средство и способ профилактики и уменьшения неблагоприятных проявлений острой алкогольной интоксикации (варианты) и способ получения средства

Формула изобретения

1. Средство для профилактики и уменьшения неблагоприятных проявлений острой алкогольной интоксикации, характеризующееся тем, что оно представляет собой экстракт семян и/или соцветий растений семейства Brassicaceae, отличительной особенностью которых является наличие глюкозида глюкорафанина и/или глюкозинолатол, являющихся предшественниками сульфорафана и его аналогов общей формулы: [СН₃-SO_m-(CH₂) _n-NCS], где m=0, 1, 2; n=3, 4, 5, и/или сульфорафана и его аналогов общей формулы: [СН₃-SO_m-(CH ₂)_n-NCS], где m=0, 1, 2; n=3,4, 5, в эффективной концентрации.

2. Средство по п.1, где используют растения семейства Brassicaceae, выбранные из группы брокколи (Brassica oleracea var. italica), кольраби (Brassica oleracea var. gongylodes), цветная капуста (Brassica oleracea var. botrytis), брюссельская капуста (Brassica oleracea var. gemnifera), зеленая капуста (Brassica oleracea var. capitata), кале (Brassica oleracea var. acephala).

3. Средство по п.1, представляет собой экстракт, приготовленный при условиях, обеспечивающих сохранение перечисленных соединений и активности мирозиназы растения.

4. Средство для профилактики и уменьшения неблагоприятных проявлений острой алкогольной интоксикации, характеризующееся тем, что оно представляет собой глюкорафанин и/или глюкозинолаты, являющиеся предшественниками сульфорафана или его аналогов общей формулы: [СН₃-SO_m -(CH₂)_n-NCS], где m=0, 1, 2; n=3, 4, 5, и/или сульфорафан и его аналоги, общей формулы: [СН₃ -SO_m-(СН₂)_n-NCS], где m=0, 1, 2; n=3, 4, 5, в эффективной концентрации.

5. Средство по пп.1 и 4, дополнительно содержит фармацевтически приемлемые наполнители.

6. Средство по пп.1 и 4, выполнено в форме растворов, суспензий, эмульсий, гелей, мазей кремов, суппозиториев, таблеток, капсул, карамелей или жевательных таблеток и резинок и аэрозолей.

7. Средство по пп.1 и 4, предназначено для парентерального, внутримышечного, внутривенного, подкожного, внутрикожного, субокулярного, перорального, анального, вагинального, интраназального и сублингвального введения.

8. Способ получения средства для профилактики и уменьшения неблагоприятных проявлений острой алкогольной интоксикации, характеризующийся тем, что измельченные семена и/или соцветия растений семейства Brassicaceae, особенностью которых является наличие глюкозида глюкорафанина, и/или глюкозинолатов, являющихся предшественниками сульфорафана и его аналогов общей формулы: [СН₃-SO_m-(CH₂)_n-NCS], где m=0, 1, 2; n=3, 4, 5, и/или сульфорафана и его аналогов общей формулы: [СН₃-SO_m-(СН₂) _n-NCS], где m=0, 1, 2; n=3, 4, 5, экстрагируют дистиллированной водой, солевыми или буферными водными растворами и инкубируют при условиях, обеспечивающих гидролиз глюкозинолатов мирозиназой растения с образованием сульфорафана и/или его аналогов отвечающих общей формуле: [СН₃-SO_m-(СН₂ )_n-NCS], где m=0, 1, 2; n=3, 4, 5, экстракт отделяют от осадка и липидов.

9. Способ по п.8, при котором используют препарат мирозиназы растений, не относящихся к группам, перечисленным в п.3.

10. Способ по п.8, при котором экстракт подвергают лиофильной сушке в условиях, обеспечивающих сохранность указанных соединений.

11. Способ профилактики и уменьшения неблагоприятных проявлений острой алкогольной интоксикации, заключающийся в использовании средства по пп.1, 4, перед употреблением алкогольных напитков или на высоте развития признаков острого наркотического эффекта этанола.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области создания лечебных средств, для профилактики и уменьшения неблагоприятных проявлений острой алкогольной интоксикации - симптомов постинтоксикационного алкогольного синдрома.

Состояние алкогольного опьянения различной степени тяжести само по себе является казуальным фактором повышенной смертности, что порождает целый комплекс не только медицинских, но и социальных проблем. Существенный вклад алкогольной составляющей в неалкогольные виды смертности в России и других в странах в настоящее время является бесспорным [А.В.Немцов. Алкогольный урон регионов России. М., NALEX, 2003. - 136 с.].

Доминирующее представление о природе психических и соматических нарушений, наблюдаемых при злоупотреблении алкоголем, базируется на постулате прямой причинно - следственной связи между этими нарушениями и содержанием этанола и ацетальдегида в тканях и биологических жидкостях человека.

Вместе с тем, экзогенный этанол и наиболее агрессивный продукт его метаболизма - ацетальдегид при злоупотреблении алкоголем выступают уже в качестве ксенобиотиков. Их нейтрализация в организме человека осуществляется с участием не только ряда дегидрогеназ и цитохром-зависимых систем микросомального окисления этанола, но и с помощью ферментов т.н. «второй линии защиты». К последним, в частности, относятся: хинон-редуктаза [НАД(Р)Н: (хинон-акцептор) оксидоредуктаза, ЕС: 1.6.99.2], глутатион-трансфераза [RX: глутатион R-трансфераза (ЕС: 2.5.1.18)], глутатион-пероксидаза (ЕС: 1.11.1.9), глутатион-редуктаза (ЕС: 1.6.4.2), эпоксид-гидролаза (ЕС: 3.3.2.3), супероксиддисмутаза (ЕС: 1.15.1.1), каталаза (ЕС: 1.11.1.6), N-ацетилтранфераза (ЕС: 2.3.1.5), ферменты семейства УДФ-глюкуронозилтрансферазы (ЕС: 2.4.1.17) и сульфотрансферазы (ЕС: 2.8.2.1-2.8.2.4), роль которых сводится к нейтрализации электрофильных функциональных групп ксенобиотиков путем образования нетоксичных конъюгатов, легко удаляемых из организма [McCarver D.G., Hines R.N. The ontogeny of human durg-metabolizing enzymes: phase II conjugation enzymes and regulatory mechanisms // J Pharmacol Exp Ther. 2002 Feb; 300(2): 361-6.].

Показано, в частности, что индукция хинон-редуктазы с помощью синтетического субстрата, бутил-гидроксианизола, вводимого мышам и крысам в течение 10 дней в виде добавки к диете, приводит к увеличению скорости элиминации экзогенного этанола [Chung J.H., Cha Y.N., Rubin R.J. Role of quinone reductase in in vivo ethanol metabolism and toxicity // Toxicol. Appl. Pharmacol. - 1994. - Vol.124 (1). - P.123-130.].

Одним из наиболее мощных биогенных монофункциональных несубстратных индукторов ферментов «второй линии защиты», в частности хинон-редуктазы и глутатион-трансферазы, является изотиоцианат сульфорафан, образующийся с помощью фермента мирозиназы из гликозида глюкорафанина, характерного для ряда представителей рода Brassica семейства крестоцветных (Cruciferae или Brassicaceae) [Rushmore Т.Н., Kong A.N., Pharmacogenomics, regulation and signaling pathways of phase I and II drug metabolizing enzymes // Curr. Drug Metab. - 2002. - Vol.3 (5). - P.481-490].

Наиболее богатым источником глюкорафанина являются семена практически всех сортов капусты брокколи (Brassica oleracea var. italica), некоторых сортов кольраби (Brassica oleracea var. gongylodes) и цветной капусты (Brassica oleracea var. botrytis) [West L.G. et all. Glucoraphanin and 4-hydroxyglucobrassicin contents in seeds of 59 cultivars of broccoli, raab, kohlrabi, radish, cauliflower, brussels sprouts, kale, and cabbage // J Agric Food Chem. 2004. - Vol.52 (4). - Р.916-926.]. Семена других пищевых и кормовых видов Brassicaceae содержат лишь незначительное количество глюкорафанина или содержат иные глюкозинолаты, не являющиеся предшественником сульфорафана [Fahey J.W. et all. Separation and purification of glucosinolates from crude plant homogenates by high-speed counter-current chromatography // J. Chromatogr. A. - 2003 - Vol.996 (1-2). - P.85-93.].

Показано, что сульфорафан: [СН₃-SO-(СН₃)₄-NCS] и его сульфидные и сульфоновые производные с общей формулой: [СН₃-SO _m-(СН₂)_n-NCS], где m=0, 1, 2; n=3, 4, 5, обладают способностью индуцировать активность хинон-редуктазы (ЕС: 1.6.99.2) и глутатион-трансферазы (ЕС: 2.5.1.18) различных тканей мыши [Zhang Y. et all. A Major Inducer of Anticarcinogenic Protective Enzymes from Broccoli: Isolation and Elucidation of Structure // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1992. - Vol.89 (6). - P.2399-2403.].

В настоящее время сульфорафан рассматривают в качестве перспективного индуктора ферментов противоопухолевой защиты [Fahey J.W., Zhang Y., Talalay P. Broccoli sprouts: An exceptionally rich source of inducers of enzymes that protect against chemical carcinogens // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1997. - Vol.94 (19) - P.10367-10372.].

Показано непрямое антиоксидантное действие сульфорафана, позволяющее защитить клетки пигментного эпителия, кератиноциты и клетки лейкемии мыши in vitro от воздействия оксидантного стресса [Gao X., Dinkova-Kostova A.T., Talalay P. Powerful and prolonged protection of human retinal pigment epithelial cells, keratinocytes, and mouse leukemia cells against oxidative damage: The indirect antioxidant effects of sulforaphane. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-2001. - Vol.98 (26). - P.15221-15226.].

Выявлена способность сульфорафана подавлять развитие различных форм Helicobacter pylori, способствующих возникновению рака желудка [Fahey J.W., et all. Sulforaphane inhibits extracellular, intracellular, and antibiotic-resistant strains of Helicobacter pylori and prevents benzo [a] pyrene-induced stomach tumors. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 2002. - Vol.99 (11). - P.7610-7615.].

На культуре клеток гепатоцитов показана способность сульфорафана вызывать индукцию синтеза глутатион-трансферазы, а также подавлять активность ферментов семейства цитохромов Р450, что обеспечивает его хемопротективные свойства [Morel F. et all. The use of primary hepatocyte cultures for the evaluation of chemoprotective agents. // Cell. Biol. Toxicol. - 1997. - Vol.13 (4-5). - P.323-329.].

Несмотря на это, высказана гипотеза о возможной способности сульфорафана при курсовом применении подавлять гепатотоксичность этанола за счет подавления индукции цитохрома CYP2E1 [McCarty M.F. Inhibition of CYP2E1 with natural agents may be a feasible strategy for minimizing the hepatotoxicity of ethanol. // Med. Hypotheses. - 2001. - Vol.56 (1), - P.8-11.]. Вместе с тем доказано, что индукция цитохрома CYP2E1 в печени животных и человека наблюдается лишь при хроническом, но не остром применении алкоголя [Schoedel K.A., Tyndale R.F. Induction of nicotine-metabolizing CYP2B1 by ethanol and ethanol-metabolizing CYP2E1 by nicotine: summary and implications. // Biochim. Biophys. Acta. - 2003. - Vol.1619 (3). - P.283-290.], [Oneta C.M. et all. Dynamics of cytochrome P4502E1 activity in man: induction by ethanol and disappearance during withdrawal phase. // J. Hepatol. - 2002. - Vol.36 (1). - P.47-52.].

Доказано, что интрагастральное (пероральное) применение растворов, содержащих сульфорафан, является адекватным способом введения, обеспечивающим относительно быстрое, в течение одного часа появление сульфорафана в крови и достижение его максимальной концентрации через четыре часа, что сопровождается индукцией металлотионеин - подобных генов и кластера глутатион-S-трансфераза - подобных генов [Hu R. et all. In Vivo Pharmacokinetics and Regulation of Gene Expression Profiles by Isothiocyanate Sulforaphane in the Rat. // J. Pharmacol. Exp. Ther. 2004. - Vol.26 [Epub ahead of print].

Экспериментально показано, что пероральное введение крысам брокколи (содержащей алифатический глюкозинолат глюкорафанин, предшественник сульфорафана) в виде лиофильно высушенной биомассы или процессированного экстракта этой лиофильно высушенной биомассы в качестве пищевой добавки сопровождается образованием сульфорафана непосредственно в организме животного в результате действия как мирозиназы растения, так и соответствующего фермента микрофлоры кишечника. Это, в свою очередь, сопровождается индукцией хинон-редуктазы в различных органах животного и доказывает адекватность такого способа введения сульфорафана, как употребление пищевых продуктов, содержащих его метаболический предшественник, глюкорафанин [Keck A.S., Qiao Q., Jeffery E.H. Food matrix effects on bioactivity of broccoli-derived sulforaphane in liver and colon of F344 rats. // J. Agric. Food Chem. - 2003 - Vol.51(11). - P.3320-3327.].

В экспериментах на здоровых добровольцах показано, что употребление в пищу обработанного мирозиназой экстракта брокколи, содержащего 200 мкмолей (около 35 мг) изотиоцианатов, представленных сульфорафаном и его производными иберином и эрутином, соответствующим формуле [СН₃-SO_m-(СН₂)_n-NCS], где m=0, 1, 2; n=3, 4, 5, сопровождается появлением в моче, плазме крови и эритроцитах дитиокарбаматов/изотиоцианатов, определяемых с помощью специфического метода циклоконденсации. Существенная концентрация продуктов специфической циклоконденсации дитиокарбаматов/изотиоцианатов в этих объектах наблюдается уже через 15 мин и достигает максимума через 2 часа. Кинетика выведения продуктов специфической циклоконденсации дитиокарбаматов/изотиоцианатов между 2-м и 6-м часом эксперимента описывается уравнением первого порядка с периодом полувыведения около 1,8 часа [Ye L., Dinkova-Kostova A.T., Wade K.L., Zhang Y., Shapiro T.A., Talalay P. Quantitative determination of dithiocarbamates in human plasma, serum, erythrocytes and urine: pharmacokinetics of broccoli sprout isothiocyanates in humans. // Clin. Chim. Acta. - 2002. - Vol.316 (1-2). - P.43-53.]. Иными словами, пероральное введение человеку сульфорафана и его производных является адекватным способом применения этих изотиоцианатов, приводящему к быстрому появлению этих соединений в тканях и биологических жидкостях.

Исследований влияния индукторов ферментов «второй линии защиты», в частности растворов сульфорафана или его аналогов или галеновых препаратов, содержащих сульфорафан или его аналоги; растворов или галеновых препаратов, содержащих метаболический предшественник сульфорафана, глюкорафанин, или предшественники аналогов сульфорафана с общей формулой [СН₃-SO_m-((CH₂ )_n-NCS], где m=0, 1, 2; n=3, 4, 5, на проявления острой алкогольной интоксикации в эксперименте на животных или при испытаниях на добровольцах не опубликовано.

Задачей настоящего изобретения является создание принципиально нового способа профилактики и уменьшения проявлений острой алкогольной интоксикации путем воздействия на организм человека или животного биогенных, полусинтетических или синтетических монофункциональных несубстратных индукторов ферментов «второй линии защиты»:

хинон-редуктазы (ЕС: 1.6.99.2),

глутатион-трансферазы (ЕС: 2.5.1.18),

глутатион-пероксидазы (ЕС: 1.11.1.9),

глутатион-редуктазы (ЕС 1.6.4.2),

эпоксид-гидролазы (ЕС: 3.3.2.3),

супероксиддисмутазы (ЕС: 1.15.1.1),

каталазы (ЕС: 1.11.1.6),

УДФ-глюкуронозилтрансферазы (ЕС: 2.4.1.17),

сульфотрансферазы (ЕС: 2.8.2.1-2.8.2.4),

N-ацетилтрансферазы (ЕС: 2.3.1.5),

и других ферментов, участвующих в конъюгации и нейтрализации ксенобиотиков или продуктов их распада.

Поставленная цель достигается тем, что предложена группа изобретений, объединенная единым изобретательским замыслом.

Преложено средство для профилактики и уменьшения неблагоприятных проявлений острой алкогольной интоксикации, характеризующееся тем, что оно представляет собой галеновый препарат, содержащий экстракт семян и/или надземных частей растений семейства Brassicaceae, обязательной отличительной особенностью которых является наличие глюкозида глюкорафанина и/или глюкозинолатов, являющихся предшественниками сульфорафана и его аналогов, отвечающих общей формуле: [СН ₃-SO_m-(СН₂)_n-NCS], где m=0, 1, 2; n=3, 4, 5, сульфорафана и(или) его аналогов, отвечающих общей формуле: [СН₃-SO_m-(СН₂ )_n-NCS], где m=0, 1, 2; n=3, 4, 5, в эффективной концентрации.

В качестве растений семейства Brassicaceae используют брокколи (Brassica oleracea var. italica), кольраби (Brassica oleracea var. gongylodes), цветную капусту (Brassica oleracea var. botrytis), брюссельскую капусту (Brassica oleracea var. gemnifera), зеленую капусту (Brassica oleracea var. capitata), кале (Brassica oleracea var. acephala).

Средство представляет собой экстракт, приготовленный при условиях, обеспечивающих сохранение перечисленных ранее соединений и активности мирозиназы растения.

Предложено также средство для профилактики и уменьшения неблагоприятных проявлений острой алкогольной интоксикации, характеризующееся тем, что оно представляет собой глюкорафанин и/или глюкозинолаты, являющиеся предшественниками сульфорафана или его аналогов с общей формулой: [СН₃ -SO_m-(СН₂)_n-NCS], где m=0, 1, 2; n=3, 4, 5, а также сам сульфорафан и(или) его аналоги, отвечающие общей формуле: [СН₃-SO_m-(СН₂ )_n-NCS], где m=0, 1, 2; n=3, 4, 5, в эффективной концентрации.

Средство может дополнительно содержать любые фармацевтически приемлемые компоненты и наполнители.

Средство может быть выполнено в форме растворов, суспензий, эмульсий, гелей, мазей кремов, суппозиториев, таблеток, капсул, карамелей или жевательных таблеток и резинок и аэрозолей.

Кроме того, средство предназначено для парентерального, внутримышечного, внутривенного, подкожного, внутрикожного, субокулярного, перорального, анального, вагинального, интраназального и сублингвального введения.

Предложен способ получения средства для снижения неблагоприятных проявлений острой алкогольной интоксикации, характеризующийся тем, что измельченные семена и/или надземные части растений семейства Brassicaceae, отличительной особенностью которых является наличие глюкозида глюкорафанина, и/или глюкозинолатов, являющихся предшественниками сульфорафана и его аналогов, отвечающих общей формуле: [СН ₃-SO_m-(CH₂)_n-NCS], где m=0, 1, 2; n=3, 4, 5, самого сульфорафана и(или) его аналогов, отвечающих общей формуле: [СН₃-SO_m-(СН ₂)_n-NCS], где m=0, 1, 2; n=3, 4, 5, экстрагируют дистиллированной водой, солевыми или буферными водными растворами в диапазоне соотношений 1:1-1:100 при условиях, обеспечивающих гидролиз глюкозинолатов мирозиназой растения с образованием сульфорафана или его аналогов, отвечающих общей формуле: [СН₃-SO _m-(СН₂)_n-NCS], где m=0, 1, 2; n=3, 4, 5, экстракт отделяют от осадка и липидов, при этом используют препарат мирозиназы растений, не относящихся к группам, перечисленным ранее, и экстракт подвергают лиофильной или другой сушке в условиях, обеспечивающих сохранность указанных соединений.

Предложен способ профилактики и уменьшения неблагоприятных проявлений острой алкогольной интоксикации, заключающийся в использовании вышеуказанных средств перед употреблением алкогольных напитков или на высоте развития признаков острого наркотического эффекта этанола.

Эффективность предлагаемого средства, снижающего неблагоприятные последствия острой алкогольной интоксикации, подтверждается, в частности, нижеследующими примерами, которые иллюстрирует осуществимость изобретения и его преимущества.

ПРИМЕР 1

В эксперименте на крысах исследовали влияние процессированного экстракта (ПЭ) семян капусты брокколи (сорт «Линда») и рапса (сорт «Урожайный») на выраженность наркотического действия этанола и содержание этанола в крови животных.

Эксперименты проводили в кондиционируемом помещении с температурой воздуха 23°С на крысах линии Wistar массой тела 210-240 г, со свободным доступом к сухому сбалансированному стандартному корму и воде. Животных разделяли на 3 группы по 18 особей в каждой. За 18 часов до эксперимента всех животных лишили корма. Наркотический эффект моделировали внутрижелудочным введением 25% вес/об. раствора этанола в дозе 3 г/кг. За 30 минут до и через 1 час после введения этанола в желудок крысам опытных групп вводили процессированные экстракты (ПЭ) семян капусты брокколи (1-я группа) и рапса (2-я группа) в объеме 10 мл; контрольной группе (3-я группа) вводили эквиобъемное количество воды.

Приготовление ПЭ: навеску семян (13 г) измельчали до тонкого порошка, полученную массу (12,6 г) заливали 50 мл дистиллированной воды и инкубировали при 7°С в течение 16 часов. Согласно данным литературы, при этом происходит количественный гидролиз глюкорафанина с образованием сульфорафана. После центрифугирования экстракта супернатант освобождали от верхнего слоя липидов и использовали в качестве галенового препарата в экспериментах для введения в желудок крыс в объеме 10 мл/кг.

Содержание сухих веществ в ПЭ составило: для семян брокколи - 57 мг/мл, для семян рапса - 38 мг/мл. Таким образом, при введении крысам в желудок гидролизата семян в объеме 10 мл/кг разовая доза в пересчете на сухие вещества составила в 1-й группе (капуста брокколи) 570 мг/кг, а во второй группе (pane) - 380 мг/кг.

Выраженность наркотического действия этанола оценивали в динамике на протяжении 7 часов после введения этанола, тестируя животных каждый час в баллах по специально разработанной системе оценки [В.П.Нужный, И.В.Демешина, И.Г.Забирова, В.П.Листвина, Л.В.Самойлик, Л.А.Суркова и Е.Б.Тезиков. Влияние компонентов сивушного масла и эфироальдегидной фракции на острую токсичность и наркотическое действие этилового спирта. // Токсикологический вестник. - 1999. - №2. - с.2-8.].

На высоте и на спаде наркотического эффекта (через 3 и 6 часов после введения этанола) отбирали кровь из хвостовых сосудов животных для определения концентрации этанола в крови парофазным методом газовой хроматографии на приборе фирмы "Agilent" (США) [А.Б.Успенский, А.Х.Абдрашитов, В.М.Смирнов, В.П.Листвина Ж. Определение содержания этанола и ацетальдегида в биологических жидкостях. // Судебно-мед. экспертиза. - 1982. т.XXV, №3, с.45-48].

Результаты обрабатывали методом параметрической статистики с использованием программы StatSoft "STATISTICA".

Полученные данные свидетельствуют о том, что введение ПЭ семян брокколи за 30 минут до и через 1 час после введения этанола привело к ослаблению степени выраженности наркотического действия этанола на протяжении всего последующего срока наблюдения по сравнению с контрольной группой (табл.1). При этом достоверные различия наблюдалась уже через 2 часа после введения этанола, сохранялись через 4 и 5 часов и усиливались через 6 (р<0,01) и 7 часов (р<0,001). Сумма баллов наркотического эффекта у крыс 1-й группы также достоверно ниже, чем у крыс контрольной группы. Введение ПЭ семян рапса крысам 2-й группы не вызвало достоверного изменения наркотического действия этанола, что свидетельствует об отсутствии эффекта у галенового препарата из семян растения рода Brassicaceae, не содержащих глюкорафанина.

Как следует из данных, приведенных в таблице 2, введение ПЭ семян брокколи и рапса не приводит к достоверным изменениям содержания этанола в периферической крови.

Таким образом, в использованной дозировке ПЭ семян брокколи существенно снижает наркотическое действие этанола и приводит к более быстрому вытрезвлению. Этот эффект не сопровождается снижением уровня этанола в крови. ПЭ семян рапса в данных условиях не вызывает изменения наркотического эффекта этанола и не влияет на его содержание в периферической крови крыс.

ПРИМЕР 2

В эксперименте на крысах исследовали влияние перорального введения крысам микрокапсул, содержащих гомогенат обезжиренных семян капусты брокколи (сорт «Линда») и рапса (сорт «Урожайный») на выраженность наркотического действия этанола и содержание этанола в крови.

Эксперименты проводили в кондиционируемом помещении с температурой воздуха 23°С на крысах линии Wistar массой тела 210-240 г., со свободным доступом к сухому сбалансированному стандартному корму и воде. Животных разделяли на 3 группы по 16 особей в каждой. Животным 1-й группы за сутки до введения этанола в качестве безальтернативного источника пищи в течение 12 часов (с 21 часа до 90 ч.) предоставляли сухие семена капусты брокколи, сорт «Калабрезе», животным 2-й группы - сухие семена рапса, сорт «Урожайный», крысам 3-й группы предоставляли сухой сбалансированный стандартный корм. Вода для животных всех трех групп была доступна "ad libitum". За 6 часов до эксперимента всех животных лишали корма. Среднее потребление корма одним животным за 12 часов составило: семена брокколи - 6,2 г, семена рапса - 6,8 г, сухой сбалансированный стандартный корм - 4,8 г.

Наркотический эффект моделировали внутрижелудочным введением 25% вес/об. раствора этанола в дозе 3 г/кг. Выраженность наркотического действия в динамике на протяжении 7 часов после введения этанола оценивалась каждый час в баллах по специально разработанной системе оценки (см. Пример 1).

Результаты обрабатывали методом параметрической статистики с использованием программы StatSoft "STATISTICA".

Как следует из данных, приведенных в таблице 3, выраженность наркотического действия этанола у животных, получавших за сутки до эксперимента семена брокколи в качестве единственного источника пищи, в течение первых четырех часов наблюдения была достоверно ниже, чем у контрольных крыс. Животные, получавшие в качестве единственного источника пищи семена рапса, по этому показателю не отличались от контрольной группы.

Таким образом, применение семян капусты брокколи в качестве пищевой добавки за 12 часов до введения этанола в наркотической дозе способно уменьшать выраженность симптомов постинтоксикационного алкогольного синдрома у крыс.

Пример 1, таблица 1
Динамика наркотического действия этанола у крыс, получивших гидролизат семян капусты брокколи или рапса
Группы (n)	M±SD Тяжесть наркотического состояния крыс в баллах после введения этанола							Сумма баллов
	1 час	2 часа	3 часа	4 часа	5 часов	6 часов	7 часов
1-я группа Капуста (18)	3,2±0,5	3,0±0,3*	2,8±0,2	2,5±0,3*	2,1±0,4 *	1,5±0,5**	0,5±0,6***	15,6±2,1**
2-я группа Рапс (18)	3,2±0,3	3,1±0,3	2,9±0,3	2,6±0,3	2,3±0,4	1,8±0,4	1,0±0,7	16,9±2,3
3-я группа Контроль (18)	3,2±0,3	3,2±0,3	3,0±0,3	2,8±0,3	2,5±0,3	2,0±0,3	1,3±0,5	17,8±1,9
Примечания: * - р<0,05 ** - р<0,01 *** - р<0,001 в сравнении с контролем.

Пример 1, таблица 2
Содержание этанола в крови через 3 и 6 часов после его введения у крыс, получивших гидролизат семян капусты или рапса
Группы (n)	M±SD
	Концентрация этанола в крови через 3 ч	Концентрация этанола в крови через 6 ч
	г/л	г/л
1-я группа Капуста (18)	1,83±0,32	0,73±0,29
2-я группа Рапс (18)	1,85±0,58	0,89±0,37
3-я группа Контроль (18)	2,03±0,35	0,88±0,27
Примечание: различия по сравнению с контролем недостоверны

Пример 2, таблица 3
Динамика наркотического действия этанола у крыс, получивших в качестве пищевой добавки семена капусты брокколи или рапса
Группы (n)	M±SD Тяжесть наркотического состояния крыс в баллах после введения этанола							Сумма баллов
	1 час	2 часа	3 часа	4 часа	5 часов	6 часов	7 часов
1-я группа Капуста (18)	1,9±0,5 ***	2,1±0,4**	2,2±0,3*	2,0±0,4*	1,9±0,6	1,5±0,7	1,4±0,5	13,0±2,1 **
2-я группа Рапс (18)	3,0±0,3	3,2±0,4	2,8±0,4	2,7±0,2	2,5±0,4	1,9±0,4	1,1±0,7	17,2±2,3
3-я группа Контроль (18)	3,4±0,4	3,3±0,3	3,2±0,4	2,9±0,4	2,7±0,4	2,2±0,3	1,4±0,5	19,1±1,9
Примечания: * - р< 0,05 ** - р< 0,01 *** - р< 0,001 в сравнении с контролем.