способ дозирования препарата миакальцик

Формула изобретения

Способ дозирования препарата миакальцик у больных с остеопорозом, отличающийся тем, что из 6-8 мл крови больного получают мононуклеарные клетки, которые адгезируют в опытной и контрольной лунках планшета, затем в опытную лунку добавляют 9 мкл раствора миакальцика с концентрацией 500 ЕД/л, а в контрольную лунку - равный объем разводящей жидкости, культивируют и оценивают уровни NO ₃ и при повышении уровня NO₃ в присутствии миакальцика до 10% больному назначают миакальцик в дозе 50 ЕД/сут, до 10-30% - 100 ЕД/сут, свыше 30% - 200 ЕД/сут.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области медицины, точнее к ортопедии и ревматологии, и предназначено для дифференцированного назначения и индивидуального дозирования синтетического кальцитонина лосося (миакальцик) у больных остеопорозом.

Препараты из группы кальцитонинов применяются в комплексном лечении больных остеопрозом. В сочетании с лекарственными средствами из других групп наибольшее распространение получил синтетический кальцитонин лосося, выпускаемый швейцарской фирмой "Новартис" под названием "Миакальцик". Механизм развития остеопороза зависит от преобладающей причины и индивидуален у каждого конкретного пациента. Поэтому разработка новых способов дифференцированного применения и индивидуального дозирования лекарственных препаратов, влияющих на костную ткань, играет важную роль.

Наиболее эффективными способами применения препаратов из группы кальцитонинов, широко вошедшими в практику лечения больных остеопорозом, считают рекомендуемые фирмой "Новартис" схемы дозирования миакальцика для лечения больных с эпизодами острой или хронической болью в спине. Указанные способы применяют следующим образом: при эпизоде острой боли в спине назначают 50-100 ЕД препарата подкожно или внутримышечно в течение 2 недель, затем по 50 ЕД через день до 2 месяцев, курсы по 2 месяца 3 раза в год, при хронической боли в спине назначают по 50 ЕД внутримышечно через день, затем 50 ЕД три раза в неделю до 2 месяцев, курсы по 2 месяца 3 раза в год с 2-месячными перерывами.

Однако эти способы применения миакальцика учитывают только характер болевого синдрома. Известно же, что остеопороз имеет множество этиопатогенетических вариантов и клиническая эффективность миакальцика напрямую зависит от ведущих механизмов развития заболевания у конкретного пациента. Также известно, что у ряда больных при использовании миакальцика эффект отсутствует либо выявляется непереносимость препарата.

Для эффективного назначения миакальцика необходимо применение дифференцированных схем с предварительной оценкой действия препарата in vitro и индивидуальным его дозированием.

Миакальцик является синтетическим аналогом кальцитонина лосося, пептидного гормона, секретируемого парафолликулярными клетками щитовидной железы. Широко известны его способность к торможению остеокластической резорбции за счет подавления активности остеокластов и уменьшения их количества, гипокальцемический эффект, аналгетический эффект, положительное влияние на процессы костеобразования [3, 4]. Также широко известны схемы применения этого препарата у больных остеопорозом в зависимости от характера болевого синдрома [1, 2, 3, 4]. Вместе с тем не известно о дифференцированном подходе к назначению миакальцика и индивидуальном его дозировании на основании тестов in vitro.

Известны способы, позволяющие провести дозированное назначение миакальцика в зависимости от характера болевого синдрома.

Известен, в частности, способ применения миакальцика больным с эпизодом острой боли в спине путем назначения 50-100 ЕД подкожно или внутримышечно в течение 2-х недель, затем 50 ЕД через день до 2-х месяцев, курсы по 2 месяца 3 раза в год с 2-месячными перерывами.

К недостаткам известного способа следует отнести то, что он не позволяет проводить индивидуальное дозирование миакальцика. Известно, что остеопороз имеет множество этиопатогенетических вариантов и клиническая эффективность любого лекарственного препарата напрямую зависит от ведущих механизмов формирования заболевания у каждого отдельно взятого пациента.

Установлено, что в процессе лечения больных остеопорозом необходимо учитывать этиопатогенетический вариант заболевания и проводить индивидуальное дозирование препаратов [4].

Кроме низкой эффективности известного способа следует отметить отсутствие возможности предварительной оценки эффективности препарата in vitro до назначения его больному.

Целью изобретения является повышение клинической эффективности препарата миакальцик путем индивидуального дозирования.

Поставленную цель достигают тем, что в способе применения препарата миакальцик согласно изобретению получают из периферической гепаринизированной крови больных остеопорозом мононуклеарные клетки с помощью градиентного центрифугирования и оценивают известным способом уровень продукции эндогенного оксида азота мононуклеарными клетками в присутствии миакальцика in vitro. Миакальцик назначают больным с повышением уровня продукции NO₃ и суммарного количества конечных метаболитов оксида азота в культуральной среде в присутствии этого препарата in vitro. Дозу препарата подбирают в зависимости от степени повышения продукции NO₃: до 10% - 50 ЕД/сутки, 10-30% - 100 ЕД/сутки, свыше 30% - 200 ЕД/сутки. Способ позволяет проводить дифференцированное назначение и индивидуальное дозирование препарата.

Сопоставительный анализ заявленного и известного, выбранного за прототип, технических решений показал, что отличием предлагаемого способа является назначение миакальцика только больным с повышением уровня продукции NO₃ и суммарного количества конечных метаболитов оксида азота в культуральной среде в присутствии препарата in vitro, при этом дозу препарата подбирают индивидуально в зависимости от степени повышения продукции NO ₃: до 10% - 50 ЕД/сутки, 10-30% - 100 ЕД/сутки, свыше 30% - 200 ЕД/сутки.

Наличие отличительных от прототипа признаков обеспечивает соответствие предлагаемого способа критерию "новизна".

Авторами впервые установлена возможность дифференцированного применения и индивидуального дозирования миакальцика. Как оказалось, необходимость назначения миакальцика зависит от его влияния in vitro на продукцию NO₃ и суммарного количества конечных метаболитов оксида азота в культуральной среде мононуклеарных клеток, а дозу препарата возможно индивидуально варьировать в зависимости от степени повышения продукции NO ₃. Именно это позволило выборочно назначать миакальцик больным и индивидуально дозировать препарат в диапазоне от 50 до 200 ЕД в сутки.

Существенный признак "оценивают уровень продукции эндогенного оксида азота мононуклеарными клетками в присутствии миакальцика in vitro известным способом. Миакальцик назначают больным с повышением уровня продукции NO ₃ и суммарного количества конечных метаболитов оксида азота в культуральной среде в присутствии этого препарата in vitro. Дозу препарата подбирают в зависимости от степени повышения продукции NO₃: до 10% - 50 ЕД/сутки, 10-30% - 100 ЕД/сутки, свыше 30% - 200 ЕД/сутки" является новым и обеспечивает соответствие заявляемого технического решения критерию "существенные отличия".

Заявляемый способ осуществляют следующим образом.

У больного остеопорозом утром, натощак путем пункции вены локтевого сгиба в стерильную пробирку получают 6-8 мл крови. В кровь, находящуюся в пробирке, добавляют 5-10 ЕД гепарина. С помощью градиентного центрифугирования гепаринизированной крови получают мононуклеарные клетки и проводят адгезию мононуклеарных клеток в лунках стерильного планшета. Затем готовят раствор миакальцика в стерильном 0,9% растворе хлорида натрия с концентрацией 500 ЕД/литр. После получения адгезированных клеток в лунку с клетками и питательной средой добавляют 9 мкл раствора миакалыщка (опыт), а в контрольную лунку - равный объем разводящей жидкости, после чего мононуклеарные клетки культивируют 48 часов при 37°С при 5% содержании углекислого газа. Уровень продукции эндогенного оксида азота оценивают по концентрации конечных стабильных метаболитов оксида азота с помощью реакции Грисса. Миакальцик назначают больным с повышением уровня продукции NO₃ и суммарного количества конечных метаболитов оксида азота в культуральной среде в присутствии этого препарата in vitro и проводят индивидуальный подбор дозы препарата в зависимости от степени повышения продукции NO₃: до 10% - 50 ЕД/сутки, 10-30% - 100 ЕД/сутки, свыше 30% - 200 ЕД/сутки. Миакальцик в индивидуальной дозе вводят подкожно или внутримышечно 1 раз в сутки в течение 2-х недель, затем по 50 ЕД через день до 2-х месяцев, курсы по 2 месяца 3 раза в год с 2-месячными перерывами.

Авторами проведено комплексное лечение 14 больных остеопорозом с дозированием миакальцика предложенным способом. Отличным лечение считали при полном исчезновении боли и восстановлении двигательной активности пациента, хорошим - при незначительном остаточном болевом синдроме и высокой активности больного, удовлетворительным - при умеренном остаточном болевом синдроме и сниженной активности пациента, неудовлетворительным - при неизменившейся интенсивности болевого синдрома и выраженном ограничении активности больного. Результаты тестов in vitro и лечения больных представлены в таблице. Установлено, что имеется тесная связь между влиянием миакальцика in vitro на продукцию NO₃ и суммарного количества конечных метаболитов оксида азота в культуральной среде и эффектом проведенной терапии.

Авторами установлено, что при отсутствии повышения продукции NO₃ и суммарного количества конечных метаболитов оксида азота в культуральной среде мононуклеарных клеток в присутствии миакальцика in vitro, отмечается низкая клиническая эффективность лечения этим препаратом. Таким образом, проведенные исследования выявили взаимосвязь между влиянием миакальцика на продукцию NO₃ и суммарного количества конечных метаболитов оксида азота в культуральной среде мононуклеарных клеток in vitro и клиническим эффектом этого препарата, подтвержденной иммунологическим методом, свидетельствует о эффективности предлагаемого способа дифференцированного применения и индивидуального дозирования синтетического кальцитонина лосося (Миакальцик) у больных остеопорозом.

Пример 1: Больная К-ва А.В., 64 года. (Тест №3) Поступила в травматологическое отделение 01.12.03 с диагнозом: "Постменопаузальный остеопороз, патологический перелом тела L1 позвонка" и интенсивным болевым синдромом. 03.12.03 утром натощак у больной взята венозная кровь в количестве 8 мл, гепаринизирована 10 ЕД гепарина. Через 2 часа кровь доставлена в иммунологическую лабораторию, где с помощью градиентного центрифугирования получены мононуклеарные клетки. Далее проведена адгезия клеток в лунках стерильного планшета. После получения адгезированных клеток в лунку с клетками и питательной средой добавлено 9 мкл раствора миакальцика в разведении 500 ЕД/литр (опыт), в контрольную лунку - равный объем разводящей жидкости. В качестве разводящей жидкости использован стерильный 0,9% раствор хлорида натрия. Мононуклеарные клетки культивированы 48 часов при 37°С при 5% содержании углекислого газа. Уровень продукции эндогенного оксида азота оценен по концентрации конечных стабильных метаболитов оксида азота с помощью реакции Грисса. В результате установлено, что у больной имеет место повышение уровня продукции NO₃ и суммарного количества конечных метаболитов оксида азота в культуральной среде в присутствии миокальцика in vitro (без препарата NO₃ 17,05 мкмоль/л, общий азот 20,1 мкмоль/л, в присутствии препарата NO₃ 41,7 мкмоль/л, общий азот 44,6 мкмоль/л). Уровень продукции NO₃ в присутствии препарата оказался повышен более чем на 30%. Больной назначен миакальцик в виде внутримышечных инъекций 1 раз в сутки по 200 ЕД в течение 14 дней. После проведенного лечения достигнут отличный результат: боли полностью купированы, активность больной восстановлена. После выписки из стационара продолжен прием миакальцика амбулаторно по 50 ЕД через день внутримышечно до 2 месяцев.

Пример 2: Больная К-ва В.Е., 72 года. (Тест №10) Поступила в травматологическое отделение 11.03.03 с диагнозом: "Стероидный остеопороз, множественные патологические переломы тел грудных и поясничных позвонков", выраженным болевым синдромом, резким ограничением активности 12.03.03 утром натощак у больной взята венозная кровь в количестве 8 мл, гепаринизирована 10 ЕД гепарина. Через 2 часа кровь доставлена в иммунологическую лабораторию, где с помощью градиентного центрифугирования получены мононуклеарные клетки. Далее проведена адгезия клеток в лунках стерильного планшета. После получения адгезированных клеток в лунку с клетками и питательной средой добавлено 9 мкл раствора миакальцика в разведении 500 ЕД/литр (опыт), в контрольную лунку - равный объем разводящей жидкости. В качестве разводящей жидкости использован стерильный 0,9% раствор хлорида натрия. Мононуклеарные клетки культивированы 48 часов при 37°С при 5% содержании углекислого газа. Уровень продукции эндогенного оксида азота оценен по концентрации конечных стабильных метаболитов оксида азота с помощью реакции Грисса. В результате установлено, что у больной имеет место снижение уровня продукции NO₃ и суммарного количества конечных метаболитов оксида азота в культуральной среде в присутствии миокальцика in vitro (без препарата NO₃ 19,33 мкмоль/л, общий азот 21,4 мкмоль/л, в присутствии препарата NO₃ 11,5 мкмоль/л, общий азот 13,9 мкмоль/л). Больной назначен миакальцик общепринятым способом в виде внутримышечных инъекций 1 раз в сутки по 100 ЕД в течение 14 дней. После проведенного лечения достигнут неудовлетворительный результат: интенсивность боли не изменилась, активность больной резко ограничена, требует постороннего ухода. После выписки из стационара продолжен прием миакальцика амбулаторно по 50 ЕД через день внутримышечно до 2 месяцев. По истечении 2 месяцев сохраняются интенсивные боли, активность больной остается низкой. Целесообразность применения миакальцика в данном случае сомнительная.

Пример 3: Больная К-т Е.Н., 67 лет. (Тест №11) Поступила в травматологическое отделение 15.04.03 с диагнозом: "Сенильный остеопороз, множественные патологические переломы тел грудных позвонков", выраженным болевым синдромом, значительным ограничением активности 17.04.03 утром натощак у больной взята венозная кровь в количестве 8 мл, гепаринизирована 10 ЕД гепарина. Через 2 часа кровь доставлена в иммунологическую лабораторию, где с помощью градиентного центрифугирования получены мононуклеарные клетки. Далее проведена адгезия клеток в лунках стерильного планшета. После получения адгезированных клеток в лунку с клетками и питательной средой добавлено 9 мкл раствора миакалыщка в разведении 500 ЕД/литр (опыт), в контрольную лунку - равный объем разводящей жидкости. В качестве разводящей жидкости использован стерильный 0,9% раствор хлорида натрия. Мононуклеарные клетки культивированы 48 часов при 37°С при 5% содержании углекислого газа. Уровень продукции эндогенного оксида азота оценен по концентрации конечных стабильных метаболитов оксида азота с помощью реакции Грисса. В результате установлено, что у больной имеет место снижение уровня продукции NO ₃ и суммарного количества конечных метаболитов оксида азота в культуральной среде в присутствии миокальцика in vitro (без препарата NO₃ 16,81 мкмоль/л, общий азот 17,2 мкмоль/л, в присутствии препарата NO₃ 16,32 мкмоль/л, общий азот 16,9 мкмоль/л). Больной назначен миакальцик общепринятым способом в виде внутримышечных инъекций 1 раз в сутки по 100 ЕД в течение 14 дней. После проведенного лечения достигнут неудовлетворительный результат: интенсивность боли не изменилась, активность больной ограничена, обслуживает себя с трудом. После выписки из стационара продолжен прием миакальцика амбулаторно по 50 ЕД через день внутримышечно до 2 месяцев. По истечении 2 месяцев сохраняется болевой синдром, активность больной остается низкой. Целесообразность применения миакальцика в данном случае сомнительная.

Таким образом, как видно из приведенных примеров, назначение миакальцика в зависимости от его влияния на продукцию NO₃ и суммарного количества конечных метаболитов оксида в культуральной среде мононуклеарных клеток in vitro является эффективным в повышении качества лечения больных остеопорозом.

Проведенные испытания предлагаемого способа подтвердили его преимущества перед способом-прототипом: в отличие от способа-прототипа, не предусматривающего дифференцированного назначения миакальцика, предлагаемый позволяет применять препарат только тем больным, у которых повышается уровень продукции NO ₃ и суммарного количества конечных метаболитов оксида в кулътуральной среде мононуклеарных клеток in vitro. Кроме, того учет степени повышения продукции NO₃ позволяет проводить индивидуальное дозирование препарата.

Достижение подобного результата стало возможным благодаря установленной авторами тесной взаимосвязи между влиянием миакальцика на продукцию NO₃ и суммарного количества конечных метаболитов оксида азота в культуральной среде мононуклеарных клеток in vitro и клиническим эффектом этого препарата, подтвержденной иммунологическим методом.

Таким образом, индивидуальное дозирование препарата миакальцик повышает его клиническую эффективность.

Источники информации:

1. Беневоленская Л.И. Остеопороз: эпидемиология, диагностика. Кальцитонин в лечении остеопороза: Методические рекомендации для врачей / Л.И.Беневоленская, Е.И.Марова, Л.Я.Рожинская и др. - М., 1997. - 32 с.

2. Верткин А.Л. Клиническое применение миакальцика при лечении постменопаузального остеопороза / А.Л.Верткин, Л.А.Алексанян, О.Н.Ткачева // Русский медицинский журнал. - 2003. - Т.11, №27. - С.2-7.

3. Насонов Е.Л. Место миакальцика (синтетический кальцитонин лосося) при лечении и профилактике остеопороза / Е.Л.Насонов, И.А.Скрипникова, Ю.В.Муравьев и др. // Терапевтический архив. - 1997. - №7. - С.86-89.

4. Рожинская Л.Я. Системный остеопороз / Л.Я.Рожинская. - М.: Издатель Мокеев, 2000. - 196 с.

Влияние миакальцика на продукцию оксида азота in vitro и результаты лечения больных
№ теста	Без препарата			В присутствии препарата			Результат лечения
	NO2	NO 3	Общий N	NO 2	NO3	Общий N
1.	6,3	40,1	46,4	6,8	43,3	50,1	Хороший
2.	8,5	25,7	34,2	5,8	33,6	39,4	Хороший
3.	3,05	17,05	20,1	2,9	41,7	44,6	Отличн.
4.	2,91	13,49	16,4	2,38	14,82	17,2	Удовл.
5.	3,08	10,82	13,9	2,5	13,1	15,6	Хороший
6.	9,1	11,2	20,3	8,6	13,1	21,7	Удовл.
7.	3,12	18,58	21,7	1,26	29,14	30,4	Удовл.
8.	5,12	34,28	39,4	2,73	39,07	41,8	Удовл.
9.	10,4	31,7	42,1	11,1	35,6	46,7	Хороший
10.	2,07	19,33	21,4	2,4	11,5	36,1	Неудовл.
11.	0,39	16,81	17,2	0,58	16,32	16,9	Неудовл.
12	8,5	12,9	21,4	9,3	26,8	36,1	Хороший
13.	5,6	11,6	17,2	4,02	12,88	16,9	Хороший
14.	4,73	12,67	17,4	2,89	16,81	19,7	Хороший