способ прогнозирования распространенности метастатического поражения головного мозга

Формула изобретения

Способ прогнозирования распространенности метастатического поражения головного мозга, включающий биохимическое исследование плазмы крови, отличающийся тем, что у онкологических больных с поражением головного мозга определяют интенсивность Н ₂О₂-люминолзависимой хемилюминесценции плазмы крови, содержание пероксинитрита и нитрозопроизводных, вычисляют суммарный процент изменения этих показателей относительно нормы и при незначительном изменении - снижении от -21,7 до -148% или увеличении от +11,9 до +155,4% показателя, не превышающем у большинства больных 50%, определяют одиночный церебральный метастаз, а при его увеличении от 200 до 1000% констатируют множественное метастатическое поражение головного мозга независимо от локализации первичного опухолевого очага.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано при биохимических исследованиях у онкологических больных для определения распространенности метастатического поражения головного мозга.

Известен "Способ прогнозирования течения онкологических заболеваний" (см. патент №2018835 от 30.08.94. Бюл. №16). Цель изобретения - в более раннем прогнозировании течения заболевания (за 4-45 суток). Сущность способа заключается в том, что определяют уровень гистамина в лимфоцитах и нейтрофилах, рассчитывают соотношение первого показателя ко второму и при его значении более 0,9 прогнозируют осложненное течение заболевания в виде появления рецидивов и метастазов.

Способ позволяет предсказать ухудшение состояния больного и своевременно принять лечебные меры. Однако достаточно трудный и длительный процесс выполнения биохимического исследования требует высокой квалификации исполнителя и отодвигает начало лечения. Для осуществления анализа необходимо использование органических растворителей, вредных для медицинского персонала, и применение сложной аппаратуры.

Известен «Способ определения распространенности патологического процесса при онкологических заболеваниях» (см. патент №2241987 от 10.12.2004. Бюл. №34). Этот способ выбран нами в качестве прототипа. Новизна изобретения - в прогнозировании генерализации опухолевого процесса при отсутствии клинической манифестации. Сущность способа заключается в том, что определяют интенсивность хемилюминесценции (ХЛ) и активность церулоплазмина в плазме крови больных раком молочной железы. При снижении по сравнению со здоровыми людьми отношения интенсивности ХЛ к активности церулоплазмина в 8-12 раз констатируют генерализацию опухолевого процесса, а при снижении отношения в 2-3 раза констатируют отсутствие генерализации. Способ позволяет предсказать ухудшение состояния больного и своевременно принять лечебные меры. Однако с помощью данного способа исследуют только один из показателей, характеризующих уровень свободнорадикальных процессов, который не отражает состояние всей системы в целом. Также не изучена возможность применения данного способа у больных с метастатическим поражением головного мозга.

Целью изобретения является раннее прогнозирование наличия распространенного метастатического поражения головного мозга.

Поставленная цель достигается тем, что у больных определяют интенсивность хемилюминесценции плазмы крови, содержание пероксинитрита и нитрозопроизводных, вычисляют суммарный процент изменения данных показателей относительно нормы (у людей без онкопатологии) и при незначительном изменении (снижении от -21,7 до -148% или увеличении от +11,9 до +155,4%), не превышающем у большинства больных 50%, констатируют одиночный церебральный метастаз, а при его увеличении от 200 до 1000% констатируют множественное метастатическое поражение головного мозга независимо от локализации первичного опухолевого очага.

Изобретение "Способ прогнозирования распространенности метастатического поражения головного мозга" является новым, так как оно неизвестно при использовании биохимических исследований в онкологии для выявления метастатического поражения головного мозга.

Новизна изобретения заключается в том, что у онкологических больных с подозрением на метастатическое поражение головного мозга определяют интенсивность свободнорадикальных процессов и содержание производных оксида азота в плазме крови. При увеличении вычисленного суммарного процента изменения исследованных показателей от 200 до 1000% (в среднем на 418,6%) констатируют наличие множественных метастазов в головном мозге, а при его незначительном изменении (при снижении или увеличении изменения отдельных из исследуемых компонентов), не превышающем у большинства больных 50%, констатируют одиночный церебральный метастаз.

Об активности свободнорадикальных процессов в плазме крови судили по интенсивности перекись водорода-люминолзависимой хемилюминесценции (Н₂О₂ -люминолзависимая ХЛ) и спектрофотометрически определяемому уровню пероксинитрита и нитрозопроизводных (нитрозогемоглобин, нитрозоглутатион, нитротирозин). Н₂О ₂-люминолзависимая ХЛ является одним из методов изучения перекисного окисления липидов, позволяющим судить об уровне активных форм кислорода (О₂ , ОН ) в системе и об интенсивности их взаимодействия с липидными радикалами. Пероксинитрит, нитрозогемоглобин, нитрозоглутатион, нитротирозин являются метаболитами оксида азота (NO ), являющегося важным регулятором физиологических функций организма. Пероксинитрит (ONOO ) образуется в результате реакции NO и О₂ и выступает в качестве чрезвычайно токсического соединения. Нитрозогемоглобин, нитрозоглутатион и нитротирозин выполняют функцию депонирования оксида азота (см. Ванин А.Ф. Динитрозильные комплексы железа - эндогенные сигнальные агенты в клетках и тканях животных и человека (Гипотеза). // Биофизика. 2004. Т.49. Вып.4. С.581-586).

Изобретение «Способ прогнозирования распространенности метастатического поражения головного мозга» является промышленно применимым, так как может быть использовано в здравоохранении, медицинских учреждениях различного профиля для ранней диагностики церебральных метастазов и на этапах лечения злокачественных опухолей, наиболее часто метастазирующих в головной мозг, в научно-исследовательских онкологических институтах и онкодиспансерах, поскольку оно просто в исполнении и не требует больших материальных затрат.

«Способ прогнозирования распространенности метастатического поражения головного мозга» выполняется следующим образом, В плазме крови больных при их поступлении в отделение нейрохирургии определяют светосумму Н₂O ₂-люминолзависимой ХЛ и количество пероксинитрита, нитрозогемоглобина, нитрозоглутатиона, нитротирозина. Затем вычисляют суммарный процент изменения данных показателей по сравнению с их значениями в контроле (группа из 15 человек без онкопатологии, сопоставимых по возрасту с обследованными больными). Исследование Н₂ О₂-люминолзависимой ХЛ проводили по методу Шестакова В.А. и соавт. (см. Хемилюминесценция в плазме крови в присутствии перекиси водорода. Вопросы медицинской химии. 1979. Т.25. Вып.2. С.132-137). Величину светосуммы хемилюминесценции (в количестве фотонов, излученных за 6 секунд) регистрировали при 37°С и непрерывном перемешивании на хемилюминометре. Уровень в плазме крови пероксинитрита, нитрозогемоглобина, нитрозоглутатиона и нитротирозина определяли спектрометрически на спектрофлюориметре Флюорат-02-панорама при следующих длинах волн: пероксинитрит - 302 нм, нитрозогемоглобин - 2 пика при 418 и 545 нм, нитрозоглутатион - 338 нм, нитротирозин - 438 нм. Уровень продуктов оксида азота рассчитывали с использованием выведенных молярных коэффициентов экстинции (см. Степуро И.И., Чайковская Н.А., Солодунов А.А., Арцукевич А.Н. Образование NO в процессе окисления ферроформ гемоглобина нитритом // Биохимия. 1997. Т.62. Вып.9, С.1122-1129; Лобышева И.И., Сереженков В.А., Ванин А.Ф. Взаимодействие динитрозильных тиолсодержащих комплексов железа с пероксинитритом и перекисью водорода in vitro // Биохимия. 1999. Т.64. Вып.2. С.194-200).

Полученные результаты приведены в таблице.

Таблица Процент изменения интенсивности хемилюминесценции и содержания производных оксида азота
	Светосумма ХЛ, %,	Пероксинитрит, %	Нитрозогемоглобин, %		Нитрозоглутатион, %	Нитротирозин, %	,%
			418 нм	545 нм
I группа	-27,8	39,5	18,2	14,2	12,4	-24,6	7,8
II группа	73,8	136,0	51,0	78,9	66,0	23,5	418,6
							Р=0,003
Примечание. Группа I - больных с одиночными церебральными метастазами (n=10), группа II - больных с множественными церебральными метастазами (n=8), р - достоверность различий по критерию Вилкоксона-Манна-Уитни.

Примеры конкретного выполнения «Способа прогнозирования распространенности метастатического поражения головного мозга».

Пример 1

Больной Р., 63 года, история болезни №17545/р, находился на лечении в торакальном отделении РНИОИ с 20.10.2003 по 28.01.2004 по поводу центрального рака левого легкого (T2N2M0) с метастатическим поражением медиастинальных лимфоузлов.

Во время химиолучевого лечения стал предъявлять жалобы на упорную головную боль диффузного характера, потери сознания, слабость в левых конечностях, в связи с чем был осмотрен нейроонкологом РНИОИ и направлен на РКТ-исследование головного мозга с целью исключения метастатического поражения головного мозга. По данным РКТ головного мозга от 28.01.2004 выявлен одиночный церебральный метастаз в правой теменно-затылочной доле мозга размером 3 см в диаметре. Больной был переведен для оперативного лечения в отделение нейроонкологии РНИОИ.

Перед началом лечения проведено биохимическое исследование, которое выявило увеличение суммарного процента изменений величины светосуммы хемилюминесценции и уровня производных оксида азота на 100,4%. При этом наблюдали снижение величины светосуммы хемилюминесценции и содержания пероксинитрита и увеличение содержания нитрозопроизводных.

Пример 2

Больной П., 55 лет, история болезни №17345/о, с диагнозом меланомы кожи левой заушной области T4N1M0 с метастатическим поражением регионарных лимфоузлов, состояние после иссечения первичного очага, курса лучевой терапии и 2-х курсов химиотерапии в 2002 г., обратился в нейроонкологу РНИОИ в начале 2004 г. по поводу упорной головной боли и когнитивных нарушений.

Был направлен на РКТ-исследование головного мозга, при котором 18.03.2004 обнаружен одиночный метастаз меланомы в левой лобно-теменной доле головного мозга размером 2,5 см в диаметре. Больной был госпитализирован для оперативного лечения в отделение нейроонкологии РНИОИ.

При проведении перед началом лечения биохимических исследований обнаружено, что суммарный процент изменений исследованных показателей увеличен на 44,4% по сравнению с людьми без онкопатологии. Происходило увеличение содержания в плазме крови пероксинитрита и нитрозогемоглобина при снижении величины светосуммы хемилюминесценции.

Пример 3

Больной С., 64 лет, история болезни №8043/т, находился на лечении в радиологическом отделении РНИОИ с 23.04.2004 по 18.06.2004 по поводу центрального рака правого легкого (T3N2M1) с метастатическим поражением медиастинальных лимфоузлов, паренхимы обоих легких и печени.

Во время лучевого лечения стал предъявлять жалобы на упорную головную боль диффузного характера, в связи с чем был осмотрен нейроонкологом и направлен на РКТ-исследование головного мозга с целью исключения метастатического поражения головного мозга. По данным РКТ головного мозга от 17.06.2004 выявлены множественные церебральные метастазы в веществе больших полушарий мозга с обеих сторон (более четырех очагов). Больной был переведен для специального лечения в отделение нейроонкологии РНИОИ. Перед началом лечения проведено биохимическое исследование, выявившее, что суммарный процент изменений светосуммы хемилюминесценции и содержания пероксинитрита и нитрозопроизводных составил у этого больного +1191%. То есть происходило значительное увеличение всех изученных показателей.

Пример 4

Больная Щ., 55 лет, история болезни №6267/р, с диагнозом рака правой молочной железы T3N1M1 с метастатическим поражением правых надключичных лимфоузлов, состояние после радикальной мастэктомии, курса лучевой терапии и 6-ти курсов химиотерапии в 2003 г., обратилась в нейроонкологу РНИОИ в начале 2005 г. по поводу жалоб на пощипывание языка и подергивание левой щеки.

Была направлена на МРТ-исследование головного мозга, по данным которого было выявлено 2 метастатических узла в правой височно-теменной области (диаметром до 3 см) и в правом полушарии мозжечка (диаметром до 2 см). Больная поступила в отделение нейроонкологии РНИОИ 11.01.2005 г. для оперативного лечения.

Перед началом лечения проведено биохимическое исследование, которое выявило, что суммарный процент изменений составил +558,4%. Наблюдали существенное возрастание величины светосуммы хемилюминесценции, уровня пероксинитрита, нитрозогемоглобина и нитрозоглутатиона.

Технико-экономическая эффективность «Способа прогнозирования распространенности метастатического поражения головного мозга» заключается в том, что использование способа повышает качество диагностики распространенности метастатического поражения головного мозга, позволяет прогнозировать наличие множественных церебральных метастазов до проведения дорогостоящих рентген-компьютерных исследований. Проведение биохимических исследований просто по исполнению, занимает мало времени (в течение 1 часа с момента взятия крови), доступно, не требует больших материальных затрат на препараты и дорогостоящей аппаратуры. Применение «Способа прогнозирования распространенности метастатического поражения головного мозга» рекомендуется на этапе диспансерного наблюдения больных с энцефалофильными злокачественными опухолями (рак легкого, рак молочной железы, меланома кожи), у которых имеет место минимальная неврологическая симптоматика. Раннее и своевременное выявление вторичного поражения головного мозга позволяет планировать необходимую тактику лечения и улучшать качество жизни больных.