равномерномеченная тритием [³h]транс-3,7-диметил-9-(2,6,6-триметил-3-оксо-1-циклогексен-1-ил)-2,4,6,8-нонатетраеновая кислота

Формула изобретения

Равномерномеченная тритием [³H]транс-3,7-диметил-9-(2,6,6-триметил-3-оксо-1-циклогексен-1-ил)-2,4,6,8-нонатетраеновая кислота формулы

3h]транс-3,7-диметил-9-(2,6,6-триметил-3-оксо-1-циклогексен-1-ил)-2,4,6,8-нонатетраеновая кислота, патент № 2318806" SRC="/images/patents/149/2318806/2318806-4-s.gif" BORDER="0">

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области органической химии и может найти применение в аналитической химии, биоорганической химии, биохимии и прикладной медицине.

При изучении физиологически активных соединений бывают необходимы их меченые аналоги.

Известно, что замена атомов водорода органического соединения на их изотопы не приводит к изменению каких-либо свойств исходного соединения (Evans E.A. - Tritium and its compounds. London, Butterworths, 1974, p.48) [1].

Известена транс-3,7-диметил-9-(2,6,6-триметил-3-оксо-1-циклогексен-1-ил)-2,4,6,8-нонатетраеновая кислота формулы:

3h]транс-3,7-диметил-9-(2,6,6-триметил-3-оксо-1-циклогексен-1-ил)-2,4,6,8-нонатетраеновая кислота, патент № 2318806" SRC="/images/patents/149/2318806/2318806-3.gif" height=100 BORDER="0">

Данное соединение образуется из витамина А и является сильным мутагенным препаратом (R.P.Warrell, Jr. et al. // Leukemia. 1994. Vol.8. 929) [2].

Однако ее меченный тритием аналог не описан.

Техническим результатом, достигаемым настоящим изобретением, является расширение ассортимента меченых аналогов физиологически активных веществ.

Достигается указанный технический результат получением нового меченого физиологически активного соединения - равномерномеченной тритием транс-3,7-диметил-9-(2,6,6-триметил-3-оксо-1-циклогексен-1-ил)-2,4,6,8-нонатетраеновой кислоты формулы:

3h]транс-3,7-диметил-9-(2,6,6-триметил-3-оксо-1-циклогексен-1-ил)-2,4,6,8-нонатетраеновая кислота, патент № 2318806" SRC="/images/patents/149/2318806/2318806-3.gif" height=100 BORDER="0">

Ниже приведен пример реализации изобретения.

Пример I.

В первую камеру реакционной двухкамерной ампулы помещали катализатор - 25 мг окиси палладия и 25 мг 5% PdO/BaSO ₄, в другую - раствор 5 мг транс-3,7-диметил-9-(2,6,6-триметил-3-оксо-1-циклогексен-1-ил)-2,4,6,8-нонатетраеновой кислоты и 15 мкл триэтиламина в 150 мкл диоксана. Вторую камеру замораживали жидким азотом, ампулу вакуумировали до давления 0,1 Па и заполняли газообразным тритием до давления 333 гПа, затем первую камеру нагревали до 70°С. В результате реакции окись палладия восстанавливалась, тритиевая вода (10 Ки) перемораживалась во вторую камеру. Реакционную ампулу, не прекращая охлаждение второй камеры жидким азотом, вакуумировали до давления 0,1 Па и заполняли аргоном. Затем содержимое второй камеры переносили в первую камеру, которую затем запаивали.

Таким образом, реакционная смесь состояла из паладиевого катализатора, тритиевой воды, триэтиламина и раствора транс-3,7-диметил-9-(2,6,6-триметил-3-оксо-1-циклогексен-1-ил)-2,4,6,8-нонатетраеновой кислоты в диоксане. Содержимое ампулы нагревали в течение 30 мин при 125°С. Затем ампулу вскрывали, реакционную смесь разбавляли 0,5 мл метанола, катализатор отделяли фильтрованием, промывали метанолом (5×1 мл). Тритиевую воду и триэтиламин отгоняли на роторе. Лабильный тритий удаляли, несколько раз растворяя вещество в метаноле (5×2 мл) и упаривая последний (общая радиоактивность остатка 180 мКи).

Так как кроме продуктов деструкции в реакционной смеси содержались изомеры транс-3,7-диметил-9-(2,6,6-триметил-3-оксо-1-циклогексен-1-ил)-2,4,6,8-нонатетраеновой кислоты, очистку искомого препарата проводили в два этапа.

Сначала отделяли продукты деструкции на колонке Kromasil 100C ₁₈, 8*150 мм, в системе 70% метанол-3 мМ Н ₃PO₄, v - 2 мл/мин.

Фракция, содержащая изомеры транс-3,7-диметил-9-(2,6,6-триметил-3-оксо-1-циклогексен-1-ил)-2,4,6,8-нонатетраеновой кислоты, имела радиоактивность 16,8 мКи, из которых 8 мКи приходилось на транс-3,7-диметил-9-(2,6,6-триметил-3-оксо-1-циклогексен-1-ил)-2,4,6,8-нонатетраеновую кислоту. Анализ проводили методом ВЭЖХ на колонке Kromasil C ₁₈, 4,0×150 мм, 7,0 мкм, скорость элюента - 1,0 мл/мин, в системе 70% метанол-3 мМ Н₃PO ₄, время удерживания искомого меченого препарата - 9,77 мин.

Изомеры разделяли методом препаративной ВЭЖХ на колонке Kromasil 100C₁₈, 8,0×150 мм, 7,0 мкм, скорость элюента - 2,0 мл/мин, в системе А (60% метанол-3 мМ Н₃PO₄) и В (50% метанол), градиент от 0%В-до 50%В за 30 мин.

Выход меченой транс-3,7-диметил-9-(2,6,6-триметил-3-оксо-1-циклогексен-1-ил)-2,4,6,8-нонатетраеновой кислоты после хроматографии составил 7 мКи (25%), молярная радиоактивность 1,8 Ки/ммоль.

Таким образом, получено новое равномерномеченное тритием физиологически активное соединение.