способ получения гепатопротективного средства, обладающего антиоксидантной активностью
Классы МПК: | A61K36/18 Magnoliophyta (покрытосеменные) B01D11/02 твердых веществ |
Автор(ы): | Краснов Ефим Авраамович (RU), Дудко Владимир Владимирович (RU), Новожеева Татьяна Петровна (RU), Сапрыкина Элеонора Васильевна (RU), Марьясова Евгения Юрьевна (RU), Блинникова Александра Александровна (RU), Нурмухаметова Карлыгаш Абековна (RU) |
Патентообладатель(и): | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Сибирский государственный медицинский университет" (ГОУ ВПО СибГМУ) (RU), Краснов Ефим Авраамович (RU), Дудко Владимир Владимирович (RU), Новожеева Татьяна Петровна (RU), Сапрыкина Элеонора Васильевна (RU), Марьясова Евгения Юрьевна (RU), Блинникова Александра Александровна (RU), Нурмухаметова Карлыгаш Абековна (RU) |
Приоритеты: |
подача заявки:
2005-07-26 публикация патента:
20.03.2008 |
Изобретение относится к фармацевтической промышленности. В качестве растительного сырья используют надземную часть репешка волосистого (Agrimonia pilosa L.), которую экстрагируют 70% этиловым спиртом в батарее из 5 перколяторов с интервалом слива 24 часа при соотношении сырье - этанол 1:1. Изобретение позволяет реализовать указанное назначение. 4 табл.
Формула изобретения
Способ получения гепатопротективного средства, обладающего антиоксидантной активностью путем экстракции растительного сырья надземной части репешка волокнистого (Agrimonia pilosa L.), отличающийся тем, что сырье экстрагируют 70% этанолом в батарее из 5 перколяторов с интервалом слива 24 ч при соотношении сырье - этанол 1:1.
Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к фармацевтической промышленности и касается способов получения лекарственного средства из растительного сырья.
Известен способ получения аналогичных лекарственных средств (карсил, силибор), обладающих гепатопротективным действием, заключающийся в экстракции плодов расторопши пятнистой 80% этиловым спиртом методом реперколяции с последующим упариванием, обработкой 50% этанолом, обезжириванием четыреххлористым углеродом и обработкой спиртоводного раствора хлороформно-спиртовой смесью с последующим высушиванием [1].
Недостатком известного способа является использование при экстракции 80% этилового спирта при повышенной температуре, применение токсичных растворителей, дефицит природного сырья в Российской Федерации, малая биомасса плодов и использование интродуцируемого сырья [2].
Наиболее близким к предлагаемому является способ получения водорастворимых экстрактов путем экстракции целого или измельченного до состояния порошка растения рода Agrimonia с водой и нагревания смеси при 20-30°С в течение 7 дней и более или до 55°С и выше с последующим удалением полученных экстрактов нерастворимых в воде компонентов [3].
Недостатком этого метода является длительное воздействие нагревания и использование в качестве экстрагента воды, что приводит к уменьшению выхода целевого продукта и снижению гепатопротективной активности.
Новая техническая задача - расширение арсеналов способов получения лекарственного средства из растительного сырья, обладающего выраженной гепатопротективной активностью.
Для решения поставленной задачи в способе получения гепатопротективного средства, обладающего антиоксидантной активностью путем экстракции растительного сырья надземной части репешка волосистого (Agrimonia pilosa L.), сырье экстрагируют 70% этанолом в батарее из 5 перколяторов с интервалам слива 24 часа при соотношении сырье - этанол 1:1.
Сущность изобретения заключается в следующем. Измельченные воздушно-сухие листья и стебли репешка волосистого, собранные в фазе цветения, просеивают через сито с диаметром отверстий 5-7 мм, заливают 70% этанолом и экстрагируют методом реперколяции в батарее из 5 перколяторов при соотношении сырье - экстрагент (1:1).
Полученное извлечение отстаивают и удаляют растворитель под вакуумом. Сгущенный экстракт досушивают под термовентилятором. Сухой экстракт представляет собой бурый гигроскопичный порошок. Выход целевого продукта по загруженному сырью составляет 19,3%.
Фармакологические испытания.
Для проведения фармакологических испытаний из жидких экстрактов экстрагент удаляли под вакуумом.
Эксперименты проведены на белых крысах-самцах массой 280-340 г (в каждой опытной группе 12 крыс). Животные находились в стандартных условиях вивария при естественном световом режиме и свободном доступе к воде и пище. Все манипуляции (взвешивание, введение препаратов и тетрахлорметана и забой крыс) осуществляли с 9 до 12 ч.
Для изучения динамики фармакологических и биохимических показателей у крыс вызывали токсическое поражение печени с помощью тетрахлорметана, который вводили в течение 6 дней в дозе 1 мл/кг массы в виде 20% раствора на рафинированном, дезодорированном подсолнечном масле. Терапию проводили сухими экстрактами, полученными реперколяцией 40 и 70% этанолом измельченной надземной части репешка волосистого, в дозе 140 мг/кг массы животного.
В качестве препарата сравнения использовали наиболее часто применяемый в гепатологии препарат карсил в дозе 1,2 г/кг или 100 мг действующего вещества силимарика. Препараты вводили внутрижелудочно с помощью зонда в виде суспензий на 1% крахмальной слизи.
Исследования проводили через сутки после последнего введения препаратов.
Определяли выживаемость животных, динамику массы тела в течение срока наблюдения, удельную массу печени (отношение массы печени в г к массе тела в г), длительность сна, наступающего после внутрибрюшинной инъекции гексенала (80 мг/кг). До 80% этого вещества метаболизируется в печени, что позволяет судить об ее антитоксической функции (таблица 2 Приложения) [4].
Для оценки гепатотоксичности тетрахлорметана и гепатозащитного действия препаратов изучали активность ферментов в сыворотке крови - аланинаминотрансферазы (АЛАТ) и аспартатаминотрансферазы (АСАТ), а также уровень общего билирубина (таблица 2 Приложения) [4].
Биохимические испытания.
Известно, что одним из звеньев сложной системы защитных реакций организма против воздействия чужеродных соединений является антиоксидантная система, включающая механизмы обезвреживания свободных радикалов и перекисных соединений.
О состоянии процессов перекисного окисления липидов в печени судили по содержанию одного из первичных продуктов - диеновых конъюгатов (ДК), а также по накоплению уровня спонтанного малонового диальдегида (МДА) и индуцированного ионами железа. Была также проведена оценка общей антиокислительной активности.
Содержание диеновых конъюгатов определяли спектрофотометрически при длине волны 232 нм и выражали в условных единицах D232/г ткани. Содержание малонового диальдегида определяли также спектрофотометрически в красной области спектра при длине волны 532 нм. Расчет проводили в ммоль/г ткани с учетом коэффициента молярной экстинкции k=1,56·10 -5 М-1см-1.
Общую антиокислительную активность (АОА) изучали по величине торможения переокисления суспензии липопротеинов куриного желтка. Измеряли оптическую плотность контрольной и опытных проб против соответствующего контроля при =532 нм. Общую АОА рассчитывали в процентах (таблица 3 Приложения) [5].
Результаты исследований показали, что при развитии токсического поражения печени у крыс отмечается интенсификация процессов перекисного окисления липидов за счет увеличения содержания диеновых конъюгатов и уровня малонового диальдегида в ткани печени, обусловленное снижением общей антиокислительной активности почти в 2 раза. При введении экстрактов из надземной части репешка волосистого, в особенности 70% экстракта, аналогично введению препарата карсил, выявлена нормализация общей антиокислительной активности в ткани печени, что, в свою очередь, способствует снижению уровня диеновых конъюгатов и радонового диальдегида.
Испытания на острую токсичность.
Определяли на белых беспородных мышах по методу Buchty (Buchty Е., 1963). Каждую дозу испытывали на пяти мышах. 70% экстракт вводили внутрижелудочно в виде суспензии на 1% крахмальной слизи в дозе 5 и 10 г/кг массы животных. В течение первых двух часов после введения исследуемого препарата отмечали двигательную реакцию животных, нервно-мышечную возбудимость, болевой и роговичный рефлекс, вегетативные реакции. Регистрировали гибель животных и определяли LD 50 (таблица 4 Приложения) [6].
Острую токсичность (LD50) экстрактов репешка волосистого определяли по методу Литчфилда и Уилкоксона в модификации Фота. Широту терапевтического действия оценивали на мышах по отношению LD50 /ЭД по МЭШ.
Экстракт не токсичен и обладает большой широтой терапевтического действия: LD50 составляет 5,99 г/кг.
Обработку результатов фармакологических и биохимических исследований проводили с помощью пакета программ Statistica 5.0 по t-критерию Стьюдента.
Примеры конкретного выполнения способа.
Сырье собрано в фазу цветения в Красноярском крае в 30 км зоне от г. Железногорска и использовано во всех примерах.
Пример 1.
В каждый перколятор загружают 120 г воздушно-сухих измельченных листьев и стеблей репешка волосистого. Первую порцию замачивают равным объемом 70% этилового спирта (120 мл), набухшее сырье загружают в головной перколятор, заливают двойным объемом экстрагента до "зеркала" и оставляют на сутки. На следующий день собирают два отпуска: один для намачивания второй порции сырья в объеме, равном его массе, другой - в двойном количестве (для настаивания сырья в перколяторе №2). Одновременно в перколятор №1 подают чистый экстрагент в количестве, равном объемам взятых отпусков. На третий день из перколятора №2 собирают два отпуска для работы с третьей порцией сырья, предназначенной для загрузки в перколятор №3.
В перколятор №2 подают отпуски из перколятора №1, а в него снова подают чистый экстрагент. На 4-й день из перколятора №3 собирают два отпуска для работы с четвертой порцией сырья, предназначенной для загрузки в перколятор №4, в перколятор №3 подают отпуски из перколятора №2, в перколятор №2 подают отпуски из перколятора №1, а в него снова подают чистый экстрагент. На пятый день из перколятора №4 собирают два отпуска для работы с пятой порцией сырья, предназначенной для загрузки в перколятор №5, в перколятор №4 подают отпуски из перколятора №3, в перколятор №3 подают отпуски из перколятора №2, в перколятор №2 подают отпуски из перколятора №1, а в него снова подают чистый экстрагент.
Одновременно из перколятора №4 собирают весь отпуск и подают его в перколятор №5, из перколятора №3 собирают весь отпуск и подают его в перколятор №4, из перколятора №2 собирают весь отпуск и подают его в перколятор №3, из перколятора №1 собирают весь отпуск и подают в перколятор №2, сырье в перколяторе №1 отжимают и заливают в перколятор №2, а перколятор №1 заливают водой для рекуперации этанола.
Аналогичные последовательные циклы осуществляют ежесуточно, одновременно продолжая собирать готовый продукт из перколятора №5 [7].
Объем полученного извлечения равен количеству загруженного сырья. Полученное извлечение упаривают под вакуумом. Сгущенный экстракт досушивают под термовентилятором. Выход целевого продукта 19,3%.
По результатам биохимических исследований содержание диеновых конъюгатов в гомогенате печени исследуемых животных при применении 70% сухого экстракта на фоне токсического поражения тетрахлорметаном составило 8,0 у.е./г, спонтанного малонового диальдегида - 3,29 ммоль/г, индуцированного малонового диальдегида - 8,04 ммоль/г, АЛАТ сыворотки - 1,3 ммоль/л·ч, АСАТ сыворотки - 1,5 ммоль/л·ч, билирубин - 2,7 мг%. Общая антиокислительная активность составила 64% (таблицы 2 и 3 Приложения).
Фармакологические испытания показали, что масса тела животных при применении 70% сухого экстракта репешка на фоне токсического поражения печени тетрахлорметаном изменилась на 35,0 г, удельная масса печени составила 12,45%, а длительность гексобарбиталового сна - 13,67 мин (таблица 2 Приложения).
Пример 2.
В каждый перколятор загружают 120 г воздушно-сухих измельченных листьев и стеблей репешка волосистого. Первую порцию накачивают равным объемом 40% этилового спирта (120 мл), набухшее сырье загружают в головной перколятор, заливают двойным объемом экстрагента "до зеркала" и оставляют на сутки. На следующий день собирают два отпуска: один для намачивания второй порции сырья в объеме, равном его массе, другой - в двойном количестве (для настаивания сырья в перколяторе №2). В это время в перколятор №1 подают чистый экстрагент в количестве, равном объемам взятых отпусков. На третий день из перколятора №2 собирают два отпуска для работы с третьей порцией сырья, предназначенной для загрузки в перколятор №3.
В перколятор №2 подают отпуски из перколятора №1, а в него снова подают чистый экстрагент. На 4-й день из перколятора №3 собирают два отпуска для работы с четвертой порцией сырья, предназначенной для загрузки в перколятор №4, в перколятор №3 подают отпуски из перколятора №2, в перколятор №2 подают отпуски из перколятора №1, а в него снова подают чистый экстрагент. На пятый день из перколятора №4 собирают два отпуска для работы с пятой порцией сырья, предназначенной для загрузки в перколятор №5, в перколятор №4 подают отпуски из перколятора №3, в перколятор №3 подают отпуски из перколятора №2, в перколятор №2 подают отпуски из перколятора №1, а в него снова подают чистый экстрагент. Через сутки после загрузки последнего перколятора №5 начинается рабочий период с получением первой порции готового продукта в объеме, равном массе загруженного сырья.
Одновременно из перколятора №4 собирают весь отпуск и подают его в перколятор №5, из перколятора №3 собирают весь отпуск и подают его в перколятор №4, из перколятора №2 собирают весь отпуск и подают его и перколятор №3, из перколятора №1 собирают весь отпуск и подают в перколятор №2, сырье в перколяторе №1 отжимают и заливают в перколятор №2, а перколятор №1 заливают водой для рекуперации этанола.
Аналогичные последовательные циклы осуществляют ежесуточно, одновременно продолжая собирать готовый продукт из перколятора №5 [5].
Объем полученного извлечения равен общему количеству сырья в перколяторах. Полученное извлечение упаривают под вакуумом. Сгущенный экстракт досушивают под термовентилятором. Выход целевого продукта 18,2%.
По результатам биохимических исследований содержание диеновых конъюгатов в гомогенате печени исследуемых животных при применении 40% сухого экстракта на фоне токсического поражения тетрахлорметана составило 7,38 у.e./г, спонтанного малонового дикальдегида - 4,49 ммоль/г, индуцированного малонового диальдегида - 12,63 ммоль/г, АЛАТ сыворотки - 1,6 ммоль/л·ч, АСАТ сыворотки - 1,8 ммоль/л·ч, билирубин - 3,8 мг%. Общая антиокислительная активность составила 82% (таблицы 2 и 3 Приложения).
Фармакологические испытания показали, что масса тела животных при применении 40% сухого экстракта репешка на фоне токсического поражения печени четыреххлористым углеродом изменилась на 20,0 г, удельная масса печени составила 13,08%, а длительность гексобарбиталового сна - 19,33 мин (таблица 2 Приложения).
Пример 3.
В каждый перколятор загружают 120 г воздушно-сухих измельченных листьев и стеблей репешка волосистого. Первую порцию замачивают равным объемом 20% этилового спирта (120 мл), набухшее сырье загружают в головной перколятор, заливают двойным объемом экстрагента до "зеркала" и оставляют на сутки. На следующий день собирают два отпуска: один для намачивания второй порции сырья в объеме, равном его массе, другой - в двойном количестве (для настаивания сырья в перколяторе №2). Одновременно в перколятор №1 подают чистый экстрагент в количестве, равном объемам взятых отпусков. На третий день из перколятора №2 собирают два отпуска для работы с третьей порцией сырья, предназначенной для загрузки в перколятор №3.
В перколятор №2 подают отпуски из перколятора №1, а в него снова подают чистый экстрагент. На 4-й день из перколятора №3 собирают два отпуска для работы с четвертой порцией сырья, предназначенной для загрузки в перколятор №4, в перколятор №3 подают отпуски из перколятора №2, в перколятор №2 подают отпуски из перколятора №1, a в него снова подают чистый экстрагент. На пятый день из перколятора №4 собирают два отпуска для работы с пятой порцией сырья, предназначенной для загрузки в перколятор №5, в перколятор №4 подают отпуски из перколятора №3, в перколятор №3 подают отпуски из перколятора №2, в перколятор №2 подают отпуски из перколятора №1, а в него снова подают чистый экстрагент. Через сутки после загрузки последнего перколятора начинается рабочий период с получением первой порции готового продукта в объеме, равном массе загруженного сырья.
Одновременно из перколятора №4 собирают весь отпуск и подают его в перколятор №5, из перколятора №3 собирают весь отпуск и подают его в перколятор №4, из перколятора №2 собирают весь отпуск и подают его в перколятор №3, из перколятора №1 собирают весь отпуск и подают в перколятор №2, сырье в перколяторе №1 отжимают и заливают в перколятор №2, а перколятор №1 заливают водой для рекуперации этанола.
Аналогичные последовательные циклы осуществляют ежесуточно, одновременно продолжая собирать готовый продукт из перколятора №5 [5].
Объем полученного извлечения равен количеству загруженного сырья. Полученное извлечение упаривают под вакуумом. Сгущенный экстракт досушивают под термовентилятором. Выход целевого продукта 14.8%.
Пример 4.
В каждый перколятор загружают 120 г воздушно-сухих измельченных листьев и стеблей репешка волосистого. Первую порцию замачивают равным объемом 95% этилового спирта (120 мл), набухшее сырье загружают в головной перколятор, заливают двойным объемом экстрагента до "зеркала" и оставляют на сутки. На следующий день собирают два отпуска: один для намачивания второй порции сырья в объеме, равном его массе, другой - в двойном количестве (для настаивания сырья в перколяторе №2). Одновременно в перколятор №1 подают чистый экстрагент в количестве, равном объемам взятых отпусков. На третий день из перколятора №2 собирают два отпуск для работы с третьей порцией сырья, предназначенной для загрузки в перколятор №3.
В перколятор №2 подают отпуски из перколятора №1, а в него снова подают чистый экстрагент. На 4-день из перколятора №3 собирают два отпуска для работы с четвертой порцией сырья, предназначенной для загрузки в перколятор №4, в перколятор №3 подают отпуски из перколятора №2, в перколятор №2 подают отпуски из перколятора №1, а в него снова подают чистый экстрагент. На пятый день из перколятора №4 собирают два отпуска для работы с пятой порцией сырья, предназначенной для загрузки в перколятор №5, в перколятор №4 подают отпуски из перколятора №3, в перколятор №3 подают отпуски из перколятора №2, в перколятор №2 подают отпуски из перколятора №1, а в него снова подают чистый экстрагент. Через сутки после загрузки последнего перколятора начинается рабочий период с получением первой порции готового продукта в объеме, равном массе загруженного сырья.
Одновременно из перколятора №4 собирают весь отпуск и подают его в перколятор №5, из перколятора №3 собирают весь отпуск и подают его в перколятор №4, из перколятора №2 собирают весь отпуск и подают его в перколятор №3, из перколятора №1 собирают весь отпуск и подают в перколятор №2, сырье в перколяторе №1 отжимают и заливают в перколятор №2, а перколятор №1 заливают водой для рекуперации этанола.
Аналогичные последовательные циклы осуществляют ежесуточно, одновременно продолжая собирать готовый продукт из перколятора №5 [5].
Объем полученного извлечения равен количеству загруженного сырья. Полученное извлечение упаривают под вакуумом. Сгущенный экстракт досушивают под термовентилятором. Выход целевого продукта 16,8%.
Обоснование режимов
В процессе поиска оптимальных условий получения экстракта из репешка волосистого было изучено влияние следующих факторов: использование различных растворителей, соотношение сырье - экстрагент, температура и время экстракции на выход целевого продукта и гепатопротекторную и антиоксидантную активность.
При этом установлено, что экстракцию следует вести методом реперколяции в батарее из пяти перколяторов, без нагревания, так как при применении экстракции при нагревании занижен выход действующих веществ.
Найдено, что 40 и 70% этиловый спирт обладают практически равной экстрагирующей способностью, однако, учитывая несколько меньшую фармакологическую активность и более низкий выход продукта при 40% этиловом спирте, предпочтительно использование для экстракции 70% этилового спирта.
Экстракты, полученные из надземной части репешка волосистого на 40% и 70% этиловом спирте, обладают гепатопротекторными и антиокислительными свойствами и способствуют нормализации свободнорадикального окисления липидов. Указанные эффекты получены за счет увеличения общей антиокислительной активности, обусловленной снижением уровня продуктов перекисного окисления липидов у крыс с токсическим поражением печени тетрахлорметаном, причем 70% экстракт показал наибольшую активность.
Приложение
Таблица 1 | ||||
Влияние концентрации этанола на выход целевого продукта | ||||
№ п/п | Экстрагент | Кратность экстракции | Внешний вид | Выход целевого продукта, % |
1 | 40% этанол | 3 | Бурый порошок со специфическим запахом и слабогорьким вкусом, очень гигроскопичен | 18,2±0,2 |
2 | 70% этанол | 3 | Темно-бурый порошок со специфическим запахом и слабогорьким вкусом, очень гигроскопичен | 19,3±0,3 |
3 | 20% этанол | 3 | Бурый порошок со специфическим запахом и слабогорьким вкусом, очень гигроскопичен | 14,8±0,2 |
4 | 95% этанол | 3 | Темно-бурый, почти черный порошок со специфическим запахом и слабогорьким вкусом, очень гигроскопичен | 16,8±0,15 |
Таблица 2 | |||||
Гепатопротективная активность 40% и 70% этанольных экстрактов из надземной части репешка волосистого и препарата карсил при токсическом поражении печени крыс тетрахлорметаном (М±m). | |||||
Исследуемые группы (n=12) | |||||
Изучаемые показатели | Интактные | CCl4 - гепатит | CCl 4 - гепатит + 40% экстракт | CCl 4 - гепатит + 70% экстракт | CCl 4 - гепатит + карсил |
Изменение массы тела, г | 32,67±5,7 | 32,69±8,8 | 20,0±0,0 | 35,0±5,8 | 26,6±5,7 |
Удельная масса печени, % | 12,06±0,59 | 14,90±0,72 * | 13,08±0,41 | 12,45±0,55*/** | 14,49±0,54* |
Длительность гексеналового сна, мин | 15,5±1,28 | 19,0±1,8 | 19,33±1,33 | 13,67±3,32 | 15,8±1,85 |
Активность АЛАТ сыворотки, ммоль/л·ч | 1,1±0,04 | 1,9±0,21 * | 1,6±0,09* | 1,3±0,07/** | 1,4±0,11/** |
Активность АСАТ сыворотки, ммоль/л·ч | 1,2±0,04 | 2,5±0,23 * | 1,8±0,05* | 1,5±0,06/** | 1,2±0,07/** |
Билирубин сыворотки, мг % | 1,5±0,24 | 4,6±0,51 * | 3,8±0,42* /** | 2,7±0,32 */** | 2,9±0,25 */** |
Примечание: * - р <0,05 достоверные различия по отношению к соответствующему контролю; | |||||
** - р <0,05 достоверные различия по отношению к интактной группе; | |||||
n - количество животных в группе. |
Таблица 3 | |||||
Действие экстрактов репешка на 40% и 70% этаноле и карсила на показатели перекисного окисления липидов в печени крыс при токсическом поражении печени тетрахлорметаном (М±m). | |||||
Исследуемые группы (n=6) | |||||
Изучаемые показатели | Интактные | CCl4 - гепатит | CCl4 - гепатит + 40% экстракт | CCl4 - гепатит + 70% экстракт | CCl4 - гепатит + карсил |
Диеновые конъюгаты (у.е./г) | 10,2±0,62 | 17,2±1,06 * | 7,88±0,21* | 8,0±0,52* | 9,56±0,89* |
МДА спонтанный (мМ/г) | 2,64±1,06 | 4,47±0,43 * | 4,49±0,67/** | 3,29±0,66/** | 3,78±0,37/** |
МДА индуцированный (мМ/г) | 9,29±1,35 | 13,11±1,05 | 12,63±1,12 | 8,04±1,35 | 8,33±0,97 |
АОА (в %) | 0,60±0,04 | 0,32±0,02 * | 0,82±0,04* /** | 0,64±0,061 * | 0,64±0,08* |
Примечание: * - р <0,05 достоверные различия по отношению к соответствующему контролю; | |||||
** - р <0,05 достоверные различия по отношению к интактной группе; | |||||
n - количество животных в группе. |
Таблица 4 | ||||||||||
Регистрация токсических эффектов сухого 70% экстракта репешка волосистого в дозах 5 г/кг и 10 г/кг | ||||||||||
№ животного | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | |||||
Вес, г | 47 | 41 | 48 | 44,5 | 45 | 32 | 46 | 41 | 43 | 40,5 |
Двигательная активность | N | N | N | |||||||
Возбудимость | N | N | N | |||||||
Судороги | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - |
Судорожные подергивания | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - |
Мышечный тонус | - | - | - | N | ||||||
Рефлексы: болевой | + | + | + | + | + | + | + | + | + | + |
роговичный | + | + | - | + | + | + | - | + | - | + |
Сон | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - |
Сонливость | - | + | + | + | - | + | + | + | - | + |
Саливация | - | + | + | + | - | + | + | + | - | + |
Диурез | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - |
Птоз | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - |
Гибель | - | + | - | + | - | + | + | + | - | + |
Примечание: N - норма, |
Источники информации, принятые во внимание.
1. Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. / М.Л.Беленький. - Л.: Наука, 1963. - 149 с.
2. Владимиров Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. / Ю.А.Владимиров, А.И.Арчаков. - М.: Наука, 1972. - 239 с.
3. Камышников B.C. Клинические методы диагностики в биохимии. / B.C.Камышников. - М.: Наука, 2002. - 568 с.
4. Муравьева Д.А. Фармакогнозия. / Д.А.Яковлева, И.А.Самылина, Г.П.Яковлев. - М.: Медицина, 2002. - 654 с.
5. Технология лекарственных форм: В 2-х т. / Под ред. Кондратьевой Т.С. [и др.] - М.: Наука, 1991. - Т.1. - 496 с.; Т.2. - 534 с.
6. Промышленная технология лекарств: Учебник в 2-х т. Том 2 / В.И.Чуенков, М.Ю.Чернов, Л.М.Хохлова и др.; Под ред. профессора В.И.Чуенкова. - Харьков: Изд-во МТК-Книга; НФАУ, 2002. - С.158-159.
Класс A61K36/18 Magnoliophyta (покрытосеменные)
Класс B01D11/02 твердых веществ