замещенные омега-азолилалкананилиды, способ их получения и применение в качестве антиагрегантов

Формула изобретения

1. Замещенные -азолилалкананилиды общей формулы I

где Z и Y означают атом азота или СН-группу, или одновременно являются цепью С-СН=СН-СН=СН-С, составляющую вместе аннелированное кольцо, n означает целое число от 1 до 3, R одинаковые или разные означают атом водорода, галогена, алкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 4, алкоксигруппу, алкилендиоксигруппу, бензилоксигруппу, перфторалкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 4, нитрогруппу, алкоксикарбонильную группу, карбоксильную группу, галогенфенилтиогруппу, галогенбензоилгруппу, m означает целое число атомов от 0 до 5, их соли с кислотами.

2. Способ получения замещенных -азолилалкананилидов общей формулы I,

где Z и Y означают атом азота или СН-группу, или одновременно являются цепью С-СН=СН-СН=СН-С, составляющую вместе аннелированное кольцо, n означает целое число от 1 до 3, R одинаковые или разные означают атом водорода, галогена, алкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 4, алкоксигруппу, алкилендиоксигруппу, бензилоксигруппу, перфторалкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 4, нитрогруппу, алкоксикарбонильную группу, карбоксильную группу, галогенфенилтиогруппу, галогенбензоилгруппу, m означает целое число атомов от 0 до 5, заключающийся в том, что -галогенацилгалогенидами ацилируют замещенные анилины в среде органических растворителей, в присутствии водного раствора гидроксидов или карбонатов щелочных или щелочноземельных металлов при температуре от 0 до 20°С с получением -галогенацетанилидов формулы II, где R, m, n имеют те же значения, что и в формуле I, X означает галоген, которые подвергают взаимодействию с азолатами щелочных металлов в среде полярного апротонного растворителя при температуре от 40 до 150°С.

3. Способ получения замещенных -азолилалкананилидов общей формулы I,

где Z и Y означают атом азота или СН-группу, или одновременно являются цепью С-СН=СН-СН=СН-С, составляющую вместе аннелированное кольцо, n означает целое число от 1 до 3, R одинаковые или разные означают атом водорода, галогена, алкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 4, алкоксигруппу, алкилендиоксигруппу, бензилоксигруппу, перфторалкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 4, нитрогруппу, алкоксикарбонильную группу, карбоксильную группу, галогенфенилтиогруппу, галогенбензоилгруппу, m означает целое число атомов от 0 до 5, заключающийся в том, что -азолилалкановые кислоты формулы III, где n, Z и Y имеют те же значения, что и в формуле I, вводят во взаимодействие с хлорирующими агентами в инертном растворителе при температуре от 20 до 50°С с получением гидрохлоридов хлорангидридов -азол-1-илалкановых кислот формулы IV, где n, Z и Y имеют те же значения, что и в формуле I, которыми ацилируют замещенные анилины в среде полярного апротонного растворителя, в присутствии оснований при температуре от 20 до 60°С

4. Применение замещенных -азолилалкананилидов общей формулы I

где Z и Y означают атом азота или СН-группу, или одновременно являются цепью С-СН=СН-СН=СН-С, составляющую вместе аннелированное кольцо, n означает целое число от 1 до 3, R одинаковые или разные означают атом водорода, галогена, алкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 4, алкоксигруппу, алкилендиоксигруппу, бензилоксигруппу, перфторалкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 4, нитрогруппу, алкоксикарбонильную группу, карбоксильную группу, галогенфенилтиогруппу, галогенбензоилгруппу, m означает целое число атомов от 0 до 5, и их солей с кислотами в качестве антиагрегационных препаратов.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к химии гетероциклических соединений, а именно к замещенным -азолилалкананилидам ( -(1Н-азол-1-ил)-N-фенилалканамидам) общей формулы I:

где Z и Y означают атом азота или СН-группу, или одновременно являются цепью С-СН=СН-СН=СН-С, составляющей вместе аннелированное кольцо; n означает целое число от 1 до 3; R одинаковые или разные означают атом водорода, галогена, алкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 4, алкоксигруппу с числом атомов углерода от 1 до 4, алкилендиоксигруппу, бензилоксигруппу, перфторалкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 4, нитрогруппу, алкоксикарбонильную группу, карбоксильную группу, галогенфенилтиогруппу, галогенбензоилгруппу, m означает целое число атомов от 0 до 5; к их солям с кислотами, обладающим антиагрегационной активностью.

Соединения общей формулы I могут найти применение в качестве медицинских, ветеринарных и фитотерапевтических препаратов, в первую очередь антиагрегантов.

Изобретение относится также к способам получения соединений общей формулы I и использованию этих соединений в качестве антиагрегантов.

Известны многие продукты с азольными циклами, в частности N-фенил-N-бензил 2-гетерилацетамиды с бактерицидной активностью, применяемые в сельском хозяйстве и садоводстве, общей формулы II, где Х и Y атом означают атом водорода, низший алкил или атом галогена; Het означает пиперидино, метилпиперидино, диметилпиперидино, гексаметиленимино, пиразолил, имидазолил или 1,2,4-триазолил [патент Японии № 4145067, МКИ C07D 249/08. - Заявл. - 04.10.1990].

Известны 2-(азол-1-ил)-N-фенилацетамиды с противораковой активностью общей формулы III, где R означает атом водорода, метильную группу или нитрогруппу; R₁ означает атом водорода или метильную группу [Kasai S., Nagasawa H., Yamashita M. New Antimetastatic Hypoxic Cell Radiosensitizers: Desing, Synthesis, and Biological Activities of 2-Nitroimidazole-acetamide, TX-1877, and its Analogues. // Bioorg. Med. Chem. - 2001. - No.9. - P.453-64].

Известны 2-азолил-N,N-дифенилацетамиды общей формулы IV, где Z означает атом азота или СН-группу S.Dalkara, A.Willke. Synthesis of Some N-Arylazole Acetamide Derivatives and Their Anticonvulsant and Antimicrobial Activities. // Arzneim. - Forsch. / Drug Res. - 1994. - Vol.44 (II). - № 8. - P.920-924], которые обладают противосудорожной активностью.

Наиболее близкими к заявленным замещенным -(1Н-азол-1-ил)-N-фенилалканамидам по структуре и по способу получения являются N-фенил-2-(азол-1-ил)-2-алканамиды общей формулы V, где R₁ означает алкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 10, фенильную или феноксигруппу; R ₂ означает атом водорода, алкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 5, аллильную группу; R₃ означает алкильную группу с числом атомов углерода от 1 до 8, аллильную группу, циклоалкильную группу, фенильную группу; R ₄ означает атом водорода, низшую алкильную группу или атом галогена [патент Японии №58052256, МКИ C07D 249/10. - Заявл. - 24.09.1981], применяемые как бактерициды промышленного или сельскохозяйственного назначения, гербициды или фунгициды. Соединения общей формулы V получают в две стадии, сначала взаимодействием 2-бромацилгалогенидов с аминами в инертном растворителе, например бензоле, толуоле или тетрагидрофуране в присутствии водного раствора карбоната или гидроксида натрия при температуре -10 - +10°C, получают 2-бромацетамиды, которыми алкилируют азолы в диметилсульфоксиде в присутствии 1,8-диазобицикло[5.4.0]ундец-7-ена (ДБУ) при нагревании до 60°C в течение 24 часов.

Первое место среди причин летального исхода занимают заболевания сердечно-сосудистой системы. Назначение антитромбоцитарных препаратов (антиагрегантов) предупреждает развитие тяжелых сосудистых осложнений, снижает риск тяжелых сосудистых исходов: инфаркта миокарда, инсультов. Данная группа препаратов является важной составной частью лечения и профилактики стенокардии, атеросклероза периферических артерий и проявлений атеротромбоза.

Антиагреганты ингибируют агрегацию тромбоцитов, уменьшают их способность к склеиванию и прилипанию (адгезии) к эндотелию кровеносных сосудов. Антиагреганты способны не только предупреждать агрегацию, но и вызывать дезагрегацию уже агрегированных кровяных пластинок. Применяют их для предупреждения образования послеоперационных тромбов, при тромбофлебитах, тромбозах сосудов сетчатки, нарушениях мозгового кровообращения, а также для предупреждения тромбоэмболических осложнений при ишемической болезни сердца, в том числе и при инфаркте миокарда [Харкевич Д.А. Фармакология. - М.: ГЭОТАР Медицина, 2000. - 664 с.].

Важное место среди антиагрегантов занимают производные азолов, в первую очередь имидазола, являющиеся ингибиторами тромбоксансинтетазы [Демина О.В., Ходонов А.А., Швец В.И., Варфоломеев С.Д. Агрегация тромбоцитов человека: молекулярно-кинетические механизмы и пути регуляции. // Биолог. мембраны. - 2002. - Т.19, № 2. - С.115-152].

После стимуляции клетки арахидоновая кислота высвобождается из мембранных фосфолипидов и превращается в результате последовательности ферментных реакций (каскад арахидоновой кислоты) во множество различных производных метаболитов по двум основным путям - липоксигеназному и циклооксигеназному. Продуктами циклооксигеназного пути являются широко распространенные простагландины, из устойчивого простациклина PGH₂ образуется как простациклин (PGI₂), образующийся в эндотелии сосудов, так и тромбоксан (ТхА₂ ), который синтезируется в тромбоцитах. При ряде заболеваний наблюдается дисбаланс между этими двумя эйкозаноидами, перепроизводство тромбоксана А₂ выявлено при многих паталогических состояниях. Ингибиторы тромбоксансинтетазы, например дазоксибен, блокируют биосинтез тромбоксана, при этом наблюдается конверсия тромбоцитарных эндоперекисей (PGH₂) в простациклин PGI₂, что способствует повышению атромбогенных свойств сосудистой стенки, ингибированию адгезии тромбоцитов, их агрегации и коагуляции, а также может сопровождаться понижением давления [Garsia-Szabo R.R., Peterson M.B., Watkins W.D. et. al. Thromboxane generation after thrombin. Protective effect of thromboxane synthetase inhibition on lang Huid balance. // Circ. Res. - 1983. - Vol.53, N2. - P.214-222].

Многие антиагреганты - ингибиторы тромбоксансинтетазы применяют в качестве вазодилаторов, антигипертензивных препаратов, антиангинальных средств, церебровазодилаторов, коронарных вазодилаторов, средств лечения бронхиальной астмы и ринита.

Наиболее близкими к заявленным замещенным -(1Н-азол-1-ил)-N-фенилалканамидам по применению в качестве антиагрегантов являются феноксиалкилимидазолы общей формулы IV, где R означает водород или алкил; с числом метиленовых групп n от 1 до 9; m от 0 до 8; Z означает атом О, S или NH группу [Патент США № 4632934. - Заявл. - 21.08.1979], которые ингибируют тромбоксансинтетазу и за счет этого находят применение как антигипертензивные противовоспалительные, противотромбоэлические средства [Cross P.E., Dickinson R.P., Parry M.J., Randall M.J. Selective tromboxane synthetase Inhibitors. I. 1-[(Aryloxy)alkyl]-1H-imidazoles. // J. Med. Chem. - 1985. - Vol.28. - P.1427-32]

Техническая задача данного изобретения состоит в увеличении эффективности антиагрегационных лекарственных средств и расширении ассортимента гематотропных препаратов.

Поставленная задача решается получением соединений общей формулы I, обладающих антиагрегационной активностью. Согласно настоящему изобретению -азолилалкананилиды ( -(1Н-азол-1-ил)-N-фенилалканамиды) формулы I получают двумя способами. По первому способу взаимодействием -галогенацилгалогенидов, например хлорацетилхлорида с замещенными анилинами (VII) в среде органических растворителей, например хлористом метилене, хлороформе, толуоле и др., в присутствии водного раствора гидроксидов или карбонатов щелочных или щелочно-земельных металлов при температуре от 0 до 20°С по реакции Шоттена-Баумана получали -галогенациланилиды (VIII), которыми алкилировали азолаты щелочных металлов в среде полярного апротонного растворителя, например ацетонитрила, диметилформамида, диметилсульфоксида и др. при температуре от 40 до 150°С.

По второму способу получают соединения общей формулы I взаимодействием -азолилалкановых кислот (IX) с хлорирующими агентами, например хлоридом фосфора (V), хлоридом фосфора (III), тионилхлоридом, оксалилхлоридом, в инертном растворителе, например в диоксане, тетрагидрофуране, хлористом метилене и др., при температуре от 20 до 50°С получали гидрохлориды хлорангидридов -азол-1-илалкановых кислот (X), которые затем вводили в реакцию с замещенными анилинами (VII) в среде полярного апротонного растворителя, например ацетонитрила, диметилформамида, диметилсульфоксида либо хлористого метилена, диоксана в присутствии оснований, например триэтиламина, диазабициклооктана, ДБУ и др. при температуре от 20 до 60°С.

В приведенных схемах R, n, m, Z и Y имеют те же значения, что и в формуле I, X означает хлор, бром; М означает щелочной металл, например натрий, калий и т.п.; :В означает основание, например триэтиламин, ДБУ, гидроксид или карбонат щелочного или щелочно-земельного металлов.

Алкилированию азолов, в частности имидазола и 1,2,4-триазола, посвящено множество статей. Первоначально получают 1,2,4-триазолат щелочного металла, например, взаимодействием с гидридом натрия в ДМФА или с этилатом натрия в спирте, к которому затем прибавляют алкилгалогенид и получают 1-алкил-1,2,4-триазолы [Bergtrap M., Larsen P. Alkylation, acylation and silylation of azoles. // Acta Chem. Scand. - 1990. - Vol.44, № 10. - Р.1050-1057].

2-(Имидазол-1-ил)-N,N-дифенилацетамид получают взаимодействием 2-бром-N,N-дифенилацетамида с имидазолатом натрия в кипящем ДМФА в течение 48 ч [F.ÖzkanIi, S.Dalkara, Ü.Çali , A.Willke. Synthesis of Some N-Arylazole Acetamide Derivatives and Their Anticonvulsant and Antimicrobial Activities. // Arzneim.-Forsch. / Drug Res. - 1994. - Vol.44 (II). - № 8. - P.920-924].

Замещенные 2-галогенацетамиды (VIII), например бромацетамиды, получают взаимодействием анилинов (VII) с бромацилбромидом в эфире в присутствии водного раствора гидроксида натрия. S.Dalkara, A.Willke. Synthesis of Some N-Arylazole Acetamide Derivatives and Their Anticonvulsant and Antimicrobial Activities. // Arzneim.-Forsch. / Drug Res. - 1994. - Vol.44 (II). - № 8. - P.920-924].

Техническим результатом изобретения являются новые вещества - замещенные -(1Н-азол-1-ил)-N-фенилалкиламиды общей формулы I и способ их получения. В указанном патенте [патент Япония № 58052256, - Заявл. - 24.09.1981] предлагают получать целевые 1-замещенные азолы в трудноудаляемых растворителях, например, в диметилсульфоксиде в течение длительного времени взаимодействия. Мы предлагаем проводить алкилирование в легко удаляемых растворителях, например в ацетонитриле, при существенно меньшем времени взаимодействия. Нами предложен альтернативный способ получения целевых соединений из азолилалкановых кислот в две стадии. Вначале взаимодействием с хлорирующими агентами с высоким выходом получали хлорангидриды кислот, которыми затем ацилировали анилины.

Технической результатом изобретения также является применение -(1Н-азол-1-ил)-N-фенилалкиламиды формулы I в качестве антиагрегантов, которые превосходят по активности известный антиагрегационный препарат дазоксибен (гидрохлорид 4-[2-(имидазол-1-ил)этокси]бензойной кислоты) [J. Med. Chem. - 1985. - Vol.28. - P.1427-32], что позволяет увеличить эффективность антиагрегационных лекарственных средств и расширить ассортимент гематотропных препаратов. Эффект -(1Н-азол-1-ил)-N-фенилалкиламидов формулы I в экспериментах in vitro проявлялся в диапазоне фармакологически приемлемых концентраций 10^-4-10^-6 M, при этом оптическая плотность плазмы снижалась до 7,7-42,6%. Исследуемые соединения, например, 30, 45, 47 превосходили эталон дазоксибен, как при агрегации вызываемой АДФ, так и коллагеном.

Сравнивая степень влияния соединения 30 на АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов in vivo в концентрациях 11, 16, 21 мг/кг, установлено, что оно во всех изученных концентрациях в разной степени проявляло антиагрегационное действие, при этом максимум действия наступал через 7, 9 и 11 часов в зависимости от используемой дозы. Степень подавления агрегации также зависела от дозы, и значения оптической плотности составляли 26,5% (11 мг/кг), 18,8% (16 мг/кг) и 16,9% (21 мг/кг) соответственно. Продолжительность эффекта соединения 30 в концентрации 11 мг/кг наблюдалась в интервале от 1 до 13 часов, а под влиянием концентраций 16 и 21 мг/кг не значительное подавление АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов наблюдалось и спустя 24 часа после введения. В то время как сравнительное изучение влияния дазоксибена на АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов in vivo в концентрациях 11, 16, 21 мг/кг позволило установить, что максимум действия при изучении всех концентраций наступал через 1 час после введения препарата, при этом значения оптической плотности плазмы составляли 31% при изучении концентрации 11 мг/кг, 29,4% при изучении концентрации 16 мг/кг и 29,3% при изучении концентрации 21 мг/кг соответственно.

Сопоставление данных, полученных при изучении влияния соединения 30 в концентрациях 11, 16, 21 мг/кг на плазменные факторы свертывания крови in vivo, позволило установить, что изучаемое соединение во всех концентрациях увеличивало время образования сгустка. На максимуме действия соединение 30 в концентрациях 16 и 21 мг/кг (28,9, 29,2 с) показывало примерно равные результаты, а в концентрации 11 мг/кг (22,7 с) несколько уступало им. Таким образом, все изученные концентрации (11, 16, 21 мг/кг) соединения увеличивали время образования сгустка при изучении действия на плазменные факторы свертывания крови. При этом на максимуме действия соединение 30 в концентрациях 16 и 21 мг/кг (28,9, 29,2 с) в равной степени увеличивало время образования сгустка, а в концентрации 11 мг/кг (22,7 с) несколько уступало более высоким концентрациям. Эффект при использовании концентрации 16 и 21 мг/кг длился более 12 часов, а под действием концентрации 11 мг/кг до 8 часов. В то время как сравнительное изучение влияния дазоксибена в концентрациях 11, 16, 21 мг/кг на плазменные факторы свертывания крови in vivo, позволило установить, что изучаемое соединение во всех концентрациях увеличивало значения АЧТВ. При этом не зависимо от концентрации значимое увеличение времени образования сгустка наблюдалось через 3 часа после введения. Таким образом, все изученные концентрации (11, 16, 21 мг/кг) дазоксибена увеличивали время образования сгустка при изучении действия на плазменные факторы свертывания крови. При этом на максимуме действия активность всех концентраций была примерно равной, но продолжительность максимального эффекта увеличивалась с увеличением концентрации изучаемого соединения (1 час при концентрации 11 мг/кг, 2 часа при концентрации 16 мг/кг и 4 часа при концентрации 21 мг/кг). Непосредственно сам эффект при использовании концентрации 11 и 16 мг/кг длился в промежутке между 1 и 7 часами, а под действием концентрации 21 мг/кг на 2 часа дольше (между 1 и 9 часами).

Изобретение может быть проиллюстрировано следующими примерами.

Пример 1. 2-Хлор-N-фенилацетамид (1).

К смеси 19,7 мл 20%-ного раствора гидроксида натрия, 9,3 г (0,1 моль) анилина и 100 мл хлористого метилена, охлаждаемой в бане со льдом и солью до 5°C, при перемешивании добавляют по каплям 13,56 г, 9,6 мл (0,12 моль) 2-хлорацетилхлорида так, чтобы температура смеси не превышала 10°C, а затем перемешивают при комнатной температуре еще 2 часа. Выпавший осадок отфильтровывают и промывают водой, фильтрат промывают насыщенным раствором гидрокарбоната натрия (2×15 мл), водой (3×20 мл), рассолом (15 мл) и сушат над сульфатом магния. После отгонки растворителя в вакууме водоструйного насоса полученный остаток перекристаллизовывают из смеси гексан:толуол (2:1) и получают 19,64 г (86%) 2-хлор-N-фенилацетамида (1) с т.пл. 129-131°C.

Аналогично получены замещенные 2-хлор-N-фенилацетамиды. Таблица 1.

Таблица 1
Температуры плавления и выход синтезированных 2-хлор-N-фенилацетамидов (n=1)
Соединение	R	m	Выход, %	Т.пл., °C
1	Н	0	86	129-131
2	4-Cl	1	85	170-172
3	4-OBn	1	54	139-140
4	3,4-Cl2	2	92	111-113
5	3-CF3	1	84	60-62
6	4-CF 3	1	98	161-162
7	4-i-Pr	1	90	130-132
8	4-NO2	1	97	159-162
9	4-CO2Et		84	91-93

Пример 2. 2-(1,2,4-Триазол-1-ил)-N-фенилацетамид (10).

К суспензии 2,73 г (0,03 моль) 1,2,4-триазолата натрия, в 30 мл ацетонитрила при перемешивании добавляют 5 г (0,03 моль) 2-хлор-N-фенилацетамида (1), кипятят реакционную массу в течение 10 часов, выпавший осадок отфильтровывают и промывают 5 мл дистиллированной воды и высушивают. Получают 5,628 г технического продукта, являющегося смесью изомеров 1- и 4-алкилирования триазола, из которой методом «сухой» флеш-хроматографии, используя в качестве элюента смесь метанол:хлороформ 1:10, выделяют 3,20 г (57%) 2-(1,2,4-триазол-1-ил)-N-фенилацетамид (10) с т.пл. 146-148°C.

Пример 3. 2-(1,2,4-Триазол-1-ил)-N-(4-трифторметилфенил)ацетамид (17).

К 1,61 г (0,01 моль) 4-1,1,1-трифторметиланилина в 20 мл абсолютного ацетонитрила при перемешивании добавляют 1,82 г (0,01 моль) гидрохлорида хлорангидрида 1,2,4-триазол-1-ил уксусной кислоты и 2,02 г (0,02 моль) триэтиламина. Перемешивают в течение двух часов. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают 2 мл воды и 2 мл ацетонитрила. Осадок перекристаллизовывают из изопропилового спирта. Получают 2,16 г (41%) 2-(1,2,4-Триазол-1-ил)-N-(4-1,1,1-трифторметилфенил)ацетамида (17) с т.пл. 187-188°C.

Аналогично получены замещенные 2-(1,2,4-триазол-1-ил)-N-фенилацетамиды (таблица 2).

Пример 4. 2-(Имидазол-1-ил)-N-фенилацетамид (11).

К суспензии 2,70 г (0,03 моль) имидазолата натрия, в 25 мл ацетонитрила при перемешивании добавляют 5 г (0,03 моль) 2-хлор-М-фенилацетамида (1), кипятят в течение 10 часов, выпавший осадок отфильтровывают и промывают 5 мл дистиллированной воды, высушивают и перекристаллизовывают из изопропилового спирта, получают 2,64 г (64%) 2-(имидазол-1-ил)-N-фенилацетамид (2) с т.пл. 138-140°C.

Аналогично получены замещенные 2-(имидазол-1-ил)-N-фенилацетамиды (таблица 2).

Пример 5. Этил 4[(1Н-бензимидазол-1-ил ацетил)амино]бензоат (43).

К 1,65 г (0,01 моль) этил 4-аминобензоату в 10 мл абсолютного ацетонитрила при перемешивании добавляют порциями 2,37 г (0,01 моль) гидрохлорида хлорангидрида (бензимидазол-1-ил)уксусной кислоты и 2,02 г (0,02 моль) триэтиламина. Нагревают до 40°С и выдерживают при этой температуре при перемешивании в течение восемнадцати часов. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают водой (2×3 мл), перекристаллизовывают из метилового спирта. Получают 1,03 г (32%) этил 4-[(1Н-бензимидазол-1-ил ацетил)амино]бензоата (43)с т.пл. 222-223°C.

Аналогично получены замещенные 2-(1Н-бензимидазол-1-ил ацетил)-N-фенилацетамиды (таблица 3).

Пример 6. 4-(1Н-имидазол-1-ил)-N-(3-нитрофенил)бутанамид (26).

К 1,38 г (0,01 моль) 3-нитроанилина в 10 мл абсолютного диметилформамида при перемешивании добавляют порциями 1,725 г (0,01 моль) гидрохлорида хлорангидрида 4-(имидазол-1-ил)бутановой кислоты и 2,02 г (0,02 моль) триэтиламина. Реакционную массу нагревают до 40°С в течение суток. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают 5 мл воды и 1 мл изопропилового спирта, фильтрат упаривают в вакууме водоструйного насоса. К полученному остатку добавляют 10 мл воды и фильтруют. Полученный осадок перекристаллизовывают из изопропилового спирта. Получают 0,56 г (26%). 4-(1Н-имидазол-1-ил)-N-(3-нитрофенил)бутанамид (26) с т.пл. 145-7°C.

Пример 7. Этил 3-([4-(1Н-имидазол-1-ил)бутаноил]амино)бензоат (30).

а) Гидрохлорид хлорангидрида 4-(имидазол-1-ил)бутановой кислоты. К 1,16 г (0,0075 моль) 4-(имидазол-1-ил)бутановой кислоты в 5 мл абсолютного диоксана добавляют порциями при перемешивании 1,56 г (0,0075 моль) пятихлористого фосфора. Реакционную массу нагревают до 40°C в течение шести часов до полного растворения пятихлористого фосфора, охлаждают до комнатной температуры и перемешивают еще десять часов. Реакционную массу упаривают в вакууме водоструйного насоса. Получают 1,56 г (99%) гидрохлорид хлорангидрида 4-(имидазол-1-ил)бутановой кислоты в виде масла. По результатам потенциометрического аргентометрического титрования определяют содержание хлора. Найдено: Cl 34,35%; С ₇Н₁₀Cl₂N ₂O; вычислено: Cl 33,97%. В дальнейшем продукт используют без дополнительной очистки.

б) К 1,25 г (0,0075 моль) 3-этоксикарбониланилину в 10 мл абсолютного диоксана при перемешивании добавляют порциями 1,56 г (0,0075 моль) гидрохлорида хлорангидрида 1Н-имидазол-1-ил бутановой кислоты и 1,515 г (0,0075 моль) триэтиламина. Реакционную массу нагревают в течение сорока восьми часов. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают 10 мл воды, перекристаллизовывают из изопропилового спирта. Получают 0,56 г (26%) этил 3-{[4-(1Н-имидазол-1-ил)бутаноил]амино}бензоата (30) с т.пл. 146-148°С.

Аналогично получены замещенные -(азол-1-ил)-N-фенилалканамиды.

ЯМР ¹Н-спектры записаны на приборе «Bruker AC-200» (рабочая частота 200 МГц), сдвиги измерены относительно тетраметилсилана, в качестве растворителя использовали d₆ -ДМСО. ИК-спектры регистрировали с призмами NaCl в тонкой пленке в вазелиновом масле на спектрометре «Specord M80».

Таблица 2
Температуры плавления и выход синтезированных -(1,2,4-триазол-1-ил)-N-фенилалканамидов и -(имидазол-1-ил)-N-фенилалканамидов
Соединение	Z	n		R		m	Выход, %		Т.пл., °C
1	2	3		4		5	6		7
10	N	1		Н		0	57		146-148
11	СН	1		Н		0	64		138-140
12	N	1		4-Cl		1	60		198-199
13	СН	1		4-Cl		1	98		191-192
14	N	1		4-Br		1	74		210-211
15	СН	1		4-Br		1	64		207-208
16	N	1		3,4-Cl2		2	63		207-208
17	N	1		3-CF3		2	67		146-147
18	СН	1		3-CF3		1	60		162-165
19	N	2		3-CF3		1	38		200-201
20	N	1		4-CF3		1	41		187-188
21	СН	1		4-CF3		1	27		191-192
22	N	1		4-i-Pr		1	43		193-195
23	СН	1		4-i-Pr		1	48		188-190
24	N	1		4-NO2		1	68		230-232
25	СН	1		4-NO2		1	62		140-144
26	СН	3		3-NO2		1	26		145-147
27	N	1		4-CO2Et		1	57		170-172
28	СН	1		4-CO2Et		1	51		171-173
29	СН	2		3-CO2Et		1	52		120-121
30	СН	3		3-CO2Et		1	26		146-147
31	N	1		3,4-(ОСН2СН2O)		2	69		205-207
32	СН	1		3,4-(ОСН 2СН2O)		2	46		190-193
33	N	1		4-OCH2 Ph		1	75		184-186
34	СН	1		4-OCH2Ph		1	83		180-183
35	N	1		3-NO2, 5-(4-FPhS)		2	56		180-183
36	СН	1		3-NO2, 5-(4-FPhS)		2	51		204-206
37	СН	1		2-(2-ClBz), 4-Br		2	58		310-312
Таблица 3
Температуры плавления и выход синтезированных 2-(бензимидазол-1-ил)-N-фенилацетамидов (n=1, m=1)
Соединение			R		Выход, %			Т.пл., °С
38			4-Cl		11			247-248
39			4-Br		25			260-261
40			4-CF3		38			207-209
41			4-NO2		33			272-273
42			4-ОСН3		31			200-201
43			4-CO2 Et		15			222-223
44			3-CF3		18			197-199

Пример 8. Гидрохлорид 2-(имидазол-1-ил)-N-(4-хлорофенил)ацетамида (45).

К раствору 0,326 г (1,38 ммоль) 2-(имидазол-1-ил)-N-(4-хлорофенил)ацетамида (13) в 5 мл метилового спирта при перемешивании добавляют 1,41 мл (2,08 ммоль) 1,47М раствора хлороводорода в метаноле. Растворитель отгоняют в вакууме водоструйного насоса досуха. Получают 0,373 г (98%) гидрохлорида 2-(имидазол-1-ил)-N-(4-хлорофенил)ацетамида (45) с т.пл. 216-217°C.

Аналогично получены гидрохлориды замещенных 2-(азол-1-ил)-N-фенилалканамидов: из этил 4-[2-(1Н-имидазол-1-ил)ацетиламино]бензоата (28) гидрохлорид этил 4-[2-(1Н-имидазол-1-ил)ацетиламино]бензоата (46) с т.пл. 105-106°С, из этил 4-[2-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ацетиламино]бензоата (27) гидрохлорид 4-[2-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)ацетиламино]бензоата (47) с т.пл. 144-146°С.

Пример 9. Проведение испытаний -азол-1-илалкан анилидов на наличие антиагрегационной активности in vitro.

Методика проведения эксперимента. Богатую тромбоцитами плазму (в среднем 3×10⁸ в 1 см ³ тромбоцитов) получали центрифугированием свежеполученной крови здоровых доноров (стабилизатор - 3.8%-ный цитрат натрия, соотношение крови и раствора цитрата 9:1) в течение 10 минут при 1000 об/мин при комнатной температуре. До проведения эксперимента и в конце его в каждом образце подсчитывали количество тромбоцитов. В том случае, если плазма содержала большее количество кровяных пластинок, то ее разводили до необходимого количества безтромбоцитарной плазмой, полученной центрифугированием цитратной крови в течение 10 минут при 3000 об/мин. В качестве индуктора агрегации использовали АДФ, коллаген (НПО «РЕНАМ», Россия). Агрегацию тромбоцитов изучали методом светорассеяния по методу Born [Born J.V.R. Aggregation of blood platelets by adenosine diphosphate and its reversal. // Nature - 1962. - V.194, N5. - P.927-929. Born J.V.R. Quantitative investigation into the aggregation of blood platelets. // J. Physiol. - 1962. - V.162, N4. - P.487-511] на агрегометре фирмы «CHRONO-LOG» (США).

Условия проведения эксперимента: 37°C, объем богатой тромбоцитами плазмы 450 мкл, объем исследуемого раствора вещества 50 мкл, время прединкубации с препаратом ингибитора 5 минут при перемешивании, объем индуктора агрегации 50 мкл, конечная концентрация для АДФ 1×10^-5 М, коллагена - 0,2 мг/мл. (В качестве контроля использовали богатую тромбоцитами плазму в объеме 450 мл). Количественной характеристикой степени агрегации служило относительное падение оптической плотности на максимуме амплитуды агрегатограммы. В процессе записи наблюдали изменение оптической плотности исследуемой плазмы в диапазоне 100% (богатой тромбоцитами плазмы) до 0% (безтромбоцитарная плазма) (длина волны зондированного светового потока 660 нм). Результат выражали в процентах падения оптической плотности на максимуме амплитуды агретограммы.

Были проведены эксперименты сравнения антиагрегационных свойств веществ и эталона, известного препарата дазоксибена.

Таблица 5
Влияние -(1Н-азол-1-ил)-N-фенилалкиламидов и дазоксибена на АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов in vitro
Соединение	% падения оптической плотности плазмы
	Контроль	Концентрация соединения-антиагреганта, моль/л
		10-3 М	10-4 М	10-5 M	10 -6 М	10-7 M
30	59,1±1,3	16,9±1,5	18,3±1,2	26,4±1,7	30,7±2,2	46,6±2,6
45	59,2±1,2	14,0±1,8	22,2±2,1	42,9±1,3	43,0±2,0	48,0±2,5
47	56,3±2,3	18,0±1,7	18,6±1,6	24,5±2,3	28,4±2,8	46,1±2,3
Дазоксибен	57,9±1,7	40,9±1,3	40,1±1,7	41,0±1,8	46,1±1,9	54,0±2,8
Таблица 6
Влияние -(1Н-азол-1-ил)-N-фенилалкиламидов и дазоксибена на коллаген-индуцированную агрегацию тромбоцитов in vitro
Соединение	% падения оптической плотности плазмы
	Контроль	Концентрация соединения- антиагреганта, моль/л
		10-3 М	10-4 М	10-5 M	10 -6 М	10-7 M
30	58,3±1,7	11,4±1,9	15,1±1,6	15,4±1,8	28,1±1,3	49,3±1,7
Дазоксибен	58,7±1,4	27,1±1,7	30,2±1,3	37,8±1,2	46,1±1,6	56,9±2,2

Пример 10. Проведение биологических испытаний -азол-1-илалкан анилидов на наличие антиагрегационной активности in vivo.

Выбранные соединения вводились кроликам породы Шиншилла внутривенно в краевую вену уха в дозах 11, 16, 21 мг/кг. Первый забор крови для исследования осуществлялся через 30 мин после введения, далее через 1 час, 3, 5, 7, 9, 11 и 24 часа. В том случае если оптическая плотность плазмы через 11 часов после введения исследуемого соединения значительно отличалась от контрольных значений, то забор крови делали еще через 13 и 15 часов после введения. В качестве индуктора использовали АДФ в пороговой концентрации (1×10^-5 М).

Полученные результаты суммированы и представлены в таблице 7.

Пример 11. Сравнительное изучение действия новых производных азолилалкановых кислот и дазоксибена на плазменные факторы свертывания крови in vivo.

Соединения вводились кроликам породы Шиншилла внутривенно в краевую вену уха, в дозах 11,16, 21 мг/кг. Полученные результаты суммированы и представлены в таблице 8. Первый забор крови для исследования осуществлялся до введения изучаемого соединения (контроль). Далее через 30 мин после введения, через 1 час, 3, 5, 7, 9, 11 и 24 часа. В том случае если получаемые результаты значительно отличалась от контрольных значений через 11 часов после введения исследуемого соединения, то забор крови делали еще через 13 и 15 часов после введения.

Таблица 7

Влияние соединения 30 и дазоксибена на максимальную амплитуду агрегатограмм в экспериментах in vivo

Вещество

мг/кг

% падения оптической плотности

Контроль

Время после введения

30 мин

1 ч

3 ч

5 ч

7 ч

9 ч

11 ч

13 ч

15 ч

24 ч

30

11

60,1±1,3

50,9±1,5

39±1,9

33,2±2,1

27,4±1,4

26,5±1,7

29,5±1,6

38,7±2,5

49±1,9

59,8±2,2

60,6±2,9

16

61,1±1,6

49,1±1,8

36,8±1,3

36±1,9

34,6±2,2

21,5±2,1

18,8±1,1

22,1±1,3

30,1±1,5

35,1±2,6

56,2±2,5

21

59,7±1,2

47,2±1,4

32,7±1,1

25,8±1,6

22±2,1

20±1,9

18,1±1,7

16,9±2,3

19,1±1,3

25,2±2,3

54±3,4

Дазоксибен

11

59,7±1,1

45,7±2,3

31±1,4

33,5±1,8

44,2±2,4

57,5±1,1

59,1±1,5

59,5±2,5

-

-

61,2±2,8

16

62,3±2,1

46,3±1,3

29,4±1,1

30,2±1,4

33,2±2,2

51,7±1,8

58,1±1,7

59,2±2,1

-

-

60,9±2,5

21

60,6±1,6

48,1±1,4

30±1,7

29,3±1,1

30,3±1,2

40,9±1,6

54,7±2,3

58,7±1,9

-

-

59±1,8

Примечание: * - достоверно, по сравнению с контролем, при р<0,05

Таблица 8

Влияние соединения 30 и дазоксибена на показатели АЧТВ кроликов при внутривенном введении (М±т).

Вещество

мг/кг

Значения АЧТВ

контроль

Время после введения

30 мин

1 ч

3 ч

5 ч

7 ч

9 ч

11 ч

13 ч

15 ч

24 ч

30

11

15,7±1,3

15,2±1,5

15,9±1,1

16,4±1,6

18±1,4

21,3±2,3

22,7±2,2

20,3±1,2

18,2±1,9

16,8±2,4

15,4±2,1

16

15,3±1,6

15,7±1,8

15,9±1,1

19,5±2,1

23,5±1,4

26±1,8

28,1±1,3

28,9±1,2

26,1±2,3

24,1±2,5

15,2±1,9

21

16,1±1,1

16,7±1,6

17±2,1

19±1,3

22,9±1,1

26,5±1,8

29,1±1,6

29,2±2,3

29±1,9

27,4±1,5

16,3±2,4

Дазоксибен

11

14,8±1,4

15,3±1,6

16,6±1,2

23,3±1,9

21,4±1,3

17,5±2,1

15,5±1,2

15,4±1,7

-

-

15,1±2,3

16

15,1±1,1

15,2±1,4

16±1,7

24,8±1,3

24±1,9

17±1,2

15,3±2,4

15,4±2,2

-

-

15,3±1,8

21

15,5±1,7

15,9±1,3

16,6±1,2

24,3±1,9

23,5±1,5

23,1±2,1

18,3±1,8

16,3±1,6

-

-

15,6±2,1

Применение -(1Н-азол-1-ил)-N-фенилалкиламидов формулы I в качестве антиагрегантов в медицине позволяет увеличить эффективность антиагрегационных лекарственных средств и расширить ассортимент гематотропных препаратов. По проявленному эффекту как в эксперементах in vitro, так и in vivo некоторые исследуемые соединения превосходили эталон дазоксибен, как при агрегации вызываемой АДФ, так и коллагеном, оказывали дозазависимое влияние на плазменные факторы свертываемости крови. Таким образом, указанные соединения могут расширить арсенал лекарственных препаратов? применяемых при заболеваниях сердечно-сосудистой системы.