селективное ингибирование продукции эстрогена и обеспечение эстрогенного действия в организме человека

Формула изобретения

1. Применение продукта переработки Morinda citrifolia в качестве биологически активной добавки для селективного ингибирования продукции экстрогена в организме млекопитающего и обеспечения эстрогенного действия в организме.

2. Применение по п.1, где продуктом переработки является один из:

(i) плодового сока Morinda citrifolia:

(ii) масляного экстракта Morinda citrifolia;

(iii) пищевых волокон Morinda citrifolia;

(iv) сока-пюре Morinda citrifolia;

(v) пюре Morinda citrifolia;

(vi) концентрата плодового сока Morinda citrifolia;

(vii) концентрата сока-пюре Morinda citrifolia; и

(viii) экстракта из листьев Morinda citrifolia.

3. Применение по п.2, дополнительно предусматривающее стадию, обеспечивающую рекомендованное применение биологически активной добавки, где рекомендованное применение включает

употребление одной жидкой унции биологической добавки в день;

употребление более одной жидкой унции биологически активной добавки в день; и

употребление менее одной жидкой унции биологически активной добавки в день.

4. Применение по п.3, где рекомендованное применение дополнительно предусматривает применение биологически активной добавки перед едой.

5. Применение по п.1, где применение предусматривает либо (i) употребление, либо (ii) трансдермальное применение.

6. Применение по п.1, дополнительно предусматривающее применение биологически активной добавки в качестве ингибитора ароматазы.

7. Применение экстракта переработанных листьев Morinda citrifolia в виде биологически активной добавки в качестве ингибитора ароматазы для контроля продукции эстрогена в организме млекопитающего для селективного ингибирования продукции эстрогена и обеспечения эстрогенного действия.

8. Применение по п.7, дополнительно предусматривающий применение переработанного экстракта для обеспечения эстрогенного действия в организме.

9. Применение по п.7, где переработанный экстракт представлен в форме крема для кожи.

10. Применение по п.7, где рекомендованное применение включает в себя

употребление одной жидкой унции биологически активной добавки в день;

употребление более одной жидкой унции биологически активной добавки в день; и

употребление менее одной жидкой унции биологически активной добавки в день.

11. Применение по п.10, где рекомендованное применение дополнительно предусматривает употребление биологически активной добавки перед едой.

12. Биологически активная добавка для ингибирования продукции эстрогена и повышения уровней эстрогена у человека, где добавка содержит продукт переработки Morinda citrifolia.

13. Биологически активная добавка по п.12, где продукт выбран из

(i) листьев Morinda citrifolia; и

(ii) сока Morinda citrifolia.

14. Способ ингибирования ароматазы и ароматазных ферментов, функция которых заключается в преобразовании андрогенов в эстрогены, где указанный способ предусматривает введение млекопитающему композиции, содержащей продукт переработки Morinda citrifolia в количестве от около 0,01 до 100 мас.%, где указанный продукт переработки Morinda citrifolia содержит активный ингредиент кверцетин.

15. Способ по п.14, где количество указанного кверцетина составляет от около 0,1 до 100 мас.%.

16. Способ по п.14, где указанным продуктом переработки Morinda citrifolia является по крайней мере один из:

(i) плодового сока Morinda citrifolia;

(ii) масляного экстракта Morinda citrifolia;

(iii) пищевых волокон Morinda citrifolia;

(iv) сока-пюре Morinda citrifolia;

(v) пюре Morinda citrifolia;

(vi) концентрата плодового сока Morinda citrifolia; и (vii) концентрата сока-пюре Morinda citrifolia.

17. Способ по п.14, где указанный продукт переработки Morinda citrifolia, кроме того, содержит в качестве дополнительного активного ингредиента рутин, который синергически ингибирует указанную ароматазу вместе с указанным кверцетином.

18. Способ по п.17, где количество указанного рутина составляет от около 0,1 до 10 мас.%.

19. Способ по п.14, где указанная композиция вводится одним из следующих путей:

(i) пероральным;

(ii) трансдермальным применением на указанную пораженную область;

(iii) инъекцией в указанную пораженную область;

(iv) внутривенно; и

(v) системно.

20. Способ ингибирования ароматазы и профилактики образования и роста эстроген-зависимых раковых клеток у млекопитающего, где указанный способ включает следующие стадии:

стадию добавления продукта переработки Morinda citrifolia в спиртовой раствор;

стадию выделения и экстракции активного ингредиента указанного продукта переработки Morinda citrifolia из указанного раствора;

введение указанного экстрагированного активного ингредиента в организм млекопитающего, где указанный экстрагированный активный ингредиент ингибирует, предотвращает, нейтрализует и обращает эффекты указанных эстроген-зависимых раковых клеток.

21. Способ по п.20, где указанный продукт переработки Morinda citrifolia включает в себя по крайней мере один из (i) плодового сока переработанного Morinda citrifolia, и (ii) продукт переработки Morinda citrifolia, включающий пюре переработанной Morinda citrifolia.

22. Способ по п.20, где указанный спиртовой раствор выбран из группы, включающей, по существу, метанольные, этанольные, этилацетатные и другие спиртовые производные.

23. Способ по п.20, где указанным активным ингредиентом является кверцитин.

24. Способ по п.23, где указанным активным ингредиентом является рутин, который синергически ингибирует образование и рост указанных эстроген-зависимых раковых клеток вместе с указанным кверцетином.

25. Способ по п.20, где указанная стадия введения указанного экстрагированного активного ингредиента предусматривает пероральный прием пациентом двух унций пищевого продукта два раза в день натощак, где указанный пищевой продукт содержит указанный активный ингредиент, полученный из продукта переработки Morinda citrifolia.

26. Способ по п.20, где указанная стадия введения указанного экстрагированного активного ингредиента предусматривает нанесение композиции для местного применения на указанную область, где указанная композиция для местного применения содержит указанный активный ингредиент, полученный из продукта переработки Morinda citrifolia.

27. Способ ингибирования ароматазы и профилактики образования и роста эстроген-зависимых раковых клеток у млекопитающих, указанный метод предусматривает

стадию перорального введения утром натощак указанному млекопитающему по крайней мере одной унции композиции биологически активной добавки, содержащей продукт переработки Morinda citrifolia;

стадию перорального введения перед сном натощак указанному млекопитающему по крайней мере одной унции композиции биологически активной добавки; и

повторение указанных стадий перорального введения ежедневно, до тех пор, пока указанные эстроген-зависимые раковые клетки не будут разрушены.

28. Способ по п.27, где указанная композиция биологически активной добавки содержит сок переработанных плодов Morinda citrifolia, в количестве около 100 мас.%.

29. Способ по п.27, где указанная композиция биологически активной добавки содержит;

сок переработанных плодов Morinda citrifolia в количестве от около 85 до 99,9 мас.%; и

воду в количестве от около 0,1 до 15 мас.%.

30. Способ по п.27, где указанная композиция биологически активной добавки содержит

сок переработанных плодов Morinda citrifolia в количестве от около 85 до 99,9 мас.%; и

соки плодов, отличных от Morinda citrifolia, в количестве от около 0,1 до 15 мас.%.

31. Способ по п.27, где указанная композиция биологически активной добавки содержит

сок переработанных плодов Morinda citrifolia в количестве от около 50 до 90 мас.%;

воду в количестве от около 0,1 до 49,9 мас.%; и

соки плодов, отличных от Morinda citrifolia, в количестве от около 0,1 до 30 мас.%.

32. Способ по п.27, где указанная композиция биологически активной добавки содержит сок-пюре из переработанных плодов Morinda citrifolia в количестве около 100 мас.%.

33. Способ по п.27, где указанная композиция биологически активной добавки содержит

сок-пюре из переработанных плодов Morinda citrifolia в количестве от около 85 до 99,9 мас.%; и

воду в количестве от около 0,1 до 15 мас.%.

34. Способ по п.27, где указанная композиция биологически активной добавки содержит

сок-пюре из переработанных плодов Morinda citrifolia в количестве от около 85 до 99,9 мас.%; и

соки плодов, отличных от Morinda citrifolia в количестве от около 0,1 до 15 мас.%.

35. Способ по п.27, где указанная композиция биологически активной добавки содержит

сок-пюре из переработанных плодов Morinda citrifolia в количестве от около 50 до 90 мас.%; и

воду в количестве от около 0,1 до 49,9 мас.%; и

соки плодов, отличных от Morinda citrifolia, в количестве от около 0,1 до 30 мас.%.

36. Способ по п.27, где указанная стадия перорального введения включает в себя пероральное введение двух унций указанного состава биологически активной добавки.

37. Способ регуляции продукции эстрогена и ингибирования способности эстрогенных рецепторов связываться с эстрогеном, где указанный способ предусматривает следующие стадии:

стадию перорального введения утром натощак по крайней мере одной унции композиции биологически активной добавки, содержащей продукт переработки Morinda citrifolia; и

стадию перорального введения вечером перед сном по крайней мере одной унции указанной композиции биологически активной добавки.

38. Способ по п.37, где указанная композиция биологически активной добавки содержит сок переработанных плодов Morinda citrifolia в количестве около 100 мас.%.

39. Способ по п.37, где указанная композиция биологически активной добавки содержит

сок переработанных плодов Morinda citrifolia в количестве от около 85 до 99,9 мас.%; и

воду в количестве от около 0,1 до 15 мас.%.

40. Способ по п.37, где указанная композиция биологически активной добавки содержит

сок переработанных плодов Morinda citrifolia в количестве от около 85 до 99,9 мас.%; и

соки плодов, отличных от Morinda citrifolia в количестве от около 0,1 до 15 мас.%.

41. Способ по п.37, где указанная композиция биологически активной добавки содержит

сок переработанных плодов Morinda citrifolia в количестве от около 50 до 90 мас.%;

воду в количестве от около 0,1 до 49,9 мас.%; и

соки плодов, отличных от Morinda citrifolia, в количестве от около 0,1 до 30 мас.%.

42. Способ по п.37, где указанная композиция биологически активной добавки содержит сок-пюре переработанных плодов Morinda citrifolia в количестве около 100 мас.%.

43. Способ по п.37, где указанная композиция биологически активной добавки содержит

сок-пюре переработанных плодов Morinda citrifolia в количестве от около 85 до 99,9 мас.%; и

воду в количестве от около 0,1 до 15 мас.%.

44. Способ по п.37, где указанная композиция биологически активной добавки содержит

сок-пюре переработанных плодов Morinda citrifolia в количестве от около 85 до 99,9 мас.%; и

соки плодов, отличных от Morinda citrifolia в количестве от около 0,1 до 15 мас.%.

45. Способ по п.37, где указанная композиция биологически активной добавки содержит

сок-пюре переработанных плодов Morinda citrifolia в количестве от около 50 до 90 мас.%;

воду, в количестве от около 0,1 до 49,9 мас.%; и

соки плодов, отличных от Morinda citrifolia, в количестве от около 0,1 до 30 мас.%.

46. Способ по п.37, где указанная стадия перорального введения предусматривает пероральный прием двух унций указанной композиции биологически активной добавки ежедневно два раза в день.

47. Способ ингибирования ароматазы и способности эстрогена связываться с эстрогенными рецепторами для лечения, профилактики, ингибирования, разрушения и обращения эстроген-зависимых раковых клеток млекопитающих, где указанный способ предусматривает следующие стадии:

стадию системного введения композиции для внутреннего введения в организм млекопитающего, где указанная композиция для внутреннего введения содержит

продукт переработки Morinda citrifolia, в количестве от около 10 до 80 мас.%; и

среду-носитель в количестве от около 20 до 90 мас.%.

48. Способ по п.47, где указанным продуктом переработки Morinda citrifolia является по крайней мере один из:

(i) сока переработанных плодов Morinda citrifolia;

(ii) сока-пюре переработанных плодов Morinda citrifolia; и

(iii) пищевых волокон переработанной Morinda citrifolia.

49. Способ по п.47, где указанная стадия внутреннего введения композиции выбрана из группы, состоящей из внутривенного введения, перорального приема и инъекции.

50. Способ ингибирования ароматазы и регуляции продукции эстрогена, где указанный способ предусматривает следующие стадии:

стадию введения композиции для внутреннего применения в организм млекопитающего, где указанная композиция для внутреннего применения содержит

продукт переработки Morinda citrifolia, в количестве от около 5 до 80 мас.%; и

среду-носитель, в количестве от около 20 до 95 мас.%.

51. Способ по п.50, где указанный продукт переработки Morinda citrifolia, выбран из группы, состоящей из сока переработанных плодов Morinda citrifolia, сока-пюре плодов переработанной Morinda citrifolia, пищевых волокон переработанной Morinda citrifolia, масла переработанной Morinda citrifolia и масляного экстракта переработанной Morinda citrifolia.

52. Способ по п.50, где указанная стадия введения композиции для внутреннего применения, предусматривает способы, выбранные из группы, состоящей из внутривенного введения, перорального приема, трансдермального применения и инъекции.

53. Ингибитор ароматазы для лечебного воздействия на эстроген-зависимые опухолевые клетки млекопитающих, содержащий композицию биологически активной добавки, содержащую по крайней мере один продукт переработки Morinda citrifolia.

54. Ингибитор ароматазы по п.53, где указанным продуктом переработки Morinda citrifolia является по крайней мере один из:

(i) плодового сока Morinda citrifolia;

(ii) сока-пюре Morinda citrifolia;

(iii) концентрата сока-пюре Morinda citrifolia;

(iv) концентрата плодового сока Morinda citrifolia; и

(v) пищевых волокон Morinda citrifolia.

55. Ингибитор ароматазы по п.53, где указанный продукт переработки Morinda citrifolia указанной композиции биологически активной добавки дополнительно содержит активный ингредиент кверцитин, в количестве от около 0,1 до 10 мас.%.

56. Ингибитор ароматазы по п.53, где количество указанного продукта переработки Morinda citrifolia составляет от около 0,01 до 100 мас.%.

57. Ингибитор ароматазы по п.55, где указанный продукт переработки Morinda citrifolia также содержит рутин в качестве дополнительного активного ингредиента, который синергически действует вместе с кверцитином при лечении мигренеподобных головных болей и сопутствующих симптомов.

58. Ингибитор ароматазы по п.57, где количество указанного рутина составляет от около 0,1 до 10 мас.%.

59. Ингибитор ароматазы по п.53, где указанная композиция биологически активной добавки (i) вводится перорально, (ii) применяется трансдермально на указанной пораженной области, (iii) вводится внутривенно или (iv) системно.

60. Способ регуляции продукции эстрогена в организме млекопитающего для лечебного воздействия на эстроген-зависимые опухоли, где указанный способ предусматривает следующие стадии: стадию системного введения композиции для внутреннего применения в организм млекопитающего, где указанная композиция для внутреннего применения содержит продукт переработки Morinda citrifolia, в количестве от около 0,1 до 100 мас.%.

Описание изобретения к патенту

ОБЛАСТЬ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение относится к эстрогенному действию в организме человека. Более конкретно, настоящее изобретение относится к применению биологически активной композиции или добавки для селективного ингибирования продукции эстрогена и обеспечения эстрогенного действия в организме человека, где в состав композиции входит один или несколько продуктов переработки растения Индийская шелковица, научное название которого Morinda citrifolia L.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Эстрогены представляют собой стероидные гормоны, в основном вырабатываемые яичниками и являющиеся ответственными за стимуляцию эструса, а также за развитие и поддержание женских вторичных половых признаков. У человека эстроген вырабатывается в яичнике, вероятно, в корковом веществе надпочечников в яичках и комплексе плод-плацента. Эстрогены обладают различными функциями. Например, они ответственны за развитие женских вторичных половых признаков, и во время менструального цикла их действие на женские гениталии заключается в обеспечении среды, подходящей для оплодотворения, имплантации и питания эмбриона на ранних стадиях развития.

За продукцию эстрогена отвечает фермент, называемый ароматазой, который является частью ферментного комплекса, известного как цитохром Р450, который присутствует в различных органах и тканях организма и, в частности, в некоторых жизненно важных органах. Фермент ароматаза в организме человека экспрессируется в плаценте, жировой ткани, волосяных фолликулах, мышцах, костях, печени и головном мозге. В головном мозге ароматаза находится в переднем и медиабазальном гипоталамусе.

Ароматаза действует на преобразование С19 андрогенов в ароматические С18 эстрогенные стероиды. Тем не менее, ароматаза также способна метаболизировать ксенобиотики. Способность или функция ароматазы преобразовывать адрено-андрогенные субстраты в эстрогены рассматривается как единственный источник эстрогена у женщин в постклимактерическом периоде. Поэтому ингибиторы фермента ароматазы используются для лечения постклимактерического рака груди и других эстроген-зависимых заболеваний.

Лишь недавно ингибиторы ароматазы были признаны эффективными при лечении груди и других эстроген-зависимых заболеваний. Применение таких ингибиторов продолжает увеличиваться. Ингибиторы ароматазы принадлежат семейству гормональных препаратов, которые как в лабораторных испытаниях, так и в некоторых клинических испытаниях, продемонстрировали значительную противораковую активность в отношении рака груди, диагностированного у женщин в постклимактерическом периоде. Ингибиторы ароматазы особенно предпочтительны и эффективны в случаях, когда у женщины присутствует высокая чувствительность к эстрогенам.

Было установлено и полагают, что более двух третей случаев рака груди являются «эстроген-чувствительными», потому что они способны расти и пролиферировать в области молочной железы и выходить за ее пределы. Для предотвращения такого чрезмерного роста было введено использование ингибиторов ароматазы, которые снижают количество циркулирующего эстрогена в организме женщин в постклимактерическом периоде и, таким образом, вызывают прекращение роста или даже уменьшение эстроген-чувствительных или эстроген-зависимых опухолей. Эстроген-чувствительные злокачественные опухоли также называют ER+(эстроген-рецептор положительные), или, по-другому, прогестерон-рецептор положительными (PR+).

Любые раковые или опухолевые клетки имеют рецепторы (места связывания), расположенные на их клеточной мембране. При продукции и секреции эстрогена в организме происходит его связывание с этими клеточными рецепторами. Таким образом, для определения эффективности ингибиторной терапии можно оценить каждый рецептор и эффективность его связывания с эстрогеном. Эту эффективность связывания обычно называют «статусом рецептора». Наряду с этим, статус рецептора отвечает за инвазивность рака груди.

Многие ингибиторы ароматазы ингибируют связывание рецепторов с эстрогеном, тогда как другие ингибируют ароматазные ферменты, чьей функцией является преобразование андрогенов в эстрогены. Кроме того, ингибиторы ароматазы снижают содержание эстрогена более эффективно после менопаузы, потому что во время менопаузы оба яичника прекращают продуцировать эстроген. Тем не менее, это не означает, что в организме вообще не вырабатывается эстроген. Низкий уровень эстрогена, который наблюдается после менопаузы, является результатом работы ароматазных ферментов, превращающих другие природные гормоны в эстроген. По существу, ингибиторы ароматазы были разработаны для эффективного блокирования продукции эстрогена ферментом ароматазой. В результате, уровни эстрогена в организме снижаются, и эстроген-зависимые опухоли начинают сокращаться и исчезают. Наоборот, до менопаузы эстроген в основном вырабатывается в яичниках и только небольшое количество продуцируется в результате процесса преобразования под действием ароматазы. Многочисленные исследования показали, что у женщин в предклимактерическом периоде ингибиторы ароматазы недостаточно снижают уровни эстрогена, чтобы влиять на рост опухоли.

На настоящий момент очень ограниченное число ингибиторов ароматазы было одобрено Управлением по контролю за продуктами и лекарствами и находится в применении. Наиболее широко применяемыми ингибиторами являются Аримидекс®, Аромазин® и Фемара® и все они прошли несколько клинических испытаний. Несмотря на то, что они эффективно ингибируют ароматазные ферменты, эти ингибиторы вызывают многочисленные нежелательные побочные эффекты у пациентов, что делает их использование в лечении менее популярным и маложелательным. Интересно, что одобренные виды лечения женщин в постклимактерическом периоде включают применение лекарственных средств, которые как обратимо, так и необратимо блокируют эстрогенные рецепторы на клеточной поверхности. При этом их побочные эффекты включают, но ими не ограничиваются, потливость, приливы, повышенную утомляемость, изменение аппетита, головную боль, боль в костях, боль в груди, кашель, затруднение дыхания и, у некоторых пациентов, тромбообразование.

Также существуют методики получения эстрогенов для повышения уровня эстрогена в организме человека. Такие методики включают получение эстрогена из мочи беременных лошадей. Несмотря на имеющуюся методику, она имеет ряд побочных эффектов, которые аналогичны побочным эффектам, возникающим при гормоно-заместительной терапии, например потливость, приливы, повышенную утомляемость, изменение аппетита, головную боль, боль в костях, боль в груди, кашель, затруднение дыхания и тому подобное. В связи с этим были предприняты попытки создания более совершенных методов получения и/или улучшенных композиций для получения безопасного эстрогена, который можно применять в организме.

Таким образом, хотя в настоящее время существуют технологии, используемые для ингибирования продукции эстрогена и для получения исследователями и группой разработчиков эстрогена для применения в организме, все еще существуют недостатки, включая такие нежелательные побочные действия, как потливость, приливы, повышенную утомляемость, изменение аппетита, головную боль, боль в костях, боль в груди, кашель, затруднение дыхания и тому подобное. Соответственно, в данной области необходимы дополнительные методики или даже методики, которые могли бы заменить существующие.

КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к эстрогенному действию в организме человека. Более конкретно, настоящее изобретение относится к применению биологически активной композиции или добавки для селективного ингибирования продукции эстрогена и обеспечения эстрогенного действия в организме человека, где в состав композиции входит один или несколько продуктов, полученных из растения Индийская шелковица, научное название которого Morinda citrifolia L.

Осуществление настоящего изобретения связано с биологически активной композицией или добавкой, полученной из продукта растения Индийская шелковица, научное название которого Morinda citrifolia L. («Morinda citrifolia»). Продукт Morinda citrifolia может быть получен из плодов, листьев, семян, корней или любой другой части Morinda citrifolia. В одном из вариантов осуществления биологически активная добавка включает в себя плодовый сок Morinda citrifolia, восстановленный из чистого пюре из плодов, выращенных во Французской Полинезии. Добавка также может включать в себя другие натуральные соки, например концентрат натурального виноградного сока, концентрат натурального черничного сока, и/или концентрат другого натурального сока. В одном из вариантов осуществления жидкую фракцию получают из плодов Morinda citrifolia и используют для получения биологически активной добавки для употребления. По крайней мере, в одном из вариантов осуществления биологически активная добавка называется "Tahitian Noni"® и может быть приобретена от компании Morinda, Inc., основное коммерческое предприятие которой расположено по адресу 5152 N. Edgewood Dr. #100, Provo, UT, 84604.

В другом варианте осуществления биологически активную добавку получают из листьев Morinda citrifolia с получением сухой или порошкообразной биологически активной добавки, которая может быть добавлена, например, в таблетированную форму для применения. Еще в одном из вариантов осуществления композиция находится в виде чрескожного крема, который наносится на поверхность кожи индивидуума.

По крайней мере, в нескольких вариантах осуществления настоящего изобретения биологически активная добавка или композиция обеспечивает эстрогенное действие в организме человека, при этом действие биологически активной добавки или композиции более мягкое, чем действие эстрогена и, поэтому, не вызывает сопутствующих побочных эффектов. Например, заместительная гормональная терапия может вызвать рак эстроген-зависимых клеток в таких органах, как молочная железа, матка и/или яичники, применение же биологически активной добавки является предпочтительным из-за ее более медленной экскреции.

Биологически активная добавка или композиция может служить заменой эстрогена при гормонозаместительной терапии, при этом ее действие более слабое. В случае высокой концентрации природных эстрогенов, биологически активная добавка будет снижать действие природного эстрогена, а при очень низкой концентрации природного эстрогена она будет обеспечивать эстрогенную активность.

В некоторых вариантах осуществления женщины получают экстракт листьев, сок или другой продукт Morinda citrifolia в жидкой форме, в сухом виде в капсуле или в виде крема. В одном из вариантов осуществления пациент принимает по крайней мере один грамм в день. Таким образом, в соответствии по крайней мере с некоторыми вариантами осуществления настоящего изобретения употребление или применение другим путем биологически активной добавки индивидуумом обеспечивает эстрогенное действие в организме пациента для профилактики или прекращения таких симптомов как приливы, ночная потливость, кровотечение, депрессия, которые характерны при начале менопаузы. Кроме того, биологически активная добавка предотвращает остеопороз или улучшает состояние при остеопорозе.

Существуют два типа клеток, называемые остеобластами и остеокластами, которые отвечают за поддержание нормального состояния костной ткани. Остеобласты ответственны за перестройку кости, а остеокласты ответственны за разрушение костного матрикса. Уровень кальция в бластах должен быть постоянным и кость является буфером для поддержания уровня кальция. Если уровень кальция в крови понижается, то костный матрикс будет разрушаться остеокластами, повышая уровень кальция. Во время беременности кальций из крови матери активно усваивается эмбрионом, так как происходит формирование его скелета. Поэтому метаболизм костного матрикса скелета матери повышается. Во время беременности уровень эстрогена высокий, так как эстроген очень важен для процессов, происходящих в остеобластах, отвечающих за перестройку кости, а во время менопаузы уровень эстрогена падает. Процесс костной перестройки ослабевает, женщина теряет костный матрикс и возникает остеопороз. Таким образом, применение биологически активной добавки по настоящему изобретению может обеспечить эстрогенное действие и компенсировать потери костного матрикса в организме. Таким образом, в соответствии по крайней мере с некоторыми вариантами осуществления настоящего изобретения продукт переработки Morinda citrifolia, например листьев, сока или другой части Morinda citrifolia, может использоваться для селективного обеспечения эстрогенного действия в организме.

По крайней мере в нескольких вариантах осуществления биологически активная добавка, кроме того, ингибирует ароматазу или ароматазные ферменты, функция которых заключается в преобразовании андрогенов в эстрогены, тем самым ингибируя связывание рецепторов с эстрогеном и снижая и/или регулируя продукцию эстрогена, а также уменьшая количество продуцируемого эстрогена в организме и регулируя такую продукцию посредством ингибирования ароматазы при лечении рака и, в частности, при лечении эстроген-зависимых злокачественных опухолей путем введения в организм (например, при приеме внутрь) безопасной, заранее определенной дозы композиции биологически активной добавки, в состав которой входит один или несколько продуктов переработки Morinda citrifolia на протяжении заранее определенного, безопасного периода времени.

В одном из вариантов осуществления продукт переработки Morinda citrifolia получали в виде плодового сока, листьев, пюре-сока или сока-пюре, мякоти плода, масла семян и/или пищевых волокон, используя методику(и), описанную(ые) здесь. Затем количество любого продукта или комбинации продуктов включали вместе с другими ингредиентами в композицию биологически активной добавки, оказывающую благотворное воздействие на организм и способствующую лечению раковых заболеваний и обеспечивающую профилактические эффекты путем ингибирования ароматазных ферментов.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к композиции биологически активной добавки включающей по крайней мере один продукт переработки Morinda citrifolia, для ингибирования ароматазы или ароматазных ферментов в организме млекопитающих; и к способу ее введения.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения также относится к композиции биологически активной добавки, в состав которой входит по крайней мере один продукт, полученный из одной из нескольких форм Morinda citrifolia (предпочтительно плодового сока или порошка из листьев), вместе с другими ингредиентами, либо природными, либо синтетическими, если необходимо. Предпочтительной композицией биологически активной добавки является жидкая композиция, которая может вводиться перорально или с помощью внутривенной инъекции, где активные ингредиенты, а именно Morinda citrifolia, способны абсорбироваться в тканях и ингибировать ароматазу и снижать/регулировать продукцию эстрогена.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к способу ингибирования ароматазы и лечения, ингибирования, профилактики и обратимости роста раковых клеток, посредством профилактического применения композиции биологически активной добавки, в состав которой в качестве активного ингредиента входит по крайней мере один продукт переработки Morinda citrifolia.

Хотя способы и методики по настоящему изобретению были доказаны для конкретного применения в области селективного ингибирования продукции эстрогена и/или обеспечения эстрогенного действия в организме, специалисту в данной области будет понятно, что эти способы и методики могут иметь большое количество различных практических применений, и в большом количестве различных форм с получением композиции, в состав которой входит продукт переработки Morinda citrifolia для обеспечения селективного контроля уровня эстрогена путем ингибирования продукции эстрогена и/или обеспечения умеренных эстрогенных действий.

Эти и другие признаки и преимущества настоящего изобретения будут изложены или станут полностью очевидны из нижеследующего описания и прилагаемой формулы изобретения. Признаки и преимущества могут быть реализованы и получены с помощью инструментов и сочетаний, подробно перечисленных в прилагаемой формуле изобретения. Кроме того, признаки и преимущества настоящего изобретения могут быть изучены посредством практического применения изобретения или станут очевидными из описания, изложенного далее.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к эстрогенному действию в организме человека. Более конкретно, настоящее изобретение относится к применению биологически активной композиции или добавки для селективного ингибирования продукции эстрогена и обеспечения эстрогенного действия в организме человека, где в состав композиции входит один или несколько продуктов переработки растения Индийская шелковица, научное название которого Morinda citrifolia L.

Настоящее изобретение относится к способу и методике получения лекарственного средства для селективного ингибирования продукции эстрогена и обеспечения эстрогенного действия и для лечения и профилактики роста раковых клеток у млекопитающих, а также для снижения продукции эстрогена, способствующей росту эстроген-зависимых злокачественных опухолей, у млекопитающих, путем профилактического применения композиции биологически активной добавки, содержащей по крайней мере один продукт Morinda citrifolia в переработанном виде.

Представленные предпочтительные варианты осуществления изобретения будут более понятны, и его эффекты и преимущества более ясно указаны, путем разделения нижеследующего подробного описания на части. Первая часть относится к общему описанию растения Morinda citrifolia, в том числе к описанию его происхождения, методам переработки и оказания благотворительного воздействия на организм, а также способам, используемым для получения продуктов переработки Morinda citrifolia, используемых в качестве основных активных ингредиентов композиций биологически активных добавок, описанных здесь; во второй части более подробно и конкретно обсуждается состав и композиции, в состав которых входит продукт переработки Morinda citrifolia, используемые для обеспечения эстрогенного действия; и в третьей части более подробно и конкретно описаны композиции биологически активных добавок и композиции, в состав которых входит продукт переработки Morinda citrifolia, используемые для ингибирования ароматазы и снижения/регулирования продукции эстрогена в организме, а также к различным способам применения этих биологически активных добавок для ингибирования роста, пролиферации, метастазирования и жизнеспособности эстроген-зависимых раковых клеток. Также здесь представлены примеры экспериментальных исследований и полученные результаты.

Соответственно, следующее описание настоящего изобретения разделено на три подзаголовка: «Биологически активная добавка», «Обеспечение эстрогенного действия» и «Ингибирование продукции эстрогена». Подзаголовки использованы исключительно для удобства читателя и не должны рассматриваться как ограничения.

Биологически активная добавка

Варианты осуществления настоящего изобретения относятся к биологически активной добавке, которая получена из переработанного растения Индийская шелковица, научное название которого Morinda citrifolia L. ("Morinda citrifolia"), которое представляет собой кустарник или небольшое дерево высотой до 10 м. Листья овальной формы расположены на одинаковой высоте друг против друга. Маленькие белые цветы образуют мясистое, шаровидное, зонтикообразное соцветие. Плоды большие, мясистые и овальные. Зрелые плоды имеют сливочно-белый цвет и съедобны, но имеют неприятный вкус и запах. Это растение родом из Юго-Восточной Азии, но в давние времена оно распространилось на обширной площади от Индии до восточной Полинезии. Дикое растение растет беспорядочно, а культурное растет на плантациях и небольших частных участках. Цветы Morinda citrifolia маленькие, белые, трех-пятилепестковые, цилиндрические, ароматные, длиной около 1,25 см. Цветы развиваются в сложные плоды, состоящие из множества маленьких косточковых плодов, соединенных в яйцевидное, эллипсовидное или округлое, шероховатое тело, с восковой, белой или зеленовато-белой или желтоватой, полупрозрачной кожицей. На поверхности плода имеются «глазки», похожие на картофельные. Сочный, неприятный на вкус, тускло-желтый или желтовато-белый плод содержит многочисленные красно-коричневые, твердые, продолговато-треугольные, крылатые 2-ячеечные косточки, каждая из которых содержит четыре семечки.

Полностью зрелый плод имеет резко выраженный запах, подобный протухшему сыру. Хотя плоды использовались в качестве еды некоторыми национальностями, наиболее часто растения Morinda citrifolia использовали в качестве источника красной и желтой краски. Недавно к растению Morinda citrifolia был проявлен интерес с точки зрения питательного и оздоровительного действия на организм, обсуждаемые ниже.

Поскольку при всех практических применениях плод Morinda citrifolia является несъедобным, плод необходимо обработать таким образом, чтобы сделать его аппетитным для человека, и включить его в биологически активную добавку, используемую для обеспечения эстрогенного действия, ингибирования ароматазы и воздействия на различные злокачественные клетки. Переработанный плодовый сок Morinda citrifolia может быть получен путем отделения семян и кожицы от сока и мякоти созревшего плода Morinda citrifolia; отделения сока от мякоти, путем фильтрования; и упаковывания сока. Альтернативно, вместо упаковывания сока, сок может быть сразу же включен в качестве ингредиента в другой пищевой продукт, заморожен или пастеризован. В некоторых вариантах осуществления сок и мякоть могут быть переработаны в гомогенную смесь для смешивания с другими ингредиентами. Другая методика включает в себя сушку замораживанием плода и сока. Плод и сок могут быть восстановлены при получении окончательного продукта-сока. Другие методики включают в себя воздушную сушку плода и соков перед перетиранием.

Варианты осуществления настоящего изобретения предусматривают экстракцию продукта Morinda citrifolia из листьев Morinda citrifolia и использование этого продукта в композиции капсул или таблеток для ингибирования продукции эстрогена и обеспечения эстрогенного действия в организме.

Варианты осуществления настоящего изобретения также предусматривают использование плодового сока и/или плодового пюре, полученных из растения Morinda Citrifolia. В этом предпочтительном способе получения плодового сока Morinda citrifolia, плоды собирают вручную или с помощью механического оборудования. Плоды могут быть собраны, когда их размер достигает по крайней мере от 1 дюйма (2-3 см) до 12 дюймов (24-36 см) в диаметре. Предпочтительно, цвет плода может быть темно-зеленым, желто-зеленым, белым и их промежуточных оттенков. После сбора плод тщательно моют перед любой дальнейшей обработкой.

Плод оставляют дозревать или выдерживают от 0 до 14 дней, чаще всего 2-3 дня. Плод дозревает или его выдерживают в приспособлении таким образом, чтобы он не контактировал с землей. Плод в период дозревания предпочтительно оборачивают тканью или сетчатым материалом, но плод может дозревать и без этого. Плод готов к дальнейшей обработке, если его цвет становится светлым, светло-зеленым, светло-желтым, белым или полупрозрачным. Плод внимательно осматривают на наличие порчи или чрезмерно зеленого цвета и твердостей. Испорченный или твердый зеленый плод отделяют от подходящих плодов.

Предпочтительно, созревшие плоды и плоды, которые выдерживают для дальнейшей обработки и транспортировки, помещают в герметичные пластиковые контейнеры. Контейнеры с созревшими плодами могут храниться от 0 до 30 дней. Чаще всего перед обработкой контейнеры с плодами хранятся 7-14 дней. При желании перед дальнейшей обработкой контейнеры могут храниться в холодных условиях. После извлечения из контейнеров плоды подвергают ручной или механической сортировке. Семена и кожуру отделяют от сока и мякоти.

Сок и мякоть могут быть упакованы в контейнеры для хранения и транспортировки. Альтернативно, сок и мякоть могут быть сразу же переработаны в конечный продукт-сок. Контейнеры могут храниться в холодных условиях, быть заморожены или находиться при комнатной температуре.

Сок и мякоть Morinda citrifolia предпочтительно смешивают до гомогенной смеси, которая затем может быть смешана с другими ингредиентами, например ароматизаторами, подсластителями, питательными компонентами, растительными компонентами и красителями. Конечный продукт-сок предпочтительно нагревают и пастеризуют при минимальной температуре 181°F (83°C) или при максимальной температуре 212°F (100°C).

Другим продуктом, получаемым из Morinda citrifolia является пюре и сок-пюре, либо в виде концентрата, либо в разбавленном виде. По существу, пюре представляет собой мякоть плода, отделенную от семян, и отличается от плодового сока другого продукта, описанного здесь.

Каждый продукт помещают и герметично упаковывают в окончательный контейнер из пластика, стекла или другого подходящего материала, который может выдержать температуру переработки. Контейнеры оставляют при температуре, при которой происходило наполнение, или их можно быстро охладить и поместить в транспортировочный контейнер. Предпочтительно, транспортировочные контейнеры обернуты в материал для того, чтобы поддерживать или контролировать температуру продукта в окончательных контейнерах.

Сок и мякоть могут быть затем разделены через фильтровальную установку. Предпочтительно, фильтровальная установка состоит из, но этим не ограничивается, центрифужного стакана, сетчатого фильтра размером от 1 микрона до 2000 микрон, более предпочтительно, менее 500 микрон, из фильтр-пресса, установки обратного осмоса и любых других стандартных коммерческих устройств фильтрации. Предпочтительно, рабочее давление фильтрации находится в пределах от 0,1 фунтов на кв.дюйм примерно до 1000 фунтов на кв.дюйм. Предпочтительная скорость потока составляет от 0,1 г/мин до 1000 г/мин и, более предпочтительно, между 5 и 50 г/мин. Сочную, свежую мякоть промывают и фильтруют по крайней мере один раз и до 10 раз для того, чтобы удалить весь сок из мякоти. Свежая мякоть обычно содержит 10-40% по массе клетчатки. Предпочтительно, свежую мякоть пастеризуют при минимальной температуре 181°F (83°C), a затем упаковывают в цилиндрическую коробку для дальнейшей обработки или приготовления продукта, богатого клетчаткой.

Продуктом переработки Morinda citrifolia также могут быть пищевые волокна. Кроме того, продукт переработки Morinda citrifolia может находиться в виде экстракта (например, порошкообразного экстракта), извлеченного из листьев Morinda citrifolia. Также продукт переработки Morinda citrifolia может быть в виде масла. Масло Morinda citrifolia обычно содержит смесь нескольких различных жирных кислот, например триглицеридов, таких как пальмитиновая, стеариновая, олеиновая и линоленовая жирная кислота, и других жирных кислот, которые присутствуют в меньших количествах. Кроме того, масло предпочтительно содержит антиоксидант, ингибирующий деградацию масла. Предпочтительно, используют обычные пищевые антиоксиданты.

Morinda citrifolia богата натуральными компонентами. Например, натуральные компоненты включают в себя: (в листьях) аланин, антрахиноны, аргинин, аскорбиновую кислоту, аспарагиновую кислоту, кальций, бета-каротин, цистеин, цистин, глицин, глутаминовую кислоту, гликозиды, гистидин, железо, лейцин, изолейцин, метионин, никотиновую кислоту, фенилаланин, фосфор, пролин, смолы, рибофлавин, серин, бета-ситостерин, тиамин, треонин, триптофан, тирозин, урсоловую кислоту и валин; (в цветах): акацетин-7-о-бета-d(+)-глюкопиранозид, 5,7-диметил-апигенин-4'-о-бета-d(+)-галактопиранозид, и 6,8-диметокси-3-метилантрахинон-1-о-бета рамнозил-глюкопиранозид; (в плодах) уксусную кислоту, асперулозид, масляную кислоту, бензойную кислоту, бензиловый спирт, 1-бутанол, каприловую кислоту, декановую кислоту, (Е)-6-додецено-гамма-лактон, (Z,Z,Z)-8,11,14-эйкозатриеноевую кислоту, элаидиновую кислоту, этиловый деканоат, этиловый гексаноат, этиловый октаноат, этиловый пальмитат, (Z)-6-(этилтиометил) бензол, эвгенол, глюкозу, гептановую кислоту, 2-гептанон, гексаналь, гексанамид, гександиоловую кислоту, капроновую кислоту (гексановую кислоту), 1-гексанол, 3-гидрокси-2-бутанон, лауриновую кислоту, лимонен, линолевую кислоту, 2-метилбутановую кислоту, 3-метил-2-бутен-1-ол, 3-метил-3-бутен-1-ол, метил деканоат, метил элаидат, метилгексаноат, метил 3-метилтио-пропаноат, метилоктаноат, метилолеат, метилпальмитат, 2-метилпропановая кислота, 3-мелтиопропановая кислота, миристиновую кислоту, нонановая кислота, октановая кислота (каприловая кислота), масляная кислота, пальмитиновая кислота, калий, скополетин, ундекановая кислота, (Z,Z)-2,5-ундекадиен-1-ол и вомифол; (в корнях) антрахиноны, асперулозид (рубихлорная кислота), дамнакантал, гликозиды, мориндадиол, мориндин, мориндон, слизистое вещество, нордамнакантал, рубиадин, монометиловый эфир рубиадина, смолы, соранжидиол, стеролы, и тригидроксиметил антрахинон-монометиловый эфир; (коре корней) ализарин, хлорорубин, гликозиды (пентоза, гексоза), мориндадиол, моринданигрин, мориндин, мориндон, смолистое вещество, монометиловый эфир рубидия, и соранжидиол; (из древесины) антрагаллол-2,3-диметилэфир; (из тканевой культуры) дамнакантал, люцидин, люцидин-3-примеверозид, и мориндон-6-бета-примеверозид; и (из растения) ализарин, ализарин-альфа-метиловый эфир, антрахиноны, асперулозид, капроновую кислоту, мориндадиол, мориндон, мориндогенин, октановую кислоту, и урсоловую кислоту.

Как указано, совсем недавно было обнаружено, что использование продуктов, содержащих Morinda citrifolia, полезно для здоровья. Было обнаружено, что Morinda citrifolia способна выделять и продуцировать ксеронин, который является относительно небольшим алкалоидом, физиологически активным в организме. Ксеронин встречается практически во всех здоровых клетках растений, животных и микроорганизмов. Несмотря на то, что растение Morinda citrifolia имеет ничтожно малое количество свободного ксеронина, оно содержит значительное количество предшественника ксеронина, называемого проксеронин. Более того, Morinda citrifolia содержит неактивную форму фермента проксероназы, который преобразует проксеронин в ксеронин. В публикации R.M.Heinicke Гавайского Университета "The Pharmacologically Active Ingredient of Noni" указано, что Morinda citrifolia является «лучшим исходным веществом для выделения ксеронина», благодаря наличию строительных блоков проксеронина и проксероназы. Эти строительные блоки способствуют выделению и продукции ксеронина в организме. Незаменимый питательный элемент ксеронин имеет четыре функции.

Во-первых, ксеронин служит активатором ферментов тонкого кишечника. Эти ферменты крайне необходимы для эффективного пищеварения, оказывают успокоительное действие на нервы и необходимы для общего физического и эмоционального состояния. Во-вторых, ксеронин защищает и поддерживает форму и гибкость белковых молекул для того, чтобы они могли проходить через клеточные стенки и использоваться для формирования здоровой ткани. Без этих пищевых веществ, поступающих в клетку, клетка не может эффективно выполнять свою работу. Без проксеронина, производящего ксеронин, страдают клетки, а впоследствии и организм. В-третьих, ксеронин способствует увеличению пор клеточных мембран. Это увеличение позволяет поступать в клетку более крупным полипептидным цепям (аминокислотам или белкам). Если эти цепи не используются, они утилизируются. В-четвертых, ксеронин, получаемый из проксеронина, способствует увеличению пор, тем самым способствуя лучшему всасыванию питательных веществ.

В каждой ткани есть клетки, которые содержат белки, имеющие рецепторные участки для абсорбции ксеронина. Некоторые из этих белков являются инертными формами ферментов, для активации которых необходимо поглощение ксеронина. Таким образом, ксеронин быстро и безопасно удаляет мертвые ткани с кожи путем преобразования системы проколлагеназ организма в специфические протеазы. Другие белки, после взаимодействия с ксеронином, приобретают потенциальные рецепторные участки для гормонов. Таким образом, свойство Morinda citrifolia улучшать состояние человека, возможно, связано со способностью ксеронина преобразовывать некоторые рецепторные белки головного мозга в активные участки для абсорбции эндорфина, гормонов хорошего самочувствия. Другие белки образуют поры мембран кишечника, кровеносных сосудов и других органов. Абсорбция ксеронина этими белками изменяет форму пор и, таким образом, влияет на прохождение молекул через мембраны.

Известно, что в результате своего благоприятного воздействия Morinda citrifolia обеспечивает множество невероятных эффектов у больных раком, страдающих артритом, головными болями, нарушением пищеварения, имеющим злокачественные новообразования, переломы костей, высокое кровяное давление, диабет, боль, инфекцию, астму, зубную боль, пятна на коже, иммунодефицит и тому подобное.

Композиции, содержащие Morinda citrifolia, могут быть. в форме, подходящей для перорального применения, системного введения, инъекций и тому подобное. Что касается пероральной композиции, то такая композиция может существовать, например, в виде таблеток, или пастилок, водных или масляных суспензий, дисперсных порошков или гранул, эмульсий, сиропов или эликсиров. Композиции, предназначенные для перорального приема, могут быть получены любым способом, известным в данной области для получения композиций Morinda citrifolia, и такие композиции могут содержать один или несколько агентов, выбранных из группы, включающей подслащивающие вещества, ароматизирующие вещества, красители и консерванты. Таблетки содержат Morinda citrifolia в смеси с нетоксичными фармацевтически приемлемыми инертными наполнителями, которые могут использоваться для получения таблеток. Эти инертные наполнители могут быть, например, инертными разбавителями, гранулирующими и дезинтегрирующими веществами, связывающими агентами и любрикантами. Таблетки могут быть без покрытия, или могут быть покрыты оболочкой с использованием известных технологий, во избежание разрушения и всасывания в желудочно-кишечном тракте, что обеспечивает отсроченное действие в течение продолжительного времени. Например, можно использовать материалы, обеспечивающие отсроченное действие, такие как глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат.

Водные суспензии содержат Morinda citrifolia в смеси с инертными наполнителями, которые можно использовать для получения водных суспензий. Такими инертными наполнителями являются суспендирующие вещества, например натрийкарбоксиметилцеллюлоза, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, натрийальгинат, поливинилпирролидон, трагакантовая камедь и аравийская камедь; диспергирующими или увлажняющими веществами могут быть природные фосфатиды, например лецитин, или продукты конденсации оксида алкилена с жирными кислотами, например полиоксиэтиленстеарат, продукты конденсации этиленоксида с длинноцепочечными алифатическими спиртами, например гептадекаэтилен-оксицетанол, или продукты конденсации этиленоксида с неполными эфирами, полученными из жирных кислот и гексита, как, например, полиоксиэтилен сорбит моноолеат, или продукты конденсации этиленоксида с неполными эфирами, происходящими из жирных кислот и ангидридов гексита, например полиэтилен сорбитан моноолеат.

Таким образом, варианты осуществления изобретения селективно ингибируют продукцию эстрогена и обеспечивают эстрогенное действие. В некоторых вариантах осуществления жидкий или сухой экстракт включает в себя продукт переработки Morinda citrifolia. Еще в других вариантах осуществления, для облегчения приема продукт предоставлен в виде капсул. В некоторых вариантах осуществления, по крайней мере, один грамм применяется ежедневно до исчезновения симптомов.

Обеспечение эстрогенного действия

Как описано выше, настоящее изобретение относится к контролю эстрогенного действия в организме человека. Более конкретно, настоящее изобретение относится к применению биологически активной композиции или добавки для селективного ингибирования продукции эстрогена и обеспечения эстрогенного действия в организме человека, где в состав композиции входит один или несколько продуктов, полученных из растения Индийская шелковица, научное название которого Morinda citrifolia L.

Фитоэстрогенами являются определенные соединения, встречающиеся в растениях, которые имеют схожее действие с естественными эстрогенами. Растениями, богатыми фитоэстрогенами являются: клопогон кистевидный (Cimicifuga racemosa), соя (Glycine max.), красный клевер (Trifolium pratense) и хмель (humulus lupulus). Данные исследований, проведенных авторами изобретения, показывают, что Morinda citrifolia (плоды и листья) также проявляет эстрогенную активность. Это подтверждается тем фактом, что у женщин, употребляющих пищу, богатую фитоэстрогенами, меньше проблем со здоровьем во время менопаузы.

Эстрогенная активность спиртового экстракта листьев Morinda citrifolia была исследована двумя In vitro методами. (1.) Замена эстрогена на выделенном рецепторе альфа и бета (ER-альфа, ER-бета); и (2.) Введение щелочной фосфатазы в клетки Ишикавы (карцинома эндометрия человека). Использовали спиртовой экстракт размельченных сухих листьев Morinda citrifolia (выращенную на Таити). Один миллилитр экстракта содержит 100 мкл листьев.

В случае замещения эстрогена были использованы рекомбинантные ER-альфа и ER-бета. Рецепторы насыщали эстрадиолом, меченым тритием. После добавления тестируемого вещества измеряли свободную несвязанную радиоактивность. Использованный метод основывался на публикации Kuiper et al., 1998. Kuiper GG, Lemmen J G, Carlsson B, Corton J C, Safe S H, van der Saag P T, van der В В and Gustafsson J A (1998) Interaction of Estrogenic Chemicals and Phytoestrogens with Estrogen Receptor Beta. Endocrinology 139: pp 4252-4263.

Результаты показали, что в обоих рецепторах происходила устойчивая замена эстрадиола. Замещение эстрогена достигало 100% уровня, что характерно для фитоэстрогенов. Аффинность экстракта листьев к ER-альфа была почти в 5 раз больше, чем к ER-бета (см. фиг.1).

Индукция фермента щелочная фосфатаза находится под контролем эстрогенных рецепторов. Известно, что эстрадиол имеет регулирующую функцию при костной перестройке. Щелочная фосфатаза является ключевым ферментом в этом процессе. Клетки Ишикавы использовали в качестве модели для исследования агонистического действия соединений с эстрогенной активностью (Wober J, Weisswange I and Vollmer G (2002) Stimulation of Alkaline Phosphatase Activity in Ishikawa Cells Induced by Various Phytoestrogens and Synthetic Estrogens. J Steroid Biochem Mol Biol 83: pp 227-233).

Экстракт листьев Morinda citrifolia оказывает среднюю, но значимую индукцию щелочной фосфатазы в клетки Ишикавы. Максимальный эффект был получен при концентрации 0,3 мл/мл (соответствует 30 мг сухих листьев/мл). Более высокие концентрации ингибировали индукцию фермента (см. фиг.2).

Соответственно, эстрогенная активность спиртового экстракта листьев Morinda citrifolia, была показана в двух in vitro анализах, обычно используемых для изучения эстрогенной активности. Оба анализа показали положительные эффекты. Результаты предполагают возможное использование листьев Нони для лечения симптомов, обусловленных недостатком эстрогена (например, при менопаузе и овариэктомии).

Фитоэстрогены и эстроген-подобные молекулы способны связывать эстрогенные рецепторы, которые в свою очередь способны вызывать действие, подобное действию эстрогена в клетках и тканях. Недавно для изофлавонов сои была продемонстрирована селективность в отношении селективных модуляторов эстрогенных рецепторов (SERM), которое оказывает благотворное влияние на организм, не вызывая нежелательных действий. Благоприятные эффекты могут включать в себя профилактику рака груди и могут быть причиной задержки роста и, в некоторых случаях, причиной апоптоза клеток рака простаты in vitro и in vivo, а также могут предотвращать остеопороз.

Как сообщалось, некоторые фитоэстрогены обладают анти-андрогенными эффектами и антиоксидантными свойствами. Механизмы включают ингибирование 5 -редуктазы, 17 -гидроксистероид-дегидрогеназы, ароматазы, тирозин специфичной протеинкиназы, и ДНК-топоизомеразы II. Одно из лучших объяснений биологической активности эстроген-подобных молекул заключается в том, что фитоэстрогены имеют слабые эстрогенные действия, но стимулируют определенную активность агонистов ER и антагонистов ER, которые зависят от клеточного окружения и промотора, и предполагают, что такие соединения со слабой эстрогенной активностью будут стимулировать тканеспецифичную активность агонистов или антагонистов ER.

Некоторые исследования доказали, что некоторые фитоэстрогены могут ингибировать ферменты, которые преобразуют андрогены в эстрогены, а именно ароматазу и 17 -гидроксистероид дегидрогеназу типа 1&5, а не другие. Как представлено ниже, биологически активная добавка, содержащая продукт переработки Morinda citrifolia, ингибирует фермент ароматазу. Такая биологически активная добавка также обеспечивает эстрогенные действия.

Сок Tahitian Noni® обладает высокими антиоксидантными свойствами, по сравнению с пикногенолом. Было обнаружено, что соединения с эффектом эстрогена предотвращают болезнь ломких костей у мышей, но при этом не вызывают побочных эффектов. Это обнаружение можно использовать для оказания помощи и облегчения, которые так необходимы пожилым женщинам, прекратившим использовать гормонозаместительную терапию (ГЗТ) из-за риска развития рака и сердечных заболеваний, которые связаны с ГЗТ.

Раньше гормонозаместительную терапию (ГЗТ) эстрогеном и производными эстрогена использовали для профилактики остеопороза, но в настоящее время она больше не используется в некоторых странах из-за побочных эффектов. Таким образом, использование гормонозаместительной терапии ограничено при тяжелых симптомах, но женщинам желательно проводить лечение при симптомах средней тяжести, потому что они причиняют неудобства.

Оценивали возможное эстроген-агонистическое действие сухой формы концентрата сока-пюре Tahitian Noni® (TNPJC) неполовозрелых самок мышей из ICR в максимально переносимой дозе 4000 мг/кг, вводимой перорально один раз в день в течение трех последующих дней. Сухую форму TNPJC получали используя Rotor Vap под давлением и при низкой температуре.

Обнаружено, что введенная доза 4000 мг/кг является причиной повышения полной массы матки (не массы сухого вещества) приблизительно на 50% относительно группы сравнения (0,03 мг/кг -эстрадиол 3-бензоат повышает полную массу матки на 83%), что показывает возможную эстроген-агонистическую активность. Это также может предположить зависимость от дозы.

Огромная доза сухой формы TNPJC вызывает 50% повышение, в то время как ничтожная доза (0,03 мг/кг) эстрадиола-3-бензоата является причиной значительного увеличения веса, наблюдаемой выше.

Кратко, концентрат сока-пюре Tahitian Noni имеет противоароматазные эффекты, противораковый, антиоксидантный и другие полезные эффекты, Tahitian Noni, предотвращает побочные действия эстроген-подобных соединений, а также в подобранной дозе имеет эстроген-подобные эффекты, которые могут объяснить преимущества для женщин в предклимактерическом и постклимактерическом периоде, такие как профилактика остеоартрита, остеопороза и другие полезные эффекты, уже указывалось выше.

В соответствии с вариантами осуществления настоящего изобретения, биологически активная добавка, содержащая продукт переработки Morinda citrifolia, обеспечивает мягкое эстрогенное действие. Природные гормоны имеют очень быстрый цикл, так как секретируются под действием несоматических процессов и, следовательно, для того, чтобы гарантировать быструю систему контроля, необходимо получить контроль над регулятором, каковым является гормон, и единственным способом такого контроля является удаление его для возможности высвобождения нового гормона системой. Таким образом, если рассматривать природный эстроген, время полужизни этого компонента очень короткое. Таким образом, для обеспечения постоянного уровня гормона необходимо использовать соединение, которое обладает действием, подобным природному гормону, но не удаляется из системы так быстро вследствие некоторых химических изменений молекулы.

Например, стероидное соединение содержит 1 эстрогенную группу в этой системе, и природные ферменты, которые выводят эстроген из кровотока, не могут преобразовывать производное, таким образом оно остается активным в течение длительного времени в организме. Для постоянного лечения в течение нескольких дней или недель нельзя использовать природный гормон, необходимо использовать производные, которые более медленно выводятся из организма. Соответственно, может быть использована биологически активная добавка с продуктом переработки Morinda citrifolia. Эта биологически активная добавка действует схожим образом с природным гормоном и обладает сильным действием. Действие очень сильное и иногда более сильное, чем у природного гормона, поэтому побочные действия гормона усугубляются под действием этих соединений. Фитоэстрогены не являются эстрогенами с химической точки зрения, но с биологической точки зрения, они являются эстрогенами. Так как они обладают эстрогенным действием, то они взаимодействуют с системой и имеют сходную, но не одинаковую, реакцию или последствия с эстрогеном. Их действие слабее и не имеет пиков.

В присутствии эстрогена их действие может быть антагонистичным действию эстрогена. Таким образом, существует много мнений о целесообразности применения природных эстрогенов. Женщины, принимающие пищу, богатую фитоэстрогенами, реже заболевают раком груди и у них меньше проблем в период менопаузы. Фитоэстрогены находятся в различных натуральных пищевых продуктах, особенно в сое и других растениях. Соя богата фитоэстрогенами и женщины в Японии и Китае потребляют множество соевых продуктов.

Согласно, по крайней мере, некоторым вариантам осуществления настоящего изобретения, биологически активная добавка, содержащая продукт переработки Morinda citrifolia, может быть представлена в виде капсул или крема, например крема, проникающего через кожу или через слизистые оболочки.

Скорость всасывания переработанных листьев Morinda citrifolia при приеме внутрь высокая. Для того чтобы обнаружить соединение с эстрогенным действием, необходимо некое предельное значение. Функцией эстрогена в организме или клетках является обнаружение в клетке рецептора, и затем связывание с этим рецептором, затем этот комплекс эстроген-рецептор присоединяется к ДНК и стимулирует индукцию определенных белков, которые затем продуцируются клетками и, таким образом, это является механизмом их действия. Таким образом, с целью обнаружения эстрогенного действия, можно следовать этому механизму действия.

Сначала было показано, что соединение связывается с рецептором для насыщения рецептора природным эстрогеном в радиоактивной форме, после добавления другого соединения к рецептору, это соединение будет вытеснять эстроген из рецептора, вследствие конкуренции за сайт рецептора между природным эстрогеном и другим эстрогеном. Если соединение связывается, то эстроген высвобождается. Можно сказать, связывание - это первая стадия, а вторая стадия - соединение комплекса эстроген - рецептор с ДНК и стимуляцию индукции некоторых белков.

Соединение может связывать рецептор эстрогена, но не проявлять эстрогенного действия, если же оно проявляет это действие, то действует как антагонист. После этого происходит ингибирование действия эстрогена, так как рецептор оказывается занятым, эстроген не может найти свободный рецептор и, как следствие, не может действовать. Таким образом, авторы проводили поиск соединений, которые связывают рецептор и затем действуют как эстроген. Это приводит к функционированию некоторых белков. Поэтому проводили оба исследования. Во-первых, исследовали связывание с рецептором и, во-вторых, определяли конечную точку.

Экстракт листьев Morinda citrifolia действует подобно эстрогену и обеспечивает эстрогенные действия. Однако действие экстракта слабее, чем действие природного эстрогена, поэтому он не вызывает побочных эффектов.

Неблагоприятным действием гормонозаместительной терапии является то, что она может спровоцировать рак эстроген-зависимых клеток, как, например, рак груди, матки, яичников, при проведении лечения высокими дозами эстрогена или синтетическими эстрогенами, полученными из природного эстрогена, но имеющими более длительное действие из-за более низкой экскреции. Если проводить лечение женщин высокими дозами эстрогена в определенный период времени, может быть, годы, это может вызвать рак груди, или рак матки, или рак яичников, особенно рак груди и рак эндометрия.

Поэтому зачастую женщины отказываются от гормонозаместительной терапии, но нуждаются в другом более слабом заменителе гормонозаместительной терапии. Для этих соединений интересно то, что при высоких концентрациях природного эстрогена они действуют как антагонисты, что означает, что они ослабляют действие природного эстрогена, а при очень низких концентрациях природного эстрогена они действуют как эстроген, тем самым поддерживая эстрогенное действие или имеют эстрогенные действия. Это означает, что эти соединения будут способствовать выравниванию концентраций эстрогена, тем самым помогая женщинам избежать чрезвычайных ситуаций.

Симптомы, которые обычно возникают у женщин во время начала менопаузы и иногда до прекращения менструации навсегда, включают приливы, ночную потливость и/или депрессию. Кровотечение и депрессия могут быть очень сильными. Другим эффектом длительного приема является остеопороз, в результате которого происходит постоянное изменение костного матрикса. Костный матрикс деградирует и снова реконструируется. Существуют два типа клеток, ответственных за этот процесс, называемые остеобласты и остеокласты. Клетки-остеобласты необходимы для перестройки кости, а клетки-остеокласты ответственны за деградацию кости, что очень важно, так как уровень кальция в бластах должен быть постоянным и кость является буфером уровня кальция. При снижении уровня кальция в крови происходит деградация костного вещества и повышение уровня кальция. Во время беременности, кальций из крови матери активно усваивается эмбрионом для построения скелета. Таким образом, расход костного матрикса скелета матери во время беременности должен увеличиться. При этом увеличивается и уровень эстрогена во время беременности, так как эстроген является важным для осуществления процесса, происходящего в клетках-остеобластах, которые перестраивают кости, а во время менопаузы уровень эстрогена снижается, и процесс перестройки становится слабее, костный матрикс постепенно разрушается и возникает остеопороз.

Для определения активности соединения MDA-6 (РТ # 1026431) проводили ферментативный анализ и анализ радиолигандного связывания. Способы, использованные в этом исследовании, для достижения максимальной достоверности и воспроизводимости были адаптированы, основываясь на научной литературе. В каждом исследовании для обеспечения надежности полученных результатов использовали ссылочные стандарты. Исследования проводили в условиях, описанных в сопутствующем разделе «Способы» данного описания. Литературная ссылка(ки) для каждого исследования приведены в разделе «Литературные ссылки».

Представлено значение, определявшееся IC₅₀ нелинейным методом регрессии наименьших квадратов с использованием Data Analysis Toolbox (MDL Information Systems, Сан Леонардо, Калифорния, США), где K_i представляет собой константу ингибирования, и значение K_i было рассчитано с использованием уравнения Ченга и Прусоффа (Cheng, Y., Prusoff, W.H., Biochem. Pharmacol. 22: 3099-3108, 1973), используя экспериментальное значение IC₅₀ тестируемого соединения, концентрацию радиолиганда, используемого в исследовании, и первоначальное значение K_d лиганда (полученное экспериментальным путем в MDS Pharma Services). Представленный коэффициент Хилла, определяющий наклон кривой конкурентного связывания, был рассчитан, используя Data Analysis Toolbox . Коэффициенты Хилла, значительно отличающиеся от 1,0, предполагают, что смещение связывания не следует законам действующих масс с единственным сайтом связывания. Где данные IC ₅₀, K_i, и/или n_H представлены без стандартной средней ошибки (SEM), данные недостаточные, чтобы быть количественными, и представленные значения (IC ₅₀, K_i, n_H) должны быть интерпретированы с осторожностью.

Обобщение результатов приведено в следующей таблице в порядке ранжирования эффективности вычисленных значений IC₅₀ и/или K_i. Результаты биохимического исследования представлены как процент ингибирования специфического связывания или активности. Все другие результаты выражены в терминах количественного определения, соответственно, исследования показаны в таблице. Для первичных исследований только низкие концентрации со значимым ответом удовлетворяли критериям исследования. Также показаны либо результаты повторного испытания, когда низкая доза/концентрация, удовлетворяют критерию значимости, либо в случае инактивации, когда высшая доза/концентрация не удовлетворяют критерию достоверности, если такие испытания проводились. Если проведения таких испытаний не требовалось, то показаны первичные скрининги с повтором с количественными показателями (например, IC₅₀ ±SEM, K_i±SEM и n _H). При скрининге показаны первичный скрининг с повтором с полуколичественными данными (например, вычисленными значениями IC₅₀, K_i и n _H), где возможно (диапазон концентрации 4 логарифмических единицы); вторичные функциональные анализы, если таковые проводились, выполняли при 30 мкм, и МЕС или MIC определяли только когда активность в первичных тестах>50% при концентрации на 1 логарифмическую единицу ниже первоначального теста. Значимые ответы ( 50% ингибирования или стимулирования для биохимических исследований), отмеченные в первичных исследованиях, перечисленны ниже.

136010 Липогеназа 5-LO

Источник: клетки PBMN человека

Субстрат: эндогенная арахидоновая кислота из PBMNC

Разбавитель: 100% Н₂0

Время преинкубации/температура: 15 минут/37°С

Время инкубации/температура: 15 минут/37°С

Инкубационный буфер: HBSS (сбалансированный солевой раствор Хенкса)

Метод количественного определения: EIA определение количества LTB ₄

Критерий достоверности: 50% максимальной стимуляции или ингибирования

226010 Эстроген ER

Источник: рекомбинантные клетки Sf9 человека и насекомого

Лиганд: 0,5 нМ ³H эстрадиол

Разбавитель: 100% Н₂О

Время инкубации/температура: 2 часа/25°С

Инкубационный буфер: 10 мМ трис-HCl, рН 7,5, 10% глицерин, 1 мМ DTT, 1 мг/мл BSA

Неспецифический лиганд: 1 мкМ диэтилстильбэстрол

K_d : 0,2 нМ*

B_max: 1400 пмоль/мг белок*

Специфическое связывание: 85% *

Метод количественного определения: радиолигандное связывание

Критерий достоверности: 50% максимальной стимуляции или ингибирования

250600 Лейкотриен D 4

Источник: легкое морской свинки Hartley

Лиганд: 0,2 нМ ³H лейкотриен D ₄ (LTD₄)

Разбавитель: 100% Н₂O

Время инкубации/температура: 60 минут/25°С

Инкубационный буфер: 50 мМ трис-HCl, 0,01% BSA, 5 мМ CaCl₂, 5 мМ MgCl ₂, бацитрацин 100 мкг/мл, 1 мМ фенилметилсульфонил фторид.

Неспецифический лиганд: 0,1 мкМ лейкотриен D ₄ (LTD₄)

K_d : 0,2 нМ*

B_max: 0,24 пмоль/мг белок*

Специфическое связывание: 85%*

Метод количественного определения: радиолигандное связывание

Критерий достоверности: 50% максимальной стимуляции или ингибирования

226050 Эстроген ER

Источник: рекомбинантные клетки Sf9 человека и насекомого

Лиганд: 0,5 нМ ³H эстрадиол

Разбавитель: 100% H₂O

Время инкубации/температура: 2 часа/25°С

Инкубационный буфер: 10 мМ трис-HCl, рН 7,5, 10% глицерин, 1 мМ DTT, 1 мг/мл BSA

Неспецифический лиганд: 1 мкМ диэтилстильбэстрол

K_d : 0,13 нМ*

B_max: 3000 пмоль/мг белок*

Специфическое связывание: 90% *

Метод количественного определения: радиолигандное связывание

Критерий достоверности: 50% максимальной стимуляции или ингибирования

271200 Серотонин 5-HT_1B

Источник: кора головного мозга крысы Wistar

Лиганд: 10 пМ ^l25 I CYP

Разбавитель: 100% Н₂O

Время инкубации/температура: 90 минут/37°С

Инкубационный буфер: 50 мМ трис-HCl, 154 мМ NaCl, 10 мкМ паргилин, 30 мкМ изопреналин, рН 7, 7

Неспецифический лиганд: 10 мкМ серотонин (5-НТ)

K_d: 0,19 нМ*

B _max: 0,14 2 пмоль/мг белок*

Специфическое связывание: 70% *

Метод количественного определения: радиолигандное связывание

Критерий достоверности: 50% максимальной стимуляции или ингибирования

Соответственно было показано, что рецепторы эстрогена обладают более высокой способностью к связыванию NSAID лигандов с более высокой аффинностью. Большинство из этих лигандов, смесь агонистов и антагонистов, были разработаны и использованы при лечении женщин в период постменопаузы. Более того, стероидные эстрогены играют не только важную роль в развитии организма, но и в дифференцировке определенных клеток, функционировании мужской и женской репродуктивной системы оказывают положительное влияние на остеобласты и их функции, сердечно-сосудистую и центральную нервную системы.

Эффекты, описанные выше, опосредованы двумя внутриядерными белками, такими как ER и ER . Связывание эстрогенов или эстроген-подобных молекул с этими внутриядерными белками ведет к структурно-конформационным изменениям, что, в свою очередь, димеризует лиганд-рецепторный комплекс и ведет к активации генов, находящихся под контролем ДНК.

Документально было подтверждено, что ксеноэстрогены, фитоэстрогены и синтетические эстрогены способны связываться с теми рецепторами эстрогена, которые в свою очередь имитируют действия эстрогена человека в конкретной клетке и тканях специфическим образом, как, например, те, которые хорошо известны в репродуктивных системах. Однако эстроген и эстроген-подобные молекулы и его рецепторы могут действовать в различных областях по всему организму и, в частности, в головном мозге. Эстроген и эстроген-подобные молекулы действуют как сильный нейропротекторный антиоксидант, который может активировать транскрипцию генов для обеспечения прямого или опосредованного нейропротективного действия.

Любые соединения, которые посредством этих рецепторов ядерных белков, могут оказывать либо стимулирующее воздействие (агонист) на определенные ткани (например, на костную ткань и как антагонист на другие ткани) и блокирующее действие (антагонист) в других тканях (например, рак груди и рак матки). Некоторые недавние научные исследования дают основание предположить, что в регуляции сердечного ритма и частоты сердечных сокращений ER форма является более значимой, чем ERR. Таким образом, было сделано несколько предположений в отношении селективного антагониста ER для эффективного контроля сердечной деятельности.

Для оценки активности концентрата сока-пюре Tahitian Noni® было проведено экспериментальное исследование радиолигандного связывания для установления эффектов концентрата сока-пюре Tahitian Noni® Puree и сока Tahitian Noni® на рецепторы эстрогена ER и ER , и были получены следующие результаты:

1% концентрат сока-пюре Tahitian Noni = 99% ингибирование ER с IC₅₀ 0,31%

1% концентрат сока-пюре Tahitian Noni = 99% ингибирование ER с IC₅₀ 0,28%

2% сок Tahitian Noni® = 20% ингибирование ER

2% сок Tahitian Noni® = 40% ингибирование ER

На основании этих результатов можно предположить, что существует дозозависимый эффект сока Tahitian Noni® на ингибирование рецепторов эстрогена ER и Er , соответственно, по сравнению с концентратом сока-пюре Tahitian Noni в этих исследованиях in vitro. Более того, эти результаты показывают, что сок Tahitian Noni® и концентрат сока-пюре Tahitian Noni оказывают благоприятное кардиопротективное действие, эффективны при лечении симптомов постменопаузы, остеоартрита, рака груди, рака матки и рака толстой кишки.

Далее описывается агонистическая активность в отношении эстрогена продуктов переработки Morinda citrifolia. Это означает, что эстроген представляет собой гормон, обладающий многими свойствами, и этот гормон необходим для поддержания равновесия внутренней системы. Таким образом, эстроген необходим для соединения нервной системы и эндокринной и особенно важен для репродуктивной системы, что делает возможным рождение детей, при этом он участвует не только на стадиях беременности, но и на стадиях формирования привлекательности женщины для мужчины, то есть эстрогены формируют вторичные половые признаки, делают гладкой кожу и так далее. В организме эстроген регулирует различные клетки, выполняя в каждом органе особую роль. Эта роль заключается в пролиферации, например матка, например, в момент оплодотворения должна быть чувствительна к получению яйцеклетки, а затем питать ее, а затем, при росте эмбриона новые кровеносные сосуды должны прорастать из матки и проникать в эмбрион для его питания, следовательно, эстроген может индуцировать разрастание клеток, а во время беременности увеличивается масса всей матки, следовательно, в этом органе усиливается деление клеток.

И то же самое относится к молочной железе. Молочная железа должна расти для того, чтобы вырабатывать молоко после рождения ребенка, следовательно, эстроген индуцирует рост этих клеток тоже. Развитие рака начинается с клеточного роста, но обычно клетки в нужное время прекращают рост, но иногда они мутируют и клеточный рост не прекращается, и соединения, индуцирующие клеточный рост, могут способствовать образованию опухоли раковыми клетками, и вот почему эстроген повышает частоту появления рака в этих органах, поскольку эстроген индуцирует рост клеток матки и груди. Еще одним действием эстрогена является, например, индукция синтеза особого белка ангиотензина в печени, который регулирует кровяное давление и многое другое. Он также регулирует процессы в головном мозге, контролирующие настроение. Эстроген способствует хорошему самочувствию и настроению женщин, при вынашивании и рождении ребенка, а при его недостатке часто возникает депрессия. У мужчин эстроген также обладает некоторой активностью (эстроген не является чисто женским гормоном, у мужчин также есть эстроген). В небольших концентрациях и после менопаузы у женщин уровень концентрации эстрогена снижается до концентрации эстрогена у мужчин.

Обычно мужчины не получают лечение синтетическими эстрогенами, за исключением тех случаев, когда у них наблюдается рак предстательной железы, поскольку у мужчин тестостерон оказывает такое же действие на клетки предстательной железы, таким образом, и на половые функции, какое эстроген оказывает на женские половые функции, и особенно тестостерон усиливает рост клеток предстательной железы, и при наличии единичных злокачественных клеток и высокого уровня тестостерона они могут перерастать в опухоль и образовывать рак предстательной железы, и тестостерон и эстроген являются антагонистами, и при лечении мужчин эстрогеном он оказывает на тестостерон антагонистическое действие и уменьшает рост клеток предстательной железы. Это является основанием для лечения мужчин, страдающих раком предстательной железы эстрогеном. При этом у них начинают проявляться женские признаки, так, у них начинают расти грудь, перестает расти борода, и тому подобное, но витальные эстрогены не вызывают таких симптомов, поскольку они являются реагирующими. Таким образом, при приеме витальных эстрогенов мужчины не теряют сексуальных функций, или у них не наблюдается никаких изменений в их фенотипе. При этом витальные эстрогены не уменьшают рост клеток предстательной железы и не снижают риск возникновения рака предстательной железы, что могло быть еще одним полезным свойством витальных эстрогенов, экспрессируемых у мужчин.

Оценивали возможное эстроген-агонистическое действие тестируемого вещества TNCONC у неполовозрелых самок мышей ICR, в максимально переносимой дозе 4000 мг/кг, вводимой перорально раз в день в течение трех последовательных дней. Значительная эстроген-агонистическая активность, которая проявлялась изменением сырой массы матки, наблюдалась для TNCONC (50% увеличение по сравнению с группой, получающей плацебо). У каждого из тестируемых животных наблюдалось увеличение кишечника; однако в тестируемый период изменений в поведении не наблюдалось. Был сделан вывод о том, что TNCONC в дозе 4000 мг/кг перорально (РО) обладает существенной эстроген-агонистической активностью у мышей.

Ниже представлены материалы и оборудование:

1. Тестируемые вещества и режим дозирования - TNCONC, предоставленное фирмой Morinda, Inc., растворяли в 2% Tween 80/0,9% NaCl. Для тестирования максимально переносимую дозу 4000 мг/кг вводили внутрибрюшинно ежедневно в течение трех последовательных дней и использовали величину дозы 10 мл/кг.

2. Животные - использовали самок мышей ICR, предоставленных фирмой MDS Pharma Services - Taiwan Ltd. Распределение пространства для 5 животных составило 29×18×13 см. Животных размещали в клетках АРЕС¹¹ и содержали в среде с контролируемой температурой (22°С-24°С) и влажностью (60%-80%) с 12-часовыми циклами дня и ночи, по крайней мере, одну неделю до эксперимента в лаборатории MDS Pharma Services-Taiwan Laboratory. Им был предоставлен свободный доступ к обычно используемому лабораторному корму для крыс (Lab Diet, Rodent Diet, PMI Nutrition International, USA) и водопроводной воде. Все аспекты этой работы, включая размещение, экспериментальную часть и обработку животных, проводили главным образом в соответствии с Международными основополагающими принципами биомедицинских исследований с участием животных (International Guiding Principles for Biomedical Research Involving Animals) (CIOMS Публикация №ISBN 92 90360194, 1985).

3. Реактивы - -эстрадиол 3-бензоат (Sigma, USA), апирогенный физиологический раствор (Sinton, Taiwan) и Tween 80 (Wako, Japan).

4. Оборудование - клетки животных (ShinTeh, R. О. С.), электронные весы 0,0001 г - 9,9999 г (R160P, Sarturius, Germany), стеклянный шприц (1 мл, 0,5 мл Mistuba, Japan), игла для подкожных инъекций (26 G × 1", TOP Corporation, Japan), игла для перорального введения для мышей, ножницы из нержавеющей стали (Klappencker, Germany).

Тестируемое вещество вводили в максимально переносимой дозе 4000 мг/кг внутрибрюшинно (IP) в течение трех последовательных дней группе из пяти неполовозрелых самок мышей ICR с массой 13±1 г. Животных скарифицировали через 24 часа после финальной дозы и измеряли сырую массу матки каждого животного. Увеличение сырой массы матки на 50 процентов или более ( 50%) по сравнению с контрольной группой животных указывает на возможную эстроген-агонистическую активность. В следующей таблице представлены результаты проведенного исследования:

Таблица 1
Протокол 9531000 эстроген-агонистическое действие у мышей
Обработка	Путь обработки	Доза	№	Вес матки (мг)		% уменьшения
				Индивидуальный	Средний
Носитель	IP	10 мл/кг	1	14,9
(2% Tween 80/			2	16,1
0,9% NaCl)			3	14,7
			4	18,0
			5	14,6	15,7	-
PT# 1026431-	IP	4000 мг/кг	1	23,4
ADD (MDA-6)			2	23,5
(TNCONC)			3	27,5
			4	19,6
			5	23,5	23,5	(50)
-эстрадиол	PO	0,03 мг/кг	1	28,7
3-бензоат			2	20,7
			3	31,3
			4	35,6
			5	34,9	30,2	(83)

Плацебо или тестируемое вещество вводили IP в течение трех последовательных дней неполовозрелым самкам мышей массой 13±1 г. Животных скарифицировали через 24 часа после финальной дозы и определяли сырую массу матки каждого животного. Увеличение сырой массы матки на 50 процентов или более ( 50%) по сравнению с группой животных, получающих плацебо, показано в скобках, указывает на возможную эстроген-агонистическую активность. Примечание: значение в группе, получающей эстрадиол сравнивали с первоначальным контролем плацебо перорально 2% Tween 80 (сырая масса матки составила 16,5 мг).

Таким образом, как представлено выше, получена диетическая композиция или добавка, которая включает в себя один или несколько переработанных продуктов, полученных из растения индийская шелковица, научное название которого Morinda citrifolia L., и используемых для обеспечения эстрогенного действия в организме человека.

Ингибирование продукции эстрогена

Далее описан способ и его признаки и состав ингибирования ароматазы и для лечения и предупреждения роста раковых клеток млекопитающего, а также для снижения в организме млекопитающего продукции эстрогена, который способствует росту эстроген-зависимых злокачественных опухолей, каждый посредством профилактического приема композиции биологически активной добавки, включающего, по крайней мере, одну из форм продукта переработки Morinda citrifolia.

Варианты осуществления настоящего изобретения относятся к ингибиторам ароматазы, к композиции биологически активной добавки, или ингибитору ароматазы, или к композиции, воздействующей на эстроген-зависимые раковые клетки, в состав которой входит Morinda citrifolia, растение Индийская шелковица. Morinda citrifolia входит в состав композиций биологически активной добавки вместе с различными носителями или пригодных для in vivo лечения пациента. Например, ингибитор может быть принят внутрь, инъецирован, введен внутривенно, или усвоен любым другим подходящим путем в соответствии с предписанием.

В одном из характерных вариантов осуществления, композиция биологически активной добавки по настоящему изобретению, включает в себя один или несколько продуктов переработки Morinda citrifolia, в количестве между 0,01 и 100 процентами по массе, предпочтительно между 0,01 и 95 процентами по массе. Несколько вариантов осуществления составов представлено ниже. Однако они представлены только в качестве примеров, и специалисту в данной области ясно, что могут быть получены другие составы или композиции, включающие в себя продукт переработки Morinda citrifolia.

Продукт переработки Morinda citrifolia включает, по крайней мере, один из активных ингредиентов в биологически активной добавке или содержит один или несколько активных ингредиентов, как, например, кверцитин и рутин, и другие, для осуществления ингибирования ароматазы и снижения и контроля продукции эстрогена, ингибируя связывания эстрогенных рецепторов с эстрогеном, так же, как для осуществления разрушения эстроген-зависимых раковых клеток, в частности, эстроген-зависимых раковых клеток на ранней стадии.

Активные ингредиенты в составе продукта переработки Morinda citrifolia могут быть экстрагированы с использованием различных спиртов или спиртовых растворов, например метанола, этанола и этилацетата, или других производных спирта, используя любые известные в данной области процессы. В конечном составе или композиции активные ингредиенты кверцитин и рутин представлены в количествах от 0,01 до 10 процентов по массе. Эти количества также могут быть сконцентрированы в более высокие концентрации, в которых они представлены в количествах в пределах от 10 до 100 процентов.

Продукт переработки Morinda citrifolia может находиться в смеси с различными другими ингредиентами для получения различных композиций, например, композиции биологически активной добавки, местной кожной композиции или других. В композиции биологически активной добавки используются любые ингредиенты, являющиеся безопасными для введения в организм млекопитающего, в частности человека, и могут существовать в различных формах, например в виде жидкостей, таблеток, пастилок, водных или масляных растворов, дисперсных порошков или гранул, эмульсий, сиропов, элексиров и тому подобное. Более того, поскольку композиция биологически активной добавки предпочтительно употребляется перорально, она может содержать одно или несколько веществ, выбранных из группы, включающей подсластители, ароматизаторы, красители, консерванты и другие лекарственные вещества, в соответствии с предписанием.

В композиции для местного нанесения композиции также используют ингредиенты, являющиеся безопасными для усвоения организмом млекопитающего и могут существовать в различных формах, например в виде гелей, лосьонов, кремов, мазей и тому подобное, каждый содержит один или несколько носителей. Ингредиенты для системно вводимых составов (например, внутривенно) могут также включать любые известные в данной области.

Настоящее изобретение также характеризует способ введения композиции биологически активной добавки в организм млекопитающего для ингибирования ароматазы, а также для снижения и/или регулирования продукции эстрогена. В одном типичном варианте осуществления способ включает следующие стадии (а) формулирование композиции биологически активной добавки, включающей частично продукт переработки Morinda citrifolia, представленный в количестве между 0,01 и 95 процентами по массе, где композиция включает также носитель, например, воду или дистиллированную воду, и также может включать другие природные или искусственные ингредиенты; (b) введение композиции биологически активной добавки в организм млекопитающего, таким путем, чтобы продукт переработки Morinda citrifolia адекватно усваивался; (с) повторение вышеупомянутых стадий так часто, как это необходимо для обеспечения эффективного количества продукта переработки для ингибирования ароматазных ферментов, чьей функцией является превращение андрогенов в эстрогены, ингибирование связывания рецепторов с эстрогеном, и/или снижение, и/или регулирование продукции эстрогена.

Стадия введения композиции биологически активной добавки в организм млекопитающего предпочтительно включает пероральное применение композиции. В частности, композиция биологически активной добавки может представлять собой жидкую, гелеобразную, твердую или другую форму, которая позволит композиции быть быстро усвоенной и сконцентрированной в толстом кишечнике. Важно обратить внимание, что стадия введения композиции биологически активной добавки должна осуществляться в эффективной манере, таким образом, чтобы наибольшая концентрация композиции биологически активной добавки была абсорбирована в тканях и клетках. Для того чтобы композиция биологически активной добавки проявила эффект, она должна быть адекватно усвоена. После адекватного усвоения, композиция может затем начать действовать, ингибируя ароматазу, препятствуя связыванию эстрогена рецепторами и снижая количество произведенного эстрогена.

В другом варианте осуществления, стадия введения композиции биологически активной добавки может включать инъекцию композиции с использованием внутривенного насоса. Эта технология является выигрышной, потому что это позволит композиции быть локализованной в области, где композиция будет иметь наибольшую эффективность, или в области, где будет обеспечена наибольшая концентрация композиции биологически активной добавки, например, в области молочной железы у пациентки с раком груди. В одном типичном варианте осуществления композиция биологически активной добавки вводится употреблением от 1 чайной ложки до 2 унций, предпочтительно 2 унций, композиции биологически активной добавки каждые два часа ежедневно, или, по крайней мере, дважды в день длительный период времени. Также композиция биологически активной добавки должна приниматься натощак, что означает период времени, по крайней мере, за два часа до приема пищи или жидкости. В результате, композиция биологически активной добавки может активно ингибировать ароматазу, таким образом, положительно воздействовать на эстроген-зависимые раковые клетки и ингибируя их рост в организме. Конечно, специалисту в данной области будет понятно, что количество композиции и частота применения могут варьировать у различных индивидуумов.

Последующие таблицы иллюстрируют или представляют некоторые предпочтительные составы или композиции, рассмотренные в соответствии с настоящим изобретением. Как указано, они предназначены только для иллюстрации вариантов осуществления изобретения и никак не ограничивают его.

Состав Один
Ингредиенты	Процентное отношение по массе
Сок-пюре или сок Morinda citrifolia	100%
Состав Два
Ингредиенты	Процентное отношение по массе
Сок Morinda citrifolia	85-99,9%
Вода	0,1-15%
Состав Три
Ингредиенты	Процентное отношение по массе
сок Morinda citrifolia	85-99,9%
сок плодов, отличных от Morinda citrifolia	0,1-15%
Состав Четыре
Ингредиенты	Процентное отношение по массе
сок Morinda citrifolia	50-90%
Вода	0,1-49,9%
сок плодов, отличных от Morinda citrifolia	0,1-30%
Состав Пять
Ингредиенты	Процентное отношение по массе
сок-пюре Morinda citrifolia	85-99,9%
Вода	0,1-15%
Состав Шесть
Ингредиенты	Процентное отношение по массе
сок-пюре Morinda citrifolia	85-99,9%
сок плодов, отличных от Morinda citrifolia	0,1-15%
Состав Семь
Ингредиенты	Процентное отношение по массе
сок-пюре Morinda citrifolia	50-90%
Вода	0,1-49,9%
сок плодов, отличных от Morinda citrifolia Состав Восемь	0,1-30%
Ингредиенты	Процентное отношение по массе
пищевые волокна Morinda citrifolia	0,1-30%
Вода	1-98,9%
сок плодов, отличных от Morinda citrifolia	1-99,9%
Состав Девять
Ингредиенты пищевые волокна Morinda citrifolia	Процентное отношение по массе 0,1-30%
Вода	1-98,9%
сок или сок-пюре Morinda citrifolia	1-99,9%
Состав Десять
Ингредиенты масло Morinda citrifolia	Процентное отношение по массе 0,1-30%
несущая среда	70-98,9%
другие ингредиенты	1-95%
Состав Одиннадцать
Ингредиенты	Процентное отношение по массе
продукт Morinda citrifolia	10-80%
несущая среда	20-90%
Состав Двенадцать
Ингредиенты	Процентное отношение по массе
продукт Morinda citrifolia	5-80%
несущая среда	20-95%
Состав Тринадцать
Ингредиенты	Процентное отношение по массе
масло или масляный экстракт Morinda citrifolia	0,1-20%
несущая среда	20-90%
Состав Четырнадцать
Ингредиенты сок-пюре или сок Morinda citrifolia	Процентное отношение по массе 0,1-80%
масло Morinda citrifolia	0,1-20%
несущая среда	20-90%
Состав Пятнадцать
Ингредиенты	Процентное отношение по массе
Morinda citrifolia концентрат сока-пюре или концентрат сока	100%
Состав Шестнадцать
Ингредиенты	Процентное отношение по массе
концентрат сока или концентрат сока-пюре Morinda citrifolia	85-99,9%
Вода	0,1-15%

Как указано в одном типичном варианте осуществления, настоящее изобретение характеризует способ введения композиции или состава для внутреннего применения для ингибирования ароматазы, снижения/регулирования продукции эстрогена, ингибирования связывания эстрогена с рецепторами, и лечения, предупреждения, ингибирования, разрушения и полного изменения эффектов эстроген-зависимых опухолей и роста злокачественных клеток в пределах области злокачественной опухоли, например в области молочной железы. По существу, этот способ включает введение композиции для внутреннего применения в организм млекопитающего, пораженного раковыми клетками. Здесь рассмотрено использование нескольких вариантов осуществления композиции для внутреннего применения, включающие различные ингредиенты, каждый вариант осуществления включает одну или более форм продукта переработки Morinda citrifolia, как объяснено и показано здесь, и несущий агент или среду.

В одном предпочтительном способе ингибируется ароматаза или ароматазные ферменты, производится воздействие на эстроген-зависимый рак, предупреждается, разрушается и/или полностью изменяется рост раковых клеток, путем назначения утром натощак по крайней мере одной унции (1) одного из составов с Состава Один по Состав Шестнадцать, описанных выше, и по крайней мере одной (1) унции натощак вечером, непосредственно перед сном. В одном примере, который не является ограничением, целебная Morinda citrifolia переработана в сок Tahitian Noni®, производящийся фирмой Morinda, Inc., Orem, Utah.

В одном типичном варианте осуществления композиция для внутреннего применения включает следующие ингредиенты: продукт переработки Morinda citrifolia, представленный в количестве между 10 и 80 процентами по массе; и несущую среду, представленную в количестве между 20 и 90 процентами по массе.

В этом варианте осуществления, продукт переработки Morinda citrifolia может включать сок одного или нескольких переработанных плодов Morinda citrifolia, сок-пюре, переработанной Morinda citrifolia, переработанных пищевых волокон Morinda citrifolia, и/или масляный экстракт Morinda citrifolia.

В другом типичном варианте осуществления композиция для внутреннего применения содержит следующие ингредиенты: сок или сок-пюре из переработанных плодов Morinda citrifolia, представленный в количестве по массе между 0,1 и 80 процентами; масло переработанной Morinda citrifolia, представленное в количестве по массе между 0,1 и 20 процентами; и несущую среду, представленную в количестве по массе между 20 и 90 процентами. Сок-пюре или сок плодов Morinda citrifolia также может быть сформулирован с пищевыми волокнами переработанной Morinda citrifolia, представленными в аналогичных концентрациях.

В соответствии с настоящим изобретением, частные способы введения композиции для внутреннего применения могут включать любой способ фактического введения композиции для внутреннего применения в организм млекопитающего, для целей, описанных здесь. Хотя существует множество частных способов, настоящее изобретение определяет, что композиция для внутреннего применения может быть введена внутривенно, трансдермально, перорально или системно. Независимо от того, какой способ используется, главное, чтобы композиция полностью усвоилась, так чтобы композиция для внутреннего применения, в частности Morinda citrifolia и другие активные ингредиенты, могли эффективно ингибировать ароматазу и воздействовать на эстроген-зависимый рак, таким образом, способствуя уменьшению и последующему ингибированию и предотвращению такого рака, а также эстроген-зависимые раковые клетки на любой ранней стадии могут быть разрушены.

Несущая среда, установленная в вышеупомянутых Составах, может включать любой ингредиент, который может быть введен в организм млекопитающего и который также способен обеспечить несущую среду для продукта переработки Morinda citrifolia. Определенные составы несущих сред известны в данной области и детально здесь не описаны. Как указано, назначением несущей среды является обеспечение доставки продукта переработки Morinda citrifolia в составе композиции для внутреннего применения, которая может быть введена в организм.

Следующие примеры объясняют и представляют профилактические и лечебные эффекты продуктов переработки Morinda citrifolia на ароматазу и эстроген-зависимые раковые клетки, а также профилактические и лечебные эффекты Morinda citrifolia в отношении пролиферации или метастазирования этих раковых клеток. Эти примеры приведены здесь не в качестве ограничения, а в качестве иллюстрации преимуществ и пользы, а также лечебных эффектов, продуктов Morinda citrifolia.

Пример 1

Современные известные виды лечения, доступные женщинам, имеющим рак груди в постклимактерическом периоде, включают лечебные схемы, направленные либо на блокирование или ингибирование эстрогенных рецепторов, либо на блокирование действия ароматазы. Тем не менее, эти виды лечения не способны сочетать оба действия. Недавние эксперименты проводились, используя in vitro биопробы для оценки ингибирования ароматазного фермента и активности радиолигандного связывания Morinda citrifolia в форме сока-пюре Tahitian Noni®.

В этом эксперименте использовали рекомбинантные клетки человека в качестве источника рецепторов эстрогена ER и ER . Каждый из ферментов положительного контроля, диэтилстильбэстрол ароматаза и СYР450 2С19, имели человеческое происхождение.

В первую очередь исследовали 1% сок-пюре Tahitian Noni®. Результаты этого теста показали, что активный ингредиент Morinda citrifolia обуславливал или индуцировал 89% ингибирование ароматазы рецептора фермента CYP450 2С19, 99% ингибирование ароматазы эстроген-альфа рецепторов фермента, и 102% ингибирование ароматазы эстроген-бета рецепторов фермента. Эти результаты очевидно, предполагают, что сок-пюре Morinda citrifolia в использованной концентрации имел значительное воздействие на ингибирование ароматазы и рецепторов эстрогенов, каковое ингибирование выдерживает сравнение с современными известными видами лечения.

Более того, было обнаружено, что Morinda citrifolia ингибировала 81% 1А2, 89% 2С19, 81% 2С9, 93% 2D6, и 77% 3А4 СYР450 ферментов.

Таким образом, как обсуждено здесь, варианты осуществления настоящего изобретения охватывают эстрогенное действие в организме человека. Конкретнее, настоящее изобретение относится к применению биологически активной композиции или добавки для селективного ингибирования продукции эстрогена и обеспечения эстрогенного действия в организме человека, где композиция сформулирована из одного или нескольких продуктов переработки растения Индийская шелковица, научное название которого Morinda citrifolia L. Настоящее изобретение может быть воплощено в других частных формах, не выходя за пределы его сущности или основных характеристик. Считается, что описанные варианты осуществления являются иллюстрирующими, а не ограничивающими.

Таким образом, объем изобретения определяется прилагаемой формулой изобретения, а не в соответствии с описанием, представленным выше. Все изменения в пределах значений и диапазона эквивалентов формулы изобретения охватываются данным изобретением.