способ получения иммобилизованной -фруктофуранозидазы

Классы МПК:	C12N11/00 Иммобилизованные ферменты или ферменты на носителях; иммобилизованные микробные клетки или микробные клетки на носителях; их получение C12N11/04 помещенные в носитель, например гель, полое волокно C12N11/12 целлюлозой или ее производными C12N11/14 ферменты или микробные клетки, иммобилизованные на или в неорганическом носителе
Автор(ы):	Корнеева Ольга Сергеевна (RU), Мещерякова Ольга Леонидовна (RU), Калач Андрей Владимирович (RU), Ситников Александр Иванович (RU), Свиридова Татьяна Васильевна (RU)
Патентообладатель(и):	Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Воронежская государственная технологическая академия (RU)
Приоритеты:	подача заявки: 2006-11-20 публикация патента: 27.06.2008

Способ включает оживление чистой культуры Klyuveromyces marxianus Y-303 по методу Коха, засев ее в чашки Петри с 2%-ным сусло-агаром при температуре 48-50°С. Чашки переворачивают вверх дном и выдерживают в течение 2-3 суток в термостате при температуре 28-30°С. Выросшие колонии переносят в чашку Петри с сусло-агаром для наращивания биомассы, затем на скосы с сусло-агаром. Проводят глубинное культивирование дрожжей в колбах емкостью 500 см³, содержащих по 50 см³ пивного сусла в течение 47,5-48,5 ч при температуре 30°С. Выращенную биомассу смешивают с дистиллированной водой в соотношении 1:5, проводят автолиз при температуре 38-42°С в течение 59,5-60,5ч. Полученную ферментсодержащую смесь осаждают этиловым спиртом при рН 5,0 или ацетоном при рН 5,5. Проводят очистку способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="/images/patents/138/2327400/946.gif" BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы в 3 стадии: удаляют низкомолекулярные примеси гель-фильтрацией на колонке с сефадексом G-25, повышают чистоту ферментного препарата ионообменной хроматографией на колонке с ДЭАЭ-целлюлозой, фракционируют на колонке с сефадексом G-150. Осуществляют концентрирование на мембране Amicon РМ-30 до 5 см³, направляют на лиофильную сушку при t=-30°C. Осуществляют иммобилизацию способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="/images/patents/138/2327400/946.gif" BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы на полимерном волокнистом сорбенте (анионите). Перед иммобилизацией сорбент обрабатывают 5%-ной соляной кислотой, дистиллированной водой, 5%-ным раствором едкого натра и снова водой. Каждая обработка длится 12 ч. Промытый сорбент дополнительно обрабатывают 95%-ным этиловым спиртом и снова водой. Готовят водный раствор способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="/images/patents/138/2327400/946.gif" BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы с содержанием 0,018-0,098 моль/дм³ и инкубируют подготовленный сорбент. Способ позволяет получить иммобилизованный фермент в количестве 0,005-0,025 мг/г, обеспечить чистоту целевого продукта. 2 табл.

Формула изобретения

Способ получения иммобилизованной -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="/images/patents/138/2327400/946.gif" BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы, характеризующийся тем, что оживляют чистую культуру Klyuveromyces marxianus Y-303 по методу Коха, затем засевают ее в чашки Петри с 2%-м сусло-агаром при температуре 48-50°С, чашки переворачивают вверх дном и выдерживают в течение 2-3 суток в термостате при температуре 28-30°С, затем выросшие колонии переносят в чашку Петри с сусло-агаром для наращивания биомассы, после чего дрожжи переносят на скосы с сусло-агаром, далее проводят глубинное культивирование дрожжей Klyuveromyces marxianus Y-303 в колбах емкостью 500 см³, содержащих по 50 см³ питательной среды, в качестве которой используют пивное сусло, в течение 47,5-48,5 ч при температуре 30°С, затем выращенную биомассу дрожжей смешивают с дистиллированной водой в соотношении 1:5 и проводят автолиз при температуре 38-42°С в течение 59,5-60,5 ч, полученную после автолиза ферментсодержащую смесь осаждают этиловым спиртом при рН 5,0 или ацетоном при рН 5,5, затем проводят очистку способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="/images/patents/138/2327400/946.gif" BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы в 3 стадии: удаляют низкомолекулярные примеси гель-фильтрацией на колонке с сефадексом G-25, повышают чистоту ферментного препарата ионообменной хроматографией на колонке с ДЭАЭ-целлюлозой, фракционируют на колонке с сефадексом G-150, после очистки фермента осуществляют концентрирование на мембране Amicon РМ-30 до 5 см³ и направляют на лиофильную сушку при t=-30°C, после чего осуществляют иммобилизацию способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="/images/patents/138/2327400/946.gif" BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы на полимерном волокнистом сорбенте (анионите), причем перед процессом иммобилизации сорбент обрабатывают 5%-ной соляной кислотой, дистиллированной водой, 5%-ным раствором едкого натра и снова водой, каждая обработка длится 12 ч, промытый сорбент дополнительно обрабатывают 95%-ным этиловым спиртом и снова водой, далее готовят водный раствор способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="/images/patents/138/2327400/946.gif" BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы с содержанием 0,018-0,098 моль/дм³ и инкубируют подготовленный сорбент.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способам получения иммобилизованной способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы, и может быть использовано при производстве инвертного сахара.

Известен способ получения иммобилизованной -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы (инвертазы) для гидролиза сахарозы, включающий получение очищенной способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы из содержимого клеток дрожжей, иммобилизацию ее на модифицированных кремнеземных сорбентах, при этом в процессе порционного связывания инвертазы с сорбентами осуществляют многократную обработку инвертазы глутаровым альдегидом (а.с. СССР N 1564186, М. кл. С12Н 11/00, публ. 1990 г.).

Недостатками известного способа является достаточно трудоемкий процесс в связи с необходимостью осуществления сложной процедуры специальной очистки фермента, а обработка глутаровым альдегидом приводит к резкому снижению активности способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому эффекту является способ получения иммобилизованной инвертазы, включающий автолитическую деструкцию клеток дрожжей, обладающих инвертазной активностью, получение препарата инвертазы и его последующую иммобилизацию на поверхности или в массе твердого или гелеобразного носителя, причем в качестве препарата инвертазы используют изолированные стенки дрожжевых клеток, разрушенных в процессе автолиза [Патент N 2158761 RU Е.М.Рязанов, Д.И.Островский, А.В.Бубнов Способ получения иммобилизованной инвертазы для гидролиза сахарозы].

Недостатком известного способа является сложность осуществления способа, возможность загрязнения целевого продукта (инвертного сахара) ионами металлов и большим количеством балластных веществ, выходящих из иммобилизованным клеток микроорганизмов.

Технической задачей настоящего изобретения является упрощение и повышение эффективности способа получения иммобилизованной способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы при сохранении ее высокой ферментативной активности и обеспечение чистоты целевого продукта.

Техническая задача достигается тем, что способ получения иммобилизованной -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы характеризуется тем, что оживляют чистую культуру Klyuveromyces marxianus Y-303 по методу Коха, затем засевают ее в чашки Петри с 2%-ным сусло-агаром при температуре 48-50°С, чашки переворачивают вверх дном и выдерживают в течение 2-3 суток в термостате при температуре 28-30°С, затем выросшие колонии переносят в чашку Петри с сусло-агаром для наращивания биомассы, после чего дрожжи переносят на скосы с сусло-агаром, далее проводят глубинное культивирование дрожжей Klyuveromyces marxianus Y-303 в колбах емкостью 500 см³, содержащих по 50 см³ питательной среды, в качестве которой используют пивное сусло, в течение 47,5-48,5 ч при температуре 30°С, затем выращенную биомассу дрожжей смешивают с дистиллированной водой в соотношении 1:5 и проводят автолиз при температуре 38-42°С в течение 59,5-60,5 ч, полученную после автолиза ферментсодержащую смесь осаждают этиловым спиртом при рН 5,0 или ацетоном при рН 5,5, затем проводят очистку способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы в 3 стадии: удаляют низкомолекулярные примеси гель-фильтрацией на колонке с сефадексом G-25 (Fine, 1,4×20 см), повышают чистоту ферментного препарата ионообменной хроматографией на колонке с ДЭАЭ-целлюлозой (0,8×13 см), фракционируют на колонке с сефадексом G-150, после очистки фермента осуществляют концентрирование на мембране Amicon РМ-30 до 5 см³ и направляют на лиофильную сушку при t=-30°С, после чего осуществляют иммобилизацию способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы на полимерном волокнистом сорбенте (анионите) марки ФИБАН® (Беларусь), причем перед процессом иммобилизации сорбент обрабатывают 5%-ной соляной кислотой, дистиллированной водой, 5%-ным раствором едкого натра и снова водой, каждая обработка длится 12 ч, промытый сорбент дополнительно обрабатывают 95%-ным этиловым спиртом и снова водой, далее готовят водный раствор способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы с содержанием 0,018-0,098 моль/дм³ и инкубируют подготовленный сорбент.

Технический результат заключается в упрощении и повышении эффективности способа получения иммобилизованной способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы при сохранении ее высокой ферментативной активности и обеспечении чистоты целевого продукта.

Способ получения иммобилизованной способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы осуществляется следующим образом.

Используемые в работе дрожжи Klyuveromyces marxianus Y-303 хранят в запаянных ампулах. Оживление чистой культуры Klyuveromyces marxianus Y-303 проводят по методу Коха. Культуру дрожжей засевают в чашки Петри с 2%-ным сусло-агаром при температуре 48-50°С, чашки переворачивают вверх дном и выдерживают в течение 2-3 суток в термостате при температуре 28-30°С. Выросшие колонии переносят в чашку Петри с сусло-агаром, по истечении 2-3 суток дрожжи переносят на скосы с сусло-агаром. Далее проводят глубинное культивирование дрожжей Klyuveromyces marxianus Y-303 в колбах емкостью 500 см³ в термостате, содержащих по 50 см³ питательной среды, в качестве которой используют пивное сусло, в течение 47,5-48,5 ч при температуре 30°С. Затем выращенную биомассу дрожжей смешивают с дистиллированной водой в соотношении 1:5 и проводят автолиз при температуре 38-42°С в течение 59,5-60,5 ч. Полученную после автолиза ферментсодержащую смесь осаждают этиловым спиртом при рН 5,0 или ацетоном при рН 5,5, затем проводят очистку способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы в 3 стадии: гель-фильтрация на колонке с сефадексом G-25 (Fine, 1,4×20 см) с целью освобождения от низкомолекулярных примесей, ионообменная хроматография на колонке с ДЭАЭ-целлюлозой (0,8×13 см) для повышения чистоты ферментного препарата, фракционирование на колонке с сефадексом G-150, после очистки фермента осуществляют концентрирование на мембране Amicon РМ-30 до 5 см³ и направляют на лиофильную сушку при t=-30°С.

Иммобилизацию способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы проводят на полимерном волокнистом сорбенте марки ФИБАН® (Беларусь). Подготовка сорбента проводится в соответствии с ГОСТ 10896-72. Кондиционирование анионита осуществляют обработкой 5%-ной соляной кислотой, дистиллированной водой, 5%-ным раствором едкого натра и снова водой. Каждая обработка длится 12 ч. Каждый реагент берут в 2-кратном избытке по сравнению с содержанием обменных групп в обрабатываемом образце. Кондиционирование проводят на воронке с пористым фильтром. Промытый сорбент с целью очистки дополнительно обрабатывают 95%-ным этиловым спиртом и снова водой. Далее готовят водный раствор способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы с содержанием 0,018-0,098 моль/дм³ и инкубируют подготовленный сорбент.

Способ поясняется следующими примерами.

Пример 1. Культивирование дрожжей Klyuveromyces marxianus Y-303 проводят в чашках Петри с 2%-ным сусло-агаром при температуре 29°С в течение 2 суток, выросшие колонии переносят на скосы с сусло-агаром, после чего проводят глубинное культивирование в колбах емкостью 500 см³ в термостате, содержащих по 50 см³ питательной среды, в качестве которой используют пивное сусло, в течение 48 ч при температуре 30°С. Затем выращенную биомассу дрожжей смешивают с дистиллированной водой в соотношении 1:5 и проводят автолиз при температуре 40°С в течение 60 ч. Полученную после автолиза ферментсодержащую смесь осаждают этиловым спиртом при рН 5,0 или ацетоном при рН 5,5, затем проводят очистку ( способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы в 3 стадии: гель-фильтрация на колонке с сефадексом G-25 (Fine, 1,4×20 см), ионообменная хроматография на колонке с ДЭАЭ-целлюлозой (0,8×13 см), фракционирование на колонке с сефадексом G-150, после очистки фермента осуществляют концентрирование на мембране Amicon РМ-30 до 5 см³ и направляют на лиофильную сушку при t=-30°С.

Готовят водный раствор, содержащий способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазу в количестве 0,098 моль/дм³. Раствор пропускают через слой ионообменного волокнистого материала марки ФИБАН® (Беларусь). Подготовка сорбента проводится в соответствии с ГОСТ 10896-72. Кондиционирование анионита осуществляют обработкой 5%-ной соляной кислотой, дистиллированной водой, 5%-ным раствором едкого натра и снова водой. Каждая обработка длится 12 ч. Промытый сорбент с целью очистки дополнительно обрабатывают 95%-ным этиловым спиртом и снова водой.

Далее смолу инкубируют с раствором способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы. Способ осуществим. Результаты осуществления способа приведены в табл.1; результаты сравнения предлагаемого способа и способа-прототипа представлены в табл.2.

Пример 2. Готовят водный раствор, содержащий способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазу в количестве 0,044 моль/дм³. Получение ферментного препарата и подготовку ионообменного волокнистого материала марки ФИБАН® проводят по методике, описанной в примере 1. Способ осуществим. Результаты осуществления способа приведены в табл.1.

Пример 3. Готовят водный раствор, содержащий способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазу в количестве 0,018 моль/дм³. Получение ферментного препарата и подготовку ионообменного волокнистого материала марки ФИБАН® проводят по методике, описанной в примере 1. Способ осуществим. Результаты осуществления способа приведены в табл.1.

Как видно из примеров, предложенный способ получения иммобилизованной -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы осуществим при культивировании дрожжей Klyuveromyces marxianus Y-303 при температуре 28-30°С в течение 2-3 суток, глубинном культивировании в колбах емкостью 500 см³ в термостате, содержащих по 50 см³ питательной среды, в качестве которой используют пивное сусло, в течение 47,5-48,5 ч при температуре 30°С, проведении автолиза при температуре 38-40°С в течение 59,5-60,5 ч, осаждении ферментсодержащей смеси спиртом при рН 5,0 или ацетоном при рН 5,5 и очистке способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы в 3 стадии: гель-фильтрация на колонке с сефадексом G-25 (Fine, 1,4×20 см), ионообменная хроматография на колонке с ДЭАЭ-целлюлозой (0,8×13 см), фракционирование на колонке с сефадексом G-150. Как видно из табл.1, предложенный способ иммобилизации осуществим при содержаниях данного фермента в количествах 0,018-0,098 моль/дм³ (способ 1-3), при увеличении концентрации способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы свыше 0,098 моль/дм³ приводит к переходу процесса иммобилизации к фильтрованию ферментного препарата ионообменным волокнистым материалом, снижение концентрации способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы ниже 0,018 моль/дм³ приводит к невозможности определения содержания иммобилизованного фермента.

Предлагаемый способ получения иммобилизованной -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы позволяет:

получить иммобилизованный препарат, отличающийся хорошей операционной стабильностью и активностью,

обеспечить чистоту продукта,

упростить способ иммобилизации способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> -фруктофуранозидазы,

снизить себестоимость осуществляемого способа.

Таблица 1
Примеры осуществления способа
Номер примера	Концентрация раствора фермента, моль/дм³	Содержание иммобилизованного фермента, мг/г	Результат анализа
1	0,098	0,025	Способ осуществим
2	0,057	0,0125	Способ осуществим
3	0,044	0,0075	Способ осуществим
4	0,031	0,005	Способ осуществим

способ получения иммобилизованной <img src= -фруктофуранозидазы, патент № 2327738" SRC="" height=100 BORDER="0">

Класс C12N11/00 Иммобилизованные ферменты или ферменты на носителях; иммобилизованные микробные клетки или микробные клетки на носителях; их получение

биосорбент для ликвидации нефти с поверхности водоемов - патент 2529771 (27.09.2014)
биокатализатор для переэтерификации жиров и способ его получения - патент 2528778 (20.09.2014)

наноразмерный ферментный биокатализатор для детоксификации фосфорорганических соединений in vivo - патент 2525658 (20.08.2014)
иммобилизованный биокатализатор для микробной биотрансформации стероидных соединений - патент 2524434 (27.07.2014)
фотобиокатализатор для образования водорода и фотокаталитический способ получения водорода - патент 2511053 (10.04.2014)
способ криоконсервации клеток фототрофных микроорганизмов - патент 2508397 (27.02.2014)
способ получения иммобилизованного биокатализатора для синтеза водных растворов амидов - патент 2500814 (10.12.2013)
способ получения липосомально-иммунопероксидазного конъюгата - патент 2500813 (10.12.2013)
композиция для получения кремнийорганической золь-гель матрицы для иммобилизации микроорганизмов в биосенсорных анализаторах - патент 2492236 (10.09.2013)
способ получения биоспецифического гидрогелевого сорбента для выделения протеиназ - патент 2484475 (10.06.2013)

Класс C12N11/04 помещенные в носитель, например гель, полое волокно

иммобилизованный биокатализатор для микробной биотрансформации стероидных соединений - патент 2524434 (27.07.2014)
способ криоконсервации клеток фототрофных микроорганизмов - патент 2508397 (27.02.2014)
способ получения иммобилизованного биокатализатора для синтеза водных растворов амидов - патент 2500814 (10.12.2013)
биогибридный материал для сорбции и деградации нефти и нефтепродуктов - патент 2483797 (10.06.2013)
композиция для получения полимерной пленки для иммобилизации микроорганизмов в биосенсорных анализаторах - патент 2461625 (20.09.2012)
коллагеновые материалы, пленки и способы их изготовления - патент 2455322 (10.07.2012)
способ получения гранул, содержащих иммобилизованные нефтеокисляющие микроорганизмы - патент 2422521 (27.06.2011)
способ получения биокатализатора, обладающего активностью в отношении синтеза цефалоспоринов-кислот - патент 2420581 (10.06.2011)
способ и устройство для очистки, разделения, модификации и/или иммобилизации химических или биологических объектов, находящихся в текучей среде, и опора из микропроволоки - патент 2411291 (10.02.2011)
новые сшивающие реагенты для получения биосовместимых материалов на основе хитозана - патент 2408618 (10.01.2011)

Класс C12N11/12 целлюлозой или ее производными

способ производства культуры "чайного гриба" и способ производства напитка брожения с использованием культуры "чайного гриба" - патент 2480519 (27.04.2013)
фермент ловастатин эстераза, иммобилизованный на твердом носителе, способ иммобилизации фермента, биокатализируемый проточный реактор и способ очистки симвастатина - патент 2475538 (20.02.2013)
способ ферментативного гидролиза фосфорорганических соединений в почвогрунте - патент 2451077 (20.05.2012)
способ получения иммобилизованной коллагеназы - патент 2389794 (20.05.2010)
способ получения иммобилизованной протеазы - патент 2389793 (20.05.2010)
способ получения иммобилизованной липазы - патент 2389792 (20.05.2010)
способ получения иммобилизованной целлюлазы - патент 2388822 (10.05.2010)
способ формирования белковых пленок на твердых подложках - патент 2317100 (20.02.2008)
композиция для получения носителя иммобилизованных микроорганизмов, расщепляющих углеводороды, и способ получения носителя - патент 2298033 (27.04.2007)
рекомбинантный белок lacspcbd, обладающий бета-галактозидазной активностью и способностью самопроизвольно связываться с целлюлозосодержащими сорбентами, рекомбинантная плазмидная днк, кодирующая синтез рекомбинантного белка lacspcbd, штамм escherichia coli m15 [prep4, placspcbd] - продуцент рекомбинантного белка lacspcbd, способ получения иммобилизованного рекомбинантного белка lacspcbd на целлюлозе и способ ферментативного расщепления лактозы - патент 2278160 (20.06.2006)

Класс C12N11/14 ферменты или микробные клетки, иммобилизованные на или в неорганическом носителе

биокатализатор для переэтерификации жиров и способ его получения - патент 2528778 (20.09.2014)
фотобиокатализатор для образования водорода и фотокаталитический способ получения водорода - патент 2511053 (10.04.2014)
способ иммобилизации l-фенилаланин-аммоний-лиазы на магнитных наночастицах - патент 2460790 (10.09.2012)
биокатализатор, способ его приготовления и способ получения инвертного сиропа с использованием этого катализатора - патент 2451546 (27.05.2012)
стабилизатор ферментативной активности пероксидазы - патент 2445271 (20.03.2012)
способ получения поверхностно-модифицированных наночастиц для иммобилизации биологических веществ - патент 2425879 (10.08.2011)
фотобиокатализатор для получения восстановленных форм никотинамидных коферментов nadh или nadph и фотокаталитический способ получения nadh или nadph - патент 2416644 (20.04.2011)
биокатализатор, способ его приготовления и способ получения инвертного сиропа с использованием этого биокатализатора - патент 2372403 (10.11.2009)
способ получения композиции, содержащей высушенные бактерии, и ее применение - патент 2370525 (20.10.2009)
ферментативная модификация триглицеридных жиров - патент 2366693 (10.09.2009)