безводный кристаллический азидоцитозинполусульфат

Формула изобретения

1. Соль, представляющая собой полусульфат 1-[4(S)-азидо-2(S),3(R)-дигидрокси-4-(гидроксиметил)-1(R)-циклопентил]цитозина (Ia)

2. Кристаллическая форма (форма А) полусульфата по п.1, по существу характеризующаяся картиной порошковой дифракции рентгеновских лучей с D-параметром решетки (межплоскостное расстояние), как показано:

D-параметр	I/Ioґ100	D-параметр	I/Ioґ100
17,5556	26,35	4,3828	35,14
10,2507	18,39	4.1366	78,45
8,5821	15,58	4,1093	83,40
7,2181	8,75	3,7211	18,57
6,2309	62,70	3,6167	56,83
5,8186	100	2,9787	32,98
5,5808	30,52

3. Кристаллическая форма (форма В) полусульфата по п.1, по существу характеризующаяся картиной порошковой дифракции рентгеновских лучей с D-параметром решетки (межплоскостное расстояние), как показано:

D-параметр	I/Ioґ100	D-параметр	I/Ioґ100
22,8037	21,10	4,3696	100
18,9103	13,09	4,1814	81,04
16,7391	36,12	3,3481	36,97
13,1075	18,80	3,2741	33,51
5,7242	74,54	2,6227	19,75

4. Кристаллическая форма (форма С) полусульфата по п.1, по существу характеризующаяся картиной порошковой дифракции рентгеновских лучей с D-параметром решетки (межплоскостное расстояние), как показано:

D-параметр	I/Ioґ100	D-параметр	I/Ioґ100
7,7865	9,39	4,7788	100
6,1199	5,71	3,9577	46,41
6,0219	3,97	3,8939	71,89
5,6949	9,68	3,7099	90,29
5,4499	1,90	3,0178	26,81
5,1928	13,72	2,7752	12,02
4,9757	1,90

5. Способ получения кристаллической формы А соединения Ia, по существу характеризующейся значениями D-параметра решетки (межплоскостное расстояние) такими, как указано:

D-параметр	I/Ioґ100	D-параметр	I/Ioґ100
17,5556	26,35	4,3828	35,14
10,2507	18,39	4.1366	78,45
8,5821	15,58	4,1093	83,40
7,2181	8,75	3,7211	18,57
6,2309	62,70	3,6167	56,83
5,8186	100	2,9787	32,98
5,5808	30,52

включающий кристаллизацию соединения (I)

из этанольного раствора серной кислоты, выдержанного при приблизительно 70°С в течение 3 ч.

6. Способ получения кристаллической формы В соединения Ia, по существу характеризующейся значениями D-параметра решетки (межплоскостное расстояние) такими, как указано:

D-параметр	I/Ioґ100	D-параметр	I/Ioґ100
22,8037	21,10	4,3696	100
18,9103	13,09	4,1814	81,04
16,7391	36,12	3,3481	36,97
13,1075	18,80	3,2741	33,51
5,7242	74,54	2,6227	19,75

включающий кристаллизацию соединения (I)

из смеси изопропанол/вода (в соотношении 9:1) и серной кислоты.

7. Способ получения кристаллической формы С соединения Ia, по существу характеризующейся значениями D-параметра решетки (межплоскостное расстояние) такими, как указано:

D-параметр	I/Io ґ 100	D-параметр	I/Io ґ 100
7,7865	9,39	4,7788	100
6,1199	5,71	3,9577	46,41
6,0219	3,97	3,8939	71,89
5,6949	9,68	3,7099	90,29
5,4499	1,90	3,0178	26,81
5,1928	13,72	2,7752	12,02
4,9757	1,90

включающий кристаллизацию соединения I

из смеси изопропанол/вода (в соотношении 2:1) в присутствии серной кислоты.

8. Способ по п.7, согласно которому значение рН смеси изопропанол/вода устанавливают на уровне от приблизительно 5 до приблизительно 3, используя серную кислоту.

9. Способ лечения заболевания, обусловленного вирусом гепатита С, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения формулы Ia

10. Способ по п.9, согласно которому указанное соединение представляет собой кристаллическую форму А соединения Ia.

11. Способ по п.9, согласно которому указанное соединение представляет собой кристаллическую форму В соединения Ia.

12. Способ по п.9, согласно которому указанное соединение представляет собой кристаллическую форму С соединения Ia.

13. Фармацевтическая композиция, обладающая противовирусным действием в отношении гепатита С, включающая эффективное количество соли, представляющей собой полусульфат соединения Ia, в смеси по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем или наполнителем.

14. Фармацевтическая композиция по п.13, где указанный полусульфат представляет собой кристаллическую форму С.

Описание изобретения к патенту

Настоящее изобретение относится к соли - полусульфату (гемисульфату) 1-[4(S)-азидо-2(S),3(R)-дигидрокси-4-(гидроксиметил)-1(R)-циклопентил]цитозина Ia с повышенной стабильностью и улучшенными физическими свойствами, что облегчает производство, транспортировку соединения и приготовление композиций на основе соединения формулы I, a также к его полиморфным кристаллическим формам. Настоящее изобретение, кроме того, относится к способам получения полиморфных кристаллических форм соединения формулы Ia:

Соединение 1-[4(S)-азидо-2(S),3(R)-дигидрокси-4-(гидроксиметил)-1(R)-циклопентил] цитозин I является эффективным противовирусным средством (U.S. Pat. Application 10/167,106 file June 11, 2002; J.G. Moffatt, Nucleoside Analogs; R.T. Walker, E. DeClercq, F. Eckstein, Eds., Plenum Publishing, New York, 1979, p.144; H. Maag et al., J. Med. Chem. 1992 35:1440-1451). Хотя биологическая активность является необходимым условием эффективности лекарственного средства, соединение должно быть подходящим для его изготовления в значительных количествах, причем физические свойства соединения могут оказать большое влияние на эффективность и стоимость используемого для приготовления композиций активного ингредиента. Хотя это соединение обладает высокой противовирусной активностью, применение свободного основания I ограничено из-за его термической нестабильности, низкой кристалличности и гигроскопичности, что создает проблемы при проведении каких-либо операций с этим соединением и при приготовлении композиций.

Соли кислотных или основных соединений могут обладать видоизмененными или улучшенными физическими свойствами по сравнению с исходными соединениями. Такие солеобразующие агенты, однако, должны быть эмпирически идентифицированы специалистом в области фармацевтической химии, поскольку нет надежных методов, позволяющих предсказать влияние образования соли исходного соединения на свойства, которые проявятся в дозированных формах. Эффективные методики скрининга, которые могли бы упростить процесс отбора, к сожалению, отсутствуют (G.W. Radebaugh, L.J. Ravin Preformulation. In: Remington: The Science and Practice of Pharmacy; A.R. Gennaro Ed.; Mack Publishing Co. Easton, PA, 1995; pp.1456-1457).

Среди фармацевтически полезных соединений часто можно встретить различные полиморфные формы солей. Полиморфизм представляет собой способность какого-либо элемента или соединения кристаллизоваться с образованием более чем одной определенной кристаллической структуры. Физические свойства, включая растворимость, температуру плавления, плотность, твердость, тип кристаллической решетки и стабильность, могут быть совершенно различными у различных полиморфных форм одного и того же химического соединения.

Полиморфные формы характеризуют с использованием методов рассеивания, например, таких как дифракция рентгеновских лучей на порошке, с использованием спектроскопических методов, например, таких как инфракрасная спектроскопия, ¹³С ядерный магнитный резонанс и с использованием методов термического анализа, например, таких как дифференциальная сканирующая калориметрия или дифференциальный термический анализ. Соединение, являющееся предметом настоящего изобретения, наилучшим образом может быть охарактеризовано посредством картины порошковой дифракции рентгеновских лучей, регистрируемой с использованием методик, хорошо известных из предшествующего уровня техники. Обсуждение этих методик можно найти в: J. Haleblian, J. Pharm. Sci. 1975 64:1269-1288, and J. Haleblain and W. McCrone, J. Pharm. Sci. 1969 58:911-929. Хотя интенсивность максимумов на картине порошковой дифракции рентгеновских лучей для различных образцов полусульфата Ia может варьироваться незначительно, максимумы и их положение являются характеристическими для конкретной полиморфной формы.

Проблема, которую необходимо решить, заключается в том, чтобы идентифицировать подходящую соль, которая (i) обладает адекватной химической стабильностью во время осуществления процесса получения, (ii) может быть эффективно получена, очищена и выделена, (ii) обладает приемлемой растворимостью в фармацевтически приемлемых растворителях, (iii) удобна в обращении (т.е. характеризуется соответствующими текучестью и размером частиц) и подходит для изготовления композиций, не проявляя значительного разложения или изменения физических или химических характеристик соединения, (iv) обладает приемлемой химической стабильностью в составе композиции. В дополнение, весьма желательно получение солей, содержащих высокий молярный процент активного ингредиента, поскольку это минимизирует количество вещества, которое должно быть использовано в композиции и введено с получением при этом терапевтически эффективной дозировки. Эти часто взаимопротиворечащие требования приводят к тому, что идентификация подходящих солей представляет собой трудную и значительную проблему, которая должна быть решена специалистами в области фармацевтической науки и техники для того, чтобы разработки в области лекарственных средств смогли значительно продвинуться.

Настоящее изобретение относится к кристаллическим формам полусульфата 1-[4(S)-азидо-2(S),3(R)-дигидрокси-4-(гидроксиметил)-1(R)-циклопентил]цитозина (1а), способам получения полиморфных кристаллических форм соединения

фармацевтическим композициям, содержащим соль - полусульфат (гемисульфат) соединения (Ia), и способам лечения заболеваний, связанных с вирусом гепатита С, с использованием соли - полусульфата соединения (Ia).

Многочисленные объекты настоящего изобретения и преимущества настоящего изобретения могут быть непосредственно поняты специалистом в данной области техники с использованием прилагаемых фигур, на которых представлено следующее:

На фиг.1 приведена дифрактограмма для порошковой дифракции рентгеновских лучей полиморфной формы А соединения Ia.

На фиг.2 приведена дифрактограмма для порошковой дифракции рентгеновских лучей полиморфной формы В соединения Ia.

На фиг.3 приведена дифрактограмма для порошковой дифракции рентгеновских лучей полиморфной формы С соединения Ia.

На фиг.4 приведена кривая дифференциальной сканирующей калориметрии для свободного основания I.

На фиг.5 приведена кривая дифференциальной сканирующей калориметрии для полиморфной кристаллической формы С соединения Ia.

Неожиданно было обнаружено, что полусульфат соединения I является значительно более стабильным, чем свободное основание, и в дополнение, является безводной негигроскопичной кристаллической солью с превосходными свойствами по сравнению с другими солями. Были выделены и идентифицированы три новые безводные полиморфные формы соли - полисульфата соединения I - форма А, форма В и форма С. Формы А и В трансформируются в форму С в присутствии влаги.

В соответствии с одним из вариантов настоящего изобретения предлагается соль - полусульфат 1-[4(S)-азидо-2(S),3(R)-дигидрокси-4-(гидроксиметил)-1(R)-циклопентил] цитозина (Ia) и его сольваты.

В соответствии с другим вариантом настоящего изобретения предлагается полиморфная кристаллическая форма (форма А) соединения по п.1 формулы изобретения с такой картиной дифракции рентгеновских лучей, как показано на фиг.1.

В соответствии с еще одним вариантом осуществления настоящего изобретения предлагается способ получения полиморфной кристаллической формы соединения Ia (форма А) посредством кристаллизации соединения (I) из выдержанного этанольного раствора серной кислоты.

В соответствии с еще одним вариантом осуществления настоящего изобретения предлагается способ получения полиморфной кристаллической формы соединения Ia (форма В) с картиной дифракции рентгеновских лучей, приведенной на фиг.2.

В соответствии с еще одним вариантом осуществления настоящего изобретения предлагается способ получения полиморфной кристаллической формы соединения Ia посредством кристаллизации соединения (I) из смеси изопропанол/вода (в соотношении 85:15) и серной кислоты.

В соответствии с еще одним вариантом осуществления настоящего изобретения предлагается полиморфная кристаллическая форма соединения Ia (форма С) с картиной дифракции рентгеновских лучей, приведенной на фиг.3.

В соответствии с еще одним вариантом осуществления настоящего изобретения предлагается способ получения указанной полиморфной кристаллической формы С соединения Ia посредством кристаллизации соединения I из смеси изопропанол/вода (в соотношении 60:40) в присутствии серной кислоты. В соответствии с другим вариантом настоящего изобретения величину рН раствора для перекристаллизации - смеси изопропанол/вода - доводят до значения, составляющего от приблизительно 5 до приблизительно 3, используя серную кислоту.

В соответствии с еще одним вариантом осуществления настоящего изобретения предлагается способ лечения заболевания, связанного с вирусом гепатита С посредством введения пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества полиморфной формы А соединения Ia.

В соответствии с еще одним вариантом осуществления настоящего изобретения предлагается способ лечения заболевания, связанного с вирусом гепатита С, посредством введения пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества полиморфной формы В соединения Ia.

В соответствии с еще одним вариантом осуществления настоящего изобретения предлагается способ лечения заболевания, связанного с вирусом гепатита С, посредством введения пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества полиморфной формы С соединения Ia.

В соответствии с еще одним вариантом осуществления настоящего изобретения предлагается способ лечения заболевания, связанного с вирусом гепатита С, посредством введения пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения Ia, в дозе, составляющей от 1 до 100 мг/кг массы тела пациента/день.

В соответствии с еще одним вариантом осуществления настоящего изобретения предлагается способ лечения заболевания, связанного с вирусом гепатита С, посредством введения пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения Ia в комбинации с модулятором иммунной системы.

В соответствии с еще одним вариантом осуществления настоящего изобретения предлагается способ лечения заболевания, связанного с вирусом гепатита С, посредством введения пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения Ia в комбинации с интерфероном или химически модифицированным интерфероном.

В соответствии с еще одним вариантом осуществления настоящего изобретения предлагается фармацевтическая композиция, включающая соль-полусульфат соединения I в смеси с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым носителем или наполнителем.

Нуклеозид I представляет собой органический азид, который является потенциально термически нестабильным. При анализе методом дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) соединения I эндотермическое изменение, соответствующее плавлению, не определяется. Регистрируется большой экзотермический пик разложения, начальная температура приблизительно 150°С, максимальный расход тепла при 198°С, с регистрируемым значением энтальпии, составляющим - 1053 Дж/г.

Все полиморфные формы соли-полусульфата соединения Ia проявляют лучшую термическую стабильность, чем исходное соединение I и различные другие соли. Данные дифференциальной сканирующей калориметрии формы А соединения Ia свидетельствуют об экзотермическом разложении с началом приблизительно при 185°С. Форма В соединения Ia характеризуется началом экзотермического разложения при приблизительно 189°С. Форма С соединения Ia характеризуется началом экзотермического разложения при приблизительно 210°С.

По данным экспресс-калориметрического исследования (ARC) (условия адиабатической калориметрии) свободного основания I регистрируется значительное экзотермическое разложение, со скорректированной температурой начала разложения, составляющей 102°С, адиабатическим подъемом температуры 388°С и энтальпией, составляющей - 194 кал/г. Форма С соли-полусульфата Ia, в противоположность этому, характеризуется скорректированной температурой начала разложения, составляющей 152°С, адиабатическим подъемом температуры 265°С и энтальпией, составляющей - 132 кал/г, что существенно снижает риск разложения в процессе получения и переработки.

Получение солей-полусульфатов также обеспечивает улучшенные физические свойства и характеристики, облегчающие манипуляции, как показано в таблице. При анализе полиморфной формы методом экспресс-калориметрии при высокой температуре или высокой температуре в сочетании с повышенной относительной влажностью не наблюдается никаких изменений химической чистоты или структуры полиморфной формы. Соль-полусульфат представляет собой кристаллическое вещество с высокой насыпной плотностью, с этой солью проще осуществлять манипуляции, чем со свободным основанием, о чем свидетельствуют возросшая степень использования и повышенная текучесть. Как обнаружено, соль-полусульфат также является менее гигроскопичной, чем свободное основание. Не наблюдается прирост массы при хранении соединения Ia в условиях высокой относительной влажности. Вследствие негигроскопичной природы безводный кристаллический полусульфат соединения I лучше сохраняет внешний вид, физические свойства и высокую способность к переработке в течение длительного периода времени. Улучшение внешнего вида и физических свойств дозированной формы лекарственного средства приводит к увеличению привлекательности лекарственного средства как для врачей, так и для пациентов и повышает вероятность успеха проведения лечения.

Физические свойства формы С полусульфата соединения Ia
Условия	Время	Внешний вид	Прирост массы	Полиморфная форма	Анализ
93% OB	4 недели	белый порошок	0%	Форма С	99,9
60°С	1 неделя	белый порошок	Н/А	Форма С	99,9
	2 недели	белый порошок	Н/А	Н/А	99,9
	4 недели	белый порошок	Н/А	Форма С	99,9
40°С/75% OB	1 неделя	белый порошок	Н/А	Форма С	99,9
	2 недели	белый порошок	Н/А	Н/А	99,9
	4 недели	белый порошок	Н/А	Форма С	99,9
ОВ = относительная влажность; Н/А = не анализировали

Образование полусульфата вносит незначительный вклад в увеличение молекулярной массы активного ингредиента, таким образом, соль характеризуется высоким процентным содержанием исходного соединения, что приводит к минимизации количества активного ингредиента, которое нужно вводить пациенту. Поскольку нуклеозиды часто характеризуются низкой биодоступностью, это обеспечивает дополнительные преимущества соединений согласно настоящему изобретению.

Использования грамматической формы единственного числа существительного при использовании в тексте настоящей заявки подразумевает также и множественное число, т.е., например, термин "соединение" относится к одному или более, чем одному соединению, или к по меньшей мере одному соединению. Таким образом, использование формы единственного числа, словосочетаний "одно или более" или "по меньшей мере одно" в тексте настоящей заявки может быть взаимозаменяемым.

Термин "полусульфат" при использовании в тексте настоящей заявки означает соль, в которой присутствует два молярных эквивалента свободного основания на каждый молярный эквивалент серной кислоты.

Термин "сольват" при использовании в тексте настоящей заявки означает соединение согласно настоящему изобретению или его соль, которые дополнительно включают стехиометрическое или нестехиометрическое количество растворителя, связанное нековалентными межмолекулярными связями.

Термин "гидрат" при использовании в тексте настоящей заявки означает соединение согласно настоящему изобретению или его соль, которые дополнительно включают стехиометрическое или нестехиометрическое количество воды, связанное нековалентными межмолекулярными связями. Гидраты формируются при объединении одной или более молекул воды с одной или более молекулой одного из соединений, причем вода остается в своем молекулярном состоянии, как Н₂О, такая комбинация может приводить к образованию одного или более гидрата.

Термин "клатрат" при использовании в тексте настоящей заявки означает соединение согласно настоящему изобретению или его соль, в кристаллической решетке которых имеются области (например, каналы), в которых располагаются захваченные молекулы - "гости" (например, растворитель или вода).

Термин "полиморфные" или "кристаллические формы" при использовании в тексте настоящей заявки означает кристаллические структуры, в которых соединение может кристаллизоваться с формированием различных кристаллических упаковок, каждая из которых имеет тот же самый элементарный состав. Различные кристаллические формы обычно характеризуются различными картинами дифракции рентгеновских лучей, инфракрасными спектрами, температурами плавления, плотностью, твердостью, формой кристаллов, оптическими и электрическими свойствами, стабильностью и растворимостью. Растворитель для перекристаллизации, скорость кристаллизации, температура хранения и другие факторы могут приводить к преобладанию одной кристаллической формы.

Термин "иммуномодулятор" при использовании в тексте настоящей заявки означает терапевтический агент, который способствует или способен модифицировать или регулировать иммунные функции. Такой агент вызывает иммунологическую корректировку, регулирование или потенцирование.

Термин "интерферон" при использовании в тексте настоящей заявки означает семейство белков, способных интерферировать с вирусной инфекцией клеток, а также ингибировать пролиферацию нормальных и трансформированных клеток, регулировать дифференцировку клеток и модулирование иммунной системы. Четыре основных антигенных типа интерферона ( , , и ) определяются клеточным источником их продуцирования. Тип I интерферонов (интерфероны , , и ) конкурирует с каждым из других в отношении клеточного связывания с рецептором интерферона типа I и, таким образом, использует по меньшей мере некоторые компоненты этой мульти-субъединичной поверхности клеточных рецепторов, в то время как рецептор интерферона типа II (интерферон ) является отличным от других интерферонов. Как имеющиеся в природе, так и рекомбинантные интерфероны могут быть введены посредством комбинационной терапии вместе с соединениями согласно настоящему изобретению. Обобщенная типичная последовательность для интерферона описана в патенте США №4897471 (Y. Stabinsky).

Термин "химически модифицированный интерферон" при использовании в тексте настоящей заявки относится к молекуле интерферона, ковалентно присоединенной к полимеру, который видоизменяет физические и/или фармакокинетические свойства интерферона. Неограничивающий перечень таких полимеров включает гомополимеры полиалкиленоксида, например, такие как полиэтиленгликоль (ПЭГ) или полипропиленгликоль (ППГ), полиоксиэтилированные полиолы, их сополимеры и их блоксополимеры, при условии, что сохраняется водорастворимость блоксополимеров. Специалисту в данной области техники известны многочисленные методы присоединения интерферона к полимеру (например, см. A. Kozlowski, J.M. Harris J. Control. Release 2001 72(1-3):217-24; С.W. Gilbert, M. Park-Cho, патент США. №5951974). Неограничивающий перечень химически модифицированных интерферонов , использование которых предполагается в настоящем патенте, включает ПЭГ-интерферон- -2а (торговая марка "PEGASYS®") и ПЭГ-интерферон- -2b (торговая марка «PEGINTRON »).

Композиции соединений формулы I могут быть получены способами, хорошо известными в области приготовления композиций из предшествующего уровня техники. Следующие примеры (ниже) приводятся для того, чтобы дать возможность специалисту в данной области техники более четко понять и использовать на практике настоящее изобретение. Эти примеры не следует рассматривать как ограничивающие объем настоящего изобретения, они приводятся главным образом как иллюстрирующие и поясняющие изобретение.

Соли-полусульфаты согласно настоящему изобретению могут быть введены в виде множества форм для перорального или парентерального введения. Дозированные формы для перорального введения могут представлять собой таблетки, таблетки с покрытием, драже, твердые и мягкие желатиновые капсулы, растворы, эмульсии, сиропы или суспензии. Парентеральное введение включает внутривенное, внутримышечное, внутрикожное, подкожное, интрадуоденальное или интраперитональное введение. Дополнительно соли, являющиеся предметом настоящего изобретения, могут быть введены посредством трансдермального введения (при этом может быть использован промотор всасывания), посредством трансбуккального, назального введения и с использованием суппозиториев. Также соли могут быть введены посредством ингаляции.

Для получения фармацевтических композиций из соединений согласно настоящему изобретению могут быть использованы либо твердые, либо жидкие носители. Препараты в твердом состоянии включают порошки, таблетки, пилюли, твердые и мягкие желатиновые капсулы, облатки, драже, суппозитории и диспергируемые гранулы. Твердый носитель может представлять собой одно или более вещество, которое может также быть использовано как разбавитель; агент, улучшающий вкус и запах; солюбилизатор; агент, улучшающий скольжение; суспендирующий агент, связующее, консервант; агент, способствующий распаду лекарственной формы и материал для инкапсулирования.

В случае порошков носитель представляет собой твердое вещество, которое диспергировано в смеси с тонко измельченным активным компонентом. В случае таблеток активный компонент смешивают с носителем, обладающим необходимыми свойствами связующего, в подходящем соотношении, и прессуют, придавая необходимую форму и размер.

Подходящие наполнители для таблеток, таблеток с покрытием, драже и твердых желатиновых капсул представляют собой, например, лактозу, кукурузный крахмал и его производные, карбонат магния, стеарат магния, сахар, лактозу, пектин, декстрин, крахмал, желатин, трагакант, метилцеллюлозу, натриевую соль карбоксиметилцеллюлозы, тальк и жирные кислоты или их соли, например стеариновую кислоту. Если необходимо, таблетки или капсулы могут быть с растворимым в кишечнике покрытием или представлять собой форму с замедленным высвобождением. Подходящие наполнители для мягких желатиновых капсул, представляют собой, например, растительные масла, воски, жиры, полутвердые и жидкие полиолы.

Препараты в жидком состоянии включают растворы, суспензии, удерживающие клизмы и эмульсии, например растворы в воде или смеси вода/пропиленгликоль. Для парентеральных инъекций жидкие препараты могут быть приготовлены в виде раствора в воде или в смеси вода/пропиленгликоль.

Водные растворы, пригодные для перорального применения, могут быть получены растворением активного компонента в воде и добавления подходящих подкрашивающих веществ, веществ, улучшающих вкус и запах, стабилизаторов и загустителей, если это требуется. Водные суспензии, пригодные для перорального применения, могут быть приготовлены посредством диспергирования тонко измельченного активного компонента в воде вместе с веществом с высокой вязкостью, например, таким как природные или синтетические смолы, полимеры, метилцеллюлоза, натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы, и с другими хорошо известными диспергирующими агентами. Подходящие наполнители для растворов и сиропов, предназначенных для энтерального использования, представляют собой, например, воду, полиолы, сахарозу, инвертный сахар и глюкозу. Подходящие наполнители для растворов для инъекций представляют собой, например, воду, физиологический раствор, спирты, полиолы, например полиалкиленгликоли, глицерин или растительные масла.

Композиции также могут содержать, в дополнение к активному компоненту, подкрашивающие вещества, вещества, улучшающие вкус и запах, стабилизаторы, буферные вещества, искусственные и природные подсластители, диспергаторы, загустители, солюбилизирующие агенты, консерванты, агенты, улучшающие смачиваемость, эмульгаторы, соли для регулирования осмотического давления, маскирующие агенты, антиоксиданты и подобные вещества.

Поскольку соединения, являющиеся предметом настоящего изобретения, растворимы в воде, их можно вводить внутривенно в физиологическом солевом растворе (например, забуференном до значения рН, приблизительно равного от 7,2 до 7,5). В такой композиции могут быть использованы обычные буферы, такие как фосфатный, бикарбонатный или цитратный.

В объем настоящего изобретения также входят препараты в твердом состоянии, которые, как предполагается, могут быть превращены, непосредственно перед использованием, в препараты, находящиеся в жидком состоянии, предназначенные для перорального введения.

Для приготовления суппозиториев подходящие наполнители включают природные и отвержденные масла, воски, глицериды жирных кислот, полутвердые или жидкие полиолы. Расплавленные гомогенные смеси затем выливают в формы подходящего размера, дают остыть и затем отверждают.

Подходящие фармацевтические носители, наполнители и их составы описаны в: Remington: The Science and Practice of Pharmacy 1995, edited by E.W. Martin, Mack Publishing Company, 19th edition, Easton, Pennsylvania. Типичные фармацевтические композиции, содержащие соединение согласно настоящему изобретению, описаны в примерах 7-9.

Дозировка может варьироваться в широких пределах, и в каждом конкретном случае будет регулироваться в соответствии с индивидуальными требованиями пациента и степени выраженности симптомов состояния, подлежащего лечению. Типичный препарат будет содержать от приблизительно 5% до приблизительно 95% активного соединения (мас./мас.). Для перорального введения подходящая дневная дозировка будет составлять от приблизительно 0,01 и до приблизительно 100 мг/кг массы тела при монотерапии и/или при комбинационной терапии. Предпочтительная дневная дозировка составляет от приблизительно 0,1 и до приблизительно 300 мг/кг массы тела, более предпочтительно от 1 и до приблизительно 100 мг/кг массы тела, и наиболее предпочтительно - от 1,0 и до приблизительно 50 мг/кг массы тела в день. Определение подходящей дозировки в конкретном случае находится в пределах компетенции специалиста в данной области техники. Как правило, лечение начинают с меньших дозировок, которые меньше, чем оптимальная дозировка соединения. Затем дозировку повышают с небольшим возрастанием до тех пор, пока не будет достигнут оптимальный при данных обстоятельствах эффект. Дневная доза может быть введена как единичная доза или разделенной на несколько дозировок, обычно от 1 до 5 дозировок в день.

Фармацевтические препараты предпочтительно находятся в виде единичных дозированных форм. В такой форме препарат разделен на единичные дозы, содержащие подходящее количество активного компонента. Единичная дозированная форма может представлять собой препарат в упаковке, причем упаковка содержит дискретные количества препарата, примером являются таблетки в упаковке, капсулы и порошки во флаконах или ампулах. Кроме того, единичная дозированная форма может представлять собой капсулу, таблетку, облатку или леденец в отдельности, или их подходящее количество в упакованном виде.

Нуклеозидные производные или лекарственные формы на их основе могут быть использованы для монотерапии или для комбинационной терапии, т.е. лечение может осуществляться в сочетании с введением одного или более дополнительного терапевтически активного вещества (или веществ), например, модулятора иммунной системы, например, такого как интерферон, интерлейкин, фактор некроза опухоли, колониистимулирующий фактор или противовоспалительный агент или противовирусный агент. В том случае, когда лечение представляет собой комбинационную терапию, такое введение может быть совместным или последовательным по отношению к нуклеозидным производным. Термин "совместное введение" при использовании в тексте настоящей заявки включает таким образом введение агентов в одно и тоже время или в различное время. Фармацевтическая композиция может необязательно содержать другие терапевтически активные агенты, известные из предшествующего уровня техники.

Указание в тексте настоящей заявки относительно лечения распространяется и на профилактику заболеваний, связанных с гепатитом, а также на лечение существующих состояний, причем лечение живых организмов включает как лечение людей, так и лечение других животных. Кроме того, лечение заболеваний, вызываемых инфицированием вирусом гепатита С (HCV), при использовании в тексте настоящей заявки также включает лечение или профилактику заболевания или состояния, связанного с инфицированием вирусом гепатита С или опосредованного вирусом гепатита С, или его клинических симптомов.

Нуклеозидные производные или лекарственные формы на их основе могут быть использованы для монотерапии или для комбинационной терапии, т.е. лечение может осуществляться в сочетании с введением одного или более дополнительного терапевтически активного вещества (или веществ), например, модулятора иммунной системы, например, такого как интерферон, интерлейкин, фактор некроза опухоли, колониистимулирующий фактор или противовоспалительный агент или противовирусный агент. В том случае, когда лечение представляет собой комбинационную терапию, такое введение может быть совместным или последовательным по отношению к 4'-замещенным нуклеозидным производным. Термин "совместное введение" при использовании в тексте настоящей заявки включает, таким образом, введение агентов в одно и тоже время или в различное время.

Необходимо понимать, что указание в тексте настоящей заявки на лечение также распространяется и на профилактику имеющихся состояний, причем лечение живых организмов включает как лечение людей, так и лечение других животных. Кроме того, лечение заболеваний, вызываемых инфицированием вирусом гепатита С (HCV), при использовании этого термина в тексте настоящей заявки также включает лечение или профилактику заболевания или состояния, связанного с инфицированием вирусом гепатита С или опосредованного с инфицированием вирусом гепатита С, или соответствующих клинических симптомов.

Получение соединений формулы I описано в: U.S. Ser. № 10/167,106, этот документ включен в качестве ссылки в полном объеме.

Пример 1

Полиморфная форма А

Свободное основание (2,0 г) растворяют в 50 мл горячего (приблизительно 60°С) этанола и добавляют раствор 0,18 г концентрированной серной кислоты, растворенной в 2 мл этанола. Полученную суспензию выдерживают при приблизительно 70°С в течение 3 час и затем дают остыть до комнатной температуры. Полученный осадок отфильтровывают (очень медленная фильтрация), промывают этанолом и высушивают в вакууме при приблизительно 70°С, получая при этом 2,1 г полиморфной формы А соединения Ia. Данные дифференциальной сканирующей калориметрии свидетельствуют о начале проявления экзотермичности при 185°С. Дифрактограмма для дифракции рентгеновских лучей, продуцируемой полиморфной формой, приведена на фиг.1.

Пример 2

Полиморфная форма В

Свободное основание (0,5 г) растворяют в 10 мл теплого (приблизительно 40°С) раствора изопропанол-вода (в соотношении 9:1) и добавляют 1 мл раствора 0,875 г концентрированной серной кислоты, растворенной в 10 мл смеси изопропанол-вода (в соотношении 9:1). Полученную густую суспензию разбавляют, используя 10 мл смеси изопропанол-вода (в соотношении 9:1) и 1 мл воды. Полученную суспензию выдерживают при температуре окружающей среды в течение приблизительно 2 час и выпавший в осадок продукт отфильтровывают, промывают изопропанолом и гексаном и высушивают до постоянной массы, используя мягкий вакуум с получением при этом 0,56 г полиморфной формы В соединения формулы Ia. Данные дифференциальной сканирующей калориметрии свидетельствуют о начале проявления экзотермичности при 189°С. Дифрактограмма для дифракции рентгеновских лучей, продуцируемой полиморфной формой, показана на фиг.2.

Пример 3

Полиморфная форма С

Свободное основание (3,0 г) растворяют в растворе изопропанола (20 мл) и воды (10 мл) и затем нагревают раствор до приблизительно 60°С. Медленно добавляют раствор разбавленной (приблизительно 10%) серной кислоты, доводя величину рН до приблизительно 3. Полученный раствор выдерживают при приблизительно 65-70°С в течение приблизительно 2 час до тех пор, пока не образуется плотный кристаллический осадок. Полученную суспензию охлаждают до температуры окружающей среды, отфильтровывают, промывают изопропанолом и высушивают в вакууме при приблизительно 70°С, получая при этом 2,8 г полиморфной формы С соединения формулы Ia. Данные дифференциальной сканирующей калориметрии свидетельствуют о начале проявления экзотермичности при 210°С. Дифрактограмма для дифракции рентгеновских лучей, продуцируемой полиморфной формой, показана на фиг.3.

Вычислено для С₁₈Н₂₆Н ₁₂О₁₄S: С, 32,44; Н 3,93; N, 25,22; S 4,81; найдено: С, 32,37; Н, 3,90; N, 25,08; S, 4,80.

Пример 4

Порошковую рентгеновскую дифракцию образцов полиморфных кристаллов измеряют дифрактометром для рентгеновского анализа порошка "Scintag XI powder X-ray diffractometer", снабженном запаянным медным источником излучения К 1. Образцы сканируют от 2° до 40° 2 со скоростью 3° в минуту, ширина щелей для недифрагировавшего пучка составляет от 4 до 2 микрон, а ширина щелей для дифрагировавшего пучка составляет от 0,5 до 0,2 микрон.

Пример 5

В этом примере описан способ определения термических характеристик формы С соединения Ia и 1-[4(S)-азидо-2(S),3(R)-дигидрокси-4-(гидроксиметил)-1(R)-циклопентил]цитозина (I) методом дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК). Используется прибор "Perkin-Elmer DSC-2" со скоростью нагрева 10° в минуту и чувствительностью 5 мкал в секунду; или "ТА DSC 2910" со сканированием 5°С/мин.

Пример 6

Гигроскопичность формы С соединения Ia при относительной влажности, равной 93%, приведена в таблице 1. Небольшое количество кристаллов полиморфной формы С (приблизительно 10 мг) взвешивают в бюксе для взвешивания и помещают в камеру с контролируемой относительной влажностью на 4 недели и вычисляют процент абсорбированной воды по приросту массы. Образец также исследуют, используя ЖХВР по отношению к внешнему стандарту на приборе "Waters 2690 HPLC" при 276 нм с использованием колонки "Zorbax SB-Phenyl". Мобильная фаза, которую подают со скоростью 1 мл/мин, состоит из смеси ацетонитрил/вода с 10 мМ гептансульфоновой кислоты, 0,1% фосфорной кислоты. Градиент изменяется от 10% ACN до 100% в течение 30 мин. Данные анализируют с использованием программного обеспечения "Waters Millennium software", версия 3,2. Термическую стабильность также определяют при 60°С и в условиях 40°С/75%-ная относительная влажность. Чистоту образца определяют анализом аликвот по массе посредством ЖХВР против внешнего стандарта. Экспериментальные данные подтверждают, что полиморфная форма С негигроскопична и термически стабильна при 40 и 60°С в течение проведения исследования.

Пример 7

Композиция для перорального введения

Ингредиент	% мас./мас.
Активный ингредиент	20,0
Лактоза	79,5
Стеарат магния	0,5

Ингредиенты смешивают и помещают в капсулы, каждая из которых содержит приблизительно 100 мг; одна капсула примерно соответствует одной суммарной дневной дозе.

Пример 8

Композиция для перорального введения

Ингредиент	% мас./мас.
Активный ингредиент	20,0
Стеарат магния	0,5
Кросскармелоза, натриевая соль	2,0
Лактоза	76,5
ПВП (поливинилпирролидон)	1,0

Ингредиенты объединяют и гранулируют, используя растворитель, такой как метанол. Состав затем высушивают и формируют таблетки (содержащий приблизительно 20 мг активного соединения), используя соответствующее устройство для изготовления таблеток.

Пример 9

Композиция для перорального введения

Ингредиент	Количество
Активное соединение	1,0 г
Фумаровая кислота	0,5 г
Хлорид натрия	2,0 г
Метилпарабен	0,15 г
Пропилпарабен	0,05 г
Гранулированный сахар	25,5 г
Сорбит (70% раствор)	12,85 г
Смола "Veegum К" (фирма "Vanderbilt Co.")	1,0 г
Вещества, улучшающие вкус и запах	0,035 мл
Подкрашивающие вещества	0,5 мг
Дистиллированная вода	количество, необходимое для доведения до 100 мл

Ингредиенты смешивают до получения суспензии для перорального введения.

Для осуществления изобретения в его различных формах могут, по отдельности или в комбинации, использоваться признаки, раскрытые выше в описании или в приведенных ниже пунктах формулы изобретения, или в прилагаемых чертежах, выраженные в их конкретной форме или в терминах, определяющих признак через выполняемую раскрытую функцию или способ или процесс для достижения заявленного результата, как является подходящим.

Изложенное выше изобретение описано в некоторых подробностях посредством примеров и иллюстраций, в целях ясности и для лучшего понимания. Специалисту в данной области техники будет понятно, что в объеме прилагаемой формулы изобретения могут быть выполнены изменения и модификации. Таким образом, следует понимать, что приведенное выше описание приведено только для иллюстрации и не ограничивает объем изобретения. Следовательно, объем изобретения необходимо устанавливать не согласно ссылкам на приведенное выше описание, а посредством указания на приведенные ниже пункты формулы изобретения, с учетом всех эквивалентов признаков, содержащихся в формуле изобретения.

Все патенты, патентные заявки и публикации, цитированные в тексте настоящей заявки, включены в их полном объеме в качестве ссылки, во всех случаях цитирования в той степени, как это специально указано для каждого отдельного патента, патентной заявки и публикации.