агонизм 5нт_2a -рецептора для лечения нарушения функции терморегуляции

Формула изобретения

1. Комбинированный препарат для лечения расстройств функции терморегуляции, включающий в себя ингибитор повторного поглощения серотонина (SRI), представляющий собой флуоксетин, и антагонист 5HT_1a-рецептора, выбранный из группы, которую составляют N-[2-[4-(2-метоксифенил)-1-пиперазинил]этил]-N-2-пиридинилциклогексанкарбоксамид и (R)-N-(2-метил-(4-индолил-1-пиперазинил)этил)-N-(2-пиридинил)циклогексанкарбоксамид, в терапевтически эффективных количествах.

2. Применение ингибитора повторного поглощения серотонина (SRI), представляющего собой флуоксетин, и антагониста 5НТ_la-рецептора, выбранного из группы, которую составляют N-[2-[4-(2-метоксифенил)-1-пиперазинил]этил]-N-2-пиридинилциклогексанкарбоксамид и (R)-N-(2-метил-(4-индолил-1-пиперазинил)этил)-N-(2-пиридинил)циклогексанкарбоксамид, при изготовлении комбинированного препарата для лечения расстройств функции терморегуляции.

Описание изобретения к патенту

Область, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к способу лечения, предотвращения, облегчения либо подавления вазомоторной нестабильности и к композициям, которые обеспечивают достижение такого эффекта. Конкретнее, настоящее изобретение относится к соединениям и композициям соединений, а также вариантам их применения, которые посредством модуляции уровней серотонина (5НТ) активируют 5НТ_2а -рецептор. Настоящее изобретение дополнительно относится к способу повышения передачи сигнала 5НТ через 5НТ_2а -рецептор, используя комбинированный способ лечебного воздействия для лечения расстройств функции терморегуляции посредством применения комбинации антагониста 5НТ_1а-рецептора и ингибитора повторного поглощения серотонина (SRI), а также содержащих их фармацевтических композиций и продуктов.

Предпосылки создания изобретения

Общепризнанно, что причиной "приливов", которые могут подрывать здоровье и обусловливать потерю трудоспособности как мужчин, так и женщин, является колебание уровней половых стероидных гормонов. Продолжительность "приливов" может достигать тридцати минут с частотой от нескольких раз в течение недели до более десятка приступов в течение дня. Больной испытывает "прилив" в виде внезапно появляющегося ощущения тепла, быстро распространяющегося из области лица на грудную клетку и спину, а затем охватывающего все тело. Эти приступы, как правило, сопровождаются вспышками обильного потоотделения. Иногда они наблюдаются по несколько раз в течение часа и часто случаются в ночное время. "Приливы" и потоотделение, происходящие в ночное время, могут влечь за собой утрату сна, следствием чего является появление таких психологических и эмоциональных симптомов, как нервозность, усталость, раздражительность, бессонница, депрессивная утрата памяти, головная боль, тревога, нервная застенчивость либо неспособность сосредоточения внимания (Мерфи (Murphy) и другие, 3^rd Int'l Symposium on Recent Advances in Urological Cancer Diagnosis and Treatment Proceedings. Paris, France: SCI: 3-7 (1992)).

"Приливы" могут быть еще более тяжелыми у женщин, перенесших рак молочной железы, по нескольким причинам: 1) многие из перенесших рак молочной железы принимают тамоксифен, наиболее выраженным побочным действием которого являются "приливы", 2) у многих женщин, лечившихся по поводу рака молочной железы, наступила преждевременная менопауза вследствие химиотерапии, 3) у женщин с анамнезом рака молочной железы эстрогенотерапия, как правило, исключается из-за опасности потенциального рецидива рака молочной железы (Уолдингер (Waldinger) и другие, Maturitas, 2000, 36 (3): стр.165-168).

Мужчины также испытывают "приливы" после прекращения поступления стероидного гормона (андрогена). Это наблюдается в случаях возрастного снижения выработки андрогена (Катович (Katovich) и другие, Proceedings of the Society for Experimental Biology & Medicine, 1990, 193 (2): стр.129-135), а также в крайних случаях выключения эндокринной функции, связанных с лечением рака предстательной железы (Берендсен (Berendsen) и другие, European Journal of Pharmacology, 2001, 419 (1): стр.47-54). До одной трети из числа этих больных испытывают постоянные и частые симптомы, достаточно тяжелые для того, чтобы причинять ощущение значительного дискомфорта и неудобства.

Лечение климактерических "приливов" чаще всего осуществляют посредством гормонозаместительной терапии (перорально, чрезкожно либо посредством имплантатов), однако некоторые больные не переносят лечение эстрогеном либо андрогеном (Берендсен (Berendsen), Maturitas, 2000, 36 (3): стр.155-164), Финкет (Finket) и другие, Nature, 1996, 383 (6598): стр.306). Кроме того, гормонозаместительная терапия, как правило, не рекомендована для женщин или мужчин с повышенным риском возникновения либо имеющих диагностированные виды рака, чувствительные к гормональной терапии (например, рак молочной или предстательной железы). В связи с этим клиническую проверку проходят нестероидные лекарственные средства (например, флуоксетин (fluoxetine), пароксетин (paroxetine) и клонидин (clonidine)). В WO 99/44601 раскрыт способ ослабления "приливов" у женщин посредством введения флуоксетина. Исследуются другие варианты лечения "приливов", в том числе стероидами, альфа-адренергическими агонистами и бета-блокаторами, с различной степенью успеха (Уолдингер (Waldinger) и другие, Maturitas, 2000, 36 (3): стр.165-168).

Берендсен (Berendsen) и другие (European Journal of Pharmacology, 2001, 419 (1): стр.47-54) и Финк Г. (Fink G.) и другие (Clinical & Experimental Pharmacology & Physiology, 1998, 25 (10): стр.764-775) сообщали о показанности антагонистов 5НТ_2а-рецептора для лечения "приливов".

"Приливы" являются источником сильного нервно-физического напряжения. Критическим условием для поддержания нормальной функции терморегуляции является баланс половых гормонов и нейромедиаторов, однако механизмы, вовлеченные в расстройство функции терморегуляции, остаются, per se, в значительной мере неизвестными. При нарушениях функции терморегуляции часто оправданным является консервативное лечение, однако появления удовлетворительного лекарственного средства с немногими побочными эффектами в ближайшее время не ожидается. Соответственно, учитывая многогранную природу функции терморегуляции, для целенаправленного воздействия на вазомоторную нестабильность могут применяться многочисленные лекарственные средства и варианты подходов.

Настоящее изобретение сосредоточено на новых механизмах, стимулирующих передачу сигналов 5НТ_2а-рецептора для облегчения вазомоторной нестабильности.

Краткое изложение сущности изобретения

Настоящим изобретением предлагается способ лечения субъекта, страдающего от расстройств функции терморегуляции либо восприимчивого к ним, который включает введение субъекту терапевтически эффективного количества одного либо нескольких соединений, которые агонизируют 5НТ_2а-рецептор.

Предлагаются также способы агонизирования 5НТ _2а-рецептора эндогенно вырабатываемыми соединениями, например серотонином. Настоящее изобретение включает способ, согласно которому эндогенно вырабатываемый серотонин модулируется антагонистом 5HT_1a-рецептора и ингибитором повторного поглощения серотонина. Согласно некоторым аспектам настоящего изобретения антагонист 5НТ_1а-рецептора и ингибитор повторного поглощения серотонина могут предоставляться в виде единого соединения, обладающего двойной активностью. Предлагается также способ применения комбинированного лечебного воздействия, включающий введение субъекту эффективного количества первого компонента, которым является антагонист 5НТ_1а -рецептора, его производные и/или его фармацевтически приемлемые соли, в сочетании с эффективным количеством второго компонента, которым является ингибитор повторного поглощения серотонина, его производные и/или его фармацевтически приемлемые соли. Еще в одном варианте осуществления предлагается способ агонизирования 5НТ_2а-рецептора посредством введения любого из соединений, таких как флуоксетин, пароксетин, сертралин (sertraline), флувоксамин (fluvoxamine), амоксапин (amoxapine), доксепин (doxepin), бупропион (bupropion) и амитриптилин (amitriptyline) с антагонистом 5НТ_1а-рецептора.

Предлагается также способ, согласно которому 5НТ_2а-рецептор агонизируется экзогенно введенным соединением.

Настоящим изобретением предлагается также продукт, содержащий эффективное количество ингибитора повторного поглощения серотонина (SRI) и антагониста 5НТ_1а-рецептора в виде комбинированного препарата для одновременного, раздельного либо последовательного применения при лечении и/или профилактике расстройств функции терморегуляции.

Дополнительный аспект настоящего изобретения относится к применению агониста 5НТ_2а-рецептора при изготовлении лекарственного средства для лечения и/или профилактики расстройств функции терморегуляции.

Настоящим изобретением дополнительно предлагается применение ингибитора повторного поглощения серотонина и антагониста 5НТ_1а-рецептора при изготовлении комбинированного препарата для одновременного, раздельного или последовательного применения при лечении и/или профилактике упомянутых расстройств функции терморегуляции. Согласно предпочтительному варианту агонист 5НТ_2а -рецептора выбран из группы, которую составляют гидрохлорид 1-(2,5-диметокси-4-йодофенил)-2-аминопропана (DOI) и гидробромид (±)-2,5-диметокси-4-бромамфетамина (DOB). Ингибитор повторного поглощения серотонина согласно предпочтительному варианту выбран из группы, которую составляют флуоксетин, пароксетин, сертралин, флувоксамин, дулоксетин (duloxetine), амоксапин, доксепин, бупропион, циталопром (citaloprom) и амитриптилин. Антагонист 5НТ_1а-рецептора согласно предпочтительному варианту выбран из группы, которую составляют N-[2-[4-(2-метоксифенил)-1-пиперазинил]этил]-N-2-пиридинилциклогексанкарбоксамид (WAY-100635), (R)-N-(2-метил-(4-индолил-1-пиперазинил)этил)-N-(2-пиридинил)циклогексанкарбоксамид и моногидрат гидро-(2R,3R)-тартрата (R)-3-N,N-дициклобутиламино-8-фтор-3,4-дигидро-2Н-1-бензопиран-5-карбоксамида (NAD-299, производитель AstraZeneca) (Larsson L.G., Stenfors С., Ross S.B. (1998): Differential regional antagonism of 8-OH-DPAT-induced decrease in serotonin synthesis by two 5-HT1A receptor antagonists. Eur. J. Pharmacol. 346:209-215 (2000)). Наиболее предпочтительным антагонистом 5НТ_1а-рецептора является N-[2-[4-(2-метоксифенил)-1-пиперазинил]этил]-N-2-пиридинилциклогексанкарбоксамид.

Краткое описание фигур

Более полному пониманию изобретения служат приведенное ниже подробное описание и прилагаемые чертежи, которые являются составной частью этой заявки.

На Фиг.1А и Фиг.1В представлено воздействие 5НТ_2а -рецепторов на функцию терморегуляции (упоминается в Примере 1).

Фиг.2А и Фиг.2В показывают, что 5НТ _2с-рецепторы не вовлекаются в функцию терморегуляции в морфинозависимой модели (крысы) вазомоторной нестабильности (* означает р<0,05, по сравнению с контрольным носителем) (упоминается в Примере 2).

Фиг.3А и Фиг.3В показывают эффект переадресации передачи сигнала 5НТ на 5НТ_2а-рецептор с помощью комбинации ингибитора повторного поглощения серотонина и антагониста 5НТ_1а-рецептора на ослабление "прилива" (* означает р<0,05, по сравнению с контрольным носителем) (упоминается в Примере 3).

Фиг.4А и Фиг.4В показывают эффект антагониста 5HT_1a-рецептора в сочетании с ингибитором повторного поглощения серотонина на ослабление "прилива" (упоминается в Примере 4). Фиг.4А: * обозначает р<0,05, по сравнению с контрольным носителем; 2a -рецептора для лечения нарушения функции терморегуляции, патент № 2340333" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> обозначает р<0,05, по сравнению с флуоксетином (10 мг/кг). Фиг.4В: * обозначает р<0,05, по сравнению с контрольным носителем; 2a -рецептора для лечения нарушения функции терморегуляции, патент № 2340333" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> обозначает р<0,05, по сравнению с WAY-100635 (0,1 мг/кг); Ф обозначает р<0,05, по сравнению с WAY-100635 (1,0 мг/кг).

Фиг.5А показывает способность антагониста 5НТ _2а-рецептора (MDL-100907) блокировать комбинацию ингибитора повторного поглощения серотонина, например флуоксетина, и антагониста 5НТ_1а-рецептора (WAY-100635). На Фиг.5В представлена доза (10 мг/кг) флуоксетина (соединение-ингибитор повторного поглощения серотонина), неэффективная в отношении ослабления "прилива", однако потенцируемая антагонистом 5НТ_2а-рецептора. Фиг.5С показывает, что эффективная доза (30 мг/кг) флуоксетина (соединение-ингибитор повторного поглощения серотонина) подобным же образом потенцируется антагонистом 5НТ_2а-рецептора (упоминается в Примере 5). * обозначает р<0,05, по сравнению с контрольным носителем; Ф обозначает р<0,05, по сравнению с MDL-100907 (0,01 мг/кг); 2a -рецептора для лечения нарушения функции терморегуляции, патент № 2340333" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> обозначает р<0,05, по сравнению с MDL-100907 (0,1 мг/кг).

Подробное описание изобретения

Настоящее изобретение включает способы лечения, предотвращения, облегчения либо подавления вазомоторной нестабильности у субъекта согласно предпочтительному варианту у человека, где упомянутый способ включает введение терапевтически эффективного количества одного или нескольких соединений, которые агонизируют 5НТ_2а-рецептор. 5НТ_2а-рецептор может агонизироваться эндогенно либо экзогенно вырабатываемыми соединениями. Настоящее изобретение дополнительно включает способы, в которых эндогенно вырабатываемым соединением является серотонин. Эндогенно вырабатываемый серотонин может модулироваться комбинацией антагониста 5НТ _1а-рецептора и ингибитора повторного поглощения серотонина, а также включающими их фармацевтическими композициями и продуктами.

Настоящее изобретение пригодно для лечения климактерического "прилива", индуцированного химическим либо хирургическим выключением стероидной функции (больные, перенесшие рак), для применения в способах лечебного воздействия с исключением андрогена и способах антиэстрогенного лечебного воздействия. Настоящее изобретение особо пригодно для пациентов, которые не в состоянии подвергаться способам лечебного воздействия на основе стероидов.

Определения, приведенные ниже, предназначены для полного понимания терминов и сокращений, использованных в этой заявке.

Сокращения в описании соответствуют единицам измерения, способам, свойствам либо соединениям следующим образом: "мин" означает минуты, "ч" означает час(-ы), "мкл" означает микролитр(-ы), "мл" означает миллилитр(-ы), "мкМ" означает микромольный, "мМ" означает миллимольный, "М" означает мольный, "ммоль" означает миллимоль(-и), "SEM" означает среднюю квадратическую ошибку среднего и "IU" означает Международные Единицы. "2a -рецептора для лечения нарушения функции терморегуляции, патент № 2340333" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> °С" означает изменение температуры кожи хвоста, нормализованной к 15 мин базисной температуре кожи хвоста перед индуцированным налоксоном "приливом". "2a -рецептора для лечения нарушения функции терморегуляции, патент № 2340333" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> TST" означает изменение температуры кожи хвоста от базисной и "значение ED₅₀" означает дозу, которая обеспечивает воздействие на 50% популяции для считывания конечной точки.

"Температура кожи хвоста" сокращенно обозначается TST.

"Ингибитор повторного поглощения серотонина" сокращенно обозначается SRI. Селективные ингибиторы повторного поглощения серотонина представляют собой класс ингибиторов повторного поглощения серотонина и сокращенно обозначаются SRI. Примеры ингибиторов повторного поглощения серотонина включают (однако ими не ограничиваются) флуоксетин, пароксетин, сертралин, дулоксетин, флувоксамин, амоксапин, доксепин, бупропион, циталопрам и амитриптилин.

"Серотонин" сокращенно обозначается 5НТ.

"Подкожный" сокращенно обозначается sc.

В контексте этого описания будет использоваться ряд терминов. Термин "курс лечения", используемый в этом описании, включает превентивное (например, профилактическое), целебное либо паллиативное лечение, а термин "лечение", используемый в этом описании, также включает превентивное, целебное и паллиативное лечение.

Используемый в описании термин "субъект" относится к животному, включая человека, которое подвергается лечению композициями, способами, соответствующими настоящему изобретению. Термин "субъект" либо "субъекты" относится как к мужскому, так и к женскому полу, если только один пол не указывается конкретно.

Термин "больной" включает любое животное, которое может получить пользу от лечения или предупреждения нарушений вазомоторной функции. Термин "больной" включает животных-самок, в том числе людей, и среди людей не только женщин пожилого возраста, прошедших климактерический период, но и женщин, у которых наступила преждевременная менопауза, подвергшихся экстирпации матки или женщин, у которых по какой-либо иной причине подавлена выработка эстрогена, например женщин, которым в течение длительного периода времени вводились кортикостероиды, которые страдают гиперадренокортицизмом либо имеют дисгенезию половых желез. Термин "больной" не предполагается ограничивать женщиной.

Термин "преждевременная менопауза" означает угасание функции яичников невыясненной этиологии, которое может произойти до достижения сорокалетнего возраста. Оно может быть связано с курением, проживанием на большой высоте либо плохим состоянием питания. Искусственная менопауза может быть следствием овариэктомии, химиотерапии, облучения таза или любого другого процесса, нарушающего кровоснабжение яичников.

Овариэктомия означает удаление яичника или яичников, следствием чего является выключение стероидной функции (Мерчентелер (Merchenthaler) и другие, Maturitas, 1998, Nov 16; 30 (3): 307-316).

Термин "предклимактерический" означает "перед менопаузой", термин "периклимактерический" означает "во время менопаузы" и термин "постклимактерический" означает "после менопаузы".

Термин "прилив" является признанным в данной области термином, обозначающим эпизодические отклонения температуры тела, представляющие собой, как правило, внезапное повышение температуры кожи, которое, обычно, сопровождается потением субъекта.

Термин "прилив" может применяться взаимозаменяемо с терминами "вазомоторная нестабильность", "вазомоторная дисфункция", "расстройство терморегуляторной функции", "ночная потливость", "приступообразное ощущение жара", "расстройство вазомоторной функции" либо "нарушение вазомоторной функции".

Словосочетание "терапевтически эффективное количество" означает количество, эффективно обеспечивающее, в дозах и в течение необходимых периодов времени, достижение желаемого результата. Следует понимать, что терапевтически эффективное количество компонентов, соответствующих настоящему изобретению, будет изменяться от пациента к пациенту не только в случае конкретного выбранного соединения, компонента или композиции, пути введения и способности компонентов (самостоятельно либо в сочетании с одним или несколькими включаемыми в комбинацию лекарственными средствами) вызывать необходимую реакцию у индивида, но и в зависимости от таких факторов, как болезненное состояние либо тяжесть состояния, подлежащего облегчению, возраст, пол, масса индивида, общее состояние здоровья больного и тяжесть патологического состояния, подвергаемого лечению, одновременно проводимая лекарственная терапия либо специальные диеты, которых придерживается конкретный больной, и других факторов, которые будут определяться специалистами в данной области, причем соответствующая дозировка, в конечном счете, определяется штатным врачом больницы. Схемы приема лекарственных средств могут регулироваться для обеспечения оптимальной терапевтической реакции. Терапевтически эффективным количеством является такое количество, при котором любые токсические либо вредные эффекты компонентов перевешиваются терапевтически благоприятными эффектами.

Согласно предпочтительному варианту соединения, соответствующие настоящему изобретению, вводятся в дозе и в течение такого периода времени, которые обеспечивают сокращение количества "приливов" сравнительно с количеством "приливов" перед началом лечения. Такое лечение может также быть благотворным в отношении ослабления общего распределения тяжести либо интенсивности любых все еще испытываемых "приливов" по сравнению с тяжестью "приливов" перед началом лечения. Субъектом, согласно предпочтительному варианту человеком, может быть женщина, а согласно более предпочтительному варианту женщина периклимактерического, климактерического либо постклимактерического периода. Больные мужского пола, находящиеся на стадии андроменопаузы, также могут подвергаться лечению в соответствии с настоящим изобретением.

Фармацевтический препарат для применения в соответствии с настоящим изобретением представляет собой агонист 5НТ _2а-рецептора, комбинацию антагониста 5НТ _1а-рецептора и ингибитора повторного поглощения серотонина в виде единого соединения, обладающего двойной активностью, либо комбинацию соединений и их фармацевтически приемлемой соли вместе с фармацевтически приемлемым носителем. Упомянутая композиция может содержать один или несколько агонистов 5НТ _2а-рецептора либо один или несколько ингибиторов повторного поглощения серотонина и антагонистов 5НТ_1а -рецептора в качестве активных ингредиентов либо один или несколько соединений, обладающих как активностью ингибиторов повторного поглощения серотонина, так и активностью антагонистов 5НТ _1а-рецептора, вместе с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями.

Термин "модуляция" означает способность усиливать либо подавлять функциональное свойство биологической активности или процесс, например связывание рецептора или активность передачи сигнала. Такое усиление либо подавление может зависеть от осуществления конкретного явления, например активации пути трансдукции сигнала и/или может проявляться лишь в клетках конкретного типа. Подразумевается, что модулятор включает любое соединение, например антитело, небольшую молекулу, пептид, олигопептид, полипептид или белок, согласно предпочтительному варианту небольшую молекулу или пептид.

Термин "подавлять" означает процесс уменьшения, ослабления, облегчения, предотвращения, снижения либо ликвидации, частично либо полностью, функции или активности. Термин "подавлять" может применяться к системам как in vitro, так и in vivo. Используемый в настоящем описании термин "ингибитор" означает любое подавляющее средство.

В пределах настоящего изобретения антагонист 5НТ_1а-рецептора и ингибитор повторного поглощения серотонина могут быть получены в форме фармацевтически приемлемых солей. Применяемый в настоящем описании термин "фармацевтически приемлемые соли" обозначает соли, полученные из фармацевтически приемлемых нетоксичных кислот, в том числе неорганические соли и органические соли. К числу подходящих неорганических солей относятся соли неорганических и органических кислот, например уксусной, бензолсульфоновой, бензойной, камфорсульфоновой, лимонной, этенсульфоновой, фумаровой, глюконовой, глутаминовой, бромистоводородной, хлористоводородной, изэтионовой, молочной, яблочной, малеиновой, миндальной, метансульфоновой, слизевой, азотной, памовой, пантотеновой, фосфорной, янтарной, серной, винной, n-толуолсульфоновой и т.п. Особое предпочтение отдается хлористоводородной, бромистоводородной, фосфорной и серной кислотам; наибольшее предпочтение отдается хлористоводородной соли.

В дополнение к этому соединения, соответствующие настоящему изобретению, могут существовать в несольватированной, а также в сольватированной формах с фармацевтически приемлемыми растворителями, например водой, этанолом и т.п. В общем, сольватированные формы рассматриваются как эквивалентные несольватированным формам для цели настоящего изобретения.

Некоторые соединения, соответствующие настоящему изобретению, могут включать хиральные центры, и такие соединения могут существовать в форме изомеров (т.е. энантиомеров). Настоящее изобретение включает все такие изомеры и любые их смеси, в том числе рацемические смеси.

Путем введения может быть любой путь, который эффективно переносит агонист 5НТ_2а-рецептора либо антагонист 5НТ_1а-рецептора и ингибитор повторного поглощения серотонина к подходящему либо необходимому месту действия, например пероральный, назальный, легочный, чрезкожный путь, например пассивная или ионофоретическая доставка, либо парентеральный, например ректальный путь, доставка препаратом пролонгированного действия, подкожный, внутривенный, интрауретральный, внутримышечный, интраназальный, посредством офтальмологического раствора или мази. Кроме того, введение антагониста(-ов) 5НТ _1а-рецептора и ингибитора(-ов) повторного поглощения серотонина может быть совместным или одновременным.

Термин "комбинированный способ лечебного воздействия" означает введение двух или нескольких терапевтических средств или соединений для лечения терапевтического состояния или расстройства, описанного в настоящем описании, например "прилива", потоотделения, состояния или расстройства, связанного с функцией терморегуляции и т.п. Такое введение включает совместное введение этих терапевтических средств или соединений одновременно, например в виде единого соединения, имеющего активность как антагониста 5НТ _1а-рецептора, так и активность ингибитора повторного поглощения серотонина, либо в виде многочисленных отдельных соединений как для активности антагониста 5НТ_1а-рецептора, так и активности ингибитора повторного поглощения серотонина. В дополнение к этому такое введение включает также совместное применение терапевтического средства каждого типа. В любом случае лечебная схема обеспечит благотворные эффекты комбинации лекарственных препаратов при лечении состояний либо расстройств, описание которых приведено.

Термин "центральная нервная система" или "ЦНС" включает головной мозг и спинной мозг. Термин "периферическая нервная система" или "ПНС" включает все части нервной системы, которые не являются частью ЦНС, например черепно-мозговые и спинно-мозговые нервы и вегетативную нервную систему.

Термины "компонент", "лекарственное средство", "фармакологически активное средство", "средство" и "лекарственный препарат" применяются в настоящем описании взаимозаменяемо для обозначения соединения или соединений, например антитела, небольшой молекулы, молекулы нуклеиновой кислоты, пептида, олигопептида, полипептида или белка либо композиций, включающих такое соединение, которое в случае введения в организм (человека либо животного) вызывает необходимый фармакологический и/или физиологический эффект вследствие местного и/или системного действия. Описанные средства могут действовать непосредственно на 5НТ_2а-рецептор либо обеспечивать комбинированный эффект угнетения повторного поглощения серотонина и эффект антагонизирования 5НТ_1a -рецептора для модуляции передачи сигнала 5НТ _2а-рецептора.

Активность 5НТ_2а -рецептора может агонизироваться эндогенно эндогенным агонистом, например 5-НТ, либо экзогенно посредством введения средства, агонизирующего 5НТ_2а-рецептор, например лекарственного средства или другого синтетического лиганда. "Активность 5НТ_2а-рецептора" включает активность, индуцированную: (1) эндогенным агонистом; (2) экзогенным агонистом и (3) сочетанием эндогенного и экзогенного агонистов. Кроме того, активация рецептора может быть обусловлена конститутивной активацией, связанной с нативным, мутировавшим либо модифицированным рецептором. Рецептор может быть очищенным или присутствовать в in vitro либо in vivo системе.

Средства, соответствующие настоящему изобретению, могут вводиться по мере необходимости либо непрерывно. Продолжительность периода лечения, необходимая для появления изменений, и промежуток времени после лечения для появления реакций могут изменяться в зависимости от необходимого эффекта. В случае комбинированного способа лечебного воздействия с применением более одного средства, упомянутые средства могут вводиться совместно либо они могут вводиться через раздельно смещенные промежутки времени.

В одном из вариантов осуществления антагонисты 5НТ _2а-рецептора индуцировали "прилив" на модели функции терморегуляции на грызунах, в то время как агонист 5НТ _2а-рецептора неожиданно ослабил этот индуцированный "прилив". Было установлено, однако, что некоторые агонисты 5НТ _2а-рецептора имеют нежелательное галлюциногенное побочное действие. Так, в других вариантах осуществления настоящего изобретения агонисты, имеющие сравнительно более низкое сродство, нежели такие соединения, как DOI или DOB, частичные агонисты или эндогенные агонисты 5НТ_2а-рецептора ликвидируют нежелательное побочное действие агонистов 5НТ_2а-рецептора с одновременным сохранением терапевтически благотворного воздействия, заключающегося в облегчении вазомоторных симптомов. Например, уровни 5НТ могут модулироваться, что влечет за собой активацию 5НТ_2а-рецептора через посредство его эндогенного лиганда.

В другом варианте осуществления агонизм 5НТ _2а-рецептора с помощью DOI (агонист 5НТ _2а/2с-рецептора) оказывал необходимое воздействие, заключавшееся в предотвращении индуцированного налоксоном повышения температуры кожи хвоста. DOI и DOB представляют собой неограничивающие примеры агонистов 5НТ_2а-рецептора. Этот эффект подобен эффектам, наблюдавшимся в случае других клинических лекарственных средств для "прилива", которые оценивались на этой модели (Мерчентелер (Merchenthaler) и другие, Maturitas, 1998, 30 (3): стр.307-316). Кроме того, агонисты и антагонисты 5НТ _2с-рецептора не имели эффекта в этой модели, что свидетельствует о модуляции 5НТ_2а-рецептора.

В еще одном варианте осуществления повышенная активация 5НТ _2а-рецептора его эндогенным лигандом, серотонином (5-НТ), обеспечивает средство облегчения "прилива" (нормализуя функцию терморегуляции) без нежелательного галлюциногенного побочного действия. Комбинированный способ лечебного воздействия, включающий антагонист 5НТ_1a-рецептора и ингибитор повторного поглощения серотонина, обеспечил повышение передачи сигнала 5НТ через 5НТ_2а-рецептор, достаточное для облегчения "прилива".

В еще одном варианте осуществления агонист 5НТ_2а-рецептора выбран из группы, которую составляют гидрохлорид 1-(2,5-диметокси-4-йодофенил)-2-аминопропана (DOI) и гидробромид (±)-2,5-диметокси-4-бромамфетамина (DOB). В другом варианте осуществления ингибитор повторного поглощения серотонина выбран из группы, которую составляют флуоксетин, пароксетин, сертралин, флувоксамин, дулоксетин, амоксапин, доксепин, бупропион, циталопром и амитриптилин. В еще одном варианте осуществления антагонист 5НТ_1а-рецептора выбирают из группы, которую составляют N-[2-[4-(2-метоксифенил)-1-пиперазинил]этил]-N-2-пиридинилциклогексан-карбоксамид (WAY-100635), (R)-N-(2-метил-(4-индолил-1-пиперазинил)этил)-N-(2-пиридинил)циклогексанкарбоксамид и NAD-299 (AstraZeneca).

В предпочтительном варианте осуществления соединения действуют посредством периферического способа действия на 5НТ_2а-рецепторы.

ПРИМЕРЫ

Дополнительное определение настоящего изобретения представлено в приведенных ниже Примерах, в которых все части и проценты даны в массовом отношении, а градусы в градусах Цельсия, если не оговорено иное. Следует понимать, что эти примеры, в которых представлены предпочтительные варианты осуществления настоящего изобретения, представлены исключительно в иллюстративных целях. Из приведенного выше обсуждения и этих Примеров специалист в данной области может определить основные характеристики этого изобретения и, не отступая от его сути и объема, может внести различные изменения и модификации для его приспособления к различным условиям и вариантам применения.

Общие методы

Реактивы

MDL-100907 (антагонист 5НТ _2а-рецептора) был синтезирован, как описано в WO 91/18602. Перечисленные ниже реактивы закупались из коммерческих источников: флуоксетин (ингибитор повторного поглощения серотонина (SRI), Sigma), 1-(2,5-диметокси-4-йодфенил)-2-аминопропан (агонист 5НТ _2а-рецептора, DOI, Sigma), WAY-100635 (антагонист 5НТ _2а-рецептора, описанный в патенте США №6127357, который включен в настоящее описание посредством ссылки), гранулы алкалоида морфина (Murty Pharmaceuticals, Lexington, штат Кентукки), кетамин (Phoenix Pharmaceuticals, Belmont, штат Калифорния) и налоксон (Research Biochemicals International, St. Louis, штат Миссури).

Дозировка

Все соединения растворяли в стерильной воде, за исключением MDL-100907, которое растворяли в Твин-80, инъецировали подкожно (sc) и вводили в следующих дозах: флуоксетин (10 мг/кг), WAY-100635 (0,01 мг/кг, 0,1 мг/кг и 1,0 мг/кг), DOI (1 мг/кг), MDL-100907 (0,3 мг/кг и 1 мг/кг) и налоксон (1,0 мг/кг). Кетамин (Ketaject, Phoenix Pharmaceuticals, Belmont, штат Калифорния) вводили внутримышечно в дозе 40 мг/кг, которая определялась как слабоседативная, но не вызывающая изменений температуры кожи хвоста (TST).

Животные

Овариэктомированные крысы линии Sprague-Dawley (180-220 г) были получены из коммерческого источника (Taconic, Germantown, штат Нью-Йорк) и раздельно размещены в помещении с 12 ч циклом чередования света и темноты, температура в котором поддерживалась на уровне 25°С. Животных обеспечивали стандартным кормом для крыс и водой ad libitum.

Морфинозависимая экспериментальная модель

Овариэктомированным крысам один раз в день в течение 8-9 дней вводили носитель для сведения до минимума стрессовых реакций, после чего в день начала эксперимента ввели соединение(-я). На 4 день дозированного введения морфиновую зависимость индуцировали посредством подкожного (sc) имплантирования двух гранул пролонгированного выделения морфина (75 мг/гранулу) в спинной лопаточной области. Основой этой модели является установившийся морфинозависимый индуцированный налоксоном образец "приливов", обратимость которого обеспечивается посредством введения эстрогена (Катович (Katovich) и другие, Proceedings of the Society for Experimental Biology & Medicine, 1990, 193 (2): стр.129-135). Через четыре-шесть дней после имплантации с помощью опиоидного антагониста (налоксон) вызывали прекращение поступления морфина, что вызывало временное повышение температуры кожи хвоста. В типичном эксперименте крысам вводили конечную дозу экспериментального соединения за 1 ч до введения налоксона. Крыс слегка успокаивали с помощью седативного средства (кетамин) и к основанию хвоста клейкой лентой крепили терморезистор, подсоединенный к системе сбора данных MacLab. После этого температуру кожи хвоста непрерывно отслеживали в течение 35 мин для определения базисной температуры. После этого вводили налоксон и в течение 60 мин проводили дополнительные измерения температуры кожи хвоста (общее время регистрации 95 мин).

Модель нарушения функции терморегуляции, индуцированного овариэктомией

Для определения воздействия экспериментальных соединений на функцию терморегуляции температуру кожи хвоста овариэктомированных крыс непрерывно контролировали телеметрическими средствами. Эта модель представляет собой модификацию ранее сообщавшейся методики, основанной на регулировании характера изменений дневной температуры кожи хвоста с помощью эстрогена (Берендсен (Berendsen) и другие, European Journal of Pharmacology, 2001, 419 (I): стр.47-54). После акклиматизации в спинной лопаточной области подкожно имплантировали передатчик температуры и физической активности (PhysioTemp TA10TA-F40, Data Sciences International). Конец температурного зонда подкожно выводили в хвост и прикрепляли в 2 см от основания хвоста. После семидневного периода выздоровления, в течение 3 дней осуществляли регистрацию базисной температуры кожи хвоста для определения исходной (базисной) температуры. После этого крысам вводили разовую дозу экспериментального соединения либо носителя и температуру кожи хвоста непрерывно отслеживали в течение периода времени продолжительностью до 12 ч. Поскольку температура кожи хвоста в течение 24 ч периода между активной (темнота) и пассивной (свет) фазами изменяется, воздействие экспериментальных соединений проверяли в течение каждой из этих фаз посредством введения дозы в течение цикла света или же непосредственно перед циклом темноты.

Статистический анализ

Для анализа изменений температуры кожи хвоста, вызванных налоксоном у морфинозависимых крыс, все данные анализировались посредством двухфакторных повторных измерений. Факторами служили "лечение" и "время" (повторно). В случае значительных различий в реакциях между экспериментальными группами модель приводили в соответствие с условиями эксперимента. Данные подвергали анализу с 5-минутными промежутками времени, начиная с 20 мин (-20) перед введением налоксона (указывается как время 0) до 60 мин после лечения. Первые три показания усредняли и использовали в качестве базисных количественных показателей температуры кожи хвоста. Все данные анализировались, как 2a -рецептора для лечения нарушения функции терморегуляции, патент № 2340333" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> TST (температура кожи хвоста (TST) для каждой временной точки - базисная температура). Для анализа использовали множественные сравнения (значения вероятности отклонений наименьших квадратов (LSD)) среди экспериментальных групп в каждой временной точке, однако изменения температуры кожи хвоста оказываются наибольшими через 15 мин после введения налоксона, и эта временная точка является наилучшим показателем ослабления "прилива". В случае необходимости вычисляли значение ED₅₀ . Значение ED₅₀ определяли с помощью логарифмической шкалы, и линию вычерчивали между максимальной (2a -рецептора для лечения нарушения функции терморегуляции, патент № 2340333" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> TST через 15 мин после введения налоксона) и минимальной реакцией (средняя базисная температура перед введением налоксона). Значение ED₅₀ выражается в виде дозы экспериментального соединения, обеспечивающей 50% ослабление "прилива", вызванного налоксоном.

Для анализа изменений температуры кожи хвоста, вызванных экспериментальными соединениями в модели нарушения функции терморегуляции, осуществляли анализ повторных измерений. Для анализа использовалась модель TST=((GRP (группа)+HR (часы))+((GRP×HR)+BASELINE (базисное значение)) с применением неструктурированной ковариационной матрицы ошибок. Таким образом, представленные средние наименьших квадратов являются ожидаемыми средними значениями, как если бы обе группы имели одинаковое базисное значение. Post hoc испытания часовых GRP×HR промежутков времени представляют собой по сути t-критерии различия между группами для каждого часа. Для обеспечения большего запаса надежности результат считался статистически значимым лишь в случае р<0,025. Все анализы осуществляли с помощью SAS PROC MIXED (SAS, Carey, штат Северная Каролина). Для каждого соединения базисную температуру для каждой крысы определяли посредством усреднения температурных показаний в течение 12-часового периода времени в день, предшествующий дозированному введению соединения.

ПРИМЕР 1

Влияние 5НТ_2а-рецептора на функцию терморегуляции

Крысам подкожно (sc) инъецировали носитель (стерильная Н ₂О), DOI (агонист 5HT_2a/2c-рецептора, Sigma) (растворенный в стерильной Н₂О и вводившийся в дозе 1 мг/кг). Антагонист 5НТ_2а -рецептора MDL-100907 синтезировали, как описано в патентах США №5,134,149, №5,561,144, №5,700,812, №5,700,813, №5,721,249, №5,874,445 и №6,004,980, которые включены в настоящее описание посредством ссылки, растворяли в стерильной Н₂О и вводили в дозе 0,3 мг/кг, 1 мг/кг. Все лекарственные препараты вводили за 20 мин до введения налоксона.

MDL-100907 (антагонист 5НТ_2а-рецептора) вызывал значительное повышение температуры кожи хвоста до введения налоксона (Фиг.1А). В противоположность этому DOI (агонист 5HT_2a/2c-рецептора) значительно ослаблял вызванный налоксоном "прилив" без воздействия на базисную температуру кожи хвоста (Фиг.1В). Эти данные показывают, что способность DOI к облегчению симптомов вазомоторной нестабильности избирательно опосредуется через 5НТ _2а-рецептор.

ПРИМЕР 2

5НТ_2с -рецепторы и функция терморегуляции в двух моделях (крысы) вазомоторной нестабильности

Метод, описанный в разделе общих методов, со следующими исключениями.

Крысам подкожно инъецировали носитель (стерильная Н₂О). (7bR, 10aR)-1,2,3,4,8,9,10,10а-октагидро-7bН-циклопента[b][1,4]диазепино[6,7,1-ги]индол (агонист 5НТ_2с-рецептора) синтезировали, как описано в WO 02/42304, растворяли в стерильной Н ₂О и вводили в дозе 0,1 мг/кг, 3,0 мг/кг. Антагонист 5НТ _2с-рецептора (6-хлор-5-метил-1-[[2-[(2-метил-3-пиридил)окси]-5-пиридил]карбамоил]индолин) (Бромидж (Bromidge) и другие, J.Med. Chem., 1997, 40, 3494-3496) растворяли в стерильной Н₂О и вводили в дозе 0,1 мг/кг, 1,0 мг/кг. Все лекарственные препараты вводили за 20 мин до введения налоксона.

Изменения температуры кожи хвоста (2a -рецептора для лечения нарушения функции терморегуляции, патент № 2340333" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> °С, среднее) с течением времени в морфинозависимой модели (крысы) указывают на то, что ни (7bR,10aR)-1,2,3,4,8,9,10,10а-октагидро-7bН-циклопента[b][1,4]диазепино[6,7,1-ги]индол (агонист 5НТ_2с-рецептора) (Фиг.А), ни 6-хлор-5-метил-1-[[2-[(2-метил-3-пиридил)окси]-5-пиридил]карбамоил]индолин (антагонист 5НТ_2с-рецептора) (Фиг.В) не обеспечивали значительного ослабления "прилива", вызванного налоксоном. Отсутствие активности 5НТ_2с -рецепторспецифичных соединений указывает на то, что эффект DOI (агонист 5НТ_2а-рецептора) обусловлен его воздействием на 5НТ_2а-рецептор.

ПРИМЕР 3

Переадресация передачи сигнала 5НТ на 5НТ _2a-репептор с помощью комбинации ингибитора повторного поглощения серотонина и антагониста 5HT_1a -рецептора

Крысам подкожно инъецировали носитель (стерильная Н₂О), флуоксетин (Sigma, St. Louis, штат Миссури) растворяли в стерильной Н₂О в дозе 10 мг/кг, антагонист 5НТ_1а-рецептора, WAY-100635 (Sigma, St. Louis, штат Миссури), растворяли в стерильной Н₂О и вводили в дозе 1 мг/кг либо с комбинацией флуоксетина и WAY-100635. Флуоксетин вводили за 1 ч до инъецирования налоксона, a WAY-100635 вводили за 20 мин до введения налоксона.

Изменения температуры кожи хвоста (2a -рецептора для лечения нарушения функции терморегуляции, патент № 2340333" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> °С, среднее) с течением времени в морфинозависимой модели (крысы) указывают на то, что ни флуоксетин, ни самостоятельно введенный WAY-100635 не обеспечивали значительного ослабления "прилива", вызванного налоксоном (Фиг.3А). Однако комбинация флуоксетина и WAY-100635 значительно ослабляла "прилив", вызванный налоксоном. В случае "прилива" максимальной интенсивности (через 15 мин после введения налоксона; 2a -рецептора для лечения нарушения функции терморегуляции, патент № 2340333" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> °С, среднее±средняя квадратическая ошибка среднего) лишь комбинированный способ лечебного воздействия ослаблял "прилив", вызванный налоксоном (Фиг.3В). Эти данные указывают на синергию между ингибитором повторного поглощения серотонина и антагонистом 5НТ_1а-рецептора при облегчении симптомов вазомоторной нестабильности. В дополнение к этому наблюдалось усиление стереотипных реакций типа "встряхивания мокрой собаки", связанное с активацией 5НТ_2а -рецептора. Эти данные означают, что упомянутая комбинация осуществляет переадресацию передачи сигнала 5НТ через 5НТ_2а -рецептор, что не является обобщенным явлением действия 5НТ.

ПРИМЕР 4

Эффект антагониста 5НТ_1а -рецептора в комбинации с ингибитором повторного поглощения серотонина

Крысам подкожно инъецировали носитель (стерильная Н ₂О) либо флуоксетин (Sigma, растворенный в стерильной Н ₂О в дозе 0,1 мг/кг, 1,0 мг/кг или 10 мг/кг) и антагонист 5НТ_1а-рецептора, WAY-100635 (растворенный в стерильной Н₂О и введенный в дозе 1,0 мг/кг) или флуоксетин (10 мг/кг) и WAY-100635 (0,01 мг/кг, 0,1 мг/кг или 1,0 мг/кг). Флуоксетин вводили за 1 ч до инъецирования налоксона, a WAY-100635 вводили за 20 мин до введения налоксона.

В случае "прилива" максимальной интенсивности (через 15 мин после введения налоксона; 2a -рецептора для лечения нарушения функции терморегуляции, патент № 2340333" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> °С, среднее±средняя квадратическая ошибка среднего), флуоксетин дозозависимо ослабляет "прилив", вызванный налоксоном, при сочетании с WAY-100635 (1,0 мг/кг) (Фиг.4А), значение ED₅₀=0,20±0,11. В случае "прилива" максимальной интенсивности (через 15 мин после введения налоксона; 2a -рецептора для лечения нарушения функции терморегуляции, патент № 2340333" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> °С, среднее±средняя квадратическая ошибка среднего), WAY-100635 дозозависимо ослабляет "прилив", вызванный налоксоном, при сочетании с флуоксетином (10 мг/кг) (Фиг.4В), значение ED₅₀=0,01±0,009. Эти данные указывают на то, что антагонист 5НТ_1а-рецептора является важным вкладчиком в потенцирование острого действия ингибитора повторного поглощения серотонина, поскольку он способен усиливать действие флуоксетина в более низких дозах. Повышенная эффективность флуоксетина (10 мг/кг) в присутствии WAY-100635 является, вероятно, результатом более эффективной переадресации передачи сигнала 5НТ через 5НТ_2а-рецептор.

ПРИМЕР 5

Антагонист 5НТ_2а-рецептора

Крысам подкожно инъецировали носитель (стерильная Н ₂О) либо флуоксетин (Sigma, растворенный в стерильной Н ₂О в дозе 10 мг/кг) и антагонист 5НТ_1а -рецептора, WAY-100635 (растворенный в стерильной Н ₂О и введенный в дозе 0,01 мг/кг) или флуоксетин (10 мг/кг или 30 мг/кг) и MDL-100907 (антагонист 5НТ_2а -рецептора, в дозе 0,01 мг/кг или 0,1 мг/кг). MDL-100907 вводили за 55 мин до инъецирования налоксона, а через 15 мин вводили флуоксетин или комбинацию (флуоксетин (10 мг/кг)+WAY-100635 (0,01 мг/кг)).

В случае "прилива" максимальной интенсивности (через 15 мин после введения налоксона; 2a -рецептора для лечения нарушения функции терморегуляции, патент № 2340333" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> °С, среднее±средняя квадратическая ошибка среднего), MDL-100907 дозозависимо обращал обусловленное комбинированным лекарственным препаратом ослабление "прилива", вызванного налоксоном (Фиг.5А). В противоположность этому в случае "прилива" максимальной интенсивности (через 15 мин после введения налоксона; 2a -рецептора для лечения нарушения функции терморегуляции, патент № 2340333" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> °С, среднее±средняя квадратическая ошибка среднего), MDL-100907 потенцировал неэффективную дозу флуоксетина (10 мг/кг) (Фиг.5В). В дополнение к этому введение MDL-100907 перед введением дозы флуоксетина (30 мг/кг), которая ослабляет "прилив", вызванный налоксоном, также потенцирует эффект ослабления.

Эти данные показывают, что антагонист 5НТ_2а -рецептора по разному воздействует на комбинацию флуоксетин (10 мг/кг)/WAY-100635 и на флуоксетин в дозе 10 мг/кг или 30 мг/кг. Таким образом, введение антагониста 5НТ_1а -рецептора в сочетании с флуоксетином отличается от введения как низких, так и высоких доз флуоксетина, что позволяет предположить существование иного механизма действия.