частичные и полные агонисты аденозиновых рецепторов a ₁

Формула изобретения

1. Соединение формулы (I)

1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-32.gif" BORDER="0" TI="CF" HE="53" WI="56">

где R¹ представляет собой необязательно замещенный атомом галогена, гидрокси, трифторметилом, C_1-4-алкокси С_3-6 циклоалкил, необязательно замещенный атомом галогена 5-6-членный гетероциклил, в котором гетероатомы выбраны из кислорода, необязательно замещенный атомами галогена фенил или необязательно замещенный атомами галогена 5-6-членный гетероарил, в котором гетероатомы выбраны из азота и/или серы;

R² представляет собой водород или трифторметил;

R³ представляет собой водород, необязательно замещенный атомом галогена С₃-₆циклоалкил, необязательно замещенный атомом галогена, трифторметилом, С _1-4-алкилом фенил, необязательно замещенный атомом галогена, трифторметилом, С_1-4-алкокси гетероарил, который имеет в кольце 1-2-гетероатома, выбранных из азота, кислорода или серы, или необязательно замещенный C_1-4 -алкилом 5-6-членный гетероциклил, который имеет в кольце 1-2-гетероатома, выбранных из азота или кислорода;

R⁴ и R⁵ независимо представляют собой водород;

X представляет собой ковалентную связь или низший алкилен;

X¹ представляет собой ковалентную связь или низший алкилен.

Y представляет собой ковалентную связь или низший алкилен, необязательно замещенный гидрокси или циклоалкилом; и

Z представляет собой -С 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340611/8801.gif" BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> С-, -R⁶C=CR⁷ - или -CHR⁶CHR⁷-, где R⁶ и R⁷ в каждом положении представляют собой водород или низший алкил, при условии, что R³ не может означать водород,

если X-метилен, Z представляет собой -С 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340611/8801.gif" BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> С-, каждый У и X¹ представляет собой ковалентную связь, R¹-представляет собой С₄-С₇циклоалкил, возможно замещенный атомом галогена, гидрокси, С _1-4алкокси; фенил, необязательно замещенный атомами галогена; 5-6-членная гетероциклическая группа, в которой гетероатомы выбраны из кислорода, необязательно замещенная атомами галогена,

R²-водород, либо

если Х-ковалентная связь, Z означает -R⁶C=CR ⁷-, каждый У и X¹ представляет собой ковалентную связь, R¹-представляет собой С₄-С₆циклоалкил, возможно замещенный гидрокси, С_1-4алкокси, R²-водород, трифторметил,

2. Соединение по п.1, где Z представляет собой -С 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340611/8801.gif" BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> С-.

3. Соединение по п.2, где X, X ¹ и Y представляют собой ковалентные связи.

4. Соединение по п.3, где R¹ представляет собой необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероциклил или необязательно замещенный гетероарил.

5. Соединение по п.4, где R², R⁴ и R⁵ представляют собой водород.

6. Соединение по п.5, где R³ представляет собой водород или необязательно замещенный арил.

7. Соединение по п.6, где R¹ представляет собой необязательно замещенный циклопентил или необязательно замещенный тетрагидрофуранил и R³ представляет собой водород, или необязательно замещенный фенил.

8. Соединение по п.7, где R ³ представляет собой циклопентил и R³ представляет собой водород, а именно (4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-этилоксолан-3,4-диол.

9. Соединение по п.7, где R¹ представляет собой 2 гидроксициклопентил и R³ представляет собой водород, а именно (4S,2R,3R,5R)-5-этинил-2-{6-[(2-гидроксициклопентил)амино]пурин-9-ил}оксолан-3,4-диол.

10. Соединение по п.7, где R¹ представляет собой тетрагидрофуран-3-ил и R³ представляет собой водород, а именно (4S,2R,3R,5R)-2-[6-(оксолан-3-иламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диол.

11. Соединение по п.7, где R¹ представляет собой циклопентил и R³ представляет собой 2-фторфенил, а именно (4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-[2-(2-фторфенил)этинил]оксолан-3,4-диол.

12. Соединение по п.7, где R¹ представляет собой циклопентил и R³ представляет собой 2-трифторметилфенил, а именно (4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-(трифторметил)фенил]этинил}оксолан-3,4-диол.

13. Соединение по п.7, где R¹ представляет собой тетрагидрофуран-3-ил и R³ представляет собой 2-фторфенил, а именно (4S,2R,3R,5R)-2-[6-(оксолан-3-иламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-фторфенил]этинил} оксолан-3,4-диол.

14. Соединение по п.7, где R ¹ представляет собой тетрагидрофуран-3-ил и R ³ представляет собой 2-трифторметилфенил, а именно (4S,2R,3R,5R)-2-[6-(оксолан-3-иламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-(трифторметил)фенил]этинил}оксолан-3,4-диол.

15. Соединение по п.5, где R³ представляет собой необязательно замещенный атомом галогена, трифторметилом, С_1-4алкокси гетероарил, который имеет в кольце 1-2 гетероатома, выбранных из азота, кислорода или серы.

16. Соединение по п.15, где R¹ представляет собой необязательно замещенный циклопентил или необязательно замещенный тетрагидрофуранил и R³ представляет собой необязательно замещенный тиенил.

17. Соединение по п.16, где R¹ представляет собой циклопентил или тетрагидрофуран-3-ил и R³ представляет собой тиен-2-ил.

18. Соединение по п.1, где Z представляет собой -R⁶C=CR⁷-, где R⁶ и R⁷ оба являются водородом.

19. Соединение по п.18, где X, X ¹ и Y представляют собой ковалентные связи.

20. Соединение по п.19, где R¹ представляет собой необязательно замещенный циклоалкил.

21. Соединение по п.20, где R ², R⁴ и R⁵ представляют собой водород.

22. Соединение по п.21, где R³ представляет собой необязательно замещенный фенил или необязательно замещенный атомом галогена, трифторметилом,С _1-4алкокси гетероарил.

23. Соединение по п.22, где R¹ представляет собой циклопентил и R ³ представляет собой 5-хлортиен-2-ил, 4-метилизоксазол-3-ил или 3,5-диметилизоксазол-4-ил.

24. Соединение по п.22, где R¹ представляет собой циклопентил и R³ представляет собой 2-метилфенил, а именно 5-[2-(2-метилфенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол.

25. Соединение по п.22, где R¹ представляет собой циклопентил и R³ представляет собой фенил, а именно 5-[2-(фенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол.

26. Применение соединений формулы (I) по п.1 в качестве агонистов рецепторов A₁ аденозина в терапевтически эффективном количестве для приготовления лекарственных средств для лечения заболеваний, связанных с активностью рецепторов А ₁ аденозина.

27. Применение соединения по п.26, где агонист аденозинового рецептора A₁ по п.1 обладает антилиполитическим эффектом.

28. Применение агониста аденозинового рецептора A₁ с антилиполитическим эффектом по п.27 для получения лекарственных средств для лечения заболеваний, относящихся к метаболическим нарушениям.

29. Применение по п.28, где метаболическое нарушение представляет собой ожирение.

30. Фармацевтическая композиция, обладающая свойствами агониста аденозиновых рецепторов А ₁, включающая, по меньшей мере, один фармацевтически приемлемый наполнитель и терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) по 1.

Разноска приоритетов по пунктам формулы:

15.08.2002 - пп.1-25, характеризующие соединения со значением Х-ковалентная связь пп.26-30, характеризующие применение соединений со значением Х-ковалентная связь;

25.02.2003 - пп.1, 2 характеризующие соединения со значением Х-алкилен, пп.26-30, характеризующие применение соединений со значением Х-алкилен.

Описание изобретения к патенту

Поданной заявке испрашивается приоритет в соответствии с предварительной патентной заявкой США с регистрационным No. 60/403712, поданной 15 августа 2002 г., и предварительной патентной заявкой США с регистрационным No. 60/450094, поданной 25 февраля 2003 г., описания которых полностью включены здесь в качестве ссылки.

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к новым соединениям, которые являются частичными или полными агонистами аденозиновых рецепторов A ₁, и к их применению для лечения млекопитающих от различных патологических состояний, включая сердечно-сосудистые заболевания, в частности аритмию и предотвращение внезапной смерти, возникающей из-за аритмии, ишемию и нарушения ЦНС, включая боль, эпилепсию и рвоту. Агонисты аденозиновых рецепторов A₁ представляют собой антилиполитические агенты и могут быть использованы для лечения метаболических нарушений, включая диабет и ожирение. Изобретение также относится к способам их получения и фармацевтическим композициям, содержащим такие соединения.

Уровень техники

Аденозин представляет собой существующий в природе нуклеозид, который осуществляет свои биологические эффекты путем взаимодействия с семейством аденозиновых рецепторов, известных как A₁, A_2a, A _2b и A₃, каждый из которых модулирует важные физиологические процессы. Например, аденозиновые рецепторы A_2A модулируют коронарную вазодилятацию, рецепторы A_2B вовлечены в активацию тучных клеток, астму, вазодилятацию, регуляцию роста клеток, функцию кишечника и модуляцию нейросекреции (Смотри Adenosine A _2B Receptors as Therapeutic Targets, Drug Dev Res 45:198; Feoktistov et al., Trends Pharmacol Sci 19:148-153), и аденозиновые рецепторы A₃ модулируют процессы клеточной пролиферации.

Агонисты аденозиновых рецепторов A ₁ модулируют кардиостимуляторные эффекты катехоламина (опосредованные ингибированием аденилатциклазы) и замедляют сердечный ритм (HR), а также пролонгируют распространение импульсов по AV узлу, что обусловлено большей частью активацией I_KAdo . (B. Lerman and L. Belardinelli Circulation, Vol. 83 (1991), P. 1499-1509 and J. C. Shryock and L. Belardinelli The Am. J. Cardiology, Vol. 79 (1997) P. 2-10). Стимуляция аденозинового рецептора A₁ сокращает продолжительность и снижает амплитуду потенциала действия клеток AV узла и, следовательно, пролонгирует рефрактерный период клетки AV узла. Таким образом, стимуляция рецепторов A₁ является способом лечения суправентрикулярных тахикардий, включая возвратные тахикардии узла, и контроля желудочкового ритма при фибрилляции и трепетании предсердий.

Повышенный уровень неэтерифицированных свободных жирных кислот (НЭЖК) в сыворотке является нежелательным как для механической, так и для электрической функций сердца, и агонисты аденозиновых рецепторов A₁ являются сильными и эффективными ингибиторами липолиза. Это важно, потому что агонисты аденозиновых рецепторов A₁ более сильно действуют в жировой ткани, чем в тканях сердца, они снижают липолиз в концентрациях, которые не влияют на сердечный ритм. Таким образом, агонисты аденозиновых рецепторов A₁ могут быть использованы для лечения метаболических нарушений, таких как инсулиннезависимый сахарный диабет и ожирение, за счет их антилиполитической активности. Антилиполитический эффект агонистов аденозиновых рецепторов A₁ может быть использован также для терапии застойной сердечной недостаточности. Более того, агонисты аденозиновых рецепторов A₁ защищают против ишемии сердца. Агонисты аденозиновых рецепторов A₁ также могут быть использованы в качестве химиотерапевтических препаратов при лечении расстройств ЦНС, включая эпилепсию (антиконвульсантная активность) и ишемию.

Соответственно, целью данного изобретения является разработка соединений, которые являются сильными полными агонистами аденозиновых рецепторов A₁ или частичными агонистами аденозиновых рецепторов A₁. Предпочтительные соединения изобретения являются селективными для аденозинового рецептора A₁, что сводит к минимуму нежелательные побочные эффекты, связанные со стимуляцией или антагонистическим действием на другие аденозиновые рецепторы.

Сущность изобретения

Соответственно, в первом аспекте изобретение относится к соединениям формулы I:

1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-3.jpg" height=100 BORDER="0">

где R¹ представляет собой необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил;

R² представляет собой водород, галоген, трифторметил или циано;

R ³ представляет собой водород, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероарил или необязательно замещенный гетероциклил;

R ⁴ и R⁵ независимо представляют собой водород или необязательно замещенный ацил;

X представляет собой ковалентную связь или низший алкилен, необязательно замещенный циклоалкилом;

X¹ представляет собой ковалентную связь или алкилен;

Y представляет собой ковалентную связь или низший алкилен, необязательно замещенный гидроксилом или циклоалкилом; и

Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-, -R⁶C=CR⁷ - или -CHR⁶CHR⁷-, где R⁶ и R⁷ в каждом случае представляют собой водород или низший алкил.

Второй аспект изобретения относится к фармацевтическим составам, включающим терапевтически эффективное количество соединения формулы I и, по меньшей мере, один фармацевтически приемлемый наполнитель.

Третий аспект изобретения относится к способу применения соединения формулы I при лечении заболевания или состояния у млекопитающего, которое может быть эффективно излечено частично или полностью избирательным агонистом аденозинового рецептора A1. Такие заболевания и состояния включают, по меньшей мере, одно из следующих: суправентрикулярную тахикардию, включая предсердную фибрилляцию и трепетание предсердий, ишемию, включая такую, которая обусловлена стабильной и нестабильной стенокардией, застойную сердечную недостаточность, инфаркт миокарда, расстройства ЦНС, включая эпилепсию и удар, метаболические расстройства, такие как ожирение и диабет, или осложнение диабета или застойной сердечной недостаточности, особенно гиперлипидемию, которая облегчается антилиполитическим действием агонистов A₁ на адипоциты; и лечение тошноты (рвоты).

Четвертый аспект данного изобретения относится к способам получения соединений формулы I.

Из соединений формулы I один предпочтительный класс включает те соединения, в которых Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-, особенно те соединения, в которых X, X ¹ и Y представляют собой ковалентные связи. Предпочтительная группа в пределах данного класса включает те соединения, в которых R¹ представляет собой необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероциклил или необязательно замещенный гетероарил и R², R ⁴ и R⁵ представляют собой водород.

Предпочтительная подгруппа включает те соединения формулы I, в которых R³ представляет собой водород или необязательно замещенный арил, особенно необязательно замещенный фенил. Особенно предпочтительными соединениями в пределах данной подгруппы являются те соединения, в которых R ¹ представляет собой циклоалкил, особенно циклопентил или гидроксициклопентил, или необязательно замещенный гетероциклил, особенно тетрагидрофуран-3-ил, и R³ представляет собой водород. Другие предпочтительные соединения в пределах данной подгруппы включают те соединения формулы I, в которых R³ представляет собой необязательно замещенный фенил. Особенно предпочтительными являются те соединения, в которых R¹ представляет собой циклоалкил, особенно циклопентил, или необязательно замещенный гетероциклил, особенно тетрагидрофуран-3-ил, и R³ представляет собой 2-фторфенил или 2-трифторметилфенил.

Другая предпочтительная подгруппа включает те соединения формулы I, в которых R ³ представляет собой необязательно замещенный арил. Особенно предпочтительными соединениями в пределах данной подгруппы являются те соединения, в которых R¹ представляет собой циклоалкил, особенно циклопентил, или необязательно замещенный гетероциклил, особенно тетрагидрофуран-3-ил. Предпочтительные R³ группы включают необязательно замещенный тиенил, особенно 5-хлортиен-2-ил.

Из соединений формулы I другой предпочтительный класс включает те соединения, в которых Z представляет собой -R⁶C=CR ⁷-, особенно те соединения, в которых R ⁶ и R⁷ представляют собой водород и X, X¹ и Y представляют собой ковалентные связи. Предпочтительная группа в пределах данного класса включает те соединения, в которых R¹ представляет собой необязательно замещенный циклоалкил и R ², R⁴ и R⁵ представляют собой водород. Предпочтительная подгруппа включает те соединения формулы I, в которых R³ представляет собой необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил. Особенно предпочтительными являются те соединения, в которых R³ включает необязательно замещенный фенил, особенно фенил или 2-метилфенил, или необязательно замещенный тиенил, особенно 5-хлортиен-2-ил.

Определения и общие параметры

Применяемые в настоящем описании следующие слова и фразы обычно предназначены для обозначения нижеизложенного, за исключением случаев, когда контекст, в котором они применяются, не указывает иное.

Термин "алкил" относится к однорадикальной разветвленной или неразветвленной насыщенной углеводородной цепи, содержащей от 1 до 20 углеродных атомов. Данный термин иллюстрируется такими группами, как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил, н-гексил, н-децил, тетрадецил и тому подобное.

Термин "замещенный алкил" относится к:

1) алкильной группе, как определено выше, имеющей 1, 2, 3, 4 или 5 заместителей, например от 1 до 3 заместителей, выбранных из группы, состоящей из алкенила, алкинила, алкокси, циклоалкила, циклоалкенила, ацила, ациламино, ацилокси, амино, аминокарбонила, алкоксикарбониламино, азидо, циано, галогена, гидрокси, кето, тиокарбонила, карбокси, карбоксиалкила, арилтио, гетероарилтио, гетероциклилтио, тиола, алкилтио, арила, арилокси, гетероарила, аминосульфонила, аминокарбониламино, гетероарилокси, гетероциклила, гетероциклоокси, гидроксиамино, алкоксиамино, нитро, -SO-алкила, -SO-арила, -SO-гетероарила, -SO₂-алкила, SO₂-арила и -SO₂-гетероарила. Если определением не ограничивается иначе, все заместители могут быть необязательно дополнительно замещены 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из алкила, карбокси, карбоксиалкила, аминокарбонила, гидрокси, алкокси, галогена, CF₃, амино, замещенного амино, циано и -S(О)_nR, где R представляет собой алкил, арил или гетероарил, а n равно 0, 1 или 2; или

2) алкильной группе, как указано выше, которая прервана 1-10 атомами, независимо выбранными из кислорода, серы и NR_a-, где R_a выбран из водорода, алкила, циклоалкила, алкенила, циклоалкенила, алкинила, арила, гетероарила и гетероциклила. Все заместители могут быть необязательно дополнительно замещены алкилом, алкокси, галогеном, CF₃, амино, замещенным амино, циано или -S(О)_nR, где R представляет собой алкил, арил, или гетероарил, а n равно 0, 1 или 2; или

3) алкильной группе, как определено выше, которая содержит и 1, 2, 3, 4 или 5 заместителей, как определено выше, и также прервана 1-10 атомами, как определено выше.

Термин "низший алкил" относится к однорадикальной разветвленной или неразветвленной насыщенной углеводородной цепи, содержащей 1, 2, 3, 4, 5 или 6 углеродных атомов. Данный термин иллюстрируется такими группами, как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил, н-гексил и тому подобное.

Термин "замещенный низший алкил" относится к низшему алкилу, как определено выше, содержащему от 1 до 5 заместителей, например 1, 2 или 3 заместителя, как определено для замещенного алкила, или группе низшего алкила, как определено выше, которая прервана 1, 2, 3, 4 или 5 атомами, как определено для замещенного алкила, или группе низшего алкила, как определено выше, которая и содержит 1, 2, 3, 4 или 5 заместителей, как определено выше, и также прервана 1, 2, 3, 4 или 5 атомами, как определено выше.

Термин "алкилен" относится к двойному радикалу разветвленной или неразветвленной насыщенной углеводородной цепи, например, содержащей от 1 до 20 углеродных атомов, предпочтительно 1-10 углеродных атомов, более предпочтительно 1, 2, 3, 4, 5 или 6 углеродных атомов. Данный термин иллюстрируется такими группами, как метилен(-CH₂-), этилен(-CH ₂CH₂-), изомеры пропилена (например, -CH₂CH₂CH ₂- и -CH(CH₃)CH₂ -) и тому подобное.

Термин "низший алкилен" относится к двойному радикалу разветвленной или неразветвленной насыщенной углеводородной цепи, например, содержащей 1, 2, 3, 4, 5 или 6 углеродных атомов.

Термин "замещенный алкилен" относится к:

(1) алкиленовой группе, как определено выше, имеющей 1, 2, 3, 4 или 5 заместителей, выбранных из группы, состоящей из алкила, алкенила, алкинила, алкокси, циклоалкила, циклоалкенила, ацила, ациламино, ацилокси, амино, аминокарбонила, алкоксикарбониламино, азидо, циано, галогена, гидрокси, кето, тиокарбонила, карбокси, карбоксиалкила, арилтио, гетероарилтио, гетероциклилтио, тиола, алкилтио, арила, арилокси, гетероарила, аминосульфонила, аминокарбониламино, гетероарилокси, гетероциклила, гетероциклоокси, гидроксиамино, алкоксиамино, нитро, -SO-алкила, -SO-арила, -SO-гетероарила, -SO₂-алкила, SO₂-арила и -SO₂-гетероарила. Если определением не ограничивается иначе, все заместители могут быть необязательно дополнительно замещены 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из алкила, карбокси, карбоксиалкила, аминокарбонила, гидрокси, алкокси, галогена, CF₃, амино, замещенного амино, циано и -S(O)_nR, где R представляет собой алкил, арил или гетероарил, а n равно 0, 1 или 2; или

(2) алкиленовой группе, как определено выше, которая прервана 1-20 атомами, независимо выбранными из кислорода, серы и NR _a-, где R_a выбран из водорода, необязательно замещенного алкила, циклоалкила, циклоалкенила, арила, гетероарила и гетероциклила, или групп, выбранных из карбонила, карбоксиэфира, карбоксамида и сульфонила; или

(3) алкиленовой группе, как определено выше, которая и содержит 1, 2, 3, 4 или 5 заместителей, как определено выше, и также прервана 1-20 атомами, как определено выше. Примерами замещенных алкиленов являются хлорметилен (-CH(Cl)-), аминоэтилен (-CH(NH₂)CH ₂-), метиламиноэтилен (-CH(NHMe)CH₂ -), изомеры 2-карбоксипропилена (-CH₂CH(CO ₂H)CH₂-), этоксиэтил (-CH ₂CH₂O-CH₂CH ₂-), этилметиламиноэтил (-CH₂CH ₂N(CH₃)CH₂CH ₂-), 1-этокси-2-(2-этоксиэтокси)этан (-CH ₂CH₂О-CH₂CH ₂-OCH₂CH₂-OCH ₂CH₂-) и тому подобное.

Термин "аралкил" относится к арильной группе, ковалентно связанной с алкиленовой группой, где арил и алкилен определены здесь. "Необязательно замещенный аралкил" относится к необязательно замещенной арильной группе, ковалентно связанной с необязательно замещенной алкиленовой группой. Примерами таких аралкильных групп являются бензил, фенилэтил, 3-(4-метоксифенил)пропил и тому подобное.

Термин "алкокси" относится к группе R-O-, где R представляет собой необязательно замещенный алкил или необязательно замещенный циклоалкил, или R представляет собой группу -Y-Z, в которой Y представляет собой необязательно замещенный алкилен и Z представляет собой необязательно замещенный алкенил, необязательно замещенный алкинил; или необязательно замещенный циклоалкенил, где алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил и циклоалкенил представляют собой определенное здесь. Предпочтительными алкокси группами являются алкил-O-, которые включают, в качестве примера, метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, н-бутокси, трет-бутокси, sec-бутокси, н-пентокси, н-гексокси, 1,2-диметилбутокси и тому подобное.

Термин "алкилтио" относится к группе R-S-, где R представляет собой то, что определено для алкокси.

Термин "алкенил" относится к монорадикалу разветвленной или неразветвленной ненасыщенной углеводородной группы, содержащей от 2 до 20 углеродных атомов, предпочтительно от 2 до 10 углеродных атомов и даже более предпочтительно от 2 до 6 углеродных атомов и имеющей 1-6, предпочтительно 1, двойных связей (винил). Предпочтительные алкенильные группы включают этенил или винил (-CH=CH ₂), 1-пропилен или аллил (-CH₂CH=CH ₂), изопропилен (-C(CH₃)=CH ₂), бицикло[2.2.1]гептен и тому подобное. В том случае, когда алкенил присоединен к азоту, двойная связь не может находиться в положении альфа по отношению к азоту.

Термин "низший алкенил" относится к алкенилу, как определено выше, содержащему от 2 до 6 углеродных атомов.

Термин "замещенный алкенил" относится к алкенильной группе, как определено выше, содержащей 1, 2, 3, 4 или 5 заместителей и предпочтительно 1, 2, или 3 заместителей, выбранных из группы, состоящей из алкила, алкенила, алкинила, алкокси, циклоалкила, циклоалкенила, ацила, ациламино, ацилокси, амино, аминокарбонила, алкоксикарбониламино, азидо, циано, галогена, гидрокси, кето, тиокарбонила, карбокси, карбоксиалкила, арилтио, гетероарилтио, гетероциклилтио, тиола, алкилтио, арила, арилокси, гетероарила, аминосульфонила, аминокарбониламино, гетероарилокси, гетероциклила, гетероциклоокси, гидроксиамино, алкоксиамино, нитро, -SO-алкила, -SO-арила, -SO-гетероарила, -SO ₂-алкила, SO₂-арила и -SO ₂-гетероарила. Если определением не ограничивается иначе, все заместители могут быть необязательно дополнительно замещены 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из алкила, карбокси, карбоксиалкила, аминокарбонила, гидрокси, алкокси, галогена, CF ₃, амино, замещенного амино, циано и -S(O) _nR, где R представляет собой алкил, арил или гетероарил и n равно 0, 1 или 2.

Термин "алкинил" относится к монорадикалу ненасыщенного углеводорода, содержащего от 2 до 20 углеродных атомов, предпочтительно от 2 до 10 углеродных атомов и даже более предпочтительно от 2 до 6 углеродных атомов и имеющего, по меньшей мере, 1 и предпочтительно 1-6 сайтов ацетиленовой (тройная связь) ненасыщенности. Предпочтительные алкинильные группы включают этинил (-C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> CH), пропаргил (или пропинил, -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> CCH₃) и тому подобное. В том случае, когда алкинил присоединен к азоту, тройная связь не может находиться в положении альфа по отношению к азоту.

Термин "замещенный алкинил" относится к алкинильной группе, как определено выше, содержащей 1, 2, 3, 4 или 5 заместителей и предпочтительно 1, 2 или 3 заместителей, выбранных из группы, состоящей из алкила, алкенила, алкинила, алкокси, циклоалкила, циклоалкенила, ацила, ациламино, ацилокси, амино, аминокарбонила, алкоксикарбониламино, азидо, циано, галогена, гидрокси, кето, тиокарбонила, карбокси, карбоксиалкила, арилтио, гетероарилтио, гетероциклилтио, тиола, алкилтио, арила, арилокси, гетероарила, аминосульфонила, аминокарбониламино, гетероарилокси, гетероциклила, гетероциклоокси, гидроксиамино, алкоксиамино, нитро, -SO-алкила, -SO-арила, -SO-гетероарила, -SO₂-алкила, SO₂-арила и -SO₂-гетероарила. Если определением не ограничивается иначе, все заместители могут быть необязательно дополнительно замещены 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из алкила, карбокси, карбоксиалкила, аминокарбонила, гидрокси, алкокси, галогена, CF₃, амино, замещенного амино, циано и -S(O)_nR, где R представляет собой алкил, арил, или гетероарил и n равно 0, 1 или 2.

Термин "аминокарбонил" относится к группе -C(O)NRR, где каждый R представляет собой независимо водород, алкил, циклоалкил, арил, гетероарил, гетероциклил или где обе R группы соединены с образованием гетероциклической группы (например, морфолино). Если определением не ограничивается иначе, все заместители могут быть необязательно дополнительно замещены 1, 2, или 3 заместителями, выбранными из алкила, карбокси, карбоксиалкила, аминокарбонила, гидрокси, алкокси, галогена, CF₃, амино, замещенного амино, циано и -S(O)_nR, где R представляет собой алкил, арил, или гетероарил и n равно 0, 1 или 2.

Термин "сложный эфир" или "карбоксиэфир" относится к группе -C(O)OR, где R представляет собой алкил, циклоалкил, арил, гетероарил или гетероциклил, который может быть необязательно дополнительно замещен алкилом, алкокси, галогеном, CF ₃, амино, замещенным амино, циано или -S(O) _nR_a, где R_a представляет собой алкил, арил, или гетероарил и n равно 0, 1 или 2.

Термин "ациламино" относится к группе -NRC(O)R, где каждый R представляет собой независимо водород, алкил, арил, гетероарил или гетероциклил. Все заместители могут быть необязательно дополнительно замещены алкилом, алкокси, галогеном, CF₃, амино, замещенным амино, циано или -S(O)_nR, где R представляет собой алкил, арил или гетероарил и n равно 0, 1 или 2.

Термин "ацилокси" относится к группам -O(O)C-алкил, -O(O)C-циклоалкил, -O(O)C-арил, -O(O)C-гетероарил и -O(O)C-гетероциклил. Если определением не ограничивается иначе, все заместители могут быть необязательно дополнительно замещены 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из алкила, карбокси, карбоксиалкила, аминокарбонила, гидрокси, алкокси, галогена, CF₃, амино, замещенного амино, циано и -S(O)_nR, где R представляет собой алкил, арил или гетероарил и n равно 0, 1 или 2.

Термин "арил" относится к ароматической карбоциклической группе, содержащей от 6 до 20 углеродных атомов, имеющей одно кольцо (например, фенил), или множество колец (например, бифенил), или множество конденсированных (слитых) колец (например, нафтил или антрил). Предпочтительные арилы включают фенил, нафтил и тому подобное.

Если определением для арильного заместителя не ограничивается иначе, такие арильные группы могут быть необязательно замещены 1, 2, 3, 4 или 5 заместителями, предпочтительно 1, 2, или 3 заместителями, выбранными из группы, состоящей из алкила, алкенила, алкинила, алкокси, циклоалкила, циклоалкенила, ацила, ациламино, ацилокси, амино, аминокарбонила, алкоксикарбониламино, азидо, циано, галогена, гидрокси, кето, тиокарбонила, карбокси, карбоксиалкила, арилтио, гетероарилтио, гетероциклилтио, тиола, алкилтио, арила, арилокси, гетероарила, аминосульфонила, аминокарбониламино, гетероарилокси, гетероциклила, гетероциклоокси, гидроксиамино, алкоксиамино, нитро, -SO-алкила, -SO-арила, -SO-гетероарила, -SO₂-алкила, SO₂-арила и -SO₂-гетероарила. Если определением не ограничивается иначе, все заместители могут быть необязательно дополнительно замещены 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из алкила, карбокси, карбоксиалкила, аминокарбонила, гидрокси, алкокси, галогена, CF₃, амино, замещенного амино, циано и -S(O)_nR, где R представляет собой алкил, арил или гетероарил, а n равно 0, 1 или 2.

Термин "арилокси" относится к группе арил-O-, где арильная группа представляет собой определенное выше и включает необязательно замещенные арильные группы, также определенные выше. Термин "арилтио" относится к группам R-S-, где R представляет собой определенное для арила.

Термин "амино" относится к группе -NH₂.

Термин "замещенный амино" относится к группе -NRR, где каждый R независимо выбран из группы, состоящей из водорода, алкила, циклоалкила, арила, гетероарила и гетероциклила, предлагаемых так, что обе R-группы не являются водородом, или группе -Y-Z, в которой Y представляет собой необязательно замещенный алкилен и Z представляет собой алкенил, циклоалкенил или алкинил. Если определением не ограничивается иначе, все заместители могут быть необязательно дополнительно замещены 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из алкила, карбокси, карбоксиалкила, аминокарбонила, гидрокси, алкокси, галогена, CF₃, амино, замещенного амино, циано и -S(O)_nR, где R представляет собой алкил, арил или гетероарил и n равно 0, 1 или 2.

Термин "карбоксиалкил" относится к группам -C(O)O-алкил, -C(O)O-циклоалкил, где алкил и циклоалкил являются такими, как определено здесь, и могут быть необязательно дополнительно замещены алкилом, алкенилом, алкинилом, алкокси, галогеном, CF₃, амино, замещенным амино, циано или -S(O)_nR, где R представляет собой алкил, арил или гетероарил, а n равно 0, 1 или 2.

Термин "циклоалкил" относится к циклическим алкильным группам, содержащим от 3 до 20 углеродных атомов, имеющим одно циклическое кольцо или множественные конденсированные кольца. Такие циклоалкильные группы включают, в качестве примера, структуры с одним кольцом, такие как циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклооктил и тому подобное, или структуры с множеством колец, такие как адамантанил и бицикло[2.2.1]гептан, или циклические алкильные группы, с которыми конденсирована арильная группа, например индан, и тому подобное.

Термин "замещенный циклоалкил" относится к циклоалкильным группам, содержащим 1, 2, 3, 4 или 5 заместителей и предпочтительно 1, 2, или 3 заместителя, выбранных из группы, состоящей из алкила, алкенила, алкинила, алкокси, циклоалкила, циклоалкенила, ацила, ациламино, ацилокси, амино, аминокарбонила, алкоксикарбониламино, азидо, циано, галогена, гидрокси, кето, тиокарбонила, карбокси, карбоксиалкила, арилтио, гетероарилтио, гетероциклилтио, тиола, алкилтио, арила, арилокси, гетероарила, аминосульфонила, аминокарбониламино, гетероарилокси, гетероциклила, гетероциклоокси, гидроксиамино, алкоксиамино, нитро, -SO-алкила, -SO-арила, -SO-гетероарила, -SO ₂-алкила, SO₂-арила и -SO ₂-гетероарила. Если определением не ограничивается иначе, все заместители могут быть необязательно дополнительно замещены 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из алкила, карбокси, карбоксиалкила, аминокарбонила, гидрокси, алкокси, галогена, CF ₃, амино, замещенного амино, циано и -S(O) _nR, где R представляет собой алкил, арил или гетероарил и n равно 0, 1 или 2.

Термин "галоген" или "гало" относится к фтору, брому, хлору и йоду.

Термин "ацил" обозначает группу -C(O)R, в которой R представляет собой водород, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный циклоалкил, необязательно замещенный гетероциклил, необязательно замещенный арил и необязательно замещенный гетероарил.

Термин "гетероарил" относится к ароматической группе (т.е. ненасыщенной), включающей от 1 до 15 углеродных атомов и от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из кислорода, азота и серы в пределах, по меньшей мере, одного кольца.

Если определением для гетероарильного заместителя не ограничивается иначе, такие гетероарильные группы могут быть необязательно замещены от 1 до 5 заместителями, предпочтительно 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из группы, состоящей из алкила, алкенила, алкинила, алкокси, циклоалкила, циклоалкенила, ацила, ациламино, ацилокси, амино, аминокарбонила, алкоксикарбониламино, азидо, циано, галогена, гидрокси, кето, тиокарбонила, карбокси, карбоксиалкила (алкильного эфира), арилтио, гетероарила, гетероарилтио, гетероциклилтио, тиола, алкилтио, арила, арилокси, аралкила, гетероарила, аминосульфонила, аминокарбониламино, гетероарилокси, гетероциклила, гетероциклоокси, гидроксиамино, алкоксиамино, нитро, -SO-алкила, -SO-арила, -SO-гетероарила, -SO ₂-алкила, SO₂-арила и -SO ₂-гетероарила. Если определением не ограничивается иначе, все заместители могут быть необязательно дополнительно замещены 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из алкила, карбокси, карбоксиалкила, аминокарбонила, гидрокси, алкокси, галогена, CF ₃, амино, замещенного амино, циано и -S(O) _nR, где R представляет собой алкил, арил или гетероарил и n равно 0, 1 или 2. Такие гетероарильные группы могут содержать одно кольцо (например, пиридил или фурил) или множественные конденсированные кольца (например, индолизинил, бензотиазол или бензотиенил). Примеры содержащих азот гетероциклов и гетероарилов включают, но не ограничиваются этим, пиррол, имидазол, пиразол, пиридин, пиразин, пиримидин, пиридазин, индолизин, изоиндол, индол, индазол, пурин, хинолизин, изохинолин, хинолин, фталазин, нафтилпиридин, хиноксалин, хиназолин, циннолин, птеридин, карбазол, карболин, фенантридин, акридин, фенантролин, изотиазол, феназин, изоксазол, феноксазин, фенотиазин, имидазолидин, имидазолин и тому подобное, а также N-алкокси-азотсодержащие гетероарильные соединения.

Термин "гетероарилокси" относится к группе гетероарил-O-.

Термин "гетероциклил" относится к однорадикальной насыщенной или частично ненасыщенной группе, содержащей одно кольцо или множественные конденсированные кольца, имеющей от 1 до 40 углеродных атомов и от 1 до 10 гетероатомов, предпочтительно от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из азота, серы, фосфора и/или кислорода, в пределах кольца.

Если определением не ограничивается иначе для гетероциклического заместителя, такие гетероциклические группы могут быть необязательно замещены от 1 до 5 и предпочтительно 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из группы, состоящей из алкила, алкенила, алкинила, алкокси, циклоалкила, циклоалкенила, ацила, ациламино, ацилокси, амино, аминокарбонила, алкоксикарбониламино, азидо, циано, галогена, гидрокси, кето, тиокарбонила, карбокси, карбоксиалкила, арилтио, гетероарилтио, гетероциклилтио, тиола, алкилтио, арила, арилокси, гетероарила, аминосульфонила, аминокарбониламино, гетероарилокси, гетероциклила, гетероциклоокси, гидроксиамино, алкоксиамино, нитро, -SO-алкила, -SO-арила, -SO-гетероарила, -SO₂-алкила, SO₂-арила и -SO₂-гетероарила. Если определением не ограничивается иначе, все заместители могут быть необязательно дополнительно замещены 1, 2 или 3 заместителями, выбранными из алкила, карбокси, карбоксиалкила, аминокарбонила, гидрокси, алкокси, галогена, CF₃, амино, замещенного амино, циано и -S(O)_nR, где R представляет собой алкил, арил или гетероарил и n равно 0, 1 или 2. Гетероциклические группы могут иметь одно кольцо или множественные конденсированные кольца. Предпочтительные гетероциклы включают тетрагидрофуранил, морфолино, пиперидинил и тому подобное.

Термин "тиол" относится к группе -SH.

Термин "замещенный алкилтио" относится к группе -S-замещенный алкил.

Термин "гетероарилтиол" относится к группе -S-гетероарил, где гетероарильная группа представляет собой определенное выше, включая необязательно замещенные гетероарильные группы, также определенные выше.

Термин "сульфоксид" относится к группе -S(O)R, в которой R представляет собой алкил, арил или гетероарил. "Замещенный сульфоксид" относится к группе -S(O)R, в которой R представляет собой замещенный алкил, замещенный арил или замещенный гетероарил, как определено здесь.

Термин "сульфон" относится к группе -S(O) ₂R, в которой R представляет собой алкил, арил или гетероарил. "Замещенный сульфон" относится к группе -S(O) ₂R, в которой R представляет собой замещенный алкил, замещенный арил или замещенный гетероарил, как определено здесь.

Термин "кето" относится к группе -C(O)-.

Термин "тиокарбонил" относится к группе -C(S)-.

Термин "карбокси" относится к группе -C(O)-OH.

"Необязательный" или "необязательно" обозначает, что описываемое в последующем событие или условие может иметь или может не иметь места и что описание включает случаи, когда указанное событие или условие имеет место, и случаи, при которых они не имеют места.

Термин "соединение формулы I" предназначено для охвата соединений изобретения, как это раскрыто, и их полиморфов, фармацевтически приемлемых солей, фармацевтически приемлемых сложных эфиров и пролекарств таких соединений. Кроме того, соединения изобретения могут обладать одним или несколькими асимметрическими центрами и могут быть получены в виде рацемической смеси или в виде индивидуальных энантиомеров или диастереоизомеров. Количество стереоизомеров, присутствующих в любом данном соединении формулы I, зависит от количества имеющихся асимметрических центров (возможны 2 ⁿ стереоизомеров, где n равно количеству асимметричных центров). Индивидуальные стереоизомеры могут быть получены разделением рацемической или нерацемической смеси промежуточного продукта на определенной подходящий стадии синтеза или разделением соединения формулы I обычными способами. Индивидуальные стереоизомеры (включая индивидуальные энантиомеры и диастереоизомеры), а также рацемические и нерацемические смеси стереоизомеров входят в объем настоящего изобретения, причем подразумевается, что все они описываются структурами данного описания, если специально не указано иначе.

"Изомеры" представляют собой различные соединения, которые имеют одинаковую молекулярную формулу.

"Стереоизомеры" представляют собой изомеры, которые отличаются только расположением атомов в пространстве.

"Энантиомеры" представляют собой пару стереоизомеров, которые не являются наложенными зеркальными отражениями друг друга. Смесь 1:1 пары энантиомеров представляет собой "рацемическую" смесь. Термин "(±)" применяют для обозначения рацемической смеси, где это подходит.

"Диастереоизомеры" представляют собой стереоизомеры, которые имеют, по меньшей мере, два асимметричных атома, но которые не являются зеркальными отображениями друг друга.

Абсолютная стереохимия описывается по R-S системе Cahn-Ingold-Prelog. Когда соединение представляет собой чистый энантиомер, стереохимия при каждом хиральном углероде может быть описана или R, или S. Разделенные соединения, абсолютная конфигурация которых неизвестна, обозначают (+) или (-) в зависимости от направления (право- или левовращающего), в котором они вращают плоскость поляризованного света при длине волны, соответствующей полосе D натрия.

Термин "терапевтически эффективное количество" относится к такому количеству соединения формулы I, которое достаточно для эффективного лечения, как определено ниже, при введении млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении. Терапевтически эффективное количество должно варьировать в зависимости от субъекта и болезненного состояния, подлежащего лечению, массы и возраста субъекта, тяжести болезненного состояния, способа введения и тому подобного, которые могут быть легко определены специалистом в данной области техники.

Термин "лечение" или "терапия" обозначает любое лечение заболевания у млекопитающего, включая:

(i) профилактику заболевания, то есть блокирование развития клинических симптомов заболевания;

(ii) торможение заболевания, то есть остановку развития клинических симптомов; и/или

(iii) облегчение заболевания, то есть стимуляцию регрессии клинических симптомов.

Во многих случаях соединения данного изобретения способны образовывать кислые и/или основные соли в силу присутствия амино и/или карбоксильных групп или сходных с ними групп. Термин "фармацевтически приемлемая соль" относится к солям, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства соединений формулы I и которые не являются биологически или другим образом нежелательными. Фармацевтически приемлемые аддитивные соли основания могут быть получены из неорганических и органических оснований. Соли, полученные из неорганических оснований, включают, лишь в качестве примера, соли натрия, калия, лития, аммония, кальция и магния. Соли, полученные из органических оснований, включают, но не ограничиваются этим, соли первичных, вторичных и третичных аминов, такие как алкиламины, диалкиламины, триалкиламины, замещенные алкиламины, ди(замещенные алкил)амины, три(замещенные алкил)амины, алкениламины, диалкениламины, триалкениламины, замещенные алкениламины, ди(замещенные алкенил)амины, три(замещенные алкенил)амины, циклоалкиламины, ди(циклоалкил)амины, три(циклоалкил)амины, замещенные циклоалкиламины, дизамещенный циклоалкиламин, тризамещенные циклоалкиламины, циклоалкениламины, ди(циклоалкенил)амины, три(циклоалкенил)амины, замещенные циклоалкениламины, дизамещенный циклоалкениламин, тризамещенные циклоалкениламины, ариламины, диариламины, триариламины, гетероариламины, дигетероариламины, тригетероариламины, гетероциклические амины, дигетероциклические амины, тригетероциклические амины, смешанные ди- и триамины, где, по меньшей мере, два из заместителей на амине различны и выбраны из группы, состоящей из алкила, замещенного алкила, алкенила, замещенного алкенила, циклоалкила, замещенного циклоалкила, циклоалкенила, замещенного циклоалкенила, арила, гетероарила, гетероциклила и тому подобного. Включаются также амины, где два или три заместителя, вместе с аминоазотом, образуют гетероциклическую или гетероарильную группу.

Конкретные примеры подходящих аминов включают, лишь в качестве примера, изопропиламин, триметиламин, диэтиламин, три(изопропил)амин, три(н-пропил)амин, этаноламин, 2-дметиламиноэтанол, трометамин, лизин, аргинин, гистидин, кофеин, прокаин, гидрабамин, холин, бетаин, этилендиамин, глюкозамин, N-алкилглюкамины, теобромин, пурины, пиперазин, пиперидин, морфолин, N-этилпиперидин и тому подобное.

Фармацевтически приемлемые аддитивные соли кислоты могут быть получены из неорганических и органических кислот. Соли, полученные из неорганических кислот, включают хлористоводородную кислоту, бромистоводородную кислоту, серную кислоту, азотную кислоту, фосфорную кислоту и тому подобное. Соли, полученные из органических кислот, включают уксусную кислоту, пропионовую кислоту, гликолевую кислоту, пировиноградную кислоту, щавелевую кислоту, яблочную кислоту, малоновую кислоту, янтарную кислоту, малеиновую кислоту, фумаровую кислоту, винную кислоту, лимонную кислоту, бензойную кислоту, коричную кислоту, миндальную кислоту, метансульфокислоту, этансульфокислоту, п-толуол-сульфокислоту, салициловую кислоту и тому подобное.

Применяемый здесь термин "фармацевтически приемлемый носитель" включает любые и все растворители, дисперсионные среды, глазировочные агенты, антибактериальные и противогрибковые агенты, изотоничные и задерживающие всасывание агенты и тому подобное. Применение таких сред и агентов для фармацевтически активных веществ хорошо известно в данной области техники. Охватывается применение в терапевтических композициях любой традиционной среды или агента, за исключением несовместимых с активным ингредиентом. В композиции могут также быть включены дополнительные активные ингредиенты.

Применяемый здесь термин "агонист" относится к способности соединения взаимодействовать с рецептором и вызывать максимальный физиологический эффект (то есть, активировать или стимулировать рецептор). Данный эффект известен как внутренняя эффективность. Специалистам в данной области техники известны многие полные агонисты аденозинового рецептора A₁, например N⁶-циклопентиладенозин (CPA или CCPA). Некоторые агонисты аденозина A₁ обозначают как "частичные агонисты", потому что они взаимодействуют с рецепторами A₁ аденозина, но индуцируют ответ, меньший по сравнению с максимальным при сравнении с таким агонистом, как CPA.

Внутренняя эффективность соединения представляет собой его дифференцированный эффект на выбранную ткань. Таким образом, соединение может быть полным агонистом в данной ткани, но частичным в других. Соединения, выявленные в данном изобретении, обладают терапевтически приемлемым сродством к рецептору A₁ аденозина, но имеют внутреннюю эффективность, варьирующуюся от полных агонистов до частичных агонистов. То есть некоторые соединения могут не оказывать действия в отношении данной эффекторной системы в данном типе клеток, но могут быть полными агонистами в клетках другого типа и/или в отношении другой эффекторной системы. Частичный агонист, предназначенный для выбранной мишени, вероятно, вызывает меньшие побочные эффекты по сравнению с полным агонистом, поскольку он, по-видимому, должен вызывать меньшую десенситизацию рецептора A₁ (R. B. Clark, B. J. Knoll, R. Barber TiPS, Vol. 20 (1999) p. 279-286) и меньшие побочные эффекты. Хроническое введение полного агониста (R-N₆-фенилизопропиладенозина, R-PIA) в течение 7 дней приводило к десенситизации рецептора A₁ в отношении дромотропного ответа у морских свинок (следует отметить: наблюдалось снижение количества рецепторов - D. M. Dennis, J. C. Shryock, L. Belardinelli JPET, Vol. 272 (1995) p. 1024-1035). Было показано, что ингибирующее действие агониста A₁ на продукцию цАМФ аденилатциклазой в адипоцитах ведет также к десенситизации после хронического применения агониста A₁ (W. J. Parsons and G. L. J. Biol. Chem. Vol. 262 (1987) p. 841-847).

Номенклатура

Названия и нумерация соединений по изобретению иллюстрируются с помощью типичного соединения формулы I, в котором R¹ представляет собой циклопентил, R ² представляет собой водород, R³ представляет собой 2-фторфенил, R⁴ и R ⁵ оба представляют собой водород, X, X¹ и Y представляют собой ковалентные связи и Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-:

1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-9.gif" height=100 BORDER="0">

которое называется: (4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-[2-(2-фторфенил)этинил]оксолан-3,4-диол, или альтернативно может быть названо: (4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)-9H-пурин-9-ил]-5-[2-(2-фторфенил)этинил]тетрагидрофуран-3,4-диол.

Параметры реакции синтеза

Термины "растворитель", "инертный органический растворитель" или "инертный растворитель" обозначают растворитель, инертный в условиях описываемой непосредственно в связи с этим реакции [включая, например, бензол, толуол, ацетонитрил, тетрагидрофуран ("ТГФ"), диметилформамид ("ДМФА"), хлороформ, метиленхлорид (или дихлорметан), диэтиловый эфир, метанол, пиридин и тому подобное]. Если не указано иначе, растворители, применяемые в реакциях настоящего изобретения, являются инертными органическими растворителями.

Термин "q.s." обозначает добавление количества, достаточного для достижения установленной функции, например для доведения раствора до желаемого объема (т.е. 100%).

Синтез соединений формулы I

Соединения формулы I, где R³ представляет собой водород, X ¹ и Y представляют собой ковалентные связи и Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-, получают исходя из соединения формулы (1), как показано на схеме реакций I.

1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-11.gif" height=100 BORDER="0">

1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-12.gif" height=100 BORDER="0">

Стадия 1 - Получение формулы (2)

Исходные соединения формулы (1) имеются в продаже (например, соединение формулы (1), в котором R² представляет собой водород, можно приобрести в Aldrich, Milwaukee) или их получают с помощью способов, хорошо известных специалистам в данной области техники. Соединение формулы (2) обычно получают из соединения формулы (1) путем взаимодействия с 2,2-диметоксипропаном в инертном растворителе, предпочтительно в N,N-диметилформамиде, в присутствии каталитического количества кислотного катализатора, предпочтительно п-толуолсульфокислоты, при температуре около 40-90°C, предпочтительно при около 70°C, в течение около 24-72 часов, предпочтительно в течение около 48 часов. После практически полного завершения реакции продукт формулы (2) выделяют обычными способами, например удалением растворителя при пониженном давлении и очисткой остатка хроматографией.

Стадия 2 - Получение формулы (3)

6-Хлор радикал в соединении формулы (2) замещают путем взаимодействия с соединением формулы R¹XNH ₂, где X имеет значения, указанные выше, в присутствии основания, например триэтиламина. Реакцию проводят в инертном протонсодержащем растворителе, например этаноле, при температуре, равной приблизительно температуре кипения с обратным холодильником, в течение около 14-48 часов, предпочтительно около 16 часов. После практически полного завершения реакции продукт формулы (3) выделяют обычными способами, например удалением растворителя при пониженном давлении с последующей кристаллизацией остатка из подходящего растворителя.

Следует отметить, что стадии 1 и 2 можно проводить в обратном порядке.

Стадия 3 - Получение формулы (4)

Гидроксиметильное соединение формулы (3) окисляют до альдегида формулы (4) с применением модификации окисления по Moffat. Обычно к соединению формулы (3) добавляют смесь 1,3-дициклогексилкарбодиимида DCC, диметилсульфоксида и пиридина. Начальную реакцию проводят при температуре от около -5° до около 10°C, предпочтительно около 0°C, и затем при комнатной температуре в течение около 6-48 часов, предпочтительно около 18 часов. После практически полного завершения реакции альдегид формулы (4) выделяют обычными способами, например с помощью распределения продукта между этилацетатом и водой и удаления растворителя при пониженном давлении. Продукт используют на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 4 - Получение формулы (5).

4'-Альдегидную группу затем преобразуют в этинильную группу путем взаимодействия с бромметилтрифенилфосфонийбромидом в присутствии сильного основания, предпочтительно трет-бутоксида калия. Реакцию проводят в инертном растворителе, предпочтительно в тетрагидрофуране, при температуре около -80°C, давая реакционной смеси постепенно нагреться до комнатной температуры в течение приблизительно 1-3-дневного периода. После практически полного завершения реакции продукт формулы (5) выделяют обычными способами, например удалением растворителя при пониженном давлении с последующим распределением между растворителем, таким как этилацетат, и водой, удалением растворителя при пониженном давлении. Остаток затем может быть дополнительно очищен хроматографией на силикагеле с получением 5'-этинильного соединения формулы (5).

Стадия 5 - Получение соединения формулы I

Защищенное ацетонидом соединение формулы (5) затем преобразуют в соединение формулы I, в котором Y представляет собой ковалентную связь, Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C- и R³ представляет собой водород, обработкой кислотой, например органической кислотой, например уксусной кислотой. Реакцию проводят в смеси кислоты и воды, при около 50-100°C, предпочтительно около 80-90°C, в течение около 10-48 часов, предпочтительно около 16 часов. После практически полного завершения реакции продукт формулы I выделяют обычными способами, например удалением растворителя при пониженном давлении, с последующей хроматографией остатка на силикагеле.

Альтернативное получение соединения формулы I

Соединения формулы I, в которых R³ представляет собой водород, X¹ и Y представляют собой ковалентные связи и Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-, могут быть альтернативно получены, исходя из соединения формулы (1), как показано на схеме реакций IA. Данный способ синтеза предпочтителен, когда на R' части имеется заместитель, например гидроксильный заместитель.

1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-15.gif" height=100 BORDER="0">

Стадию 1 проводят, как показано на схеме реакций I.

Стадия 2 - Получение формулы (4a)

Гидроксиметильное соединение формулы (2) окисляют до альдегида формулы (4a) с применением модификации окисления по Moffat. Обычно к соединению формулы (2) добавляют смесь DCC, диметилсульфоксида и пиридина. Начальную реакцию проводят при температуре от около -5° до около 10°C, предпочтительно около 0°C, и затем при комнатной температуре в течение около 6-48 часов, предпочтительно около 18 часов. После практически полного завершения реакции альдегид формулы (4a) выделяют обычными способами, например путем распределения продукта между этилацетатом и водой и удаления растворителя при пониженном давлении. Продукт используют на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 3 - Получение формулы (5a)

5'-Альдегидную группу преобразуют в этинильную группу путем взаимодействия с бромметилтрифенилфосфонийбромидом в присутствии сильного основания, предпочтительно трет-бутоксида калия. Реакцию проводят в инертном растворителе, предпочтительно тетрагидрофуране, при температуре около -80°C, давая реакционной смеси постепенно нагреться до комнатной температуры в течение около 1-3-дневного периода. После практически полного завершения реакции продукт формулы (5a) выделяют обычными способами.

Стадия 4 - Получение формулы (5)

6-Хлор часть в соединении формулы (5a) замещают путем взаимодействия с соединением формулы R¹XNH ₂, где X имеет значения, указанные выше, в присутствии основания, например триэтиламина. Реакцию проводят в инертном протонсодержащем растворителе, например этаноле, при температуре, равной приблизительно температуре кипения с обратным холодильником, в течение около 14-48 часов, предпочтительно около 16 часов. После практически полного завершения реакции продукт формулы (5) выделяют обычными способами.

Стадия 5 - Получение формулы I

Соединение формулы (5) затем преобразуют в соединение формулы I, как показано на схеме реакций I выше.

Получение соединения формулы I, в котором R ³ не является водородом

Получение соединения формулы I, в котором R³ не является водородом, X¹ представляет собой ковалентную связь, Y имеет значения, указанные выше, а Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-, представлено на схеме реакций II.

1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-17.jpg" height=100 BORDER="0">

Стадия 1 - Получение формулы (6)

4'-Этинильное соединение формулы (5) преобразуют в соединение формулы (6) путем взаимодействия с соединением формулы R³Y-LG, в котором LG представляет собой удаляемую группу, предпочтительно галоген, например йод или бром. Реакцию проводят в присутствии каталитических количеств дихлорбис(трифенилфосфин)палладия (II) и йодида меди (II) плюс третичный амин, например триэтиламин, в инертном растворителе, например тетрагидрофуране, при температуре, равной комнатной температуре, в течение около 15 минут. После практически полного завершения реакции продукт формулы I выделяют обычными способами, например путем удаления растворителя при пониженном давлении, с последующей препаративной хроматографией на силикагеле с получением 5'-змещенного этинильного соединения формулы I.

Стадия 2 - Получение формулы I

Соединение формулы (6) затем подвергают снятию защиты тем же способом, что показано выше в схеме реакций 1, путем обработки кислотой, предпочтительно органической кислотой, например уксусной кислотой, с получением соединения формулы I.

Альтернативное получение соединения формулы I, в котором R ³ не является водородом

Альтернативно, соединение формулы I, в котором R ³ не является водородом, X¹ представляет собой ковалентную связь, Y имеет значения, указанные выше, а Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-, может быть получено прямо из соединения формулы I, в котором R³ представляет собой водород, как показано на схеме реакций IIA.

1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-19.jpg" height=100 BORDER="0">

Стадия 1

4'-Этинильное соединение формулы I преобразуют в соединение формулы I, в котором R³ не является водородом, путем взаимодействия с соединением формулы R³Y-LG, в котором LG представляет собой удаляемую группу, предпочтительно галоген, например йод или бром. Реакцию осуществляют в присутствии каталитических количеств дихлорбис(трифенилфосфин)палладия (II) и йодида меди (I) плюс третичный амин, например триэтиламин, в инертном растворителе, например тетрагидрофуране, при температуре, равной комнатной температуре, в течение около 15 минут. После практически полного завершения реакции продукт формулы I, в котором R ³ не является водородом, выделяют обычными способами, например путем удаления растворителя при пониженном давлении, с последующей препаративной хроматографией на силикагеле с получением 4'-замещенного этинильного соединения формулы I.

Получение соединения формулы I, в котором Z представляет собой -CH=CH-

Получение соединения формулы I, в котором X¹ представляет собой ковалентную связь и Z представляет собой -CH=CH-, показано на схеме реакций III.

1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-20.jpg" height=100 BORDER="0">

Стадия 1 - Получение формулы (7)

4'-Альдегидную группу преобразуют в этенильную группу с помощью реакции Wittig, путем взаимодействия соединения формулы (4), получение которого было показано выше, с R ³Y-CH₂P(Ph)₃ Br (где Ph представляет собой фенил) в присутствии основания, например водного гидроксида натрия. Реакцию проводят в инертном растворителе, например дихлорметане, при температуре, равной комнатной температуре, в течение периода около 1-10 часов. После практически полного завершения реакции продукт формулы (7) выделяют обычными способами, например путем удаления растворителя при пониженном давлении с последующим распределением между растворителем, таким как этилацетат, и водой, удалением растворителя при пониженном давлении. Остаток может быть дополнительно очищен хроматографией на силикагеле с получением 4'-этенильного соединения формулы (7).

Стадия 2 - Получение соединения формулы I, в котором Z представляет собой -CH=CH-

Соединение формулы (7) затем подвергают снятию защиты тем же способом, что и показанный выше на схеме реакций 1, обработкой кислотой, например органической кислотой, например уксусной кислотой, с получением соединения формулы I.

А. Получение соединения формулы I, в котором Z представляет собой -CH ₂CH₂-

Получение соединения формулы I, в котором X ¹ представляет собой ковалентную связь и Z представляет собой -CH₂CH₂-, показано на схеме реакций IV.

1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-21.jpg" height=100 BORDER="0">

Соединение формулы I, в котором Z представляет собой -CH₂CH₂-, получают из соединения формулы I, в котором Z представляет собой -CH=CH- (или, альтернативно, может быть применено соединение формулы I, в котором Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-). Обычно соединение формулы I, в котором Z представляет собой -CH=CH-, растворяют в инертном растворителе и перемешивают с катализатором, например гидроксидом палладия, и реагентом переноса при каталитической гидрогенизации, таким как циклогексен. Реакцию проводят в инертном растворителе, например этаноле, при комнатной температуре, в течение около 10-48-часового периода. После практически полного завершения реакции продукт формулы I выделяют обычными способами, например удалением растворителя при пониженном давлении с последующей хроматографией, с получением соединения формулы I, в котором Z представляет собой -CH₂CH ₂-.

B. Получение формулы I, где R ² представляет собой водород и X ¹ представляет собой CH₂ .

Соединения формулы I, где R ³ представляет собой водород, Y представляет собой ковалентную связь, X¹ представляет собой CH ₂ и Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-, могут быть получены, исходя из соединения формулы (4), как показано на схеме реакций V.

1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-24.jpg" height=100 BORDER="0">

Стадия 1 - Получение формулы (8)

Гексаметилдисилазан N-натрия вводят во взаимодействие с бензилоксиметилтрифенилфосфония хлоридом (формула 4a) при температуре около -80°C в течение около 1 часа. Соединение формулы (4), полученное, как показано на схеме реакций 1, или способами, хорошо известными специалистам в данной области техники, растворяют в инертном растворителе, например тетрагидрофуране, и добавляют к реакционной смеси, температуре которой дают повыситься до комнатной температуры, и перемешивают в течение 4-24 часов, предпочтительно 8 часов. После практически полного завершения реакции продукт выделяют и очищают обычными способами, например кристаллизацией остатка.

Стадия 2a - Получение формулы (9)

Соединение формулы (9) получают обычными способами из соединения формулы (8) гидрогенизацией в присутствии катализатора, например Pd/C. После практически полного завершения реакции продукт формулы (9) выделяют обычными способами и применяют без дополнительной очистки.

Стадия 2b - Получение формулы (10)

Соединение формулы (9) подвергают снятию защиты гидрогенизацией в присутствии катализатора, например гидроксида палладия, и реагента переноса при каталитической гидрогенизации, такого как циклогексен. Реакцию проводят в инертном растворителе, например этаноле, при комнатной температуре, в течение около 2-7-дневного периода, предпочтительно 5 дней, при около 75-100°C, предпочтительно около 80°C. После практически полного завершения реакции продукт формулы (10) выделяют обычными способами, например удалением растворителя фильтрацией, с последующей очисткой хроматографией на силикагеле, с получением соединения формулы (10).

Стадия 3 - Получение формулы (11)

Гидроксиметильное соединение формулы (10) окисляют до альдегида формулы (11) с применением модификации окисления по Moffat. Обычно соединение формулы (10) вводят во взаимодействие со смесью дициклогексилкарбодиимида, диметилсульфоксида и пиридина. Начальную реакцию проводят при температуре около -5°-10°C, предпочтительно около 0°C, и затем при комнатной температуре в течение около 6-48 часов, предпочтительно около 18 часов. После практически полного завершения реакции альдегид формулы (11) выделяют обычными способами. Продукт, например, применяют на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 4 - Получение формулы (12)

4'-Альдегидную группу преобразуют в этинильную группу путем взаимодействия с бромметилтрифенилфосфонийбромидом в присутствии сильного основания, например трет-бутоксида калия. Реакцию проводят в инертном растворителе, например тетрагидрофуране, при температуре около -80°C, давая реакционной смеси постепенно нагреться до комнатной температуры и перемешивая в течение около 1-3 дней. После практически полного завершения реакции продукт формулы (12) выделяют и очищают обычными способами, например хроматографией на силикагеле, с получением 5'-эинильного соединения формулы (12).

Стадия 5 - Получение формулы I

Защищенное ацетонидом соединение формулы (12) затем преобразуют в соединение формулы I, в котором Y представляет собой ковалентную связь, Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C- и R³ представляет собой водород, обработкой кислотой, например уксусной кислотой. Реакцию проводят в смеси кислоты и воды при около 50-100°C, предпочтительно около 80-90°C, в течение около 10-48 часов, предпочтительно около 16 часов. После практически полного завершения реакции продукт формулы I выделяют и очищают обычными способами, например хроматографией остатка на силикагеле.

Получение соединений формулы I, где X¹ представляет собой (CH₂) ₂

1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-26.jpg" height=100 BORDER="0">

Соединения формулы (1), где X ¹ представляет собой (CH₂) ₂ получают, как показано на схеме реакций V, но с заменой соединения формулы (4a) соединением формулы (4b).

1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-27.jpg" height=100 BORDER="0">

Синтез соединений (4a) и (4b)

Хлор(фенилметокси)этан и трифенилфосфин вводят во взаимодействие в инертном растворителе, например бензоле, и поддерживают при условиях кипения с обратным холодильником в течение ночи. После практически полного завершения реакции продукт формулы (4a) выделяют обычными способами.

Сходным образом, заменой хлор(фенилметокси)метана хлор(фенилметокси)этаном получают соединение формулы (4b).

Соединения формулы I, где X¹ представляет собой (CH₂)₂ и R ³ представляет собой водород, преобразуют в соединения формулы I, где X¹ представляет собой (CH ₂)₂, а R³ отличен от водорода, как показано на схеме реакций II выше.

Применение, исследование и введение

Общее применение

Соединения формулы I эффективны при лечении состояний, для которых известен ответ на введение частичного или полного агониста аденозинового рецептора A₁. Такие состояния включают, но не ограничиваются этим, острые и хронические расстройства сердечного ритма, особенно те заболевания, которые отличаются высокой скоростью сердечных сокращений, при которых скорость определяется нарушениями синоатриальной, предсердной ткани и ткани AV узла. Такие расстройства включают, но не ограничиваются этим, фибрилляцию предсердий, наджелудочковую тахикардию и трепетание предсердий, застойную сердечную недостаточность и внезапную смерть в результате аритмии, инсулиннезависимый сахарный диабет, гипергликемию, эпилепсию (антиконвульсантная активность) и сердечную и нейрозащиту.

Агонисты A₁, ввиду их ингибирующего действия на образование циклического АМФ, оказывают антилиполитическое действие в адипоцитах, что ведет к сниженному высвобождению неэтерифицированных жирных кислот (НЭЖК) (E. A. van Schaick et al J. Pharmacokinetics and Biopharmaceutics, Vol. 25 (1997) p. 673-694 и P. Strong Clinical Science Vol. 84 (1993) p. 663-669). Инсулиннезависимый сахарный диабет (ИНСД) характеризуется резистентностью к инсулину, которая приводит к гипергликемии. Факторами, вносящими свой вклад в наблюдаемую гипергликемию, являются отсутствие нормального захвата глюкозы и активации гликогенсинтазы (GS) скелетных мышц. Было показано, что повышенный уровень НЭЖК ингибирует стимулируемый инсулином захват глюкозы и синтез гликогена (D. Thiebaud et al Metab. Clin. Exp. Vol. 31 (1982) p. 1128-1136 и G. Boden et al J. Clin. Invest. Vol. 93 (1994) p. 2438-2446). Еще в 1963 г. P. J. Randle предложил гипотезу о цикле глюкозы и жирных кислот (P. J. Randle et al. Lancet (1963) p. 785-789). В соответствии с ней ограничение снабжения периферических тканей жирными кислотами способствует утилизации углеводов (P. Strong et al. Clinical Science Vol. 84 (1993) p. 663-669).

Были рассмотрены преимущества агониста A ₁ при расстройствах центральной нервной системы (L. J. S. Knutsen и T. F. Murray. In Purinergic Approaches in Experimental Therapeutics, Eds. K. A. Jacobson and M. F. Jarvis (1997) Wiley-Liss, N. Y., P.423-470). Вкратце, на основе экспериментальных моделей эпилепсии было показано, что смешанный агонист A _2A:A₁, метрифудил, является сильным антиконвульсантом в отношении приступов, вызванных обратным бензодиазепиновым агонистом метил 6,7-диметокси-4-этил-бета-карболин-3-карбоксилатом (DMCM, H. Klitgaard. Eur. J. Pharmacol. (1993) Vol. 224, p. 221-228). В других исследованиях, в которых применялся CGS 21680, агонист A_2A, был сделан вывод о том, что антиконвульсантная активность была обусловлена активацией рецептора A ₁ (G. Zhang et al. Eur. J. Pharmacol. Vol. 255 (1994) p. 239-243). Кроме того, аденозиновые селективные агонисты A ₁, как было показано, обладают антиконвульсантной активностью на модели DMCM (L. J. S. Knutsen In Adenosine and Adenne Nucleotides: From Molecular Biology to Integrative Physiology; eds. L. Belardinelli and A. Pelleg, Kluwer: Boston, 1995, pp. 479-487). Второй областью, где аденозиновый агонист A₁ обладает преимуществом, являются животные модели ишемии переднего мозга, как это было показано Knutsen et al. (J. Med. Chem. Vol. 42 (1999) p. 3463-3477). Полагают, что преимущество в нейрозащите отчасти обусловлено ингибированием высвобождения возбуждающих аминокислот (там же).

Исследование

Исследование активности производят, как описано в патентных и литературных ссылках, цитированных выше, и примерах, описанных ниже, и с помощью способов, очевидных для специалистов в данной области техники.

Фармацевтические композиции

Соединения формулы I обычно вводят в виде фармацевтических композиций. В данном изобретении поэтому предлагаются фармацевтические композиции, которые содержат в качестве активного ингредиента одно или несколько соединений формулы I, или их фармацевтически приемлемых солей, или сложных эфиров, и один или несколько фармацевтически приемлемых наполнителей, носителей, включая инертные твердые разбавители и наполнители, разбавители, включая стерильный водный раствор и различные органические растворители, усилители всасывания, солюбилизаторы и адъюванты. Соединения формулы I можно вводить отдельно или в сочетании с другими терапевтическими агентами. Такие композиции получают способом, хорошо известным в фармацевтической области (смотри, например, Remington's Pharmaceutical Sciences, Mace Publishing Co., Philadelphia, PA 17^th Ed. (1985) и "Modern Pharmaceutics", Marcel Dekker, Inc. 3^rd Ed. (G.S. Banker & C.T. Rhodes, Eds.).

Введение

Соединения формулы I можно вводить в виде однократных или раздельных доз с помощью любых приемлемых способов введения агентов, обладающих сходными свойствами, например, как описано в тех патентах и патентных заявках, которые включены в качестве ссылок, включая ректальный, защечный, интраназальный и чрескожный пути, посредством внутриартериальной инъекции, внутривенного, внутрибрюшинного, парентерального, внутримышечного, подкожного, перорального, местного введения, в виде ингалянта или посредством пропитанного или покрытого устройства, такого как, например, стент или вводимый в артерию цилиндрический полимер.

Одним из способов введения является парентеральный, путем инъекции. Формы, в которые новые композиции настоящего изобретения могут быть включены для введения путем инъекции, включают водные или масляные суспензии или эмульсии с конопляным маслом, кукурузным маслом, хлопковым маслом или арахисовым маслом, а также эликсиры, маннитовый, декстрозный или стерильный водный раствор и сходные фармацевтические носители. Водные растворы в солевом растворе также обычно применяются для инъекции, но являются менее предпочтительными в контексте настоящего изобретения. Могут быть также применены этанол, глицерин, пропиленгликоль, жидкий полиэтиленгликоль и тому подобное (их подходящие смеси), производные циклодекстрина и растительные масла. Подходящая текучесть может быть поддержана, например, путем применения покрытия, такого как лецитин, путем поддержания желаемого размера частиц в случае дисперсии и путем применения поверхностно-активных веществ. Предотвращение действия микроорганизмов может быть достигнуто с помощью различных антибактериальных и противогрибковых агентов, например парабенов, хлорбутанола, фенола, сорбиновой кислоты, тимеросала и тому подобного.

Стерильные растворы для инъекций получают включением соединения формулы I в необходимое количество подходящего растворителя с различными другими ингредиентами по необходимости, как перечислено выше, с последующей стерилизацией фильтрованием. Обычно дисперсии получают включением различных стерилизованных активных ингредиентов в стерильный носитель, который содержит базальную дисперсионную среду и необходимые другие ингредиенты из тех, которые перечислены выше. В случае стерильных порошков для получения стерильных растворов для инъекций предпочтительными способами получения являются способы сушки в вакууме и лиофилизирования, которые дают порошок активного ингредиента плюс любого дополнительного желаемого ингредиента из их предварительно стерилизованного фильтрованием раствора.

Другим путем введения соединений формулы I является пероральное введение. Введение может быть осуществлено посредством капсулы или таблеток, покрытых для всасывания в кишечнике, или тому подобного. При получении фармацевтических композиций, которые включают, по меньшей мере, одно соединение формулы I, активный ингредиент обычно разбавляют наполнителем и/или включают в такой носитель, который может находиться в форме капсулы, саше, бумажного пакетика или другого контейнера. Когда наполнитель служит в качестве разбавителя, он может быть твердым, полутвердым или жидким веществом (как выше), которое действует в качестве растворителя, носителя или среды для активного ингредиента. Таким образом, композиции могут быть в форме таблеток, пилюль, порошков, пастилок, саше, облаток, эликсиров, суспензий, эмульсий, растворов, сиропов, аэрозолей (в виде твердой или жидкой среды), мазей, содержащих, например, до 10% по массе активного соединения, мягких и твердых желатиновых капсул, стерильных растворов для инъекций и стерильно упакованных порошков.

Некоторые примеры подходящих наполнителей включают лактозу, декстрозу, сахарозу, сорбит, маннит, крахмалы, аравийскую камедь, фосфат кальция, альгинаты, трагакант, желатин, силикат кальция, микрокристаллическую целлюлозу, поливинилпирролидон, целлюлозу, стерильную воду, патоку и метилцеллюлозу. Составы могут дополнительно включать: смазывающие агенты, такие как тальк, стеарат магния и минеральное масло; увлажняющие агенты; эмульгирующие и суспендирующие агенты; консервирующие агенты, такие как метил- и пропилгидрокси-бензоаты; подсластители и отдушки.

Композиции изобретения могут быть составлены таким образом, чтобы обеспечивать быстрое, постоянное или замедленное высвобождение активного ингредиента после введения больному с применением процедур, известных в данной области техники. Системы доставки с контролируемым высвобождением лекарства для перорального введения включают системы осмотических помп и системы с разложением, содержащие покрытые полимером резервуары или составы лекарство - полимерный матрикс. Примеры систем с контролируемым высвобождением представлены в патентах США Nos. 3845770; 4326525; 4902514 и 5616345. В другом составе для применения в способах настоящего изобретения применяют устройства для чрескожной доставки ("пластыри"). Такие чрескожные пластыри могут применяться для обеспечения непрерывного или прерывистого введения соединений настоящего изобретения в контролируемых количествах. Конструирование и применение чрескожных пластырей для доставки фармацевтических агентов хорошо известно в данной области техники. Смотри, например, патенты США Nos. 5023252, 4992445 и 5001139. Такие пластыри могут быть сконструированы для непрерывной, пульсирующей доставки или доставки по требованию фармацевтических агентов.

Композиции составляют в единицах лекарственной формы. Термин "единица лекарственной формы" относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве разовых доз для человека и других млекопитающих, причем каждая единица содержит предварительно определенное количество активного вещества, которое рассчитано для получения желаемого терапевтического эффекта, в сочетании с подходящим фармацевтическим наполнителем (например, таблетка, капсула, ампула). Соединения формулы I эффективны в широком диапазоне доз, и их обычно вводят в фармацевтически эффективном количестве. Например, для перорального введения каждая единица лекарственной формы содержит от 10 мг до 2 г соединения формулы I, более предпочтительно от 10 до 700 мг, и для парентерального введения предпочтительно от 10 до 700 мг соединения формулы I, более предпочтительно около 50-200 мг. Следует понимать, однако, что действительное количество вводимого соединения формулы I должно определяться врачом с учетом сопутствующих обстоятельств, включая подлежащее лечению состояние, выбранный путь введения, вводимое действующее соединение и его относительную активность, возраст, массу и реакцию конкретного больного, тяжесть симптомов у больного и тому подобного.

Для получения твердых композиций, таких как таблетки, основной активный ингредиент смешивают с фармацевтическим наполнителем с образованием твердого предварительного состава композиции, содержащего гомогенную смесь соединения настоящего изобретения. Гомогенность данных предварительных составов композиций обозначает, что активный ингредиент диспергирован случайным образом в композиции таким образом, что композиция может быть легко разделена на равноэффективные единицы лекарственной формы, такие как таблетки, пилюли и капсулы.

Таблетки или пилюли настоящего изобретения могут быть покрыты оболочкой или другим образом составлены с получением единицы лекарственной формы, обеспечивающей преимущество продолжительного действия, или для защиты от кислых условий в желудке. Например, таблетка или пилюля может включать компонент внутренней дозы и внешней дозы, причем последняя находится в форме оболочки в отношении первой. Два компонента могут быть разделены слоем для всасывания в кишечнике, который препятствует разрушению в желудке и обеспечивает прохождение внутреннего компонента интактным в 12-перстную кишку, или задержанное высвобождение. Для таких кишечных слоев или покрытий может быть применено множество веществ, причем такие вещества включают ряд полимерных кислот и смесей полимерных кислот с такими веществами, как шеллак, цетиловый спирт и ацетат целлюлозы.

Композиции для ингаляции или вдувания включают растворы и суспензии в фармацевтически приемлемых водных или органических растворителях или их смесях и порошки. Жидкие или твердые композиции могут содержать подходящие фармацевтически приемлемые наполнители, как описано выше. Композиции вводят через ротовой или носовой дыхательный путь для местного или системного действия. Композиции в фармацевтически приемлемых растворителях могут быть распылены с применением инертных газов. Распыленные растворы можно ингалировать прямо из распыляющего устройства, или распыляющее устройство может быть соединено с покрывалом лицевой маски или промежуточным механизмом для дыхания при повышенном давлении. Композиции в виде раствора, суспензии или порошка можно вводить, например, перорально или интраназально из устройств, которые доставляют состав подходящим образом.

Следующие примеры включены для демонстрации предпочтительных осуществлений изобретения. Специалистам в данной области техники должно быть понятно, что раскрытые в примерах способы, которые соответствуют репрезентативным способам, раскрытым изобретателем, в качестве эффективно работающих при практическом осуществлении изобретения, могут таким образом рассматриваться как созданные предпочтительные способы его практического осуществления. Однако в свете настоящего раскрытия специалистам в данной области техники должно быть ясно, что в раскрытых конкретных осуществлениях можно сделать много изменений и все еще получать сходный или подобный результат без выхода за пределы духа и объема изобретения.

Пример 1

Получение соединения формулы (3)

A. Получение соединения формулы (3), где R ¹ представляет собой циклопентил, R² представляет собой водород и X представляет собой ковалентную связь

1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-28.jpg" height=100 BORDER="0">

К раствору (2S,1R,4R,5R)-2-гидроксиметил-5-(6-хлорпурин-9-ил)тетрагидрофуран-3,4-диола ацетонида, соединение формулы (2), в котором R ² представляет собой водород (4,98 г, 15 ммоль), в этаноле (80 мл) добавляли циклопентиламин (0,6 мл, 30 ммоль) и триэтиламин (6,27 мл, 45 ммоль) и смесь кипятили с обратным холодильником в течение 16 часов. Растворитель затем удаляли при пониженном давлении и остаток распределяли между этилацетатом и 10%-ным раствором лимонной кислоты в воде и затем водой. Этилацетат удаляли из органического слоя с получением {(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-ола, соединение формулы (3).

B. Получение соединений формулы (3) с варьирующимися X, R¹ и R²

Сходным образом, следуя способу 1A, указанному выше, но заменяя циклопентиламин другими аминами формулы R¹XNH₂ , было получено следующее соединение формулы (3):

{(1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триокса-4-[6-(оксолан-3-иламино)пурин-9-ил]бицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-ол.

C. Получение соединений формулы (3) с варьирующимися X, R¹ и R ²

Сходным образом, следуя способу 1A, указанному выше, но заменяя циклопентиламин другими аминами формулы R ¹XNH₂, получают следующие соединения формулы (3):

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(циклопентилметиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-ол;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[2-трифторметил-6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-ол;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-циклобутиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-ол;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-циклогексиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-l-ол;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[2-фтор-6-циклогексиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-ол;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-циклогексилметиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-ол;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(3-фторциклопентиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-ол;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(4-трифторметилциклопентиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-ол;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(3-метоксициклопентиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-ол;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(фениламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-ол;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(бензиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-ол;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(4-фторфениламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-ол;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(пиридин-3-иламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-ол;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(тиазол-2-иламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-ол;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(тетрагидропиран-3-иламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-ол;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(тетрагидропиран-3-илметиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-ол и

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(5-фтортетрагидропиран-3-иламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-ол.

D. Получение соединений формулы (3) с варьирующимися X, R¹ и R ²

Сходным образом, следуя способу 1A, указанному выше, но заменяя циклопентиламин другими аминами формулы R ¹XNH₂, получают другие соединения формулы (3).

Пример 2

Получение соединения формулы (4)

A. Получение соединения формулы (4), где R¹ представляет собой циклопентил, R² представляет собой водород и X представляет собой ковалентную связь

1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-29.jpg" height=100 BORDER="0">

Смесь {(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-ола (0,94 г, 25 ммоль), диметилсульфоксида (7 мл), дициклогексилкарбодиимида (1,55 г) и пиридина (0,2 мл) перемешивали при 0°С в течение нескольких минут и затем добавляли трифторуксусную кислоту (0,1 мл). Смеси давали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 18 часов. Смесь затем распределяли между этилацетатом и водой и промывали водой. Растворитель удаляли из органического слоя при пониженном давлении с получением продукта, (2S,1R,4R,5R)-4-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]октан-2-карбальдегида, соединение формулы (4).

B. Получение соединений формулы (4) с варьирующимся R¹

Сходным образом, следуя способу 2A, указанному выше, но заменяя {(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-ол {(1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триокса-4-[6-(оксолан-3-иламино)пурин-9-ил]бицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-олом, было получено следующее соединение формулы (4): (2S,1R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триокса-4-[6-(оксолан-3-иламино)пурин-9-ил]бицикло[3.3.0]октан-2-карбоксальдегид.

C. Получение соединений формулы (4) с варьирующимися X, R¹ и R ²

Сходным образом, следуя способу 2A, указанному выше, но заменяя {(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-ол другими соединениями формулы (3), получают следующие соединения формулы (4):

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(циклопентилметиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]октан-2-карбоксальдегид;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[2-трифторметил-6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]октан-2-карбоксальдегид;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-циклобутиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]октан-2-карбоксальдегид;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-циклогексиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]октан-2-карбоксальдегид;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[2-фтор-6-циклогексиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]октан-2-карбоксальдегид;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-циклогексилметиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]октан-2-карбоксальдегид;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(3-фторциклопентиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]октан-2-карбоксальдегид;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(4-трифторметилциклопентиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]октан-2-карбоксальдегид;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(3-метоксициклопентиламино)пурин-9-ил] -7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]октан-2-карбоксальдегид;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(фениламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]октан-2-карбоксальдегид;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(бензиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]октан-2-карбоксальдегид;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(4-фторфениламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]октан-2-карбоксальдегид;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(пиридин-3-иламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]октан-2-карбоксальдегид;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(тиазол-2-иламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]октан-2-карбоксальдегид;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(тетрагидропиран-3-иламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]октан-2-карбоксальдегид;

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(тетрагидропиран-3-илметиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]октан-2-карбоксальдегид и

{(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(5-фтортетрагидропиран-3-иламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]октан-2-карбоксальдегид.

D. Получение соединений формулы (4) с варьирующимися X, R¹ и R ²

Сходным образом, следуя способу 2A, указанному выше, но заменяя {(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-ол другими соединениями формулы (3), получают другие соединения формулы (4).

Пример 3

Получение соединения формулы (5)

A. Получение соединения формулы (5), где R¹ представляет собой циклопентил, а R² представляет собой водород

1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-30.jpg" height=100 BORDER="0">

К суспензии трет-бутоксида калия (0,84 г, 7,5 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) при -78°С добавляли бромметилтрифенилфосфоний (1,64 г, 3,75 ммоль) небольшими порциями и смесь перемешивали в течение 2 часов. К данной смеси добавляли раствор (2S,1R,4R,5R)-4-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]октан-2-карбоксальдегида (0,932 г, 2,5 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл) и смесь перемешивали в течение 2 часов при -78°С. Реакционной смеси затем давали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 6 дней, после чего гасили водным раствором хлорида аммония и распределяли между водой и этилацетатом. Органический слой отделяли, сушили над сульфатом магния, фильтровали и растворитель удаляли из фильтрата при пониженном давлении с получением [9-((1R,2S,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-9-ил]циклопентиламина, соединение формулы (5).

B. Получение соединений формулы (5) с варьирующимся R¹

Сходным образом, следуя способу 3A, указанному выше, но заменяя (2S,1R,4R,5R)-4-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]октан-2-карбоксальдегид {(1R,2S,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триокса-4-[6-(оксолан-3-иламино)пурин-9-ил]бицикло[3.3.0]октан-2-карбоксальдегидом, было получено следующее соединение формулы (5): (1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-9-ил]оксолан-3-иламин.

C. Получение соединений формулы (4) с варьирующимися X, R¹ и R ²

Сходным образом, следуя способу 3A, указанному выше, но заменяя {(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-ол другими соединениями формулы (3), получают следующие соединения формулы (4):

{(1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-9-ил]циклопентилметиламин;

{(1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-2-трифторметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-9-ил]циклопентиламин;

{(1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-9-ил]циклобутиламин;

{(1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-9-ил]циклогексиламин;

{(1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-9-ил]-2-фтор-6-циклогексиламин;

{(1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-9-ил]циклогексилметиламин;

{(1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-9-ил]-3-фторциклопентиламин;

{(1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-9-ил]-4-трифторметилциклопентиламин;

{(1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-9-ил]-3-метоксициклопентиламин;

{(1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-9-ил]-фениламин;

{(1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-9-ил]бензиламин;

{(1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-9-ил](4-фторфениламин);

{(1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-9-ил]-пиридин-3-иламин;

{(1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-илпурин-9-ил]-тиазол-2-иламин;

{(1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-9-ил](тетрагидропиран-3-иламин);

{(1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-9-ил]-тетрагидропиран-3-илметиламин и

{(1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-9-ил]-5-фтортетрагидропиран-3-иламин.

D. Получение соединений формулы (5) с варьирующими X, R¹ и R ²

Сходным образом, следуя способу 3A, указанному выше, но заменяя {(1R,2R,4R,5R)-4-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}метан-1-ол другими соединениями формулы (4), получают другие соединения формулы (5).

Пример 4

Получение соединения формулы I

A. Получение соединения формулы I, где R¹ представляет собой циклопентил, R², R ³, R⁴ и R⁵ представляют собой водород, X, X¹ и Y представляют собой ковалентные связи и Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-

1, патент № 2340623" SRC="" height=100 BORDER="0">

[9-((1R,2R,4R,5R)-4-Этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин (0,28 г) растворяли в 20 мл смеси уксусная кислота:вода (80:20) и перемешивали в течение ночи при 75°С. Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток очищали препаративной ТСХ с элюцией смесью метанол:метиленхлорид (1:8), с получением (4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диола, соединение формулы I.

B. Получение соединения формулы I, где R¹ представляет собой тетрагидрофуран-3-ил, R² , R³, R ⁴ и R⁵ представляют собой водород, X, X¹ и Y представляют собой ковалентные связи и Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-

Сходным образом, следуя способу 4A, указанному выше, но заменяя [9-((1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин (1R,2R, 4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)-пурин-9-ил]оксолан-3-иламином, получают следующие соединения формулы I:

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(оксолан-3-иламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентилметиламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[2-трифторметил-6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклобутиламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклогексиламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[2-фтор-6-(циклогексиламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклогексилметиламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(3-фторциклопентиламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(4-трифторметилциклопентиламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(3-метоксициклопентиламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(фениламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(бензиламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(4-фторфениламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(пиридин-3-иламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(тиазол-2-иламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(тетрагидропиран-3-иламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(тетрагидропиран-3-илметиламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диол и

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(5-фтортетрагидропиран-3-иламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диол.

C. Получение соединений формулы I с варьирующимися X, R¹ и R ²

Сходным образом, следуя способу 4A, указанному выше, но заменяя [9-((1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин другими соединениями формулы (5), получают другие соединения формулы I.

Пример 5

Получение соединения формулы 6

A. Получение соединения формулы (6), где R¹ представляет собой циклопентил, R² представляет собой водород, R³ представляет собой 2-трифторметилфенил, Y представляет собой ковалентную связь и Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-

1, патент № 2340623" SRC="" height=100 BORDER="0">

К раствору [9-((1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламина (40 мг, 0,12 ммоль), соединение формулы (5), в тетрагидрофуране (4 мл) в атмосфере азота добавляли в каталитических количествах (3 мг) дихлорбис(трифенилфосфин)палладий (II) и йодид меди (II) и затем 1-йод-2-трифторметилбензол (0,25 мл, 0,3 ммоль). Затем добавляли триэтиламин (0,4 мл) и смесь перемешивали в течение 15 минут при комнатной температуре. Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток очищали препаративной ТСХ с элюцией смесью метанол:метиленхлорид (6.5:1) с получением [9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[2-(трифторметил)- фенил]этинил}-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламина, соединение формулы (6).

B. Получение соединения формулы (6), где R¹ представляет собой циклопентил или тетрагидрофуран-3-ил, R ², R⁴ и R ⁵ представляют собой водород, X, X¹ и Y представляют собой ковалентные связи и Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C- при варьирующемся R³

Сходным образом, следуя способу 5A, указанному выше, но заменяя [9-((1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин подходящими соединениями формулы (5), получают следующие соединения формулы (6):

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[2-(трифторметил)фенил]этинил}-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]оксолан-3-иламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[2-фторфенил]этинил}-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]оксолан-3-иламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[2-хлорфенил]этинил}-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]оксолан-3-иламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[тиен-2-ил]этинил}-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]оксолан-3-иламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[2-хлорфенил]этинил}-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин и

{9-[(1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-(2-(2-тиенил)этинил)-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил]пурин-6-ил}циклопентиламин.

C. Получение соединения формулы (6) с варьирующимися R¹, R ², R³, R ⁴, R⁵ , X, X¹ и Y, где Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-

Сходным образом, следуя способу 5A, указанному выше, но необязательно заменяя [9-((1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин другими соединениями формулы (5) и необязательно заменяя 1-йод-2-трифторметилбензол другими соединениями формулы R³Y-LG, где LG представляет собой удаляемую группу, получают следующие соединения формулы I:

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[2-метилфенил]этинил}-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[2-фторфенил]этинил}-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[фенилэтинил]-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[5-хлортиен-2-ил]этинил}-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[4-метилизоксазол-3-ил]этинил}-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[3,5-диметилизоксазол-4-ил]этинил}-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[циклопентил]этинил}-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[2-фторциклогексил]этинил}-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[пиперидин-2-ил]этинил}-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[4-метилпиперазин-1-ил]этинил}-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[пиридин-2-ил]этинил}-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[6-фторпиридин-2-ил]этинил}-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[тиазол-2-ил]этинил}-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[пиримидин-2-ил]этинил}-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[2-фторфенил]этинил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-6-ил]циклопентилметиламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-2-трифторметил-7,7-диметил-4-{2-[2-фторфенил]этинил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-6-ил]циклопентилметиламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[2-фторфенил]этинил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-6-ил]циклобутиламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[2-фторфенил]этинил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-6-ил]циклогексиламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[2-фторфенил]этинил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-6-ил](2-фторциклогексил)амин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[2-фторфенил]этинил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-6-ил]циклогексилметиламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[2-фторфенил]этинил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-6-ил]-3-фторциклопентиламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[2-фторфенил]этинил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-6-ил]-4-трифторметилциклопентиламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-2-[2-фторфенил]этинил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-6-ил]-3-метоксициклопентиламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[2-фторфенил]этинил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-6-ил]фениламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[2-фторфенил]этинил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-6-ил](4-фторфенил)амин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[2-фторфенил]этинил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-6-ил]бензиламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[2-фторфенил]этинил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-6-ил]пиридин-3-иламин;

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[2-фторфенил]этинил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил-пурин-6-ил]тиазол-2-иламин и

[9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[тиен-2-ил]этинил}-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил](5-фтороксолан-3-иламин).

D. Получение соединений формулы I с варьирующимися X, R¹ и R ²

Сходным образом, следуя способу 5A, указанному выше, но необязательно заменяя [9-((1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин другими соединениями формулы (5) и необязательно заменяя 1-йод-2-трифторметилбензол другими соединениями формулы R³Y-LG, где LG представляет собой удаляемую группу, получают другие соединения формулы I.

Пример 6

Получение соединения формулы I

A. Получение соединения формулы I, где R¹ представляет собой циклопентил, R², R ⁴ и R⁵ представляют собой водород, R³ представляет собой 2-трифторметилфенил, X, X ¹ и Y представляют собой ковалентные связи и Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-

1, патент № 2340623" SRC="" height=100 BORDER="0">

a) К раствору (4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диола (40 мг, 0,12 ммоль) в тетрагидрофуране (4 мл) в атмосфере азота добавляли каталитические количества (3 мг) (4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диола (II) и йодида меди(I) и затем 1-йод-2-трифторметилбензол (0,042 мл). Затем добавляли триэтиламин (0,4 мл) и смесь перемешивали в течение 15 минут при комнатной температуре. Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток очищали препаративной ТСХ, с применением для элюирования смеси метанол:метиленхлорид (6,5:1), с получением (4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5- {2-[2-(трифторметил)фенил]этинил}-оксолан-3,4-диола, соединение формулы I.

b) Альтернативно, ацетонидную защитную группу удаляли из [9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[2-(трифторметил)-фенил]этинил}-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламина, соединение формулы (6), тем же способом, что и в примере 4, с получением (4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-(трифторметил)фенил]этинил}оксолан-3,4-диола, соединение формулы I.

B. Получение соединения формулы I, где R¹ представляет собой циклопентил или тетрагидрофуран-3-ил, R ², R⁴ и R ⁵ представляют собой водород, X, X¹ и Y представляют собой ковалентные связи и Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-, с варьирующимся R³

Сходным образом, следуя способу 6A(a), описанному выше, но необязательно заменяя (4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диол другими соединениями формулы I, в которых R³ представляет собой водород, и необязательно заменяя 1-йод-2-трифторметилбензол другими соединениями формулы R³Y-LG, где LG представляет собой удаляемую группу, или:

следуя способу 6A(b), описанному выше, но заменяя [9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[2-(трифторметил)-фенил]этинил}-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин другими соединениями формулы (6);

были получены следующие соединения формулы I:

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-фторфенил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(оксалан-3-иламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-(трифторметил)фенил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(оксалан-3-иламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-фторфенил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(оксалан-3-иламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-хлорфенил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(оксалан-3-иламино)пурин-9-ил]-5-{2-[тиен-2-ил]этинил}оксолан-3,4-диол и

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[тиен-2-ил]этинил}оксолан-3,4-диол.

C. Получение соединения формулы I с варьирующимися R¹ R² , R³, R ⁴, R⁵, X, X¹ и Y, и где Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-

Сходным образом, следуя способу 6A(a), описанному выше, но необязательно заменяя (4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диол другими соединениями формулы I, в которых R³ представляет собой водород, и необязательно заменяя 1-йод-2-трифторметилбензол другими соединениями формулы R³Y-LG, где LG представляет собой удаляемую группу, или:

следуя способу 6A(b), описанному выше, но заменяя [9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[2-(трифторметил)-фенил]этинил}-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин другими соединениями формулы (6); получают следующие соединения формулы I:

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[фенил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-хлорфенил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-метилфенил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{5-хлортиен-2-ил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[4-метилизоксазол-3-ил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2,5-диметилизоксазол-4-ил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[циклопентил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-фторциклогексил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[пиперидин-2-ил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[4-метилпиперазин-1-ил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[пиридин-2-ил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[6-фторпиридин-2-ил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[тиазол-2-ил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[пиримидин-2-ил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-циклопентилметиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-фторфенил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентилметиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-фторфенил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклобутиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-фторфенил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклогексиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-фторфенил]этил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(2-фторциклогексиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-фторфенил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклогексилметиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-фторфенил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(3-фторциклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-фторфенил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(4-трифторметилциклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-фторфенил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(3-метоксициклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-фторфенил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(фениламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-фторфенил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(4-фторфениламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-фторфенил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(бензиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-фторфенил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(пиридин-3-иламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-фторфенил]этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(тиазол-2-иламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-фторфенил]-этинил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(оксолан-3-илметиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-фторфенил]этинил}оксолан-3,4-диол и

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(5-фтороксолан-3-иламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-фторфенил]этинил}оксолан-3,4-диол.

D. Получение соединения формулы I с варьирующимися R¹, R ², R³, R ⁴, R⁵ , X, X¹ и Y, и где Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-

Сходным образом, следуя способу 6A, описанному выше, но заменяя [9-((1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-4-{2-[2-(трифторметил)фенил]этинил}-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин другими соединениями формулы (6), получают другие соединения формулы I.

Пример 7

Получение соединения формулы (7)

А. Получение соединения формулы (7), где R¹ представляет собой тетрагидрофуран-3-ил, R² представляет собой водород, R³ представляет собой 4-фторфенил, X и Y представляют собой ковалентные связи и Z представляет собой -CH=CH-

1, патент № 2340623" SRC="" height=100 BORDER="0">

К раствору (2S,1R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триокса-4-[6-(оксолан-3-иламино)пурин-9-ил]бицикло[3.3.0]октан-2-карбальдегида, соединение формулы (4) (200 мг), в метиленхлориде (5 мл) добавляли (4-фторфенил)трифенилфосфония бромид (459 мг, 1 ммоль), с последующим добавлением по каплям водного раствора 50% гидроксида натрия. После завершения добавления смесь перемешивали в течение 2 часов, затем промывали водой. Органический слой отделяли, сушили и растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной тонкослойной хроматографией, элюируя этилацетатом, с получением чистого (9-{4-[2-(4-фторфенил)винил](1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)оксолан-3-иламина, соединение формулы (7).

B. Получение соединения формулы (7), где R¹ представляет собой циклопентил или тетрагидрофуран-3-ил, R ², R⁴ и R ⁵ представляют собой водород, X, X¹ и Y представляют собой ковалентные связи и Z представляет собой -CH=CH-, с варьирующимся R³

Сходным образом, следуя способу 7A, описанному выше, но необязательно заменяя (2S,1R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триокса-4-[6-(оксолан-3-иламино)пурин-9-ил]бицикло[3.3.0]октан-2-карбальдегид другими соединениями формулы (4) и необязательно заменяя (4-фторфенил)трифенилфосфония бромид другими соединениями формулы R³YCH ₂P(PH)₃Br, получали следующие соединения формулы (7):

(9-{4-[2-(5-хлортиен-2-ил)винил](1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклопентиламин;

(9-14-[2-(3,5-диметилизоксазол-4-ил]винил(1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклопентиламин;

(9-{4-[2-(4-метилизоксазол-3-ил]винил(1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклопентиламин;

(9-{4-[2-(2-метилфенил]винил(1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклопентиламин и

(9-{4-[2-(фенил]винил(1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклопентиламин.

C. Получение соединения формулы (7) с варьирующимися R¹, R ², R³, R ⁴, R⁵ , X, X¹, Y, и где Z представляет собой -CH=CH-

Сходным образом, следуя способу 7A, описанному выше, но необязательно заменяя (2S,1R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триокса-4-[6-(оксолан-3-иламино)пурин-9-ил]бицикло[3.3.0]октан-2-карбальдегид другими соединениями формулы (4) и необязательно заменяя (4-фторфенил)трифенилфосфония бромид другими соединениями формулы R³YCH ₂P(PH)₃Br, получают следующие соединения формулы I:

(9-{4-[2-(2-метилфенил]винил(1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклопентиламин;

(9-{4-[2-(2-фторфенил]винил(1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклопентиламин;

(9-{4-[2-(фенил]винил(1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклопентиламин;

(9-{4-[2-(циклопентил]винил(1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклопентиламин;

(9-{4-[2-(2-фторциклогексил]винил(1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклопентиламин;

(9-4-[2-(пиперидин-2-ил]винил(1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклопентиламин;

(9-{4-[2-(4-метилпиперазин-1-ил]винил(1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклопентиламин;

(9-{4-[2-(пиридин-2-ил]винил(1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклопентиламин;

(9-{4-[2-(6-фторпиридин-2-ил]винил(1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклопентиламин;

(9-{4-[2-(тиазол-2-ил]винил(1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклопентиламин;

(9-{4-[2-(пиримидин-2-ил]винил(1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклопентиламин;

(9-{4-[2-(2-фторфенил)винил](1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклопентилметиламин;

(9-{4-[2-(2-фторфенил)винил](1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-2-трифторметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклопентилметиламин;

(9-{4-[2-(2-фторфенил)винил](1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклобутилметиламин;

(9-{4-[2-(2-фторфенил)винил](1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклогексиламин;

(9-{4-[2-(2-фторфенил)винил](1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)(2-фторциклогексиламин);

(9-{4-[2-(2-фторфенил)винил](1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклогексилметиламин;

(9-{4-[2-(2-фторфенил)винил](1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)(3-фторциклопентиламин);

(9-{4-[2-(2-фторфенил)винил](1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)(4-трифторметилциклопентиламин);

(9-{4-[2-(2-фторфенил)винил](1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)(3-метоксициклопентиламин);

(9-{4-[2-(2-фторфенил)винил](1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)фениламин;

(9-{4-[2-(2-фторфенил)винил](1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)(4-фторфениламин);

(9-{4-[2-(2-фторфенил)винил](1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)бензиламин;

(9-{4-[2-(2-фторфенил)винил](1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)пиридин-3-иламин);

(9-{4-[2-(2-фторфенил)винил](1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)тиазол-2-иламин и

(9-{4-[2-(2-фторфенил)винил](1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)(5-фтороксолан-3-иламин).

D. Получение соединения формулы (7) с варьирующимися R¹, R ², R³, R ⁴, R⁵ , X, X¹, Y, и где Z представляет собой -CH=CH-

Сходным образом, следуя способу 7A, описанному выше, но необязательно заменяя (2S,1R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триокса-4-[6-(оксолан-3-иламино)пурин-9-ил]бицикло[3.3.0]октан-2-карбальдегид другими соединениями формулы (4) и необязательно заменяя (4-фторфенил)трифенилфосфония бромид другими соединениями формулы R³YCH ₂P(PH)₃Br, получают другие соединения формулы I.

Пример 8

Получение соединения формулы I

A. Получение соединения формулы I, где R¹ представляет собой тетрагидрофуран-3-ил, R² представляет собой водород, R³ представляет собой 4-фторфенил, X и Y представляют собой ковалентные связи и Z представляет собой -CH=CH-

1, патент № 2340623" SRC="" height=100 BORDER="0">

Ацетонидную защитную группу затем удаляли из (9-{4-[(1E)-2-(4-фторфенил)винил](1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)оксолан-3-иламина, соединение формулы (7), тем же способом, что и показанный в примере 4, с получением 5-[2-(4-фторфенил)винил]-2-[6-(оксолан-3-иламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диола, соединение формулы I.

B. Получение соединения формулы I, где R¹ представляет собой циклопентил или тетрагидрофуран-3-ил, R ², R⁴ и R ⁵ представляют собой водород, X, X¹ и Y представляют собой ковалентные связи и Z представляет собой -CH=CH-, с варьирующимся R³

Сходным образом, следуя способу 8A, описанному выше, но заменяя (9-{4-[(1E)-2-(4-фторфенил)винил](1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)оксолан-3-иламин другими соединениями формулы (7), получали следующие соединения формулы I:

5-[(1E)-2-(метоксикарбонилвинил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(оксолан-3-иламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол;

5-[(1E)-2-(2-метилфенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(оксолан-3-иламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол;

5-[2-(5-хлортиен-2-ил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол;

5-[2-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол;

5-[2-(4-метилизоксазол-3-ил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол;

5-[2-(2-метилфенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол и

5-[2-(фенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол.

C. Получение соединения формулы I с варьирующимися R¹, R ², R³, R ⁴, R⁵ , X, X¹, Y, и где Z представляет собой -CH=CH-

Сходным образом, следуя способу 8A, описанному выше, но заменяя (9-{4-[(1E)-2-(4-фторфенил)винил](1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)оксолан-3-иламин другими соединениями формулы (7), получают следующие соединения формулы I:

5-[2-(2-метилфенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

5-[2-(2-фторфенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

5-[2-(фенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

5-[2-(циклопентил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

5-[2-(2-фторциклогексил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

5-[2-(2-пиперидин-2-ил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

5-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

5-[2-(2-пиридин-2-ил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

5-[2-(6-фторпиридин-2-ил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

5-[2-(2-тиазол-2-ил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

5-[2-(пиримидин-2-ил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

5-[2-(2-фторфенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-циклопентилметиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

5-[2-(2-фторфенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-циклобутилметиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

5-[2-(2-фторфенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклогексиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

5-[2-(2-фторфенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(2-фторциклогексиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

5-[2-(2-фторфенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(2-фторциклогексилметиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

5-[2-(2-фторфенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(3-фторциклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

5-[2-(2-фторфенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(4-трифторметилциклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

5-[2-(2-фторфенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(3-метоксициклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

5-[2-(2-фторфенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(фениламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

5-[2-(2-фторфенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(бензиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

5-[2-(2-фторфенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(пиридин-3-иламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

5-[2-(2-фторфенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(тиазол-2-иламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол и

5-[2-(2-фторфенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(5-фтороксолан-3-иламино) пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол.

D. Получение соединения формулы I с варьирующимися R¹ , R², R ³, R⁴, R ⁵, X, X¹ , Y, и где Z представляет собой -CH=CH-

Сходным образом, следуя способу 8A, описанному выше, но заменяя (9-{4-[(1E)-2-(4-фторфенил)винил](1R,2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)оксолан-3-иламин другими соединениями формулы (7), получают другие соединения формулы I.

Пример 9

Получение соединения формулы I

А. Получение соединения формулы I, где R¹ представляет собой тетрагидрофуран-3-ил, R² представляет собой водород, R³ представляет собой 4-фторфенил, X и Y представляют собой ковалентные связи и Z представляет собой -CH₂ CH₂-

1, патент № 2340623" SRC="" height=100 BORDER="0">

К раствору 5-[2-(4-фторфенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(оксолан-3-иламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диола (40 мг) в этаноле (5 мл) и циклогексене (2 мл) добавляли гидроксид палладия (50 мг) и смесь перемешивали в течение 24 часов. Катализатор отфильтровывали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной тонкослойной хроматографией с получением чистого (4S,2R,3R,5R)-5-[2-(4-фторфенил)этил]-2-[6-(оксолан-3-иламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диола, соединение формулы I.

B. Получение соединения формулы I, где R¹ представляет собой циклопентил или тетрагидрофуран-3-ил, R ², R⁴ и R ⁵ представляют собой водород, X, X¹ и Y представляют собой ковалентные связи и Z представляет собой -CH ₂CH₂-, с варьирующимся R³

Сходным образом, следуя способу 9A выше, но заменяя 5-[2-(4-фторфенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(оксолан-3-иламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол другими соединениями формулы I, в которых Z представляет собой -CH=CH-, получали следующие соединения формулы I:

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(метоксикарбонил)этил]-2-[6-(оксолан-3-иламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(2-метилфенил)этил]2-[6-(оксолан-3-иламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-фенилэтил]-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)этил]-2-[6-(циклопентилиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол и

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(5-хлортиен-2-ил)этил]-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол.

C. Получение соединения формулы I с варьирующимися R¹, R ², R³, R ⁴ и R⁵ , X, X¹, Y и Z представляют собой -CH₂CH ₂-

Сходным образом, следуя способу 9A выше, но заменяя 5-[2-(4-фторфенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(оксолан-3-иламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол другими соединениями формулы I, в которых Z представляет собой -CH=CH-, получают следующие соединения формулы I:

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(4-метилизоксазол-3-ил)этил]-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(2-метилфенил)этил]-2-[6-(циклопентилиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(2-метилфенил)этил]-2-[6-(оксолан-3-иламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(2-фторфенил)этил]-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(фенил)этил]-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(циклопентил)этил]-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(2-фторциклогексил)этил]-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(2-пиперидин-2-ил)этил]-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этил]-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(2-пиридин-2-ил)этил]-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(6-фторпиридин-2-ил)этил]-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(2-тиазол-2-ил)этил]-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(2-пиримидин-2-ил)этил]-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(2-фторфенил)этил]-2-[6-(циклопентилметиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(2-фторфенил)этил]-2-[6-(циклобутилметиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(2-фторфенил)этил]-2-[6-(циклогексиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(2-фторфенил)этил]-2-[6-(2-фторциклогексиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(2-фторфенил)этил]-2-[6-(2-фторциклогексилметиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(2-фторфенил)этил]-2-[6-(3-фторциклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(2-фторфенил)этил]-2-[6-(4-трифторметилциклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(2-фторфенил)этил]-2-[6-(3-метоксициклопентиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(2-фторфенил)этил]-2-[6-(фениламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(2-фторфенил)этил]-2-[6-(бензиламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(2-фторфенил)этил]-2-[6-(пиридин-3-иламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол,

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(2-фторфенил)этил]-2-[6-(тиазол-2-иламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол и

(4S,2R,3R,5R)-5-[2-(2-фторфенил)этил]-2-[6-(5-фтороксолан-3-иламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол.

D. Получение соединения формулы I с варьирующимися R¹, R ², R³, R ⁴ и R⁵ , X, X¹, Y и Z представляют собой -CH₂CH ₂-

Сходным образом, следуя способу 9A выше, но заменяя 5-[2-(4-фторфенил)винил](4S,2R,3R,5R)-2-[6-(оксолан-3-иламино)пурин-9-ил]оксолан-3,4-диол другими соединениями формулы I, в которых Z представляет собой -CH=CH-, получают другие соединения формулы I.

Пример 10

Получение соединения формулы (8), где R¹ представляет собой циклопентил и R² представляет собой водород

1, патент № 2340623" SRC="" height=100 BORDER="0">

К перемешиваемому раствору хлорида бензилоксиметилтрифенилфосфония (7,71 г, 18,40 ммоль) в тетрагидрофуране (40 мл) добавляли по каплям N-натрий-гексаметилдисилазан (1М в ТГФ, 17,50 мл) и смесь перемешивали при -78°С в течение 1 часа. Затем {(2S,1R,4R)-4-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}фрмальдегид, соединение формулы (4) (3,73 г, 10 ммоль), растворяли в тетрагидрофуране (10 мл) и медленно добавляли. Смесь медленно доводили до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи, гасили H ₂O (60 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x50 мл). Объединенные органические слои промывали водой (2x50 мл), сушили над Na ₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Колоночная хроматография дала (9-{4-[2-(фенилметокси)винил](2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклопентиламин, соединение формулы (8).

Пример 11

Получение соединения формулы (9), где R¹ представляет собой циклопентил и R ² представляет собой водород.

1, патент № 2340623" SRC="" height=100 BORDER="0">

Смесь (9-{4-[(1E)-2-(фенилметокси)винил(2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклопентиламина, соединение формулы (8), (1,90 г, 3,98 ммоль), и каталитического количества Pd/C в метаноле (30 мл) перемешивали в атмосфере водорода (67 фунт/кв. дюйм) в течение ночи. Pd/C фильтровали через целит и промывали метанолом. Фильтрат концентрировали и остаток, (9-{4-[(1E)-2-(фенилметокси)винил](2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклопентиламин, соединение формулы (9), применяли без дополнительной очистки.

Пример 12

Получение соединения формулы (10), где R¹ представляет собой циклопентил и R² представляет собой водород.

1, патент № 2340623" SRC="" height=100 BORDER="0">

Смесь (9-{4-[(1E)-2-(фенилметокси)винил](2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}пурин-6-ил)циклопентиламина, соединение формулы (9), и Pd(OH)₂ в циклогексене (45 мл) и этаноле (30 мл) перемешивали при 80°C в течение 5 дней. Смесь фильтровали через целит и промывали этанолом. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали колоночной хроматографией с получением 2-{(1R, 2R,4R)-4-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}этан-1-ола, соединение формулы (10).

Пример 13

Получение соединения формулы (11), где R ¹ представляет собой циклопентил и R ² представляет собой водород.

1, патент № 2340623" SRC="" height=100 BORDER="0">

К охлажденному на льду раствору 2-{(1R,2R,4R)-4-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}этан-1-ола, соединение формулы (10) (0,90 г, 2,31 ммоль), дициклогексилкарбодиимиду (1,43 г, 6,93 ммоль) и пиридину (0,19 мл, 2,31 ммоль) в диметилсульфоксиде (16 мл) медленно добавляли трифторуксусную кислоту (0,09 мл, 1,15 ммоль). Полученную смесь перемешивали в атмосфере N ₂ при комнатной температуре в течение ночи. N,N'-дициклогексилмочевину затем отфильтровывали и промывали этилацетатом (60 мл). Фильтрат промывали водой (3 x 40 мл), сушили над Na₂ SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток, 2-{(1R,2R,4R)-4-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}этан-1-он, соединение формулы (11), применяли без дополнительной очистки.

Пример 14

Получение соединения формулы (12), где R¹ представляет собой циклопентил и R² представляет собой водород.

1, патент № 2340623" SRC="" height=100 BORDER="0">

К перемешиваемому раствору трет-бутоксида калия (0,78 г, 6,93 ммоль) в тетрагидрофуране (45 мл) добавляли маленькими порциями при -78°C бромид (бромметил)трифенилфосфония (1,51 г, 3,27 ммоль). Полученную смесь перемешивали при -78°C в течение 2 часов. Медленно добавляли 2-{(1R,2R,4R)-4-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил}этан-1-он, соединение формулы (11), (0,89 г, 2,31 ммоль), растворенное в ТГФ (15 мл) и смесь перемешивали в атмосфере N ₂ при -78°C в течение 3 часов, медленно доводили до комнатной температуры и перемешивали в течение 4 дней. Реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором NH₄ Cl (15 мл) и разводили H₂O (60 мл) и затем экстрагировали EtOAc (3 x 50 мл). Объединенные органические слои промывали H₂O (2 x 50 мл), сушили над Na ₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении с получением {9-[4-((2E)-3-бромпроп-2-енил)(2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил]пурин-6-ил}циклопентиламина, соединение формулы (12), которое выделяли колоночной хроматографией.

К перемешиваемому раствору {9-[4-((2E)-3-бромпроп-2-енил) (2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил]пурин-6-ил}циклопентиламина (0,40 г, 0,86 ммоль) в тетрагидрофуране (25 мл) добавляли маленькими порциями при -78°C калий трет-бутоксид (0,78 г, 6,93 ммоль). Полученную смесь перемешивали при -78°C в течение 30 минут, затем медленно доводили до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором хлорида аммония (5 мл) и разводили H₂O (30 мл), затем экстрагировали EtOAc (3 x 30 мл). Объединенные органические слои промывали водой (2 x 30 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и фильтрат упаривали при пониженном давлении с получением [9-((2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триокса-4-проп-2-инилбицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламина, соединение формулы (13), которое выделяли колоночной хроматографией.

Пример 15

Получение соединения формулы I

Получение соединения формулы I, где R¹ представляет собой циклопентил, R² и R ³ представляют собой водород, X и Y представляют собой ковалентные связи, X¹ представляет собой -CH₂- и Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-

1, патент № 2340623" SRC="" height=100 BORDER="0">

[9-((2R,4R,5R)-7,7-диметил-3,6,8-триокса-4-проп-2-инилбицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентиламин, соединение формулы (13), перемешивали в водном растворе 80% уксусной кислоты (20 мл) при 80°C в запаянной пробирке в течение 2 дней. Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток очищали препаративной тонкослойной хроматографией с получением (4S,2R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-проп-2-инилоксолан-3,4-диола, соединение формулы I.

Пример 16

Получение соединения формулы I

A. Получение соединения формулы I, где R¹ представляет собой циклопентил, R² представляет собой водород, R³ представляет собой 2-фторфенил, X и Y представляют собой ковалентные связи, X¹ представляет собой -CH₂- и Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-

1, патент № 2340623" SRC="" height=100 BORDER="0">

К перемешиваемому раствору (4S,2R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-проп-2-инилоксолан-3,4-диола (0,017 г, 0,05 ммоль) и 1-фтор-2-йодбензола (0,02 мл, 0,13 ммоль) в ТГФ (3,50 мл) в атмосфере N₂ добавляли каталитическое количество дихлорбис(трифенилфосфин)палладия (II) и йодид меди (I). Затем добавляли Et₃N (0,20 мл). Полученную смесь перемешивали в атмосфере N ₂ при 75°C в течение 2 дней. Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток очищали препаративной тонкослойной хроматографией с получением (4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-[3-(2-фторфенил)проп-2-инил]оксолан-3,4-диола, соединение формулы I.

B. Получение соединения формулы I, где R¹ представляет собой циклопентил, R², R ⁴ и R⁵ представляют собой водород, X и X ¹ представляют собой ковалентные связи, Y представляет собой CH₂ и Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-, с варьирующимся R³

Сходным образом, следуя процедурам примеров 10-16 выше, получают следующие соединения формулы I, в которых X¹ представляет собой -CH₂- и Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-:

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{3-[2-фторфенил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол и

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{3-[2-(трифторметил)фенил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол.

C. Получение соединения формулы I с варьирующимися R¹, R ², R³, R ⁴ и R⁵ , X, X¹, и Y представляет собой CH₂ и Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-

Сходным образом, следуя процедурам примеров 10-16 выше, получают следующие соединения формулы I, в которых X¹ представляет собой -CH ₂- и Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-:

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{3-[4-метилизоксазол-3-ил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{3-[2-метилфенил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(оксолан-3-иламино)пурин-9-ил]-5-{3-[2-фторфенил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{3-[2-фторфенил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{3-[фенил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{3-[циклопентил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{3-[2-фторциклогексил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{3-[пиперидин-2-ил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{3-[4-метилпиперазин-1-ил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{3-[пиридин-2-ил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{3-[6-фторпиридин-2-ил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{3-[тиазол-2-ил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{3-[пиримидин-2-ил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентилметиламино)пурин-9-ил]-5-{3-[2-фторфенил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклобутилметиламино)пурин-9-ил]-5-{3-[2-фторфенил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклогексиламино)пурин-9-ил]-5-{3-[2-фторфенил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(2-фторциклогексиламино)пурин-9-ил]-5-{3-[2-фторфенил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(2-фторциклогексилметиламино)пурин-9-ил]-5-{3-[2-фторфенил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(3-фторциклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{3-[2-фторфенил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(4-трифторметилциклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{3-[2-фторфенил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(фениламино)пурин-9-ил]-5-{3-[2-фторфенил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(бензиламино)пурин-9-ил]-5-{3-[2-фторфенил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(пиридин-3-иламино)пурин-9-ил]-5-{3-[2-фторфенил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол;

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(тиазол-2-иламино)пурин-9-ил]-5-{3-[2-фторфенил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол и

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(5-фтороксолан-3-иламино)пурин-9-ил]-5-{3-[2-фторфенил]проп-2-инил}оксолан-3,4-диол.

D. Получение соединения формулы I с варьирующимися R¹, R ², R³, R ⁴ и R⁵ , X, X¹, и Y представляет собой CH₂ и Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-

Сходным образом, следуя процедурам примеров 10-16 выше, получают другие соединения формулы I, в которых X ¹ представляет собой -CH₂- и Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-.

Пример 17

Получение соединения формулы I

A. Получение соединения формулы I, где R¹ представляет собой 2-гидроксициклопентил, R² представляет собой водород, R³ представляет собой водород, X, X¹ и Y представляют собой ковалентные связи и Z представляет собой -C 1, патент № 2340623" SRC="/images/patents/125/2340623/2340623-4.jpg" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> C-

1, патент № 2340623" SRC="" height=100 BORDER="0">

1) К суспензии трет-бутоксида калия (0,84 г, 7,5 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) добавляли маленькими порциями при -78°C бромметилтрифенилфосфоний (1,64 г, 3,75 ммоль) и смесь перемешивали в течение 2 часов. К данной смеси добавляли раствор (2S,1R,4R,5R)-4-[6-хлорпурин-9-ил]-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]октан-2-карбальдегида (1 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл) и смесь перемешивали в течение 2 часов при -78°C. Реакционной смеси затем давали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 24 часов, затем гасили водным раствором хлорида аммония и распределяли между водой и этилацетатом. Органический слой отделяли, сушили над сульфатом магния, фильтровали и растворитель удаляли из фильтрата при пониженном давлении с получением (1R,5R,6R,8R)-6-(6-хлорпурин-9-ил)-8-этинил-3,3-диметил-2,4,7-триоксабицикло[3.3.0]октана.

2) К раствору (1R,5R,6R,8R)-6-(6-хлорпурин-9-ил)-8-этинил-3,3-диметил-2,4,7-триоксабицикло[3.3.0]октана (50 мг) и транс 2-аминоциклопентанола (0,04 г) в этаноле добавляли триэтиламин (0,12 мл) и смесь перемешивали при 60°C в течение 32 часов. Растворитель затем удаляли при пониженном давлении и остаток растворяли в этилацетате, промывали разведенной азотной кислотой, затем насыщенным раствором соли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и растворитель удаляли из фильтрата при пониженном давлении с получением 2-[9-((1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентан-1-ола.

3) В запаянной пробирке 2-[9-((1R,2R,4R,5R)-4-этинил-7,7-диметил-3,6,8-триоксабицикло[3.3.0]-окт-2-ил)пурин-6-ил]циклопентан-1-ол перемешивали в 10 мл смеси 80% уксусная кислота/вода в течение ночи. Растворитель затем удаляли при пониженном давлении и остаток очищали препаративной тонкослойной хроматографией, элюируя смесью 10% метанол/метиленхлорид с получением (4S,2R,3R,5R)-5-этинил-2-{6- [(2-гидроксициклопентил)амино]пурин-9-ил}оксолан-3,4-диола.

Все соединения формулы I были охарактеризованы спектрами ЯМР и масс-спектрами. Например:

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-этинилоксолан-3,4-диол:

¹H-ЯМР (CDCl₃): 1,54-1,79 (м, 6H), 2,06-2,13 (м, 2H), 3,47 (с, 1H), 4,45-4,58 (м, 2H), 4,71 (с, 1H), 4,94 (с, 1H), 6,01 (д, 1H, J=5,09 Гц), 6,38 (с, 1H, NH), 8,03 (с, 1H), 8,26 (с, 1H). MH ⁺ 317.

(4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-[2-(2-фторфенил)этинил]оксолан-3,4-диол:

¹H-ЯМР (CDCl₃) 1,51-1,77 (м, 6H), 2,08-2,14 (м, 2H), 4,03 (с, 1H, OH), 4,56 (с, 1H, OH), 4,61 (д, 1H, J=4,30 Гц), 4,78-4,81 (м, 1H), 5,21 (с, 1H), 5,94 (д, 1H, J=6,65 Гц), 6,07 (д, 1H, J=5,48 Гц), 6,56 (с, 1H, NH), 7,01-7,07 (м, 2H), 7,26-7,35 (м, 2H), 8,11 (с, 1H), 8,28 (с, 1H). MH⁺ 412.

Пример 18

Получают твердые желатиновые капсулы, содержащие следующие ингредиенты:

	Количество
Ингредиент	(мг/капсулу)
Активный ингредиент	30,0
Крахмал	305,0
Стеарат магния	5,0

Указанные выше ингредиенты смешивают и применяют для наполнения твердых желатиновых капсул.

Пример 19

Формулу таблетки получают с применением следующих ингредиентов:

	Количество
Ингредиент	(мг/таблетку)
Активный ингредиент	25,0
Целлюлоза, микрокристаллическая	200,0
Коллоидный диоксид кремния	10,0
Стеариновая кислота	5,0

Компоненты смешивают и прессуют с образованием таблеток.

Пример 20

Получают сухой порошок состава для ингаляции, содержащий следующие компоненты:

Ингредиент	Масса %
Активный ингредиент	5
Лактоза	95

Активный ингредиент смешивают с лактозой и смесь вносят в устройство для ингаляции сухого порошка.

Пример 21

Таблетки, каждая из которых содержит 30 мг активного ингредиента, получают следующим образом:

	Количество
Ингредиент	(мг/таблетку)
Активный ингредиент	30,0 мг
Крахмал	45,0 мг
Микрокристаллическая целлюлоза	35,0 мг
Поливинилпирролидон (в виде 10% раствора в стерильной воде)	4,0 мг
Карбоксиметилкрахмал натрия	4,5 мг
Стеарат магния	0,5 мг
Тальк	1,0 мг
Всего	120 мг

Активный ингредиент, крахмал и целлюлозу пропускают через сито No. 20 меш США и тщательно перемешивают. С полученными порошками смешивают раствор поливинилпирролидона, после чего пропускают через сито 16 меш США. Полученные таким образом гранулы сушат при температуре от 50°С до 60°С и пропускают через сито 16 меш США. После этого к гранулам добавляют карбоксиметилкрахмал натрия, стеарат магния и тальк, предварительно пропущенные через сито No. 30 меш США, и после добавления гранулы прессуют на машине для таблетирования с получением таблеток с массой каждой 120 мг.

Пример 22

Суппозитории, каждый из которых содержит 25 мг активного ингредиента, получают следующим образом:

Ингредиент	Количество
Активный ингредиент	25 мг
Глицериды насыщенных жирных кислот до	2000 мг

Активный ингредиент пропускают через сито No. 60 меш США и суспендируют в глицеридах насыщенных жирных кислот, предварительно расплавленных с применением минимально необходимого нагревания. Смесь затем выливают в форму для суппозитория с номинальной емкостью 2,0 г и дают ей остыть.

Пример 23

Суспензии, каждая из которых содержит 50 мг активного ингредиента на 5,0 мл, получают следующим образом:

Ингредиент	Количество
Активный ингредиент	50,0 мг
Ксантановая камедь	4,0 мг
Карбоксиметилцеллюлоза натрия (11%)
Микрокристаллическая целлюлоза (89%)	50,0 мг
Сахароза	1,75 г
Бензоат натрия	10,0 мг
Отдушка и краситель	q.v.
Очищенная вода до	5,0 мл

Активный ингредиент, сахарозу и ксантановую камедь смешивают, пропускают через сито No. 10 меш США, после чего смешивают с заранее приготовленным раствором микрокристаллической целлюлозы и карбоксиметилцеллюлозы натрия в воде. Бензоат натрия, отдушку и краситель разбавляют некоторым количеством воды и добавляют при перемешивании. Добавляют необходимое количество воды для получения желаемого объема.

Пример 24

Состав для подкожного введения может быть получен следующим образом:

Ингредиент	Количество
Активный ингредиент	5,0 мг
Кукурузное масло	1,0 мл

Пример 25

Препарат для инъекций получают со следующим составом:

Ингредиенты	Количество
Активный ингредиент	2,0 мг/мл
Маннит, USP	50 мг/мл
Глюконовая кислота, USP	q.s. (pH 5-6)
Вода (дистиллированная, стерильная)	q.s. до 1,0 мл
Газообразный азот, NF	q.s.

Пример 26

Препарат для местного нанесения получают со следующим составом:

Ингредиенты	граммы
Активный ингредиент	0,2-10
Span 60	2,0
Твин 60	2,0
Минеральное масло	5,0
Вазелин	0,10
Метилпарабен	0,15
Пропилпарабен	0,05
BHA (бутилированный гидроксианизол)	0,01
Вода	q.s. до 100

Все указанные выше ингредиенты, исключая воду, соединяют и нагревают до 60°С при перемешивании. Затем добавляют необходимое количество воды при 60°С при тщательном перемешивании для эмульгирования ингредиентов, после чего добавляют воду до q.s. 100 г.

Пример 27

Композиция для непрерывного высвобождения

	Масса	Предпочтительная
Ингредиент	Диапазон (%)	Диапазон (%)	Наиболее предпочтительная
Активный ингредиент	50-95	70-90	75
Микрокристаллическая целлюлоза (наполнитель)	1-35	5-15	10,6
Сополимер метакриловой кислоты	1-35	5-12,5	10,0
Гидроксид натрия	0,1-1,0	0,2-0,6	0,4
Гидроксипропилметилцеллюлоза	0,5-5,0	1-3	2,0
Стеарат магния	0,5-5,0	1-3	2,0

Составы настоящего изобретения с постоянным высвобождением получают следующим образом: соединение, зависимое от pH связующее и любые необязательные наполнители тщательно смешивают (сухое перемешивание). Перемешанную сухую смесь затем гранулируют в присутствии водного раствора сильного основания, который напыляют на перемешанный порошок. Гранулят сушат, просеивают, смешивают с необязательными смазывающими агентами (такими как тальк или стеарат магния) и прессуют в таблетки. Предпочтительными водными растворами сильных оснований являются растворы гидроксидов щелочных металлов, такие как гидроксид натрия или калия, например как гидроксид натрия, в воде (необязательно содержащей до 25% смешиваемых с водой растворителей, таких как низшие спирты).

Полученные таблетки могут быть необязательно покрыты образующим пленку агентом для идентификации, придания вкуса и облегчения глотания. Образующий пленку агент обычно должен находиться в диапазоне между 2% и 4% массы таблетки. Подходящие образующие пленку агенты хорошо известны в данной области техники и включают гидроксипропил, метилцеллюлозу, катионные метакрилатные сополимеры (диметиламиноэтилметакрилат/метил-бутилметакрилатные сополимеры - Eudragit® E -Röhm. Pharma) и тому подобное. Данные образующие пленку агенты могут необязательно содержать красители, пластификаторы и другие дополнительные ингредиенты.

Спрессованные таблетки обладают твердостью, достаточной для противодействия сжатию 8 Kp. Размер таблетки должен зависеть в первую очередь от количества соединения в таблетке. Таблетки обычно включают от 300 до 1100 мг свободного основания соединения. Например, таблетки обычно включают свободное основание соединения в количестве, варьирующемся от 400-600 мг, 650-850 мг и 900-1100 мг.

Для оказания влияния на скорость растворения контролируют время, в течение которого порошок, содержащий соединение, смешивают при увлажнении. Например, общее время смешивания порошка, т.е. время, в течение которого порошок экспонируют с раствором гидроксида натрия, обычно варьируется от 1 до 10 минут и предпочтительно от 2 до 5 минут. После гранулирования частицы извлекают из гранулятора и помещают на платформу для сушки жидкости для высушивания при около 60°С.

Пример 28

Вещества

Агонисты A₁ аденозина 8-циклопентил-1,3-дипропилксантин (CPX) и 8-циклопентил-1,3-диметилксантин (CPT), агонисты A₁ аденозина N ₆-циклопентиладенозин (CPA), 2-хлор- N₆ -циклопентиладенозин (CCPA) и N₆-циклогексиладенозин (CHA), ингибитор аденозиндеаминазы эритро-9-(2-гидрокси-3-нонил)аденин (EHNA), ингибитор аденозинкиназы йодтуберкулин и форсколин получали от Research Biochemicals (Natick, MA). {[(5-{6-[(3R)оксолан-3-ил]амино}пурин-9-ил)(3S,2R,4R)-3,4-дигидроксиоксолан-2-ил]-метокси}-N-метилкарбоксамид, молекулярная масса 394,38, представляет собой производное избирательного полного агониста рецептора A₁ аденозина CVT-510. Аденозин получали от Sigma Chemical (St. Louis, MO). Радиолиганд 8-циклопенил-1,3-дипропил-[2,3-³ H(N)]ксантин ([³H]CPX) был получен от New England Nuclear (Boston, MA.). Концентрированные исходные растворы (10-100 мМ) CVT-2759, CPX, CPT, CPA, CCPA, CHA и форсколина растворяли в диметилсульфоксиде, хранили в виде аликвот при -80°С и разводили в физиологическом растворе для применения в экспериментах. Конечное содержание диметилсульфоксида в физиологическом растворе во время экспериментов не превышало 0,1%. Аденозин и EHNA растворяли в физиологическом растворе непосредственно перед применением.

Тестирование связывания - клетки DDT ₁

Культура клеток

Клетки DDT (линия гладкомышечных клеток семявыносящего протока хомячка) выращивали в виде монослоя в чашках Петри с применением среды Игла, модифицированной по Дульбекко (DMEM), содержащей 2,5 мкг мл^-1 амфотерицина B, 100 U мл ^-1 пенициллина G, 0,1 мг мл^-1 стрептомицина сульфата и 5% сыворотки плодов телят, в увлажненной атмосфере из 95% воздуха и 5% CO₂. Клетки субкультивировали дважды в неделю путем диспергирования в сбалансированном солевом растворе Хенкса (HBSS) без двухвалентных катионов и содержащем 1 мМ ЭДТА. Клетки затем высевали в среду для роста при плотности 1,2 x 10⁵ клеток на чашку и эксперименты проводили через 4 дня, приблизительно за один день до конфлуентности.

Препараты мембран

Клеточные слои промывали дважды HBSS (2 x 10 мл), соскабливали с чашки с помощью резиновой дубинки в 5 мл 50 мМ трис-HCl буфера pH 7,4 при 4°С и суспензию гомогенизировали в течение 10 сек. Гомогенат центрифугировали при 27000 x g в течение 10 мин, ресуспендировали в буфере и вновь центрифугировали, как описано выше. Содержание белка определяли с помощью Biorad Protein Assay Kit (Richmond, CA) с применением бычьего сывороточного альбумина в качестве стандарта. Данную мембранную суспензию хранили с диметилсульфоксидом (ДМСО) в буфере He (10 мМ HEPES, 1 мкМ ЭДТА с pH 7,4) и хранили в жидком азоте при -80°С.

Конкурентный связывающий анализ:

Соединения формулы I анализировали на предмет их сродства к сайтам рецептора аденозина A₁ на мембранах клеток DDT. Вкратце, 50-70 мкг мембранного белка инкубировали в смеси, содержащей 2U/мл аденозиндеаминазы, 10 мМ ГТФ- 1, патент № 2340623" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> S в 5 мМ буфере HE, содержащем 5 мМ MgCl ₂, в стеклянных пробирках. Исходные растворы соединений изобретения последовательно разводили (от 10^-10 М до 10^-4 М) в буфере HE или применяли только буфер HE (контроль для определения неспецифического связывания) и добавляли к инкубационной смеси. Наконец, добавляли тритированный циклопентиладенозин (³H-CPA) до конечной концентрации 1,5 нМ. После инкубации при 23°С в течение 90 минут реакцию останавливали фильтрованием на коллекторе клеток Brandel MR24 и промывкой охлажденным до температуры льда буфером трис-ЭДТА (три раза, приблизительный объем 10 мл/промывку) через фильтры Whatman GF/B (предварительно пропитанные в течение 1 час в 0,3% полиэтиленимине для снижения неспецифического связывания). Фильтры переносили в сцинтилляционные флаконы и добавляли 5 мл Scintisafe (VWR, Brisbane, CA). Количество радиоактивности, задержанной на фильтрах, определяли с помощью жидкостной сцинтилляционной спектрометрии. Определение белка осуществляли по способу Bradford (1976. Anal. Biochem. 72:248) с применением бычьего сывороточного альбумина в качестве стандарта.

В данном тесте было показано, что соединения формулы I являются агонистами рецептора A ₁ аденозина.

Пример 29

Тестирование связывания [³⁵ S]ГТФ 1, патент № 2340623" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> S

Способность агонистов активировать G-белки определяли с помощью радиоактивно меченного ГТФ ([ ³⁵S]ГТФ 1, патент № 2340623" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> S). Вкратце, мембранные белки (30-50 мкг/пробирку для анализа) помещали в стеклянные пробирки, содержащие 50 мм трис-HCl буфер pH 7,4,

5 мМ MgCl₂, 100 мМ NaCl, 1 мМ дитиотреитол, 0,2 единицы мл^-1 аденозиндеаминазы, 0,5% БСА, 1 мМ ЭДТА, 10 мМ ГДФ и 0,3 нМ [³⁵ S]ГТФ 1, патент № 2340623" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> S. В отдельные пробирки добавляли различные концентрации соединений изобретения (предполагаемые агонисты рецептора A ₁ аденозина), известного полного агониста рецептора A ₁ аденозина N циклопентиладенозина (CPA или CCPA), или контрольная пробирка содержала 10 мкМ ГТФ 1, патент № 2340623" SRC="" height=100 BORDER="0" ALIGN="absmiddle"> S без агониста (для определения неспецифического связывания). Пробирки для тестирования инкубировали в течение 90 минут при 37°С. Стимулируемое агонистом связывание оценивали путем определения разницы между суммарным связыванием в присутствии предполагаемых агонистов и базальным связыванием, определяемым в отсутствие CPA. Результаты выражали в процентах стимуляции предполагаемыми агонистами относительно полного агониста CPA после вычитания неспецифического связывания.

В данном тесте было показано, что соединения формулы I являются агонистами рецептора A₁ аденозина.

Пример 30

Изолированные перфузируемые сердца морских свинок

Морских свинок (Hartley) обоего пола с массой 300-350 г анестезируют метоксифлураном и забивают декапитацией. Вскрывают грудную клетку, быстро извлекают сердце и промывают охлажденным на льду модифицированным раствором Кребса-Хенселейта (K-H). Составляющими модифицированного раствора K-H являются (в мМ) 117,9 NaCl, 4,8 KCl, 2,5 CaCl ₂, 1,18 MgSO₄, 1,2 KH ₂PO₄, 0,5 Na₂ ЭДТА, 0,14 аскорбиновая кислота, 5,5 декстроза, 2,0 пировиноградная кислота (натриевая соль) и 25 NaHCO₃. Раствор K-H непрерывно газируют 95% O₂-5% CO ₂ и pH доводят до величины 7,4. Для перфузии сердца по способу Лангендорфа иссеченную аорту надевают на стеклянную канюлю и укрепляют лигатурой. Ретроградную перфузию аорты начинают немедленно при постоянной скорости тока 10 мл/мин модифицированного раствора K-H, нагретого до 36,0±0,5°С. Боковой вход канюли используют для присоединения линии перфузии к датчику давления Gould для измерения коронарного перфузионного давления. Коронарное перфузионное давление непрерывно записывают на ленте самописца (Gould RS3400, Cleveland, OH) на протяжении каждого эксперимента. Коронарную проводимость (в мл·мин^-1·мм рт.ст. ^-1) рассчитывают как отношение коронарного потока (10 мл/мин) к перфузионному давлению (в мм рт.ст.). Для облегчения выхода жидкости из левого желудочка створки митрального клапана надрезают с помощью тонких снабженных пружиной ножниц. При необходимости сердца подвергают электростимуляции с постоянной интенсивностью с использованием внешних электродов. После завершения иссечения и присоединения аппаратуры непрерывно отслеживают интервал стимул-пучок Гиса (S-H) и коронарное давление перфузии, причем каждому сердцу дают стабилизироваться за 20-40 мин до введения лекарства. Экспериментальным вмешательствам всегда предшествуют контрольные измерения, и они всегда сопровождаются ими. Критериями для исключения сердец из исследования являются 1) коронарное перфузионное давление <50 мм рт. ст., 2) отсутствие стабильности коронарного перфузионного давления в период стабилизации и 3) невозможность электростимуляции сердца с постоянной интенсивностью на протяжении эксперимента.

Для электростимуляции сердец биполярный, покрытый тефлоном электрод помещают на стенку внутрипредсердной перегородки. Удаляют часть ткани левого и правого предсердия, включая область синоатриального узла, как для снижения спонтанного сердечного ритма, так и для экспозиции перегородки предсердий для помещения электрода. Сердца подвергают электростимуляции в постоянном режиме 3,2 Гц. Стимуляцию обеспечивают с помощью интервального генератора (модель 1830, WPI, Sarasota, FL) и передают с помощью устройства для изоляции стимула (модель 1880, WPI) в виде прямоугольных импульсов длительностью 3 мс и интенсивностью, по меньшей мере, в два раза превосходящей порог.

S-H Интервал. Удлинение интервала S-H применяют в качестве показателя негативного дромотропного действия A ₁-аденозиновых агонистов на проводимость AV узла. Записывают электрограмму пучка Гиса с помощью однополярного электрода, помещенного на правую сторону межпредсердной перегородки рядом с AV узлом. Сигнал непрерывно отражается на дисплее осциллоскопа с частотой сканирования 10 мс/см. В качестве интервала S-H используют промежуток времени между первым артефактом и максимумом отклонения вверх сигнала пучка Гиса.

Сердца стабилизируют до тех пор, пока интервал S-H и CPP не становятся постоянными. Тестируемое соединение вводят в систему перфузии в конечной концентрации 0,3, 3, 10 и в некоторых случаях 30 мкМ. Если происходит блок AV второго уровня при любой концентрации до 30 мкМ, тестируемое соединение удаляют промывкой. После отмывки от первого тестируемого соединения второе тестируемое соединение нельзя применять на том же сердце до тех пор, пока интервал SH и CPP не возвращаются до контрольного уровня или интервал S-H не превышает более 2 мс по сравнению с контролем. На одном и том же сердце может быть применено до трех соединений.

Соединения формулы I демонстрируют способность задерживать проведение в AV узле в данном тесте.

Пример 31

Противорвотные исследования

Во всех экспериментах применяли взрослых самцов хорька с массой тела в диапазоне 1-1,5 кг. Рвоты вызывали рентгеновским облучением, морфином и цисплатином.

Рентгеновское облучение:

Хорьков взвешивают накануне эксперимента. В день эксперимента каждый хорек получает 2 Gy (200 Рад) рентгеновского облучения на все тело, производимого на протяжении 5-минутного периода. Агонисты A₁ рецептора вводят подкожно сразу после рентгеновского облучения (т.е. приблизительно за 25 минут до наступления рвоты). При исследовании действия антагониста A₁ рецептора, DPCPX, на эффект частичного агониста либо производится одновременное введение обоих соединений непосредственно после рентгеновского облучения, либо DPCPX вводят в виде предваряющего лечения за 15 минут. Во всех случаях за хорьками наблюдают на протяжении 2 часов после рентгеновского облучения и регистрируют время и количество позывов на рвоту и срыгиваний.

Морфин:

Хорьков взвешивают накануне эксперимента. Агонист A₁ рецептора аденозина вводят подкожно за 15 минут до введения подкожной дозы 0,5 мг кг^-1 морфина. (Рвота обычно начинается через 5 минут после введения морфина.) За хорьками наблюдают на протяжении 2 часов после введения дозы морфина и регистрируют время и количество позывов на рвоту и срыгиваний.

Цисплатин:

Хорьков взвешивают и измеряют для расчета площади поверхности тела накануне эксперимента. В день эксперимента каждый хорек получает внутрибрюшинную дозу цисплатина (200 мг м^-2). Агонист A₁ рецептора аденозина вводят подкожно непосредственно перед первым эпизодом рвоты (приблизительно через 1,5 часа после введения цисплатина). За хорьками наблюдают на протяжении 7 часов после первого эпизода рвоты и регистрируют время и количество позывов на рвоту и срыгиваний.

Соединения формулы I проявляют способность контролировать рвоту в данном тесте.

Определение антилиполитических свойств

Животные. Самцов крыс линии Sprague-Dawley (380-420 г) получали от Simonsen Laboratories (Gilroy, CA). Всех животных содержали в гуманных условиях в соответствии с нормативами, установленными в The Principles of Laboratory Animal Care, составленных Национальным обществом медицинских исследований, и Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, подготовленным Институтом ресурсов лабораторных животных, и опубликованных Национальным институтом здоровья (публикация NIH 86-23, исправленная 1996).

Выделение адипоцитов эпидидимиса крысы. Адипоциты выделяли из жировых подушечек эпидидимиса крыс, как описано ранее (Rodbell, 1964). Вкратце, крыс анестезировали с помощью метоксифлуорана и умерщвляли путем обескровливания. Жировую ткань эпидидимиса удаляли и помещали в модифицированный раствор Кребса (KRH), содержащий NaCl (100 мМ), KCl (4,7 мМ), CaCl₂ (2,5 мМ), NaHCO₃ (3,6 мМ), MgSO ₄ (1,19 мМ), KH₂PO ₄ (1,18 мМ), декстрозу (5 мМ), пировиноградную кислоту (5 мМ), аскорбиновую кислоту (1 мМ) и HEPES (5 мМ), pH 7,4. Видимые кровеносные сосуды иссекали и удаляли, а жировую ткань измельчали. Измельченную ткань гидролизуют 25 мл свежего раствора KRH, содержащего коллагеназу типа I (1 мг/мл), свободный от жирных кислот БСА [1%(мас./об.)] и никотиновую кислоту (2М для ингибирования липолиза) на протяжении от 40 до 60 минут при 37°С при непрерывном легком встряхивании. Клеточную суспензию фильтровали через нейлоновое сито (210 м) для удаления негидролизованных фрагментов ткани. Клеточный фильтрат промывали три раза с помощью раствора KRH, содержащего 1% свободный от жирных кислот БСА, при 37°С. Конечную суспензию адипоцитов либо разбавляли свежим раствором KRH с 1% свободным от жирных кислот БСА для применения в экспериментах с цАМФ, либо использовали для получения мембран для радиолигандного связывающего анализа.

Тестирование цАМФ в изолированных адипоцитах крысы. Аликвоты (100 мкл, 45000-90000 клеток свежеполученной суспензии адипоцитов помещали в лунки 24-луночных планшетов для культивирования, содержащие 0,4 мл раствора KRH, содержащего свободный от жирных кислот БСА (1%), аскорбиновую кислоту (1 мМ), ролипрам (10 мкМ), цилостамид (1 мкМ), аденозиндеаминазу (2 U/мл) и подходящий(е) агонист(ы) рецептора A ₁ аденозина. В каждую лунку добавляли аликвоту 0,5 мл раствора KRH, содержащего 60 нМ изопротеренола, и проводили инкубацию в течение 4 минут в бане с вращающимся шейкером при температуре 37°С. Тестирование прекращали добавлением в каждую лунку 200 мкл 300 мМ HCl для лизирования клеток. Концентрацию цАМФ в клеточном лизате определяли с помощью наборов для прямой колориметрии цАМФ (Assay Designs, Inc., Ann Arbor, MI).

Получение мембран адипоцитов и конкурентное связывание

Тестирование. Свежевыделенные адипоциты добавляли к охлажденному раствору, содержащему сахарозу (0,25М), ЭДТА (1 мМ) и трис-HCl (10 мМ, pH 7,4), и гомогенизировали в 10 приемов с применением снабженной мотором мельницы для ткани. Гомогенат охлаждали на льду и жировой слой отбрасывали. Гомогенат затем центрифугировали при 500g в течение 10 мин при 4°С. Супернатант под слоем жира удаляли, ресуспендировали в свежем буфере и гомогенизировали второй раз в шесть приемов с помощью мельницы для ткани. Клеточные мембраны собирали центрифугированием гомогената при 15000g в течение 15 мин. Конечный осадок мембран ресуспендировали в растворе, содержащем сахарозу (0,25М), фенилметилсульфонилфторид (0,1 мМ), леупептин (5 мкг/мл), апротинин (5 г/мл), аденозиндеаминазу (2 U/мл) и трис-HCl (10 мМ) буфер, pH 7,4). Суспензию мембран замораживали и хранили в жидком азоте. Для тестирования конкурентного связывания суспензии мембран размораживали и инкубировали в течение 2 часов при комнатной температуре в трис-HCl (50 мМ) буфере, содержащем ADA (1 U/мл), гуанозин 5-(имидо)трифосфат (100 М) и [3H]CPX (1-3 нМ) и последовательно возрастающие концентрации конкурирующего агента. В конце инкубации свободный радиолиганд отделяли от связанного с мембранами радиолиганда фильтрованием через стекловолоконные фильтры GF/C (Watman, Maidstone, UK) с помощью коллектора ткани (Brandel, Inc., Gaitherburg, MD). Радиоактивность измеряли с помощью жидкостного сцинтилляционного счетчика. Неспецифическое связывание [3H]CPX определяли как связывание [3H]CPX в присутствии 10 мкМ N6-циклопентилтеофиллина. Для каждой концентрации немеченых соединений производили измерения в трех параллельных образцах.

Влияние соединений формулы I на частоту сердечных сокращений и концентрацию НЭЖК в сыворотке у бодрствующих крыс

Частоту сердечных сокращений измеряли у крыс с хронически установленными телеметрическими датчиками. Для имплантации датчика производили лапаротомию по средней линии у анестезированных крыс и в брюшную стенку вшивали датчик для записи ЭКГ. Через стенку были сделаны два электрокардиографических вывода, проходящих подкожно (один на левом плече, другой на правом бедре) и закрепленных на месте швами. Частоту сердечных сокращений у бодрствующих крыс определяли с помощью Dataquest ART Gold System (Data Sciences International, St. Paul, MN). Электрическую активность сердца записывали на протяжении 10-сек периодов и использовали для вычисления частоты сердечных сокращений в ударах в минуту. После записи исходной частоты сердечных сокращений в брюшную полость каждой крысы вводили либо растворитель (0,9% ДМСО в физиологическом растворе, 0,5 мл), либо соединение формулы I, и частоту сердечных сокращений отслеживали с интервалами в течение еще 3 часов.

Действие соединения формулы I на частоту сердечных сокращений и снижение концентрации НЭЖК сыворотки определяли в раздельных группах крыс во избежание влияния хэндлинга животных и сбора крови на частоту сердечных сокращений. За три дня до эксперимента в левую общую каротидную артерию каждой крысы имплантировали катетер (внешний диаметр 0,025 мм) в асептических условиях с применением стерильного способа. Катетер проводили подкожно на спинную поверхность. После выхода из анестезии крыс помещали в метаболические клетки для облегчения хэндлинга и забора крови. Образцы крови (0,2 мл) отбирали до и через различные интервалы времени после в.б. инъекции либо соединения формулы I, либо растворителя (ДМСО в физиологическом растворе). После отбора каждого образца крови вводили 1% цитрат натрия в физиологическом растворе в объеме 0,4 мл для восстановления объема крови и предотвращения свертывания в катетере каротидной артерии. Из каждого образца получали сыворотку после центрифугирования свернувшейся крови. Образцы сыворотки хранили при 80°С до проведения анализа. Концентрацию НЭЖК сыворотки определяли с помощью набора для ферментативного колориметрического анализа (Wako Chemicals, Richmond, VA).

Антилиполитические свойства соединений формулы I у крыс со стимулированным катехоламинами уровнем НЭЖК исследовали у крыс с постоянными катетерами (описанными выше). Норадреналин вводили либо путем в.в. инфузии в яремную вену со скоростью 3 мкг/кг/мин в течение 30 минут, либо путем в.б. инъекции (60 мкг/кг). Соединение формулы I вводили с помощью в.б. инъекции либо до, либо после норадреналина для определения того, может ли вызываемое норадреналином увеличение концентрации НЭЖК быть предотвращено или обращено соединением формулы I.

В данном тесте соединения формулы I проявили антилиполитические свойства. Например, пероральное введение (4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-фторфенил]этинил}оксолан-3,4-диола в дозе 1 мг/кг обеспечивало исходное 40% снижение неэтерифицированных свободных жирных кислот (НЭЖК), которое сохранялось в течение 1 часа, после чего уровень НЭЖК плазмы возвращался к нормальному к 2 часам. Пероральное введение 4S,2R,3R,5R)-2-[6-(циклопентиламино)пурин-9-ил]-5-{2-[2-фторфенил]этинил}оксолан-3,4-диола в дозе 2,5 мг/кг обеспечивало исходное 60% снижение неэтерифицированных свободных жирных кислот (НЭЖК), которое сохранялось в течение 90 минут, после чего уровень НЭЖК плазмы возвращался к нормальному к 4 часам.

При дозах 1 мг/кг, 2,5 мг/кг и 5 мг/кг не наблюдалось действия на частоту сердечных сокращений.