хмелевый экстракт

Формула изобретения

1. Хмелевый экстракт, полученный путем пульсационной обработки сырья в среде экстрагента, отличающийся тем, что экстракцию проводят маслом в высокоградиентном поле массообмена при соотношении между сырьем и экстрагентом 1:10-1:20, причем полученный масляный экстракт хмеля, содержащий горькие кислоты не менее 0,1%, ксантогумол не менее 0,15%, и пренилфлавоны не менее 0,06%, пригоден для активации рецепторов врожденного иммунитета и сцепленных с ними механизмов адаптации организма.

2. Хмелевый экстракт по п.1, отличающийся тем, что высокоградиентное поле создают роторно-пульсационным аппаратом.

3. Хмелевый экстракт по п.1, отличающийся тем, что вызывает активацию рецепторов врожденного иммунитета TLR4 и/или TLR2

4. Хмелевый экстракт по п.1, отличающийся тем, что активация механизмов адаптации связана с сенситизацией сцепленных с TLR4 регуляторных молекул - рецепторов к альфа-фетопротеину.

5. Хмелевый экстракт по п.1, отличающийся тем, что активация механизмов адаптации связана с сенситизацией сцепленных с TLR4 регуляторных молекул - рецепторов к интерлейкину 1.

6. Хмелевый экстракт по п.1, отличающийся тем, что активация механизмов адаптации связана с сенситизацией сцепленных с TLR4 регуляторных молекул - рецепторов к интерлейкину 2.

7. Хмелевым экстракт по п.1, отличающийся тем, что активация механизмов адаптации связана с сенситизацией сцепленных с TLR4 регуляторных молекул - рецепторов к гранулоцит-макрофаг колонийстимулирующему фактору.

8. Хмелевый экстракт по п.1, отличающийся тем, что активация механизмов адаптации связана с сенситизацией сцепленных с TLR4 регуляторных молекул - рецепторов к инсулину.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к пищевой промышленности, а именно к производству функциональных продуктов питания на основе растительного сырья, и может найти применение в диетологии, профилактической, адаптационной, клинической медицине и косметологии.

Данный продукт, в частности, может быть использован как средство для профилактики и лечения патологических состояний, связанных с нарушением функции рецепторов врожденного иммунитета.

Известно, что на поверхности клеток человека расположены генетически запрограммированные образраспознающие рецепторы, которые координируют механизмы врожденного и адаптивного иммунного ответа.

Toll-подобные рецепторы (далее TLR) узнают характерные для микроорганизмов молекулярные структуры. Биопатогены активируют TLR и синтез хемокинов эпителиальными клетками с последующей миграцией в очаг клеток-эффекторов иммунного ответа. Активация TLR этих клеток вызывает секрецию цитокинов и развитие иммунного ответа на биопатогены.

При этом реакции врожденного иммунитета развиваются быстро - в течение одного - двух часов, в то время как для адаптивных реакций требуется свыше двух суток.

При снижении активности TLR нарушается микробный пейзаж (биоценоз), повышается количество условно-патогенных микроорганизмов, что обусловливает атипичное течение воспалительных процессов. Взаимодействие эндотоксина с TLR приводит к активации реакций врожденного иммунитета.

Один из сигнальных рецепторов врожденной иммунной системы TLR4 играет важную роль в развитии процессов врожденного иммунного ответа, подавляет реакции хронического воспаления. Он действует подобно тормозному механизму: при отсутствии TLR4-рецептора (отпущенном тормозе) усиливаются воспалительные процессы и смертность от инфекционной патологии. Такие выводы были сделаны после экспериментов на генетически модифицированных мышах, в клетках которых отсутствует TLR4 [1].

Эндогенными активаторами TLR4 врожденного иммунитета являются белки теплового шока и мочевая кислота, а также продукты деградации гиалуроновой кислоты, продукты некроза и апоптоза.

Однако излишняя активность TLR может привести к аллергическим, хроническим воспалительным или аутоиммунным заболеваниям, например ревматоидному артриту и системной красной волчанке.

Нарушения регуляторной функции TLR могут стать причиной патологий различных органов и систем. Установлено, что нарушение функций рецепторов врожденного иммунитета играет важную роль в патогенезе заболеваний органов желудочно-кишечного тракта. Их активация необходима для реализации механизмов заживления ран и регенерации тканей. TLR регулируют чувствительность жировой и мышечной ткани к инсулину.

Из вышесказанного следует, что для повышения эффективности профилактики и лечения инфекционных заболеваний, хронических воспалительных процессов, аллергических и аутоиммунных заболеваний разработка и получение средств, блокирующих или активирующих TLR, является актуальной задачей.

Заявляемое техническое решение позволяет получить продукт, а именно масляный экстракт хмеля с повышенным содержанием целевых соединений.

В результате использования такого продукта повышается эффективность профилактики и лечения патологических состояний, связанных с нарушением функции рецепторов врожденного иммунитета.

Экстракты представляют собой концентрированные вытяжки из лекарственного растительного сырья.

Известен масляный экстракт растительного сырья, полученный путем нагревания измельченного сырья в масляной среде при температуре до 80-90°С и дальнейшего настаивания полученной массы [2].

Данный экстракт обладает низкой биологической активностью, так как нагревание растительного сырья приводит к снижению активности целевых компонентов.

Известен также растительный экстракт, полученный путем экстрагирования в режиме кавитации посредством воздействия ультразвуком на гомогенную смесь жидкого экстрагента с измельченным растительным субстратом [3].

Данный экстракт также недостаточно биологически активен, так как кавитационная обработка смеси приводит к развитию неконтролируемого окисления как экстрагента, так и экстрагируемых целевых соединений, что ведет к значительному разрушению биологически активных веществ.

Известен экстракт на основе растительного сырья, полученный путем путем обработки этого сырья высоковольтными импульсными разрядами в промежутке между электродами [4].

Недостатком данного продукта является то, что индукция импульсными электрическими разрядами высокого напряжения свободно-радикального окисления растворителя и компонентов растительного сырья приводит к потере целевых свойств его компонентов.

Известен также экстракт растительного сырья, полученный путем импульсного вакуумирования [5].

Данный экстракт обладает достаточным содержанием целевых соединений, однако такой способ экстрагирования применим для получения водных извлечений, но малопригоден для получения масляных экстрактов растительного сырья.

Из анализа уровня техники видно, что существующие способы получения экстрактов из растительного сырья имеют определенные недостатки и не позволяют получить продукт с повышенным содержанием целевых соединений.

Сырье хмеля включено в Европейскую и Британскую фармакопеи, а также входит в I-III издания отечественной фармакопеи. Лекарственные средства из шишек хмеля обладают разносторонними свойствами - успокаивающим, обезболивающим, противовоспалительным. Основными веществами, обусловливающими биологическую активность шишек хмеля, являются горечи и фенольные соединения, а также эфирное масло.

Наиболее близким по технической сущности к заявляемому решению является хмелевой экстракт, полученный путем непрерывной экстракции измельченного хмеля этиловым спиртом [6].

Недостатками данного решения является низкая концентрация хмелевых веществ в получаемом экстракте, а также то, что спиртовые экстракты не пригодны для длительного применения в диетическом и лечебно-профилактическом питании из-за возможности развития алкогольной зависимости.

Технический результат настоящего изобретения состоит в создании продукта с повышенным содержанием целевых веществ повышенной биологической активности, способного эффективно регулировать TLR и пригодного для длительного применения.

Для достижения указанного технического результата в хмелевом экстракте, полученном путем пульсационной обработки сырья в среде экстрагента, согласно изобретению экстракцию проводят маслом в высокоградиентном поле массообмена при соотношении между сырьем и экстрагентом 1:10-1:20, причем полученный масляный экстракт хмеля, содержащий горькие кислоты не менее 0,1%, ксантогумол не менее 0,15% и пренилфлавоны не менее 0,06%, пригоден для активации рецепторов врожденного иммунитета и сцепленных с ними механизмов адаптации организма. При этом высокоградиентное поле создают роторно-пульсационным аппаратом.

Наличие отличительных признаков, а именно проведение экстракции маслом в высокоградиентном поле массообмена при соотношении между сырьем и экстрагентом 1:10-1:20, получение масляного экстракта хмеля с содержанием горьких кислот не менее 0,1%, ксантогумола не менее 0,15%, пренилфлавонов не менее 0,06%, пригодного для активации рецепторов врожденного иммунитета и сцепленных с ними механизмов адаптации организма, свидетельствует о соответствии заявляемого технического решения условию патентоспособности «новизна».

В заявляемом техническом решении для получения высокоэффективного экстракта из растительного сырья был использован метод, основанный на пульсационных технологиях.

Под воздействием пульсации экстракционная масса (жидкость-твердое) приходит в возвратно-поступательное движение, что обеспечивает равномерное распределение гетерогенных компонентов в объеме экстрагента и интенсивное проведение массообменных процессов. Благодаря этому происходит выравнивание концентраций компонентов во всем объеме экстрагента. Твердая фаза (сырье) непрерывно колеблется в экстрагенте, что приводит к увеличению эффективности экстракционных процессов.

Из патентной литературы известен способ пульсационной экстракции растительного сырья, где примеры конкретного выполнения иллюстрируют получение водных или спиртовых экстрактов с повышенным выходом в них сухих растворимых веществ [7].

Эксперименты показали, что только сочетание в одном техническом решении таких составляющих, как использование в качестве растительного сырья шишек хмеля, в качестве экстрагента - растительного масла, а в качестве способа экстракции - способ высокоэнергетических импульсных воздействий, позволило получить уникальный продукт с максимальным содержанием целевых веществ (ксантогумол, изоксантогумол, 8-пренилнарингенин) и их биологической активностью. Данный продукт позволяет активировать рецепторы врожденного иммунитета и сопряженные с ними механизмы адаптации организма.

Массовое соотношение между хмелем и маслом было выбрано в пределах 1:10-1:20.

Импульсно-периодический характер обработки масляной среды при пульсационной экстракции позволил не только повысить выход экстрагируемых веществ, но и предотвратить их свободнорадикальное окисление с потерей биологической активности.

Высокоэнергетическое кратковременное воздействие на масляную среду, содержащую измельченное растительное сырье, позволило значительно усилить экстракцию целевых компонентов и одновременно избежать их необратимой термической деструкции.

Исследование масляных экстрактов, полученных с помощью импульсно-периодических воздействий, показало, что содержание экстрактивных веществ (ксантогумола, изоксантогумола, 8-пренилнарингенина) в них значительно выше, чем при других способах экстракции (электрогидравлический удар, ультразвуковая экстракция,

светогидравлический удар, кипячение и настаивание). Соответственно, гораздо выше и их биологическая активность.

Продукт, полученный нами в результате пульсационной масляной экстракции хмеля, содержит горьких кислот не менее 0,1%, ксантогумола не менее 0,15%, и пренилфлавонов (6-пренилнарингенин, 8-пренилнарингенин и изоксантогумол) не менее 0,06%.

Определение содержания ксантогумола и пренилированных флавоноидов (изоксантогумол, 8-пренилнарингенин) проводили методом обращено-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ) с фотометрическим детектированием. Использовали стандарты ксантогумол (Alexis USA San Diego, USA), изоксантогумол (Alexis USA San Diego, USA), 8- пренилнарингенин (Alexis USA San Diego, USA).

Для приготовления рабочих стандартных образцов с концентрацией 0,1 мг/мл по 5 мг ксантогумола, изоксантогумола, 6-пренилнарингенина, 8-пренилнарингенина помещали в мерные колбы вместимостью 50 мл, доводя объем до метки метанолом. 25 г масляного экстракта хмеля (далее МЭХ) помещали в делительную воронку вместимостью 100 см³, экстрагировали трижды по 10 мл этилацетата. Извлечение объединяли и отфильтрововали.

Колонка NUCLEOSIL PR С18, 5 мкм, 250×4,6 мм (Macherey Nagel), подвижная фаза: ацетонитрил-метанол-1% муравьиная кислота (35:32:33), объемная скорость: 1,0 мл/мин, температура колонки: 25°С, детектирование: УФ, 370 нм, объем вводимой пробы 10 мкл.

Расчет концентрации флавоноидов осуществляли по градуировочному графику или по формуле: Х%=C×S1×30×100% / S2×M, где С-концентрация стандартного раствора, мг/мл; S1 - площадь пика в анализируемой пробе; S2 - площадь пика в стандартом образце; М - масса навески, мг.

Жирорастворимая фракция хмеля, содержащая ксантогумол и 8-пренилнарингенин, а также нарингин и нарингенин, подавляет секрецию провоспалительных цитокинов, которая происходит при активации липополисахаридом (ЛПС) рецепторов врожденного иммунитета (TLR). Активация TLR сопровождается сенситизацией сцепленных с ними сигнальных молекул, например пероксисомного пролифераторактивируемого рецептора (PPAR). Противовоспалительный, антидиабетический и нормализующий липидный обмен эффект изогумулонов, входящих в состав экстракта хмеля связан с активацией PPAR.

Учитывая высокий защитный эффект жирорастворимых фракций хмеля при различных бактериальных и вирусных инфекциях, нами проведены исследования по изучению защитного действия полученного масляного экстракта хмеля при экспериментальном эндотоксическом шоке и гриппозной инфекции и выявлены связи реализации защитного эффекта с активацией рецепторов врожденного иммунитета.

Иммуногенность противовирусных вакцин, как правило, слабая. Активация рецепторов врожденного иммунитета может быть использована для получения адъювантного эффекта при вакцинации. В распознавании вирусных антигенных детерминант участвуют рецепторы врожденного иммунитета TLR2 и TLR4.

Установлено, что МЭХ активирует TLR и вызывает сенситизацию рецепторов, сцепленных с TLR (к АФП, IL-1, IL-2, GMCSF, инсулину). Следовательно, он может быть перспективным средством для профилактики и лечения патологических состояний, связанных с функциональной недостаточностью клеточных рецепторов, сцепленных с TLR: сахарного диабета, метаболического синдрома, ожирения, хронических инфекционных заболеваний, дисгормональных и менопаузных расстройств, мастопатии, воспалительных поражений желудочно-кишечного тракта.

МЭХ может быть использован при инфекционных заболеваниях и септических состояниях, особенно в восстановительный период, а также в качестве адъюванта вакцин.

Экспериментально установлена эффективность внутрикожного применения бактериальных токсинов в качестве адъювантов противовирусных вакцин. Это послужило основанием для проведения исследований по изучению адъювантных свойств масляного экстракта хмеля и его сочетания с радиомодифицированным ЛПС при применении противогриппозной вакцины.

Эксперименты показали, что защитный эффект МЭХ, полученного с помощью высокоинтенсивных роторно-пульсационных воздействий, является намного более выраженным, чем МЭХ, полученного при ультразвуковой экстракции. Выраженность защитного эффекта также зависит от пути введения МЭХ и достигает максимальных значений при ингаляционном введении в сравнении с пероральным приемом МЭХ.

Из вышесказанного следует, что технический результат изобретения достигается новой совокупностью существенных признаков, как вновь введенных, так и известных, следовательно, заявляемый способ соответствует условию патентоспособности «изобретательский уровень».

Свойства полученного масляного экстракта хмеля иллюстрируются экспериментальными данными, где на фиг.1 представлена диаграмма влияния ЛПС и модифицированного эндотоксина (ЛПСм) на миграцию лимфоцитов ex vivo; на фиг.2 представлена диаграмма влияния модифицированного ЛПС на активацию нейтрофилов и моноцитов вызываемую немодифицированным ЛПС; на фиг.3 представлена таблица, в которой показано влияние длительности применения масляного экстракта хмеля на выживаемость белых беспородных и линейных мышей (n=20) С3Н/HeJ при экспериментальном эндотоксическом шоке, вызванном введением ЛД₅₀ продигиозана; на фиг.4 представлена таблица, в которой показано влияние применения масляного экстракта хмеля в сочетании с радиомодифицированным ЛПС на выживаемость белых беспородных мышей (n=20) при экспериментальном эндотоксическом шоке; на фиг.5 представлена диаграмма изменения миграции лейкоцитов в крови мышей ex vivo в ответ на введение альфа-фетопротеина (АФП); на фиг.6 представлена диаграмма изменения миграции лейкоцитов в крови мышей ex vivo в ответ на введение интерлейкина 1 (IL-1); на фиг.7 представлена диаграмма изменения миграции лейкоцитов в крови мышей ex vivo в ответ на введение интерлейкина 2 (IL-2); на фиг.8 представлена диаграмма изменения миграции лейкоцитов в крови мышей ex vivo в ответ на введение гранулоцитмакрофаг колонийстимулирующего фактора (GMCSF); на фиг.9 представлена диаграмма изменения миграции лейкоцитов в крови мышей ех vivo в ответ на введение инсулина; на фиг.10 представлена таблица с показателями клеточного иммунитета через определенные промежутки времени после вакцинации; на фиг.11 показаны изменения гуморального иммунитета при сочетанном введении вакцины Ваксигрип с пероральным введением масляного экстракта хмеля; на фиг.12 представлена таблица с содержанием целевых веществ в масляных экстрактах хмеля, которые были получены различными способами; на фиг.13 представлена таблица с данными защитного эффекта МЭХ от летальной гриппозной инфекции H3N2 у мышей.

Получают масляный экстракт хмеля с помощью роторно-пульсационного аппарата (РПА).

В технологической схеме РПА устанавливают ниже днища экстрактора. Предварительно моют в проточной воде шишки хмеля. Вымытое сырье загружают на ложное дно экстрактора и заливают растительным маслом. Масло поступает в РПА через штуцеры, а шишки хмеля - с помощью шнека.

При работе РПА происходит механическое измельчение частиц, возникает интенсивная турбулизация и пульсация смеси.

Масло, которое подают под давлением или самотеком через входной патрубок в полость ротора, проходит через каналы ротора, каналы статора, рабочую камеру и выходит из аппарата через выходной патрубок. При вращении ротора, его каналы периодически совпадают с каналами статора. Выходя из канала статора, масло собирается в рабочей камере и продвигается к выходному патрубку. В период времени, когда каналы ротора перекрыты стенкой статора, в полости ротора давление возрастает, а при совмещении канала ротора с каналом статора давление за короткий промежуток времени сбрасывается и в результате этого в канал статора распространяется импульс давления.

Скорость масла в канале статора является переменной величиной. При распространении в канале статора импульса избыточного давления вслед за ним возникает кратковременный импульс пониженного («отрицательного») давления, так как совмещение каналов ротора и статора завершилось, и подача масла в канал статора происходит только за счет транзитного течения из радиального зазора между ротором и статором. Объем масла, вошедшей в канал статора, стремится к выходу из канала, и инерционные силы создают растягивающие напряжения в жидкости, что вызывает кавитацию. Кавитационные пузырьки растут при воздействии импульса пониженного давления и схлопываются или пульсируют при увеличении давления в канале статора. Часть кавитационных пузырьков выносится в рабочую камеру.

В связи с тем, что скорость потока масла в канале статора велика и пульсирует, поток является турбулентным. При вращении ротора в зазоре между ротором и статором возникают большие сдвиговые напряжения. Рабочие поверхности ротора и статора воздействуют на масляную гетерогенную среду за счет механического контакта, создавая высокие срезывающие и сдвиговые усилия.

Из РПА пульпа, то есть смесь измельченного материала и экстрагента, поднимается вверх и через штуцер поступает в экстрактор с мешалкой. Способ основан на многократной циркуляции сырья и экстрагента. Процесс повторяется до получения концентрированного извлечения. При этом происходит одновременно экстрагирование и измельчение.

Таким образом, для получения заявленной композиции шишки хмеля измельчают на электротраворезке ТУ-37-53, тип 622-1М. Измельченное сырье просеивают через сито по ГОСТ 21.483 с размером отверстий 1-2 мм. Экстракцию проводят подсолнечным маслом в роторно-пульсационном аппарате (РПА-4) при соотношении между растительным сырьем и экстрагентом 1:10. Перед проведением экстракции измельченный хмель пропитывают 70° этиловым спиртом при массовом соотношении между хмелем и этиловым спиртом 2:1. Время экстракции составило 4-8 мин. После окончания экстракции проводят фильтрацию нерастворенных частиц хмеля на капроновом фильтре.

Изобретение поясняется примерами.

Пример 1

Исследования проводили на беспородных белых мышах-самцах (по 20 голов в группе) и генетически модифицированных мышах линии С3Н/HeJ (по 20 голов в группе), в клетках которых отсутствуют рецепторы врожденного иммунитета TLR4. Только у мышей без генетических модификаций TLR4 ЛПС в дозе 20-100 мг/кг активирует секрецию цитокинов лимфоцитами (по данным РТМЛ) и «кислородный взрыв» в нейтрофилах и моноцитах крови мышей (чертежи заявки фиг.1, 2).

Это свидетельствует о том, что действие ЛПС опосредует TLR4. Животным в рацион питания добавляли масляный экстракт хмеля, в котором горькие кислоты составили 0,15%, ксантогумол - 0,18%, пренилфлавоны - 0,08%, в объеме 2-4 мл в сутки в течение 4-12 недель.

Кормление мышей масляным экстрактом хмеля (далее - МЭХ) привело к сенситизации TLR4 (по данным РТМЛ с ЛПС). Установлен дозозависимый характер защитного эффекта МЭХ при эндотоксическом шоке, вызываемом введением 2 ЛД₅₀ ЛПС. В группе генетически модифицированных мышей гибели животных при действии ЛПС в дозе 2 ЛД₅₀ не выявлено, что указывает на роль рецепторов TLR в развитии эндотоксического шока и роли TLR в реализации защитного эффекта МЭХ. Результаты проведенных исследований по определению защитного действия МЭХ при введении 2 ЛД₅₀ ЛПС представлены в материалах заявки в таблице на фиг.3.

Таким образом, защитный эффект МЭХ при экспериментальном эндотоксическом шоке отмечался только у белых мышей и не отмечается у мышей линии С3Н/HeJ, у которых отсутствуют рецепторы врожденного иммунитета TLR4. Это свидетельствует о роли TLR в реализации защитного эффекта МЭХ.

Сочетанное применение МЭХ с радиомодифицированным ЛПС значительно усиливало его защитное действие. Результаты представлены в таблице на фиг.4.

Указанный по составу масляный экстракт хмеля использовали для активации механизмов иммунной защиты при инфекционных заболеваниях, сопровождающихся нарушением функций TLR.

МЭХ вызывал перекрестную сенсибилизацию сцепленных с TLR4-рецепторов к альфа-фетопротеину (диаграмма на фиг.5), интерлейкину 1 (фиг.6), интерлейкину 2 (фиг.7), гранулоцит-макрофаг колонийстимулирующему фактору (фиг.8), инсулину (фиг.9), которая была наиболее выражена через 4 недели после начала эксперимента. Это является молекулярным механизмом реализации защитного эффекта МЭХ.

Пример 2

Исследования проводили на беспородных белых мышах-самцах, которым вводили 50 мкл вакцины Ваксигрип фирмы Aventis внутрикожно в вентральную поверхность ушной раковины.

Масляный экстракт хмеля, в котором горькие кислоты составили 0,15%, ксантогумол - 0,19%, пренилфлавоны - 0,09%, вводили перорально в дозе 2 мл в сутки в течение 14 суток перед вакцинацией и 14 суток после ее проведения.

Критерии оценки эффективности иммунного ответа на профилактическое введение вакцины Ваксигрип: титр противогриппозных антител через 28 суток после вакцинации - log2 (M±2m), показатели Т-клеточного иммунитета - РТМЛ с общими: конканавалином А, фитогемагглютинином, регуляторными (альфафетопротеином) и специфическими вакцинными антигенами (Ваксигрип).

Показатели клеточного иммунитета определяли через 2, 7, 14, 21 и 28 суток после вакцинации. Результаты исследований представлены в таблице на фиг.10.

Анализ результатов исследований свидетельствует о том, что применение масляного экстракта хмеля повышает эффективность противогриппозной вакцины Ваксигрип. При этом происходит активация клеточного иммунитета как антигеннеспецифического (РТМЛ с КонА), так и антигенспецифического (РТМЛ с вакциной). Максимальный адъювантный эффект был получен при сочетанном введении вакцины, масляного экстракта хмеля и радиомодифицированного ЛПС.

Изменения гуморального иммунитета при сочетанном введении вакцины Ваксигрип с пероральным введением масляного экстракта хмеля представлены в таблице на фиг.11.

Анализ результатов исследований свидетельствует о том, что применение масляного экстракта хмеля повышало эффективность гуморального ответа на вакцину.

Пример 3

Больной П., 39 лет, в течение 5 лет страдает хроническим персистирующим гепатитом В, HBsAg+, ПЦР ДНК гепатита В+.

В течение 4 недель применял МЭХ, в котором горькие кислоты составили 0,11%, ксантогумол - 0,16%, пренилфлавоны - 0,07%, по 30 мл в день перорально в сочетании с традиционной терапией. Через 4 недели после начала терапии не определялось ДНК гепатита В и HBsAg. Контрольное обследование через 3 и 6 месяцев без отрицательной динамики. На иммунограмме отмечалось торможение миграции лейкоцитов (46-61%) на введение ex vivo альфа-фетопротеина (АФП), модифицированного ЛПС и интерлекинов 1 (ИЛ-1) и 2 (ИЛ-2), что свидетельствует о сенсибилизации TLR4 и сцепленных с ними регуляторных молекул - рецепторов к АФП, ИЛ-1, ИЛ-2.

Пример 4

Пациентка М., 52 года, фиброзно-кистозная мастопатия. Размер узла по данным УЗИ 4 см. В течение 4 недель принимала МЭХ, в котором горькие кислоты составили 0,2%, ксантогумол - 0,19%, пренилфлавоны - 0,07%, перорально в дозе 30 мл в сутки. По завершении приема средства на УЗИ данных наличия фиброзного уза нет. На иммунограмме отмечается торможение миграции лейкоцитов (38-64%) на АФП, ИЛ-1, ИЛ-2, гранулоцитмакрофаг-колонийстимулирующий фактор (ГМКСФ).

Повышение миграционной активности лейкоцитов при лечении МЭХ отражает повышение функциональной активности TLR4 и указывает на перспективность его применения.

Из вышесказанного следует, что заявляемый продукт обеспечивает технический результат, получение его не вызывает затруднений, предполагает использование освоенных материалов и стандартного оборудования, что свидетельствует о соответствии заявляемого технического решения условию патентоспособности «промышленная применимость».

Масляный экстракт хмеля, включающий эффективное количество целевых компонентов (изоксантохумол, ксантогумол, 8-пренилнарингинин) может применяться в любой удобной форме. Это могут быть эмульсии по типу «масло в воде» или «вода в масле», или комплексы масляного экстракта с кремнийсодержащими носителями, или мази, или кремы, или гели, или масляные аэрозоли, или суппозитории, или желатиновые капсулы, или майонезы, или соусы, или мороженое.

Источники информации

1. Jeyaseelan S., Chu Н.W., Young S.К., Freeman М.W., Worthen G.S. - Distinct roles of pattern recognition receptors CD 14 and Toll-like receptor 4 in acute lung iniury. // Infect Immun. 2006. Vol.73, №3. P.1754-1763;

2. Патент РФ №2280660, C09B 61/00, 2006;

3. Патент РФ №2279283, А61К 36/00, 2006;

4. Патент РФ №2191520, A23F 3/36, А 61К 35/78, 2002;

5. Патент РФ №2163827, B01D 11/02, 2001;

6. Патент РФ №2062785, С12С 3/08, 1996;

7 Патент РФ №2255751, А61К 35/78, 2005;

8. Патент РФ №2271245, B01F 11/00, B01F 7/28, 2006.