способ получения цис-диаммонийдихлордигидроксоплатины (iv) и ее применение

Формула изобретения

1. Способ получения цис-диаммонийдихлордигидроксоплатины (IV), заключающийся в том, что цис-диаммонийдихлорплатину (II) подвергают взаимодействию с раствором, содержащим перекись водорода, и полученный таким образом продукт растворяют в минеральной кислоте и затем осаждают щелочным раствором, отличающийся тем, что используют раствор, содержащий свыше 30% перекиси водорода, и обработку им цис-диаммонийдихлорплатины (II) ведут при температуре ниже 30°С.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что полученную цис-диаммонийдихлордигидроксоплатину (IV) превращают в ее производные.

3. Соединение общей формулы

где Х₁, Х₂ - ионы кальция, магния, натрия, калия, лития, алкильные и/или арильные остатки.

4. Применение соединения по п.3 для профилактики, терапии, последующего наблюдения и ухода за выздоравливающим при заболеваниях, связанных с ростом клеток, дифференциацией клеток и/или делением клеток.

5. Применение по п.4, отличающееся тем, что заболевание представляет собой опухоль.

6. Применение по п.4 или 5, отличающееся тем, что соединение применяется орально, вагинально, ректально, назально, подкожно, внутривенно, внутримышечно, внутрибрюшинно, регионально и/или локально.

7. Фармацевтическая композиция для профилактики и терапии заболеваний, связанных с ростом клеток, дифференциацией клеток и/или делением клеток, содержащая соединение по п.3, вместе с фармацевтически приемлемым носителем, адъювантом и/или наполнителем.

8. Фармацевтическая композиция по п.7, отличающаяся тем, что носители выбраны из группы, включающей наполнители, разбавители, связующие, увлажнители, дезинтегранты, замедлители растворения, ускорители абсорбции, смачивающие агенты, адсорбенты и/или смазывающие вещества.

9. Фармацевтическая композиция по п.8, отличающаяся тем, что носители являются липосомами, сиосомами и ниосомами.

Описание изобретения к патенту

Данное изобретение относится к способу получения транс- или цис-диаммонийдихлордигидроксоплатины (IV), ее солей и производных, полученных из этого соединения; изобретение относится также к применению этих соединений для профилактики, терапии, контроля и ухода за выздоравливающим в случае болезней, ассоциируемых с ростом клеток, дифференциацией клеток и/или делением клеток, особенно опухолевых.

Хорошо известно, что металлы, такие как молибден, ванадий, а также особенно золото и платина, могут быть использованы в терапии острых и хронических заболеваний, таких как ревматизм, рак или аутоиммунные болезни. Часто применяемые металлы контактируют с организмом, подвергаемым лечению, в виде комплексов, во многих случаях при оральном усвоении.

Эти комплексные соединения, содержащие металлы, трудно получить с требуемой степенью фармацевтической чистоты. Многочисленные способы получения, которые были описаны, или не приводят к получению соединений с достаточной степенью фармацевтической чистоты или приводят к образованию ряда побочных продуктов, вызывающих нежелательные побочные эффекты в организме. В частности, получение интересных с фармацевтической точки зрения цис- и транс-оксоплатинов с требуемой степенью чистоты или при отсутствии побочных продуктов невозможно по известным способам (SU 1137698 A1, SU 1021116 А1). В SU 1137698 А1 описаны способы получения цис-диаминодихлордигидроксоплатины (IV). Эти способы получения обеспечивают степень чистоты конечного продукта, равную 99-99,6%.

Кроме того, описаны различные ацильные производные цис-платиновых соединений (Kelland et al., Cancer Research, 1992). Согласно работе Kelland et al. для действия на раковые клетки на яичнике существенное значение имеют заместители азотсодержащего остатка, а не ацильные радикалы. По мнению авторов, существует тесная взаимосвязь между заместителями в азотсодержащем остатке и цитотоксической активностью соединений. Цитотоксическая активность цис-платиновых соединений возрастает с увеличением количества атомов углерода в заместителях азотсодержащего остатка. То есть согласно объяснениям, данным Kelland et al., у специалиста в данной области нет мотивации к замене ацильных радикалов другими заместителями, например алкильными, поскольку внимание специалиста в данной области сосредоточено на заместителях в азотсодержащем остатке. Согласно Kelland et al. специалисту имеет смысл вводить заместители, имеющие предпочтительно большее количество атомов углерода в азотсодержащий остаток соответствующих цис-платиновых соединений. Согласно Kelland et al. особенно предпочтительны кольцевые структуры, и, следовательно, у специалиста будет мотивация к введению других особенно больших кольцевых заместителей в цис-платиновые соединения путем замещения аминных лигандов.

Цель данного изобретения, следовательно, состоит в создании способа, позволяющего легко, надежно и эффективно получать цис- и транс-оксоплатиновые соединения.

Изобретение достигает вышеуказанной цели посредством способа получения цис-или транс-диаммонийдихлордигидроксоплатины (IV) или диаммонийдихлор-транс-дигидроксоплатины (IV) и их производных, согласно которому цис- или транс-диаммонийдихлорплатина (П) реагирует с раствором, содержащим более 30% перекиси при температурах ниже 30°С, и полученный продукт растворяется в минеральной кислоте и затем осаждается в щелочном растворе. Неожиданно комбинация таких признаков, как применение раствора, содержащего >30% перекиси, и сравнительно низкие температуры, позволяет осуществить легко и надежно способ получения оксо-цис-платины и оксо-транс-платины таким образом, что образуются небольшие количества нежелательных побочных продуктов. Способ по изобретению предусматривает применение цис- или транс-диаммоний-дихлорплатины (II) в качестве исходных соединений, которые превращаются в соответствующие цис- или транс-формы диаммонийдихлор-транс-дигидроксо-платины (IV). Предпочтительно, чтобы раствор, содержащий перекись, добавляли в течение продолжительного промежутка времени предпочтительно непрерывно. Растворы, содержащие перекись, могут быть растворами, которые выделяют перекись во время реакции или ведут себя функционально аналогичным способом вследствие их специфической структуры, как это имеет место, например, с растворами перекиси водорода или перхлоруксусной кислоты.

По способу согласно изобретению высокий выход и чистота продуктов реакции сочетается с тем, что реакция является очень безопасной. В противоположность хорошо известным способам предотвращаются, например, вспенивание и разбрызгивание реакционной смеси, приводящие к потере платины. Высокая чистота полученного продукта позволяет производить дальнейшее получение фармацевтически активных веществ, таких как соли и производные. Конечно, способ по изобретению пригоден также для получения желательных соединений в промышленном масштабе.

В способе по изобретению исходные вещества добавляются несколько раз с раствором перекиси водорода, особенно при высокой концентрации, при низких температурах и, необязательно, при охлаждении, и реагируют в течение длительного периода времени, например в течение нескольких дней. По этой реакции можно получить твердый продукт, например осадок, который растворяется при добавлении минеральной кислоты. Это сопровождается осаждением с применением предпочтительно концентрированного щелочного раствора.

Затем полученный таким образом продукт можно промыть и высушить в вакууме.

Продукт, полученный взаимодействием цис- или транс-диаммонийдихлор-платины (II), представляет собой раствор или твердый продукт; полученный продукт предпочтительно является вначале осадком. Он реагирует с минеральной кислотой, например фосфорной или серной. Если продукт, полученный по изобретению, является осадком, он в основном растворяется в указанной минеральной кислоте. Растворенный в минеральной кислоте осадок затем обрабатывают щелочным раствором, например концентрированным раствором едкого натра, с получением второго осадка. Дальнейшая обработка осажденной цис- или транс-диаммонийдихлордигидроксоплатины (IV) зависит от желаемого дальнейшего применения полученного продукта и известна специалистам. Согласно предпочтительному варианту изобретения раствор, содержащий перекись, является очень концентрированным раствором перекиси водорода. Указанный раствор перекиси водорода предпочтительно представляет собой раствор с концентрацией >30% и более предпочтительно с концентрацией, равной 35%. Как хорошо известно специалистам, раствор перекиси водорода может также содержать другие компоненты, усиливающие ее окисляющий эффект. Например, предпочтительно применение раствора, содержащего 30% перекиси водорода и 70% перхлоруксусной кислоты. Очевидно, можно также применять раствор, содержащий перхлоруксусную кислоту без перекиси водорода. Помимо перекиси водорода и перхлоруксусной кислоты специалистам известны другие функционально аналогичные соединения и растворы, генерирующие или обеспечивающие перекись, например перекись натрия или калия.

Согласно другому предпочтительному варианту изобретения реакция диаммоний-дихлорплатины (II) или в цис-, или в транс-форме с раствором, содержащим перекись, предпочтительно раствором перекиси водорода, проводится при комнатной температуре. Комнатная температура в контексте данного изобретения равна 20-29°С, предпочтительно 23-27°С и более предпочтительно 24-25°С. Однако следует иметь в виду, что комнатная температура не является фиксированной. В зависимости от других параметров процесса комнатная температура согласно данному изобретению может быть ниже или выше.

Согласно особенно предпочтительному варианту реакция цис- или транс-диаммонийдихлорплатины (II) или весь процесс осуществляют при температуре ниже 20°С, более предпочтительно ниже 15°С, еще более предпочтительно ниже 10°С и особенно предпочтительно ниже 7°С. Кроме того, может быть предпочтительным проводить реакцию при охлаждении ледяной водой, чтобы достичь температуры около 4°С. Такое охлаждение, которое необязательно проводить при 4°С, благоприятно для подавления образования ряда побочных продуктов.

Согласно другому предпочтительному варианту изобретения кислота, способная растворить продукт реакции раствора, содержащего перекись, с цис- или транс-диаммонийдихлорплатиной (II), является минеральной, предпочтительно серной. Конечно, могут быть использованы другие минеральные кислоты, известные специалистам, такие как фосфорная кислота, азотная кислота, угольная кислота и другие. Требуемая концентрация таких минеральных кислот легко может быть определена специалистами. Количество и концентрация указанных кислот должны выбираться так, чтобы полученный продукт, в частности, мог быть растворен, особенно если он является осадком. Предпочтительно выбирать концентрацию таким образом, чтобы нужно было применять только небольшое количество минеральной кислоты, например достаточное количество 0,5N серной кислоты.

Согласно предпочтительному варианту изобретения в качестве щелочного раствора применяют гидроокись натрия. Предпочтительно применять 25%, 30%, 33% или 35%-ный раствор гидроокиси натрия. Специалистам хорошо известно, что кроме раствора гидроокиси натрия любое другое основание можно использовать для осаждения продукта, полученного при помощи минеральной кислоты. Щелочной раствор нужно выбирать таким образом, чтобы конечный продукт был как можно чище и содержал как можно меньше побочных продуктов. Это можно определить рутинными опытами.

Согласно другому варианту изобретения предпочтительно осуществлять реакцию транс- или цис-диаммонийдихлорплатины (II) при охлаждении и повторяющемся добавлении раствора, содержащего перекись, особенно высококонцентрированного раствора, в течение периода времени от 12 до 96, предпочтительно от 24 до 48 часов. В этом случае охлаждение означает, что температура не должна постоянно превышать 30°С. Однако при некоторых обстоятельствах короткое превышение этой температуры может быть возможным. Предпочтительные типы охлаждения включают те, которые можно осуществить эффективно и безопасно при небольших расходах в промышленном масштабе, например охлаждение ледяной водой или смесями ледяная вода/соль. Тип охлаждения выбирают так, чтобы, в частности, высококонцентрированный раствор перекиси водорода мог реагировать с исходными веществами с протеканием хорошо контролируемой реакции. В контексте данного изобретения термин «контролируемая» означает, что не будет происходить бурных химических реакций, когда, например, металлическая платина будет теряться при разбрызгивании и т.д. В зависимости от концентрации и выбора исходных веществ предпочтительная температура охлаждения составляет менее 10°С, более предпочтительна температура в пределах от 3°С до 7°С. Путем определения степени чистоты конечного продукта и, возможно, имеющихся побочных продуктов специалист легко может определить, вся ли реакция или только отдельные ее стадии должны проводиться при вышеуказанных температурах. Так, например, может быть благоприятно при температурах от 3°С до 7°С проводить только реакцию исходных веществ с раствором, содержащим перекись, например раствором перекиси водорода; однако может быть предпочтительно проводить при этой температуре и весь процесс.

Предпочтительно, определив путем рутинных опытов подходящую величину температуры, менее 30°С, и соответствующую концентрацию раствора, содержащего перекись, достигать выход реакционных продуктов более 60%, предпочтительно более 65% и особенно предпочтительно более 67% от теоретически рассчитанного количества транс- или цис-диаммонийдихлор-дигидроксоплатины (IV).

Изобретение также относится к соединениям общей формулы:

где Х₁, Х₂ = кальций, магний, натрий, калий, литий, алкил и/или арил.

Соответствующие соединения указанной общей формулы могут иметь совершенно разные структуры. Так, если X₁ и Х₂ обозначают кальций и/или магний, соответствующие двухвалентные катионы могут связывать два платиновых комплекса через кислород, так что будут иметься два комплексных соединения в ассоциированной форме. Однако если X ₁ и Х₂ обозначают, например, натрий или литий, возможно также, что образуется соединение только с одним комплексом платины. Предпочтительно, чтобы Х ₂ был двухвалентным катионом, например кальцием или магнием, связывающим два комплекса, каждый из которых содержит один центральный атом платины, и X₁ может обозначать натрий, калий, литий, алкил и/или арил. Соответственно, можно получать соли транс- или цис-диаммонийдихлордигидроксоплатины (IV) с одно-, двухвалентными и трехвалентными ионами, или с одно- и двухвалентными ионами, или с одно- и двухвалентными ионами и алкильными и/или арильными заместителями, каждый в одном соединении, из основания, полученного способом по изобретению. Предпочтительными являются соли, содержащие в качестве катионов элементы основных групп I-V или подгрупп I-VIII Периодической таблицы элементов. Согласно особенно предпочтительному варианту используют соли калия, лития, натрия, магния, бария, цинка, марганца, серебра, меди, ванадия, кальция, в которых анионы могут быть, например, хлоридами, сульфатами, фосфатами, нитратами или карбонатами или др. Другие элементы, способные к образованию солей, хорошо известны специалистам, например все элементы основных групп I-V Периодической таблицы элементов, а также элементы из подгрупп I-VIII; все вышеуказанные элементы Периодической таблицы элементов могут образовывать соли цис-оксоплатины. Например, предпочтительными алкильными остатками являются метил, этил, пропил, а предпочтительными арильными остатками - фенил, нафтил или антрил. Соли и производные, особенно когда они получены способом по изобретению, имеют некоторые преимущества по сравнению с цис- или транс-диаммонийдихлордигидроксоплатиной (IV). Неожиданно по сравнению с основанием соли имеют такую хорошую растворимость, что с успехом можно применять комбинацию с другими активными веществами или витаминами или с другими хорошо известными фармацевтическими агентами, например противоопухолевыми агентами. В частности, неожиданно оказалось, что растворимость солей по изобретению в 0,1N HCl лучше, чем у соответствующего основания во много раз. Такая концентрация в основном соответствует концентрации кислоты в желудке, то есть соли по изобретению будут немедленно растворяться в желудке, особенно, когда попадают в желудок в виде фармацевтического агента, введенного орально или другим путем. Это особенно благоприятно для лечения опухолей в желудке или для того, чтобы убедиться, что соединения по изобретению могут достичь различных областей организма за счет абсорбции в желудке. Соли и производные имеют большую биодоступность и более эффективны при меньших дозах, чем основание, из которого они получены, поэтому приводят к появлению меньших побочных эффектов. Время пребывания солей в важных метаболических органах, таких как печень или почки, меньше, чем у оснований. Соли, особенно структуры, в которых одновалентные и двухвалентные катионы вместе образуют соединение по изобретению, образуют меньше аддуктов, например, в почках и печени и, следовательно, менее нефротоксичны или менее токсичны для печени. Кроме того, они лучше подходят для желудочно-кишечного тракта. Однако эти преимущества характерны не только для солей, полученных с одно- и двухвалентными катионами. Соединения, полученные по изобретению, имеют преимущества при профилактике и лечении опухолей. Соответственно, данное изобретение относится также к применению соединений по изобретению в медицине, особенно при получении лекарств.

Соединения по изобретению контактируют с организмом в терапевтическом количестве; в этом случае соединения по изобретению применяются в качестве фармацевтических агентов или лекарств; соответственно, эти термины в контексте данного изобретения являются синонимами. Выражение «терапевтическое количество» относится к количеству, которое предотвращает или ослабляет симптомы расстройства или патологического физиологического состояния. Согласно конкретным вариантам данного изобретения введенное количество является достаточным для предотвращения или ингибирования роста опухоли, причем это количество в основном предотвращает или ингибирует распространение опухоли, развитие кровеносных сосудов в опухоли, прорастание опухолей и/или метастазирование опухолей у реципиента, при этом опухоли выбраны из группы неопластических опухолей, воспалительных опухолей и/или абсцессов, выпотов и отеков. Как указано выше, данное изобретение относится к фармацевтическим агентам или лекарствам, содержащим соединения по изобретению, возможно, вместе с фармацевтическими адъювантами.

Количество соединений по изобретению, которое нужно применять для здорового субъекта в случае профилактики и для пациента в случае лечения, определяется, и устанавливается доза в соответствии с обычной медицинской практикой с учетом расстройства, подвергающегося лечению, состояния каждого отдельного пациента, места введения, метода введения и других факторов, хорошо известных лечащим врачам. Точно так же доза соединений, вводимых по изобретению, зависит от характеристик опухоли, от in vivo периода полувыведения соединений по изобретению из плазмы и от концентрации соединений по изобретению в составе, а также от метода введения, места и скорости дозирования, клинической переносимости каждым отдельным субъектом (человеком и животным), патологического заболевания пациента и т.п., как хорошо известно врачам и другим специалистам. В общем, предпочтительны дозы от примерно 0,1 до 1000 мг для пациента, особенно предпочтительна доза от 10 до 500 мг, более предпочтительно 200-400 мг и особенно доза, равная 300 мг. Можно также применять разные дозы при последовательном введении.

Например, инъекции (внутримышечная, или подкожная, или в кровеносные сосуды) предусмотрены как метод терапевтического введения соединений по изобретению, например инкапсулированных или связанных с носителем соединений по изобретению, хотя применяется также введение в виде аэрозоля, при помощи катетеров или хирургических трубок. Другие предпочтительные формы включают суспензии, таблетки, капсулы и т.п. для орального введения; коммерчески доступные небулайзеры для жидких составов и ингаляторы для лиофилизированных или разбрызгиваемых соединений и суппозитории для ректального или вагинального введения также возможны. Жидкими составами могут быть растворы, сиропы, жидкие смеси, суспензии, эмульсии, стерильные лекарственные формы (стерильные ампулы, флаконы с перегородкой, инфузионные растворы, лиофилизаты) и/или лосьоны. Пригодность выбранных параметров, например дозы, схемы введения, выбора адъювантов и т.п., может быть определена путем отбора аликвотных порций сыворотки у пациента, а именно человека или животного, и определения во время курса лечения. Альтернативно или совместно можно определить количество Т-клеток или других клеток иммунной системы обычным методом, для того чтобы получить полное представление об иммунологическом состоянии пациента.

Кроме того, наблюдают за клиническим состоянием пациента для достижения желаемого эффекта. В частности, можно определять рост и метастазирование опухолей. Поскольку опухоли могут ассоциироваться с другими болезнями, например инфекциями, можно также проводить мониторинг этих заболеваний.

В общем, и жидкие, и сухие соединения по изобретению могут быть смешаны с эксципиентом, например растворителем, для получения стабилизирующего эффекта до лечения. Согласно изобретению можно применять водный раствор или суспензию соединений. Другие формы препаратов и применение хорошо известны специалистам. Например, это могут быть гель, пудра, порошок, таблетка, таблетка с пролонгированным высвобождением, премикс, эмульсия, состав для заваривания, капли, концентрат, гранулят, сироп, гранулы, болюс, капсулы, аэрозоль, лак и/или состав для ингаляции. Лечение твердых опухолей или лейкозов включает профилактику, предотвращение, диагностику, ослабление, лечение, контроль и/или последующее наблюдение за метастазированием, прорастанием и/или развитием кровеносных сосудов, причем контроль означает мониторинг эффективности противоопухолевого лечения.

Соединение по изобретению можно вводить в растворе вместе с консервантом. Примеры подходящих консервантов для суспензий или растворов включают фенол, бензиловый спирт, м-крезол, метилпарабен, пропилпарабен, бензалкония хлорид и бензетония хлорид. Вообще, составы соединений по изобретению могут включать компоненты в количествах, которые не оказывают вредного влияния на получение стабильных форм и обеспечивают эффективное безопасное фармацевтическое введение. Например, другие фармацевтически приемлемые эксципиенты, хорошо известные специалистам, могут образовывать часть составов по изобретению. Например, они включают соли, различные наполнители, дополнительные буферные агенты, хелатирующие агенты, антиоксиданты, сорастворители и т.п.

Согласно предпочтительному варианту соединения по изобретению связаны с липосомами, сиосомами и/или ниосомами.

Например, такие формы можно получить таким способом, когда соединение по изобретению «захватывается» липосомой или прикрепляется к поверхности липосомы. Специалистам хорошо известно, что искусственные или природные мембраны липосом могут проявлять иммуностимулирующий эффект, особенно в тех случаях, когда компоненты соединены с поверхностью липосомы или находятся внутри липосом или просто смешаны с липосомами. Такой состав, содержащий липосомы, может быть введен парентерально. С применением хорошо известных методов, например распыления, такие составы можно вводить назально на слизистую оболочку полости носа. Терапевтическое лечение с применением спрея предпочтительно применять для лечения рака легких или опухолей в области уха-носа-горла. При назальном введении особенно соединение по изобретению нужно наносить на слизистую оболочку в состоянии, обеспечивающем проникновение в слизистую или абсорбцию слизистой оболочкой. По этой причине везикула должна быть совместимой со слизью и иметь определенную степень гидрофильности. Например, такие структуры известны специалистам из ЕР 0682528, содержание которого включено в данное описание в качестве ссылки. Липосомальные составы могут содержать один или более дополнительных фармацевтических носителей, выбранных из поверхностно-активных веществ и агентов, промотирующих абсорбцию, таких как полиоксиэтиленовые эфиры, соли желчных кислот и их производные, фусидиновая кислота и ее производные, олеиновая кислота, лецитин, лизолецитины, Tween® 21-85 и т.д.; абсорбирующих воду полимеров, таких как гликофурол, полиэтиленгликоли 200-7500, поливинилпирролидон, пропилен-гликоль или полиакриловая кислота, желатин, целлюлоза и ее производные и т.д.; веществ, ингибирующих расщепление ферментов, таких как апротинин и т.д.; органических растворителей, таких как спирты, например этанол, глицерин, бензиловый спирт и т.д.; или этилацетат и т.д.; гидрофобных агентов, таких как растительное масло, соевое масло, арахисовое масло, кокосовое масло, кукурузное масло, оливковое масло, подсолнечное масло, «миглиолы» или их смеси и т.д.; регуляторов рН, таких как азотная кислота, фосфорная кислота, уксусная кислота, цитраты и т.д.; консервантов, агентов, регулирующих осмотическое давление, например глицерина, хлорида натрия, метил-пара-оксибензоата, бензойной кислоты и т.д.; липосом и/или эмульсионных составов, таких как лецитины и т.д.; микроинкапсулированных составов; пропеллентов, таких как бутан.

Согласно другому варианту соединения по изобретению могут ассоциироваться друг с другом или соединяться с носителем, быть включенными в липосомы, причем такое включение вовсе не означает, в контексте данного изобретения, что соединения по изобретению находятся внутри липосом. «Включение» согласно изобретению может также обозначать, что соединения по изобретению связаны с мембраной липосом, например, таким образом, что соединения прикреплены к внешней поверхности мембраны.

Такое нахождение соединений по изобретению в липосомах или на липосомах благоприятно в тех случаях, когда специалист выбирает такие липосомы, которые проявляют иммуностимулирующий эффект. Различные методы модификации иммуностимулирующего эффекта липосом известны специалистам из DE 19851282. Липиды могут быть обычными, такими как сложные эфиры и амиды, или сложными липидами, например гликолипидами, такими как цереброзиды или ганглиозиды, сфинголипиды или фосфолипиды.

В контексте данного изобретения носители, которые могут быть компонентами лекарств, содержащих соединения по изобретению, могут быть белками, стимулирующими ответ антител в результате их иммунногенного поведения, а также фармацевтическими адъювантами, хорошо известными специалистам, такими как QS-21, GPI-0100 или другие сапонины, эмульсии вода в масле, такие как монотониды, полилизин, полиаргинины или др., например буферированными фосфатами физиологическими растворами, водой, различными видами детергентов, стерильными растворами и т.п.

Согласно изобретению фармацевтический агент представляет собой любой агент в области медицины, который можно применять для профилактики, диагностики, лечения, последующего контроля или ухода за пациентами, у которых есть опухоль, таким образом, что может наступать, хотя бы временно, патогенная модификация их общего состояния или состояния конкретных областей в организме. Так, например, согласно изобретению фармацевтический агент может быть вакциной или терапевтическим агентом. Кроме соединений по изобретению фармацевтический агент может включать, например, приемлемую соль или производные. Например, это могут быть соли неорганических кислот, таких как фосфорная, или соли органических кислот.

Далее, соли могут не содержать карбоксильных групп и получаться из неорганических оснований, таких как гидроокиси натрия, калия, аммония, кальция или железа, или из органических оснований, таких как изопропиламин, триметиламин, 2-этиламиноэтанол, гистидин и другие. Примерами жидких носителей являются стерильные водные растворы, не содержащие веществ или активных ингредиентов, например вода, или растворы, содержащие буфер, такой как фосфат натрия с физиологическим рН, или физиологический солевой раствор, или их смесь, или раствор хлористого натрия, содержащий фосфатный буфер. Другие жидкие носители могут содержать более чем одну буферную соль, например хлориды натрия и калия, декстрозу, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль и другие. Однако жидкие композиции фармацевтических агентов могут дополнительно содержать жидкую фазу, кроме воды.

Примеры таких жидких фаз включают глицерин, растительные масла, органические эфиры или эмульсии вода в масле. Фармацевтическая композиция или фармацевтический агент обычно включают, по меньшей мере, 0,1 вес.% соединений по изобретению в расчете на всю фармацевтическую композицию. Соответствующая доза вводимого фармацевтического агента по изобретению достаточно велика, и интервал доз достаточно широк для достижения желаемого профилактического или терапевтического эффекта образования нейтрализующих антител. В этом контексте выбранная доза не должна приводить к преобладанию нежелательных побочных эффектов. В общем, доза меняется в зависимости от возраста пациента, его конституции, пола и, конечно, в зависимости от серьезности заболевания. Индивидуальную дозу регулируют в отношении первичного заболевания и возникающих осложнений. Используя хорошо известные средства и методы, можно определить точную дозу, как это известно специалистам, например, путем определения роста опухоли как функции от дозы или схемы применения, или фармацевтического носителя и т.п. В зависимости от пациента доза подбирается индивидуально. Например, доза фармацевтического агента, которая переносится пациентом, может быть такой, что она составляет в плазме или локально в конкретных органах от 0,1 до 10000 мкМ, предпочтительно 1-100 мкМ. Или же доза может быть рассчитана, исходя из веса пациента. В этом случае обычную дозу фармацевтического агента нужно регулировать, например, в пределах от 0,1 мкг до 100 мкг на кг веса пациента, предпочтительно от 1 до 50 мкг/кг. Однако можно определить дозу в расчете на конкретные органы, а не на вес пациента. Например, это может быть тогда, когда фармацевтический агент по изобретению помещают, например, в биополимер, вводимый пациенту около конкретных органов, путем хирургического вмешательства.

Некоторые биополимеры, способные к высвобождению пептидов или рекомбинантных белков, известны специалистам. Например, такой гель может включать 1-100 мкг фармацевтической композиции по изобретению, например пептиды, рекомбинантные белки, или фармацевтического агента на мл композиции геля, предпочтительно 5-500 мкг/мл и более предпочтительно 10-100 мг/мл. В этом случае терапевтический агент вводится в виде твердой, гелеобразной или жидкой композиции.

Согласно другому предпочтительному варианту носители выбирают из группы наполнителей, разбавителей, связующих, увлажнителей, дезинтегрантов, замедлителей растворения, ускорителей абсорбции, смачивающих агентов, адсорбентов и/или смазывающих веществ.

Наполнителями и разбавителями предпочтительно являются крахмалы, лактоза, тростниковый сахар, глюкоза, маннит и двуокись кремния, связующим - карбоксиметилцеллюлоза, альгинат, желатин, поливинилпирролидон, увлажнителем предпочтительно является глицерин, дезинтегрантом служит предпочтительно агар, карбонат кальция и карбонат натрия, замедлителем растворения предпочтительно является парафин, ускорителем абсорбции предпочтительно служит четвертичное аммониевое соединение, смачивающий агент предпочтительно представляет собой цетиловый спирт и моностеарат глицерина, адсорбентом предпочтительно является каолин и бентонит, и смазывающим агентом предпочтительно является тальк, стеарат кальция и магния, твердый полиэтиленгликоль или смеси указанных веществ.

Согласно другому предпочтительному варианту соединения по изобретению могут быть в виде геля, пудры, порошка, таблетки, таблетки с пролонгированным высвобождением, премикса, эмульсии, завариваемого состава, капель, концентрата, гранулята, сиропа, пилюль, болюса, капсул, аэрозоля, лака и/или ингалянта и/или применяются в этой форме. Таблетки, таблетки с покрытием, капсулы, пилюли и гранулы могут быть снабжены обычными покрытиями и оболочками, возможно, включающими матирующие агенты, и могут иметь такой состав, что высвобождение активного вещества (активных веществ) происходит только или предпочтительно в конкретной части желудочно-кишечного тракта, возможно, это может быть отсроченное высвобождение, в конце которого полимерные вещества и воски могут использоваться как заливочные материалы.

Например, лекарства по изобретению можно использовать при оральном введении любой переносимой орально дозированной формы, включая капсулы, таблетки и водные суспензии и растворы, однако без ограничения этим. В случае таблеток для орального введения часто используемые носители включают лактозу, кукурузный крахмал. Обычно добавляются смазочные агенты, такие как стеарат магния. Для орального введения в виде капсул пригодные разбавители включают лактозу, высушенный кукурузный крахмал. При оральном введении водных суспензий активное вещество соединяют с эмульгаторами и суспендирующими агентами. Могут быть также добавлены подсластители, и/или корриганты вкуса, и/или красители, если это желательно. Активное вещество (вещества), то есть соединения по изобретению, могут быть в микроинкапсулированном виде вместе с одним или более вышеуказанными носителями.

Кроме активного вещества (веществ) суппозитории могут включать обычные водорастворимые и водонерастворимые носители, например полиэтиленгликоли, жиры, например жир какао, и высшие эфиры (например, С₁₄-спирта с С₁₆-жирной кислотой) или их смеси.

Кроме активного вещества (веществ) мази, пасты, кремы и гели могут включать обычные носители, например животные и растительные жиры, воска, парафины, крахмал, трагакант, производные целлюлозы, полиэтиленгликоли, силиконы, бентониты, двуокись кремния, тальк и окись цинка или их смеси.

Кроме активного вещества (веществ) порошки и спреи могут содержать обычные носители, такие как лактоза, тальк, двуокись кремния, гидроокись алюминия, силикат кальция и порошок полиамида или смеси этих веществ. Кроме того, спреи могут включать обычные пропелленты, такие как хлорфторуглеводороды.

Кроме активного вещества (веществ) растворы и эмульсии могут содержать обычные носители, такие как растворители, солюбилизаторы и эмульгаторы, например воду, этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, диметилформамид, масла, особенно масло хлопковых семян, глицерин, глицеринформаль, тетрагидрофуриловый спирт, полиэтиленгликоли и жирные эфиры сорбитана или их смеси. Для парентерального введения растворы и эмульсии могут также быть в стерильной и изотонической форме.

Кроме активного вещества (веществ) суспензии могут включать обычные носители, такие как жидкие разбавители, например вода, этиловый спирт, пропиленгликоль, суспендирующие агенты, например этоксилированные изостеариловые спирты, полиоксиэтиленсорбит и эфиры сорбитана, микрокристаллическая целлюлоза, мета-гидроокись алюминия, бентонит, агар, трагакант или их смеси.

Лекарства могут быть в виде лиофилизированного стерильного состава для инъекций, например в виде стерильной водной или масляной суспензии для инъекций. Такая суспензия может быть также получена известными методами, например с применением подходящих диспергирующих или смачивающих агентов (таких как Tween 80) и суспендирующих агентов. Стерильный состав для инъекции может также быть стерильным раствором или суспензией в нетоксичном, переносимом парентерально разбавителе или растворителе, например раствором в 1,3-бутиленгликоле. Переносимые носители и растворители, которые могут быть применены, включают маннит, воду, раствор Рингера, а также изотонический раствор хлористого натрия. Далее, в качестве растворителей или суспендирующей среды обычно используют стерильные нелетучие масла. Любое нелетучее масло, включая синтетические моно- и диглицериды, можно применять для этой цели. При получении агентов для инъекций могут применяться жирные кислоты, например олеиновая кислота, и глицеридные производные, например природные фармацевтически переносимые масла, такие как оливковое или касторовое масла, особенно в их полиоксиэтилированной форме. Такие масляные растворы или суспензии могут также включать длинноцепочечный спирт или похожий спирт в качестве разбавители или диспергатора.

Вышеуказанные формы могут также включать красители, консерванты, а также добавки, улучшающие запах или вкус, например перечное масло и эвкалиптовое масло, и подсластители, например сахарин. Предпочтительно, чтобы соединения по изобретению содержались в вышеуказанных фармацевтических формах в концентрации от примерно 0,1 до 99,5 вес.%, более предпочтительно примерно 0,5-95 вес.% в расчете на весь состав. Кроме соединений по изобретению, вышеуказанные фармацевтические препараты могут содержать еще и фармацевтически активные вещества. Получение указанных фармацевтических препаратов производится обычным способом по известным методикам, например путем смешения активного вещества (веществ) с носителем(-ями).

Вышеупомянутые препараты могут вводиться перорально, назально, ректально, регионарно, например в печень, селезенку, почки, легкие и т.п., парентерально (внутривенно, внутримышечно, подкожно), внутрицистернально, вагинально, внутриперитонеально, локально (порошок, мазь, капли) людям и животным и применяться для терапии воспалений или раковых заболеваний в области плоскостей и полостей организма.

Для оральной терапии возможными подходящими препаратами являются растворы для инъекции, растворы и суспензии, гели, завариваемые составы, эмульсии, мази или капли. Для локальной терапии можно применять офтальмические и дерматологические составы, серебряные и другие соли, ушные капли, глазные мази, порошки или растворы. В случае животных лекарства можно вводить с пищей или питьевой водой в подходящих составах. Кроме того, для людей и животных можно применять гели, пудры, порошки, таблетки, таблетки с пролонгированным высвобождением, премиксы, концентраты, грануляты, пилюли, болюсы, эмульсии, капсулы, аэрозоли, спреи и составы для ингаляции. Кроме того, соединения по изобретению можно вводить в других носителях, например в пластиках (пластиковые цепи для локальной терапии), коллагене или костном цементе.

Согласно другому предпочтительному варианту изобретения соединения по изобретению вводятся в составе с концентрацией 0,1-99,5, предпочтительно 0,5-95 и более предпочтительно 20-80 вес.%. То есть соединения по изобретению содержатся в вышеуказанных фармацевтических формах, например таблетках, пилюлях, гранулах и другом, в концентрации предпочтительно 0,1-99,5 вес.% в расчете на всю смесь. Количество активного вещества, то есть количество соединения по изобретению, которое соединяется с носителями с получением единичной дозированной формы, может меняться специалистом в зависимости от субъекта, подвергаемого лечению, опухоли и от конкретного вида введения. Как только состояние реципиента улучшится, количество активного соединения в препарате может быть изменено, чтобы получить поддерживающую дозу. В зависимости от симптомов доза или частота введения или и то, и другое могут затем уменьшаться до уровня, когда сохраняется улучшенное состояние. Как только наступает желаемый уровень ослабления симптомов, лечение должно быть прекращено. Однако пациентам может потребоваться промежуточное лечение на длительной основе, если какие-либо симптомы болезни вернутся. Соответственно, содержание соединений, то есть их концентрация, в составе фармацевтического препарата, а также состав этого препарата являются переменными, могут меняться и адаптироваться специалистом в данной области.

Специалистам известен тот факт, что соединения по изобретению могут контактировать с организмом предпочтительно человека или животного, различным образом. Специалисту известно также, что фармацевтические агенты, в частности, могут применяться в меняющихся дозах. Введение нужно осуществлять таким образом, чтобы борьба с опухолью происходила как можно более эффективно или чтобы начало такой болезни предотвращалось при профилактическом введении. Концентрацию и метод введения определяет специалист при помощи рутинных тестов. Предпочтительно осуществлять введение соединений по изобретению перорально в виде порошка, таблеток, жидких смесей, капель, капсул и т.п., ректально в виде суппозиториев, растворов и т.п., парентерально в виде инъекций, инфузий и растворов, ингаляций в виде паров и аэрозолей, порошков, и локальное введение проводят с применением мазей, прокладок, повязок, лаважей и т.п. Контактирование с соединениями по изобретению предпочтительно проводить в профилактических или терапевтических целях. При профилактическом применении развитие опухолей должно предотвращаться, по меньшей мере, таким образом, чтобы ее дальнейшее распространение значительно уменьшалось или чтобы опухоли почти полностью исчезали. При терапевтическом контактировании опухоль в организме пациента уже существует и имеющиеся опухоли должны или разрушаться, или должно ингибироваться их распространение. Другие предпочтительные для этой цели формы применения включают, например, подкожное, подъязычное, внутривенное, внутримышечное, внутрибрюшинное и/или топическое введение.

Кроме вышеуказанных концентраций во время применения соединений по изобретению согласно предпочтительному варианту соединения по изобретению можно вводить в количестве всего 0,05-500 мг/ кг веса в сутки, предпочтительно 5-100 мг/кг веса субъекта. Предпочтительно, чтобы это было терапевтическое количество, которое применяется для предотвращения или ослабления симптомов болезни или патологического физиологического состояния. Вводимое количество должно быть достаточным для ингибирования роста опухолей.

Очевидно, что доза будет зависеть от возраста, состояния здоровья и веса реципиента, степени серьезности болезни, вида требующегося одновременного введения, частоты введения и вида желательных и побочных эффектов. Дневная доза 0,05-500 мг/кг веса может быть введена в виде единичной дозы или множественных доз для достижения нужных результатов. Величина дозы в день пригодна как для профилактики, так и для лечения опухоли, включая инфекцию, например инфекцию, вызывающую или совместно вызывающую образование опухоли, например гепатит, особенно гепатит В. В частности, фармацевтические агенты обычно вводятся примерно 1-7 раз в день или, альтернативно или дополнительно, в виде непрерывной инфузии. Такое введение применяется при терапии хронических или острых болезней. Конечно, количества активного вещества, которые соединяются с материалом носителя для получения единичной дозированной формы, могут меняться в зависимости от реципиента, подвергающегося лечению, и от конкретного вида введения. Предпочтительно дневная доза распределяется на 2-5 раз по 1-2 таблетки, включающие активное вещество в количестве 0,05-500 мг/кг веса при каждом введении. Конечно, можно также выбрать большее содержание активного вещества, например до концентрации, равной 5000 мг/кг. Таблетки могут быть с пролонгированным высвобождением, когда число их приема в день уменьшается до 1-3. Содержание активного вещества в таблетках с пролонгированным высвобождением может составлять от 3 до 3000 мг. Если активное вещество вводится путем инъекции, как указано выше, реципиент предпочтительно контактирует с соединениями по изобретению 1-8 раз в день или же проводится непрерывная инфузия, в случае которой предпочтительны количества от 1 до 4000 мг/день. Предпочтительные общие количества, вводимые в день, применяются как для людей, так и в ветеринарии. Может быть необходимо отклониться от указанных доз, это зависит от природы и веса реципиента, подвергающегося лечению, типа и степени серьезности болезни, вида состава и метода введения лекарства и от промежутка времени введения лекарства. Таким образом, в некоторых случаях предпочтительно, чтобы организм контактировал с меньшими количествами, а в других случаях - с большими количествами активного вещества. Специалист в данной области может легко определить оптимальные дозы, требующиеся в каждом случае, и вид введения активных веществ.

Согласно другому особенно предпочтительному варианту изобретения соединения по изобретению вводятся один раз в количестве от 1 до 80, особенно от 3 до 30 мг/кг веса. Точно так же, как и в случае введения всего количества в день, величина единичной дозы может меняться специалистом. Соединения, используемые по изобретению, могут также применяться в ветеринарии с вышеуказанными единичными концентрациями и формами вместе с пищей, или пищевыми составами, или питьевой водой. Единичная доза предпочтительно включает количество активного вещества, которое вводится за один раз и которое обычно соответствует одной целой дневной дозе, половине дневной дозы, одной третьей или одной четвертой дневной дозы. Соответственно, дозы могут предпочтительно включать 1, 2, 3 или 4 или более единичных доз или 0,5, 0,3 или 0,25 от единичных доз. Предпочтительно, чтобы дневная доза соединений по изобретению распределялась на 2-10 применений, предпочтительно 2-7 и более предпочтительно на 3-5 применений. Конечно, возможна также непрерывная инфузия агентов по изобретению.

Согласно особенно предпочтительному варианту изобретения при каждом пероральном введении соединений по изобретению применяют 1-10 таблеток или капсул, предпочтительно 4-8 капсул или таблеток и более предпочтительно 6 капсул или таблеток. Таблетки по изобретению могут быть снабжены покрытиями и оболочками, хорошо известными специалистам, или же могут иметь такой состав, что высвобождение активного вещества (веществ) происходит только в предпочтительных конкретных областях организма реципиента.

По другому предпочтительному варианту изобретения соединения можно применять вместе, по меньшей мере, с одним другим, хорошо известным фармацевтическим агентом. То есть соединения по изобретению можно применять в профилактической или терапевтической комбинации с хорошо известными лекарствами. Такие комбинации можно вводить вместе, например в интегрированном фармацевтическом составе, или раздельно, например в виде комбинации таблеток, инъекций или других форм, вводимых одновременно или в разное время, для достижения желаемого профилактического или терапевтического действия. Эти хорошо известные агенты могут увеличивать эффект соединений по изобретению.

Конечно, можно также применять соединения по изобретению, в частности фармацевтические агенты, в отдельности или вместе с другими агентами в терапии, например в комбинационной терапии, в регионарной терапии, это может быть предпочтительным при наличии, например, опухоли в печени.

Специалистам хорошо известно, что повышение концентрации агентов, окисляющих глутатион или увеличивающих инактивацию глутатиона, может быть благоприятным при некоторых опухолях. Например, для истощения глутатиона можно применять DL-бутионин-(SR)-сульфоксимин.

Обычно существует оптимальное соотношение соединений по изобретению по отношению друг к другу и/или к другим терапевтическим или усиливающим эффект агентам (таким как ингибиторы транспорта, метаболические ингибиторы, ингибиторы почечной экскреции или глюкуронизации, например пробенецид, ацетаминофен, аспирин, лоразепан, циметидин, ранитидин, колифибрат, индометацин, кетопрофен, напроксен и т.д.), где активные вещества содержатся в оптимальном соотношении. Оптимальное соотношение определяется как соотношение соединения(-ий) по изобретению к другому терапевтическому агенту(-ам), при котором общий терапевтический эффект больше, чем сумма эффектов индивидуальных терапевтических агентов.

В общем, установлено оптимальное соотношение, когда агенты содержаться в соотношении от 10:1 до 1:10, от 20:1 до 1:20, от 100:1 до 1:100 и от 500:1 до 1:500. В некоторых случаях для увеличения действия одного или более других агентов достаточным является чрезвычайно маленькое количество терапевтического агента. Кроме того, применение соединений по изобретению в комбинации особенно благоприятно для снижения риска развития резистентности и/или для повышения терапевтической эффективности. Конечно, соединения по изобретению можно применять в комбинации с другими хорошо известными противоопухолевыми агентами. Такие агенты хорошо известны специалистам. Соответственно, соединения по изобретению могут вводиться вместе со всеми обычными агентами, особенно с другими лекарствами, доступными для применения, особенно с противоопухолевыми лекарствами, единичными или в комбинации. Они могут вводиться в отдельности или в сочетании друг с другом.

Соединения по изобретению предпочтительно вводить вместе с указанными другими хорошо известными фармацевтическими агентами в соотношении примерно 0,005-1. Предпочтительно вводить соединения по изобретению вместе с агентами, ингибирующими вирусы, в соотношении примерно 0,05-0,5 частей на до примерно 1 часть известных агентов. Фармацевтическая композиция может быть в виде вещества или водного раствора вместе с другими компонентами, такими как консерванты, буферные вещества, агенты для регулирования осмолярности раствора и т.д.

Согласно предпочтительному варианту фармацевтический агент применяется как вакцина после образования опухоли или как профилактическая вакцина. Вакцинацию лучше проводить таким образом, чтобы после ее применения в организме развивалась защита против распространения или образования опухолей. Конечно, можно также проводить вакцинацию непосредственно до проявления опухоли или сразу же после проявления опухоли или как терапию для многих целей. Специалисты знакомы с тем, что лечение опухолей может быть успешным практически в любое время после образования метастазов, поэтому вакцинация в контексте изобретения может представлять собой введение фармацевтического агента по изобретению в течение недель, месяцев, лет или десятилетий после образования опухоли.

Изобретение относится также к набору и к его применению в медицине. Соединения или набор, содержащий соединения по изобретению, предпочтительно применять в комбинационной терапии, особенно при лечении опухолей. В особенно предпочтительном случае указанная комбинационная терапия включает химиотерапию, лечение при помощи цитостатиков и/или радиотерапию. Согласно особенно предпочтительному варианту изобретения комбинационная терапия представляет собой специфическую адъювантную биологическую форму терапии и в наиболее предпочтительном случае - иммунотерапию. Далее, в другом особенно предпочтительном случае комбинационная терапия включает генную терапию и/или терапию с применением соединения по изобретению. Различные виды комбинационной терапии, особенно при лечении опухолей, хорошо известны специалистам. Например, в объем комбинационной терапии может входить лечение цитостатиками или, например, облучение определенного участка опухоли, и это лечение объединяется с генной терапией с применением соединений по изобретению в качестве противораковых агентов. Соответственно, применение соединений по изобретению для повышения чувствительности опухолевых клеток к цитостатикам и/или радиации может быть особенно предпочтительным. Далее, предпочтительное применение соединений по изобретению относится к ингибированию жизнеспособности и скорости пролиферации клеток и/или индуцированию апоптоза и остановки клеточного цикла.

Согласно предпочтительному варианту раковое заболевание или опухоль, лечение или профилактика которых предусматриваются, выбраны из группы раковых заболеваний или опухолей в области уха, носа, горла, легких, средостения, желудочно-кишечного тракта, мочеполовой системы, гинекологической системы, груди, эндокринной системы, кожи, саркомы костных и мягких тканей, мезотелиом, меланом, новообразований в центральной нервной системе, раковых болезней или опухолей в детстве, лимфом, лейкемии, паранеопластических синдромов, рака с неясной первичной локализацией (синдром CUP), карциноматоза брюшной полости, злокачественных образований, связанных с угнетением иммунной системы и/или метастаза.

Более конкретно, опухоли могут включать следующие виды: аденокарциному груди, простаты и толстой кишки, все виды рака легких, начинающегося с бронхиол, рак костного мозга, меланому, гепатому, нейробластому, папиллому, апудому, хористому, бронхиому, карциноидный синдром, карциноидную болезнь сердца, карциномы (например, карциному Уокера, карциному базальных клеток, плоскоклеточную базальную карциному, опухоль Эрлиха, in situ карциному, карциному рака-2, карциному клеток Меркеля, рак слизистой оболочки, непредклеточную бронхиальную карциному, овсяноклеточную карциному, папиллокарциному, карциному scirras, бронхоальвеолярную карциному, бронхиальную карциному, плоскоклеточный рак и переходно-клеточный рак); гистиоцитное функциональное расстройство, лейкоз (например, В-клеточный лейкоз, смешанно-клеточный лейкоз, лейкоз нулевых клеток, Т-клеточный лейкоз, хронический Т-клеточный лейкоз, HTLV-II-ассоциированный лейкоз, острый лимфоцитный лейкоз, хронический лимфоцитный лейкоз, лейкоз тучных клеток и миелоидный лейкоз); злокачественный гистиоцитоз, болезнь Ходжкина, лимфому не-Ходжкина, опухолевые одиночные плазменные клетки, ретикулоэндотелиоз, хондробластому, хондрому, хондросаркому, фиброму, фибросаркому, рак гигантских клеток, гистиоцитому, липому, липосаркому, лейкосаркому, мезотелиому, миксому, миксосаркому, остеому, остеосаркому, саркому Эвинга, синовиому, аденофиброму, аденолимфому, карциносаркому, хордому, краниофарингиому, дисгерминому, гамартому, мезенхимому, мезонефрому, миосаркому, амелобластому, цементому, одонтому, тератому, тимому, хориобластому, аденокарциному, аденому, холангиому, холестеатому, цилиндрому, цистаденокарциному, цистаденому, рак зернистых клеток, гинадробластому, гидраденому, инсулярно-клеточный рак, рак клеток Лейдига, папиллому, рак клеток Сертоли, рак слизистых поверхностных клеток, лейомиому, лейомиосаркому, миобластому, миому, миосаркому, рабдомиому, рабдомиосаркому, эпендимому, ганглионеврому, глиому; медиллобластому, менингиому, невриному, нейробластому, нейроэпителиому, нейрофиброму, нейрому, параганглиому, нехромаффинную параганглиому, ангиокератому, ангиолимфоидную гиперплазию с эозинофилией, склеротизирующую ангиому, ангиоматоз, гломангиому, гемангиоэндотелиому, гемангиому, гемангиоперицитому, гемангиосаркому, лимфангиому, лимфангиомиому, лимфангиосаркому, пинеалому, филлоидную цистосаркому, гемангиосаркому, лимфангиосаркому, миксосаркому, рак яичников, саркому (например, саркому Юинга, саркому Капоши и саркому тучных клеток); новообразования (например, неоплазмы костей, опухоль груди, неоплазмы пищеварительной системы, колоректальные опухоли, опухоли печени, опухоли поджелудочной железы, опухоли гипофиза, опухоли яичек, орбитальные опухоли, опухоли головы и шеи, центральной нервной системы, новообразования в слуховом органе, опухоли в области таза, дыхательных путей и в мочеполовой системе), нейрофиброматоз и дисплазию цервикальных плоских клеток.

Согласно предпочтительному варианту рак или опухоль, подвергающиеся лечению или профилактике, выбираются из группы, включающей опухоли в области уха - носа - горла, в том числе опухоли внутреннего носа, назального синуса, носовой части глотки, губ, ротовой полости, ротовой части глотки, гортани, гортанной части глотки, уха, слюнных желез, параганглиомы, опухоли в легких, включая непредклеточную бронхиальную карциному, предклеточную бронхиальную карциному, опухоли в предстении, желудочно-кишечном тракте, включая опухоли пищевода, желудка, поджелудочной железы, печени, желчного пузыря и желчных протоков, тонкой кишки, карциномы толстой кишки и в заднем проходе и анальные карциномы, опухоли в мочеполовой системе, включая почки, уретру, мочевой пузырь, простату, мочеточники, половой член и яички, гинекологические опухоли, в том числе опухоли в шейке, вагине, наружных женских половых органах, рак матки, злокачественный трофобластоз, карциному яичников, опухоли маточной (фаллопиевой) трубы, опухоли в брюшной полости, карциномы молочных желез, опухоли эндокринных органов, включая опухоли щитовидной железы, паращитовидной железы, коры надпочечника, поджелудочной железы, карциноидные опухоли и карциноидный синдром, множественные эндокринные опухоли, саркомы костной и мягкой тканей, мезотелиомы, опухоли на коже, меланомы, включая кожные и внутриглазные меланомы, опухоли центральной нервной системы, опухоли в младенчестве, в том числе ретинобластому, опухоль Вильмса, нейрофиброматоз, нейробластомы, семейство опухолей Юинга, рабдомиосаркому, лимфомы, в том числе лимфомы не-Ходжкина, Т-клеточные лимфомы, первичные лимфомы центральной нервной системы, болезнь Ходжкина, лейкозы, включая острые лейкозы, хронические миелоидный и лимфатический лейкозы, новообразования плазматических клеток, синдромы миелодисплазии, паранеопластические синдромы, метастазы с неясной первичной локализацией (синдром CUP), перитонеальный карциноматоз, злокачественные образования, связанные с подавлением иммунной системы, включая рак, связанный со СПИДом, такой как саркома Капоши, лимфомы, связанные со СПИДом, лимфомы центральной нервной системы, связанные со СПИДом, болезнь Ходжкина на почве СПИДа и аногенитальные опухоли на почве СПИДа, злокачественные опухоли, связанные с трансплантацией, метастазированные опухоли, в том числе метастазы в мозгу, метастазы в легких, в печени, в костях, плевральные и перикардиальные метастазы.

Согласно другому предпочтительному варианту раковые заболевания или опухоли, подвергающиеся лечению или профилактике, выбираются из группы, включающей карциномы молочных желез, опухоли в желудочно-кишечном тракте, включая карциномы толстой кишки, рак желудка, рак поджелудочной железы, рак толстой кишки, рак тонкой кишки, рак яичников, цервикальный рак, рак легких, рак простаты, почечно-клеточный рак и/или метастазы печени.

Без всяких ограничений изобретение объясняется ниже более подробно со ссылкой на следующие примеры.

1. Синтез цис-диаммонийдихлордигидроксоплатины (IV).

150 г цисплатина суспендируют в 300 мл воды в трехгорлой колбе объемом 2 л (снабженной прецизионной стеклянной мешалкой) и добавляют 350 мл Н₂O₂ (35%) частями при перемешивании в течение 2 дней. Перемешивание продолжают еще 4 дня при температуре около 20°С. Затем сырой продукт отжимают, промывают небольшим количеством ледяной воды, растворяют в достаточном количестве 0,5N серной кислоты и затем осаждают 35%-ной NaOH (pH 7-8). После хранения в течение ночи в холодильнике желтую кристаллическую массу отжимают, промывают небольшим количеством холодной воды, этанолом и, необязательно, эфиром и сушат в вакууме.

Выход (3 загрузки): 336,7 г (67,2% от теории).

2. Синтез динатровой соли цис-диаммонийдихлордигидроксоплатины (IV).

20 г (0,06 мол) цис-диаммонийдихлордигидроксоплатины (IV) растворяют в примерно 450 мл водного раствора гидроокиси натрия (содержит 4,8 г (0,12 мол) NaOH) при нагревании и после охлаждения до комнатной температуры хранят в течение ночи в холодильнике. Осажденный продукт реакции отжимают, промывают небольшим количеством холодной воды, этанолом и, возможно, эфиром и сушат в вакууме.

Выход 13,6 г (59,9% от теории).

3. Синтез кальциевой соли цис-диаммонийдихлордигидроксоплатины (IV).

Оксоплатин (9,3 г) суспендируют в 80 мл воды и после добавления эквимолярного количества (2,1 г) гидроокиси кальция перемешивают в течение 24 часов при комнатной температуре. Затем продукт реакции отжимают, промывают водой, этанолом и эфиром и сушат в вакууме.

Выход 7,7 г.

4. Синтез соединений платины (IV), содержащих алкильные или арильные остатки.

Транс- или цис-диаммонийдихлордигидроксоплатины (IV) (гидроксосоединения платины (IV)), полученные способом по изобретению, очень инертны, имеют такую нуклеофильность, что они могут реагировать со слабо электрофильными реагентами. Гидроксосоединения платины (IV) помещают в инертный растворитель (эфир) и непрерывно перемешивают. В частности, перемешивание можно проводить при помощи электрической мешалки на обычном лабораторном оборудовании. К перемешиваемому раствору добавляют избыток алкил- или арилангидридов, например фенилангидриды (бензойный ангидрид). Кроме этих ангидридов можно применять соответствующие изоцианаты и пирокарбонаты. Смесь перемешивают в течение примерно 12-48 часов. Если выбранное гидроксосоединение платины (IV) едва растворимо, смесь нагревают, например, переключая перемешивающее устройство при перемешивании на обогрев. Реакцию можно также ускорить, применяя сильнополярную реакционную среду. Осажденный продукт реакции после охлаждения можно отфильтровать. Далее, проводят обычные стадии очистки в зависимости от желательной степени чистоты.

Затем полученные алкильные или арильные производные гидроксосоединений платины (IV) могут быть испытаны на их ингибирующее опухоли действие на лабораторных животных. В присутствии аскорбатов можно превратить соединения платины (IV) в соединения платины (II) в течение нескольких дней. Соответственно, соединения по изобретению можно рассматривать как пролекарства соединений платины (II).

5. Применение цис-диаммонийдихлордигидроксоплатины (IV) и ее солей.

Опыты по ингибированию роста на различных клеточных линиях человека показывают различные активности цисплатина, цис-оксоплатина и оксалиплатина. Результаты, приведенные ниже, показывают, что цис-оксоплатин имеет активность, похожую на активность оксалиплатина, но более высокую, чем карбоплатин. В нижеследующей таблице показаны результаты, полученные с применением цисплатина, оксоплатина, карбоплатина и оксалиплатина (приведены величины IC₅₀ в мкг/мл, то есть величины концентрации, при которых 50% клеток выживает, н.о. = не определялось, рез. означает резистентны = не чувствительны или величину IC50 нельзя определить при концентрации до 40 мкг/мл, IC = концентрация ингибирования).

Таблица 1
Клеточная линия	Цисплатин	Цис-оксоплатин	Карбоплатин	Оксалиплатин
HOS остеосаркомы	н.о.	2,5	5	н.о.
SaOS остеосаркомы	н.о.	5	5	н.о.
РС3 простаты	рез.	7,5	10	н.о.
М607 меланомы	0,3	5	10	10
М518 меланомы	40	Рез.	рез.	рез.
Me128 меланомы	0,3	2,5	10	10
JVSO меланомы	40	10	рез.	рез.
Panc1 рак поджелудочной	1	40	20	5
ВхРС3 рак поджелудочной	0,6	2,5	10	10
MiaPaCa 2 рак поджелудочной	1,5	5	5	5
НСТ8 рак толстой кишки	5	40	рез.	рез.
НТ29 рак толстой кишки	0,3	20	20	20
НТС-15 рак толстой кишки	0,3	20	рез.	10
А498 почечные клетки	1	20	рез.	10
C320DM рак толстой кишки	0,3	2,5	10	0,15
Colo205 рак толстой кишки	10	Рез.	рез.	1
СС1227 рак толстой кишки	0,3	10	рез.	0,2
MCF-7 рак груди	0,2	5,5	рез.	рез.
T47D рак груди	0,3	2,5	н.о.	0,1

Таблица 2
Клеточная линия	IC50 мкг/мл
	Цис-оксоплатин	Натровая соль цис-оксоплатина
T47D рак груди	3	18
SK-OV3 рак яичника	15	22
U373 MG астроцитомы	15	18
ВхРС3 рак поджелудочной	13	12
SK-OV4 рак яичника	16,2	12,8
РС3 простаты	7,5	5,3
СаСо-2 толстой кишки	1,52	2,22
CRO2B карциноидные	3,0	10,1
НТ29 толстой кишки	13,5	4,55
Du145 простаты	19,0	27,0
SW480 толстой кишки	8,2	2,5
SIM саркомы	15,2	11,2

Активность зависит от клеточной линии. Na-соль является заметно более эффективной (примерно на 70%) для клеток НТ29 и SW480 и более эффективна для SK-OV4, РС3 и SIM (примерно на 30%) и менее эффективна для клеток СаСо-2, Du145 и CRO2B. Величины IC₅₀ для этих клеток составляют 10,5±6,4 мкг/мл для оксоплатина и 9,5±8 мкг/мл для натровой соли.

Следующие данные показывают зависимость ответа от дозы для цис-оксоплатина по сравнению с цис-оксоплатином Na для клеток РС3.

Концентрация (мкг/мл)	% выживаемости/оксоплатин	% выживаемости/Na-соль
40	15,8±2,7	0,6±0,5
20	56,7±6,3	33,2±3,0
10	87,4±11,8	77,7±2,4
5	105,2±10,8	109,3±9,1

Это типичные результаты для РСЗ, SK-OV4 и SIM. Na-соль более активна при больших концентрациях; при более низких концентрациях разница меньше. Предположительно, Na-соль цис-оксоплатина имеет несколько отличную структуру или другой механизм действия по сравнению с оксоплатином, то есть на 30-70% более активна или на 40-50% менее активна, чем цис-оксоплатин для конкретных клеточных линий. Более высокая активность Na-соли цис-оксоплатина проявляется при более высоких концентрациях (более 5 мкг/мл).

Эффект цис-оксоплатина на клеточных линиях у детей.

У детей прежде всего наблюдаются лейкозы, нейробластомы и саркома Юинга/периферические нейроэкстодермальные опухоли (семейство опухолей Юинга = EFT). Изучавшиеся линии опухолевых клеток включают три EFTs (EW-7, SIM и KAL) и также две линии клеток нейробластомы (NB: LAN1 и LAN5; нейробластома из Лос-Анджелеса = LAN) (см. Таблицу 3).

Таблица 3
Клеточная линия	Оксоплатин, IC 50 мкг/мл
EW-7 (EFT)	1,25
SIM (EFT)	1,4
KAL (EFT)	He испытывалась
LAN1 (NB)	17
LAN5 (NB)	3,5

Сравнение действия цис-оксоплатина и его Са-соли.

Действие Са-соли цис-оксоплатина и цис-оксоплатина сравнивали с применением 10 клеточных линий (см. Таблицу 4).

Таблица 4
Клеточная линия	Происхождение	Оксоплатин, IC50 мкг/мл	Са-соль оксоплатина, IC50 мкг/мл
SW480	толстая кишка	8,2	2,5
MDA-MB-435	грудь	16,5	12,0
ВТ-20	грудь	3,75	3,5
Colo205	толстая кишка	29,0	13,5
Du145	простаты	19,0	14,5
НТ29	толстая кишка	13,5	8,0
CRO2B	карциноидная	3,0	2,20
СаСо-2	толстая кишка	1,52	0,87
ВхРС3	поджелудочная	26,0	30,0
T47D	грудь	2,5	3,6

Средние величины IC ₅₀ (±SEM) оксоплатина для всех клеточных линий равны 12,3±3,2, для сравнения эти величины IC₅₀ Са-соли оксоплатина составляют 9,1±2,8.

Полученные результаты показывают, что очень сходные химически соединения платины, такие как цисплатин и цис-оксоплатин, оказывают различное действие на различные раковые клетки человека, а соли соединений платины оказывают такое действие на опухоли, которое отличается от действия оснований, из которых получены соли. В общем, основываясь не только на конкретных примерах, можно отметить, что способность солей цис-оксоплатина к связыванию ДНК, особенно натровой соли цис-оксоплатина, является неожиданной по сравнению с цис-оксоплатином. Причиной этого, например, может являться разная структура аддуктов ДНК, образовавшихся с основанием, с одной стороны, и с солью, с другой стороны. Далее, можно предположить, что соли цис-оксоплатина подвергаются другому процессу биопревращения, который отличается от процесса биопревращения соответствующих оснований. Эти неожиданные отличия имеют большое значение при применении оснований и солей в терапии опухолей. Другими важными причинами такого различного поведения оснований и солей являются, например, абсорбция, диффузия и распределение в тканях и в конкретных органах. Внутриклеточное поглощение и токсичность натровых солей цис-оксоплатина отличается от соответствующих характеристик основания; абсорбция и растворение, а также фармакогенетика солей цис-оксоплатина не сравнимы с этими же свойствами основания. Тип взаимодействия с ДНК, эффективность и действенность, а также терапевтическая активность солей цис-оксоплатина отличаются от этих свойств цис-оксоплатина. Это можно продемонстрировать, наряду с прочим, на химической структуре кальциевой соли цис-оксоплатина, одного из примеров солей двухвалентных катионов:

Как можно видеть из этой формулы, такие соли, как кальциевые, имеют строение, которое полностью отличается от строения соответствующего основания. Такое различие стереохимических свойств приводит к разному поведению в отношении взаимодействия с ДНК в клетках, особенно раковых клетках. В результате отличной структуры солей для достижения терапевтического эффекта достаточна меньшая доза. Далее, биопревращение может привести в организме к конверсии комплексов платины (IV) в комплексы платины (II), а комплексы платины (IV) и платины (II) оказывают разное действие на разные опухоли (см. Таблицу 1).

2. Цитотоксическая активность транс-оксоплатина (TRAXO).

Транс-оксоплатин испытывали на стенде с клеточными линиями, применяя две стадии и начальную концентрацию, равную 40 мкг/мл. Поскольку величины IC ₅₀ во многих случаях не достигались, указана выживаемость клеток при более высокой концентрации.

Таблица 5
Клеточная линия	% выживания при 40 мкг/мл TRAXO (если не указано 20 мкг/мл)
U87MG астроцитома	100
ASTRO астроцитома	82(20)/71
SW620 рак толстой кишки	43/51/97
MDA-MB 231 рак груди	70/103/106
G-292 остеосаркома	8,6/68
PANC-1 рак поджелудочной	100
CRO1A карциноидная	87/104/70
CRO2B карциноидная	24/57
MIAPaCa 2 рак поджелудочной	92/83
Fib3 фибробласты	91
К562 лейкоз	97
WI-38 фибробласты в легких эмбриона	21
COLO 205 рак толстой кишки	109
НТС-15 рак толстой кишки	100
T-47D рак груди	101
HL-60 лейкоз	0,5
HOS остеосаркома	4,3
ACHN рак почек	48
ВхРС3 рак поджелудочной	106

Как показывают опыты на 19 клеточных линиях, TRAXO имеет значительную активность в отношении клеточной линии рака толстой кишки (SW620), против двух линий клеток остеосаркомы (G-292, HOS), против линии клеток рака почек (ACHN), клеточной линии лейкоза (HL-60) и против клеточной линии фибробластов в легких эмбриона (WI-38). Клеточные линии, чувствительные к цис-оксоплатину, такие как T-47D и ВхРС3, не чувствительны к TRAXO. Соли транс-оксоплатина могут иметь разную терапевтическую активность и другую эффективность в отношении конкретных раковых клеток, клеточных линий и опухолей человека.

7. Противоопухолевая эффективность алкильных производных.

Этильные, пропильные, фенильные и нафтильные производные гидроксосоединения платины (IV) испытывали на крысиных опухолях, причем вышеуказанные производные вводили в организм путем инфузии, с одной стороны, и орально вместе с пищей, с другой стороны. Неожиданно оказалось, что оральное введение было особенно эффективным, так как указанные производные имеют низкий молекулярный вес, в основном, нейтральны, инертны в отношении их кинетики, стабильны к кислоте и в некоторой степени липофильны. Испытанные соединения обнаружили исключительную цитотоксичность и хорошую оральную противоопухолевую активность в моделях крыс. Противоопухолевая эффективность определялась путем определения веса опухоли. У крыс, не получивших лечение, опухоли весили в среднем 37 г. При введении агента путем инфузии (доза 5 мг/кг веса) опухоли в среднем весили 31 г. После орального введения средний вес опухоли составлял 24 г. Опыты неожиданно показали, что крысиные опухоли (карцинома Уокера) можно особенно эффективно лечить путем орального введения алкильных или арильных производных. Из-за флуктуаций между отдельными арильными или алкильными производными, измеренных в опытах по подавлению опухолей, нельзя говорить о значительных вариациях.