структурированные композиции на основе липидов и способы их применения, которые имеют свойства, улучшающие здоровье и питание

Формула изобретения

1. Липидная композиция, которая включает компонент, который является переэтерифицированным структурированным липидом, и компонент, который является фитостерином, при этом:

упомянутый компонент, который является структурированным липидом, представляет собой продукт реакции переэтерификации загрузки реагентов, при этом упомянутая загрузка реагентов, которая включает от ˜15 до ˜85 вес.%, от общего веса загрузки, среднецепочечного триглицерида, который содержит цепи жирных кислот длиной от С6 до С12, реагирует с количеством от ˜15 до ˜85 вес.%, от общего веса загрузки, длинноцепочечного съедобного жидкого масла, которое содержит цепи жирных кислот длиной по меньшей мере С16; и

упомянутый компонент, который является переэтерифицированным структурированным липидом, составляет от 80 до 98 вес.% липидной композиции, а упомянутый компонент, который является фитостериновым эфирным компонентом, составляет от 2 до 20 вес.% липидной композиции, в обоих случаях от общего веса липидной композиции.

2. Композиция по п.1, где упомянутый компонент, который является структурированным липидом, включает по меньшей мере 88 вес.%, возможно по меньшей мере 90 вес.% или по меньшей мере 92 вес.%, композиции, а упомянутый компонент, который является фитостериновым эфиром, включает до 12 вес.%, возможно до 10 вес.% или до 8 вес.%, композиции, в обоих случаях от общего веса композиции.

3. Композиция по п.1, где количество упомянутого среднецепочечного триглицерида составляет от ˜30 до ˜60 вес.%, возможно от ˜35 до ˜55 вес.%, загрузки переэтерификации, а количество съедобного жидкого масла составляет от ˜40 до ˜70 вес.%, возможно от ˜45 до ˜65 вес.%, загрузки.

4. Композиция по п.1, где упомянутый компонент, который является структурированным липидом, имеет вязкость по Брукфилду от ˜20 до ˜52 сП, вымеренную при 20°С с использованием шпинделя №4 при 50 об/мин, на вискозиметре Брукфилда.

5. Композиция по п.1, где упомянутый компонент, который является структурированным липидом, имеет температуру дымообразования по меньшей мере ˜195°С (по меньшей мере ˜383°F), вероятно по меньшей мере ˜205°С (по меньшей мере ˜400°F).

6. Композиция по п.1, где упомянутый компонент, который является фитостериновым эфиром, содержит не более чем ˜20 вес.%, от общего веса компонента, который является фитостериновым эфиром, фитостанола.

7. Композиция по п.1, где упомянутую липидную композицию назначают человеку в количестве от ˜0,4 г до ˜2 г упомянутой композиции на килограмм веса тела в день.

8. Композиция по п.1, где упомянутая липидная композиция является прозрачной жидкостью и остается прозрачной жидкостью по меньшей мере на протяжении приблизительно шести месяцев хранения при ˜21°С.

9. Композиция по п.1, где упомянутая липидная композиция имеет сенсорные свойства, которые существенно не отличаются, или существенно превосходят соответствующие сенсорные свойства масла канолы и/или оливкового масла.

10. Композиция по какому-либо из пп.1-9, где упомянутый среднецепочечный триглицерид выбирают из группы, которая включает каприловый триглицерид, каприновый триглицерид и их комбинации, при этом упомянутое съедобное жидкое масло выбирают из группы, которая включает соевое масло, кукурузное масло, хлопчатобумажное масло, масло канолы, оливковое масло, арахисовое масло, масло сафлора, подсолнечное масло, масло из зерновых растений и их комбинации.

11. Композиция для снижения атерогенного риска у людей, которая включает липидную композицию по п.1, при этом упомянутая липидная композиция при употреблении гиперхолестеринэмичным человеком снижает уровень LDL-холестерина упомянутого человека по меньшей мере на ˜10%, возможно по меньшей мере на ˜15%.

12. Композиция по п.11, где упомянутая липидная композиция включает от 4 до 20 вес.% фитостеринового эфирного компонента и снижает уровень общего холестерина упомянутого человека по меньшей мере на ˜8%, возможно по меньшей мере на ˜12%.

13. Композиция по п.11, где упомянутая липидная композиция включает от 2 до 12 вес.% фитостеринового эфирного компонента, без значительного снижения уровня HDL-холестерина упомянутого человека.

14. Композиция по п.11, где упомянутая липидная композиция снижает жировую массу упомянутого человека.

15. Композиция по какому-либо из пп.11-14, где упомянутый среднецепочечный триглицерид выбирают из группы, которая включает каприловый триглицерид, каприновый триглицерид и их комбинации, при этом упомянутое съедобное жидкое масло выбирают из группы, которая включает соевое масло, кукурузное масло, хлопчатобумажное масло, масло канолы, оливковое масло, арахисовое масло, масло сафлора, подсолнечное масло, масло из зерновых растений и их комбинации.

16. Способ изготовления липидной композиции по какому-либо из пп.1-15 для снижения атерогенного риска у людей, который включает следующие этапы:

выбирают среднецепочечный триглицерид, который имеет длину углеродной цепи от С6 до С12;

выбирают съедобное жидкое масло, которое имеет длину углеродной цепи от С16 до С22;

помещают загрузки реагентов в место реакции, при этом загрузка реагентов включает от ˜15 до ˜85 вес.% среднецепочечного триглицерида и от ˜15 до ˜85 вес.% упомянутого съедобного жидкого масла, от общего веса загрузки реагентов;

переэтерифицируют упомянутую загрузку реагентов с получением переэтерифицированного компонента, который является структурированным липидом; и

соединяют упомянутый переэтерифицированный компонент, который является структурированным липидом, с компонентом, который является фитостериновым эфиром, с получением липидной композиции, которая является пригодной для потребления человеком и снижает атерогенный риск для упомянутого человека, при этом упомянутое объединение является таковым, что упомянутая липидная композиция содержит от 80 до 98 вес.% компонента, который является структурированным липидом, и от 2 до 20 вес.% компонента, который является фитостериновым эфиром, от общего веса липидной композиции.

17. Способ применения липидной композиции по какому-либо из пп.1-15, который обеспечивает снижение атерогенного риска человека путем введения в количестве от 0,4 до 2 г упомянутой липидной композиции на килограмм веса тела упомянутого человека для улучшения здоровья и питания упомянутого человека, в том числе снижение жировой массы упомянутого человека.

18. Способ по п.17, где упомянутое введение осуществляют в количестве от ˜0,6 до ˜1 г упомянутой липидной композиции на килограмм веса тела упомянутого человека.

Описание изобретения к патенту

Перекрестная ссылка на связанную заявку

Эта заявка является частичным продолжением патентной заявки США №10/795,843, зарегистрированной 08.03.2004, которая включена в эту заявку в виде ссылки.

Предпосылки изобретения

Область изобретения

Изобретение вообще касается композиций структурированных липидов и фитостериновых эфиров. Такие композиции в особенности пригодны для применения в качестве компонентов, которые имеют свойства, улучшающие здоровье и питание. В частности, изобретение касается структурированных липидов для применения в качестве съедобных масел в комбинации с фитостериновыми эфирами во многих прикладных областях для улучшения здоровья и питания, например в продуктах потребления и/или применение живыми существами, в особенности людьми.

Родственные технологии

Композиции съедобных масел растительного происхождения издавна используют в выпечке, жаренье и обработке пищи. Съедобные масла обеспечивают вкусовые, питательные и антипригарающие свойства для любых видов жаренья, выпечки, заправки и других подобных видов применения. Съедобные масла этого общего типа включают жидкие масла, кулинарные жиры, маргарины, взбитые масляные продукты, маргарины в тубах, жиры для теста, масла, композиции в спреях, заправки для салатов и т.п. Съедобные масла также включают в композиции, применяемые людьми в продуктах, которые не обязательно являются основными продуктами питания. Некоторые из них могут быть предназначены для тонкого регулирования питания или процессов метаболизма. В этих областях используют традиционные съедобные масла, включая разнообразные продукты длинноцепочечного типа.

Публикации в области регулирования здоровья, питания и метаболизма разрешают сделать вывод о полезности фитостеринов в композициях на основе масел. В публикации в этой общей области, St-Onge, et al., "Consumption of a Functional Oil Rich in Phytosterols and Medium-Chain Triglyceride Oil Improves Plasma Lipid Profiles In Men," American Society for Nutritional Sciences, 0022-3166/03, (2003), Journal of Nutrition, Volume 133, стр.1815-1820, (2003) описано исследование по оценке эффектов комбинации среднецепочечного триглицеринового масла, фитостеринов и льняного масла на концентрации липидов в плазме и размер частичек LDL (липопротеинов низкой плотности). В другой статье описаны растительные стерины, или фитостерины: St-Onge, et al., "Phytosterols and Human Limpid Metabolism: Efficacy, Safety and Novel Foods," Lipids, Volume 38, No.4, стр.367-375, (апрель 2003). В этой статье описаны исследования эффективности растительных стеринов в снижении холестерина с целью увеличения использования фитостеринов для улучшения здоровья сердца. Съедобные масла на основе среднецепочечных триглицеридов (МСТ) описаны в этой области, например, в Seiden, патент США №5,288,512, Bertoli et al., патент США №5,395,629, Hidaka, патент США №5,503,855, Takeuchi, патентная публикация США №2002/0001660, и Heydinger and Nakhasi, "Medium Chain Triacylglycerols, Journal of Food Lipids, Volume 3, стр.251-257 (1996). Дополнительные статьи относительно МСТ включают, например St-Onge, et al., "Medium-Chain Triacylglycerides Increase Energy Expenditure и Decrease Adiposity in Overweight Men," Obesity Research, Volume 11, No.3, (март 2003), в которой показано, что верхняя жировая ткань тела уменьшается при применении функциональной смеси масла на основе среднецепочечного триглицерида, масла канолы, льняного масла, кокосового масла и неэтерифицированной станольно-стериновой смеси. В St-Onge et al., "Greater Rise in Fat Oxidation With Medium Chain Triglyceride Consumption Relative to Long Chain Triglyceride is Associated With Lower Initial Body Weight and Greater Loss of Subcutaneous Adipose Tissue," International Journal of Obesity, Volume 27, стр.95-102 (2003) исследуется эффект снижения веса тела при употреблении среднецепочечного триглицерида по сравнению с употреблением длинноцепочечного триглицерида. Эти ссылки, а также любая из публикаций и патентов, которые упоминаются здесь, являются включенными в эту заявку в виде ссылки.

Указанные публикации определяют эти среднецепочечные триглицеридные или среднецепочечные триацилглицеридные (МСТ) соединения как класс липидов, которые включают эфиры глицерина и жирных кислот. МСТ являются эфирами глицерина с среднецепочечными жирными кислотами, которые содержат в цепи 6-12 атомов углерода. Их источниками обычно являются лауриновые масла. Кокосовое и пальмовое масла содержат значительные количества цепей С8 (каприловый) и С10 (каприновый). Часто выделенные фракции С8- и С10-кислот также содержат небольшие количества С6- и С12-кислот. В целом, эфиры МСТ являются насыщенными. Соответственно, основные компоненты МСТ съедобных масел имеют цепи жирных кислот С8:0 и С10:0.

В публикациях Forbes Medi-Tech Inc также описаны композиции фитостерина. В Stewart et al., патент США №6,087,353, описаны композиции фитостерина, которые являются этерифицированными и после гидрогенизированными. Утверждается, что они пригодны для отдельного применения или для введения в пищевые продукты, напитки, лечебные средства, нутрицевтики и т.п. Другие ссылки, в которых описаны композиции фитостерина и их эффекты на холестерин, включают такие: Nguyen TT, Dale LC, von Bergmann К, Croghan IT, Cholesterol-lowering Effect of Stanol Ester in a US Population of Mildly Hypercholesterolemic Men and Women: a Randomized Controlled Trial, Mayo Clin Proc., 1999; Dec; 74 (12): 1198-206, где сравниваются эффекты маргариноподобных продуктов на основе станолового эфира, которые показывают снижение уровней холестерина у субъектов-людей. Hallikainen MA, Sarkkinen ES, Uusitupa MI, Plant Stanol Esters Affect Serum Cholesterol Concentrations of Hypercholesterolemic Men and Women in a Dose-dependent Manner, J Nutr., 2000 Apr; 130 (4): 767-76, прибавляли определенные дозы растительных станоловых эфиров к маргарину. Было отмеченное снижение общего холестерина и LDL-холестерина, который выравнивался при более высоких дозах.

St-Onge MP, Lamarche В, Mauger JF, Jones PJ, Consumption of a Functional Oil Rich in Phytosterols and Medium-chain Triglyceride Oil Improves Plasma Lipid Profiles in Men. J Nutr., 2003; Jun; 133 (6): 1815-20, оценивали эффекты комбинации МСТ масла, фитостерина и льняного масла на концентрацию липидов в плазме и размер частичек LDL.

В Zerawistowski et al., International Publication No. WO 01/91587 описана масляная композиция, которая включает коротко-, средне- и длинноцепочечные триглицериды, и ее применение для снижения веса. В Zawistowski et al. также описаны фитостерины, которые включают фитостанолы. В настоящее время считается, что эти фитосредства имеют способность снижать уровни холестерина в сыворотке при попадании в пищу разным видам млекопитающих, включая людей. Zawistowski et al. показывает, что взаимосвязь между холестерином и фитостерином является очевидной, частично благодаря сходству в соответствующих химических структурах холестерина и фитостерина. Механизм, изложенный в этих ссылках, состоит в том, что фитостерины вытесняют холестерин из мицелярной фазы со снижением его поглощения, или конкурируют с холестерином в процессе его поглощения. Этерификация триглицеридов в целом описана в Zawistowki et al., включая ссылки на переэтерификацию коротко-, средне- и длинноцепочечных триглицеридов для образования описанных остатков цепей.

Переэтерификация является известной реакцией триацилглицериновых структур, при которой отдельные структуры жирных кислот в тех положениях триглицерида, которые подвергаются переэтерификации, заменяются глицериновой группой. Иногда это называют рандомизацией, если группы жирных кислот с одного глицеринового компонента триацилглицерина заменяются группами жирных кислот глицеринового компонента другого триацилглицерина. Это приводит к образованию триацилглицериновых структур, которые имеют замененные группы жирных кислот, которые отличаются у разных глицериновых структурах. Публикации в этой области включают Pelloso et al., патент США №5,434,278, Doucet, патент США №5,908,655, Cherwin et al., патент США №6,124,486 и Liu et al., патент США №6,238,926.

Работы в области переэтерификации привели к получению, например, триглицеридных композиций, которые обеспечивают определенные характеристики плавления, которые могут представлять интерес в некоторых областях применения. В целом они упоминаются здесь как "структурированные липиды", чтобы подчеркнуть отличие между переэтерифицированными продуктами и другими продуктами, которые являются физическими смесями одних и тех же компонентов, но без их переэтерификации.

Поэтому до сих пор не уделялось внимание тому, что комбинация технологии переэтерификации, технологии МСТ и фитостериновой технологии могла бы быть с успехом примененная для решения задач усовершенствования композиций для улучшения здоровья, питания и метаболизма, которые имеют значительное содержание съедобного масла. В этом отношении особенно важной задачей, которую должны решить переэтерифицированные компоненты согласно изобретению, является создание композиции, которая имеет свойства, улучшающие здоровье, питание и метаболизм, при одновременном сохранении свойств, которые позволяют объединять и/или добавлять их в продукты для употребления людьми и/или лечения людей. В частности, было выявлено, что композиции согласно этому изобретению является по сути равноценной или лучшей заменой для обычных съедобных масел, которые используются при изготовлении и/или смешивании пищевых продуктов.

Краткое изложение изобретения

Изобретение касается продуктов, которые могут быть применены вместо или в комбинации с обычными съедобными масляными продуктами, такие как домашние масла или тропические масла. Эти продукты представляют собой композиции специально сконструированных съедобных масел в комбинации с фитостериновым эфирным компонентом. Эти продукты имеют в качестве основного компонента структурированный липид, который является продуктом переэтерификации триглицерида съедобного домашнего масла и среднецепочечного триглицерида. Эти структурированные липиды комбинируют с фитостериновыми эфирами с образованием так называемых полезных масляных композиций. По желанию эти композиции могут быть образованы теми же компонентами, которые обычно включают в композиции для любого специфического применения.

Композиции структурированного липида и фитостерина имеют хорошие показатели при применении в пищевых системах, в особенности в выпечке, тушении, жаренье и в качестве масляного компонента заправок, или другого продукта, который подлежит использованию и/или сохранению при комнатной температуре или холодильных температурах. Благодаря таким свойствам этих композиций, преимущества фитостеринов и среднецепочечных триацилглицеринов для здоровья, питания и положительного метаболизма проявляются в традиционных продуктах, которые, благодаря полезным составным этих компонентов, очевидно, получат более широкий круг потребителей.

Главным аспектом или задачей этого изобретения является получение композиций, которые объединяют структурированные липиды с фитостериновыми эфирами, пригодных для улучшения здоровья и питание людей.

Одним из аспектов или задач этого изобретения является получение среднецепочечных триглицеридов, модифицированных длинноцепочечными съедобными маслами, с целью улучшения полезных и/или питательных свойств продуктов, с которыми их комбинируют, вместе с другими фитостериновыми эфирами, в частности, в сравнении с композициями, которые включают смеси одних и тех же МСТ и длинноцепочечных компонентов, которые не были подвергнуты переэтерификации.

Другим аспектом или задачей этого изобретения является получение структурированных липидов, которые имеют содержание твердого жира, который является в сущности жидким при 10°С; такое содержание твердого жира является очень благоприятным для объединения с фитостериновыми эфирами с получением композиций, которые могут быть жидкими и прозрачными при комнатной температуре и более низких температурах.

Другим аспектом или задачей этого изобретения является создание способа проведения рандомизированной переэтерификации среднецепочечных съедобных масел с длинноцепочечными съедобными маслами и применение полученного продукта в композициях для улучшения здоровья и/или питание в форме, которая облегчает употребление людьми или другими млекопитающими для получения преимуществ этой композиции.

Другим аспектом или задачей этого изобретения является создание усовершенствованной композиции и способа, который объединяет преимущества МСТ-технологии и фитостериновой технологии со специфичными преимуществами переэтерификации для улучшения совместимости и стабильности при хранении композиций, которые показывают высокую пригодность для применения в пищевых продуктах и фармацевтических препаратах.

Другим аспектом или задачей этого изобретения является решение проблем ожирения благодаря улучшению поглощения липидов, в особенности людьми, которые имеют чрезмерный вес или ожирение, путем употребления композиций из структурированных липидов и фитостеринов.

Другим аспектом или задачей этого изобретения является получение липидных продуктов, которые обеспечивают снижение общего холестерина и LDL-холестерина в большей мере, чем это может быть достигнуто при использовании экстрачистого оливкового масла, признанного наиболее ценнным липидом для снижения холестерина.

Другим аспектом или задачей этого изобретения является получение липидных композиций, которые при применении вместо других съедобных масел и/или жиров являются средством решения проблем ожирения и дислипидэмии. Другие аспекты, задачи и преимущества изобретения будут понятны из следующего описания преобладающих вариантов осуществления изобретения, включая упомянутые и неупомянутые комбинации разных характеристик, описанных здесь.

Описание преобладающих вариантов осуществления

Детальные варианты осуществления изобретения описаны здесь, насколько это необходимо, тем не менее следует понимать, что описанные варианты осуществления являются лишь примерами изобретения, которые могут быть воплощены в разнообразных формах. Поэтому специфические подробности, описанные здесь, должны рассматриваться не как ограничивающие, а лишь как основа для формулы изобретения и как репрезентативная основа для объяснений специалистам в соответствующей области, как использовать это изобретение на практике любым возможным способом.

Изобретение касается структурированных липидов, полученных с среднецепочечных триглицеридов. Среднецепочечные триглицериды обычно вырабатывают серийным способом путем расщепления и очищения жирных кислот из кокосового или пальмового масла. Производство включает этерификацию с глицерином с образованием триглицерида, который имеет длину цепи жирной кислоты от С6 до С12. Эти известные съедобные масла обычно содержат 50-80 вес.% каприловых жирных кислот С8 и около 20-50 вес.% каприновых жирных кислот С10. Некоторые такие продукты могут содержать незначительные равные, обычно около 1-2 вес.%, одной или обеих капроновой С6 и лауриновой С12 жирных кислот.

Известные среднецепочечные триглицериды, или "МСТ", включают некоторые продукты NEOBEE®, такие как NEOBEE® М-5 (торговая марка и продукт Stepan Company), ALDO МСТ (торговая марка и продукт Lonza, Inc.), CAPTEX® 300 (торговая марка и продукт Abitec Corp.) и MIGLYOL® 812 (торговая марка и продукт Clionova, Inc.). В Traul et al., "Review of The Toxicologic Properties of Medium-Chain Triglyceride", Food and Chemical Toxicology, 38, стр.79-98 (2000) показано, что МСТ являются по сути нетоксичными в тестах на острую токсичность, которые проводятся на нескольких видах животных. В этой статье также показано, что МСТ практически не проявляют потенциального глазного или кожного раздражения, даже при продолжительном контакте с глазами или кожей. В статьи также показано, что МСТ не проявляют способности к индуцированию аллергических реакций. В соответствии с этой публикацией безопасность МСТ для потребления людьми была подтверждена на уровне 1 г/кг веса тела.

В другой публикации показано, что МСТ приводят к снижению отложения жира в сравнении с длинноцепочечными триглицеридами (LCT). Это указано в Ingale et al., "Dietary Energy Value of Medium-Chain Triglycerides", Journal of Food Science, Volume 64, No.6, стр.960-963 (1999). В выводах, сделанных в этой статье, показано, что, исходя из разности в использовании энергии, прирост тепла, связанный с метаболизмом МСТ, является приблизительно на 16% более высоким по сравнению с длинноцепочечными триглицеридами (LCT). С учетом этого, рассчитанная средняя величина полезной тепловой энергии для МСТ, которые используются в питании, имеет порядок 6,8 ккал/г. Это ниже, чем для типичных LCT (9,0 ккал/г). В соответствии с этой публикацией замена LCT на МСТ в качестве источника жира в питании показывает снижение веса и снижение отложения жира у лабораторных животных и людей. Считается, что это обусловленное более низкой плотностью полной энергии при исследовании эффективного использования энергии с МСТ.

Из этой информации можно сделать вывод, что среднецепочечные триглицериды имеют пищевые преимущества, по крайней мере, с точки зрения отложения жира. Также показано, что возможно применение среднецепочечных триглицеридов в качестве пищевых добавок для людей. Тем не менее, МСТ имеют относительно низкие значения температуры дымообразования, которое делает их менее чем удовлетворительными для применения в качестве пищевых добавок.

Переэтерификация этих МСТ согласно изобретению включает их загрузку в место переэтерификации или в реактор как части загрузки для образования структурированного липида. В общем, МСТ могут составлять около 15-75 вес.% от общего количества компонентов структурированного липида. Обычно МСТ составляют около 25-75 вес.% от загрузки структурированного липида. Как правило, количества реагентов переэтерификации, которые загружаются, точно отвечают соответствующим процентным весовым количествам в переэтерифицированном структурированном липиде. Преимущественно, количество МСТ составляет около 30-60 вес.%, наиболее преимущественно около 35-55 вес.%.

Также частью загрузки для образования структурированных липидов являются так называемые домашние масла. Домашние масла для переэтерификации согласно изобретению включают соевое масло, кукурузное масло, хлопчатобумажное масло, масло канолы, масло сафлора, подсолнечное масло, арахисовое масло, оливковое масло, масло из зерновых растений и масла, полученные по программе "Identity Preserved" (IP), то есть генетически немодифицированные, такие как генетически немодифицированное масло канолы и прочие. Какое бы съедобное масло не было выбрано, это должно быть жидкое масло. Проведение гидрогенизации обычно не является необходимым. Масла этих типов хорошо известны и являются так называемыми длинноцепочечными липидами. Длина цепей этих масел вообще составляет от С16 к С22, что в целом важно для этой технологии.

Загрузка такого домашнего масла в место переэтерификации или реактор может составлять от ˜15 до ˜85 вес.% от общей загрузки в реактор переэтерификации. Обычно масло составляет от ˜25 к ˜75 вес.% загрузки, и по сути такой же уровень длинноцепочечного компонента содержится в переэтерифицированном структурированном липиде. Преимущественно, это количество составляет от ˜40 к ˜70 вес.%, наиболее преимущественно от ˜45 до ˜65 вес.% от веса загрузки или переэтерифицированного структурированного липида.

Что касается домашних масел, которые имеют большую длину цепей, чем МСТ - реагент, преимущественно они представляют собой по сути ненасыщенные масла, такое как соевое, кукурузное, хлопчатобумажное и масло канолы, которые хорошо известны как жидкие масляные продукты. Определенные специфические масла также входят в преобладающие домашние масла. Такие масла включают генетически немодифицированное масло канолы и рафинированные, обесцвеченные и дезодорированные высокостабильные масла. Преобладающие масла также включают натуральное высокостабильное масло канолы, такое как NATREON (торговая марка, выпускается Dow Agro Sciences, Canbra Foods), что естественно имеет более высокое содержание мононенасыщенных жиров и олеиновой жирной кислоты и более низкое содержание линоленовой жирной кислоты. Это показанно в Sornyk et al., патент США №5,965,755 и Lanuza et al., патент США №6,169,190, которые включены в эту заявку в виде ссылки.

Химическая переэтерификация, которая применяется в получении структурированных липидов для композиций согласно изобретению, включает загрузку реагентов в реактор переэтерификации. Такие реакторы имеют средства для нагрева реагентов во время перемешивания и в условиях сниженного давления или вакуума. Реакция проводится в присутствия необходимого катализатора переэтерификации и обычно протекает очень быстро до завершения или практического завершения. Обычно переэтерификация представляет собой реакцию полной рандомизации, что соответствует степени переэтерификации 100% жирных ацильных цепей.

Катализаторы переэтерификации включают алкоксиды металлов, щелочные металлы, сплавы щелочных металлов и гидроксиды металлов. Алкоксиды включают алкоксиды щелочных металлов, такие как метоксид натрия, этоксид натрия, метоксид калия и этоксид калия. Щелочные металлы включают натрий. Сплавы щелочных металлов включают сплав натрия/калия, а гидроксиды металлов включают гидроксиды щелочных металлов, такие как гидроксид натрия и гидроксид калия.

По окончании переэтерификации с получением необходимого структурированного липида могут быть проведенные определенные этапы для изменения условий сравнительно с условиями реакции. Эти этапы могут включать инактивацию катализатора, снижение температуры, снижение вакуума, прекращение перемешивания, или любую комбинацию этих изменений. Средства для проведения этих изменений известные в химической технологии. Температуры реакции составляют от ˜80°С до ˜100°С (от ˜160°F до ˜212°F). Наиболее оптимальная температура для проведения переэтерификации в реакторе находится приблизительно внутри этого диапазона. Величины вакуума в реакторе составляют от ˜5 мбар до ˜100 мбар (от ˜4 мм рт.ст. до ˜75 мм рт.ст.). Преобладающий уровень находится в нижней части этого диапазона, или менее чем ˜40 мбар (˜30 мм рт.ст.), наиболее преимущественно 26,7 мбар (˜20 мм рт.ст.).

Время реакции составляет от ˜30 минут до ˜2 часов. Наиболее оптимальное время реакции составляет ˜45 минут. Время реакции может контролироваться, например, путем нейтрализации катализатора в установленное время. Нейтрализация катализатора, такого как метоксид натрия, может быть проведена с помощью 0,7 вес.% раствора лимонной кислоты с прочностью 42%.

Переэтерифицированный структурированный липид может быть определенным образом обработанный для удаления остаточного мыла и/или удаления всех цветных частичек, если это необходимо. Средства обработки включают ускоритель фильтрации и источника кремнезема, такие как TRISYL® S-615 (торговая марка, выпускается W.R.Grace & Co.), которые используются для рафинирования растительных масел. Устранение цвета может проводиться с помощью отбеливающей земли или подобного средства. Структурированный липид также обычно подвергают дезодорированию способами, общеизвестными в химической технологии.

При получении продуктов согласно изобретению переэтерифицированный структурированный липид объединяют с одним или более фитостериновыми эфирами для образования композиции, которое может быть использована непосредственно как съедобное масло, или объединяют с другими компонентами для изготовления желательного конечного продукта, что целиком понятно специалистам в соответствующей области. Например, может быть осуществленное объединение композиции с другими пищевыми компонентами в разных рецептурах для изготовления продуктов потребления и др.

Композиции за изобретением включают структурированный липид в количествах от ˜80 до ˜96 вес.% от общего веса продукта. Обычно структурированный липид присутствует в количестве от ˜92 до ˜95 вес.%. Фитостериновый компонент включают в количествах от ˜4 до ˜20 вес.% от общего веса композиции. Обычно фитостерин присутствует в количестве от ˜5 до ˜8 вес.%.

Относительно фитостеринов, которые служат основой для фитостериновых эфиров, которые составляют компонент композиции, смешиваемый с переэтерифицированным структурированным липидом согласно изобретению, специфические подробности о фитостеринах можно найти в патентах США №6,117,475, №6,139,897, №6,277,431, №6,562,395 и №6,713,118, международных публикациях № WO 01/13733, № WO 01/32029 и № WO 01/91587. Специфические подробности по эфирам фитостерина и микрочастицам фитостериновых эфиров можно найти в патенте США №6,087,353 и публикации патентной заявки США №2002/0048606. Как указано выше, любой из этих патентов и патентных публикаций, включенные в эту заявку в виде ссылки.

Термин "фитостерины" по отношению к компонентам, используемых в композициях за изобретением, включает фитостерины и/или фитостанолы или производные этих типов соединений. Признано, что присутствие стеринового компонента является полезным для снижения уровней холестерина и триглицеридов в сыворотке, а также улучшения общей эффективности питания. Считается, но без уверенности, что это можно объяснить сходством между их соответствующими химическими структурами. В соответствии с этим объяснением фитостерин вытесняет холестерин из мицелярной фазы, таким образом снижая поглощение холестерина и/или конкурируя с сайтами рецепторов и/или носителей в процессе поглощения холестерина.

Примеры соединений, которые относятся к понятию "фитостерин", включают ситостерин, кампестерин, стигмастерин, брасикастерин, демостерин, халиностерин, пориферастерин, койоанастерин и их естественные или синтезированные формы или производные, включая изомеры. Также в это понятие включены соединения, которые определяются термином "фитостанол", включая насыщенные или гидрогенизированные фитостерины и все их синтезированные формы и производные, включая изомеры. Понятно, что эти компоненты могут быть модифицированы, например, путем добавления боковых цепей, и такие продукты также относятся к понятию "фитостерин".

Фитостерины обычно получают из естественных источников, наиболее часто путем обработки растительных масел. Эти источники включают растительные масла, такое как кукурузное масло, масло из пшеничных зародышей, соевый экстракт, рисовый экстракт, рисовые отруби, масло канолы и кунжутное масло. Другие источники могут включать смолу талового масла или мыло, например, такое, которое является побочным продуктом лесной промышленности.

Эфиры фитостеринов могут быть получены из общедоступных источников, включая Forbes Medi-Tech, Inc. Примером является PHYTROL®, зарегистрированная торговая марка Forbes Medi-Tech, Inc. Композиции продаются под этим названием как средства для снижения холестерина. Типичная композиция состоит из растительных стеринов и станолов, содержащие 14,5% кампестерина, 2,4% кампостанола, 50,9% -ситостерина и 18,9% ситостанола. PHYTROL® представляет собой тонкодисперсный кристаллический воскоподобный порошок. Размер его частичек таков, что больше чем 80% частичек проходят сквозь 0,8-мм сито, а больше чем 98% частичек проходят сквозь 2,0-мм сито. Композиции фитостерина PHYTROL® включают от 38 до 79 вес.% (от общего веса безводной композиции) ситостерина 4-25 вес.% кампестерина, 6-18 вес.% ситостанола и 0-14 вес.% кампостанола. По меньшей мере 97 вес.% компонентов находятся в форме стеринэфира, и не более 3 вес.% представляют собой свободные стерины. Примером стеринэфира является эфир фито-S-стерина-10. Он имеет температуру размягчения от 15°С до 30°С и является по сути нерастворимым в воде при 25°С. Такой стериновый эфир является жидким при температуре выше 40°С.

Относительно компонента, который является фитостериновым эфиром, желательно, чтобы количество станольных структур, включенных в этот компонент, была минимизирована. Станольная структура связана с гидрогенизацией и связана с транс-изомерными структурами, которые имеют отрицательное влияние на здоровье. Кроме того, избыточная гидрогенизация ухудшает прозрачность композиций. Как правило, содержание станола или фитостанола в компонентах, которые являются фитостериновыми эфирами, согласно изобретению не превышает 20 вес.% от общего веса компонента, который является фитостериновым эфиром. Преимущественно, количество станольных или фитостанольных соединений в компоненте, который является фитостериновым эфиром, не превышает 15 вес.%.

В способах согласно изобретению по меньшей мере 80 вес.%, возможно, от 88 до 98 вес.%, обычно от 90 до 96 вес.% переэтерифицированного структурированного липида, описанного здесь, смешивают по меньшей мере с 20 вес.%, возможно, от 2 до 12 вес.%, обычно от ˜4 до ˜10% компонента, который является фитостериновым эфиром, в обоих случаях от общего веса композиции. В преобладающем варианте осуществления структурированный липид получают реакцией переэтерификации, описанной здесь, из приблизительно равных процентных весовых количеств среднецепочечного триглицерида и длинноцепочечного домашнего масла, которые в целом описаны здесь.

В соответствии со способами потом эти композиции добавляют в пищевые продукты, таким образом, чтобы соответствующие уровни фитостеринов доставлялись в организм для снижения поглощения общего холестерина. Кроме того, структура МСТ оказывает содействие метаболизму их масел в печеночной, а не в лимфатической системе, что приводит к снижению отложения жировой ткани для этих масляных продуктов по сравнению с продуктами, которые включают подобные количества других масел. Композиции также предназначены для повышения компонентов затраты энергии и окисление субстрата.

Этот структурированный липид, объединенный с эфирами фитостерина, как описано здесь, обеспечивает получение прекрасной композиции для съедобных масляных продуктов с высокой прозрачностью, хорошими пищевыми свойствами и низкими уровнями трансов-изомеров. Такая композиция представляет полезное для здоровья масло, которое может использоваться как салатное масло, масло для жаренья и выпечки, и одновременно служит добавкой для снижения уровней LDL-холестерина и минимизации отложения жировой ткани. Уровни LDL-холестерина снижаются до статистически значащей степени по сравнению с диетами, которые не включают такой композиции, и существенно снижаются по сравнению с маслами так называемого "золотого стандарта" по полезным характеристикам, такими как экстрачистое оливковое масло. Снижение LDL составляет по меньшей мере ˜10%, преимущественно по меньшей мере ˜15% и наиболее преимущественно по меньшей мере ˜20%. Снижение общего холестерина составляет по меньшей мере ˜8%, преимущественно по меньшей мере ˜12%, наиболее преимущественно по меньшей мере ˜15%. Это происходит без какого-либо статистически значащего снижения HDL-холестерина, при этом снижение HDL является меньшим, в смысле направленности, чем в случае экстрачистого оливкового масла. Масляная композиция согласно изобретению на основе структурированного липида с содержанием фитостеринового эфира, может применяться в благоприятных количествах при условии включения ее в контролируемую диету. Дозы применения должны составлять по меньшей мере ˜0,4 г масляной композиции на кг веса тела в день. Обычно уровень дозирования составляет не больше ˜2 г/кг/день. Типичный диапазон может составлять от ˜0,6 до ˜1 г этому маслу на кг веса тела в день. В образцовой контролируемой диете 40% общей энергии (приблизительно выраженной в калориях) поступает из жиров, 45% энергии из углеводов и 15% энергии из белковых источников. Из источников жиров 75% может быть предоставлено композицией структурированного липида. Таким образом, контролируемая диета, разработанная для снижения LDL-холестерина, поднимая HDL-холестерин и/или поднимая соотношение HDL/LDL-холестерина в этом примере, обеспечивает 28% энергии из композиции согласно изобретению на основе структурированного липида с содержанием фитостеринового эфира.

В зависимости от веса тела этот тип контролируемой диеты обеспечивает затрату энергии со скоростью от ˜2200 до ˜2500 калорий в день. Композиция согласно изобретению на основе структурированного липида с содержанием фитостеринового эфира имеет 8,4 килокалорий на грамм жира, тогда как обычное съедобное масло, такое как рафинированное, обесцвеченное и дезодорированное масло канолы, имеет 9 килокалорий на грамм жира.

Следующие Примеры приведены для иллюстрации концепций изобретения с определенной мерой специфичности. Измерения вязкости по Брукфилду, которые упоминаются в Примерах, проводили при 20°С с использованием шпинделя №4 при 50 об/мин на вискозиметре Брукфилда.

ПРИМЕР 1

Реакцию периодического типа проводили в реакторе со средствами подогрева, перемешиванием и снижением давления. Загрузка реагентов составляла 50 вес.% среднецепочечного триглицерида (NEOBEE® 1053) и 50 вес.% генетически немодифицированного масла канолы. Катализатор, метоксид натрия (с чистотой 95%) прибавили в количестве 0,15 вес.% от загрузки компонента, который является съедобным маслом. Реакцию переэтерификации проводили на протяжении 45 минут при температуре 90°С и давления 25,3 мбар (19 мм рт.ст.). В конце реакции провели нейтрализацию с помощью 0,7 вес.% раствора лимонной кислоты с прочностью 42 вес.%.

Полученный таким образом переэтерифицированный структурированный липид обработали 1 вес.% TRISYL® S-615 с 1 вес.% ускорителя фильтрации. Перемешивание продолжали на протяжении ˜8 минут при 90-94°С, тогда осуществили фильтрацию. Благодаря этому наблюдалось полное удаление остатка мыла. Структурированный липид также обесцветили с использованием 0,5% отбеливающей земли и 0,5% ускорителя фильтрации, для обеспечения полное удаления всех цветных частичек.

Дезодорирование проводили таким образом. Структурированный липид подвергли действию температуры около 230°С под вакуумом 2,66 мбар (2 мм рт.ст.). Вводили пар со скоростью 0,4% (объемн.) пара в час. Время дезодорирующей обработки составило 4 часа.

Структурированный липид проанализировали и обнаружили такие характеристики. Не было выявлено никаких следов мыла. Температура дымообразования составила 210°С (410°F). Вязкость измеряли на вискозиметре Брукфилда при 20°С с использованием шпинделя №4 при 50 об/мин. Значение вязкости для этого структурированного липида составило 22 сантипуаз. Такой же МСТ и генетически немодифицированное масло канолы в одних и тех же соотношениях смешали в виде физической смеси. Вязкость по Брукфилду при 20°С, с использованием шпинделя №4 при 50 об/мин, составила 40 сантипуаз, а температура дымообразования 154,4°С (31°F). Масло канолы до смешивания имело вязкость 68 сантипуаз при измерении тем же способом. Высокую стабильность продукта подтвердил показатель свободных жирных кислот 0,03. Пероксидное число (PV) составило 0,2. Индекс окислительной стойкости (OSI) составил 15,5 часов при 110°С. Содержание твердых жиров (SFC) при 10°С составило 0,32, что показывает, что структурированный липид был жидким при этой температуре. Показатель анизидина (AV) был достаточно низким, 0,85. Измерение цвета по PFX880 5¹/₄ составило 7.5Y/1.3R.

Пероксидное число (PV) определяют в соответствии с методом № Cd8-53 из публикации Official Methods and Recommended Practices of the AOCS, Fifth Edition (2002). Также в этой публикации содержится метод №Са5а-40 для определения свободных жирных кислот (FFA), метод № Cd18-90 для определения показателя анизидина (AV) и метод № Cd12b-92 для определения индекса окислительной стойкости (OSI).

Структурированный липид смешали с фитостериновым эфиром для образования композиции структурированного липида и фитостерина в соответствии с этим Примером, таким образом получив содержание стеринового эфира 6 вес.%. Приготовили разные пищевые продукты с использованием этой композиции структурированного липида и фитостерина, а также с использованием контрольных масляных источников. Провели сравнительный анализ и сделали сенсорные пробы. Результаты показывают отсутствие значительной разности между пищевыми продуктами, изготовленными со структурированным липидом в соответствии с этим Примером, и контрольным маслом. В некоторых случаях, показанных здесь, композиция структурированного липида в соответствии с этим Примером показала результаты, которые являются более благоприятными в статистически значащей мере.

В Табл.I приведенные показатели качества масел, полученные в результате анализов, которые представляют собой основные показатели качества рафинированного, обесцвеченного и дезодорированного (РЗД) масла канолы и композиции структурированного липида и фитостерина в соответствии с этим Примером.

ТАБЛИЦА I
Вид анализа	РЗД масло канолы	Масло на основе структурированного липида и стерина
OSI	6-7 ч.	16,0 ч.
Температура дымообразования	475°F	410°F
Цвет - (51/ 4)	7.0Y/0.7R	7.5Y/1.3R
FFA (%)	0,03	0,03
PV (мекв./кг)	0,8	0,8
Йодное число	100-115	59,1
Вязкость	68 спз	22 спз
% трансов-изомеров	0,36%	0,36%
Стериновый эфир	0,81%	6,00%
Кампестерин	269 мг/100 г	403,5 мг/100 г
Стигмастерин	14.3 мг/100 г	57,3 мг/100 г
-ситостерин	528.0 мг/100 г	2992,5 мг/100 г

Данные Табл.I предоставляют информацию, которая представляет определенный интерес. Индекс окислительной стойкости (OSI) для масла канолы составил лишь 6-7 часов, тогда как для композиции структурированного липида в соответствии с этим Примером этот показатель составил 16 часов. Высшее значение OSI означает, что масло на основе структурированного липида с содержимым фитостерина остается стабильной и прозрачной на протяжении длительного времени, чем контрольное масло. Это является признаком длительного срока сохранности, чем для контрольного масла. Тогда как температура дымообразования структурированного липида в соответствии с этим Примером является более низкой, чем для контрольного масла канолы, уровень 410°F (210°C) все же является приемлемым для жаренья на сковороде, но не для жаренья во фритюре. Кроме того, эта температура дымообразования является более высокой, чем температура дымообразования композиции в соответствии с этим Примером, но образованной путем смешивания без переэтерификации липидных компонентов.

Йодное число (IV) значительно ниже для масла на основе структурированного липида, чем для контрольного масла канолы. IV показывает степень гидрогенизации, хотя композиция масла на основе структурированного липида является жидкой при комнатной температуре. Это и прочие физические свойства показывают, что композиция на основе структурированного липида является жидкой, при отсутствии значительного осаждения, в том числе при сохранении в условиях холодильных температур на протяжении рациональных промежутков времени. Сопротивление кристаллизации длится значительно дольше, в условиях охлаждения, чем для контрольного масла канолы. Масло остается прозрачной жидкостью дольше, чем масла, которые имеют показатели качества на уровне масла канолы, Табл.I.

Данные вязкости показывают существенно более низкую вязкость для масла на основе структурированного липида с содержанием фитостерина, что означает, что это масло имеет меньший вес или плотность, чем масло канолы. Процент трансов-изомеров у масла на основе структурированного липида такой же, как для масла канолы. Уровень 0,36% в целом отвечает естественному уровню трансов-изомеров у масла канолы и означает, что масло на основе структурированного липида также имеет благоприятно низкое содержание трансов-изомеров. Значительно более высокое количество стеринового эфира в масле на основе структурированного липида согласовывается с количеством фитостерина, которое добавлялось в композицию. Количество 0,81% стеринового эфира в контрольном масле канолы отражает его естественный уровень в масле канолы.

В Табл.I также показанные уровни основных фитостеринов, присутствующих в масла на основе структурированного липида и в масле канолы. Было выявлено, что -ситостерин, содержание которого в 5 раз выше в масле на основе структурированного липида по сравнению с маслом канолы, является наиболее важным фитостерином для снижения LDL среди этих типов фитостериновых компонентов.

Исследование продолжительности хранения

Масляную композицию на основе структурированного липида с содержанием фитостерина в соответствии с этим Примером 1 подвергли исследованию относительно продолжительности сохранения при трех различных температурах. Полученные данные представленные в Табл.II. Хранение при температуре окружающей среды проводили в открытом помещении с обычными циклами отопления, вентиляции и кондиционирования воздуха, что обеспечивало средний уровень температуры 70°F (около 21°С). Температуры хранения 70°F (21°С) и 100°F (37,8°C) обеспечивали в закрытых помещениях с тщательным контролем температур. Температура хранения 100°F принята в качестве ускоренного испытания на продолжительность хранения.

ТАБЛИЦА II
Время хранения	Температура хранения	Пероксидное число (мекв./кг)	Свободные жирные кислоты (вес.%)	Показатель анизидина	OSL (час)
0	-	0,2	0,07	1,28	16
1 месяц	Окружающая	0,2	0,07	0,64	14,62
	70°F	0,2	0,07	0,67	13,68
	100°F	1,8	0,07	0,69	14,47
3 месяца	Окружающая	1,2	0,07	0,64	13,90
	70°F	1,2	0,07	0,66	14,03
	100°F	3,0	0,08	1,35	12,35
6 месяцев	Окружающая	3,6	0,07	0,87	12,37
	70°F	3,9	0,07	0,94	11,78
	100°F	4,3	0,08	1,85	11,23
7 месяцев	Окружающая	4,0	0,07	0,74	12,35
	70°F	4,4	0,07	1,05	12,65
	100°F	4,2	0,08	2,01	11,67

Масло на основе структурированного липида смешали с фитостерином PHYTROL® со соотношением 94% структурированного липида и 6% фитостерина. Данные Табл.II показывают очень стабильный весовой процент свободных жирных кислот (FFA). Такое низкое содержание свободных жирных кислот означает, что композиция на основе структурированного липида с содержанием фитостерина не разложилась через семь месяцев хранения, и триглицериды остались неповрежденными. Показатель анизидина (AV) ˜2 и ниже, или даже 3 и ниже, означает очень низкое -окисление или вторичное окисление. Если AV превышает 3, это является признаком начала окисления масла и образование свободных жирных кислот, которые в конце концов может привести к прогорканию.

Пероксидное число (PV) является альтернативным способом оценки продолжительности хранения. Бутылированные съедобные масла вообще считают такими, что имеют приемлемые свойства сохранения, если их PV (˜8 мекв./кг.

Индекс окислительной стойкости (OSI) показывает, что оптимальная величина 16 часов для свежего масла на основе структурированного липида, хотя в какой-то мере снизилась за семь месяцев, тем не менее осталась почти вдвое большей, чем для свежего масла канолы (см. Табл.I).

Сравнительные сенсорные пробы

Сравнительные сенсорные пробы для пищевых продуктов, которые включают композицию структурированного липида и фитостеринового эфира в соответствии с этим Примером 1, показывают пригодность таких композиций для применения в продуктах, которые благодаря этому будут успешно поставлять фитостерины (в больших количествах, как показано в Примере 15) без ухудшения сенсорных показателей пищевых продуктов.

Оценка кексов

Были приготовленные идентичные партии теста для выпечки кексов, за исключением масляного компонента. Масло на основе канолы NUTRA-CLEAR OIL®, которое выпускается Bunge Oils, было контрольным маслом в этом исследовании. В этом исследовании, а также во всех других исследованиях этого Примера, использовали так называемое "полезное масло". Эта композиция съедобного масла на основе структурированного липида с содержанием фитостеринового эфира в соответствии с этим Примером. При приготовлении соответствующего теста для бисквитного яичного кекса и выпечке кексов, субъективные и объективные результаты испытания не показали существенных отличий. В частности, для контрольного и полезного масла соответствующие величины удельного веса составили 0,909 и 0,918, вязкости теста - 10,260 и 10,180 сантипуаз, температуры теста - 68°F (20°C) в обоих случаях, однородность теста в обоих случаях одинаковая, объем кекса - 1235 см³ в обоих случаях, плотная структура в обоих случаях, с замечанием "влажный" относительно качества контрольного кекса и "вяжущий" относительно кекса на основе полезного масла. Содержание влаги для контрольного масла и полезного масла составило 41,21% и 41,86%, соответственно, а активность воды - 0,927 и 0,942 соответственно.

Образец каждого выпеченного кекса подвергли анализу в анализаторе структуры ТА-ХТ2 Texture Analyzer производства Stable Micro Systems, Goldalming, Surrey, England. Этот анализатор был установлен на такие параметры для анализа структуры бисквитного яичного кекса: дотестовая скорость 3,00 мм/с, тестовая скорость 1,70 мм/с, послетестовая скорость 1,70 мм/с, расстояние в тесте на разрыв 1,0%, расстояние 70%, усилие 100 г, время 3,00 с, количество отсчетов 5 и датчик погрузки 25 кг. Для контрольного кекса получили усилие 2919,57 г, а для кекса с полезным маслом - усилия 2741,46 г. Это есть усилие, необходимое для сжимания образца кекса со скоростью, заданной в анализаторе структуры. Эти объективно измеренные показатели структуры позволяют сделать вывод об отсутствии существенной разности между кексами, изготовленными с этими двумя разными типами масла.

Кроме того, эти бисквитные яичные кексы подвергли сенсорному анализу по треугольной методике, описанной в Sensory Evaluation Techniques, 3^rd Edition, CRC Press, стр.369 (1999). Группе из 40 лиц представили образцы бисквитных яичных кексов в слепом вкусовом тесте. Два из этих образцов представляли собой контрольный кекс и кекс с полезным маслом, а третий образец представлял собой другой кекс. Каждому из участников было предложено выбрать образец, который отличался от других двух за сенсорными показателями. 18 из 40 участников верно идентифицировали другой образец кекса, который показывает отсутствие существенной сенсорной разности между двумя кексами - кексом с контрольным маслом и кексом с полезным маслом - по результатам этого треугольного сенсорного анализа. Уровень достоверности этого теста составляет 95%.

Оценка булочек

Булочки готовили с использованием бытовых смесей для сдобы, что за рецептурой нуждаются в использования масла. В одном испытательном тесте использовали масло канолы NUTRA CLEAR OIL® в качестве контрольной, а композиция на основе структурированного липида с содержанием фитостерина в соответствии с этим Примером представляла так называемое полезное масло. Соответствующие тестовые величины для контрольного масла и полезного масла были такие: удельный вес - 0,943 и 0,952; вязкость - 22,040 сПз и 20,800 сПз; влажность - 35,70% и 39,80%; и активность воды 0,943 и 0,952 соответственно. В каждом случае температура теста составляла 68°F (20°C), и тесто было однородным. Каждое из изделий было оценено как таковое, что имеет хорошую структуру и влажность. Дополнительные сенсорные оценки показали отсутствие разности в аромате, хотя были отмечены отличия во внешнем виде, которые состояли в том, что контрольные булочки имели несколько заостренную вершину, тогда как булочки с полезным маслом были более округлыми. В общем, значительных отличий между этими двумя сдобными продуктами не было отмечено.

Оценка вафель

Вафли изготовляли с использованием смеси для блинов BUNGE®, которая содержала определенное количество масла, которое добавляется в тесто для изготовления бельгийских вафель. Как из контрольного масла, так и из полезного масла получили подобные вафли. Разности в вязкости или удельному весу теста не было выявлено. Дополнительные сенсорные оценки показали отсутствие разности в аромате или внешнем виде. В обоих случаях был получен красивый золотистый цвет и чистый аромат.

Оценка тушеных овощей

В этом исследовании оценивали контрольное масло на основе канолы и полезное масло, а также третье масло, а именно оливковое масло Bertolli, что поступает в розничную продажу. Овощи тушили в каждом масле и оценивали на аромат, цвет и функциональные показатели. Полезное масло несколько дымило и пенилось. Сенсорные оценки не показали разности во внешнем виде. Было отмечено, что овощи, тушеные в полезном масле, показали "более чистый" аромат, чем другие масла, то есть, подчеркнутый аромат самих овощей.

Оценка курятины, жаренной в кляре

Длинные кусочки куриного филе макали в кляр и жарили в контрольном масле канолы и в полезном масле. Как и при оценивании овощей, наблюдалось некоторое дымо- и пенообразование при жаренье в полезном масле. Дополнительные сенсорные оценки не показали разности во внешнем виде. Оценка вкусовых качеств показала, что в образцах, жаренных в контрольном масле, был выявлен несколько "рыбный" вкус, и этот вкус было признано неприятным. Цыплята, жаренные в полезном масле, имели очень приятный вкус и "чистый" аромат, и не проявляли остаточного вкуса.

Оценка заправки для салата

Уксусно-масляные заправки для салата готовили с использованием трех частей масла и одной части винного уксуса. В одном образце использовали масло канолы NUTRA-CLEAR OIL®, а в другом - полезную масляную композицию в соответствии с этим Примером. Из обоих масел получили заправки, очень подобные по внешнему виду. Сенсорные оценки показали, что заправка из масла канолы имеет более мягкий вкус, тогда как заправка из полезного масла имеет более выраженный уксусный аромат, который был оценен как положительный показатель аромата.

Треугольный сенсорный анализ проводили по сути тем самым способом, что и для бисквитного яичного кекса, как описан выше. 15 с 33 респондентов верно различили, какая салатная заправка была другой. Это показывает отсутствие разности в сенсорных показателях между двумя исследуемыми салатными заправками, с достоверностью 95%.

Оценка заправки для салата на основе оливкового масла

Салатные заправки изготовили способом, описанным для предшествующего исследования. В этом случае контрольным маслом было экстрачистое оливковое масло, а не масло канолы. Салатную заправку, сделанную из оливкового масла, подвергли сенсорному анализу в сравнении с заправкой, сделанной из полезного масла. 82% участников оценивания указали, что они отдают предпочтение салатной заправке из полезного масла по сравнению с заправкой из экстрачистого оливкового масла. Это есть статистически значимая разность с очень высоким уровнем достоверности.

Оценка жареных цыплят

Кусочки курятины жарили в экстрачистом оливковом масле или в полезном масле в соответствии с этим Примером. 39 участников пробовали жареных цыплят и оценивали их по шкале от 1 до 5 баллов, где 1 означает "очень нравится", а 5 означает "очень не нравится". Группа участников оценивала показатели жареных цыплят в восьми категориях. В шести категориях не было статистической разности между цыплятами, приготовленными в обоих маслах. В двух категориях - приемлемости аромата и остаточного вкуса - цыплята, жареные в полезном масле, получили статистическое преимущество над цыплятами, жареными в экстрачистом оливковом масле. Для каждой из восьми сенсорных категорий была проведена проверка по критерию Стьюдента, основанная на двойной выборке с одинаковой дисперсией. Данные представлены в Табл.III, в которой приведены величины, округленные до четырех значащих цифр.

ТАБЛИЦА III
Приемлемость общего внешнего вида
	"Полезное" масло	Оливковое масло
Средняя величина	2,344	2,423
Дисперсия	1,067	0,823
Наблюдение	39	39
Объединенная дисперсия	0,945
Гипотетическое среднее расхождение	0
Df	76
t Stat	-0,361
P (T<=t) - односторонняя проверка	0,360
t - критическая односторонняя проверка	1,665
P (T<=t) - двусторонняя проверка	0,719
t - критическая двусторонняя проверка	1,992
Приемлемость цвета
	"Полезное" масло	Оливковое масло
Средняя величина	2,208	2,397
Дисперсия	0,851	0,660
Наблюдение	39	39
Объединенная дисперсия	0,755

Гипотетическое среднее расхождение	0
Df	76
T Stat	-0,964
P (T<=t) - односторонняя проверка	0,169
t - критическая односторонняя проверка	1,665
P (T<=t) - двусторонняя проверка	0,338
t - критическая двусторонняя проверка	1,992
Приемлемость аромата
	"Полезное" масло	Оливковое масло
Средняя величина	2,357	2,808
Дисперсия	0,676	1,153
Наблюдение	37	39
Объединенная дисперсия	0,921
Гипотетическое среднее расхождение	0
Df	74
t Stat	-2,048
P (T<=t) - односторонняя проверка	0,022
t - критическая односторонняя проверка	1,666

P (T<=t) - двусторонняя проверка	0,044
t - критическая двусторонняя проверка	1,993
Приемлемость ощущения во рту/текстуры
	"Полезное" масло	Оливковое масло
Средняя величина	2,8	2,997
Дисперсия	1,223	1,369
Наблюдение	39	39
Объединенная дисперсия	1,296
Гипотетическое среднее расхождение	0
Df	76
t Stat	-0,766
P (T<=t) - односторонняя проверка	0,223
t - критическая односторонняя проверка	1,665
P (T<=t) - двусторонняя проверка	0,446
t - критическая двусторонняя проверка	1,992

Пищевая ценность
	"Полезное" масло	Оливковое масло
Средняя величина	2,770	3,113
Дисперсия	1,064	1,265
Наблюдение	37	38
Объединенная дисперсия	1,1658
Гипотетическое среднее расхождение	0
Df	73
t Stat	-1,375
P (T<=t) - односторонняя проверка	0,087
t - критическая односторонняя проверка	1,666
P (T<=t) - двусторонняя проверка	0,173
Кислотность/Горечь
	"Полезное" масло	Оливковое масло
Средняя величина	2,605	2,974
Дисперсия	0,570	0,868
Наблюдение	38	39
Объединенная дисперсия	0,721
Гипотетическое среднее расхождение	0
Df	75
t Stat	-1,907

P (T<=t) - односторонняя проверка	0,030
t - критическая односторонняя проверка	1,665
P (T<=t) - двусторонняя проверка	0,060
t - критическая двусторонняя проверка	1,992
Остаточный вкус
	"Полезное" масло	Оливковое масло
Средняя величина	2,378	2,974
Дисперсия	0,575	1,184
Наблюдение	37	39
Объединенная дисперсия	0,888
Гипотетическое среднее расхождение	0
Df	74
t Stat	-2,757
P (T<=t) - односторонняя проверка	0,004
t - критическая односторонняя проверка	1,666
P (T<=t) - двусторонняя проверка	0,007
t - критическая двусторонняя проверка	1,992

Общая приемлемость
	"Полезное" масло	Оливковое масло
Средняя величина	2,603	2,936
Дисперсия	0,923	1,318
Наблюдение	39	39
Объединенная дисперсия	1,121
Гипотетическое среднее расхождение	0
Df	76
t Stat	-1,390
P (T<=t) - односторонняя проверка	0,084
t - критическая односторонняя проверка	1,665
P (T<=t) - двусторонняя проверка	0,168
t - критическая двусторонняя проверка	1,991

ПРИМЕР 2

Структурированный липид получали по сути в соответствии с Примером 1. Загрузка составила 50% генетически немодифицированного масла канолы и 50% МСТ масла NEOBEE® 1053. Провели переэтерификацию и дезодорирование. Структурированный липид имел температуру дымообразования 207°С (405°F). Следующий анализ показал SFC 0,55 при 10°С, йодное число 49,5 и OSI 10,65 часов при 110°С. Пероксидное число составило менее, чем 0,1, а показатель свободных жирных кислот - 0,02. Составная С8 была выявлена в количестве 18,54%, а С10 в количестве 17,41%, при этом процент трансов-изомеров составлял 0,84%. Общее количество насыщенных углеводородов составило 41,93%. Из этого структурированного липида готовят "полезное" масло, описанное выше, путем смешивания его с фитостериновым эфиром, при этом структурированный липид составляет 92 вес.%, а фитостерин - 8 вес.% от общего веса полезного масла.

ПРИМЕР 3

Химическую переэтерификацию проводили по существу в соответствии с Примером 1. Загрузки составляли 65 вес.% негидрогенизированного кукурузного масла BUNGE® и 35 вес.% среднецепочечного триглицерида С8/С10. Полученный структурированный липид подвергли обработке для удаления мыла, а после подвергли дезодорированию. Измерение цвета составило 8.0Y/1.0R. Вязкость по Брукфилду составила 48 сантипуаз при 20°С с использованием шпинделя №4 при 50 об/мин. Температура дымообразования составила 214,5°С (418°F). Из этого структурированного липида готовят "полезное" масло, описанное выше, путем смешивания его с фитостериновым эфиром, при этом структурированный липид составляет 93 вес.%, а фитостерин - 7 вес.% от общего веса полезного масла.

ПРИМЕР 4

Соевое масло и среднецепочечные триглицериды загрузили в реактор при соотношении сои к МСТ 65:35. Полученный переэтерифицированный структурированный липид имел вязкость 44 сантипуаз при 20°С на вискозиметре Брукфилда с использованием шпинделя №4 при 50 об/мин. Температура дымообразования составила 213,3°С (416°F). Измерение цвета составило 13.0Y/2.0R. При изготовлении продукта в форме физической смеси с таким же соотношением компонентов, смесь имела вязкость по Брукфилду 56 сПз при 20°С с использованием шпинделя №4 при 50 об/мин, а температура дымообразования составляла 179°С (354°F). Соевое масло к смешиванию маленькая вязкость 60 сПз, вымеренную тем самым способом. Из этого структурированного липида изготовляют "полезное" масло, описанное выше, путем смешивания его с фитостериновым эфиром, при этом структурированный липид составляет 94 вес.%, а фитостериновый эфир - 6 вес.% от общего веса полезного масла.

ПРИМЕР 5

Переэтерификацию проводили с загрузкой 32,5 вес.% кукурузного масла, 32,5 вес.% хлопчатобумажного масла и 35 вес.%. МСТ. Кукурузное масло имело вязкость по Брукфилду 64 сПз, измеренную, как показано в Примере 1. После завершения операций по существу в соответствии с Примером 1, полученный таким образом структурированный липид имел вязкость по Брукфилду 48 сантипуаз при 20°С с использованием шпинделя №4 при 50 об/мин. Температура дымообразования составила 201°С (394°F). Измерение цвета составило 22.0Y/2.9R. При изготовлении продукта в форме физической смеси с таким же соотношением компонентов, смесь имела вязкость по Брукфилду 56 сПз и температуру дымообразования 176,7°С (350°F), вымеренные тем же способом. Из этого структурированного липида готовят "полезное" масло, описанное выше, путем смешивания его с фитостериновым эфиром, при этом структурированный липид составляет 93 вес.%, а фитостериновый эфир - 7 вес.% от общего веса полезного масла.

ПРИМЕР 6

Кукурузное масло BUNGE® (65 вес.%) и 35 вес.% МСТ с содержанием 70% С10 подвергли рандомизирующей реакции переэтерификации по существу в соответствии с Примером 1. Полученный структурированный липид имел вязкость по Брукфилду 48 сПз при 20°С с использованием шпинделя №4 при 50 об/мин. Температура дымообразования составила 199°С (390°F). Измерение цвета составило 9.0Y/1.5R. Из этого структурированного липида готовят "полезное" масло, описанное выше, путем смешивания его с фитостериновым эфиром, при этом структурированный липид составляет 92 вес.%, а фитостериновый эфир - 8 вес.% от общего веса полезного масла.

ПРИМЕР 7

Загрузку для реакции переэтерификации по существу в соответствии с Примером 1 осуществляли таким образом: соевое масло - 40 вес.%, хлопчатобумажное масло - 25 вес.% и МСТ - 35 вес.%. Полученный структурированный липид имел вязкость по Брукфилду 48 сПз при 20°С с использованием шпинделя №4 при 50 об/мин. Температура дымообразования составила 198°С (388°F). Измерение цвета составило 22.0Y/3.3R. Физическая смесь, изготовленная из одних и тех же компонентов с таким же соотношением, имела вязкость по Брукфилду в одних и тех же условиях 56 сПз и температуру дымообразования 172°С (342°F). Из этого структурированного липида готовят "полезное" масло, описанное выше, путем смешивания его с фитостериновым эфиром, при этом структурированный липид составляет 94 вес.%, а фитостериновый эфир - 6 вес.% от общего веса полезного масла.

ПРИМЕР 8

Загрузку для реакции переэтерификации по существу в соответствии с Примером 1 осуществляли таким образом: соевое масло - 60 вес.%, хлопчатобумажное масло - 25 вес.% и МСТ - 15 вес.%. Полученный структурированный липид имел вязкость по Брукфилду 40 сантипуаз при 20°С с использованием шпинделя №4 при 50 об/мин. Температура дымообразования составила 203,3°С (398°F). Измерение цвета составило 22.Y/3.5R. Физическая смесь, приготовленная из одних и тех же компонентов с таким же соотношением, имела вязкость по Брукфилду 48 сПз и температуру дымообразования 183°С (362°F), измеренные в соответствии с этим Примером. Из этого структурированного липида готовят "полезное" масло, описанное выше, путем смешивания его с фитостериновым эфиром, при этом структурированный липид составляет 95 вес.%, а фитостерин - 5 вес.% от общего веса полезного масла.

ПРИМЕР 9

Соевое масло и среднецепочечные триглицериды загрузили в реактор при соотношении сои к МСТ 75:25. Полученный переэтерифицированный структурированный липид имел вязкость 44 сантипуаз при 20°С на вискозиметре Брукфилда с использованием шпинделя №4 при 50 об/мин. Измерение цвета составило 4.5Y/1.9R. Температура дымообразования составила 210°С (410°F). Физическая смесь, приготовленная из одних и тех же компонентов с таким же самым соотношением, имела вязкость по Брукфилду 56 сПз и температуру дымообразования 175,5°С (348°F), измеренные в соответствии с этим Примером. Из этого структурированного липида готовят "полезное" масло, описанное выше, путем смешивания его с фитостериновым эфиром, при этом структурированный липид составляет 92 вес.%, а фитостерин - 8 вес.% от общего веса полезного масла.

ПРИМЕР 10

Масло канолы (генетически немодифицированное масло Natreon) и МСТ загрузили в реактор при соотношении масла к МСТ 60:40. Полученный переэтерифицированный структурированный липид имел вязкость 44 сантипуаз при 20°С на вискозиметре Брукфилда с использованием шпинделя №4 при 50 об/мин. Температура дымообразования составила 197,8°С (388°F). Физическая смесь, приготовленная из одних и тех же компонентов с таким же соотношением, имела вязкость по Брукфилду 48 сПз и температуру дымообразования 187,8°C (370°F), измеренные в соответствии с этим Примером. Из этого структурированного липида готовят "полезное" масло, описанное выше, путем смешивания его с фитостериновым эфиром, при этом структурированный липид составляет 92 вес.%, а компоненты фитостерина - 8 вес.% от общего веса полезного масла.

ПРИМЕР 11

Переэтерификацию проводили с загрузкой 70 вес.% масла канолы (масло Natreon) и 30 вес.% МСТ. После завершения операций по существу в соответствии с Примером 1, полученный таким образом структурированный липид имел вязкость по Брукфилду 48 сантипуаз при 20°С с использованием шпинделя №4 при 50 об/мин. Температура дымообразования составила 202°С (396°F). Физическая смесь, изготовленная из одних и тех же компонентов с таким же соотношением, имела вязкость по Брукфилду 52 сПз и температуру дымообразования 182,2°С (360°F), измеренные в соответствии с этим Примером. Из этого структурированного липида изготовляют "полезное" масло, описанное выше, путем смешивания его с фитостериновым эфиром, при этом структурированный липид составляет 92 вес.%, а фитостерин - 8 вес.% от общего веса полезного масла.

ПРИМЕР 12

Кукурузное масло BUNGE® (70 вес.%) и 30 вес.% МСТ подвергли рандомизирующей реакции переэтерификации по существу в соответствии с Примером 1. Полученный структурированный липид имел вязкость по Брукфилду 48 сПз при 20°С с использованием шпинделя №4 при 50 об/мин. Температура дымообразования составила 214,4°С (418°F). Физическая смесь, изготовленная из одних и тех же компонентов с таким же соотношением, имела вязкость по Брукфилду 48 сПз и температуру дымообразования 180°С (356°F), измеренные в соответствии с этим Примером. Из этого структурированного липида готовят "полезное" масло, описанное выше, путем смешивания его с фитостериновым эфиром, при этом структурированный липид составляет 92 вес.%, а фитостериновый эфир - 8 вес.% от общего веса полезного масла.

ПРИМЕР 13

Загрузку для реакции переэтерификации по существу в соответствии с Примером 1 осуществляли таким образом: масло канолы - 60 вес.% и МСТ - 40 вес.%. Полученный структурированный липид имел вязкость по Брукфилду 40 сантипуаз при 20°С с использованием шпинделя №4 при 50 об/мин. Температура дымообразования составила 194,4°С (382°F). Физическая смесь, изготовленная из одних и тех же компонентов с таким же соотношением, имела вязкость по Брукфилду 44 сПз и температуру дымообразования 175,5°С (348°F). Масло канолы, до или реакции, имело вязкость 64 сПз, измеренную таким же способом. Из этого структурированного липида готовят "полезное" масло, описанное выше, путем смешивания его с фитостериновым эфиром, при этом структурированный липид составляет 92 вес.%, а фитостериновый эфир - 8 вес.% от общего веса полезного масла.

ПРИМЕР 14

Загрузку для реакции переэтерификации по существу в соответствии с Примером 1 осуществляли таким образом: масло канолы - 70 вес.% и МСТ -30 вес.% Полученный структурированный липид имел вязкость по Брукфилду 40 сантипуаз при 20°С с использованием шпинделя №4 при 50 об/мин. Температура дымообразования составила 212,2°С (414°F). Физическая смесь, изготовленная из одних и тех же компонентов с таким же соотношением, в результате анализа в соответствии с этим Примером, имела вязкость по Брукфилду 48 сПз и температуру дымообразования 180°С (356°F). Из этого структурированного липида готовят "полезное" масло, описанное выше, путем смешивания его с фитостериновым эфиром, при этом структурированный липид составляет 93 вес.%, а фитостерин - 7 вес.% от общего веса полезного масла.

ПРИМЕР 15

Композицию на основе структурированного липида с содержанием фитостерина в соответствии с Примером 1 оценивали в разнообразных блюдах. Ниже показаны уровни фитостеринов, при которых может быть снижено поглощение холестерина благодаря использованию этой композиции в сравнении со съедобным маслом, которое серийно выпускается. В St-Onge et al., "Phytosterols and Human Lipid Metabolism: Efficacy, Safety and Novel Foods," Lipids, Volume 38, No. 4 (2003), показано, что поглощение 150 и 300 мг фитостеринов, включенных в съедобное масло, которое не содержит стерина, может снизить поглощение общего холестерина на 12,1% и 27,9% соответственно. Рекомендованная ежедневная норма потребления овощей в соответствии с 21 C.F.R. 101.12 составляет ПО г овощей. Если прибавить компонент, который является фитостериновым эфиром, в рафинированное, обесцвеченное и дезодорированное масло канолы (контрольное масло) и использовать его для жаренья овощей, обнаруживается, что на 110 г овощей приходится 90 мг фитостеринового компонента. Если вместо масла канолы использовать композицию на основе структурированного липида с содержанием фитостерина в соответствии с этим Примером, обнаруживается, что на 110 г овощей приходится 410 мг фитостеринового компонента. Это показывает улучшение доставки фитостерина более, чем в 4,5 раз.

Относительно курятины, в соответствии с документом 21 C.F.R. 101.12, ее рекомендованное количество составляет 55 г. Если 55 г курятины пожарили в контрольном масле канолы, в курятине было выявлено 30 мг фитостеринового компонента, тогда как при использовании масла на основе структурированного липида с фитостериновым эфиром, в курятине или на ее поверхности было выявлено 200 мг фитостеринового компонента. Курятина, пожаренная в масла на основе структурированного липида, содержала в 6,6 раз больше фитостерина, чем при использовании контрольного масла.

Ежедневное рекомендованное количество сдобы за 21 C.F.R. 101.12 составляет 55 г. Если пирожки с черникой испекли с контрольным маслом канолы в качестве масляного компонента теста, в выпеченной сдобе было выявлено 30 мг фитостеринового компонента. При использовании масла на основе структурированного липида с фитостериновым эфиром, в 55 г сдобы было выявлено 160 мг фитостеринового компонента. Масляная композиция на основе структурированного липида обеспечила доставку в 5,3 раз больше стерина, чем контрольное масло при его использовании для приготовления теста.

Рекомендованное 21 C.F.R. 101.12 количество для кексов составляет 80 г. При выпечке кекса из бисквитного яичного теста, которое включало контрольное масло канолы, количество стеринового эфира составило 50 мг на 80 г яичного кекса. При использовании в тесте масла на основе структурированного липида с фитостериновым эфиром, в 80 г яичного кекса было выявлено 300 мг стериновых эфиров. Это означает шестикратное повышение доставки стериновых эфиров при применении структурированного липида.

Ежедневное рекомендованное количество вафель в соответствии с 21 C.F.R. 101.12 составляет 85 г. При использовании контрольного масла канолы в тесте для вафель, количество стериновых эфиров, обнаруженное в вафлях, составило 10 мг на 85 г вафель. При использовании в тесте масла на основе структурированного липида с фитостериновым эфиром вместо контрольного масла, в вафлях было обнаружено 70 мг стериновых эфиров на 85 г выпеченных вафель. Это означает семикратное повышение доставки стерина за счет применения композиции на основе структурированного липида с содержанием фитостерина в соответствии с этим Примером.

ПРИМЕР 16

Было проведенное клиническое исследование для оценки эффектов некоторых съедобных масел на уровни липидов или холестерина в плазме, контроль веса, телосложение и затрату энергии у людей с избыточным весом и гиперхолестеринэмией. Одно из масел представляло собой композицию на основе структурированного липида с содержанием фитостерина, которая содержала 93,8 вес.% структурированного липида, полученного в соответствии с Примером 1, 6,0 вес.% стериновых эфиров и 0,2 вес.% полиглицеринового эфира (PGE). Композицию получали путем введения стериновых эфиров и PGE в жидкое состояние в структурированный липид в смесительном реакторе, пока стериновый эфир и PGE не растворились полностью. Смешивание продолжали (при нагревании, если необходимо) до получения прозрачной жидкости, которая представляет собой композицию на основе структурированного липида с содержанием фитостерина в соответствии с этим Примером 16. Другим съедобным маслом было экстрачистое оливковое масло.

Субъекты для исследования были выбраны из здоровых людей с избыточным весом (индекс веса тела от 25 до 33 кг/м ²), слабо и умеренно активных, гиперхолестеринэмичных, возрастом от 18 до 45 лет. Каждый субъект был мужского пола, некурящий и не употребляющий регулярно алкоголь. Субъектов исключали, если они имели в анамнезе сердечно-сосудистое заболевание, желудочно-кишечные, печеночные, почечные или эндокринные нарушения, или если они принимали любые липидо-снижающие или противогипертонические препараты. В исследования были вовлечены лишь те лица, которые принимали стабильные дозы других препаратов. Кроме того, субъекты с особыми вкусовыми антипатиями или аллергией на любой из обычных пищевых продуктов, включенных в меню, также исключались.

Протокол диеты

Исследование представляло собой рандомизированный, "односторонне" слепой, перекрестный тест, который состоял из двух независимых этапов на протяжении шести недель каждый и промежуточного периода отмывания с 4-8 недель. Экспериментальные диеты состояли из приготовленных твердых блюд североамериканской кухни, точно взвешенных, и были основаны на меню трехдневного цикла. Диеты были разработаны в виде трех изоэнергетических приемов пищи в день и обеспечивали 45% энергии в виде углеводов, 15% в виде белков и 40% в виде жиров, из которых 75% доставлялось в форме обработанного жира. Остаток 25% общего жира содержался в пищевых продуктах базовой диеты, одинаковых для обеих диет. Обработанный жир, то есть композицию на основе структурированного липида с содержанием фитостерина (далее "тестовый липид") или экстрачистое оливковое масло, непосредственно включали в блюда во время приготовления пищи, чтобы осуществить слепой опыт. Тестовый липид содержал близко 1,3 г/1000 ккал неэтерифицированных фитостеринов. Разность в содержании жирных кислот в обоих маслах учитывали при установлении энергоемкости пищи. Разный энергетический вклад среднецепочечного триглицерида и длинноцепочечного триглицерида, 34 и 38 кдж/г, соответственно, принимали во внимание во время расчета потребления энергии; таким образом, диеты на основе тестового липида и экстрачистого оливкового масла были изоэнергетическими. Потребление каждого жирового компонента равномерно распределялось между тремя приемами пищи. Содержание обезжиренных и нестериновых составных был одинаковым в обеих диетах.

Для обеспечения целевой энергосбалансованной диеты потребления питательных веществ было приспособлено к индивидуальным энергетическим потребностям субъектов с помощью уравнения Миффлина, с умножением на коэффициент активности 1,7 для компенсации энергетических потребностей активного взрослого человека. На протяжении первой недели этапа 1 потребление энергии было перерегулировано для исправления энергетического баланса. Тогда потребление энергии было зафиксировано и было одинаковой на протяжении обоих этапов исследования. Вес тела измеряли ежедневно перед завтраком или ужином. Между приемами пищи не разрешалось употреблять дополнительной пищи, за исключением декофеинизированных, низкоэнергетических газированных напитков и травяных чаев, которые выдавались кухней. Одну чашку черного кофе в день разрешалось выпить на завтрак. Величины диетически рекомендованного потребления (DRI) для всех витаминов, минералов, волокон, углеводных компонентов и незаменимых жирных кислот были соблюдены. Содержание питательных веществ в диетах был определен с помощью компьютерной программы диетического анализа Food Processor (ESHA Research, Salem, OR). Для определения непосредственно эффектов обработанного масла, а не потери веса, на разные параметры, которые измерялись, был выбран протокол поддержания постоянного веса. Состав диеты (относительный состав по калориям) включал 30% экстрачистого оливкового масла или тестового липида, плюс 45% углеводов, 40% жиров, 2% насыщенных, 7% мононенасыщенных, 1% полиненасыщенных, и 15% белков. Субъекты были предупреждены, чтобы они возвращали всю недоеденную пищу в клинику, для того чтобы можно было в плановом порядке оценивать выполнение протокола диеты. Хотя затрата энергии за счет физической активности не измерялась непосредственно, от субъектов требовалось поддержание постоянного уровня физической активности на протяжении каждого из этапов эксперимента.

Тесты и анализы

Образцы крови натощак, в пробирки для плазмы EDTA 2×10 мл и Vacutainer для сыворотки 1×5 мл, собирали на 1, 2, 41 и 42 день каждого экспериментального этапа. После образцы крови центрифугировали при 1500 об/мин на протяжении 20-25 минут, после чего плазму, сыворотку и красные кровяные клетки сразу разделять на аликвоты и сохраняли при -80°С для следующего анализа. Уровни ТС, LDL, HDL и TG определяли в лаборатории в двух экземплярах.

Аликвоты липидов плазмы анализировали на общий холестерин (ТС), HDL-холестерин (HDL) и триглицериды (TG), которые измерялись с использованием стандартных реагентов и автоанализатора VP Autoanalyzer (Abbott Laboratories, North Chicago, IL). Ферментный колориметрический тест (Ферментный комплект - Roche Diagnostics) с холестерин-эстеразой и холестерин-оксидазой в качестве ферментов использовали для определения ТС и TG. Определение HDL проводили путем осаждения апо-в-субфракции плазмы сульфатом декстрина и хлоридом магния с последующим ультрацентрифугированием. Субфракцию LDL-холестерина (LDL) определяли опосредствованно с использованием уровнения Фридевальда (Friedewald 1972): LDL=ТС-(HDL+TG/5).

Субъекты проходили ЯМР-сканирование один раз в неделю 1 и один раз в неделю 6 каждого экспериментального этапа, то есть всего четыре раза. ЯМР-прибор представлял собой сканер Siemens 1.5 Tesla Magnetom VISION. Каждый субъект находился лежа на животе в магнитном поле с поднятыми над головой руками, для того чтобы ограничить искажение изображения за счет дыхательного движения грудной клетки. Субъекты проходили полное сканирование тела от пальцев рук к пальцам ног. Сканирование включало две части: верхнюю и нижнюю часть тела, и продолжительно в средних 30-45 минут. Серии из 40-47 Т1-нагруженных спиновых эхограмм, шириной 10 мм, снимались каждые 350 мм. Ориентиры для предшествующих изображений центрировали в поясничных позвонках L4-L5 и головках бедра и плеча, чтобы различить верхнюю, абдоминальную и нижнюю секции тела. Измеряли изменения в объеме общей, подкожной, висцеральной и внутримышечной жировой ткани разных участков тела, а также безжировую компоненту массы тела, мышечную и костную массу. Данные ЯМР компоновали с использованием программного обеспечения Slice-O-Matic (TomoVision). Общее и участковое распределение подкожной, висцеральной и внутримышечной жировой ткани, а также абдоминального жира определяли путем расчета общей площади в пикселях, а после объема для конкретной ткани, исходя из разности в серой интенсивности изображения. Участковое определение абдоминального жира осуществляли путем интеграции всех осевых срезов ЯМР, снятых между головками бедер и верхней точкой печени/нижней точкой легких. Коэффициент 0,92 г/см³ использовали для преобразования объема жировой ткани в массовые величины. Затрату энергии (ЕЕ) измеряли с помощью метаболического монитора (Deltatrac, Sensor Medics, Anaheim, CA) в первую и шестую для субъектов неделю исследования. Метаболический монитор калибровали ежедневно с использованием газа, который содержал 95% О₂ и 5% СО ₂ при атмосферном давлении. Газы на выдохе анализировали в сравнении с атмосферным воздухом. Субъекты должны были пройти 12-часовой ночной период голодания перед каждым периодом измерения. После измеряли ЕЕ при CNRU 30 минут перед употреблением стандартного завтрака. После этого первичного периода покоя оценивали RMR с использованием опосредованной калориметрии на основе методики вентиляционного колпака. Субъекты должны были съесть завтрак за 30 минут, после чего измерения ЕЕ возобновлялись на 5,5 часов. ЕЕ измеряли без перерыва после завтрака.

Для статистического анализа данных вообще использовали среднюю величину (стандартную ошибку средней величины. Данные относительно уровней липидов в крови и ЕЕ/окисление субстрата для каждого этапа (с экстрачистым оливковым маслом и тестовым липидом) анализировали с использованием парного критерия Стьюдента для определения значимых изменений сравнительно с базисной линией. Данные относительно уровней липидов в крови и ЕЕ/окисление субстрата анализировали с использованием парного критерия Стьюдента для выявления значимых изменений между двумя диетами (с экстрачистым оливковым маслом и тестовым липидом) от базисной линии к конечной точке. Абсолютные величины разности между данными базисной линии и конечной точки для соответствующих данных уровней липидов в крови и ЕЕ/окисление субстрата субъектов рассчитывали для определения того, существует ли какое-то значимое изменение, с использованием парного критерия Стьюдента. Данные анализа телосложения были выражены как среднее наименьших квадратов (стандартная ошибка среднего значения для разных объемов/площадей участков жировой ткани для обеих диет - с экстрачистым оливковым маслом и тестовым липидом). Критерий Стьюдента также рассчитывали для установления значимости разности между диетами. Изменение и % изменения в общей (ТАТ), подкожной (SAT), абдоминальной (AbAT), внутримышечной (IMAT) и висцеральной (VAT) жировой ткани перекрестно между диетами с начала исследования сравнивали с использованием однофакторного дисперсионного анализа. Данные объединяли для анализа с использованием статистического программного обеспечения SAS (SAS Institute, Cary NC). Для определения значимости использовали величину р<0,05.

Все 23 субъекта прошли исследование до конца. В Табл.IV представлены показатели этих субъектов.

ТАБЛИЦА IV
	Среднее в группе (n=23)	± SEM	Нормальные величины для здоровых лиц
Век (лет)	37	1,33	Не определено
Вес (кг)	87,13	2,23	Не определено
BMI (кг/г2)	28,55	0,59	20-25
ТС (ммоль/л)	5,90	0,2	<4,14
LDL-C (ммоль/л)	3,92	0,19	<2,5
HDL-C (ммоль/л)	1,19	0,7	>1,0
TG (ммоль/л)	1,92	0,14	<1,7
Фактор CVD	5,26	0,29	<5,00
Рассчитанная потребность в энергии (ккал)	3056	66	Не определено
SEM - стандартная ошибка среднего значения.
Фактор CVD - фактор риска сердечно-сосудистого заболевания.

Соответствующие значения веса субъектов на базисной линии были подобные для диет с экстрачистым оливковым маслом и тестовым липидом (96,34 и 86,33 кг) соответственно. Обе группы экстрачистого оливкового масла и тестового липида, потеряли значительное количество веса (-1,22 кг и -1,68 кг соответственно) за 6 недель исследования. Субъекты, которые находились на диете с тестовым липидом, утратили больше веса (0,45 кг), чем те, которые находились на диете с экстрачистым оливковым маслом; тем не менее разность между группами не приобрела статистической значимости.

Уровни холестерина и триглицеридов

Величины ТС существенно снизились (р<0,0001) от базисной линии к конечной точке на этапе тестового липида, с 5,68±0,21 до 4,71±0,16 ммоль/л, см. Табл.V. Подобная тенденция наблюдалась для экстрачистого оливкового масла, но в меньшей мере (р=0,0001) от 5,73±0,18 на базисной линии до 5,14±0,19 ммоль/л в конце. Конечная точка ТС после потребления тестового липида была статистически ниже, чем для экстрачистого оливкового масла (р=0,0006), тогда как данные базисной линии для ТС между диетами статистически не отличались (р=0,7075).

LDL существенно снизился при употреблении тестового липида от базисной линии (3,95±0,19) к конечной точке (3,12±0,16 ммоль/л (р<0,0001)), см. Табл.V. Экстрачистое оливковое масло также показало существенное снижение LDL от 4,00±0,18 до 3,54±0,18 ммоль/л (р=0,0002). Конечные точки были статистически разными (р=0,0002). Тестовый липид показал существенно большее снижение LDL по сравнению с экстрачистым оливковым маслом, хотя базисные линии для оливкового масла и тестового липида были подобны (р=0,69).

HDL снизился несущественно как в случае тестового липида, так и экстрачистого оливкового масла с 0,91±0,04 до 0,89±0,03 ммоль/л и 0,97±0,07 до 0,93±0,04 ммоль/л соответственно, см. табл.V. Величины HDL не показали статистически значащей разности между базовой линией и конечной точкой для тестового липида по сравнению с экстрачистым оливковым маслом.

TG снизились существенно в случае тестового липида с 1,81±0,14 до 1,53±0,11 ммоль/л (р=0,01). Статистически подобное снижение наблюдалось для экстрачистого оливкового масла с 1,69±0,15 до 1,48±0,13 ммоль/л (р=0,02), см. Табл.V. В величинах TG между базисной линией и конечной точкой не было статистически значащей разности для тестового липида по сравнению с экстрачистым оливковым маслом. В Табл.V показаны изменения липидов в крови гиперхолестеринэмичных мужнин через шесть недель.

ТАБЛИЦА V

Экстрачистое оливковое масло (n=23)

Тестовый Липид (n=23)

Между группами Р

Баз.

± SEM

Кон.

± SEM

Р

Баз.

± SEM

Кон.

± SEM

Р

Баз. Р

Кон. Р

ТС День 1

5.66

0.18

5.13

0.2

.0008*

5.67

0.22

4.67

0.16

<.0001*

НО

.0019*

День 2	5.81	0.19	5.14	0.17	<.0001*	5.68	0.22	4.75	0.16	<.0001*	НО	.0005*
Среднее	5.73	0.18	5.14	0.19	.0001*	5.68	0.21	4.71	0.16	<.0001*	НО	.0006*
Разность			0.60	0.13				0.97	0.17			.0592
LDL
День1	3.91	0.18	3.54	0.20	.0044 *	3.90	0.2	3.10	0.16	<.0001*	НО	.0004*
День 2	4.08	0.19	3.54	0.17	<.0001*	4.00	0.2	3.14	0.16	<.0001*	НО	.0004*
Среднее	4.00	0.18	3.54	0.18	.0002*	3.95	0.19	3.12	0.16	<.0001*	НО	.0003*
Разность			0.46	0.1				0.83	0.15			.0221*
HDL
День 1	0.95	0.06	0.91	0.04	НО	0.89	0.04	0.89	0.03	НО	НО	НО
День 2	0.99	0.07	0.94	0.05	НО	0.92	0.04	0.90	0.04	НО	НО	НО
Среднее	0.97	0.07	0.93	0.04	НО	0.91	0.04	0.89	0.03	НО	НО	НО
Разность			0.04	0.04				0.02				НО
TG
День1	1.76	0.18	1.49	0.13	.0281*	1.93	0.2	1.50	0.12	.0091*	НО	НО
День 2	1.63	0.13	1.47	0.13	НО	1.68	0.1	1.57	0.12	НО	НО	НО
Среднее	1.69	0.15	1.48	0.13	.0195*	1.81	0.14	1.53	0.11	.0105*	НО	НО
Разность			0.22	0.09				0.27	0.1			НО
* Наблюдается значимая разность. Баз. = Средние величины базисной линии. ±SEM = стандартная ошибка среднего значения. Кон. = Средние величины конечной точки, Баз. Р = Величины базисной достоверности между группами, Кон. Р = Величины конечной достоверности между группами. НО - не определен.

В Табл.VI показанные эти изменения в виде процентного снижения для любого из показателей - общего холестерина, LDL-холестерина, HDL-холестерина и триглицеридов. Таблица показывает общее процентное изменение концентраций липидов в крови гиперхолестеринэмичних мужчин через шесть недель.

ТАБЛИЦА VI
	Экстрачистое оливковое масло (% изменения)	Тестовый липид (% изменения)
ТС	- 10,39%	- 17,01%
LDL	- 11,45%	- 21,01%
HDL	- 4,23%	- 1,44%
TG	- 12,85%	- 15,12%

Разность в жировой ткани

У двадцати трех пациентов были получены изображения органов тела с помощью магнитного резонанса в начале и в конечной точке каждого экспериментального этапа. Лишь двадцать (n=20) комплектов были использованы для анализа, вследствие технических проблем. Показатели пациентов, приведенные в Табл.IV. Таблицы VII, VIII и IX показывают изменения, которые наблюдались для контрольной группы (экстрачистое оливковое масло) и группы тестового липида относительно общей (ТАТ), подкожной (SAT), абдоминальной (AbAT), внутримышечной (IMAT) и висцеральной (VAT) жировой ткани. Данные, выраженные в величинах, объема (см³ - Табл.VII) и экстраполированные в величины массы (кг - Табл.VIII). Данных также представленные в величинах площади поверхности (см ³ - Табл.IX).

За период исследования общая масса жировой ткани (ТАТ), что представляет собой сумму всех участков жировой ткани, которые были подвергнуты анализу (SAT, AbAT, IMAT, VAT, тазовой, торакальной и головной жировой ткани, которая окружает голову), снизилась в группе тестового липида (-0,22±0,09 кг, р<0,05) и в контрольной группе экстрачистого оливкового масла (-0,17±0,09 кг, р=0,0739). Это означает, что для каждой из диет изменение ТАТ существенно отличалось от базисной линии. Эта разность была значимой для ТАТ на протяжении всего времени. Но она не была значимой перекрестно между диетами (р=0.6814).

Подкожная жировая ткань (SAT), которая представляет собой жир, расположенный по периферии под кожей, уменьшилась как в контрольной группе (-0,15±0,07 кг, р<0,05), так и в группе тестового липида (-0,19±0,04 кг, р<0,01) с течением времени, хотя эффект на SAT между диетами не достиг уровня статистической значимости (р-0,5834). Абдоминальная жировая ткань (AbAT) включает тазовую жировую ткань (вокруг позвонков L4-L5), висцеральные (вокруг брюшной полости/кишечника, между позвонками L4-L5 и нижней точкой легких) и торакальные (легкие) участки жировой ткани. Ни один из результатов для этого параметра не был статистически значимым ни на протяжении времени (контрольная группа: -0,04±0,03 кг; р=0,1856, и группа Дельта: -0,01±0,03 кг; р=0,8085), ни между диетами (р=0,3225). Внутримышечная жировая ткань представляет собой жир, который расположен внутри или вокруг мышечных волокон. Ни одного статистически значимого изменения в контрольной группе или в группе тестового липида на протяжении периода исследования не наблюдалось (-0,01±0,01 кг; НО), ни на протяжении времени от базисной линии, ни между диетами (р=0,7827). Висцеральная жировая ткань показала статистически значимое изменение сравнительно с базисной линией в контрольной группе (-0,05±0,03 кг; р<0,05), но не в группе тестового липида (-0,02±0,03 кг; р=0,4841), и между диетами значимой разности не было (р=0,3289).

В Табл.VII показанные изменения в объемах участков жировой ткани тела мужчин с избыточным весом (n=20) за шесть недель.

ТАБЛИЦА VII
	Экстрачистое оливковое масло	± SEM	Величина P	Тестовый липид	± SEM	Величина Р	Оценка разности между диетами	± SEM	Величина Р между диетами
ТАТ 1 Изменение (см3)	-1230,65	866,75	0,1643	-1730,19	866,75	0,0535	499,55	1177,66	0,674
% изменения	-2,3726	2,0516	0,2552	-4,379	2,0516	0,0398*	2,0064	2,7435	0,474
SAT Изменение (см3)	-906,63	680,23	0,191	-1687,26	680,23	0,0179*	780,63	902,46	0,3928
% изменения	-2,5168	2,1935	0,2588	-5,4389	2,1935	0,018*	2,9222	3,0066	0,344
AbAT2 Изменение (см3 )	-165,54	262,34	0,532	6,6087	262,34	0,98	-172,15	371	0,6454
% изменения	1,8713	4,4233	0,6748	0,3261	4,4233	0,9416	1,5452	6,2555	0,8063
IMAT Изменение (см 3)	-157,57	85,4077	0,0734	-121,73	85,4077	0,1628	-35,8395	113,11	0,755
% изменения	-7,0042	4,4074	0,1209	-5,8591	4,4074	0,1922	-1,1451	5,8528	0,8471
VAT Изменение (см 3)	-925,33	343,43	0,0107*	-21,0398	343,43	0,9515	904,29	461,87	0,0659
% изменения	-5,8596	6,6839	0,3865	1,6103	6,6839	0,811	-7,4699	9,4525	0,4346
Величина значимости (*р<0,05). Данные представленные как среднее значения ± SEM (стандартная ошибка среднего значения). 1 Сумма всех объемов жировых участков. 2Сумма объемов тазового, висцерального и торакального жира. Разность между группами = статистическая значимость между диетами.

В Табл.VIII показанные изменения в массе участков жировой ткани тела мужчин с чрезмерным весом (n=20) за шесть недель.

ТАБЛИЦА VIII
	Экстрачистое оливковое масло	± SEM		Величина Р	Тестовый липид	± SEM	Величина Р	Оценка разности между диетами	± SEM	Величина Р между диетами
ТАТ 1 Изменение (кг)	-0,17	0,09		0,0739	-0,22	0,09	0,027*	0,04	0,11	0,6814
% изменения	0,00	0,00		0,1733	0,00	0,00	0,0461*	0,00	0,00	0,5759
SAT
Изменение (кг)	-0,15	0,07	0,0379*		-0,19	0,04	0,0086**	0,04	0,08	0,5834
% изменения	0,00	0,00	0,0544		0,00	0,00	0,0039**	0,00	0,00	0,373
AbAT2 Изменение (кг)	-0,04	0,03	0,1856		-0,01	0,03	0,8085	-0,03	0,03	0,3255
% изменения	0,00	0,00	0,1968		0,00	0,00	0,7359	0,00	0,00	0,4679
IMAT Изменение (кг)	-0,01	0,01	0,5969		-0,01	0,01	0,3603	0,01	0,02
% изменения	0,00	0,00	0,6478		0,00	0,00	0,322	0,00	0,00	0,7827
										0,7031
VAT Изменение (кг)	-0,05	0,03	0,0423*		-0,02	0,03	0,4841	-0,04	0,03	0,3289
% изменения	-0,01	0,01	0,1052		0,00	0,01	0,7075	-0,01	0,01	0,3747
TOT 3 Изменение (кг)	-1,76	1,12	0,1255		-2,23	1,12	0,0543	0,47	1,59	0,7695
% изменения	0,02	0,01	0,217		0,00	0,01	0,9169	0,02	0,02	0,3473
Величина значимости (*р<0,05; **р<0,01). Данные, представленные как среднее значения ± SEM (стандартная ошибка среднего значения). 1Сумма всех масс жировых участков. 2Сумма масс тазового, висцерального и торакального жира. 3Сумма всех объединенных масс тканей. Разность между группами - статистическая значимость между диетами.

В Табл.IX показанные изменения в площади поверхности участков жировой ткани тела мужчин с чрезмерным весом (n=20) за шесть недель.

ТАБЛИЦА IX
	Экстрачистое оливковое масло	± SEM	Величина Р	Тестовый липид	± SEM	Величина Р	Разность между группами	± SEM	Величина Р
ТАТ1 Изменение (cm2)	-192,81	101,18	0,0658	-232,45	101,18	0,0283*	39,64	113,12	0,7299
% изменения	-2,698	1,6625	0,1148	-4,2145	1,66	0,0165*	1,52	1,80	0,4091
SAT Изменение (cm2)	-166,59	75,32	0,0343*	-206,59	75,32	0,0099**	39,99	84,54	0,6416
% изменения	-3,3045	1,60	0,047*	-4,87	1,60	0,0046**	1,57	1,82	0,3997
AbAT 2 Изменение (cm2)	42,73	32,08	0,1927	-9,15	32,08	0,7775	-33,59	34,02	0,3359
% изменения	-4,63	3,58	0,2049	-1,53	3,58	0,6711	-3,09	4,49	0,4992
IMAT Изменение (cm2)	-9,53	15,17	0,5335	-13,66	15,17	0,3736	4,13	21,40	0,8481
% изменения	-2,82	4,53	0,5386	-3,84	4,54	0,4028	1,02	6,40	0,8738
Величина значимости (*р<0,05; **р<0,01). Данные представленные как среднее значения ± SEM (стандартная ошибка среднего значения). 1Сумма всех площадей жировых участков. 2Сумма площадей тазового, висцерального и торакального жира. Разность между группами = статистическая значимость между диетами.

Затрата энергии

Среднечасовое значение окисления жира при кратковременном употреблении было выше для тестового липида, чем для экстрачистого оливкового масла во всех точках времени за исключением времени 6. Было отмечено несущественно более высокое окисление жира в часы 1,5, 2,5, 3,5 и 4,5. Среднечасовое значение окисления жира при долговременном употреблении также было выше для тестового липида, чем для экстрачистого оливкового масла, но в меньшей мере, чем при кратковременном употреблении. Окисление жира было несущественно выше в часы 1,5, 2,5, 3,5 и 4,5 при долговременном употреблении. Общее окисление жира при кратковременном употреблении тестового липида было незначительно выше, чем при кратковременном употреблении экстрачистого оливкового масла, тогда как данные для экстрачистого оливкового масла и тестового липида после долговременного употребления были подобны. Кроме того, наблюдалась статистически значимая разность между кратковременным употреблением тестового липида и долговременным употреблением тестового липида, который демонстрирует существенное снижение эффекта тестового липида с течением времени.

Общие наблюдения

Уровни общего холестерина и LDL-холестерина были значительно снижены при использовании тестового липида согласно изобретению, и этот эффект снижения холестерина статистически превышал соответствующий эффект от экстрачистого оливкового масла, которое считается одним из масел "золотого стандарта" для улучшения уровней липидов в кровообращении, хотя не является типичным источником жиров во многих географический районах. Тестовые липиды обеспечили это значительное снижение общего холестерина и LDL-холестерина лишь при минимальном снижении уровней HDL-холестерина. Эти данные иллюстрируют очевидные кардиозащитные преимущества тестового липида за счет снижения уровня общего холестерина на 17%, а уровня LDL-холестерина на 21%. Это означает функциональное снижение атерогенного риска. Данные показывают, что это сопровождается тенденцией к усилению потери общей массы тела и жировой массы благодаря усилению потери энергии. Следует понимать, что описанные варианты осуществления изобретения служат лишь для иллюстрации применения принципов этого изобретения. Специалистами могут быть осуществленные многочисленные модификации, которые не выходят за пределы области изобретения.