нуклеопротекторное, клеточносберегающее сорбционное средство

Формула изобретения

1. Наносорбционное средство на основе минерального сорбента - матрицы с мезо-, макропористой структурой, отличающееся тем, что в качестве матрицы используют оксид алюминия, сформированный из первичных блоков размером 3-9 нм, а в качестве модифицирующих компонентов - экстракт солянки холмовой, при содержании его в конечном продукте - модифицированном сорбенте от 3,0 до 10,0 вес.%, и лимоннокислый литий при содержании его в конечном продукте до 4 вес.%.

2. Средство по п.1, отличающееся тем, что насыпная плотность сорбента составляет 0,76-1,1 г/см³ в зависимости от гранулометрического состава и содержания модификатора на поверхности сорбента.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области пористых материалов, адсорбентов для медицинского назначения, носителей для ферментов, клеток, биологически активных веществ, лекарственных препаратов, обладающих специфическими протекторными свойствами. Интерес к таким препаратам в последнее время возрастает [Бакалинская О.Н. и др., 1994, 1997, 2003].

Считается общепринятым положение о том, что сорбенты относятся к эффективным детоксикантам, снижающим нагрузки на естественные органы детоксикации, в первую очередь - печень [Беляков Н.А., 1991, Бгатова Н.П. и др., 2000, Бородин Ю.И. и др., 2001].

Достоинством использования сорбционных пористых материалов самих по себе и как компонентов в составе более сложных композитов является выведение из организма токсических веществ, что приводит к снижению нагрузки на органы детоксикации, это обстоятельство позволяет широко использовать сорбенты в эфферентной терапии [Беляков Н.А. и др., 1997]. Так, например, эффективно используются в медицине сорбенты на основе активных углей, таких как косточковый уголь КАУ, на основе карбонизованных полимеров - СКН, СУГС, на основе минеральной матрицы (оксид алюминия) - углеродминеральный сорбент СУМС-1 и др. [Беляков Н.А., 1991; Рачковская Л.Н., 1996]. Многие сорбенты (активный уголь, цеолиты и др.) используются как пищевые добавки. Сорбционные материалы на основе углей в основном имеют микро-, мезопористую структуру, высокую удельную поверхность и достаточно высокую адсорбционную емкость в отношении низко- и среднемолекулярных токсинов неполярной природы. Известен сорбент на основе растительного сырья - Полифепан, обладающий макропористой структурой и низкой удельной поверхностью. Основным недостатком использующихся для целей детоксикации сорбентов, является неспецифичность их действия, хотя некоторые авторы отмечают, что уже определенная химическая природа поверхности, наличие заданной пористой структуры в сорбенте являются своего рода предпосылкой к развитию специфичных адсорбционных свойств сорбента по отношению к сорбции молекул определенного размера [Картель Н.Т., 1995]. В связи с вышесказанным, актуальной является разработка сорбционного материала с улучшенными органолептическими свойствами, с определенными пористыми параметрами и обладающего протекторными свойствами в отношении клеток, клеточных структур и в особенности ядер клеток.

Наиболее близким к заявляемому сорбенту по своим характеристикам является сорбент с высокими прочностными свойствами, с развитой структурой мезо-, макропор, достаточно высокой удельной поверхностью и гидрофильно-гидрофобной химической природой поверхности - углеродминеральный сорбент СУМС-1, основой которого является оксид алюминия. Характеристики сорбента следующие. Сорбент СУМС-1 (сферический углеродминеральный сорбент) - черного цвета порошок и гранулы с размером частиц от 0,1 мм до 1 мм, без вкуса и запаха, является неселективным сорбентом. Сорбент удовлетворяет требованиям, предъявляемым к сорбентам медицинского назначения: сорбент механически прочен, не токсичен, нетравматичен для слизистых оболочек рта, пищевода, желудка и т.д., хорошо выводится из организма, обладает за счет своей текстуры достаточной сорбционной емкостью по отношению к средне- и крупномолекулярным токсинам, микробным клеткам. Текстурные параметры следующие: величина удельной поверхности до 238 м ²/г, объем пор, где происходит сорбция, достигает до 0,48 см³/г, мезо-, макропористая структура, что и обеспечивает достаточно высокую поглотительную способность в отношении различных средне- и высокомолекулярных структур. Сорбент СУМС-1 имеет «мягкую» нейтральную природу поверхности, содержащую слабые основные и кислотные свойства, что обеспечивает нетравмируемость биологических сред, с которыми он контактирует в процессе его прохождения по ЖКТ (желудочно-кишечный тракт); химическая природа поверхности обеспечивает буферные свойства сорбента (за счет минеральной матрицы), что не нарушает оптимальный водно-солевой баланс; сорбент СУМС-1 не претерпевает превращений в ЖКТ и количественно выводится из организма за 24-48 часов естественным путем.

За счет мозаики на поверхности гидрофильно-гидрофобных центров (слабых по силе) сорбент многоточечно и достаточно прочно способен связывать высокомолекулярные структуры на своей поверхности. В целом, сорбент обладает хорошими детоксицирующими свойствами, но без специфической направленности [Рачковская Л.Н., 1996].

Предлагаемое техническое изобретение решает задачу создания эффективного наносорбционного средства с улучшенными органолептическими свойствами (продукт светло-бежевого цвета) на основе высокопрочного минерального сорбента белого цвета - оксида алюминия, с приданием сорбенту, наряду с его детоксицирующими свойствами, специфических свойств - клеточносберегающих и нуклеопротекторных путем введения экстракта солянки холмовой и соединения лития и обеспечения пролонгированности их действия.

Поставленная задача решается модифицированием поверхности сорбента - оксида алюминия с выбранными текстурными параметрами водным экстрактом солянки холмовой и водным раствором соли лития. После специальной низкотемпературной обработки (25-90°С) наносорбционное средство представляет собой гранулы светло-бежевого цвета (прототип - гранулы черного цвета) с величиной удельной поверхности до 235 м²/г, с содержанием экстракта солянки холмовой до 10 вес.%, с содержанием до 4 вес.% соли лития. При контакте, таким образом, модифицированного продукта с жидкими средами ингредиенты пролонгированно покидают поверхность сорбента, так, экстракт солянки холмовой выходит в раствор до 90 вес.%.

Поверхность сорбента содержит мозаику гидрофильных центров за счет оксида алюминия определенной структуры и полярных фрагментов экстракта солянки холмовой и гидрофобных участков за счет неполярных фрагментов экстракта, что позволяет многоточечно связывать из биологических растворов средне- и высокомолекулярные токсические субстанции и обеспечивать детоксицирующий эффект сорбента. Наряду с этим такая пористая структура сорбента и мягкость химической природы центров (слабые кислые и основные центры) позволяет осуществлять за счет нежесткого закрепления солянки холмовой на поверхности пролонгированный ее выход в биологическую жидкость, что обеспечивает синергический защитный эффект в отношении клеток. Технология получения продукта такова, что позволяет постепенно выделять с поверхности в раствор как солянку холмовую, так и микроэлемент литий.

Такой композиционный сорбент может использоваться в качестве энтеросорбента, биологически активной добавки. Он может применяться как носитель для ферментов, клеток, биологически активных веществ, способствуя их пролонгированному действию. Ввиду своих композиционных характеристик сорбент может быть использован как основа повязок, кремов с лечебными свойствами, как составная часть сложных медицинских изделий.

Предлагаемый пористый наносорбционный продукт получают при комнатной температуре путем пропитки матрицы (оксида алюминия) водным раствором соли лития и экстрактом солянки холмовой, с дальнейшей низкотемпературной обработкой композиционного продукта до состояния сыпучести при температурах до 90°С. Технология получения позволяет осуществить нежесткое закрепление экстракта солянки холмовой на поверхности и обеспечивает выход ее до 90% в раствор. Литий также пролонгированно высвобождается с поверхности продукта.

Матрица продукта ( -оксид алюминия белого цвета), построенная из первичных блоков размером 3-9 нанометров, с размером округлых частиц 0,1-1 мм, обладающих высокими прочностными свойствами, с развитой структурой мезо-, макропор, достаточно высокой удельной поверхностью и гидрофильной химической природой поверхности. Матрица (сама по себе является сорбентом) и обладает за счет своей текстуры достаточной сорбционной емкостью по отношению к средне- и крупномолекулярным токсинам, микробным клеткам, в частности к стафилококку. Текстурные параметры следующие: величина удельной поверхности до 240 м ²/г, объем пор, где происходит сорбция, достигает до 0,50 см³/г, преимущественный размер мезо-, макропор 10-100 нанометров. Химическая природа поверхности обеспечивает буферные свойства сорбента - матрицы, что не нарушает оптимальный водно-солевой баланс.

Экстракт травы солянки холмовой содержит глицинбетаин, флавоноиды, стерингликозиды, соли органических кислот, алкалоиды преимущественно изохинолиновой структуры. Высокая концентрация в солянке холмовой аминокислот, особенно глицина и бетаина, позволяет солянку холмовую считать природным поставщиком аминокислот. Бетаин необходим для синтеза фосфатидилэтаноламина, фосфатидилхолина, являющихся основными структурными компонентами для построения клеточных мембран. Стерины и флавоноиды обеспечивают антиоксидантные свойства. Экспериментально доказано, что присутствующие алкалоиды ответственны за гепатопротективные свойства, устраняют спазм гладкой мускулатуры [Саратиков А.С. и др., 2000].

В качестве источника микрокомпонента лития используются водорастворимые соли лития, в частности лимоннокислый литий. Известно, что литий входит в число 15 жизненно-необходимых элементов. Свои физиологические функции литий, вероятно, осуществляет через центральную нервную и эндокринную системы, он вмешивается в механизм деполяризации и формирования потенциала действия, приводит к снижению скорости проведения возбуждения. Литий влияет на обмен таких медиаторов как норадреналин, дофамин, серотонин. Литий участвует в модуляции синтеза антител и макрофагальной активности. Повышает степень сопряжения окисления и фосфорилирования. Литий нормализует уровень концентрации холестерина и триглицеридов в сыворотке крови, оказывает профилактическое действие для стабилизации психоэмоционального статуса. Существенную роль препараты лития играют в регуляции иммунных реакций организма, они стимулируют лейкопоэз, блокируют развитие постстрессорного иммунодефицита, обладают корригирующим и протективным действием при стрессогенных иммуносупрессиях. Достоинством лития, в отличие от аналогичных препаратов, является то, что он не разлагается в организме и сохраняет свою физическую целостность, не связывается с белками крови [Авруцкий Г.Я. и др., 1988].

Технический результат по предлагаемому изобретению - нуклеопротекторное, клеточносберегающее наносорбционное средство на основе оксида алюминия, модифицированного соединением лития и солянки холмовой, обеспечивающее в условиях нормы и патологии сохранность ядерного аппарата клеток, цитоплазматических органелл и клеточных мембран, обусловливающее нормальное физиологическое функционирование клеток. Сорбционное средство, с одной стороны, выполняет роль носителя и дозатора двух компонентов - гепатопротектора солянки холмовой и нормотимика лития в организм, с другой стороны, выполняет детоксицирующие функции как энтеросорбент. Аналогов предлагаемому изобретению нет.

Пролонгированный выход солянки холмовой с поверхности литийсодержащего наносорбционного средства (далее в тексте - сорбционное средство) в водный раствор оценивали весовым методом (таблица 1).

Пролонгированный выход лития с поверхности сорбционного средства оценивали методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой на спектрометре типа Baird (таблица 1).

Адсорбционную активность сорбционного средства (с оптимально выбранными параметрами, в том числе и по элюации солянки с поверхности) и прототипа оценивали с помощью метода спектрофотометрии по изменению содержания токсинов - среднемолекулярных пептидов (254 нм, 280 нм) в сыворотке крови животных (крысы) (таблица 2).

Протекторные свойства сорбционного средства и прототипа - энтеросорбента СУМС-1 оценивали в эксперименте при их пероральном (энтеральном) 15-дневном введении интактным животным - крысам (таблица 3). Сорбенты вводили в крахмальном геле. Выбор энтерального приема сорбционного средства связан с тем, что средство, содержащее сорбент и компоненты - экстракт солянки холмовой, соль лития, обеспечивает на организменном уровне детоксицирующий эффект и нуклеопротекторное действие. Исследовали группы: интактных животных, получавших энтерально прототип СУМС-1 и сорбционное средство, а также животных, получавших крахмальный гель. После 15-ти дневного энтерального введения препаратов животных декапитировали, готовили образцы печени, левого полушария коры головного мозга по стандартным методикам и проводили морфометрические исследования, используя методы световой и электронной микроскопии, морфометрии.

Кроме того, изучали эффективность использования сорбционного средства в условиях эндотоксикоза на модели термического ожога (и вызванного ожогом стресса). Животным в течение 15 дней после ожога вводили энтерально сорбционное средство с нанесенными ингредиентами солянки холмовой и соли лития. Сравнительные исследования проводили с группой животных, не получавшей сорбентов (таблица 4).

В результате исследований было показано, что при разработанной технологии получения сорбционного средства, элюация экстракта солянки холмовой в раствор происходит на 90% в зависимости от текстуры поверхности, количества модификатора, температуры. Литий пролонгированно переходит в раствор. Вследствие дорогостоящего и длительного исследования на животных выбрано сорбционное средство с 6,5%-ным содержанием экстракта солянки холмовой на поверхности, с содержанием соли лития 2,4 вес.%, как оптимальное по текстуре и экономической целесообразности (пример 2, таблица 1).

В результате экспериментального исследования была выявлена повышенная сорбционная активность сорбционного средства по сравнению с прототипом - сорбентом СУМС-1 в отношении среднемолекулярных пептидов. Показано клеточносберегающее и нуклеопротекторное действие при энтеральном использовании сорбционного средства в отношении изучаемых клеток печени (гепатоцитов) и клеток нейронов коры головного мозга животных в условиях эндотоксикоза и стресса, связанных с термическим ожогом кожи, по сравнению с животными, не получавшими сорбентов, что оценивали по состоянию клеточных мембран, цитоплазматических органелл и включений, ядер клеток (по распределению гетерохроматина и эухроматина в ядрах клеток), структуры ядрышек.

Сущность предлагаемого изобретения иллюстрируется примерами и таблицами 1-5.

Пример 1. Сорбционное средство светло-бежевого цвета, представляющее собой минеральную матрицу - оксид алюминия с размером гранул 0,2-0,8 мм, с нанесенным на ее поверхность 3% экстракта солянки холмовой, 0,5% лития лимоннокислого, высушенное при температуре 90°С, имеет величину удельной поверхности 235 м ²/г, суммарный объем мезо- и макропор 0,45 см ³/г, насыпную плотность 0,78 г/см³ . При контакте при 37°С с водным подкисленным раствором в соотношении сорбент: раствор, равном 30, (величина рН=3,99), имитирующем среду желудка, в течение 60 минут экстракт солянки холмовой переходит в раствор на 40%. При контакте сорбционного средства с водой (соотношение 1:50) за 90 мин лития выходит 15%.

Пример 2. Сорбционное средство светло-бежевого цвета, представляющее собой минеральную матрицу - оксид алюминия, с нанесенным на ее поверхность 6,5% экстракта солянки холмовой, 2,4% лития лимоннокислого, высушенный при температуре 60°С, имеет величину удельной поверхности 223 м²/г, суммарный объем мезо- и макропор 0,37 см³/г, насыпную плотность 0,77 г/см³. При контакте при 37°С с водным подкисленным раствором в соотношении сорбент : раствор, равном 30, (величина рН=3,99), имитирующем среду желудка, в течение 60 минут экстракт солянки холмовой переходит в раствор на 70,4%. При контакте сорбционного средства с водой (соотношение 1:50) за 90 мин лития выходит 25%.

Сорбционная активность: снижение показателей по «средним молекулам» (280 нм) - на 16% и на 7% при 254 нм (таблица 2).

Введение сорбционного средства интактным животным не оказывает повреждающего действия на изучаемые органы и клетки, а способствует развитию структурных изменений в печени, свидетельствующих о клеточносберегающем действии - увеличении энергетической функции гепатоцитов: происходит увеличение объемной плотности митохондрий гепатоцитов на 29,2%, гликогена - в 3,4 раза по сравнению с контролем (таблица 3).

Применение сорбционного средства в условиях эндотоксикоза и стресса, обусловленных термическим ожогом кожи 3А степени, оказывает протективное действие на структуру печени. При светооптическом исследовании печени животных, получавших сорбционное средство в послеожоговом периоде, в гепатоцитах не отмечали видимых признаков нарушения структуры. Объемы ядер и цитоплазмы гепатоцитов не отличались от соответствующих величин у интактных животных, но были в 2,3 раза выше, чем у животных, не получавших сорбционного средства в послеожоговом периоде. В ультраструктурной организации гепатоцитов наблюдали увеличение объемной плотности митохондрий на 24% и повышение объемной плотности гликогена в 2,6 раза по сравнению с контролем (таблица 4). Параметры, отражающие структуру гранулярного эндоплазматического ретикулума и обеспечивающие белоксинтетические функции клетки, достоверно не отличались от соответствующих показателей у интактных животных, но значительно превосходили соответствующие величины в группе животных, принимавших «плацебо» (крахмальный гель).

Развивающийся в результате глубокого термического ожога кожи стресс обусловливал эухроматизацию ядер гепатоцитов животных, не получавших сорбционного средства.

У животных, получавших сорбционное средство, ядра гепатоцитов сохраняли имеющееся у интактных животных соотношение эу- и гетерохроматина. Гетерохроматин располагался небольшими глыбками вдоль ядерной мембраны (таблица 5).

Исследование нейронов коры левого полушария головного мозга в послеожоговом периоде выявило большую сохранность их структуры. Ядра клеток, наряду с имеющимися развернутыми цепями эухроматина содержали окрашенный гетерохроматин, в цитоплазме отмечали хорошо выраженную гранулярную эндоплазматическую сеть, митохондрии содержали четко выявляемые кристы. Ядра нейронов животных, получавших крахмальный гель после ожога и связанного с ним стрессового состояния, были просветленными, не содержали глыбок гетерохроматина, в цитоплазме отмечали снижение концентрации цитоплазматических органелл (таблица 6).

Пример 3. Сорбционное средство светло-бежевого цвета, представляющее собой минеральную матрицу - оксид алюминия с размером гранул 0,1 мм, с нанесенными на ее поверхность 8% экстрактом солянки холмовой, 3% литием лимоннокислым, высушенный при температуре 25°С, имеет величину удельной поверхности 105 м²/г, суммарный объем мезо- и макропор 0,30 см³/г, насыпную плотность 1,1 г/см³. При контакте при 37°С с водным подкисленным раствором в соотношении сорбент : раствор, равном 30, (величина рН=3,99), имитирующим среду желудка, в течение 60 минут экстракт солянки холмовой переходит в раствор на 90%. При контакте сорбционного средства с водой (соотношение 1:50) за 90 мин лития выходит 27%.

Пример 4. Сорбционное средство светло-бежевого цвета, с размером гранул 0,2-1,0 мм, с нанесенными на ее поверхность 10% экстрактом солянки холмовой, 4% литием лимоннокислым, высушенное при температуре 30 С, имеет величину удельной поверхности 185 м²/г, суммарный объем мезо- и макропор 0,33 см³/г, насыпную плотность 0,76 г/см³. При контакте при 37°С с водным подкисленным раствором в соотношении сорбент: раствор, равном 30, (величина рН=3,99), имитирующем среду желудка, в течение 60 минут экстракт солянки холмовой переходит в раствор на 87%. При контакте сорбционного средства с водой (соотношение 1:50) за 90 мин лития выходит 29%.

Пример 5 (прототип). Углеродминеральный сорбент СУМС-1 черного цвета с размером гранул 0,2-0,8 мм имеет величину удельной поверхности 238 м ²/г, суммарный объем мезо- и макропор 0,48 см ³/г, насыпную плотность 0,80 г/см³ . Сорбционная активность сорбента по «средним молекулам» (280 нм) 1,6%, при 254 нм адсорбционной активности не обнаружено.

Прием сорбента интактными животными приводит к увеличению энергетической функции гепатоцитов: наблюдается увеличение объемной плотности митохондрий гепатоцитов - на 8,5%, гликогена - в 2,3 раза по сравнению с контролем (таблица 3).

Введение сорбента животными в условиях эндотоксикоза и стресса, обусловленных термическим ожогом кожи 3А степени способствует сохранности клеточных структур гепатоцитов животных, кроме того, наблюдается увеличение объемной плотности митохондрий на 12,3%, увеличение гликогена в 2 раза по сравнению с контролем (таблица 4).

Таблица 1. Физико-химические характеристики образцов сорбентов в примерах 1-5. Обозначение: S уд., м2/г - удельная поверхность; Vпор, см3/г - объем пор; , г/см3 - насыпная плотность.
Пример/размер гранул, мм	Содер жание соли лития, %	Содержание экстракта солянки холмовой %	Температура сушки, °С	S уд.,м 2/г	Vпор, см3/г	, г/см3	Элюация солянки холмовой в раствор, %	Элюация лития в раствор, %
Пример 1 0,2-0,8	0,5	3,0	90	235	0,45	0,78	40	15
Пример 2 0,2-0,8	2,4	6,5	60	223	0,37	0,77	70,4	25
Пример 3 0,1	3,0	8,0	25	105	0,30	1,1	90	27
Пример 4 0,2-1	4,0	10,0	30	185	0,33	0,76	87	29
Пример 5 0,2-0,8		Прототип		238	0,48	0,80	-

Таблица 2
Изменение содержания концентрации средних молекул (по оптической плотности D254, D280 ) в крови интактных животных (крыс) и интактных животных, получавших препараты (М±м)
N	Группа животных	Количество	D254	D 280
п/п		животных
1	Интактные	5	0,241±0,022	0,180±0,002
2	Интактные + СУМС-1 (по прототипу)	5	0,244±0,007	0,176±0,012
3	Интактные + наносорбционное средство по примеру 2	5	0,226±0,004	0,151±0,013*
			(снижение на7%)	(снижение на16%)
Примечание: * - Р<0,05 по сравнению с группой интактных животных;

Таблица 3.
Результаты морфометрического исследования гепатоцитов крыс, получавших СУМС-1, и наносорбционное средство по примеру 2
Исследованные параметры	Контроль	СУМС-1	Наносорбционное средство по пр.2
Митохондрии (Vv)	29,2±0,16	31,7±1,32	37,8±2,13*
Гликоген (Vv)	10,8±2,12	24,8±2,94*	32,7±2,33*
Обозначение: Vv - объемная плотность структур (% от объема цитоплазмы); Примечание: * - отмечены отличия, достоверные относительно соответствующих величин в контроле.

Таблица 4
Результаты морфометрического исследования гепатоцитов крыс через 15 суток после ожога кожи (М±m)
Исследованные объекты	Контроль	Нелеченные животные	Ожог + крахмальный гель	Ожог + СУМС-1 (прототип)	Ожог + сорбент (по примеру 2)
Митохондрии (Vv)	29,2±0,16	20,6±1,35*	30,5±1,68	32,8±3,12	36,1±1,21
Гликоген (Vv)	10,8±2,12			22,0±5,86*	28,6±4,01*
Обозначение: Vv - объемная плотность структур (% от объема цитоплазмы);
Примечание: * - отмечены отличия, достоверные относительно соответствующих величин в контроле.

Таблица 5
Результаты морфометрического исследования ядер гепатоцитов крыс через 15 суток после ожога кожи (М±m)
Исследованные параметры	Контроль	Нелеченные животные	Ожог + крахмальный гель	Ожог + СУМС-1 (прототип)	Ожог + сорбент (по примеру 2)
Эухроматин (Vv)	57,1±0,32	91,0±1,44*	88,6±2,75*	79,8±0,15*	63,4±0,18
Гетерохроматин (Vv)	42,8±1,22	7,3±2,16*	10,5±1,48*	18,4±2,13*	36,2±2,41
Обозначение: Vv - объемная плотность структур (% от объема ядра);

Таблица 6
Результаты морфометрического исследования ядер нейронов коры головного мозга крыс через 15 суток после ожога кожи (М±m)
Исследованные параметры	Контроль	Нелеченные животные	Ожог + крахмальный гель	Ожог + СУМС-1 (прототип)	Ожог + сорбент (по примеру 2)
Эухроматин (Vv)	65,6±0,11	93,7±1,18*	90,2±2,56*	72,1±0,12*	67,4±0,25
Гетерохроматин (Vv)	34,2±1,39	5,9±2,45*	7,8±1,26*	15,6±2,84*	32,0±2,15
Обозначение: Vv - объемная плотность структур (% от объема ядра)

Таким образом, из приведенных результатов следует, что литийсодержащее наносорбционное средство (Пример 2) проявляет сорбционные свойства в большей степени по сравнению с прототипом (Пример 5), что видно по значительному снижению уровня среднемолекулярных пептидов - маркеров среднемолекулярных токсических продуктов.

Профилактическое введение в течение 15 дней сорбционного средства интактным животным (крысам) приводит к более выраженному по сравнению с прототипом клеточносберегающему эффекту, выражающемуся в повышении энергетической функции гепатоцитов - возрастании объемной плотности митохондрий и гликогена.

Введение сорбционного литийсодержащего средства животными после термического ожога 3А степени (и вызванного им стресса) выявило его более выраженные свойства по сравнению с прототипом, связанные с большей сохранностью клеток печени животных - отсутствием нарушений клеточных мембран, снижением концентрации цитоплазматических органелл и значительным увеличением объемной плотности митохондрий и гликогена по сравнению с контролем.

Морфометрические исследования ядер гепатоцитов и нейронов коры головного мозга у крыс через 15 суток после ожога кожи и вызванного им стресса (таблицы 5, 6) выявили нуклеопротекторные свойства сорбционного средства, модифицированного литийсодержащим соединением и солянкой холмовой. При этом соотношение гетеро- и эухроматина в структуре ядер гепатоцитов и нейронов значительно не отличалось от соответствующих величин у интактных животных.

Известно, что по морфологическим признакам ядра - соотношению эу- и гетерохроматина и структуре ядрышка можно косвенно оценить активность процессов транскрипции, а следовательно, и синтетической функции клетки. В условиях нормы гетерохроматин располагается в виде глыбок по периферии ядра, в условиях повышенной нагрузки на клетку, в условиях стресса происходит деспирализация гетерохроматина. Длительная эухроматизация ядра обусловливает повышенную синтетическую активность клетки, что приводит к истощению пластических и энергетических субстратов, к преобладанию катаболических процессов и в конечном итоге - гибели клетки.

В ядрах гепатоцитов и нейронов не леченных животных исчезали глыбки гетерохроматина, структура ядрышка свидетельствовала об истощении синтеза РНК.

В эксперименте у животных, находящихся в стрессовом состоянии после ожога, наблюдали уменьшение энергетического субстрата в клетках печени - гликогена, что приводило к развитию аутофагии, когда клеточные органеллы использовались в качестве энергетического субстрата, что свидетельствовало о развитии стресс-реакции на уровне клетки. Подобная картина отсутствовала у животных, получавших сорбционное средство. Структура цитоплазмы и ядер гепатоцитов и нейронов у данных животных в послеожоговом периоде была более сохранна.

Следовательно, при использовании сорбционного средства, модифицированного соединением лития и солянкой холмовой, у животных не развивается стрессорный ответ, не происходит нарушения синтетических, энергетических, метаболических процессов в гепатоцитах и нейронах коры головного мозга. Сорбционное средство позволяет сохранять физиологические функции клеток, проявляя нуклеопротекторный и клеточносберегающий эффекты, выражающиеся в сохранности ядер - оптимального соотношения гетерохроматина и эухроматина и всех структурных компонентов цитоплазмы клеток.