алкалоидсодержащий корм или кормовая добавка

Формула изобретения

1. Кормовая добавка, отличающаяся тем, что она содержит протопиновый алкалоид, в частности, -аллокриптопин, в качестве средства, повышающего продуктивность и аппетит сельскохозяйственных животных.

2. Кормовая добавка по п.1, отличающаяся тем, что она содержит протопиновый алкалоид, в частности, -аллокриптопин, в комбинации с, по меньшей мере, одним бензофенантридиновым алкалоидом, выбранным предпочтительно из сангвинарина и хелеритрина.

3. Кормовая добавка по п.1 или 2, отличающаяся тем, что протопиновый алкалоид, в частности, -аллокриптопин, имеют природное или синтетическое происхождение.

4. Кормовая добавка по п.3, отличающаяся тем, что -аллокриптопин используется в форме растительного материала или отжатого сока растений, или в форме экстрактов из растительных материалов.

5. Кормовая добавка по п.4, отличающаяся тем, что -аллокриптопин используется в форме растительного материала Macleaya cordata или в виде его экстракта.

6. Кормовая добавка по п.3, отличающаяся тем, что -аллокриптопин и/или бензофенантридиновые алкалоиды введены в форме выделенных алкалоидов, или смеси алкалоидов, и/или в форме их производных, и/или их синтетических аналогов.

7. Кормовая добавка по п.2, отличающаяся тем, что протопиновый алкалоид, в частности, -аллокриптопин и/или бензофенантридиновые алкалоиды выбраны предпочтительно из сангвинарина и хелеритрина.

8. Кормовая добавка по п.7, отличающаяся тем, что -аллокриптопин и/или бензофенантридиновые алкалоиды получены в форме растительного материала, или отжатого сока растений, или в форме экстрактов из растительных материалов.

9. Кормовая добавка по п.8, отличающаяся тем, что -аллокриптопин используется в форме растительного материала Macleaya cordata или в виде его экстракта.

10. Кормовая добавка по п.7, отличающаяся тем, что -аллокриптопин и/или бензофенантридиновые алкалоиды введены в форме выделенных алкалоидов, или смеси алкалоидов, и/или в форме их производных, и/или их синтетических аналогов.

11. Корм, содержащий обычные кормовые вещества, такие как зерно или зерновые продукты, кукурузу, белки и незаменимые аминокислоты, витамины, минеральные добавки, такие как соль, фосфаты, известь, ферменты и т.п., отличающийся тем, что он содержит кормовую добавку по одному из пп.1-10.

12. Корм по п.11, отличающийся тем, что общее количество алкалоидов составляет от 1 мг до 100 г на 1 т корма.

13. Применение протопиновых алкалоидов, в частности, -аллокриптопина предпочтительно в комбинации с, по меньшей мере, одним бензофенантридиновым алкалоидом, выбранным предпочтительно из сангвинарина и хелеритрина, для стимулирования продуктивности и аппетита животных.

14. Применение по п.13, отличающееся тем, что алкалоиды имеют природное или синтетическое происхождение.

15. Применение протопиновых алкалоидов, в частности, -аллокриптопин предпочтительно в комбинации с, по меньшей мере, одним бензофенантридиновым алкалоидом, выбранным предпочтительно из сангвинарина и хелеритрина, для получения корма или кормовой добавки с гепатозащитным действием для сельскохозяйственных или домашних животных.

16. Применение по п.14, отличающееся тем, что алкалоиды имеют природное или синтетическое происхождение.

Описание изобретения к патенту

Настоящее изобретение относится к корму для усиления аппетита и продуктивности сельскохозяйственных животных, причем такой корм, кроме обычных кормовых веществ, таких как зерно, зерновые продукты, кукуруза, белки и незаменимые аминокислоты, витамины, минеральные добавки, такие как соль, фосфаты, известь, ферменты и т.п., содержит также кормовую добавку.

Названные стимуляторы продуктивности вводят при кормлении сельскохозяйственных животных ежедневно. При этом речь идет о веществах, которые оптимизируют усвоение питательных веществ в рубце или кишечнике. Тем самым улучшается переваривание корма и уменьшается потребность в корме на килограмм привеса. Различают антибиотические, пробиотические и химические стимуляторы продуктивности.

Однако в последнее время фирмы-производители, а также некоторые специалисты все больше отказываются от применения стимуляторов продуктивности, в частности антибиотических и химических стимуляторов продуктивности, так как они опасаются, с одной стороны, причинения ущерба здоровью человека остатками использованных веществ кормов для животных и, с другой стороны, создания резистентности к микроорганизмам, особенно к патогенным для человека микроорганизмам. Многие вещества, используемые в качестве стимуляторов продуктивности, в настоящее время запрещены в качестве кормовых добавок в различных странах.

С другой стороны, установлено, что введение стимуляторов продуктивности поддерживается многими держателями животных, поскольку указанные средства не только способствуют ускорению роста животного, но также улучшают состояние здоровья животного. Таким образом, поиск подходящих суррогатных веществ, которые в качестве альтернативных стимуляторов продуктивности должны заменить обычные (вещества), находится в центре внимания.

Из патента DE 4303099 известно применение для стимулирования продуктивности бензофенантридиновых алкалоидов. Указанные алкалоиды содержатся, в частности, в Sanguinaria canadensis, которые, однако, как природные растительные материалы имеются в распоряжении только в ограниченных объемах, так что указанные алкалоиды относительно дорогостоящи.

Из патента WO 02/21933 известно применение в качестве стимуляторов продуктивности и аппетита сельскохозяйственных животных протоберберинового алкалоида в комбинации с бензофенантридиновым алкалоидом.

Ныне неожиданно отмечено, что стимулирование аппетита и продуктивности может быть заметно улучшено путем применения протопиновых алкалоидов, в частности -аллокриптопина.

Ранее не было известно введение -аллокриптопина в организм животных.

Согласно одному из признаков изобретения рассмотрен корм названного выше типа или кормовая добавка(и) для получения такого корма, который(ые) содержит(ат) протопиновый алкалоид, в частности -аллокриптопин, в эффективном количестве в качестве стимулятора продуктивности и аппетита сельскохозяйственных животных.

Согласно дополнительному признаку изобретения кормовое средство или кормовая добавка могут содержать протопиновый алкалоид, в частности -аллокриптопин, в комбинации с по меньшей мере одним бензофенантридиновым алкалоидом. Путем применения указанной комбинации алкалоидов может быть достигнут неожиданный синергический эффект.

Предполагают, что -аллокриптопин является гепатозащитным веществом. Существует соответствующая литература о его применении в медицине. Комбинация с бензофенантридиновыми алкалоидами кажется весьма ценной, так как активная система должна быть синергической. Бензофенантридиновые алкалоиды в незначительной степени действуют противомикробно и обладают защитным действием на незаменимые питательные вещества, такие как триптофан, лизин и т.д. -Аллокриптопин защищает печень и предположительно оказывает регенерирующее полезное действие, которое должно быть особенно ценно для растущих животных, в период лактации и для птицы, так как ежедневно диагностируют клинические проблемы с печенью (свиньи, свиньи на откорме, молочные коровы, коровы на откорме) или большие проблемы, с точки зрения хозяйства и здоровья (птица на откорме, несушки), синдрома жировой дистрофии печени.

Согласно одному аспекту предлагаемого изобретения оба эффекта могут комбинироваться, так как лучшее обеспечение незаменимыми аминокислотами системы детоксикации печени дает необходимый субстрат, а также благодаря комбинации с -аллокриптопином указанный процесс сильно возбуждается в общем обмене веществ в печени. Описанные процессы могут, в конце концов, привести к синергическому симбиозу, который является превосходным благодаря более высокой производительности, улучшенного здоровья, более высокой продолжительности жизни, уменьшенного введения лекарственных препаратов, не говоря уже о равновесии с окружающей средой, экологией и производством.

Согласно указанному признаку изобретение может превышать собственный эффект каждого отдельно вводимого вещества, бензофенантридинового алкалоида или -аллокриптопина, и давать огромный прогресс для производства и потребителей.

Согласно дополнительному признаку изобретения протопиновый алкалоид и/или бензофенантридиновый алкалоид могут вводиться в форме растительных материалов, в виде отжатого сока растений или в виде экстрактов из растительных материалов. Например, -аллокриптопин может быть использован в форме растительного материала Macleaya cordata или в виде экстракта из него. В данном изобретении применимые экстракты могут быть получены любыми известными способами и могут быть, например, водными и/или спиртовыми экстрактами и/или СО₂-экстрактами.

Само собой разумеется, что использованный протопиновый алкалоид так же, как бензофенантридиновый(е) алкалоид(ы) могут быть введены как в виде выделенных алкалоидов или смеси алкалоидов, так и в форме их производных или синтетических аналогов.

Также могут быть использованы любые смеси растительного материала, отжатого сока растения, экстрактов из растительного материала, выделенных алкалоидов, их производных или их синтетических аналогов.

Количество содержащегося в корме алкалоида ограничено только его активностью. Общее количество алкалоида на тонну кормового средства предпочтительно составляет от 1 мг до 100 г.

Выгоды предложенного корма или кормовой добавки, которые содержат протопиновый алкалоид, предпочтительно -аллокриптопин, в частности, в комбинации с бензофенантридиновыми алкалоидами, основаны на следующих наблюдениях:

Печень домашних и сельскохозяйственных животных, потреблявших указанные корма, заметно здоровее, чем у животных контрольных групп. Это обнаружено по темно-красному окрашиванию, которое позволяет сделать вывод о незначительных жировых включениях.

Печень подопытных животных имеет меньшую массу в процентах к массе тела, так как содержит меньше жира и других тканей. Это оценено как положительный фактор, поскольку указывает на меньший «стресс печени».

Подопытные животные демонстрируют заметно более высокое усвоение корма, чем животные контрольной группы, причем, с одной стороны, отмечено, что указанный эффект значительно превышает уровень эффекта ароматизирующих веществ и, с другой стороны, исходит из того, что указанное выгодное действие приводит к улучшенному состоянию здоровья пищеварительной системы подопытного животного, в частности, к улучшенному состоянию здоровья печени.

На основе улучшенного усвоения корма в совокупности показаны улучшенная продуктивность испытуемого животного, а также более благоприятная устойчивость к стрессам и заболеваниям благодаря улучшенному состоянию здоровья печени.

Содержание триптофана в крови воротной вены подопытного животного заметно улучшено по сравнению с каждым контрольным животным, что, в свою очередь, указывает на гепатозащитное действие и, таким образом, на улучшенное состояние здоровья печени.

Преимущества предложенного изобретения поясняются ниже на примерах и приложенной диаграмме, причем фиг.1 представляет собой графическое представление эффекта, полученного с помощью алкалоидсодержащих кормовых средств по изобретению, на параметры продуктивности и убойной туши у свиней на откорме.

Пример 1

Гранулированные части растения Macleaya cordata измельчали в порошок и экстрагировали в течение 12 часов подкисленным метанолом (0,1% HCl) в аппарате Сокслета.

Экстракт анализировали методом ВЭЖХ. ВЭЖХ-анализ проводили на детекторе SPD-10Avp и флуорометрическом детекторе RF-10Axl, поставляемом Shimadzu Class VP Gerät, с применением колонки с обратимой фазой Purospher^® Star RP-18e. В качестве подвижной фазы использовали смесь 1-гептансульфоновой кислоты/триэтиламина в 25% ацетонитриле при градиенте 40% ацетонитрила. Определение проводили с помощью УФ при 285 нм и/или флуорометрией при 327 нм возбуждения/577 нм излучения. В качестве внутреннего стандарта в подвижной фазе использовали раствор сравнения алкалоидов. Все анализы проводили трижды. Результаты анализа относительно проходящих алкалоидов приведены в таблице 1.

Пример 2

Сухой экстракт Macleaya cordata, полученный этанольно-водной экстракцией, растворяли в концентрации 1 мг/мл в метаноле. Раствор подвергали ВЭЖХ-анализу. Перед анализом его разбавляли подвижной фазой. ВЭЖХ-анализ проводили, как описано в примере 1. Результаты анализа относительно исследуемого алкалоида приведены в таблице 1.

Пример 3

Еще один образец этанольно-водного экстракта Macleaya cordata растворяли в концентрации 1 мг/мл в метаноле. Раствор подвергали ВЭЖХ-анализу. Перед анализом его разбавляли подвижной фазой. ВЭЖХ-анализ проводили, как описано в примере 1. Результаты анализа относительно исследуемого алкалоида приведены в таблице 1.

Пример 4

В данном примере анализировали кормовую добавку, которая состояла из 95% высушенных частей растений Macleayacordata и 5% экстракта Macleaya cordata. Пробу экстрагировали подкисленным метанолом (0,1% HCl) в течение 12 часов в аппарате Сокслета. Экстракт исследовали методом ВЭЖХ, как описано в примере 1. Результаты анализа относительно исследуемого алкалоида также приведены в таблице 1.

Таблица 1
	Части растения Macleaya cordata (пример 1) (мкг/г)	Экстракт Macleaya cordata (пример 2) (мг/г)	Экстракт Macleaya cordata (пример 3) (мг/г)	Кормовая добавка (пример 4) (мг/г)
-аллокриптопин	6,8±0,3	21±4	6±3	15,33
сангвинарин	6,5±0,3	402±19	213±9	16,5
хелеритрин	4,7±0,3	125±7	102±6	9,33

Пример 5

Поросят для откорма помещали в два отделения хлева двумя одинаковыми группами. Животных разделяли на две испытуемые группы.

Поросята получали обычный корм из пшеницы, ячменя, соевого шрота НР, минеральных веществ, микроэлементов, витаминов и аминокислот, причем корм испытуемой группы 1 дополнительно содержал бензофенантридиновые алкалоиды, корм испытуемой группы 2 дополнительно содержал -аллокриптопин в комбинации с бензофенантридиновыми алкалоидами. Дозировка биологически активных веществ приведена в таблице 2. Добавка, которую прибавляли в корм испытуемой группы 2, содержала бензофенантридиновые алкалоиды и -аллокриптопин в соотношении примерно 3:1.

Таблица 2
Испытуемая группа	Добавленные алкалоиды	Дозировка биологически активных веществ
1	Бензофенантридиновые алкалоиды	0,5 мг/кг
2	-аллокриптопин + бензофенантридиновые алкалоиды	0,8 мг/кг

Животных взвешивали в начале и в конце испытаний еженедельно, а также во время 14-дневной продолжительности испытания. Трое животных пали в период откорма. Результаты испытаний откорма, от 30 до 105 кг живого веса, приведены в таблице 3.

Таблица 3
Испытуемая группа	1	2
Алкалоиды в корме	Бензофенантридиновые алкалоиды	-аллокриптопин + бензофенантридиновые алкалоиды
Продолжительность откорма, дни	86,3	81,6
Потребление корма, кг/день	2,09	2,21
Привес, г/день	874	931
Усвоение корма, кг	2,39	2,38
Доля мяса, %	59,9	59,3
Качество мяса, пункты	53,5	54,3

Как можно видеть из таблицы 3, уровень продуктивности откорма животных очень высок. Испытуемая группа 2 показывала более высокое потребление корма. Испытуемая группа 1 показывала меньший привес в день, и даже на 57 г меньше, чем испытуемая группа 2. Указанные 57 г соответствуют откорму от 30 кг до 105 кг примерно за 5 дней откорма.

Испытуемая группа 2, которую кормили предложенным кормовым средством, показывала более высокое потребление корма и ежедневный привес. Это является указанием на лучший аппетит, который сводился к улучшенному здоровью печени. Показатель качества мяса в указанной испытуемой группе также был выше и равнялся 54,3, что также указывало на более эффективный синтез белка в печени.

Пример 6

В двух сериях испытаний на 12×7 петушках-бройлерах (Ross 308) изучали влияние алкалоидсодержащих кормовых добавок по 25, 50 или 100 ч/млн. Корм представлял собой обычный корм для откорма бройлеров с добавкой 0, 25, 50 или 100 ч/млн алкалоидсодержащей добавки. Указанная добавка состояла из смеси размолотых корневищ Sanguinariacanandensis и частей растения Macleayacordata и содержала примерно 1,5% сангвинарина, 0,8% хелеритрина и 0,35% -аллокриптопина. Данные анализа предложенного алкалоидсодержащего кормового средства приведены в таблице 4.

Таблица 4 данные анализа предложенного алкалоидсодержащего корма, а также контрольного корма

Содержание добавки	0 ч/млн	25 ч/млн	50 ч/млн	100 ч/млн
-аллокриптопин (ч/млн) Бензофенантридиновый алкалоид (ч/млн)	0 0	230 1013±25	465 1963±60	856 3850±85
Сухое вещество (%) Содержание на кг (при 890 г сухого вещества)	87,9±0,6	88,1±0,7	88,00±1,0	88,3±0,3
Зола (г)	60±1,2	60±1,9	59±2,0	60±1,9
Сырой белок (г)	199±3,2	200±3,6	200±1,0	200±5,1
Жир (Сокслет)(г)	63±1,5	64±2,4	63±1,5	62±1,7
Волокна (г)	28±2,1	26±2,0	27±0,7	27±1,0
Полная энергия (MJ)	17,4±0,2	17,4±0,1	17,4±0,2	17,4±0,1

В таблице 5 показаны параметры роста и параметры забитой тушки.

Таблица 5
Содержание добавки	0 ч/млн Ш отн.(1)	25 ч/млн Ш отн.	50 ч/млн Ш отн.	100 ч/млн Ш отн.
Масса тела (ВМ) в день 1 (г)	46	100	47	101	46	99,1	46	100
ВМ в день 40 (г)	2488	100	2464	99,0	2526	101,5	2474	99,5
Ежедневный привес (г)	62,6	100	62,0	99,0	63,6	101,6	62,3	99,5
Корм в день (г)	103	100	99	96,3	102	99,5	102	99,6
Корм на кг ВМ (кг)	1,64	100	1,60	97,6	1,61	98,2	1,64	100
Убойный вес (г)	1799	100	1774	98,6	1834	101,9	1766	98,1
Выход костной массы (%)	72,1	100	72,0	99,9	72,6	100,7	71,4	99,0
Цвет печени(2)	1,19	100	1,06	89	1,05	88	1,07	90
Вода в день (мл)	202	100	202	100	197	97,4	196	97,2
Вода: корм (мл/г)	1,97	100	2,05	104	1,92	97,5	1,92	97,5

⁽¹⁾ Ш = среднее значение, отн. = относительное значение (в %)

⁽²⁾1 = темнокрасный (здорова), 2 = желтоватый (больная; жировая дистрофия печени, гепатит)

Параметры, приведенные в таблице 5, показывают, что убойный вес при сравнении с контрольной группой в испытуемой группе, которой отпускали корм с 50 ч/млн алкалоидсодержащей добавки, был наибольшим. Усвоение корма в испытуемой группе, которой отпускали корм с 25 или 50 ч/млн добавки, улучшалось. Указанные результаты не были статистически значимыми, так как в распоряжении имелось только четыре группы, и испытание проводили при очень высоком уровне продуктивности. При большем количестве групп, например, при 10 повторениях, были бы получены статистические результаты.

Во всех испытуемых группах животные имели более темную печень, чем бройлеры контрольной группы, что является четким указанием на гепатозащитное действие предложенных кормов.

В рамках данного ряда испытаний изучали также использование энергии по захвату азота и содержанию сухого вещества в экскрементах. Результаты приведены в таблице 6.

Таблица 6
Содержание добавки	0 ч/млн Ш отн.(1)	25 ч/млн Ш отн.	50 ч/млн Ш отн.	100 ч/млн Ш отн.
Использование энергии	0,77	100	0,78	101	0,78	101	0,77	100
Захват азота	0,60	100	0,62	103	0,61	102	0,60	100
Содержание сухого вещества в экскрементах (%)	28,9	100	29,2	101	29,0	100	29,3	100

⁽¹⁾Ш = среднее значение, отн. = относительное значение (в %)

Испытуемые группы, к корму которых было прибавлено 25 или 50 ч/млн алкалоидсодержащей добавки, показывают направленно улучшенное использование энергии и захват азота. Измеренное содержание энергии корма, 17,4 MJ/кг, вместе с использованием энергии от 0,77 до 0,78, ведет к содержанию в корме метаболизируемой энергии от 13,43 до 13,62 MJ/кг. Экскременты всех испытуемых групп показывают высокое содержание сухого вещества, причем различия едва заметны между испытуемыми группами.

Пример 7

Влияние -аллокриптопина и бензофенантридиновых алкалоидов на выбранные параметры использования белка при стандартизированном кормлении

Данный пример показывает влияние корма, содержащего -аллокриптопин и бензофенантридиновые алкалоиды, на параметры белкового обмена. Показано, что изобретение благодаря установлению необратимого ингибирования AAD (ароматической аминокислотной декарбоксилазы) бензофенантридиновыми алкалоидами in vivo улучшает снабжение животных незаменимыми питательными веществами, такими как триптофан и фенилаланин, а также другими незаменимыми аминокислотами, или дает возможность экономить на введении питательных веществ в коммерческий корм путем введения указанных алкалоидов, что ранее не было известно и не применялось.

Две группы из 6 кастрированных свиней держали в хлеву. В начале испытания (день 0) средняя масса тела животных контрольной группы была равна 36,08±3,79 кг и у животных испытуемой группы - 36,2±3,74 кг. Животных обеих групп кормили три раза в день кормом, приведенным в таблице 7, причем каждый корм для испытуемой группы содержал -аллокриптопин и бензофенантридиновые алкалоиды, в частности, сангвинарин и хелеритрин, и при том в виде добавок 30 ч/млн растительного материала Sanguinariacanadensis и Macleaya cordata. Содержание активных веществ составляло 2,2% бензофенантридиновых алкалоидов и 0,1% -аллокриптопина.

Таблица 7

Состав корма и питательность

Ячмень	64,0%	Сырой белок	16,5%
Соевый шрот	18,9%	Метаболизируемая энергия	14,0 MJ/кг
Соевое масло	7,9%	Сырое волокно	5,0%
Пшеничные отруби	6,4%	Сырая зола	5,5%
Другие компоненты 2,8%	Сырой жир	9,8%
Всего	100,0%	Лизин	0,9%
		Метионин/цистеин	0,5%
		Треонин	0,6%
		Триптофан	0,2%
		Фосфор	0,6%
		Натрий	0,1%
		Кальций	0,9%

Животные имели свободный проход к питьевой воде, но в период фазы адаптации (дни 33-39), в который животные содержались отдельно в респирационных камерах, и во время проводимых затем испытаний N-баланса (дни 40-49) им давали воду до насыщения только после кормления.

Пробы мочи брали один раз в день, а пробы кала трижды в день. В 42 и 49 дни брали пробы крови из ушной вены для определения уровня аммиака и мочевины.

В конце испытания средняя масса тела животных испытуемой группы была несколько выше (76,27±5,11 кг), чем у животных контрольной группы (75,09±7,42 кг). Подобное наблюдали по ежедневному привесу. Он составлял для испытуемой группы 821,3±44,7 г и для контрольной группы 796,1±86,2 г. Причем отпуск корма в обеих группах, благодаря точно распределенному кормлению, был одинаков, что для целей испытания составляло: испытуемая группа: 1775,9±91,5 г; контрольная группа: 1770,8±120,3 г. Усвоение корма в испытуемой группе, 2,196±0,094, было лучше, чем в контрольной группе, 2,237±0,173.

Изучение N-баланса, сначала после научных основ на базе корригированной и при этом сравнимой метаболической массы тела (масса тела ^0,75 соответствует так называемой метаболической массе тела, благодаря чему становится сравнимым обмен веществ слона и мыши на научной основе), показало, что усвоение N для контрольной группы (2,057±0,011 г/W^0,75/день) и для испытуемой группы (2,062±0,010 г/W^0,75/день) находилось на одном уровне, что было неоспоримо достигнуто точно распределенным кормлением. Измерение выделения N в фекалиях дало для контрольной и испытуемой групп почти одинаковые значения, а именно 0,360±0,023 г/W^0,75/день или 0,370±0,044 г/W^0,75 /день.

При выделении N в моче, однако, было обнаружено заметное различие, а именно 0,774±0,094 г/W^0,75 /день для испытуемой группы в сравнении с 0,860±0,135 г/W ^0,75/день для контрольной группы. Это показывает, что в контрольной группе потери N были четко уменьшены на 11%. Указанные данные подтверждают, что предложенное средство приводит к заметно лучшему усвоению общих кормовых белков из корма, что является предметом изобретения и имеет большую научную и релевантную окружающей среде пользу.

Указанные данные были подтверждены удерживанием N, то есть отложением белка в теле животного, которое составило в контрольной группе 0,837±0,133 г/W^0,75 /день и в испытуемой группе 0,918±0,084 г/W^0,75 /день; таким образом, изобретение привело к 10%-ному повышенному удерживанию N, что сравнимо с 10%-ным улучшенным усвоением белков из корма и белков растений, приводя к улучшению качества питания и уменьшению загрязнения азотом природных вод на указанные 10%.

Видимая N-перевариваемость показывает, что корм, содержащий -аллокриптопин и бензофенантридиновые алкалоиды, не оказывает влияния. Вычисленные процентные значения были 82,53±1,10% для контрольной группы и 82,07±2,06% для испытуемой группы. Данные для N-превращения, однако, четко указывают на 10%-ное повышенное значение для испытуемой группы (44,52±4,24%) по сравнению с контрольной группой (40,73±6,63%), что подтверждает in vivo промежуточно установленное действие -аллокриптопина и бензофенантридиновых алкалоидов на введение белка и потребление белка в организме животного.

Как можно видеть из таблицы 8, если бы содержание алкалоидов в корме не оказывало влияния на развитие содержания аммиака в пробах крови, которые отбирали на второй день в интервале недели во время фазы изучения N-баланса, оно дало бы четко уменьшенный уровень мочевины в крови подопытного животного. Более низкие значения мочевины являются четким указанием на улучшенное использование абсорбированного белка из корма и на незначительное расходование печени для обезвреживания ядовитых азотистых веществ из вредного белка корма. Указанный четкий эффект не был достигнут при даче одних бензофенантридиновых алкалоидов, а появился (лишь) в случае комбинации с алкалоидом -аллокриптопином. Большее количество животных в каждой группе привело бы к более значимым результатам.

Таблица 8

Влияние алкалоидсодержащего корма на уровень аммиака и мочевины в крови (n = 6).

	Аммиак [мкмоль/мл]	Мочевина [ммоль/мл]
	день 42	день 49	день 42	день 49
Контрольная группа	48,33±5,05	39,17±7,98	3,87±0,74	3,88±0,99
Испытуемая группа	41,17±3,76	39,17±3,97	2,92±0,36	3,00±0,24

Показано, что добавка к корму -аллокриптопина и бензофенантридиновых алкалоидов оказывает заметный положительный эффект в отношении исследованных параметров продуктивности, причем наибольшим было влияние на усвоение корма. Показано заметное различие в отношении экспериментов N-баланса и уровней аммиака и мочевины в крови, которое, однако, из-за незначительного числа испытуемых животных не было статистически достоверным. Уменьшенные значения аммиака и мочевины в крови подтверждают, что животное лучше использует даваемый белок и при этом улучшается работа печени. Наблюдаемый сдвиг в экономии азота, который является указанием на воздействие на белковый обмен, позволяет утверждать, что установлено ингибирование ADD бензофенантридиновыми алкалоидами in vivo, что имеет большую хозяйственную пользу.

Пример 8

Влияние -аллокриптопина и бензофенантридиновых алкалоидов в корме на усвоение корма свиньями на откорме при неограниченном доступе к корму (кормление ad-libitum)

12 кастрированных свиней содержали в двух группах с различными кормушками. Контрольной группе отпускали корм, приведенный в таблице 9. Испытуемая группа получала указанный корм с 30 ч./млн приведенных в таблице 7 добавок, состоящих из сангвинарина, хелетрина и -аллокриптопина.

Таблица 9

Состав корма

(метаболизируемая энергия: 13,5 MJ/кг; 18% сырого белка)

Компоненты	%
Кукуруза	51
Ячмень	21
Соевый шрот	11
Рыбная мука	8
Кукурузная клейковина	6
Витамино-минеральная смесь	3
Лизин	0,24
Треонин	0,18
Триптофан	0,07
Метионин	0,07

В следующей таблице 10 приведены результаты указанных испытаний.

Таблица 10

Влияние содержания алкалоидов в корме на потребление корма и рост свиней на откорме (среднее значение ± стандартное отклонение, n = 6)

	Контрольная группа	Испытуемая группа
Исходная масса, кг	35,8±1,5	35,5±0,8
Конечная масса, кг	43,8±1,5	43,8±1,0
Потребление корма, г/день	1779±102	1834±68
Ежедневный привес, г/день	1008±80	1047±63
Усвоение корма, г/г	1,8±0,1	1,8±0,1

Хотя потребление корма в контрольной группе было относительно высоким, в испытуемой группе благодаря -аллокриптопину и бензофенантридиновым алкалоидам он был еще улучшен. При кормлении ad libitum наблюдали примерно на 4% более высокое потребление корма. Это сводилось к более высокой абсорбции триптофана. В результате ингибирования ароматической аминокислотной декарбоксилазы (AAD) благодаря бензофенантридиновым алкалоидам и гепатозащитному действию алкалоида -аллокриптопина, с одной стороны, предоставлялось в распоряжение больше триптофана для повышенного продуцирования серотонина, который возбуждал аппетит, и, с другой стороны, благодаря более здоровой и продуктивной печени также возбуждался аппетит и удовольствие от корма. Таким образом, предложенное кормовое средство, благодаря защите незаменимых аминокислот и питательных веществ, ведет к улучшенному и недорогому содержанию животных с незаменимыми питательными веществами, которое обычно из-за более высокого подмешивания к корму должно было бы быть более дорогостоящим и, кроме того, оно улучшает состояние здоровья животных благодаря гепатозащитному действию -аллокриптопина.

В испытуемой группе по сравнению с контрольной группой наблюдали повышение ежедневного привеса. Влияние содержания алкалоидов в кормовом средстве на усвоение корма в данном исследовании не было установлено, так как дополнительно потребляемый корм был полезен для увеличенного роста.

Пример 9

Влияние -аллокриптопина и бензофенантридиновых алкалоидов в корме на уровни триптофана и лизина в плазме

В данном примере изучено влияние -аллокриптопина и бензофенантридиновых алкалоидов на уровень в плазме незаменимых аминокислот триптофана и лизина у свиней на откорме. Нужно было показать, что бензофенантридиновые алкалоиды, такие как сангвинарин и хелеритрин в сочетании с -аллокриптопином, необратимо ингибируют нежелательные ферменты бактерий, разрушающие незаменимые аминокислоты, в результате чего в распоряжение для абсорбции поступает больше незаменимых питательных веществ, таких как незаменимые аминокислоты (триптофан, лизин, метионин). Исследование должно было показать, приводило ли уменьшенное нежелательное разложение незаменимых аминокислот согласно изобретению к их более высоким значениям в крови in vivo, которые позднее поступали в распоряжение для роста и продуктивности, или же можно было сэкономить на уменьшенном введении в корм.

12 кастрированных свиней содержали раздельно в респирационных камерах. Контрольная группа и испытуемая группа содержали каждая по 6 животных. Состав корма для контрольной и испытуемой групп был как в примере 8. Чтобы можно было непосредственно сравнивать результаты, кормили ограниченно и, притом, фиксировали на 95 г/кг метаболической массы тела (BW^0,75).

Фаза адаптации животного составляла 10 дней, после чего фаза опыта продолжалась в течение 7 дней. В последний день перед кормлением и через один час после кормления брали пробы крови для анализа на триптофан и лизин.

Как можно видеть из таблицы 11, опыты относительно ежедневного привеса и усвоения корма показывают для испытуемой группы лучшие результаты, чем для контрольной группы.

Таблица 11

Влияние -аллокриптопина и бензофенантридиновых алкалоидов на продуктивность роста свиней на откорме (среднее значение ± стандартное отклонение, n = 6)

	Контрольная группа	Испытуемая группа
Исходная масса, кг	37,0±0,6	36,5±0,2
Конечная масса, кг	45,3±0,9	44,9±1,2
Ежедневный привес, г/день	828±25	841±28
Усвоение корма	1,86±0,06	1,84±0,06

Изучение возникающих до и после приема корма концентраций триптофана и лизина в плазме в обеих группах показывает их заметное повышение. Возникающие после приема корма концентрации триптофана и лизина в испытуемой группе были заметно выше, чем в контрольной группе. Это показывает, что имеет место ингибирование invivo аминокислотной декарбоксилазы бензофенантридиновыми алкалоидами, в частности, сангвинарином, и -аллокриптопином, что «защищенные» триптофан и лизин активно поступают в тонкий кишечник для абсорбции, и что корм, содержащий -аллокриптопин и бензофенантридиновые алкалоиды, способен привести к большей пользе триптофана и лизина в корме.

Пример 10

Влияние -аллокриптопина и бензофенантридиновых алкалоидов на свиней в период лактации и опороса, вызванное более высоким потреблением корма и более высоким предоставлением питательных веществ invivo на основе показанного в примерах 7 и 9 эффекта предложенного корма.

В данном примере показано влияние -аллокриптопина и бензофенантридиновых алкалоидов в корме на прием корма свиньями в период лактации и на продуктивность свиней и их помета в период лактации.

106 свиней (72 свиньи породы Ландрас × Крупная Белая, 34 свиньи породы Лейкома) в соотношениях с первого по девятое (3,6±0,2, среднее значение ± стандартное отклонение) размещали согласно их соотношению. Все животные получали одинаковый кукурузно-соевый корм (метаболизируемая энергия 13,8 MJ/кг; 17,5% ХР), причем к указанному корму в случае обеих испытуемых групп добавляли 30 или 50 ч/млн добавок, названных в примере 8. Начинали дачу данного корма за 4 дня до опороса и продолжали в течение 20 дней после него.

Наблюдали незначительное увеличение потребления корма в испытуемой группе по сравнению с контрольной группой. На процент выживаемости поросят, измеренный на 20 день, содержание алкалоидов не влияло. При сравнении старых свиней с поросившимися три и более раз показано отсутствие различий в привесе помета.

Однако, если сравнить свиней с первым опоросом и свиней со вторым опоросом, между испытуемыми группами с бензофенантридиновыми алкалоидами и -аллокриптопином обнаруживается совершенно другая картина. Обнаруживали заметное возрастание привеса помета испытуемой группы по сравнению с контрольной группой. Таким образом, можно заключить, что добавка к корму -аллокриптопина и бензофенантридиновых алкалоидов положительно влияет на привес поросят в помете впервые опоросившихся свиней в период кормления молоком.

В результате ингибирования AAD в распоряжение поступает больше триптофана, что приводит к большему потреблению корма свиньями. Это в соединении с большим количеством лизина в качестве важного питательного вещества для синтеза белка, в свою очередь, вызывает повышенное продуцирование молока, которое, со своей стороны, положительно влияет на рост поросят.

Пример 11

Влияние -аллокриптопина и бензофенантридиновых алкалоидов в корме на параметры продуктивности и убойной туши свиней на откорме.

Компонентами корма (метаболизируемая энергия 13,8 MJ/кг; 1,00% лизина) были:

Ячмень	46%
Пшеница	35,40%
Шрот соевого экстракта	11,40%
Рыбная мука	2,21%
Соевое масло	2,00%
Кормовая известь	1,00%
Дикальцийфосфат	0,74%
Соль	0,25%
Предварительно составленная смесь: микроэлементы + витамины	1,00%

К корму для испытуемой группы добавляли 30 ч/млн добавки, состоящей из растительного материала Sanguinariacanadensis и Macleayacordata. Содержащиеся в нем основные алкалоиды представляли собой, главным образом, сангвинарин и хелеритрин, а также -аллокриптопин. Всех животных кормили дважды в день semi ad libitum, и они всегда имели доступ к воде.

Средние массы тела в начале и в конце испытания были следующими:

	Контрольная группа	Испытуемая группа
	Начало	Конец	Начало	Конец
Опыт	30,1±0,5	100,9±7,4	30,3±0,9	100,4±5,4

В данном испытании относительно ежедневного привеса обнаружили, что потребление корма и усвоение корма не различаются между контрольной группой и испытуемой группой. Правда, некоторые параметры убойной туши испытуемой группы были заметно лучше, чем в контрольной группе, в частности было заметно больше мышечного мяса, а также была заметно меньше толщина сала со спины.

Результаты испытания представлены на чертеже. Темные столбики представляют собой результаты контрольных групп, темные заштрихованные столбики - испытуемых групп. На чертеже демонстрируются заметные положительные результаты относительно качества убойной туши, такие как заметное уменьшение толщины сала со спины и улучшение мышечного мяса на ребрах, которые могли быть достигнуты благодаря алкалоидсодержащему корму изобретения.

Показано, что существует связь между истощением и доступностью триптофана и лизина, то есть, что применение алкалоидсодержащего корма, благодаря оптимизации баланса незаменимых аминокислот, приводит к улучшенному белковому балансу и, дополнительно, к большему количеству мяса и большему количеству молочного белка.