фармацевтические продукты, содержащие бифосфонаты

Формула изобретения

1. Фармацевтический продукт в форме готового к использованию раствора, включающий емкость, вмещающую раствор золедроновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли, в котором по крайней мере внутренняя поверхность емкости содержит пластический материал, представляющий собой полиолефин, и в котором емкость можно подвергать тепловой стерилизации.

2. Продукт по п.1, в котором объем разовой дозированной формы составляет от примерно 20 до примерно 500 мл.

3. Продукт по п.1 или 2, содержащий буферный компонент, предпочтительно буферное основание, более предпочтительно буферное органическое основание.

4. Продукт по п.3, в котором рН при помощи органического основания доводят до физиологически приемлемого значения от 5,5 до 8,0, предпочтительно от 6,0 до 7,5, наиболее предпочтительно 6,5.

5. Продукт по п.4, в котором органическим основанием является цитрат натрия.

6. Продукт по п.4, в котором органическим основанием является ацетат натрия.

7. Продукт по п.3, в котором основанием является фосфат натрия или калия.

8. Продукт по п.3, в котором основанием является гидроокись натрия или калия.

9. Продукт по п.1, содержащий изотонирующий компонент, предпочтительно неионный изотонизирующий компонент, более предпочтительно сахар, эфир или спирт, например, маннит, 1,2-пропиленгликоль, глицерин и сорбит, особо предпочтительно маннит.

10. Продукт по п.9, где изотонирующий компонент представляет собой неионный изотонизирующий компонент, который можно анализировать с пределом обнаружения для золедроновой кислоты и ее побочных продуктов и продуктов распада, составляющим по меньшей мере 0,1% от заявленной дозы, предпочтительно без применения стадии дериватизации.

11. Продукт по п.10, который для определения золедроновой кислоты и ее побочных продуктов и продуктов разложения анализируют методом хроматографии с обращенной фазой с комплексообразующим компонентом, например ЭДТК.

12. Фармацевтический продукт, содержащий емкость, вмещающую золедроновую кислоту в форме готового к использованию раствора, и включающий:

а) разовую дозу золедроновой кислоты;

б) органическое буферное основание и

в) неионный изотонизирующий компонент,

в котором по крайней мере внутренняя поверхность емкости содержит прозрачный пластиковый материал и в котором заполненная емкость на заключительной стадии обрабатывается тепловой стерилизацией.

13. Продукт по п.1, в котором в качестве емкости используют предварительно заполненный пластиковый шприц.

14. Продукт по п.1, в котором пластиковый материал является прозрачным.

15. Продукт по п.1, в котором пластиковый материал является циклоолефиновым полимером.

16. Продукт по п.15, в котором пластиковым материалом является полимер Daikio CZ или аналогичный циклоолефиновый полимер.

17. Продукт по п.15, в котором пластиковым материалом является полимер Tocona TOPAS.

18. Продукт по п.15, в котором пластиковым материалом является Schott TopPac флакон или шприц.

19. Продукт по п.1, в котором емкость представляет собой мешок для вливаний.

20. Продукт по п.19, в котором мешок для вливаний изготавливают из полипропилена, смеси полипропилен/Kraton, многослойный мешок для вливаний, содержащий пропилен или полиэтилен со стороны, контактирующей с продуктом.

21. Продукт по п.19, в котором в качестве мешка для вливаний используют емкость Baxter Intravia.

22. Продукт по п.19, в котором в качестве мешка для вливаний используют емкость Braun Ecoflac.

23. Продукт по п.19, в котором в качестве мешка для вливаний используют емкость Braun PAB.

24. Продукт по п.19, в котором мешок для вливаний изготовлен из фольги Cryovac M312.

25. Продукт по п.1, в котором емкость изготавливают по технологии продуть/заполнить/укупорить, а материалом емкости является полиэтилен или полипропилен.

26. Продукт по п.25, в котором емкость изготавливают по технологии продуть/заполнить/укупорить, а материалом емкости является полипропилен.

27. Продукт по п.25, в котором емкость изготавливают по технологии продуть/заполнить/укупорить, а материалом емкости является полипропилен Rexene 32M2.

28. Продукт по п.1, в котором соль золедроновой кислоты представляет собой N-бифосфонат или его фармакологически приемлемую соль.

29. Способ получения готового к использованию фармацевтического продукта золедроновой кислоты, содержащего емкость, вмещающую раствор золедроновой кислоты, в котором раствор золедроновой кислоты помещают внутрь емкости, в которой по крайней мере внутренняя поверхность содержит прозрачный пластический материал и в котором емкость, содержащую раствор золедроновой кислоты, на конечной стадии стерилизуют методом тепловой стерилизации, предпочтительно методом влажной тепловой стерилизации.

30. Способ по п.29, в котором емкость на конечной стадии стерилизуют методом тепловой стерилизации.

31. Способ по п.29, в котором тепловую стерилизацию проводят при температуре от примерно 110 до 130°С или выше, например, при температуре, по меньшей мере, 121°С или выше, например, предпочтительно при температуре примерно от 121 до 124°С.

32. Способ по п.29, в котором время выдержки составляет от примерно 15 мин до 3 ч, обычно - от примерно 15 мин до примерно 2 ч, например, предпочтительно примерно 30 мин.

33. Способ по п.29, в котором условия стерилизации в автоклаве обеспечивают уровень гарантии стерильности, по крайней мере, 10^-6, например, посредством автоклавной обработки (время выдержки) при температуре >121°С в течение, по крайней мере, 8-кратного времени, соответствующего значению D₁₂₁ раствора.

34. Способ по п.29, в котором условия стерилизации в автоклаве обеспечивают уровень гарантии стерильности, по крайней мере, 10^-12, например, посредством автоклавной обработки (время выдержки) при температуре >121°С в течение, по крайней мере, 14-кратного времени, соответствующего значению D₁₂₁ раствора.

35. Способ по п.29, в котором емкость депирогенизируют до заполнения раствором золедроновой кислоты, обычно путем промывания водой, предпочтительно под давлением.

36. Способ по п.29, в котором получают емкости, не содержащие или в основном не содержащие эндотоксин/пироген, и заполняют их раствором золедроновой кислоты.

37. Способ по п.29, в котором продукт содержит неионный изотонизирующий компонент и для определения золедроновой кислоты и ее побочных продуктов используют ионную хроматографию, капиллярный электрофорез или высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ).

38. Способ по п.29, в котором продукт содержит неионный изотонизирующий компонент и для определения золедроновой кислоты и ее побочных продуктов и продуктов разложения используют хроматографию с обращенной фазой, предпочтительно с комплексообразующим компонентом, например ЭДТК, предпочтительно с пределом обнаружения, составляющим, по меньшей мере, 0,1% от заявленной дозы, предпочтительно без применения стадии дериватизации.

Описание изобретения к патенту

Настоящее изобретение относится к фармацевтическим продуктам и способам их получения, в частности к фармацевтическим продуктам, содержащим бифосфонаты, и к способам получения продуктов бифосфонатов.

Бифосфонаты широко используются для подавления активности остеокласта при различных доброкачественных и злокачественных заболеваниях, которые вызывают чрезмерную или несоответствующую резорбцию кости. Эти аналоги полифосфатов не только уменьшают встречаемость случаев, связанных с костной системой, но также обеспечивают пациентам клиническую помощь и уменьшают смертность. Бифосфонаты способны in vivo предотвратить резорбцию кости. Была продемонстрирована терапевтическая эффективность бифосфонатов для лечения пористости костей, остеопороза, деформирующего остита, индуцированной опухолью гиперкальциемии (ИОГ) и, сравнительно недавно, для лечения метастаз кости (МК) и множественной миеломы (ММ) (см. Fleisch H, 1997, Bisphosphonates clinical. In Bisphosphonates in Bone Disease. From the Laboratory to the Patient. Eds: The Parthenon Publishing Group, New York/London, pp 68-163).

Обычными дозированными формами бифосфоната, например для лечения ИОГ, МК и ММ, являются растворы для внутривенного вливания. Однако растворы бифосфонатов хотя и являются по существу стабильными, реагируют с двух- и многовалентными катионами, в особенности с кальцием, барием, магнием, алюминием, бором и кремнием, присутствующими в стекле, при этом образуются нерастворимые осадки, которые являются причинами появления мутности и возможной потери активности, что недопустимо в фармацевтическом продукте. Более того, эти осадки могут вызывать блокаду кровеносных сосудов и таким образом могут приводить к тромбозу, что существенно затрудняет лечение. Таким образом, длительное хранение составов растворов бифосфонатов в обычных стеклянных флаконах, даже изготовленных из гидролитически устойчивого стекла класса I, невозможно. Кроме того, стеклянные флаконы с таким раствором не могут быть подвергнуты заключительной влажной тепловой стерилизации и должны заполняться асептически, поскольку повышенная температура, при которой проводится влажная тепловая стерилизация, ускоряет выщелачивание катионов. Было показано, что при значениях рН, приемлемых для парентеральной доставки, из серийно выпускаемых стеклянных емкостей выщелачиваются значительные количества ионов (Farm. Vestnik. Vol 54, p.331 (2003)). Следовательно, для кратковременного хранения растворов в стеклянных изделиях заполнение растворами необходимо проводить асептически, хотя, если принять во внимание высокую химическую стабильность растворов бифосфонатов, их тепловая стерилизация по существу возможна. Такое асептическое заполнение не соответствует принятым в настоящее время нормам обработки, приведенным в документе CPMP/QWP/054/98 corr., "Decision trees for the selection of sterilisation methods", выпущенном European Agency for the Evaluation of Medicinal Products (Европейским Агентством по Контролю и Стандартизации лекарственных препаратов) (ЕМЕА). В соответствии с этим же документом «использование несоответствующих термолабильных упаковочных материалов само по себе не может быть единственной причиной для выбора асептической технологии».

Вследствие этого продукты бифосфонаты для внутривенного вливания обычно выпускают в форме твердых лиофилизатов, которые не проявляют способностей стимуляции микробного роста по сравнению с неконсервированными растворами бифосфонатов при физиологически приемлемых рН. Перед использованием лиофилизаты с помощью воды для инъекций или других водных растворителей переводят в растворы для инъекций, например Aredia® and Zometa®. При разбавлении концентрированных растворов фосфоновой кислоты из-за низкой растворимости осадков, образуемых двухвалентными и многовалентными катионами, даже небольшие количества примесей щелочно-земельных металлов, присутствующие во всех серийно выпускаемых соляных растворах и растворах хлорида натрия, могут приводить к образованию таких осадков.

Недавно был предложен фармацевтический продукт (WO 02/22136, F.Н.Faulding & Со Ltd.), в состав которого входит емкость, содержащая раствор бифосфоната, в котором раствор: (а) имеет рН от 5 до 8 и (б) не содержит органического буферного компонента и полиэтиленгликоля и в котором емкость является стеклянной емкостью, в которой поверхность, находящуюся в контакте с раствором, предварительно обрабатывают для защиты от выщелачивания примесей из стекла раствором, или в котором емкость содержит по крайней мере один компонент, изготовленный из материала, отличного от стекла, такого как полиэтилен, полипропилен и полиметилпентен. Однако в WO 02/22136 не указано, что делать для стерилизации продукта. Кроме того, в этой ссылке не приведен метод поддержания стабильного значения рН в процессе хранения составов, изготовленных с низкими дозами сильнодействующих бифосфонатов, например золедроновой кислоты.

Было найдено, что могут быть приготовлены составы растворов бифосфонатов для длительного хранения в емкостях, содержащих полимерные материалы, которые не взаимодействуют химически с раствором бифосфоната и которые на конечной стадии могут быть легко стерилизованы.

В соответствии с настоящим изобретением предлагается готовый для употребления фармацевтический продукт бифосфоната, содержащий емкость, содержащую раствор бифосфоната, в котором по крайней мере внутренняя поверхность емкости содержит пластиковый материал и в котором емкость можно подвергать тепловой стерилизации.

Продукты в соответствии с настоящим изобретением являются предпочтительно растворами для парентерального применения, которые не требуют преобразования лиофилизата перед использованием. Можно также легко провести тепловую стерилизацию продукта in situ в емкости в процессе получения, предпочтительной является влажная тепловая стерилизация (например паром, достигаемый при этом уровень гарантии стерильности составляет по меньшей мере 10^-6 ). Кроме того, эти готовые к употреблению растворы не требуют разбавления перед использованием.

Продукты в соответствии с настоящим изобретением могут применяться перорально, чрескожно или для инъекций, например подкожных, артериальных или внутривенных. Наиболее предпочтительно применение для внутривенных вливаний.

Продукты в соответствии с настоящим изобретением содержат готовые к употреблению растворы, в которых бифосфонаты присутствуют в концентрации, пригодной для непосредственного применения без разбавления, и упоминаются как «готовые к употреблению растворы».

Предпочтительно продукт готового к употреблению раствора является разовой дозой готового к употреблению раствора, то есть содержит дозу бифосфоната, достаточную для однократного применения. Такая разовая доза продуктов готового к употреблению раствора для вливаний обычно имеет объем от примерно 20 до примерно 500 мл, как правило, от примерно 50 до примерно 250 мл, предпочтительно 100 мл (в которых эти объемы могут дополнительно содержать примерно 20 мл, например предпочтительно 2 мл, сверх этих значений, чтобы вместить жидкость, остающуюся в емкости, когда готовый к употреблению раствор вливают пациенту).

Значения рН таких готовых к употреблению растворов легко довести до физиологически приемлемых величин с помощью оснований. Было найдено, что применение органических оснований, обладающих способностями комплексообразования с катионами, позволяет избежать незначительного замутнения, возникающего в результате осаждения лекарственного вещества катионными примесями вспомогательных веществ. Было также обнаружено, что в отличие от сильных неорганических оснований, таких как гидроокись натрия, в этом случае in situ образуется слабая буферная система с самим бифосфонатом, которая позволяет легко получить заданное значение рН и обеспечивает оптимальную стабильность рН в течение всего срока хранения. Раствор предпочтительно имеет рН от примерно 4,5 до примерно 8, более предпочтительно - от примерно 5,5 до 7,5, например примерно 6,5 или примерно 6,8, или примерно 7,2. Примеры соответствующих органических оснований включают натриевые или калиевые соли органических кислот, таких как уксусная кислота, лимонная кислота, молочная кислота, глутаминовая кислота, виннокаменная кислота, фумаровая кислота, малеиновая кислота или яблочная кислота. Кроме того, можно применять основные формы аминокислот, например гистидин или аргинин. Примерами подходящих неорганических оснований являются фосфат натрия или калия, гидрокарбонат натрия или гидроокись натрия. Можно также использовать смеси указанных выше оснований или смеси оснований с соответствующими им кислотами. Например, состав может содержать основание, например цитрат натрия с кислотой, например хлористоводородной. Предпочтительно используется соль натрия или калия. При использовании солей калия необходимо очень внимательно определять физиологическую переносимость и не рекомендуется превышать физиологическую концентрацию калия в сыворотке крови, которая составляет приблизительно 4 мМ/л.

Такие готовые к употреблению растворы обычно могут также содержать изотонический компонент. Предпочтительно тонус раствора составляет от примерно 250 до примерно 400 мОсм/кг, более предпочтительно - 260 до примерно 350 мОсм/кг, например примерно 300 мОсм/кг. Примерами соответствующих изотонизирующих компонентов являются глицерин, полиэтиленгликоль, пропиленгликоль, этанол, циклодекстрины, аминокислоты, сахара и сахарные спирты: глюкоза, фруктоза, манноза, сахароза, маннит, лактоза, трегалоза, мальтоза, сорбит, хлорид натрия, нитрат натрия, хлорид калия, мочевина, хлористый аммоний. Предпочтительно изотонизирующий компонент является неионным изотонизирующим компонентом, более предпочтительно - сахар, эфир, спирт или полиол (высокомолекулярный спирт). Наиболее предпочтительными для использования в преконцентратах растворов являются маннит, 1,2-пропиленгликоль, гликоль и сорбит, из которых особо предпочтительным является маннит.

В соответствии с настоящим изобретением было найдено, что использование неоинных изотонизирующих компонентов позволяет проводить простые и надежные анализы, например, методом ионной хроматографии, капиллярного электрофореза и высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Было найдено, что ВЭЖХ с обращенной фазой с ультрафиолетовым детектированием при использовании ион-парного реагента (например гидросульфата тетрагексиламмония) и комплексообразующего компонента (например этилендиаминтетрауксусной кислоты, ЭДТК) позволяет надежно определять очень низкую концентрацию бифосфоната и в особенности концентрацию возможных побочных продуктов и продуктов разложения. Возможность определения таких побочных продуктов и продуктов разложения на уровне низких концентраций, в которых они присутствуют в готовых к употреблению продуктах, является крайне важным преимуществом. При этом не требуется стадия дериватизации. В соответствии с настоящим изобретением для продукта готового к употреблению раствора можно проводить надежное количественное определение концентраций на уровне 0,04 мкг/мл. Это соответствует 0,1% от заявленной дозы, что является обязательным пределом, который необходимо достичь для выполнения международных требований.

Напротив, при использовании одного из обычных ионных изотонизирующих компонентов, например хлорида натрия, они до такой степени мешают хроматографическим измерениям, что надежные количественные измерения потенциальных побочных продуктов и продуктов распада становятся невозможными.

Таким образом, в конкретных вариантах осуществления изобретения описанный выше продукт содержит неионный изотонизирующий компонент и:

(I) продукт анализируют количественно с пределом обнаружения бифосфоната и его побочных продуктов и продуктов распада, составляющим по крайней мере 0,1% от заявленной дозы, предпочтительно без применения стадии дериватизации и

(II) продукт анализируют методом хроматографии с обращенной фазой с комплексообразующим компонентом, например ЭДТК, для количественного измерения бифосфоната и его побочных продуктов и продуктов распада с пределом обнаружения, составляющим по крайней мере 0,1% от заявленной дозы, предпочтительно без применения стадии дериватизации.

В другом предпочтительном варианте осуществления изобретения фармацевтический предлагается продукт, содержащий емкость, содержащую раствор бифосфоната в форме готового к употреблению раствора, в состав которого входят:

а) разовая доза бифосфоната,

б) органическое основание и

в) неионный изотонизирующий компонент,

в котором по крайней мере внутренняя поверхность емкости содержит прозрачный пластиковый материал и в котором емкость на заключительной стадии подвергают тепловой стерилизации.

Готовый к употреблению раствор может выпускаться в мешках для вливаний, например таких, какие обычно применяются для других терапевтических продуктов для вливаний, например пластиковые мешки для вливаний, изготовленные из поливинилхлорида, полиолефиновых сополимеров, Cryovac® M312 foil (Sealed Air Corporation), Baxter Intravia®, и B.Braun PAB (полипропилен с 10% термопласта на основе блоксополимера стирола, этилен - бутиленов, стирола (СЭБС)), или аналогичные мешки для вливаний.

Продукт в соответствии с настоящим изобретением может содержать стеклянную емкость, имеющую прозрачную внутреннюю пластиковую футеровку. Однако предпочтительно емкость изготовлена из пластикового материала и не имеет внешней стеклянной оболочки. Примеры пластических материалов, которые могут использоваться для этого, включают полисульфон, поликарбонат, полипропилен, полиэтилен (полиэтилен низкой плотности (ПЭНП) или полиэтилен высокой плотности (ПЭВП)), сополимеры этилен/пропилен, полиолефины, акрил-имидные сополимеры, поливинихлорид (ПВХ), полиэфир (например полиэтилентерефталат (ПЭТ), полиметилметакрилат (ПЭМ) и другие), Teflon, Nylon, ацеталь (Delrin), полиметилпентен, поливиниледенхлорид (ПВДХ), этиленвинилацетат, сополимер акрилонитрила и другие. Пластический материал, используемый для любого типа емкости, предпочтительно является прозрачным, то есть просвечивающим, и позволяет визуально контролировать содержимое.

Кроме того, используемый пластический материал в заполненном или незаполненном состоянии способен выдержать тепловую стерилизацию, предпочтительно влажную стерилизацию, например стерилизацию паром или орошением перегретой водой, при температуре по крайней мере от примерно 110 до примерно 130°С или выше, например при температуре по крайней мере 121°С, например от 121 до 124°С.

Особо предпочтительными пластическими материалами для емкости являются прозрачные циклоолефиновые полимеры, такие как полимер Daikyo CZ, термопластические олефиновые полимеры с аморфной структурой (например TOPAS, производства Ticona). Наиболее предпочтительными являются полимер Daikyo CZ и аналогичные циклоолефиновые полимеры.

Готовые к употреблению продукты могут помещаться в пластиковые или покрытые пластиком флаконы объемом от примерно 20 до примерно 500 мл, например примерно 100 мл.

Растворы бифосфоната могут также применяться для медленного внутривенного вливания более концентрированных форм, например концентраций бифосфоната от примерно 0,01 до примерно 0,5, обычно от примерно 0,05 до примерно 0,2 мг/мл. Для этого продукт помещают в предварительно заполняемые шприцы, которые затем могут быть стерилизованы методом влажной тепловой стерилизации, например в шприцы, изготовленные из полимера Dikyo CZ или аналогичного, или из термопластических олефиновых пластиков с аморфной структурой (например продаваемых Schott под торговым наименованием Schott Top Рас или аналогичных).

Кроме того, серийно выпускаемые пластические материалы, аналогичные полимеру Daikyo CZ, в соответствии с ASNM (Американское общество по испытанию материалов) D648 имеют температуру термической деформации, равную 123°С, что ограничивает максимальную допустимую температуру стерилизации значением 123°С. Было найдено, что стерилизация даже при значительно более высоких температурах, например при 130°С, не вызывает заметных деформаций емкости или нарушения герметичности ее укупорочного средства.

Предпочтительно бифосфонаты, используемые в настоящем изобретении, представляют собой азотсодержащие бифосфонаты, включая бифосфонаты с боковыми цепями, содержащими аминогруппы, или, в частности, бифосфонаты с боковыми цепями, содержащими азотсодержащие гетероциклы, наиболее предпочтительно, ароматические азотсодержащие гетероциклы.

Примеры бифосфонатов, пригодных для применения в настоящем изобретении, могут включать следующие соединения или их фармацевтически приемлемые соли: 3-амино-1-гидроксипропан-1,1-дифосфоновую кислоту (памидроновую кислоту), например памидронат (ПД); 3-(N,N-диметиламино)-1-гидроксипропан-1,1-дифосфоновую кислоту, например диметил-ПД; 4-амино-1-гидроксибутан-1,1-дифосфоновую кислоту (алендроновую кислоту), например алендронат; 1-гидрокси-этиден-дифосфоновую кислоту, например этидронат; 1-гидрокси-3-(метилпентиламино)-пропилиден-дифосфоновую кислоту, (ибандроновую кислоту), например ибандронат; 6-амино-1-гидроксигексан-1,1-дифосфоновую кислоту, например амино-гексилбифосфонат; 3-(N-метил-N-н-пентиламино)-1-гидроксипропан-1,1-дифосфоновую кислоту, например метил-ентил-ПД (=ВМ 21,0955); 1-гидрокси-2-(имидазол-1-ил)этан-1,1-дифосфоновую кислоту, например золедроновую кислоту; 1-гидрокси-2-(3-пиридил)этан-1,1-дифосфоновую кислоту (ризедроновую кислоту), например ризедронат, включая соли N-метилпиридиния, например иодиды N-метилпиридиния, такие как NE-10244 или NE-10446; 1-(4-хлорфенилтио)метан-1,1-дифосфоновую кислоту (тилудроновую кислоту), например тилудронат; 3-[N-(2-фенилтиоэтил)-N-метиламино]-1-гидроксипропан-1,1-дифосфоновую кислоту; 1-гидрокси-3-(пирролидин-1-ил)пропан-1,1-дифосфоновую кислоту, например ЕВ 1053 (Leo); 1-(N-фениламинотиокарбонил)метан-1,1-дифосфоновую кислоту, например FR 78844 (Fujisawa); тетраэтиловый эфир 5-бензоил-3,4-дигидро-2Н-пиразол-3,3-дифосфоновой кислоты, например U-81581 (Upjohn); 1-гидрокси-2-(имидазол[1,2-а]пиридин-3-ил)этан-1,1-дифосфоновую кислоту, например YM 529; и 1,1-дихлорметан 1,1-дифосфоновую кислоту (клодроновую кислоту), например клодронат.

Особо предпочтительным применением в настоящем изобретении является бифосфонат, содержащий соединение формулы I

в которой

Het обозначает имидазольную, оксазольную, изооксазольную, оксадиазольную, тиазольную, тиадиазольную, пиридиновую, 1,2,3-триазольную, 1,2,4-триазольную или бензимидазольную группу, необязательно замещенную алкильной, алкоксильной, галогеновой, гидроксильной, карбоксильной группой, аминогруппу, необязательно замещенную алкильной или алканоильной группой, или бензильную группу, необязательно замещенную алкильной, нитро-, амино- или амино-алкильной группой;

А обозначает насыщенную или ненасыщенную углеводородную группу с неразветвленной или разветвленной цепью, содержащую от 1 до 8 атомов углерода;

Х обозначает атом водорода, необязательно замещенный алканоильной группой, или аминогруппу, необязательно замещенную алкильной или алканоильной группой и

R обозначает атом водорода или алкильную группу, и его фармацевтически приемлемые соли.

Примерами соединений особо предпочтительных для использования в настоящем изобретении являются:

2-(1-метилимидазол-2-ил)-1-гидроксиэтан-1,1-дифосфоновая кислота;

2-(1-бензилимидазол-2-ил)-1-гидроксиэтан-1,1-дифосфоновая кислота;

2-(1-метилимидазол-4-ил)-1-гидроксиэтан-1,1-дифосфоновая кислота;

1-амино-2-(1-метилимидазол-4-ил)этан-1,1-дифосфоновая кислота;

1-амино-2-(1-бензилимидазол-4-ил)-этан-1,1-дифосфоновая кислота;

2-(1-метилимидазол-2-ил)этан-1,1-дифосфоновая кислота;

2-(1-бензилимидазол-2-ил)этан-1,1-дифосфоновая кислота;

2-(имидазол-1-ил)-1-гидроксиэтан-1,1-дифосфоновая кислота;

2-(имидазол-1-ил)этан-1,1-дифосфоновая кислота;

2-(4Н-1,2,4-триазол-4-ил)-1-гидроксиэтан-1,1-дифосфоновая кислота;

2-(тиазол-2-ил)этан-1,1-дифосфоновая кислота;

2-(имидазол-2-ил)этан-1,1-дифосфоновая кислота;

2-(2-метилимидазол-4(5)-ил)этан-1,1-дифосфоновая кислота;

2-(2-фенилимидазол-4(5)-ил)этан-1,1-дифосфоновая кислота;

2-(4,5-диметилимидазол-1-ил)-1-гидроксиэтан-1,1-дифосфоновая кислота и

2-(2-метилимидазол-4(5)-ил)-1-гидроксиэтан-1,1-дифосфоновая кислота и их фармацевтически приемлемые соли.

Более предпочтительными для применения в настоящем изобретении являются динатрий-3-амино-1-гидрокси-пропилиден-1,1-бифосфоната пентагидрат (памидроновая кислота) и 2-(имидазол-1-ил)-1-гидроксиэтан-1,1-дифосфоновой кислоты (золедроновая кислота) или их фармацевтически приемлемые соли.

Наиболее предпочтительной для применения в настоящем изобретении является 2-(имидазол-1-ил)-1-гидроксиэтан-1,1-дифосфоновая кислота (золедроновая кислота) или ее фармацевтически приемлемые соли.

Особо предпочтительные готовые к употреблению продукты имеют разовую дозированную форму и содержат от 2 до 10 мг золедроновой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли. Наиболее предпочтительная порционная доза продукта содержит количество золедроната, эквивалентное от 4 до 5 мг безводной золедроновой кислоты, как подробно описано в Примерах.

Фармацевтически приемлемые соли предпочтительно представляют собой соли оснований, обычно легко получаемые соли металлов Iа, Iб, IIа и IIб Периодической таблицы элементов, включая соли щелочных металлов, например соли натрия и особенно калия, а также соли аммония или органических аминов.

Особо предпочтительными являются фармацевтически приемлемые соли, в которых один, два, три или четыре, предпочтительно два или три, кислотных водорода дифосфоновой кислоты замещены фармацевтически приемлемым катионом, в частности натрием, калием или аммонием, наиболее предпочтительно натрием.

Наиболее предпочтительная группа фармацевтически приемлемых солей отличается тем, что имеет по крайней мере один кислотный водород и один фармацевтически приемлемый катион, в частности натрий, в каждой из фосфоновых кислотных групп.

Все производные дифосфоновой кислоты, перечисленные выше, подробно описаны в литературе. Также описано их получение (см., например, ЕР-А-513760, с.13-48). Получение 3-амино-1-гидроксипропан-1,1-дифосфоновой кислоты описано, например, в US 3962432, динатриевой соли - в US 4639338 и BU S4711880, 1-гидрокси-2-(имидазол-1-ил)этан-1,1-дифосфоновую кислоту получают в соответствии, например, с US 4939130. Эти вопросы также рассматриваются US 4777163 и US 4687767 и ЕР 0275821В.

Настоящее изобретение также относится к способам получения продуктов растворов, в которых обычно заключительной стадией является тепловая стерилизация.

В соответствии с другим объектом изобретения предлагается способ получения фармацевтического продукта, в состав которого входит емкость, содержащая раствор бифосфоната, в котором раствор бифосфоната помещают внутрь емкости, в которой по крайней мере внутренняя поверхность содержит прозрачный пластический материал и в котором заключительной стадией является тепловая стерилизация емкости, содержащей раствор бифосфоната.

Таким образом, контейнер, содержащий раствор бифосфоната, стерилизуют методом тепловой стерилизации, предпочтительно влажной тепловой стерилизации, например насыщенным паром, смесями пар/воздух или орошением перегретой водой, при температуре по меньшей мере от примерно 110 до примерно 130°С или выше, например при температуре по крайней мере 121°С или выше, например предпочтительно при примерно от 121 до 124°С. Эффективное время стерилизации зависит от значения D спор тест-культур в растворе и должно быть таким, чтобы получить суммарный уровень гарантии стерильности по крайней мере 10^-6, предпочтительно по крайней мере 10^-12. Эффективное время стерилизации (время стерилизационной выдержки) может быть от примерно 15 минут до примерно 3 часов, обычно - от примерно 15 минут до примерно 2 часов, например предпочтительно 30 минут. Предпочтительно тепловая стерилизацию является заключительной стадией тепловой стерилизации, то есть эту тепловую стерилизацию проводят в конце или после завершения процесса получения, после заполнения емкости раствором бифосфоната и предпочтительно после закупоривания емкости, например соответствующей крышкой, пробкой или другим укупорочным средством. Может применяться обычное технологическое оборудование для обработки стеклянных флаконов. Могут применяться пробки, характеризующиеся незначительным выщелачиванием ионов металлов, таких как кальций, магний, цинк или кремний при контакте с водными растворами, например растворами бифосфонатов. Предпочтительно пробки имеют низкую зольность и покрыты со стороны продукта непроницаемым и инертным барьером, выполненным, например, из сополимера этилена и тетрафторэтилена (ЭТФЭ), тефлона или фторированных эластомеров. Такими пробками являются, например, Daikyo D-777-1, Daikyo D-777-3, Daikyo D-713, Daikyo D-21-7S, покрытые со стороны продукта слоем ЭТФТ, или Helvoet FM259/0, покрытые слоем фторполимера (например патентованным материалом Helvoet Omniflex или Omniflex plus).

Готовый к употреблению раствор бифосфоната может быть приготовлен в большом количестве и разлит в емкости, например, с помощью известных в данной области техники методов. Основная масса раствора может быть в форме раствора свободной дифосфоновой кислоты, например золедроновой кислоты, или в форме ее соли, например соли натрия. Большой объем растворов бифосфонатов может быть приготовлен путем растворения соли в водной среде, или может быть приготовлен in situ в растворе с помощью реакции свободной дифосфоновой кислоты с основанием, например нейтрализацией кислоты гидроокисью натрия, в результате которой в зависимости от необходимости получают мононатриевую, динатриевую, тринатриевую или тетранатриевую соль, например динатрийпамидронат или динатрийзоледронат.

Согласно требованиям GMP (Правила производства лекарственных препаратов) все материалы емкостей, используемых для парентеральных продуктов, необходимо депирогенизировать, чтобы обеспечить уменьшение содержания эндотоксинов по крайней мере на 3 log единицы. Для стеклянных флаконов обычно применяют термическую депирогенизацию. Однако пластиковые емкости обычно невозможно обрабатывать на стандартных линиях заполнения стерильного фармацевтического лекарственного продукта, поскольку такие емкости не выдерживают термического напряжения, применяемого в туннельной печи для депирогенизации. Поэтому пластиковые емкости обычно обрабатывают без необходимых стадий очистки и депирогенизации, таким образом вносится риск загрязнения лекарственного продукта для парентерального применения посторонним веществом, присутствующим в емкости, а также эндотоксинами, которые могут растворяться из материала поверхности емкости. В соответствии с настоящим изобретением было найдено, что некоторые пластиковые емкости можно обрабатывать на стандартных линиях заполнения стеклянных флаконов, и что процесс очистки позволяет воспроизводимо получать уменьшение содержания эндотоксинов по крайней мере в 1000 раз.

В дополнение к стадии стерилизации емкости, в частности пластиковые емкости, могут быть депирогенизированы до их заполнения раствором бифосфоната. Обнаружили, что промывание пластиковых флаконов водой под давлением обеспечивает достаточную депирогенизацию, например уменьшение содержания эндотоксинов по меньшей мере в 1000 и более раз, например это уменьшение может составлять примерно от 16000 от 100000 раз. Предпочтительно такая стадия депирогенизации входит в способы получения настоящего изобретения.

Емкости, не содержащие или в основном не содержащие эндотоксины, могут быть также получены от поставщика, такие емкости не нуждаются в депирогенизации.

Кроме того, настоящее изобретение относится к способам получения продуктов в соответствии с настоящим изобретением, описанных выше, в которых для определения бифосфоната и его побочных продуктов и продуктов распада используют хроматографию с обращенной фазой с комплексообразующим реагентом, например ЭДТК, преимущественно с пределом обнаружения по крайней мере 0,1% от заявленной дозы, предпочтительно без применения стадии дериватизации.

Конкретный способ применения и доза продуктов настоящего изобретения могут быть выбраны лечащим врачом с учетом индивидуальных особенностей пациентов, в частности возраста, веса, образа жизни, уровня активности, гормонального состояния (например пост менопаузы) и минеральной плотности кости. Наиболее предпочтительно бифосфонат применяют внутривенно.

Обычно назначают такую дозировку, что однократная доза действующего вещества бифосфоната, назначаемая теплокровным животным весом приблизительно 75 кг, составляет от 0,002 до 20,0 мг/кг, в частности от 0,01 до 10,0 мг/кг. При необходимости эта доза может быть разбита на несколько, необязательно равных, частей.

Единица измерения «мг/кг» обозначает количество мг лекарственного препарата на кг веса млекопитающего, в том числе человека, нуждающегося в лечении.

Предпочтительно бифосфонаты назначают в дозах, которые имеют тот же порядок, что и дозы, применяемые для лечения заболеваний, для которых лечение производными дифосфоновой кислоты является классическим, таких как деформирующий остит, гиперкальциемия, индуцированная опухолью, или остеопороз. Другими словами, предпочтительно назначают такие дозы производных дифосфоновой кислоты, которые будут также терапевтически эффективны для лечения деформирующего остита, гиперкальциемии, индуцированной опухолью, или остеопороза, то есть предпочтительно их назначают в дозах, которые будут также эффективно замедлять резорбцию кости.

Далее приведены примеры, иллюстрирующие изобретение.

ПРИМЕРЫ

Пример 1: Золедроновая кислота 4 мг/100 мл

Компонент	Количество [кг] на 1000 л
Золедроновая кислота моногидрат. Соответствует 0,0400 кг безводной золедроновой кислоты	0,04264 кг
Манит	51,00 кг
Цитрат натрия	0,240 кг
Вода для инъекции	до 1015 кг = 1000 л

Приблизительно от 85 до 95% общего количества воды для инъекции помещают в сосуд для приготовления смеси из нержавеющей стали. Добавляют вспомогательные вещества маннит и цитрат натрия и растворяют при перемешивании. Добавляют лекарственное вещество золедроновую кислоту и растворяют при перемешивании. Препарат доводят до конечного веса водой для инъекции. Цитратом натрия нейтрализуют золедроновую кислоту до рН 6,5.

Раствор подают на линию заполнения и фильтруют в потоке с помощью фильтра с размером отверстий 0,2 мкм. В вымытые и высушенные 100 мл пластиковые флаконы Daikyo CZ заливают 102,0 мл раствора. Флаконы закупоривают стерилизованными пробками Helvoet FM259/0, покрытыми Omniflex plus, и запечатывают алюминиевыми колпачками. Проводят влажную тепловую стерилизацию флаконов, чтобы получить уровень гарантии стерильности 10^-12 , то есть при 121-123°C в течение 30 минут (эффективное время стерилизационной выдержки).

Продукт стабилен и не проявляет никаких признаков разложения даже в тяжелых стрессовых условиях: при температуре 50°С/относительной влажности 75% и температуре 40°С/относительной влажности 75%.

Тест	Начало	40°С/75% относительная влажность 3 месяца	50°С/75% относительная влажность 1 месяц
Количественный анализ	99,5%	101,4%	98,8%
Продукты разложения, суммарно	<0,1%	<0,1%	<0,1%
рН	6,7	6,6	6,6
Внешний вид	прозрачный, бесцветный раствор без посторонних частиц	прозрачный, бесцветный раствор без посторонних частиц	прозрачный, бесцветный раствор без посторонних частиц
Экстрагируемые компоненты	<0,05 мкг /мл	<0,05 мкг/мл	<0,05 мкг/мл

Пример 2: Золедроновая кислота 5 мг/100 мл

Компонент	Количество [кг] на 1000 л
Золедроновая кислота моногидрат. Соответствует 0,0500 кг безводной золедроновой кислоты	0,0533 кг
Маннит	49,50 кг
Цитрат натрия	0,300 кг
Вода для инъекции	до 1014,5 кг = 1000 л

Приблизительно от 85 до 95% общего количества воды для инъекции помещают в сосуд для приготовления смеси из нержавеющей стали. Добавляют вспомогательные вещества маннит и цитрат натрия и растворяют при перемешивании. Добавляют лекарственное вещество золедроновую кислоту и растворяют при перемешивании. Препарат доводят до конечного веса водой для инъекции. Цитратом натрия нейтрализуют золедроновую кислоту до рН 6,5. Раствор подают на линию заполнения и фильтруют в потоке с помощью фильтра с размером отверстий 0,2 мкм. В вымытые и высушенные 100 мл пластиковые флаконы Daikyo CZ заливают 102,0 мл раствора. Флаконы закупоривают стерилизованными пробками Helvoet FM259/0 с покрытием Omniflex plus и запечатывают алюминиевыми колпачками. Проводят влажную тепловую стерилизацию флаконов для получения уровня гарантии стерильности 10^-12, то есть при 121-123°C в течение 30 минут (время стерилизационной выдержки).

Продукт стабилен и не проявляет никаких признаков разложения в тяжелых стрессовых условиях: при температуре 50°С и относительной влажности 75%, и температуре 40°С и относительной влажности 75%.

Тест	Начало	40°С/75% относительная влажность 3 месяца	50°С/75% относительная влажность 1 месяц
Количествен- ный анализ	99,8%	100,0%	99,9%
Продукты разложения, суммарно	<0,1%	<0,1%	<0,1%
Частицы 10	10	10	5
мкл 25	0	0	0
мкл
(USP)*
рН	6,6	6,6	6,4
Внешний вид	прозрачный, бесцветный раствор	прозрачный, бесцветный раствор	прозрачный, бесцветный раствор
Экстрагируе- мые компоненты	<0,05 мкг /мл	<0,05 мкг/мл	<0,05 мкг/мл
Тяжелые металлы
Са	<50 мкг/л	<50 мкг/л	<50 мкг/л
Mg	<50 мкг/л	<50 мкг/л	<50 мкг/л
Al	<100 мкг/кг	<100 мкг/кг	<100 мкг/кг
Cd	<100 мкг/кг	<100 мкг/кг	<100 мкг/кг

Тест	Начало	40°С/75% относительная влажность 3 месяца	50°С/75% относительная влажность 1 месяц
Cr	<100 мкг/кг	<100 мкг/кг	<100 мкг/кг
Cu	<100 мкг/кг	<100 мкг/кг	<100 мкг/кг
Fe	<100 мкг/кг	<100 мкг/кг	<100 мкг/кг
Ti	<100 мкг/кг	<100 мкг/кг	<100 мкг/кг
Zn	<100 мкг/кг	<100 мкг/кг	<100 мкг/кг
* Фармакопея США

Пример 3: Регулирование рН составов золедроновой кислоты различными основаниями

533,1 мг золедроновой кислоты моногидрата (эквивалент 500 мг золедроновой кислоты) и 480,0 г маннита добавляют к 7520 г воды для инъекций и перемешивают до получения прозрачного раствора общим весом 8000 г. Каждые 800 г этого раствора (эквивалент 50 мг золедроновой кислоты) титруют

(а) раствором дигидрата тринатрий цитрата в воде для инъекций концентрацией 0,500 г/100 мл;

(б) раствором 0,500 г/100 мл безводного ацетата натрия в воде для инъекций;

(в) раствором 0,500 г/100 мл динатрийтартрата дигидрата в воде для инъекций;

(г) раствором 0,500 г/100 мл тринатрийфосфата гексагидрата в воде для инъекций;

(д) раствором 0,400 г/100 мл гидроокиси натрия в воде для инъекций.

После каждого добавления 200 мкл раствора основания потенциометрическим методом измеряют рН. Данные показывают, что поскольку константы диссоциации рКа золедроновой кислоты составляют 5,9 и 8,28, при использовании в качестве основания гидроокиси натрия для области значений рН от 6 до 7,5, наиболее предпочтительной с физиологической точки зрения, наблюдается ступенчатое увеличение рН. Фосфат и цитрат натрия несколько ослабляют диссоциацию кислотных групп золедроновой кислоты, поэтому при использовании этих оснований может быть легко установлено необходимое значение рН обычно от 6,0 до 7,5

Пример 4: Золедроновая кислота 5 мг/100 мл в составе с тринатрийцитратом при различных значениях рН

Компонент	Состав 4А: рН 6,0	Состав 4Б: рН 6,5	Состав 4В: рН 7,0
Золедроновая кислота моногидрат.	53,3 мг	53,3 мг	53,3 мг
Соответствует 50 мг безводной золедроновой кислоты
Маннит	50,0 г	49,5 г	47.0 г
Тринатрийцитрат дигидрат	0,115 г	0,300 г	1,00 г
Вода для инъекций	до 1,00 л	до 1,00 л	до 1,00 л

Пример 5: Золедроновая кислота 5 мг/100 мл в составах с тринатрийфосфатом при различных значениях рН

Компонент	Состав 5А: рН 6,0	Состав 5Б: рН 6,5	Состав 5В: рН 7,0	Состав 5Г: рН 7,5
Золедроновая кислота моногидрат.	53,3 мг	53,3 мг	53,3 мг	53,3 мг
Соответствует 50 мг безводной золедроновой кислоты
Маннит	50,0 г	50,0 г	50,0 г	50,0 г
Тринатрийфосфат гексагидрат	0,038 г	0,050 г	0,065 г	0,085 г
Компонент	Состав 5А: рН 6,0	Состав 5Б: рН 6,5	Состав 5В: рН 7,0	Состав 5Г: рН 7,5
Вода для инъекций	до 1,00 л	до 1,00 л	до 1,00 л	до 1,00 л

Пример 6: Золедроновая кислота 5 мг/100 мл в составах с ацетатом натрия при различных значениях рН

Компонент	Состав 6: рН 5,5	Состав 6Б: рН 6,0
Золедроновая кислота моногидрат.	53,3 мг	53,3 мг
Соответствует 50 мг безводной золедроновой кислоты
Маннит	49,5 г	49,0 г
Безводный ацетат натрия	0,125 г	0,500 г
Вода для инъекций	до 1,00 л	до 1,00 л

Пример 7: Золедроновая кислота 4 мг/100 мл

Компонент	Количество [кг] на 1000 л
Золедроновая кислота моногидрат.	0,04264 кг
Соответствует 0,0400 кг безводной золедроновой кислоты
Манит	51,00 кг
Цитрат натрия	0,240 кг
Вода для инъекций	до 1015 кг = 1000 л

Приблизительно от 85 до 95% общего количества воды для инъекции помещают в сосуд для приготовления смеси из нержавеющей стали. Добавляют вспомогательные вещества маннит и цитрат натрия и растворяют при перемешивании. Добавляют лекарственное вещество золедроновую кислоту и растворяют при перемешивании. Препарат доводят до конечного веса водой для инъекции. Цитратом натрия доводят рН раствора золедроновой кислоты до 6,5. Раствор подают на линию заполнения и фильтруют в потоке с помощью фильтра с размером отверстий 0,2 мкм. В пластиковые мешки для вливаний, изготовленные из фольги Cryovac® M312 (Sealed Air Corporation), Baxter Intravia®, и B.Braun PAB® (фольга на основе полиэтилена), заливают 102,0 мл основной массы раствора каждый. Мешки герметично закрывают. Мешки стерилизуют методом влажной тепловой стерилизации при избыточном давлении, по крайней мере на 100 мбар превышающем давление водяного пара при температуре камеры (орошение перегретой водой или смесь пар/воздух), для получения уровня гарантии стерильности 10 ^-12, то есть в течение 30 минут (эффективное время стерилизационной выдержки) при 121-123°C.

Пример 8: Золедроновая кислота 5 мг/100 мл

Компонент	Количество [г] на 1 л
Золедроновая кислота моногидрат. Соответствует 0,0500 кг безводной золедроновой кислоты	0,0533
Кристаллический сорбит	50,0
Цитрат натрия	0,300
Вода для инъекций	До 1,00 л

Приблизительно 800 г воды для инъекции помещают в сосуд для приготовления смеси. Добавляют вспомогательные вещества сорбит и цитрат натрия и растворяют при перемешивании. Добавляют лекарственное средство золедроновую кислоту и растворяют при перемешивании. Препарат доводят до конечного объема водой для инъекции. Раствор разливают во флаконы через фильтр с размером ячейки 0,2 мкм. Вымытые и высушенные пластиковые флаконы Daikyo CZ заполняют раствором. Флаконы закрывают стерилизованными пробками Helvoet FM259/0 с покрытием Omniflex plus и запечатывают алюминиевыми колпачками. Флаконы стерилизуют методом влажной тепловой стерилизации.

Как видно из приведенной ниже таблицы, состав сохраняет стабильность даже после тепловой обработки при 121°С в течение 60 минут.

Испытание	До стерилизации	После стерилизации (121°С/эффективное время стерилизационной выдержки 60 мин)
Цвет	бесцветный	бесцветный
Прозрачность	Прозрачный, частицы отсутствуют	Прозрачный, частицы отсутствуют
Значение рН	6,3	6,1

По результатам анализа никаких изменений содержания компонента не найдено, также ни до, ни после стерилизации не смогли обнаружить деградацию продуктов на уровне концентраций, превышающем предел детектирования используемого метода анализа.

Пример 9: Золедроновая кислота 5 мг/100 мл

Компонент	Количество [г] на 1 л
Золедроновая кислота моногидрат.	0,0533 г
Соответствует 0,0500 кг безводной золедроновой кислоты
Безводный глицерин	22,5 г
Цитрат натрия	0,300 г
Вода для инъекций	До 1,00 л

Приблизительно 800 г воды для инъекции помещают в сосуд для приготовления смеси. Добавляют вспомогательные вещества глицерин и цитрат натрия и растворяют при перемешивании. Добавляют лекарственное средство золедроновую кислоту и растворяют при перемешивании. Препарат доводят до конечного объема водой для инъекции. Раствор разливают во флаконы через фильтр с размером ячейки 0,2 мкм. Вымытые и высушенные пластиковые флаконы Daikyo CZ заполняют раствором. Флаконы закрывают стерилизованными пробками Helvoet FM259/0 с покрытием Omniflex plus и запечатывают алюминиевыми колпачками. Флаконы стерилизуют методом влажной тепловой стерилизации.

Как видно из приведенной ниже таблицы, состав сохраняет стабильность даже после тепловой обработки при 121°С в течение 60 минут.

Испытание	До стерилизации	После стерилизации (121°С/эффективное время стерилизационной выдержки 60 мин)
Цвет	бесцветный	бесцветный
Прозрачность	Прозрачный, частицы отсутствуют	Прозрачный, частицы отсутствуют
Значение рН	6,4	6,2

По результатам анализа никаких изменений содержания компонента не найдено, также ни до, ни после стерилизации не смогли обнаружить деградацию продуктов на уровне концентраций, превышающем предел детектирования используемого метода анализа.

Пример 10: Золедроновая кислота 5 мг/100 мл

Компонент	Количество [г] на 1 л
Золедроновая кислота моногидрат.	0,0533 g
Соответствует 0,0500 кг безводной кислоты золедроновой кислоты
1,2-пропиленгликоль	19,0 г
Цитрат натрия	0,300
Вода для инъекций	До 1,00 л

Приблизительно 800 г воды для инъекции помещают в сосуд для приготовления смеси. Добавляют вспомогательные вещества пропиленгликоль и цитрат натрия и растворяют при перемешивании. Добавляют лекарственное средство золедроновую кислоту и растворяют при перемешивании. Препарат доводят до конечного объема водой для инъекции. Раствор разливают во флаконы через фильтр с размером ячейки 0,2 мкм. Вымытые и высушенные пластиковые флаконы Daikyo CZ заполняют раствором. Флаконы закрывают стерилизованными пробками Helvoet FM259/0 с покрытием Omniflex plus и запечатывают алюминиевыми колпачками. Флаконы стерилизуют методом влажной тепловой стерилизации.

Как видно из приведенной ниже таблицы, состав сохраняет стабильность даже после тепловой обработки при 121°С в течение 60 минут.

Испытание	До стерилизации	После стерилизации (121°С/эффективное время стерилизационной выдержки 60 мин)
Цвет	бесцветный	бесцветный
Прозрачность	Прозрачный, частицы отсутствуют	Прозрачный, частицы отсутствуют
Значение рН	6,4	6,3

По результатам анализа никаких изменений содержания компонента не найдено, также ни до, ни после стерилизации не смогли обнаружить никакой деградации продуктов на уровне концентраций, превышающем предел детектирования используемого метода анализа.

Пример 11: Мойка флаконов / удаление эндотоксинов

Обработку пластиковых флаконов проводят на стандартной комплексной автоматической технологической линии заполнения жидкостями. Мойку выполняют на стандартной ротационной моечной машине (например, Bausch&Stroebel FAU 6000 или Bosch RRU 2020), которую используют для стеклянных флаконов. Флаконы устанавливают на загрузочной ленте моечной машины. Сначала флаконы погружают в ванну с горячей водой и подвергают ультразвуковой обработке. Затем флаконы перемещают в ротационную моечную станцию и переворачивают. Мойку проводят с помощью программируемого процесса подачи воздуха и воды через насадку, установленную во флаконы. Флаконы сначала промывают рециркулирующей горячей водой для инъекций (>70°С), продувают отфильтрованным воздухом, затем опять промывают свежей порцией горячей воды для инъекций и продувают отфильтрованным воздухом. После мойки флаконы возвращают в нормальное положение и затем транспортируют на конвейере на ленту камеры горячего воздуха, где сушат при 110°С. На моечной машине Bausch&Stroebel FAU 6000 скорость мойки составляет 84 флаконы/мин.

Для моечной машины Bosch RRU 2020 соответствующую скорость мойки получают при наладочных параметрах 5,8-6,5 единиц шкалы.

Эффективность этого процесса можно оценить путем сравнения содержания эндотоксина в бутылях, обогащенных эндотоксином, до и после стандартного процесса мойки. В соответствии с результатами уменьшение заражения эндотоксином составляет более чем 3 log, то есть требование уменьшения более чем на 3 log выполнялось для каждого объекта, протестированного в процессе мойки.

Извлечение эндотоксина из обработанных бутылей

Эндотоксин вводят с помощью инъекции в пластиковые флаконы и высушивают. Определение эндотоксина в пяти флаконах, не подвергавшихся мойке, проводят дважды (контроль ввода). Содержание эндотоксинов составляет 8538 EU (IU, международные единицы) на флакон, что соответствует среднему значению результатов определения минус удвоенное стандартное отклонение.

Было выполнено три цикла количественных определения. В каждом определении 10 бутылей, зараженных эндотоксином, распределяли в группе с незараженными бутылями и мыли в моечной машине.

Результаты выделения эндотоксина:

	EU (IU)/флакон
	Цикл 1	Цикл 2	Цикл 3
Флакон 1	<0,63	<0,63	1,57
Флакон 2	<0,63	<0,63	<0,63
Флакон 3	<0,63	<0,63	<0,63
Флакон 4	0,64	<0,63	<0,63
Флакон 5	<0.63	<0,63	<0,63
Флакон 6	<0,63	<0,63	<0,63
Флакон 7	<0,63	<0,63	<0,63
Флакон 8	<0,63	<0,63	<0,63
Флакон 9	<0,63	<0,63	<0,63
Флакон 10	<0,63	<0,63	<0,63

Для всех тестированных бутылей обнаружено уменьшение эндотоксина по крайней мере в 1000 раз.

Пример 12: Стерилизация золедроновой кислоты 5 мг/100 мл

Исследования показали, что раствор для инъекций сохраняет стабильность в процессе автоклавной обработки (в паровом стерилизации). При стерилизации при температуре 121°C продолжительностью до 150 минут не смогли обнаружить никаких признаков разложения (см. результаты в приведенной ниже таблице). Такая устойчивость по отношению к нагреву позволяет проводить цикл стерилизации, обеспечивающий уровень гарантии стерильности по крайней мере 10^-12.

Исходя из кинетики инактивации спор, описываемой десятичным значением инактивации (Д-значение) спор Geobacillus stearothermophilus в растворе лекарственного препарата золедроновой кислоты 5 мг/100 мл, было установлено, что время стерилизации (время стерилизационной выдержки), необходимое для получения требуемой скорости инактивации спор, составляет 30 минут. Выбранный метод стерилизации соответствует требованиям Европейской фармакопеи и фармакопеи США (Ph. Eur. и USP).

Стабильность золедроновой кислоты 5 мг/100 мл при длительной стерилизации

Параметр	Стерилизация в автоклаве 30 мин/121°C	Стерилизация в автоклаве в течение дополнительных 60 мин/124°С	Стерилизация в автоклаве в течение 2-х дополнительных 60 мин /124°C
Общее время выдержки при >121°C	30 мин	90 мин	150 мин
Внешний вид емкости	100 мл бесцветный пластиковый флакон, серая резиновая пробка, алюминиевый колпачок с пластиковым компонентом с внутренней стороны	100 мл бесцветный пластиковый флакон, серая резиновая пробка, алюминиевый колпачок с пластиковым компонентом с внутренней стороны	100 мл бесцветный пластиковый флакон, серая резиновая пробка, алюминиевый колпачок с пластиковым компонентом с внутренней стороны
Внешний вид раствора	Прозрачный, бесцветный раствор	Прозрачный, бесцветный раствор	Прозрачный, бесцветный раствор
Оптическая плотность раствора*	0,00	0,00	0,00
Значение рН	6,6	6,6	6,6
Частицы
>25 мкм	0 (USP)	0 (USP)	0 (USP)
	3 (Ph. Eur.)	0 (Ph. Eur.)	7 (Ph. Eur.)
>10 мкм	20 (USP)	10 (USP)	0 (USP)
	13 (Ph. Eur).	3 (Ph. Eur).	10 (Ph. Eur).
Продукты распада	<0,1%	<0,1%	<0,1%
Анализ содержания золедроновой кислоты	98,7%	99,6%	99,3%
Бактериаль- ные эндотоксины	<0,025 EU (IU)/мл	<0,025 EU (IU)/мл	<0,025 EU (IU)/мл
Емкость/Герметичность укупорочного средства по проникновению красителя	Соответствует требованиям: ни в одной из 40 тестируемых бутылей не обнаружено признаков проникновения красителя	Соответствует требованиям: ни в одной из 40 тестируемых бутылей не обнаружено признаков проникновения красителя	Соответствует требованиям: ни в одной из 40 тестируемых бутылей не обнаружено признаков проникновения красителя

В отличие от многократной стерилизации стеклянных флаконов, не обнаружено увеличения количества частиц. Состав сохраняет стабильность даже после 150 мин стерилизации при температуре >121°.

Пример 13: Оценка пластиковых бутылей в случае наиболее тяжелых условий стерилизации

В процессе обработки флаконы подвергали воздействию сухого нагревания (сушка после мойки) до 120°С и влажного нагревания (в течение автоклавной обработки). Чтобы оценить возможный риск повреждения флакона и целостности укупорочного средства, исследовали термостойкость.

20 пустых флаконов, описанных в примере 2, подвергали сухому нагреву при 125°С в течение 10 часов, что выше температуры 100-120°С, обычно устанавливаемой для сухого процесса. До и после тепловой обработки определяли внутренний диаметр и овальность горлышка флакона, поскольку эти параметры считаются наиболее критичными для герметичности флакона. Было обнаружено незначительное - 0,03 мм (от 0,02 до 0,05 м) уменьшение внутреннего диаметра горлышка флакона. Видимая овальность, определяемая как разница двух перпендикулярных диаметров входного отверстия флакона, деленная на сумму этих диаметров, осталась без изменений и составляет для выбранных образцов 0,18% (до обработки: от 0,05 до 0,45%, после обработки: от 0,00 до 0,5%).

Флаконы из примера 2 подвергали паровой стерилизации в наиболее тяжелых условиях: цикл стерилизации длился 60 минут при 124,5°С, что превышает температуру деформации флаконов, равную в соответствии с ASTM D648) 123°C. При стерилизации не применяют избыточное давление. Определяют изменение размеров и потерю веса стерилизованных и нестерилизованных флаконов, и также с помощью проникновения красителя контролируют нарушения герметичности.

Результаты оценки флаконов для стерилизации, проводимой в наиболее тяжелых условиях

	До стерилизации	После стерилизации (124,5°С/60 мин)
Потеря веса (2 недели, 40°С), n=20	21 мг (от 20-22 мг)	22 мг (от 21 до 23 мг)
	До стерилизации	После стерилизации (124,5°С/60 мин)
Внутренний диаметр входного отверстия флакона, n=20	22,0 мм (от 21,96 до 22,04 мм)	22,1 мм (от 22,09 до 22,18 мм)
Видимая овальность внутреннего диаметра входного отверстия флакона, n=8	0,11% (от 0,00 до 0,23%)	0.20% (от 0,00 до 0,41%)
Герметичность укупорочного средства флакона, определенная по проникновению красителя, n=40	герметичный	герметичный

Стерилизация, проведенная при наиболее тяжелых условиях, не оказывает заметного влияния на герметичность флакона, проявляющуюся в потере веса и в устойчивости к проникновению красителя. Наблюдается очень незначительное изменение внутреннего диаметра входного отверстия флакона, но эти измененные значения соответствуют техническим требованиям и составляют 22.0 +/-0.2 мм.

Пример 14: Анализ растворов золедроновой кислоты 4 мг/100 мл

Колонка	Luna, RP-С 18 (2), 5 мкм (в стали), Phenomenex
	Длина 250 мм, внутренний диаметр 4,6 мм, или аналогичная колонка
Маточный раствор ЭДТК	0,365 г ЭДТК взвешивают с точностью до 0,001 г в колбе вместимостью 100 мл, растворяют с 5 мл 2М-ным раствором NaOH и заполняют колбу водой до метки
Подвижная фаза	С точность до 0,1 г взвешивают в колбе 6.2 г динатрийгидрофосфата дигидрата (35 мМ) и 4,5 г гидросульфата тетрагексиламмония (10 мМ) добавляют 900 мл воды, 100 мл ацетонитрила и растворяют, затем добавляют 2 мл матричного раствора ЭДТК и тщательно перемешивают. Устанавливают рН 7.9 с помощью 2М-ного раствора гидроокиси натрия.
Скорость потока	1,2 мл/мин
Детектирование	215 нм
Температура	30°С
Вводимый объем	160 мкл
Время анализа	Приблизительно 80 мин
Важные замечания	По крайней мере между колонкой и детектором рекомендуется устанавливать PEEK капилляры. Чтобы избежать адсорбции на поверхности стекла, следует использовать пластиковые виалы для автосамплера и пластиковые пипетки Пастера. Стандартные растворы следует готовить в стеклянной или пластиковой посуде и хранить в пластиковых колбах.

Пример 15: Составы памидроновой кислоты, готовые к употреблению: 100 мл состава в порционной упаковке эквивалентно 101.5 г:

Компонент	15 мг/100 мл концентрация	30 мг/100 мл концентрация	60 мг/100 мл концентрация	90 мг/100 мл концентрация
Динатриевая соль памидроновой кислоты	19,79 мг	39,58 мг	79,16 мг	118,74 мг
пентагидрат эквивалентное количество памидроновой кислоты	15 мг	30 мг	60 мг	90 мг
Цитроновая кислота Ph. Eur.	приблизительно 1,5 мг	приблизительно 3 мг	приблизительно 6 мг	приблизительно 9 мг
до рН 6.5 Маннит Ph. Eur.	5185 мг	5170 мг	5140 мг	5110 мг
Вода для инъекций	96.29 г	96.28 г	96.27 г	96.26 г

Исходя из основного состава для единичной дозированной формы, приведенного в таблице выше, рассчитывают количество, необходимое для загрузки. Обычно это количество составляет приблизительно 5 л для производства лабораторного масштаба, 100 л для опытного производства и 1000 л для серийного производства.

Приблизительно от 85 до 95% общего количества воды для инъекции помещают в сосуд для приготовления смеси из нержавеющей стали. Добавляют маннит и растворяют при перемешивании. Добавляют лекарственное вещество динатриевую соль памидроновой кислоты пентагидрат и растворяют при перемешивании. Доводят рН до 6,5 с помощью 5%-ного раствора цитрата натрия в воде для инъекций. Препарат доводят до конечного веса водой для инъекции. Раствор подают на линию заполнения и фильтруют в потоке с помощью фильтра с размером отверстий 0,2 мкм. В вымытые и высушенные 100 мл пластиковые флаконы Daikyo CZ заливают 102,0 мл раствора. Флаконы закупоривают стерилизованными пробками Helvoet FM259/0 с покрытием Omniflex plus и запечатывают алюминиевыми колпачками. Проводят влажную тепловую стерилизацию флаконов при температуре >121°C в течение по крайней мере 15 минут (эффективное время выдержки).

Пример 16: Составы памидроновой кислоты, готовые к употреблению: 100 мл состава в порционной упаковке эквивалентно 101.5 г:

Компонент	15 мг/100 мл концентрация	30 мг/100 мл концентрация	60 мг/100 мл концентрация	90 мг/100 мл концентрация
Динатриевая соль памидроновой кислоты	19,79 мг	39,58 мг	79.16 мг	118,74 мг
пентагидрат эквивалентное количество памидроновой кислоты	15 мг	30 мг	60 мг	90 мг
85%-ная фосфорная кислота до рН 6.3	приблизительно 2,35 мг	приблизительно 4,7 мг	приблизительно 9,4 мг	приблизительно 14,1 мг
Маннит Ph.Eur.	5185 мг	5170 мг	5140 мг	5110 мг
Вода для инъекций	96,29 г	96,28 г	96,27 г	96,26 г

Исходя из основного состава для единичной дозированной формы, приведенного в таблице выше, рассчитывают количество, необходимое для загрузки. Обычно это количество составляет приблизительно 5 л для производства лабораторного масштаба, 100 л для опытного производства и 1000 л при серийном производстве.

Приблизительно от 85 до 95% общего количества воды для инъекции помещают в сосуд для приготовления смеси из нержавеющей стали. Добавляют маннит и растворяют при перемешивании. Добавляют лекарственное вещество динатриевую соль памидроновой кислоты пентагидрат и растворяют при перемешивании. Доводят рН до 6,3 с помощью 5%-ного раствора фосфорной кислоты в воде для инъекций. Препарат доводят до конечного веса водой для инъекции. Раствор подают на линию заполнения и фильтруют в потоке с помощью фильтра с размером отверстий 0,2 мкм. В вымытые и высушенные 100 мл пластиковые флаконы Daikyo CZ заливают 102,0 мл раствора. Флаконы закупоривают стерилизованными пробками Helvoet FM259/0 с покрытием Omniflex plus и запечатывают алюминиевыми колпачками. Проводят влажную тепловую стерилизацию флаконов при температуре >121°C в течение по крайней мере 15 минут (эффективное время выдержки).

Пример 17: Составы памидроновой кислоты, готовые для употребления: 100 мл состава в порционной упаковке эквивалентно 101,5 г:

Компонент	15 мг/100 мл концентрация	30 мг/100 мл концентрация	60 мг/100 мл концентрация	90 мг/100 мл концентрация
Динатриевая соль памидроновой кислоты	19,79 мг	39,58 мг	79,16 мг	118,74 мг
пентагидрат эквивалентное количество памидроновой кислоты	15 мг	30 мг	60 мг	90 мг
Ледяная уксусная кислота Ph.Eur. до рН 6.5	приблизительно 1,25 мг	приблизительно. 2,5 мг	приблизительно 5,0 мг	приблизительно. 7,5 мг
Маннит Ph.Eur.	5185 мг	5170 мг	5140 мг	5110 мг
Вода для инъекций	96,29 г	96,28 г	96,27 г	96,26 г

Исходя из основного состава для единичной дозированной формы, приведенного в таблице выше, рассчитывают количество, необходимое для загрузки. Обычно это количество составляет приблизительно 5 л для производства лабораторного масштаба, 100 л для опытного производства и 1000 л для серийного производства.

Приблизительно от 85 до 95% общего количества воды для инъекции помещают в сосуд для приготовления смеси из нержавеющей стали. Добавляют маннит и растворяют при перемешивании. Добавляют лекарственное вещество динатриевую соль памидроновой кислоты пентагидрат и растворяют при перемешивании. Доводят рН до 6,3 с помощью 5%-ного раствора уксусной кислоты в воде для инъекций. Препарат доводят до конечного веса водой для инъекции. Раствор подают на линию заполнения и фильтруют в потоке с помощью фильтра с размером отверстий 0,2 мкм. В вымытые и высушенные 100 мл пластиковые флаконы Daikyo CZ заливают 102,0 мл раствора. Флаконы закупоривают стерилизованными пробками Helvoet FM259/0 с покрытием Omniflex plus и запечатывают алюминиевыми колпачками. Проводят влажную тепловую стерилизацию флаконов при температуре >121°C в течение по крайней мере 15 минут (эффективное время выдержки).

Пример 18: Составы памидроновой кислоты, готовые для употребления: 100 мл состава в порционной упаковке эквивалентно 101,5 г:

Компонент	15 мг/100 мл концентрация	30 мг/100 мл концентрация	60 мг/100 мл концентрация	90 мг/100 мл концентрация
Динатриевая соль памидроновой кислоты	19,79 мг	39,58 мг	79,16 мг	118,74 мг
пентагидрат эквивалентное количество памидроновой кислоты	15 мг	30 мг	60 мг	90 мг
Молочная кислота Ph.Eur.	приблизительно 2,5 мг	приблизительно 5,0 мг	приблизительно 10,0 мг	приблизительно. 15,0 мг
до рН 6.5 Маннит Ph.Eur.	5185 мг	5170 мг	5140 мг	5110 мг
Вода для инъекций	96,29 г	96,28 г	96,27 г	96,26 г

Исходя из основного состава для единичной дозированной формы, приведенного в таблице выше, рассчитывают количество, необходимое для загрузки. Обычно это количество составляет приблизительно 5 л для загрузки лабораторного масштаба, 100 л для опытного производства и 1000 л для серийного производства.

Приблизительно от 85 до 95% общего количества воды для инъекции помещают в сосуд для приготовления смеси из нержавеющей стали. Добавляют маннит и растворяют при перемешивании. Добавляют лекарственное вещество динатриевую соль памидроновой кислоты пентагидрат и растворяют при перемешивании. Доводят рН до 6,3 с помощью 5%-ного раствора молочной кислоты в воде для инъекций. Препарат доводят до конечного веса водой для инъекции. Раствор подают на линию заполнения и фильтруют в потоке с помощью фильтра с размером отверстий 0,2 мкм. В вымытые и высушенные 100 мл пластиковые флаконы Daikyo CZ заливают 102,0 мл раствора. Флаконы закупоривают стерилизованными пробками Helvoet FM259/0 с покрытием Omniflex plus и запечатывают алюминиевыми колпачками. Проводят влажную тепловую стерилизацию флаконов при температуре >121°C в течение по крайней мере 15 минут (эффективное время выдержки).

Пример 19: Составы памидроновой кислоты, готовые для употребления: 100 мл состава в порционной упаковке эквивалентно 101,5 г:

Компонент	15 мг/100 мл концентрация	30 мг/100 мл концентрация	60 мг/100 мл концентрация	90 мг/100 мл концентрация
Динатриевая соль памидроновой кислоты	19,79 мг	39,58 мг	79,16 мг	118,74 мг
пентагидрат эквивалентное количество памидроновой кислоты	15 мг	30 мг	60 мг	90 мг
Винная кислота Ph.Eur. до рН 6.5 Маннит Ph.Eur.	приблизительно 1,5 мг	приблизительно 3,0 мг	приблизительно 6,0 мг	приблизительно. 9,0 мг
5185 мг	5170 мг	5140 мг	5110 мг
Вода для инъекций	96,29 г	96,28 г	96,27 г	96,26 г

Исходя из основного состава для единичной дозированной формы, приведенного в таблице выше, рассчитывают количество, необходимое для загрузки. Обычно это количество составляет приблизительно 5 л для загрузки лабораторного масштаба, 100 л для опытного производства и 1000 л для серийного производства.

Приблизительно от 85 до 95% общего количества воды для инъекции помещают в сосуд для приготовления смеси из нержавеющей стали. Добавляют маннит и растворяют при перемешивании. Добавляют лекарственное вещество динатриевую соль памидроновой кислоты пентагидрат и растворяют при перемешивании. Доводят рН до 6,3 с помощью 5%-ного раствора винной кислоты в воде для инъекций. Препарат доводят до конечного веса водой для инъекции. Раствор подают на линию заполнения и фильтруют в потоке с помощью фильтра с размером отверстий 0,2 мкм. В вымытые и высушенные 100 мл пластиковые флаконы Daikyo CZ заливают 102,0 мл раствора. Флаконы закупоривают стерилизованными пробками Helvoet FM259/0 с покрытием Omniflex plus и запечатывают алюминиевыми колпачками. Проводят влажную тепловую стерилизацию флаконов при температуре >121°C в течение по крайней мере 15 минут (эффективное время выдержки).