конкретное глюкокортикостероидное соединение, обладающее противовоспалительной активностью

Формула изобретения

1. Соединение формулы (I):



или его физиологически приемлемый сольват.

2. Соединение, которое представляет собой

6 ,9 -дифтор-11 -гидрокси-16 -метил-3-оксо-17 -(2,2,3,3-

тетраметилциклопропилкарбонил)окси-андроста-1,4-диен-17 -карбоновой кислоты цианметиловый эфир.

3. Соединение формулы (I) или его физиологически приемлемый сольват по п.1 или 2, обладающее глюкокортикоидной агонистической активностью.

4. Соединение формулы (I) или его физиологически приемлемый сольват по п.1 или 2 для применения для изготовления лекарственного средства, обладающего глюкокортикоидной агонистической активностью.

5. Применение соединения формулы (I) или его физиологически приемлемого сольвата по п.1 или 2 для изготовления лекарства для лечения воспалительных и/или аллергических состояний.

6. Применение соединения формулы (I) или его физиологически приемлемого сольвата по п.5 для лечения кожного заболевания, воспалительного состояния носа, горла или легких, воспалительного состояния кишечника, аутоиммунного заболевания или конъюктивита.

7. Применение по п.6, где воспалительное состояние носа, горла или легких представляет собой астму, ринит, носовые полипы, хроническое обструктивное легочное заболевание, интерстициальное легочное заболевание или фиброз.

8. Применение по п.7 для лечения воспалительного состояния носа.

9. Применение по п.8, где воспалительное состояние носа представляет собой ринит.

10. Применение по п.7, где воспалительное состояние носа, горла или легких представляет собой астму.

11. Применение по п.7, где воспалительное состояние носа, горла или легких представляет собой хроническое обструктивное легочное заболевание.

12. Применение по п.6, где кожное заболевание представляет собой экзему, псориаз, аллергический дерматит, нейродерматит, зуд или реакции гиперчувствительности.

13. Применение по п.6, где воспалительное заболевание кишечника представляет собой язвенный колит или болезнь Крона.

14. Применение по п.6, где аутоиммунное заболевание представляет собой ревматоидный артрит.

15. Применение по п.6, для лечения конъюктивита.

16. Применение по п.5 или 6, где указанное соединение формулы (I) или его физиологически приемлемый сольват предназначены для перорального, трансбуккального, сублингвального, парентерального, местного или ректального введения.

17. Фармацевтическая композиция, обладающая глюкокортикоидной агонистической активностью, содержащая соединение формулы (I) или его физиологически приемлемый сольват по п.1 или 2, если требуется, в смеси с одним или более физиологически приемлемыми разбавителями или носителями.

18. Фармацевтическая аэрозольная композиция, обладающая глюкокортикоидной агонистической активностью, содержащая соединение формулы (I) или его физиологически приемлемый сольват по п.1 или 2 и фторуглерод или водородсодержащий хлорфторуглерод в качестве пропеллента, возможно в комбинации с поверхностно-активным веществом и/или со-растворителем.

19. Фармацевтическая аэрозольная композиция по п.18, где пропеллент выбран из 1,1,1,2-тетрафторэтана, 1,1,1,2,3,3,3-гептафтор-н-пропана или их смеси.

20. Фармацевтическая аэрозольная композиция по п.18 или 19, где поверхностно-активное вещество представляет собой олеиновую кислоту или лецитин.

21. Фармацевтическая аэрозольная композиция по любому из пп.18-20, где сорастворитель представляет собой этанол.

22. Фармацевтическая композиция по п.17, которая дополнительно содержит другой терапевтически активный агент.

23. Фармацевтическая композиция по п.22, в которой указанный другой терапевтически активный агент представляет собой агонист ₂-адренорецепторов.

24. Фармацевтическая композиция по п.23, в которой агонист ₂-адренорецепторов представляет собой по меньшей мере один агонист ₂-адренорецепторов, выбранный из группы, состоящей из сальметерола, сальбутамола, формотерола, сальмефамола, фенотерола и тербуталина и их солей.

25. Фармацевтическая композиция по п.22, в которой указанный другой терапевтически активный агент представляет собой ингибитор PDE4 (фосфодиэстераза 4).

26. Фармацевтическая композиция по п.22, в которой указанный другой терапевтически активный агент представляет собой антихолинергический агент.

27. Фармацевтическая композиция по п.22, в которой указанный другой терапевтически активный агент представляет собой антигистамин.

28. Фармацевтическая композиция по п.27, в которой антигистамин представляет собой по меньшей мере один антигистамин, выбранный из группы, состоящей из производных этаноламинов, этилендиаминов, алкиламинов, лоратидин, дезлоратидин, терфенадин, астемизол, акривастин, азеластин, левоцетиризин, фексофенадин и цетиририн.

Описание изобретения к патенту

Настоящее изобретение относится к соединению андростанового ряда, являющемуся агонистом глюкокортикоидных рецепторов. Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим препаратам, содержащим указанное соединение, и к их терапевтическим применениям, в частности для лечения воспалительных и аллергических состояний.

Глюкокортикостероиды, обладающие противовоспалительными свойствами, известны и широко применяются при лечении воспалительных расстройств или заболеваний, таких как астма и ринит. В WO 02/00679 раскрыты глюкокортикоиды формулы (II)

,

где R представляет собой одновалентную циклическую органическую группу, их получение и их применение в качестве лекарственных средств. В GB-A-1514476 раскрыты алкил- и галогеноалкил-андрост-4-ен- и -андроста-1,4-диен-17 -карбоксилаты. В US 3856828 описаны противовоспалительные стероиды андростанового ряда, имеющие галоген-замещенную С ₁-С₄алкоксикарбонильную группу в положении 17 . В Ueno et al., J. Med. Chem. 1991, 34, 2468-2473 описаны синтез и оценка противовоспалительной активности ряда кортикостероидных 17 -эфиров, содержащих функциональную группу. Тем не менее, авторы настоящего изобретения обнаружили новый глюкокортикостероид.

Таким образом, согласно одному аспекту настоящего изобретения предложено соединение формулы (I)

или его физиологически приемлемый сольват.

Примеры сольватов включают гидраты.

Ниже в описании ссылки на соединение по изобретению включают как соединение формулы (I), так и его сольваты.

В объем настоящего изобретения включены все стереоизомеры соединения формулы (I) и их смеси.

Предпочтительно, абсолютная стереохимия является такой, как показано на изображении соединения формулы (I).

Соединение формулы (I) имеет название 6 ,9 -дифтор-11 -гидрокси-16 -метил-3-оксо-17 -(2,2,3,3-тетраметилциклопропилкарбонил)окси-андроста-1,4-диен-17 -карбоновой кислоты цианметиловый эфир. Поэтому в другом аспекте изобретение относится к соединению, которое представляет собой 6 ,9 -дифтор-11 -гидрокси-16 -метил-3-оксо-17 -(2,2,3,3-тетраметилциклопропилкарбонил)окси-андроста-1,4-диен-17 -карбоновой кислоты цианметиловый эфир.

Соединение формулы (I) обладает потенциально благоприятными противовоспалительным и противоаллергическим действиями, особенно при местном введении, которые проявляются, например, в их способности связываться с глюкокортикоидным рецептором и запрещать отклик через этот рецептор.

Таким образом, в следующем аспекте изобретение относится к вышеуказанному соединению формулы (I) или его физиологически приемлемому сольвату, обладающему глюкокортикоидной агонистической активностью.

В еще одном аспекте изобретение относится к вышеуказанному соединению формулы (I) или его физиологически приемлемому сольвату для применения для изготовления лекарственного средства, обладающего глюкокортикоидной агонистической активностью.

В другом аспекте изобретения предложено применение вышеуказанного соединения формулы (I) или его физиологически приемлемого сольвата для изготовления лекарства для лечения воспалительных и/или аллергических состояний.

Предпочтительными воспалительными и/или аллергическими состояниями являются кожное заболевание, воспалительное состояние носа, горла или легких, воспалительного состояния кишечника, аутоиммунного заболевания или конъюнктивита.

В частности, воспалительное состояние носа, горла или легких представляет собой астму, ринит, носовые полипы, хроническое обструктивное легочное заболевание, интерстициальное легочное заболевание или фиброз.

Особенно предпочтительным является применение соединения по изобретению в изготовлении лекарства для лечения воспалительного состояния носа, наиболее предпочтительно ринита.

В другом предпочтительном воплощении воспалительное состояние носа, горла или легких представляет собой астму.

В другом предпочтительном воплощении воспалительное состояние носа, горла или легких представляет собой хроническое обструктивное легочное заболевание.

Предпочтительно, кожное заболевание представляет собой экзему, псориаз, аллергический дерматит, нейродерматит, зуд или реакции гиперчувствительности.

Предпочтительно, воспалительное заболевание кишечника представляет собой язвенный колит или болезнь Крона.

Предпочтительно, аутоиммунное заболевание представляет собой ревматоидный артрит.

Предпочтительным также является применение соединения по изобретению в изготовлении лекарства для лечения конъюнктивита.

Предпочтительно, указанное соединение формулы (I) или его физиологически приемлемый сольват предназначены для перорального, трансбуккального, сублингвального, парентерального, местного или ректального введения.

Согласно следующему аспекту изобретения предложена фармацевтическая композиция, обладающая глюкокортикоидной агонистической активностью, содержащая соединение формулы (I) или его физиологически приемлемый сольват, если требуется, в смеси с одним или более физиологически приемлемыми разбавителями или носителями.

Согласно еще одному аспекту изобретения предложена фармацевтическая аэрозольная композиция, обладающая глюкокортикоидной агонистической активностью, содержащая соединение формулы (I) или его физиологически приемлемый сольват и фторуглерод или водородсодержащий хлорфторуглерод в качестве пропеллента, возможно в комбинации с поверхностно-активным веществом и/или со-растворителем.

Предпочтительно, пропеллент выбран из 1,1,1,2-тетрафторэтана, 1,1,1,2,3,3,3,-гептафтор-н-пропана или их смеси.

Предпочтительно, поверхностно-активное вещество представляет собой олеиновую кислоту или лецитин.

Предпочтительно, сорастворитель представляет собой энанол.

В одном из воплощений фармацевтическая композиция по изобретению дополнительно содержит другой терапевтически активный агент.

Предпочтительно, указанный другой терапевтически активный агент представляет собой агонист ₂-адренорецепторов. В частности, агонист ₂-адренорецепторов представляет собой по меньшей мере один агонист ₂-адренорецепторов, выбранный из группы, состоящей из сальметерола, сальбутамола, формотерола, сальмефамола, фенотерола и тербуталина и их солей.

Предпочтительно, указанный другой терапевтически активный агент представляет собой ингибитор PDE4 (фосфодиэстераза 4).

Предпочтительно, указанный другой терапевтически активный агент представляет собой антихолинергический агент.

Предпочтительно, указанный другой терапевтически активный агент представляет собой антигистамин. В частности, антигистамин представляет собой по меньшей мере один антигистамин, выбранный из группы, состоящей из производных этаноламинов, этилендиаминов, алкиламинов, лоратидин, дезлоратидин, терфенадин, астемизол, акривастин, азеластин, левоцетиризин, фексофенадин и цетиририн.

Соединение формулы (I) является потенциально полезным в лечении воспалительных и/или аллергических расстройств.

Примеры болезненных состояний, при которых могут быть полезны соединения по настоящему изобретению, включают кожные заболевания, такие как экзема, псориаз, аллергический дерматит, нейродерматит, зуд и реакции гиперчувствительности; воспалительные состояния носа, горла или легких, такие как астма (включая индуцированные аллергенами астматические реакции), ринит (включая сенную лихорадку), носовые полипы, хроническое обструктивное легочное заболевание, интерстициальное легочное заболевание и фиброз; воспалительные состояния кишечника, такие как язвенный колит и болезнь Крона; и аутоиммунные заболевания, такие как ревматоидный артрит.

Соединение по настоящему изобретению также может найти применение в лечении конъюнктивы и конъюнктивита.

В данном описании ссылка на лечение распространяется на профилактику, а также на лечение установленных состояний.

Как указано выше, соединение формулы (I) может быть полезным в медицине человека или в ветеринарии, в частности в качестве противовоспалительного и противоаллергического агента.

Соединения по настоящему изобретению могут быть приготовлены в виде препарата для введения любым удобным путем, поэтому в объем данного изобретения включены фармацевтические композиции, содержащие соединение формулы (I) или его физиологически приемлемый сольват, если требуется, в смеси с одним или более физиологически приемлемыми разбавителями или носителями.

Способы изготовления таких фармацевтических композиций включают смешивание ингредиентов.

Соединение по настоящему изобретению может быть приготовлено, например, в виде препарата для перорального, трансбуккального, сублингвального, парентерального, местного или ректального введения, главным образом для местного введения.

Местное введение в данном контексте включает введение путем инсуффляции и ингаляции. Примеры различных типов препарата для местного введения включают мази, лосьоны, кремы, гели, пены, препараты для доставки посредством чрескожных пластырей, порошки, спреи, аэрозоли, капсулы или картриджи для применения в ингаляторе или инсуффляторе или капли (например, глазные капли или капли в нос), растворы/суспензии для распыления, суппозитории, пессарии, удерживающие клизмы и жевательные или рассасываемые таблетки или гранулы (например, для лечения афтозных язв) или липосомные или микроинкапсулированные препараты.

Мази, кремы и гели можно приготовить в виде препарата, например на водной или масляной основе с добавлением подходящего загущающего и/или желатинирующего агента и/или растворителей. Соответственно, такие основы могут включать, например, воду и/или масло, такое как вазелиновое масло или растительное масло, такое как арахисовое масло или касторовое масло, или растворитель, такой как полиэтиленгликоль. Загущающие и желатинирующие агенты, которые можно использовать в соответствии с характером основы, включают мягкий парафин, стеарат алюминия, цетостеариловый спирт, полиэтиленгликоли, ланолин, пчелиный воск, карбоксиполиметилен и производные целлюлозы и/или глицерилмоностеарат и/или неионные эмульгирующие агенты.

Лосьоны могут быть приготовлены в виде препарата на водной или масляной основе и в общем случае они содержат также один или более чем один эмульгирующий агент, стабилизирующий агент, диспергирующий агент, суспендирующий агент или загуститель.

Порошки для наружного применения могут быть образованы при помощи любой подходящей порошковой основы, например талька, лактозы или крахмала. Капли можно приготовить в виде препарата на водной или неводной основе, содержащего также один или более чем один диспергирующий агент, солюбилизирующий агент, суспендирующий агент или консервант.

Композиции в виде спрея могут быть приготовлены в виде, например, водных растворов или суспензий или в виде аэрозолей, подаваемых из находящихся под давлением упаковок, таких как дозирующий ингалятор, с использованием подходящего сжиженного пропеллента. Аэрозольные композиции, подходящие для ингаляции, могут представлять собой или суспензию, или раствор и обычно содержат соединение формулы (I) и походящий пропеллент, такой как фторуглерод или водородсодержащий хлорфторуглерод или их смеси, в частности гидрофторалканы, главным образом 1,1,1,2-тетрафторэтан, 1,1,1,2,3,3,3-гептафтор-н-пропан или их смесь. Аэрозольная композиция возможно может содержать дополнительные эксципиенты для приготовления препарата, хорошо известные в данной области, такие как поверхностно-активные вещества, например олеиновую кислоту или лецитин, и со-растворители, например этанол.

Преимущественно, препараты по настоящему изобретению могут быть забуферены путем добавления подходящих буферных агентов.

Капсулы и картриджи для использования в ингаляторе или инсуффляторе, например из желатина, могут быть приготовлены в виде препарата, содержащего порошковую смесь для ингаляции из соединения по настоящему изобретению и подходящей порошковой основы, такой как лактоза или крахмал. Каждая капсула или картридж в общем случае может содержать от 20 мкг до 10 мг соединения формулы (I). Альтернативно, соединение по настоящему изобретению может присутствовать без эксципиентов, таких как лактоза.

Доля активного соединения формулы (I) в композициях для местного применения по настоящему изобретению зависит от конкретного типа изготавливаемого препарата, но обычно находится в интервале от 0,001 до 10% по массе. Однако в общем случае для большинства препаратов используемая доля преимущественно находится в интервале от 0,005 до 1% и предпочтительно - от 0,01 до 0,5%. Однако в порошках для ингаляции или инсуффляции используемая доля обычно находится в интервале от 0,1 до 5%.

Аэрозольные препараты предпочтительно приспособлены так, что каждая отмеренная доза или "пшик" аэрозоля содержит 20 мкг - 2000 мкг, предпочтительно приблизительно 20 мкг - 500 мкг соединения формулы (I). Введение можно осуществлять один раз в сутки или несколько раз в сутки, например 2, 3, 4 или 8 раз, давая, например, 1, 2 или 3 дозы каждый раз. Суммарная суточная доза аэрозольного препарата обычно находится в интервале 100 мкг - 10 мг, предпочтительно - 200 мкг - 2000 мкг. Суммарная суточная доза и отмеренная доза, подаваемая посредством капсул или картриджей в ингаляторе или инсуффляторе, обычно в два раза больше тех же доз в аэрозольных препаратах.

Препараты для местного применения можно вводить посредством одной или более аппликаций на пораженный участок в сутки; преимущественно можно использовать окклюзионные повязки поверх кожных участков. Непрерывной или пролонгированной доставки можно достичь при помощи системы с липким резервуаром.

Для внутреннего введения соединения по настоящему изобретению можно, например, приготовить традиционным способом в виде препарата для перорального, парентерального или ректального введения. Препараты для перорального введения включают сиропы, эликсиры, порошки, гранулы, таблетки и капсулы, которые обычно содержат традиционные эксципиенты, такие как связующие агенты, наполнители, скользящие агенты, разрыхлители, увлажняющие агенты, суспендирующие агенты, эмульгирующие агенты, консерванты, буферные соли, ароматизирующие, окрашивающие и/или подслащивающие агенты, как это целесообразно. Однако предпочтительными являются стандартные лекарственные формы, описанные ниже.

Предпочтительными формами препарата для внутреннего введения являются стандартные лекарственные формы, то есть таблетки и капсулы. Такие стандартные лекарственные формы содержат от 0,1 мг до 20 мг, предпочтительно от 2,5 до 10 мг соединений по настоящему изобретению.

В случаях, когда требуется системная адренокортикальная терапия, соединения по настоящему изобретению в общем случае можно давать путем внутреннего введения.

В общих чертах, препараты для внутреннего введения могут содержать от 0,05 до 10% активного ингредиента, в зависимости от типа препарата. Суточная доза может варьироваться от 0,1 мг до 60 мг, например в интервале 5-30 мг, в зависимости от состояния, которое лечат, и требуемой продолжительности лечения.

Препараты с медленным высвобождением или с кишечно-растворимым покрытием могут быть полезны, особенно при лечении воспалительных кишечных расстройств.

Соединение и фармацевтические препараты по изобретению можно применять в комбинации с одним или более другими терапевтическими агентами, или они могут включать один или более чем один другой терапевтический агент, выбранный, например, из противовоспалительных агентов, антихолинергических агентов (в частности антагонистов М₁/М₂/М₃ -рецепторов), агонистов ₂-адренорецепторов, противомикробных агентов (например, антибиотиков, противовирусных средств) или антигистаминов. Таким образом, в другом аспекте настоящего изобретения предложена комбинация, содержащая соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, сольват или физиологически функциональное производное вместе с одним или более другими терапевтически активными агентами, выбранными, например, из противовоспалительного агента (например, другого кортикостероида или NSAID (нестероидного противовоспалительного средства)), антихолинергического агента, агониста ₂-адренорецепторов, противомикробного агента (например, антибиотика или противовирусного средства) или антигистамина. Предпочтительными являются комбинации, содержащие соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, сольват или физиологически функциональное производное вместе с агонистом ₂-адренорецепторов, и/или антихолинергетическим агентом, и/или ингибитором PDE-4 (фосфодиэстеразы 4). Предпочтительными являются комбинации, содержащие один или два других терапевтических агента.

Специалисту в данной области понятно, что, когда это целесообразно, другой(ие) терапевтический(ие) ингредиент(ы) может(гут) быть использован(ы) в форме солей (например, в виде солей щелочных металлов или аминов, или в виде солей присоединения кислот), или пролекарств, или в виде сложных эфиров (например, сложных эфиров низших алкилов), или в виде сольватов (например, гидратов), чтобы оптимизировать активность и/или стабильность и/или физические характеристики (например, растворимость) терапевтического ингредиента. Также понятно, что, когда это целесообразно, терапевтические ингредиенты можно использовать в оптически чистой форме.

Комбинация, содержащая соединение по изобретению вместе с агонистом ₂-адренорецепторов, является особенно предпочтительной.

Примеры агонистов ₂-адренорецепторов включают сальметерол (например, в виде рацемата или одного энантиомера, такого как R-энантиомер), сальбутамол, формотерол, сальмефамол, фенотерол или тербуталин и их соли, например ксинафоат сальметерола, сульфатную соль или свободное основание сальбутамола или фумаратную соль формотерола. Предпочтительными являются агонисты ₂-адренорецепторов с длительным действием, особенно агонисты, обладающие терапевтическим действием в течение 24-часового периода, такие как сальметерол или формотерол.

Предпочтительные агонисты ₂-адренорецепторов с длительным действием включают агонисты, описанные в WO 02/066422, WO 02/070490, WO 02/076933, WO 03/024439, WO 03/072539, WO 03/091204, WO 04/016578, WO 2004/022547, WO 2004/037807, WO 2004/037773, WO 2004/037768, WO 2004/039762, WO 2004/039766, WO 01/42193 и WO 03/042160.

Особенно предпочтительные агонисты ( ₂-адренорецепторов с длительным действием включают соединения формулы (XX):

или их соль или сольват, где:

m представляет собой целое число от 2 до 8;

n представляет собой целое число от 3 до 11, при условии что сумма m+n равна от 5 до 19;

R²¹ представляет собой -XSO₂NR²⁶R²⁷, где Х представляет собой -(СН₂)_p- или С_2-6алкенилен;

R²⁶ и R²⁷ независимо выбраны из водорода, C_1-6алкила, С_3-7циклоалкила, C(O)NR²⁸R²⁹, фенила и фенил(С_1-4 алкила)-,

или R²⁶ и R²⁷ вместе с азотом, к которому они присоединены, образуют 5-, 6- или 7-членное азотсодержащее кольцо, и каждый из R²⁶ и R²⁷ возможно замещен одной или двумя группами, выбранными из галогено, С_1-6алкила, C_1-6 галогеналкила, C_1-6алкокси, гидроксизамещенного C _1-6алкокси, -CO₂R²⁸, -SO₂ NR²⁸R²⁹, -CONR²⁸R²⁹ , -NR²⁸C(O)R²⁹ или 5-, 6- или 7-членного гетероциклического кольца;

R²⁸ и R ²⁹ независимо выбраны из водорода, C_1-6алкила, С_3-6циклоалкила, фенила и фенил(С_1-4алкил)-; и

p представляет собой целое число от 0 до 6, предпочтительно от 0 до 4;

R²² и R ²³ независимо выбраны из водорода, С_1-6алкила, C_1-6алкокси, галогено, фенила и C_1-6галогеноалкила; и

R²⁴ и R²⁵ независимо выбраны из водорода и С_1-4алкила при условии, что общее число атомов углерода в R²⁴ и R²⁵ не больше чем 4.

Особенно предпочтительными агонистами ₂-адренорецепторов с длительным действием являются:

3-(4-{[6-({(2R)-2-гидрокси-2-[4-гидрокси-3-(гидроксиметил)фенил]этил}-амино)гексил]окси}бутил)бензолсульфонамид;

3-(3-{[7-({(2R)-2-гидрокси-2-[4-гидрокси-3-гидроксиметил)фенил]этил}-амино)гептил]окси}пропил)бензолсульфонамид;

4-{(1R)-2-[(6-{2-[(2,6-дихлорбензил)окси]этокси}гексил)амино]-1-гидроксиэтил}-2-(гидроксиметил)фенол;

4-{(1R)-2-[(6-{4-[3-(циклопентилсульфонил)фенил]бутокси}гексил)амино]-1-гидроксиэтил}-2-(гидроксиметил)фенол;

N-[2-гидроксил-5-[(1R)-1-гидрокси-2-[[2-4-[[(2R)-2-гидрокси-2-фенилэтил]амино]фенил]этил]амино]этил]фенил]формамид; и

N-2-{2-[4-(3-фенил-4-метоксифенил)аминофенил]этил}-2-гидрокси-2-(8-гидрокси-2(1H)-хинолинон-5-ил)этиламин.

Подходящие противовоспалительные агенты включают кортикостероиды. Подходящие кортикостероиды, которые можно использовать в комбинации с соединениями по настоящему изобретению, представляют собой пероральные и ингаляционные кортикостероиды и их пролекарства, обладающие противовоспалительной активностью. Примеры включают метилпреднизолон, преднизолон, дексаметазон, флутиказона пропионат, 6 ,9 -дифтор-11 -гидрокси-16 -метил-17 -[(4-метил-1,3-тиазол-5-карбонил)окси]-3-оксо-андроста-1,4-диен-17 -тиокарбоновой кислоты S-фторметиловый эфир, 6 ,9 -дифтор-17 -[(2-фуранилкарбонил)окси]-11 -гидрокси-16 -метил-3-оксо-андроста-1,4-диен-17 -тиокарбоновой кислоты S-фторметиловый эфир, 6 ,9 -дифтор-11 -гидрокси-16 -метил-3-оксо-17 -пропионилокси-андроста-1,4-диен-17 -тиокарбоновой кислоты 5-(2-оксо-тетрагидро-фуран-3S-ил)овый эфир, сложные эфиры беклометазона (например, 17-пропионат или 17,21-дипропионат), будезонид, флунизолид, сложные эфиры мометазона (например фуроат), триамцинолона ацетонид, рофлепонид, циклезонид (16 ,17-[[(R)-циклогексилметилен]бис(окси)]-11 ,21-дигидрокси-прегна-1,4-диен-3,20-дион), бутиксокорта пропионат, RPR-106541 и ST-126. Предпочтительные кортикостероиды включают флутиказона пропионат, 6 ,9 -дифтор-11 -гидрокси-16 -метил-17 -[(4-метил-1,3-тиазол-5-карбонил)окси]-3-оксо-андроста-1,4-диен-17 -тиокарбоновой кислоты S-фторметиловый эфир и 6 ,9 -дифтор-17 -[(2-фуранилкарбонил)окси]-11 -гидрокси-16 -метил-3-оксо-андроста-1,4-диен-17 -тиокарбоновой кислоты S-фторметиловый эфир, более предпочтительно 6 ,9 -дифтор-17 -[(2-фуранилкарбонил)окси]-11 -гидрокси-16 -метил-3-оксо-андроста-1,4-диен-17 -тиокарбоновой кислоты S-фторметиловый эфир.

Нестероидные соединения, обладающие глюкокортикоидным агонизмом, которые могут обладать селективностью в отношении трансрепрессии по сравнению с трансактивацией и которые могут быть полезны в комбинированной терапии, включают соединения, охватываемые следующими патентами: WO 03/082827, WO 01/10143, WO 98/54159, WO 04/005229, WO 04/009016, WO 04/009017, WO 04/018429, WO 03/104195, WO 03/082787, WO 03/082280, WO 03/059899, WO 03/101932, WO 02/02565, WO 01/16128, WO 00/66590, WO 03/086294, WO 04/026248, WO 03/061651, WO 03/08277.

Подходящие противовоспалительные агенты включают нестероидные противовоспалительные средства (NSAID).

Подходящие NSAID включают кромогликат натрия, недокромил натрия, ингибиторы фосфодиэстеразы (PDE) (например, теофиллин, ингибиторы PDE4 или смешанные ингибиторы PDE3/PDE4), антагонисты лейкотриена, ингибиторы синтеза лейкотриена (например, монтелукаст), iNOS-ингибиторы (ингибиторы индуцируемой синтазы оксида азота), ингибиторы триптазы и эластазы, антагонисты бета-2-интегрина и агонисты или антагонисты аденозиновых рецепторов (например, агонисты аденозин-2а-рецепторов), антагонисты цитокинов (например, антагонисты хемокинов, например, антагонист CCR3) или ингибиторы синтеза цитокинов, или ингибиторы 5-липоксигеназы. Другие подходящие агонисты ₂-адренорецепторов включают сальметерол (например, в виде ксинафоата), сальбутамол (например, в виде сульфата или свободного основания), формотерол (например, в виде фумарата), фенотерол или тербуталин и их соли. Ингибитор INOS (индуцируемой синтазы оксида азота) предназначен предпочтительно для перорального введения. Подходящие iNOS-ингибиторы включают ингибиторы, раскрытые в WO 93/13055, WO 98/30537, WO 02/50021, WO 95/34534 и WO 99/62875. Подходящие CCR3-ингибиторы включают ингибиторы, раскрытые в WO 02/26722.

Особый интерес представляет применение соединения формулы (I) в комбинации с ингибитором фосфодиэстеразы 4 (PDE4), особенно в случае препарата, адаптированного для ингаляции. PDE4 - специфичный ингибитор, полезный в данном аспекте изобретения, может представлять собой любое соединение, про которое известно, что оно ингибирует фермент PDE4, или для которого обнаружено, что оно действует как PDE4-ингибитор, и которые являются ингибитором только PDE4, а не соединения, которые наряду с PDE4 ингибируют другие члены PDE-семейства, такие как PDE3 и PDE5.

Соединения, представляющие интерес, включают цис-4-циано-4-(3-циклопентилокси-4-метоксифенил)циклогексан-1-карбоновую кислоту, 2-карбометокси-4-циано-4-(3-циклопропилметокси-4-дифторметоксифенил)-циклогексан-1-он и цис-[4-циано-4-(3-циклопропилметокси-4-дифторметоксифенил)циклогексан-1-ол], а также цис-4-циано-4-[3-(циклопентилокси)-4-метоксифенил]циклогексан-1-карбоновую кислоту (также известную как циломиласт) и ее соли, сложные эфиры, пролекарства или физические формы, которая описана в патенте США 5552438, выданном 03 сентября 1996 года; указанный патент и соединения, раскрытые в нем, включены в данное описание изобретения во всей полноте посредством ссылки.

AWD-12-281 от Elbion (Hofgen, N. et al. 15th EFMC Int Symp Med Chem (Sept 6-10, Edinburgh) 1998, Abst P.98; CAS (Chemical Abstracts System) ссылка No. 247584020-9); производное 9-бензиладенина под названием NCS-613 (INSERM); D-4418 от Chiroscience и Schering-Plough; бензодиазепиновый PDE4-ингибитор, названный Cl-1018 (PD-168787) и принадлежащий Pfizer; производное бензодиоксола, раскрытое Kyowa Hakko в WO 99/16766; К-34 от Kyowa Hakko; V-11294A от Napp (Landells, L.J. et al. Eur Resp J [Annu Cong Eur Resp Soc (Sept 19-23, Geneva) 1998] 1998, 12 (Suppl. 28): Abst P2393); рофлумиласт (CAS ссылка No 162401-32-3) и фталазинон (WO 99/47505, описание которого включено посредством ссылки) от Byk-Gulden; пумафентрин, (-)-napa-[(4aR*, 10bS*)-9-этокси-1,2,3,4,4а,10b-гексагидро-8-метокси-2-метилбензо[с][1,6]нафтиридин-6-ил]-N,N-диизопропилбензамид, который представляет собой смешанный PDE3/PDE4-HHrn6m-op, который был получен и пущен в обращение Byk-Gulden, в настоящее время Altana; арофиллин, разрабатываемый в Almirall-Prodesfarma; VM554/UM565 от Vernalis или Т-440 (Tanabe Seiyaku; Fuji, K. et al. J Pharmacol Exp Ther, 1998, 284(1): 162) и Т2585.

Другие соединения, представляющие интерес, раскрыты в опубликованной международной патентной заявке WO 04/024728 (Glaxo Group Ltd), РСТ/ЕР2003/014867 (Glaxo Group Ltd) и РСТ/ЕР2004/005494 (Glaxo Group Ltd).

Подходящие антихолинергические агенты представляют собой соединения, которые действуют как антагонисты мускариновых рецепторов, в частности соединения, которые являются антагонистами М₁ - или М₃-рецепторов, двойными антагонистами М ₁/М₃ или M₂/М₃ рецепторов или панантагонистами М₁/М₂/М₃ -рецепторов. Типичные соединения для введения путем ингаляции включают ипратропий (например, в виде бромида, CAS 22254-24-6, продаваемый под названием Atrovent), окситропий (например, в виде бромида, CAS 30286-75-0) и тиотропий (например, в виде бромида, CAS 136310-93-5, продаваемый под названием Spiriva). Также представляют интерес реватропат (например, в виде гидробромида, CAS 262586-79-8) и LAS-34273, который раскрыт в WO 01/04118. Типичные соединения для перорального введения включают пирензепин (CAS 28797-61-7), дарифенацин (CAS 133099-04-4 или CAS 133099-07-7 для гидробромида, продаваемого под названием Enablex), оксибутинин (CAS 5633-20-5, продаваемый под названием Ditropan), теродилин (CAS 15793-40-5), толтеродин (CAS 124937-51-5 или CAS 124937-52-6 для тартрата, продаваемого под названием Detrol), отилоний (например, в виде бромида, CAS 26095-59-0, продаваемого под названием Spasmomen), хлорид троспия (CAS 10405-02-4) и солифенацин (CAS 242478-37-1 или CAS 242478-38-2 для сукцината, известного также как YM-905 и продаваемого под названием Vesicare).

Другие подходящие антихолинергические агенты включают соединения формулы (XXI), раскрытые в заявке на патент США 60/487981:

,

в которых предпочтительной ориентацией алкильной цепи, присоединенной к тропановому кольцу, является эндо-ориентация;

R³¹ и R³² независимо выбраны из группы, состоящей из низших алкильных групп с прямой или разветвленной цепью, предпочтительно содержащих от 1 до 6 атомов углерода, циклоалкильных групп, содержащих от 5 до 6 атомов углерода, циклоалкил-алкила, содержащего от 6 до 10 атомов углерода, 2-тиенила, 2-пиридила, фенила, фенила, замещенного алкильной группой, содержащей не более 4 атомов углерода, и фенила, замещенного алкоксигруппой, содержащей не более 4 атомов углерода;

X^- представляет собой анион, ассоциированный с положительным зарядом атома N, X^- может представлять собой хлорид, бромид, иодид, сульфат, бензолсульфонат и толуолсульфонат, но не ограничен ими, включая, например:

(3-эндо)-3-(2,2-ди-2-тиенилэтенил)-8,8-диметил-8-азониабицикло[3.2.1]октана бромид;

(3-эндо)-3-(2,2-дифенилэтенил))-8,8-диметил-8-азониабицикло[3.2.1]октана бромид;

(3-эндо)-3-(2,2-дифенилэтенил)-8,8-диметил-8-азониабицикло[3.2.1]октана 4-метилбензолсульфонат;

(3-эндо)-8,8-диметил-3-[2-фенил-2-(2-тиенил)этенил]-8-азониабицикло[3.2.1]октана бромид; и/или

(3-эндо)-8,8-диметил-3-[2-фенил-2-(2-пиридинил)этенил]-8-азониабицикло[3.2.1]октана бромид.

Другие подходящие антихолинергические агенты включают соединения формулы (XXII) или (XXIII), которые раскрыты в заявке на патент США 60/511009:

где:

указанный атом Н находится в экзо-положении;

R⁴¹ представляет собой анион, ассоциированный с положительным зарядом атома N. R⁴¹ может представлять собой хлорид, бромид, иодид, сульфат, бензолсульфонат и толуолсульфонат, но не ограничен ими;

R⁴² и R⁴³ независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из низших алкильных групп с прямой или разветвленной цепью (предпочтительно содержащих от 1 до 6 атомов углерода), циклоалкильных групп (содержащих от 5 до 6 атомов углерода), циклоалкил-алкила (содержащего от 6 до 10 атомов углерода), гетероциклоалкила (содержащего от 5 до 6 атомов углерода) и N или О в качестве гетероатома, гетероциклоалкил-алкила (содержащего от 6 до 10 атомов углерода) и N или О в качестве гетероатома, арила, возможно замещенного арила, гетероарила и возможно замещенного гетероарила;

R⁴⁴ выбран из группы, состоящей из (С₁-С₆)алкила, (С₃-С₁₂)циклоалкила, (С₃-С ₇)гетероциклоалкила, (С₁-С₆)алкил(С ₃-С₁₂)циклоалкила, (С₁-С₆ )алкил(С₃-С₇)гетероциклоалкила, арила, гетероарила, (С₁-С₆)алкил-арила, (С ₁-С₆)алкил-гетероарила, -OR⁴⁵, -CH ₂OR⁴⁵, -CH₂OH, -CN, -CF₃ , -CH₂O(CO)R⁴⁶, -CO₂R⁴⁷ , -CH₂NH₂, -CH₂N(R⁴⁷ )SO₂R⁴⁵, -SO₂N(R⁴⁷ )(R⁴⁸), -CON(R⁴⁷)(R⁴⁸), -CH ₂N(R⁴⁸)CO(R⁴⁶), -CH₂N(R ⁴⁸)SO₂(R⁴⁶), -CH₂N(R ⁴⁸)CO₂(R⁴⁵), -CH₂N(R ⁴⁸)CONH(R⁴⁷);

R⁴⁵ выбран из группы, состоящей из (С₁-С₆)алкила, (С₁-С₆)алкил(С₃-С₁₂ )циклоалкила, (С₁-С₆)алкил(С₃ -С₇)гетероциклоалкила, (С₁-С₆ )алкил-арила, (С₁-С₆)алкил-гетероарила;

R⁴⁶ выбран из группы, состоящей из (С ₁-С₆)алкила, (С₃-С₁₂)циклоалкила, (С₃-С₇)гетероциклоалкила, (С₁ -С₆)алкил(С₃-С₁₂)циклоалкила, (С₁-С₆)алкил(С₃-С₇ )гетероциклоалкила, арила, гетероарила, (С₁-С ₆)алкил-арила, (С₁-С₆)алкил-гетероарила;

R⁴⁷ и R⁴⁸ независимо друг от друга выбраны из группы, состоящей из Н, (С₁-С ₆)алкила, (С₃-С₁₂)циклоалкила, (С ₃-С₇)гетероциклоалкила, (С₁-С ₆)алкил(С₃-С₁₂)циклоалкила, (С ₁-С₆)алкил(С₃-С₇)гетероциклоалкила, (С₁-С₆)алкил-арила и (С₁-С ₆)алкил-гетероарила,

включающие, например:

(эндо)-3-(2-метокси-2,2-дитиофен-2-ил-этил)-8,8-диметил-8-азониа-бицикло[3.2.1]октана иодид;

3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропионитрил;

(эндо)-8-метил-3-(2,2,2-трифенил-этил)-8-аза-бицикло[3.2.1]октан;

3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропионамид;

3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропионовую кислоту;

(эндо)-3-(2-циано-2,2-дифенил-этил)-8,8-диметил-8-азониа-бицикло[3.2.1]октана иодид;

(эндо)-3-(2-циано-2,2-дифенил-этил)-8,8-диметил-8-азониа-бицикло[3.2.1]октана бромид;

3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропан-1-ол;

N-бензил-3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропионамид;

(эндо)-3-(2-карбамоил-2,2-дифенил-этил)-8,8-диметил-8-азониа-бицикло[3.2.1]октана иодид;

1-бензил-3-[3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]-мочевину;

1-этил-3-[3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]-мочевину;

N-[3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]-ацетамид;

N-[3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]-бензамид;

3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дитиофен-2-ил-пропионитрил;

(эндо)-3-(2-циано-2,2-дитиофен-2-ил-этил)-8,8-диметил-8-азониа-бицикло[3.2.1]октана иодид;

N-[3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]-бензолсульфонамид;

[3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]-мочевину;

N-[3-((эндо)-8-метил-8-аза-бицикло[3.2.1]окт-3-ил)-2,2-дифенил-пропил]-метансульфонамид; и/или

(эндо)-3-{2,2-дифенил-3-[(1-фенил-метаноил)-амино]-пропил}-8,8-диметил-8-азониа-бицикло[3.2.1]октана бромид.

Более предпочтительные соединения, полезные в настоящем изобретении, включают:

(эндо)-3-(2-метокси-2,2-дитиофен-2-ил-этил)-8,8-диметил-8-азониа-бицикло[3.2.1]октана иодид;

(эндо)-3-(2-циано-2,2-дифенил-этил)-8,8-диметил-8-азониа-бицикло[3.2.1]октана иодид;

(эндо)-3-(2-циано-2,2-дифенил-этил)-8,8-диметил-8-азониа-бицикло[3.2.1]октана бромид;

(эндо)-3-(2-карбамоил-2,2-дифенил-этил)-8,8-диметил-8-азониа-бицикло[3.2.1]октана иодид;

(эндо)-3-(2-циано-2,2-дитиофен-2-ил-этил)-8,8-диметил-8-азониа-бицикло[3.2.1]октана иодид; и/или

(эндо)-3-{2,2-дифенил-3-[(1-фенил-метаноил)-амино]-пропил}-8,8-диметил-8-азониа-бицикло[3.2.1]октана бромид.

Подходящие антигистамины (также называемые антагонистами Н1-рецепторов) включают один или более из многочисленных известных антагонистов, которые ингибируют Н1-рецепторы и безопасны для применения у человека. Антагонисты первого поколения включают производные этаноламинов, этилендиаминов и алкиламинов, например дифенилгидрамин, пириламин, клемастин, хлорфенирамин. Антагонисты второго поколения, которые не являются седативными, включают лоратидин, дезлоратидин, терфенадин, астемизол, акривастин, азеластин, ловоцетиризин, фексофенадин и цетиризин.

Примеры предпочтительных антигистаминов включают лоратидин, дезлоратидин, фексофенадин и цетиризин.

Таким образом, в одном воплощении фармацевтическая композиция по изобретению представляет собой комбинацию, содержащую соединение формулы (I) или его физиологически приемлемый сольват вместе с агонистом ₂-адренорецепторов.

В другом воплощении фармацевтическая композиция по изобретению представляет собой комбинацию, содержащую соединение формулы (I) или его физиологически приемлемый сольват вместе с ингибитором PDE4.

В другом воплощении фармацевтическая композиция по изобретению представляет собой комбинацию, содержащую соединение формулы (I) или его физиологически приемлемый сольват вместе с антихолинергическим агентом.

В другом воплощении фармацевтическая композиция по изобретению представляет собой комбинацию, содержащую соединение формулы (I) или его физиологически приемлемый сольват вместе с антигистамином.

Обычно фармацевтические композиции по изобретению, которые представляют собой комбинации с другим терапевтически активным агентом, могут быть представлены для применения в форме фармацевтического препарата, содержащего комбинацию, как определено выше, вместе с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем.

Отдельные соединения таких комбинаций можно вводить или последовательно, или одновременно в составе раздельных или комбинированных фармацевтических препаратов. Отдельные соединения таких комбинаций можно предпочтительно вводить одновременно в составе комбинированного фармацевтического препарата. Подходящие дозы известных терапевтических агентов легко могут быть определены специалистами в данной области.

Сольваты соединения формулы (I), которые не являются физиологически приемлемыми, могут быть полезны в качестве промежуточных соединений при получении соединений формулы (I) или их физиологически приемлемых сольватов.

Соединение формулы (I) и/или его сольваты проявляют агонизм в отношении глюкокортикоидных рецепторов.

Соединение формулы (I) и/или его сольваты могут проявлять хорошие противовоспалительные свойства с прогнозируемым фармакокинетическим и фармакодинамическим поведением. Они также могут иметь благоприятный профиль побочных эффектов, проявляемый, например, в повышенной селективности в отношении глюкокортикоидного рецептора по сравнению с рецептором прогестерона и/или в повышенной селективности в отношении опосредованной глюкокортикоидными рецепторами трансрепрессии по сравнению с трансактивацией, и могут быть совместимы с традиционной схемой лечения пациентов-людей.

Следующие не ограничивающие примеры иллюстрируют настоящее изобретение.

ПРИМЕРЫ

Общие сведения

Хроматографическую очистку выполняли используя имеющиеся в продаже готовые силикагелевые картриджы Bond Elut от Varian или с помощью флэш-хроматографии на готовых Biotage колонках со стеклянным сорбентом. Эти картриджи перед использованием предварительно уравновешивали с помощью дихлорметана. LCMS (сочетание жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии) проводили на Supelcosil LCABZ+PLUS колонке (3,3 см × 4,6 мм ID (внутренний диаметр)), элюируя 0,1%-ной HCO₂Н и 0,01 М ацетатом аммония в воде (растворитель А) и смесью 0,05% HCO₂Н и 5% воды в ацетонитриле (растворитель Б), используя следующий градиент элюирования 0-0,7 мин 0% Б, 0,7-4,2 мин 100% Б, 4,2-5,3 мин 0% Б, 5,3-5,5 мин 0% Б при скорости элюирования 3 мл/мин. Масс-спектры регистрировали на спектрометре Fisons VG Platform, используя регистрацию положительных и отрицательных ионов при электрораспылении (ES+ve и ES-ve). Спектры ¹ H-ЯМР (ядерного магнитного резонанса) получали в CDCl₃ на спектрометре Bruker DPX 400, работая на 400,13 МГц и 9,4 Тл и используя в качестве внутреннего стандарта сигнал от остаточного протонированного растворителя при 7,25 м.д. (миллионные доли).

Промежуточные соединения

Промежуточное соединение 1: 2,3-диметил-1-[(2,2,3,3-тетраметилциклопропил)карбонил]-1H-имидазол-3-ия хлорид

К перемешанному раствору 2,2,3,3-тетраметилциклопропан-карбоновой кислоты (600 г, 4,2 ммоль) в дихлорметане (3,6 л) при 34°С на протяжении 65 минут добавляли оксалилхлорид (360 мл, 4,1 моль). Затем раствор нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 30 минут и затем охлаждали до 5°С. На протяжении 45 минут добавляли раствор 1,2-диметилимидазола (490 г, 5,1 моль) в дихлорметане (1,2 л), поддерживая внутреннюю температуру приблизительно 5°С. Затем полученную суспензию нагревали до 18°С и на протяжении 45 минут добавляли ацетон (4,8 л), поддерживая внутреннюю температуру приблизительно 18°С. Взвесь охлаждали до 5°С за 30 минут, перемешивали при 5°С в течение 30 минут и затем фильтровали. Продукт собирали фильтрацией, промывали смесью ацетон:дихлорметан (3:1, 3×1,2 л), досуха отсасывали и затем сушили в вакуум-сушильном шкафу при 25-30°С в течение 10 часов, получая Промежуточное соединение 1 в виде белого твердого вещества (890 г). ¹H NMR: _H (CDCl₃, 400 МГц) 8,45 (d, J 2,4 Гц, 1Н), 8,11 (d, J 2,4 Гц, 1Н), 4,21 (s, 3Н), 2,96 (s, 3Н), 2,21 (s, 1Н), 1,43 (s, 6H), 1,33 (s, 6H).

Примеры

Пример 1: 6 ,9 -дифтор-11 -гидрокси-16 -метил-3-оксо-17 -(2,2,3,3-тетраметилциклопропилкарбонил)окси-андроста-1,4-диен-17 -карбоновой кислоты цианметиловый эфир

Способ А

К перемешанному и охлажденному (на льду) раствору 6 ,9 -дифтор-11 -гидрокси-16 -метил-3-оксо-17 -(2,2,3,3-тетраметилциклопропилкарбонил)окси-андроста-1,4-диен-17 -карбоновой кислоты (полученной, как описано в WO 2003/3072592) (634 мг, 1,22 ммоль) и карбоната натрия (1,29 мг, 12,2 ммоль) в DMF (диметилформамиде) (15 мл) в атмосфере азота добавляли бромацетонитрил (0,229 мл, 3,29 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Добавляли еще карбонат натрия (258 мг) и смесь перемешивали в течение еще 18 часов. По каплям добавляли 2 М HCl (20 мл), затем воду (25 мл) и данную смесь экстрагировали этилацетатом (2×50 мл). Объединенные органические экстракты последовательно промывали водным бикарбонатом натрия (50 мл) и рассолом (50 мл), сушили через гидрофобную фритту и досуха выпаривали. В результате очистки на картридже Bond Elut, используя сначала циклогексан, а в конце - смесь циклогексан:этилацетат 3:1, получали указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества (485 г): время удерживания при LCMS составляло 3,79 мин, m/z 560 МН⁺.

Способ Б

6 ,9 -Дифтор-11 ,17 -дигидрокси-16 -метил-3-оксо-андроста-1,4-диен-17 -карбоновую кислоту (G.H.Phillipps et al., (1994) Journal of Medicinal Chemistry, 37, 3717-3729) (490 г, 1,2 моль) и Промежуточное соединение 1 (790 г, 3,1 М) суспендировали в 3-пентаноне (7,3 л). К данной суспензии при перемешивании на протяжении 10 минут добавляли раствор 1,2-диметилимидазола (120 г, 1,2 моль) в воде (730 мл), поддерживая внутреннюю температуру приблизительно 19°С. Через 35 минут на протяжении 10 минут добавляли 1-метилпиперазин (230 мл, 2,1 моль), сохраняя внутреннюю температуру приблизительно 19°С. Смесь перемешивали в течение 30 минут и затем последовательно промывали 2 М HCl (290 мл) и водой (290 мл). К раствору последовательно добавляли диизопропилэтиламин (430 мл, 2,5 моль) и бромацетонитрил (120 мл, 1,7 моль) и смесь нагревали до 53°С в течение 13 часов. Полученный раствор охлаждали до 34°С и добавляли 1-метилпиперазин (105 мл). Данную смесь перемешивали при температуре приблизительно 34°С в течение еще одного часа, охлаждали до 25°С и последовательно промывали 2 М HCl (290 мл), водой (290 мл), 2%-ным раствором карбоната калия (290 мл) и водой (290 мл). Органический раствор концентрировали до 3,9 л с помощью перегонки при атмосферном давлении, охлаждали до 75°С и затравливали кристаллами соединения из Примера 1. При 75°С на протяжении 3 часов добавляли 2,2,4-триметилпентан (6,83 л) и затем взвесь охлаждали до 10°С на протяжении 2 часов, перемешивали в течение еще 30 минут и затем фильтровали. Продукт промывали смесью 3-пентанон:2,2,4-триметилпентан (1:3, 3×1 л), досуха отсасывали и окончательно высушивали в вакуум-сушильном шкафу при 50°С в течение 12 часов, получая соединение из Примера 1 в виде белого твердого вещества (640 г), идентичного веществу, получаемому при использовании Способа А.

Фармакологическая активность

Фармакологическая активность может быть определена в функциональных in vitro анализах глюкокортикоидной агонистической активности.

Данный функциональный анализ, основанный на функциональном анализе, описанном К.Р.Ray et al., Biochem J. (1997), 328, 707-715, обеспечивает измерение трансрепрессивной активности глюкокортикоидного агониста. Клетки А549, стабильно трансфицированные геном-репортером, содержащим NF-кВ-чувствительные элементы промотора гена ELAM (эндотелиально-лейкоцитарных адгезивных молекул), присоединенные к sPAP (секретируемой щелочной фосфатазе), обрабатывают подходящими дозами тестируемых соединений в течение 1 часа при 37°С. Затем эти клетки стимулируют фактором некроза опухолей (TNF, 10 нг/мл) в течение 16 часов, когда с помощью стандартного колориметрического анализа измеряют количество продуцируемой щелочной фосфатазы. Строят кривые зависимости ответа от дозы, на основании которых можно оценить значения EC ₅₀ (концентрации, необходимой для получения 50%-ного эффекта).

Значение ЕС₅₀ для соединения Примера 1 составляло <0,1 нМ.

Данный функциональный анализ, основанный на анализе, описанном R.J.H.Austin et al., Eur Resp J. (2002), 20, 1386-1392, позволяет определить способность соединений непосредственно трансактивировать генную экспрессию. Клетки А549, стабильно трансфицированные геном-репортером, содержащим чувствительную к глюкокортикоидам область длинного концевого повтора вируса рака молочных желез мышей (MMTV-LTR), присоединенную к Renilla люциферазе, обрабатывали подходящими дозами тестируемых соединений в течение 6 часов при 37°С. Затем величину люциферазной активности, присутствующей в этих клетках, определяли путем измерения величины светового излучения после инкубации с соответствующим субстратом. Строили кривые зависимости ответа от дозы, на основе которых оценивали значения EC₅₀ и из которых рассчитывали максимальные ответы относительно дексаметазона (100%).

Соединение Примера 1 в данном анализе показывало максимальный ответ <5%.

Анализ активности в отношении рецепторов прогестерона

Описано, что линия раковых клеток молочной железы человека T47D активирует эндогенную щелочную фосфатазу в ответ на прогестины (Di Lorenzo et al., Cancer Research (1991) 51, 4470-4475). Клетки T47D засевали в 96-луночные планшеты с плотностью 1×10⁵ клеток на лунку и выращивали в течение ночи при 37°С. Стероиды растворяли в DMSO (диметилсульфоксиде), добавляли к клеткам (конечная концентрация DMSO 0,7%) и инкубировали в течение 24 часов при 37°С. Затем клетки промывали с помощью PBS (фосфатно-буферного раствора) и лизировали в буфере RIPA (1% IGEPAL, 0,5% Na-дезоксихолат, 0,1% SDS (додецилсульфат натрия) в фосфатном солевом буфере). Активность щелочной фосфатазы измеряли спектрофотометрически (405 нм), используя в качестве субстрата пара-нитрофенилфосфат (1,5 мг/мл), растворенный в смеси 1 М диэтаноламина, 0,28 М NaCl, 0,5 мМ MgCl₂. Строили кривые зависимости ответа от дозы, на основании которых оценивали значения EC ₅₀.

Значение EC₅₀ для соединения Примера 1 в данном анализе составляло >100 нМ.

Если контекст не подразумевает другого, во всем описании и в следующей формуле изобретения подразумевается, что слово "содержать" и такие варианты, как "содержит" и "содержащий", подразумевает включение указанного целого или стадии, или группы целых и не подразумевает исключение любого другого целого или стадии, или группы целых, или стадий.

Настоящая заявка, часть которой составляет данное описание и формула изобретения, может быть использована в качестве основания для приоритета по отношению к любой последующей заявке. Пункты формулы изобретения такой последующей заявки могут относится к любому признаку или комбинации признаков, описанных в данной заявке. Они могут иметь вид пунктов на продукт, композицию, способ или применение и могут включать, в качестве примера и без ограничения, следующие пункты формулы изобретения.

Патенты и патентные заявки, описанные в данной заявке, включены в данное описание посредством ссылки.