2-(1-(2-(2-хлор-10н-фенотиазин-10-ил)-2-оксоэтил)-5-метил-1н-1,2,4-триазол-3-ил)фенол, обладающий гипотензивным и антиаритмическим действием

Формула изобретения

2-(1-(2-(2-Хлор-10H-фенотиазин-10-ил)-2-оксоэтил)-5-метил-1H-1,2,4-триазол-3-ил)фенол формулы I



обладающий гипотензивным и антиаритмическим действием.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к новым производным в ряду фенотиазина, а именно к 2-(1-(2-(2-хлор-10H-фенотиазин-10-ил)-2-оксоэтил)-5-метил-1H-1,2,4-триазол-3-ил)фенолу формула I:

обладающим гипотензивным и антиаритмическим действиями при внутрибрюшинном введении вещества.

Большинство лекарственных веществ фенотиазинового ряда обладают нейролептическим, противогистаминным (дипразин), холинолитическим (динезин), седативным, противорвотным (тиэтилперазин), антиаритмическим (этмозин, этацизин) и коронарорасширяющим действием (нонахлазин) [1].

Известно, что производные фенотиазина проявляют высокую антиокислительную, антирадикальную, нейропротекторную и противоопухолевую активности [2], [3].

Наиболее близкими по структуре к соединению I является гидрохлорид 2-хлор-10-(3-диэтиламинопропионил)-фенотиазина (хлорацизин) II [4], обладающий коронарорасширяющим действием.

Техническим результатом изобретения является новое соединение в ряду фенотиазина, проявляющее гипотензивное и антиаритмическое действие, более эффективное, чем у известного антиаритмического препарата - этацизина.

Технический результат изобретения достигается соединением I - 2-(1-(2-(2-хлор-10H-фенотиазин-10-ил)-2-оксоэтил)-5-метил-1H-1,2,4-триазол-3-ил)фенолом, обладающим гипотензивным и антиаритмическим действием. В таблице 1 показано влияние соединения I и этацизина на уровень МЛЖД, ЧСС, + dP/dt, - dP/dt, dp/dt/PI, dp/dt/PD, КДД у нормотензивных бодрствующих крыс в процентах к исходному уровню в дозе 1 мг/кг, где p<0,05 по сравнению с исходными данными (по t - критерию Стьюдента для независимых рядов), n - количество животных в опыте. В таблице 2 и 3 приведена острая токсичность I и таблеток этацизина по 0,5 г соответственно (D - показатель разницы между количеством двух соседних доз, Z - показатель разницы между количеством погибших животных при использовании двух соседних доз).

Первая стадия синтеза вещества I заключается во взаимодействии перхлорта 2-метил-4-оксо-1,3-бензоксазиния III с гидразин-гидратом при нагревании в уксусной кислоте с образованием продукта IV. Реакция происходит путем рециклизации по ANRORC механизму [5] с первоначальной атакой аминогруппой второго положения оксазинового цикла.

Дальнейшее кипячение триазола IV в ацетоне в присутствии поташа с 2-хлор-10-(хлорацетил)-10H-фенотиазином V приводит к веществу I - вторая стадия:

Ниже приведены методики синтеза предлагаемого соединения.

Стадия 1. 2-(3-Метил-1H-1,2,4-триазол-5-ил)фенол IV. Получен при нагревании перхлората 2-метил-4-оксо-1,3-бензоксазиния с гидразин-гидратом в ледяной уксусной кислоте [5].

Стадия 2. 2-{1-[2-(2-Хлор-10H-фенотиазин-10-ил)-2-оксоэтил]-5-метил-1H-1,2,4-триазол-3-ил} фенол I. К раствору 1.75 г (10 ммоль) триазола IV в 15 мл ацетона прибавляют 5.52 г (40 ммоль) прокаленного поташа, кипятят 15 мин, охлаждают и прибавляют 3.1 г (10 ммоль) 2-хлор-10-(хлорацетил)-10H-фенотиазина V. Реакционную смесь кипятят 1.5 ч, разбавляют водой. Выделившийся бесцветный осадок отфильтровывают (3.59 г, 83%). Т. пл. 188-190°С.

Найдено, %: С 63,80; Н 3,40; Cl 8,50; N 12,60; S 7,10.

C₂₃H₁₇ClN₄ OS.

Вычислено, %: С 63,82; Н 3,93; Cl 8,21; N 12,95; S 7,40.

ИК-спектр (вазелин, масло), см ^-1: 1710 (С=O); 1600 (С=С).

Спектр ¹Н ЯМР (ацетон-d₆, J/Гц), , м.д: 2.50 (3Н, с, СН₃); 5.45 (2Н, Д_ушир , N-CH₂, J=5.3); 6.81-7.96 (11Н, м, аром. Н); 10.95(1Н, с, O-Н).

Спектр ¹³С ЯМР (ДМСО-d ₆, J/Гц), , м.д: 11.24 (1C, к, СН₃, J=130.4), 50.38 (1C, т, СН₂, J=143.6), 113.74 (1C, т, C_ap, J=7.02), 116.70 (1C, м, C_ap), 119.21 (1C, м, C_ap ), 126.05 (1С_ар, д, J=6.9), 126.81 (1C, м, C_ap ), 126.96 (2C, д, C_ap, J=4.5), 127.46 (1C, м, C _ap), 127.76 (2C, м, C_ap), 128.17 (1C, д, C _ap, J=8.4), 129.14 (1C, м, C_ap), 130.65 (1C, д, C_ap, J=5.0), 131.22 (1C, д, C_ap, J=6.6), 131.85 (1C, д, C_ap, J=8.9), 136.65 (1C, д, C_ap , J=9.0), 138.34 (1C, с, C_ap), 153.75 (1C, м, С _триаз, ²J=7.2 Гц, ³J=2.7), 156.09 т (1C, т, С=O, J=7.6), 158.35 (1C, д, С_триаз, J=4.5), 164.61 (1C, т, C_ap, J=4.8).

Все скрининговые исследования проводились согласно Руководству по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ с определением LD₅₀ [6].

Эксперименты проведены в соответствии со статьей 11-й Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации (1964), "Международными рекомендациями по проведению медико-биологических исследований с использованием животных" (1985) и Правилами лабораторной практики в Российской Федерации (приказ МЗ РФ № 267 от 19.06.2003 г.).

Эксперимент начали с изучения влияния исследуемого соединения в разных дозах на кардиогемодинамику лабораторных животных: на артериальное давление и работу сердца нормотензивных бодрствующих крыс (В.П.Фисенко. // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М., 2004. - С.220-224).

Острую токсичность исследовали [определяли среднюю летальную (смертельную) дозу - LD₅₀] в опытах на мышах при внутрибрюшинном введении вещества предварительно суспендированного с твин-80, определяли средние летальные дозы (LD₅₀) [7], [8], [9]. Рассчитывали острую токсичность, соблюдая рекомендации государственного фармакологического комитета по изучению общетоксического действия биологически активных веществ [10]. В качестве препаратов сравнения с сопоставляемым соединением I был взят этацизин. Вещество I, как и этацизин, оказывает мягкий гипотензивный эффект, существенно не влияя на частоту сердечных сокращений (ЧСС) бодрствующих нормотензивных белых беспородных крыс. Выявлено, что в дозе 1 мг/кг (1/3000 от LD₅₀) изученное соединение I достоверно увеличивает скорость расслабления сердечной мышцы, показатель сократимости увеличивается, конечно - диастолическое давление достоверно уменьшается (табл.1). Препарат сравнения этацизин в дозе 0,002 мг/кг (1/3000 от LD₅₀) практически не влияет на показатели центральной гемодинамики: достоверно увеличивает показатель - dP/dt - скорость расслабления миокарда только на 5, 10, 15 мин; повышает показатель КДД, достоверно увеличивает показатель +dP/dt только на 45 и 60 мин эксперимента; не влияет на показатели dp/dt/PI - контрактильный индекс Верагута (КИВ) и dp/dt/PD - модифицированный индекс Верагута (табл.1).

Сопоставление результатов проведенных исследований по острой токсичности свидетельствует о том, что согласно табуляции классов токсичности [10], [11], [12] вещество I может быть отнесено по Hodge и Sterner и классификации К.К.Сидорова к 5 классу токсичности и является практически нетоксичным соединением, и это позволило обосновать целесообразность дальнейшего изучения его биологической активности (табл.2). Действительно, исходя из формулы:

,

(где n - количество животных в опыте, равное 12, LD₁₀₀ - минимальная доза изучаемого вещества, которая приводит к 100% гибели всей группы животных), для таблеток этацизина по 0,5 г (50 мг) , следовательно, LD₅₀=55 мг/кг (табл.3). Для вещества I

Таким образом, результаты изучения кардиотропной активности показали, что вещество I обладает существенным преимуществом по сравнению с препаратом сравнения этацизином и после проведения клинических испытаний в медицинских учреждениях может быть использовано в качестве лекарственного средства, обладающего гипотензивным и антиаритмическим действием.

Источники информации

1. Большая медицинская энциклопедия [В 30-ти Т. АМН СССР]. Гл. ред. Б.В.Петровский. - 3-е изд. - М.: Советская энциклопедия. - Т.5. 1985, 560 с., М.Д.Машковский. // Лекарственные средства: пособие для врачей. М., 2005. С.356-367.

2. К. Fukuzumi, N. Ikeda, М. Egawa, J. Am. Oil Chem. Soc., 1976, No 53, pp.623.

3. S. Nagy, G. Argyclan, J. Molnar, М. Kawase, N. Motohashi, Anticancer Res., 1996, No 16, pp.1916.

4. М.Д.Машковский. // Лекарственные средства. М., 1972, с.368-369.

5. Г.Н.Дорофеенко, Ю.И.Рябухин, С.Б.Булгаревич, В.В.Межерицкий, О.Ю.Рябухина. // ЖОрХ, 1977, т.13, № 11, с.2459-2460.

6. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. // Под ред. Фисенко В.П. и др.- М.: ИАА «Ремедиум», 2004. - С.220-224.

7. М.П.Беленький. // Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. Л., 1963, с.149.

8. Методические рекомендации по изучению общетоксического действия фармакологических средств. Утв. 25.12.97. // Вести, фармакоп.комитета. - 1998. - № 1. - С.27-32.

9. И.В.Саноцкий. // Методы определения токсичности и опасности химических веществ. М., 1970, с.343.

10. К.К.Сидоров, К.К. Методы определения острой токсичности и опасности химических веществ. (Токсикология). / К.К.Сидоров. - М.: Медицина, 1970, 171 с.

11. Измеров Н.Ф. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии. / Н.Ф.Измеров, И.В.Саноцкий, К.К.Сидоров. - М.: Медицина, 1977. - 197 с.

12. Hodge H.C., Sterner L.H., Am. industr. Hyg, Ass. Quart., 1943, 10, 4, 93.

Таблица 1
Влияние I и этацизина на уровень МЛЖД, ЧСС, +dP/dt, -dP/dt, dp/dt/PI, dp/dt/PD, КДД у нормотензивных бодрствующих крыс в процентах к исходному уровню в дозе 1 мг/кг (М± m, n=6, %)
Вещество	Исходное МЛЖД, мм рт.ст.	Через 5 мин	Через 10 мин	Через 15 мин	Через 30 мин	Через 45 мин	Через 60 мин	Через 90 мин
Этацизин	120,6±12,1	-2,4±2,3	-0,3±1,5	-1,5±2,2	-0,1±2,1	1,0±1,0	0,0±1,2	1,6±1,1
I	144,1±8,4	-2,2±2,4	-4,6±2,7	-5,5±2,8	-7,8±4,2	-9,3±4,2*	-7,9±2,7*	-5,8±1,6*
	Исходное ЧСС, уд./мин
Этацизин	376,4±18,9	-1,8±1,1	-0,6±0,8	-0,3±0,8	-0,2±0,4	-0,4±0,5	-1,0±0,5	-0,2±0,7
I	408,3±11,1	1,3±1,4	-2,8±5,6	-4,8±6,1	-0,5±7,4	-3,3±6,6	0,8±5,1	2,5±4,7
	Исходное +dP/dt, мм рт.ст./сек
Этацизин	9776,2±2475,4	2,2±5,9	7,8±5,6	5,9±6,0	7,8±5,2	10,5±3,5*	9,0±4,4*	2,2±7,2
I	10872/7±1118,8	-4,5±6,3	-5,4±6,9	-9,5±6,9	-12,2±8,б	-11,5±7,5	-4,9±3,8	-3,5±1,7
	Исходное -dP/dt, мм рт.ст./сек
Этацизин	-6560,5d±1468,4	10,6±2,2*	8,3±1,9*	9,6±2,4*	7,3±3,5	5,3±3,8	7,0±3,3	5,7±2,6
I	-7962,4±1031,7	9,1±3,3*	10,5±3,7*	12,1±3,9*	21,1±4,8*	21,0±8,3*	17,8±7,6*	13,4±4,6*

Продолжение таблицы 1
	Исходное dp/dt/PI, 1/с
Этацизин	209,4±25,2	-0,6±0,8	-1,1±1,9	-2,2±1,3	-1,7±1,8	0,8±2,4	0,2±1,7	1,3±1,9
I	169,7±14,8	-2,6±3,9	3,3±5,4	0,3±4,6	4,1±5,2	4,1±7,0	8,3±3,1*	11,7±5,7
	Исходное dp/dt/PD, 1/с
Этацизин	229,6±20,9	-0,1±0,7	1,9±0,9	-0,1±0,9	0,7±1,4	-1,2±1,4	-0,6±1,7	-0,6=1,4
I	204,6±16,4	-3,4±4,3	-2,8±5,9	-4,0±6,8	-1,3±8,5	-5,2±1,4	-3,0±6,4	-0,2±4,7
	Исходное КДД мм рт.ст.
Этацизин	8,6±2,1	16,8±16,9	17,2±17,2	10,3±1,4	12,4±10,4	-1,8±5,6	6,9±2,5*	12,9±3,9*
I	10,6±2,3	20,7±32,1	3,2±25,2	2,7±19,7	-16,3±20,9	-44,1±12,1*	-45,2±13,0*	-8,2±32,1

Таблица 2
Определение острой токсичности соединения I
Результат	Доза мг/кг
10	100	500	1000	3100
Количество животных	12	12	12	12	12
Выжило	12	12	12	12	12
Погибло	0	0	0	0	0
D	-	90	400	500	2000
Z	-	0	0	0	0
DZ	-	0	0	0	0
Таблица 3
Определение острой токсичности таблеток этацизина по 0,5 г (50 мг)
Результат	Доза, мг/кг
60	55	50	45	40
Количество животных	12	12	12	12	12
Выжило	0	6	8	11	12
Погибло	12	6	4	1	0
D	-	5	5	5	5
Z	-	6	2	3	1
DZ	-	30	10	15	5