способ получения аминокислот с использованием бактерии, принадлежащей к роду escherichia
Классы МПК: | C12N1/21 модифицированные введением чужеродного генетического материала C12N15/00 Получение мутаций или генная инженерия; ДНК или РНК, связанные с генной инженерией, векторы, например плазмиды или их выделение, получение или очистка; использование их хозяев C12P13/04 альфа- или бета-аминокислоты |
Автор(ы): | Шакулов Рустэм Саидович (RU), Клячко Елена Витальевна (RU), Дорошенко Вера Георгиевна (RU), Айрих Лариса Готлибовна (RU) |
Патентообладатель(и): | Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) (RU) |
Приоритеты: |
подача заявки:
2007-09-27 публикация патента:
10.08.2010 |
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ получения L-аминокислоты, включающий выращивание бактерии и выделение указанной L-аминокислоты из культуральной жидкости. При этом бактерия-продуцент представляет собой бактерию, принадлежащую к роду Escherichia, содержащую ДНК, включающую ген, кодирующий фермент бактерии, который влияет на биосинтез указанной L-аминокислоты, и транскрибируемый фрагмент ДНК, кодирующий пептид SsrA. Изобретение касается также способа получения сложного эфира низших алкилов -L-аспартил-L-фенилаланина, включающего выращивание вышеуказанной бактерии в питательной среде, выделение L-фенилаланина, и синтез сложного эфира низшего алкила -L-аспартил-L-фенилаланина из аспарагиновой кислоты или ее производных и полученного L-фенилаланина. Изобретение позволяет получать L-аминокислоты и сложные эфиры низших алкилов -L-аспартил-L-фенилаланина с высокой степенью эффективности. 3 н. и 7 з.п. ф-лы, 5 ил., 2 табл.
Формула изобретения
1. Бактерия, принадлежащая к роду Escherichia, - продуцент L-аминокислоты, содержащая ДНК, включающую:
A) ген, кодирующий фермент бактерии, который влияет на биосинтез указанной L-аминокислоты, и
B) транскрибируемый фрагмент ДНК, кодирующий пептид SsrA, последовательность которого представлена в Перечне последовательностей под номером SEQ ID NO: 2, или его функциональный вариант, отличающийся тем, что указанный фрагмент присоединен к 3' концу указанного гена.
2. Бактерия по п.1, отличающаяся тем, что указанная бактерия является продуцентом L-фенилаланина.
3. Бактерия по п.1, отличающаяся тем, что указанным ферментом является хоризматмутаза/префенатдегидрогеназа.
4. Бактерия по п.1, отличающаяся тем, что указанная бактерия является продуцентом L-гистидина.
5. Бактерия по п.1, отличающаяся тем, что указанным ферментом является фосфоглюкозоизомераза.
6. Способ получения L-аминокислоты, включающий выращивание бактерии по п.1 в питательной среде и выделение указанной L-аминокислоты из культуральной жидкости.
7. Способ по п.6, отличающийся тем, что указанной L-аминокислотой является L-фенилаланин.
8. Способ по п.6, отличающийся тем, что указанной L-аминокислотой является L-гистидин.
9. Способ получения сложного эфира низших алкилов -L-аспартил-L-фенилаланина, включающий выращивание бактерии по любому из пп.2 и 3 в питательной среде, приводящее к накоплению L-фенилаланина, выделение L-фенилаланина, и синтез сложного эфира низшего алкила -L-аспартил-L-фенилаланина из аспарагиновой кислоты или ее производных и полученного L-фенилаланина.
10. Способ по п.9, дополнительно включающий этерификацию полученного L-фенилаланина с образованием сложного эфира низшего алкила L-фенилаланина, конденсирование сложного эфира низшего алкила L-фенилаланина с производным аспарагиновой кислоты, при этом указанным производным является N-ацил-ангидрид L-аспарагиновой кислоты, выделение сложного эфира низшего алкила N-ацил- -L-аспартил-L-фенилаланина из реакционной смеси и гидрогенизирование сложного эфира низшего алкила N-ацил- -L-аспартил-L-фенилаланина с образованием сложного эфира низшего алкила -L-аспартил-L-фенилаланина.
Описание изобретения к патенту
Класс C12N1/21 модифицированные введением чужеродного генетического материала
Класс C12N15/00 Получение мутаций или генная инженерия; ДНК или РНК, связанные с генной инженерией, векторы, например плазмиды или их выделение, получение или очистка; использование их хозяев
Класс C12P13/04 альфа- или бета-аминокислоты