фармацевтическая композиция для снижения избыточных уровней сахара в крови больных сахарным диабетом

Формула изобретения

1. Фармацевтическая композиция для снижения избыточных уровней сахара в крови больных диабетом типа 2, содержащая, по меньшей мере, один цианогенный гликозид из ядер горького миндаля в качестве активного ингредиента.

2. Фармацевтическая композиция по п.1, которая содержит от приблизительно 70 до 90% высушенных и измельченных ядер горького миндаля.

3. Способ снижения избыточных уровней сахара в крови больных сахарным диабетом типа 2, включающий введение фармацевтической композиции, содержащей, по меньшей мере, один цианогенный гликозид из ядер горького миндаля в качестве активного ингредиента.

4. Применение, по меньшей мере, одного цианогенного гликозида из ядер горького миндаля в качестве активного ингредиента для изготовления фармацевтической композиции для снижения избыточных уровней сахара в крови больных сахарным диабетом типа 2.

Описание изобретения к патенту

Изобретение обеспечивает композицию для снижения избыточных уровней сахара в крови больных сахарным диабетом типа 2. Более конкретно настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для снижения избыточных уровней сахара в крови больных сахарным диабетом типа 2, в которой используется один или несколько активных ингредиентов, где, по меньшей мере, одним из вышеуказанных активных ингредиентов является цианогенный глюкозид, предпочтительно полученный из природного источника.

В развитых странах количество людей, имеющих диабет, возрастает до эпидемиологических размеров. Существует большое количество исследований по изучению патогенеза сахарного диабета в сравнении с нормогликемией. Диагностические критерии сахарного диабета упростили для более подходящего и точного диагностирования заболевания. Есть миллионы людей, имеющих сахарный диабет, но не знающих об этом. Необходимо, чтобы проводился соответствующий скрининг для установления диагноза с целью отсрочки или предотвращения появления осложнений. Осложнения сахарного диабета имеют значения для увеличивающегося количества людей с данным диагнозом, которые помещены в стационар, и для выбора способа их лечения. Существуют точные способы распознавания и лечения и острых, и хронических осложнений у помещенных в стационар больных сахарным диабетом. Контроль содержания глюкозы в крови имеет важное значение для благоприятных исходов.

Сахарный диабет типа 2 обычно встречается у людей старше 40 лет и у тех, чей семейный анамнез отягощен сахарным диабетом. Сахарный диабет типа 2 характеризуется периферической резистентностью к инсулину с дефектом секреции инсулина, который различается по тяжести. Эти дефекты приводят к повышенному печеночному глюконеогенезу, что влечет за собой гипогликемию натощак. Большинство больных (90%), у которых развивается сахарный диабет типа 2, страдают ожирением, и ожирение само по себе связано с резистентностью к инсулину, что ухудшает состояние при диабете. Поскольку у больных сахарным диабетом типа 2 сохраняется способность секретировать некоторое количество эндогенного инсулина, у тех пациентов, которые принимают инсулин, не развивается диабетический кетоацидоз (DKA), если они по каким-то причинам прекращают принимать инсулин. По этой причине считается, что такие больные нуждаются в инсулине, но не зависят от инсулина. Более того, больные сахарным диабетом типа 2 зачастую не нуждаются в лечении с применением перорального противодиабетического лекарственного средства или инсулина, если они теряют вес посредством успешного соблюдения рекомендованной лечащим врачом программы потери веса, включающей строгую диету и физическую нагрузку.

Целый ряд других типов диабета, ранее называемых «вторичный диабет», возникает в результате других заболеваний или медикаментозных лечений. В зависимости от вовлеченного первичного процесса (то есть разрушение бета-клеток поджелудочной железы или развитие периферической резистентности к инсулину), эти типы диабета проявляются аналогично сахарному диабету типа 1 или типа 2. Самыми распространенными являются заболевания поджелудочной железы, при которых разрушаются бета-клетки поджелудочной железы (например, гемохроматоз, панкреатит, муковисцидоз, рак поджелудочной железы); гормональные синдромы, которые препятствуют секреции инсулина (например, феохромацитома) или являются причиной периферической резистентности к инсулину (например, акромегалия, синдром Кушинга, феохромацитома); и диабет, обусловленный действием лекарственного средства (например, фенитоин, глюкокортикоиды, эстрогены).

Диабет зрелого возраста у молодых (ДЗВМ) представляет собой форму диабета типа 2, которым страдают многие поколения в одной и той же семье, с началом заболевания у людей, моложе 25 лет. Существуют несколько типов.

Гестационный сахарный диабет (ГСД) определяется как любая степень непереносимости глюкозы с началом заболевания или первым распознаванием его во время беременности. ГСД осложняет приблизительно 4% всех беременностей в США, хотя этот диапазон составляет 1-14% в зависимости от исследованной популяции. Не подвергшийся лечению ГСД может привести к эмбриональной макросомии, гипогликемии, гипокальцемии и гипербилирубинемии. Кроме того, матери, страдающие ГСД, имеют более высокие показатели родоразрешения путем кесаревого сечения и хронического повышенного кровяного давления. Для постановки диагноза ГСД на 24-28 неделе беременности следует провести скрининг-тест с 50 граммами глюкозы. Если через 1 час после теста концентрация глюкозы в плазме крови выше, чем 140 мг/дл, то проводят 3-часовой пероральный тест на толерантность к глюкозе со 100 граммами глюкозы.

В США 10,3 миллионам человек поставлен диагноз сахарный диабет и предполагается, что дополнительно 5,4 миллионов имеют недиагностированный сахарный диабет. Приблизительно 90% имеют сахарный диабет типа 2, а остальные имеют сахарный диабет типа 1.

Распространенность заболевания и смертность, ассоциированные с сахарным диабетом, связаны с краткосрочными и отдаленными осложнениями. К этим осложнениям относятся гипогликемия и гипергликемии, повышенный риск инфекционных заболеваний, микрососудистые осложнения (то есть ретинопатия, нефропатия), невропатические осложнения и макрососудистые заболевания. Сахарный диабет является главной причинной слепоты у взрослых в возрасте 20-74 лет, а также основной причиной нетравматической ампутации нижней конечности и терминальной стадии почечной недостаточности (ТСПН).

Сахарный диабет типа 2 более широко распространен среди испаноговорящего населения (10,6%), коренных американцев (12-50%, в зависимости от племени), афроамериканцев (10,8%) и азиатов/уроженцев островов, чем среди людей с белым цветом кожи.

Частота заболеваний по существу не различается среди женщин и мужчин во всех популяциях.

Сахарный диабет типа 2 становится все более распространенным, поскольку продолжительность жизни многих людей становится длиннее (распространенность сахарного диабета возрастает с возрастом). Также диабет встречается более часто у людей молодого возраста в связи с увеличением распространения ожирения в детском возрасте. Хотя сахарный диабет типа 2 до сих пор встречается в основном у взрослых людей в возрасте 40 лет и старше, заболеваемость возрастает более быстро среди подростков и молодежи, чем в других возрастных группах.

В настоящее время в соответствии с существующим уровнем техники предусмотрена фармацевтическая композиция по настоящему изобретению для снижения избыточных уровней сахара в крови больных сахарным диабетом типа 2, содержащая в себе источник, по меньшей мере, одного цианогенного глюкозида в качестве активного ингредиента.

В предпочтительных вариантах осуществления настоящего изобретения вышеуказанный источник представляет собой природный источник.

В особенно предпочтительных вариантах осуществления настоящего изобретения вышеуказанный природный источник, по меньшей мере, одного цианогенного глюкозида, представляет собой ядро горького миндаля.

В дополнительных предпочтительных вариантах осуществления настоящего изобретения вышеуказанный природный источник, по меньшей мере, одного цианогенного глюкозида представляет собой плоды сливы вида Prunus.

В особенно предпочтительных вариантах осуществления настоящего изобретения вышеуказанный природный источник, по меньшей мере, одного цианогенного глюкозида, представляет собой порошок, полученный из высушенного компонента лимона, выбранного из группы, содержащей в себе мякоть лимона, кожуру и косточки и их сочетания.

В наиболее предпочтительном варианте осуществления обеспечивается фармацевтическая композиция для снижения избыточных уровней сахара в крови больного сахарным диабетом типа 2, содержащая в себе порошок, полученный из смеси высушенных ядер горького миндаля и высушенного компонента лимона, отобранного из группы, содержащей в себе мякоть лимона, кожуру и косточки и их сочетания.

В этих предпочтительных вариантах осуществления вышеуказанный порошок предпочтительно содержит, приблизительно, от 70 до 90% высушенных и измельченных ядер горького миндаля, и, приблизительно, от 30 до 10% высушенного компонента лимона, выбранного из группы, содержащей в себе мякоть лимона, кожуру и косточки или их сочетания.

В дополнительных вариантах осуществления настоящего изобретения обеспечен способ снижения избыточных уровней сахара в крови больных сахарным диабетом типа 2, включающий обеспечение фармацевтической композиции, содержащей источник, по меньшей мере, одного цианогенного глюкозида в качестве активного ингредиента.

В еще дополнительных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к использованию источника, по меньшей мере, одного цианогенного глюкозида при промышленном производстве фармацевтической композиции для снижения избыточных уровней сахара в крови больных сахарным диабетом типа 2, по существу как описано здесь.

Как указано в наиболее предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим в качестве активного ингредиента соединения, обнаруженные в ядрах горького миндаля или листьях и в мякоти лимона, кожуре и косточках. Оба компонента высушены под действием потока горячего воздуха и смешаны в соотношении 1:4 (лимон/миндаль, соответственно). Ежедневная доза для взрослого человека, страдающего сахарным диабетом типа 2, составляет предпочтительно 15000 мг, хотя другие дозы также можно использовать. Сухой порошок применяют перорально 3 раза в день. Каждый из компонентов обладает способностью понижать уровень сахара в крови больных сахарным диабетом, но комбинированный состав более эффективен, чем каждый компонент по отдельности. Данный порошок можно применять в виде порошка или в виде суспензии в воде или других жидкостях, не содержащих сахар. Ежедневная доза зависит от возраста, массы тела и степени заболевания. Однако для взрослого человека рекомендованной дозой является 15000 мг в день. Данный состав можно применять в качестве инсулиннезависимой добавки.

Данный состав наиболее эффективен у больных, у которых может синтезироваться приблизительно 70% или более от принятых с медицинской точки зрения нормальных уровней инсулина.

Данный состав чрезвычайно эффективен у больных с избыточной массой тела, у которых синтезируются нормальные или близкие к нормальным количества инсулина.

То обстоятельство, что и ядра горького миндаля, и ткани лимона содержат в себе цианогенные глюкозиды, наряду с другими косвенными результатами указывает на то, что CN-глюкозид является эффективным соединением для снижения уровней сахара в крови больных сахарным диабетом. Ядра других видов Prunus содержат цианогенные глюкозиды, и вследствие этого также обнаружено, что они эффективны для снижения уровня сахара в крови, и, таким образом, они включены в объем настоящего изобретения.

Амигдалин, известный как d-Манделонитрила глюкозид, признан как основной глюкозид горького миндаля и использовался в некоторых примерах.

Несмотря на то, что в предпочтительных вариантах осуществления настоящего изобретения и в следующих примерах применяли и испытывали природный источник, по меньшей мере, одного цианогенного глюкозида, данное изобретение также относится к применению синтетических источников глюкозидов.

Более того, в других предпочтительных вариантах осуществления другие компоненты, как указано в таблицах 1 и 2, могут быть включены в состав фармацевтической композиции, чтобы действовать в дополнение или с другим назначением вместе с цианогенным глюкозидом.

Несмотря на то, что данное изобретение сейчас будет описано применительно к некоторым предпочтительны вариантам осуществления в следующих примерах и сопутствующих фигурах таким образом, что аспекты данного изобретения могут быть более полно поняты и оценены, нет намерения ограничивать данное изобретение этими конкретными вариантами осуществления. Напротив, подразумевается включение всех альтернативных вариантов, модификаций и эквивалентов, которые могут входить в объем данного изобретения, как определено в прилагаемой формуле изобретения. Таким образом, следующие примеры, которые включают в себя предпочтительные варианты осуществления, будут служить в качестве иллюстрации практического применения данного изобретения, понятно, что подробные данные представлены только посредством примера и для иллюстрации обсуждения предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения, и представлены в причине обеспечения, что считается наиболее применимым и легко понятным описанием технологии приготовления лекарственного средства, а также принципов и концептуальных аспектов данного изобретения.

Описание чертежей

На фигуре 1 графически представлено среднее значение распределения уровней глюкозы в крови в зависимости от времени после применения композиции по настоящему изобретению и применения плацебо (сладкий миндаль).

На фигуре 2A графически представлен результат анализа ВЭЖХ амигдалина в горьком миндале.

На фигуре 2В графически представлен результат анализа ВЭЖХ амигдалина в сладком миндале; и

На фигуре 2С графически представлен результат анализа ВЭЖХ стандартного коммерческого амигдалина.

Пример 1

58-летняя женщина, страдающая диабетом типа II (ИНСД) с возраста трех лет и ранее получавшая в качестве лечения 1 таблетку Глюкофага 3 раза в день в течение нескольких месяцев, прекратившая принимать вышеуказанные таблетки и вместо этого принимавшая три раза в день по 1 чайной ложке порошка по настоящему изобретению, содержащего в себе 85% измельченных высушенных ядер горького миндаля и 15% измельченной высушенной мякоти лимона, кожуры и косточек.

Последний анализ крови этой пациентки проводили за шесть месяцев до начала лечения, и все значения были в пределах нормального диапазона, за исключением сахара крови этой пациентки, который до начала лечения находился на уровне между 280 и 300 мг%. После лечения в течение двух месяцев с использованием порошка по настоящему изобретению, средний уровень сахара крови понизился до 120 мг% натощак и до 170 мг% после еды.

Пример 2

64-летний мужчина, страдающий сахарным диабетом типа II (ИНСД) с возраста пяти лет, получавший ранее в качестве лечения один раз в день таблетку Глюкофага и один раз в день Глюкомин, у которого не выявлено никаких других заболеваний и нет признаков осложнений диабета. Последний анализ его крови проведен в апреле 2004, все показатели находились в пределах нормального диапазона, за исключением среднего показателя сахара крови, который находился в пределах 170-200 мг%.

Он начал принимать три раза в день по 1 чайной ложке порошка по настоящему изобретению, содержащего в себе 85% измельченных высушенных ядер горького миндаля и 15% измельченной высушенной мякоти лимона, кожуры и косточек, в сочетании с одной таблеткой Глюкофага в день и одной таблеткой Глюкомина в день в течение одного месяца, а затем продолжил принимать по 1 чайной ложке порошка по настоящему изобретению и только полтаблетки Глюкофага в день и полтаблетки Глюкомина в день, и продолжал эту схему лечения в течение дополнительных трех месяцев. По окончании этого четырехмесячного периода средний сахар крови этого больного снизился до 140-150 мг%.

Пример 3

62-летний мужчина, страдающий сахарным диабетом типа II (ИНСД) в течение последних 14 лет, ранее получавший в качестве лечения три раза в день по одной таблетке Глюкофага, перестал принимать вышеназванные таблетки и начал принимать три раза в день по одной чайной ложке порошка по настоящему изобретению, содержащего в себе 85% измельченных высушенных ядер горького миндаля и 15% измельченной высушенной мякоти лимона, кожуры и косточек,

Этот пациент страдает повышенным кровяным давлением - получает лечение Нормитеном, стенокардией - в неактивной форме, не получает лечения, гиперхолестеринемией и гипертриглицеридемией - получает лечение Симовилом, и бронхиальной астмой в неактивной форме.

Перед началом лечения средний уровень сахара крови составлял 285 мг%, и после лечения уровень сахара крови снизился до 110-140 мг%.

Как будет отмечено, у каждого из трех пациентов имеется снижение уровней сахара крови, связанное с лечением с использованием композиции по настоящему изобретению, несмотря на сокращение или полное прекращение общепринятого медикаментозного лечения.

Пример 4

Метаболический эффект смеси на основе горького миндаля у больных сахарным диабетом типа 2

Клинический эксперимент проводили в отделении диабета медицинской организации Адасса в госпитале Адасса Айн Керем Иерусалим (Diabetes Unit of the Hadassah Medical Organization at Hadassah Hospital Ein Kerem Jerusalem), для того чтобы определить, имеет ли смесь, основанная, главным образом, на измельченных ядрах горького миндаля, смешанная в чашке воды («Смесь»), какое-либо действие, снижающее уровень глюкозы, в обеденное время, у людей, страдающих сахарным диабетом типа 2, поддерживаемых на Метформине и диете или только одной диете. Сделано предположение о том, что эти природные компоненты можно использовать без риска, и они могут улучшать уровни глюкозы крови после приема пищи.

План исследования

Больные сахарным диабетом типа 2 (7 мужчин и 3 женщины), с HgAIc между 6,5-8,5%, BMI<32, практически здоровые люди, выразившие желание участвовать в этом исследовании. После посещения для первичного скрининга изучаемые субъекты посещали отделение диабета дважды. Во время каждого посещения они получали один и тот же стандартный завтрак. Образцы крови для определения глюкозы собирали в определенные промежутки времени (каждые 10 минут в течение первых двух часов и каждые 30 минут в течение последующих 2 часов) вплоть до 4 часов, после приема пищи в сочетании со Смесью, принимаемой в конце приема пищи. Во время 1-го посещения волонтеры получали активную Смесь, во время 2-го посещения применяли «плацебо» из других природных компонентов (на основе сладкого миндаля).

Результаты

После прима внутрь Смеси по сравнению с плацебо было показано существенное снижение уровней глюкозы крови после приема пищи. У шести человек скорость реакции была намного больше выраженной, в то время как у четырех человек реакция была менее выраженной.

На фигуре 1 графически представлено среднее значение распределения уровней глюкозы в крови в зависимости от времени после применения композиции по настоящему изобретению и применения плацебо (сладкий миндаль), и показаны полученные результаты у 6 респондентов.

Выводы

У больных сахарным диабетом типа 2 применение смеси (на основе природных компонентов, в том числе высушенного горького миндаля) было эффективным в отношении снижения уровней глюкозы крови после приема пищи.

Пример 5

Метаболический профиль горького и сладкого миндаля

Для определения активных компонентов горького миндаля летучие и нелетучие соединения сравнивали с использованием метода ГХ-МС (метод газовой хроматографии - масс-спектрометрии) и ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография). На фигурах 2A и 2B, соответственно, изображены ВЭЖХ хроматограммы, сравнивающие горький и сладкий миндаль, и на фигуре 2С изображена ВЭЖХ хроматограмма стандартного коммерческого амигдалина.

Определение содержания амигдалина в горьком и сладком миндале.

0,5 г дробленого миндаля в течение ночи экстрагировали с использованием 10 мл метилового спирта. Изократическая подвижная фаза состояла из 85% ACN и 15% воды, скорость потока 0,7 мл/мин. Колонка C18 NovaPak 4 мм, 4,6x250мм.

Содержание амигдалина подсчитывали, используя стандартную калибровочную кривую аутентичного стандарта, как показано на фигуре 2С.

Результаты

Почти 9-кратное повышение пика амигдалина было обнаружено для ядер горького миндаля по сравнению со сладким миндалем (фигуры 2A и 2B).

Пример 6

Извлечение летучих веществ горького и сладкого миндаля. Обработка водой и MTBE

Точно установлено, что в миндале содержатся гидролитические ферменты, которые гидролизуют амигдалин до других продуктов. Для того чтобы эти ферменты работали должным образом, измельченные порошки инкубировали с водой, как указано далее: 0,2 грамма каждой смеси (1-5) инкубировали при комнатной температуре с 1 мл H₂O (повторяли 2 раза), энергично встряхивали при 200 об/мин. Затем 10 мл MTBE, содержащего 10 мкг изобутилбензола в качестве внутреннего стандарта, добавляли к каждому образцу. Эти образцы энергично встряхивали (200 об/мин) в течение 5 ч при комнатной температуре. Верхний слой отделяли и высушивали посредством пропускания через маленькую колонку (Pasteur pipette), содержащую в себе сульфат натрия, а затем концентрировали до объема 1 мл под действием слабого потока азота. В таблице 1 результаты выражены в мкг соединения/гр общего веса.

Таблица 1 Обработка водой с MTBE
мкг соединения/г общего веса	1+в	2+вс	3+вс	4+в	5+в	Определение
Альдегид
2,4,декадиенал	50,85	4,05	27,17	3,46	1,87	MS, KI
2-деценал,<E->	143,62	6,11	107,81	6,80	1,54	MS, KI
Бензальдегид	60,77	6091,01	60,84	4309,60	170,49	MS, KI
Коричный альдегид <Z>	64,83	-	104,11	-	-	MS, KI
Коричный альдегид <Е->	3005,26	3,98	3160,69	8,44	4,23	MS, KI
Декадиенал 2е,4е	41,63	2,38	25,96	2,27	0,79	MS, KI
E-2-Z-6-нонадиенал	0,52	-	-	-	8,80	MS, KI
Метокси коричный альдегид<(E)-	107,99	-	85,26	-	-	KI-D
Метокси коричный альдегид<(Z)>	25,03	-	44,43	0,29	-	MS, KI
Ароматические спирты
Бензиловый спирт	-	219,19	-	78,35	24,73	MS, KI
Коричный спирт	19,22	-	32,00	1,61	-	MS, KI
Фенетиловый спирт	2,57	2,56	2,35	1,01	7,78	MS, KI
Фенол
2-метокси-4-винилфенол	3,50	3,07	-	1,26	16,33	MS
Кумарин	48,99	-	45,19	0,41	0,49	MS, KI
Евгенол	-	-	-	4,25	7,44	MS, KI
4-винил фенол	6,71	3,71	1,07	3,55	31,96	MS
Монотерпены
альфа-Пинен	-	61,99	6,07	-	-	MS, KI
бета-Пинен	16,64	176,23	32,75	-	-	MS, KI
пара-Цимен	6,91	47,93	9,27	-	-	MS, KI
Лимонен	35,01	325,71	51,57	1,57	-	MS, KI
Лимонен оксид е	7,26	10,58	4,55	-	-	MS, KI
гамма-Терпинен	-	44,56	5,70	0,66	-	MS, KI
Карвеол е	-	10,94	-	-	-	MS, KI
альфа-Терпинеол	6,62	12,02	7,21	3,96	1,56	MS, KI
Сесквитерпены
бета-Элемен	-	7,03	-	-	-	MS, KI
альфа-Бергамотен	3,00	18,05	3,59	3,48	-	MS, KI
бета-Бисаболен	6,74	25,20	6,94	7,15	1,76	MS, KI
Кариофиллен-<E->	3,35	12,40	3,87	3,48	-	MS, KI
альфа-Копаен	28,87	-	26,57	-	-	MS, KI
бета-Кубебен	8,27	-	7,90	-	-	MS, KI
Куркумен<AR->	8,76	-	5,15	-	-	MS, KI
гамма-Элемен	-	3,52	-	-	-	MS, KI
альфа-Фарнезен	-	-	16,26	7,34	-	MS, KI
Муурола-3,5-диен<(Z)>	4,56	-	3,71	-	-	MS, KI
Муурола-3,5-диен<(E)->	-	-	8,27	-	-
Муурола-4(14)-5-диен<(E)->	5,08	-	4,59	-	-	MS, KI
альфа-мууролен	29,41	-	25,75	-	-	MS, KI
гамма-мууролен	9,14	-	8,36	-	-	MS, KI
неизвестные сесквитерпены	7,05	-	6,51	-	-
Каламенен<(Z)>	15,87	-	14,00	-	-	MS, KI
Кубенол	7,33	2,72	6,19	-	-	MS, KI
t-мууролол	8,15	-	9,05	-	-	MS, KI
манделамид	-	181,08	-	41,40	227,78	MS
*MS - масс-спектр; KI - индекс Ковача; KI-D - не соответствует индексу Ковача.

Пример 7

Экстракция с применением только MTBE

В качестве контролей (без инкубации с водой) вместо воды добавляли 1 мл (MTBE). Проводили ту же самую процедуру как описано выше. Для этого эксперимента проводили только одно повторение для каждого образца.

Смесь №	Экстракция-1	Экстракция-2
1	Вода+ MTBE	MTBE	Сладкий
2	Вода+ MTBE	MTBE	Горький
3	Вода+ MTBE	MTBE	Сладкий
4	Вода+ MTBE	MTBE	Горький
5	Вода+ MTBE	MTBE	Экстракт листьев

1-мкл аликвоту концентрированного MTBE вводили в систему Agilent GC-MSD (CA, США). Этот инструмент оборудован колонкой Rtx-5 SIL (30 м длина×0,25 мм внутренний диаметр, 0,25 мкм толщина пленки, неподвижная фаза 95% диметил- 5% дифенил полисилоксан). В качестве газа-носителя использовали гелий (0,8 мл/мин), введение без разделения. Температура инжектора составляла 250°С и температура детектора составляла 280°С. Использовали следующие условия: начальная температура составляла 50°С в течение 1 мин с последующим линейным изменением от 50 до 260°С со скоростью 5°С/мин, и дополнительные 5 мин при 260°С. Квадрупольный масс детектор с ионизацией электронами при 70 eV использовали для получения данных MS в диапазоне от 41 до 350 масса/заряд. Смесь неразветвленных алканов (С7-С23) вводили в колонку при вышеуказанных условиях для вычисления индексов удерживания. Идентификацию летучих соединений проводили посредством сравнения их индексов удерживания с индексами удерживания стандартов, введенных при тех же самых условиях. Результаты представлены в таблице 2.

Таблица 2 Экстрагирование с использованием только MTBE
мкг соединения/г общего веса	1	2	3	4	5
Альдегид
2,4,декадиенал	101,3	0,68	44,20	5,96	1,15
2-деценал,<E->	230,26	1,21	136,12	21,78	3,22
Бензальдегид	17,88	4,53	11,43	17,83	-
Коричный альдегид <Z>	15,75	-	2,89	-	-
Коричный альдегид <Е->	1039,55	1,17	938,57	6,37	-
Декадиенал 2е,4е	77,39	0,38	38,57	4,87	0,69
E-2-Z-6-нонадиенал	-	-	-	-	-
Метокси коричный альдегид<(E)-	21,33	-	23,15	-	-
Метокси коричный альдегид<(Z)>	6,98	-	-	-	-
Ароматические спирты
Бензиловый спирт	-	-	-	7,60	1,89
Коричный спирт	5,62	-	8,19	1,69	-
Фенетиловый спирт	-	-	-	-	1,45
Фенол
2-метокси-4-винилфенол	-	0,25	-	0,59	3,77
Кумарин	8,24	-	7,40	-	-
Евгенол	-	-	-	6,01	5,02
4-винил фенол	-	-	-	1,58	-
Монотерпены
альфа-Пинен	-	36,87	-	-	-
бета-Пинен	24,01	115,93	18,64	-	-
пара-Цимен	12,80	32,16	7,43	-	-
Лимонен	39,78	219,12	34,48	5,39	-
Лимонен оксид е	10,72	7,25	5,98	-	-
гамма-Терпинен	-	28,26	-	0,95	-
Карвеол е	-	1,75	-	-	-
альфа-Терпинеол	-	6,11	3,15	4,45	2,09
Сесквитерпены
бета-Элемен	5,41	3,90	4,28	-	-
альфа-Бергамотен	3,31	11,39	2,39	5,36	2,08
бета-Бисаболен	6,85	16,35	4,91	12,22	6,94
Кариофиллен-<E->	4,68	9,70	4,18	5,63	2,14
альфа-Копаен	29,61	-	19,36	0,32	-
бета-Кубебен	-	-	4,59	-	-
Куркумен<AR->	5,33	-	-	-	-
гамма-Элемен	-	2,03	-	0,60	-
альфа-Фарнезен	-	10,66	-	-	-
Муурола-3,5-диен<(Z)>	4,41	-	2,57	-	-
Муурола-3,5-диен<(E)->	-	-	3,17	-	-
Муурола-4(14)-5-диен<(E)->	5,44	-	2,59	-	-
альфа-мууролен	30,18	-	19,33	-	-
гамма-мууролен	9,25	-	-	-	-
неизвестные сесквитерпены	7,00	-	5,35	-	-
Каламенен<(Z)>	17,06	-	9,99	-	-
Кубенол	6,94	1,48	4,64	2,37	-
t-мууролол	7,55	-	7,10	-	-
манделамид	-	-	-	4,23	-

Результаты

Намного более высокие уровни летучих веществ получили, когда смеси были преинкубированы в Н₂О в течение 1 ч, по сравнению с таковыми без предварительной инкубацией с водой перед проведением экстракции. Между образцами композиции также различались (см. таблицы 1 и 2).

Известно, что летучие альдегиды являются основной группой, которая обеспечивает аромат миндальной смеси. Среди них коричный альдегид (аромат корицы), безальдегид (аромат миндаля), метокси коричный альдегид <(E)- (анисовый альдегид, аромат кумарина) были обнаружены на высоких уровнях в образцах горького миндаля. Типичный пищевой ароматизатор миндаля бензальдегид обнаружен в очень больших количествах (вплоть до 6000 мкг/г общего веса) в горьком миндале и в меньших количествах (~60 мкг/общего веса), но все еще являясь основным компонентом, в сладком миндале.

Другие ароматические спирты, такие как бензиловый спирт и коричный спирт и манделамид (продукт распада амигдалина), были представлены только в горьком миндале и листьях и отсутствовали в сладком миндале.

Самыми выделяющимися компонентами в сладком миндале являются альдегиды, главным образом коричный альдегид и его производные, а также коричный спирт и различные сесквитерпены.

Второй наиболее выделяющейся группой (особенно в сладком миндале, но также выделяется и в горьком миндале) являются терпены, которые включают в себя монотерпены (пара-цимен, лимонен, лимонен оксид е, терпен-гамма, карвеол е, терпинеол-альфа) и сесквитерпены.

Основными летучими веществами, обнаруженными в Смеси 5 (экстракт листьев), были бензальдегид, бензиловый спирт, 2-метокси-4-винилфенол, 4-винил фенол и манделамид.

Специалисту в данной области будет очевидно, что данное изобретение не ограничено подробным изложением предшествующих иллюстративных примеров и что настоящее изобретение может быть реализовано в других конкретных вариантах без отклонения от его существенных признаков, и, следовательно, желательно, чтобы настоящие варианты осуществления и примеры рассматривались во всех отношениях как иллюстративные и неограничивающие ссылки, даваемые на прилагаемые пункты формулы изобретения, а не на описание, приведенное выше, и все изменения, которые находятся в пределах эквивалентности формулы изобретения, следовательно, предназначены для включения в объем притязаний.