способ коррекции нарушений в репродуктивных органах, вызванных высокой температурой

Формула изобретения

Способ коррекции нарушений в репродуктивных органах, вызванных проведением общей управляемой гипертермией (ОУГ) в эксперименте, заключающийся в том, что после воздействия ОУГ в организм животного вводят мелатонин.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области медицины, конкретнее, к гинекологии.

Приводим известные из уровня техники сведения:

а) о средствах для коррекции нарушений в репродуктивных органах;

б) о средствах, применяемых при гипертермии;

в) об областях применения мелатонина.

А) Средства для коррекции нарушений в репродуктивных органах

Известен способ коррекции нарушений репродуктивной функции яичников у животных, заключающийся в том, что последовательно воздействуют электромагнитным излучением миллиметрового диапазона на частоте молекулярного спектра атмосферного кислорода или оксида азота на биологические точки яичников и область мочеполовых органов в течение 1-2 мин на каждую область ежедневно в течение 5-7 сут (RU 2007107901).

Известен способ коррекции нарушений репродуктивной функции у больных, страдающих хроническими воспалительными заболеваниями матки и придатков, заключающийся в том, что больным назначают внутренний и наружный (ванны и гинекологические орошения t 36-38°С, экспозицией 15 мин) прием минеральной воды Славяновского источника, а также пелоидотерапию в виде аппликаций на «трусиковую» зону t 40-42°C, экспозицией 15-20 мин и вагинальных тампонов t 40-45°C, экспозицией 20-25 мин, на курс по 8-10 процедур, чередуя через день (RU 2006116203).

Вызываемые различными факторами нарушения в репродуктивных органах специфичны. Вышеуказанные изобретения не предназначены для коррекции нарушений в репродуктивных органах, вызванных высокой температурой.

Б) Известны следующие средства, применяемые при гипертермии:

- способ оказания неотложной помощи при перегревании организма, заключающийся в том, что устраняют источник теплового воздействия и пострадавший получает для дыхания гелиокислородную смесь, содержащую 40% кислорода, находящуюся при температуре 4-6°С (РФ 2002133290);

- средство, повышающее резистентность организма к перегреванию и представляющее собой натрий оксибутират в составе с реланиумом. Средство воздействует на центральную нервную и сердечно-сосудистую системы (РФ 2096035);

- гидразид (1,2,4-триазино[5,6-b]индолил-3-тио) уксусной кислоты, повышающий устойчивость к гипертермии и обладающий антиаритмической активностью. В условиях перегревающего климата (40°С, 30%-ная влажность) новое соединение повышает устойчивость к гипертермии со степенью защиты 60% для животных и обладает выраженной антиаритмической активностью, в 2 раза превосходящей по длительности действия препарат тримекаин при дозе, в 2-10 раз меньшей, чем для тримекаина (SU 1487415);

- дигидрохлорид 3-(2-морфолиноэтилтио)-1,2,4-триазино[5,6-b] индолил-5-ацетамид, ускоряющий процессы восстановления после физических нагрузок, повышающий устойчивость к гипертермии, обладающий противогипоксической активностью. Коэффициент защиты нового соединения против гипоксии 1,4; против гипертермии степень защиты животных 53% против 30% для бемитила, а степень восстановления после физических нагрузок в сравнении с контролем возрастает на 142% (РФ 1498021).

Вышеприведенные средства воздействуют на центральную нервную и сердечно-сосудистую системы организма, повышают устойчивость к перегреванию, но не предназначены для коррекции нарушений в репродуктивных органах.

В) Известны следующие направления применения мелатонина:

- для повышения резистентности и продуктивности сельскохозяйственных животных в ветеринарных имплантируемых препаратах используется синтетический мелатонин или синтетический мелатонин и лекарственное средство транквилизирующего (психотропного) действия при следующем составе смеси, %: мелатонин 10-40, циакрин-ЭО (полимер) 89,95-55,5, пластификатор 0,05-4,5 или: мелатонин 7-25, психотропное средство (например, феназепам) 7-25, циакрин-ЭО (полимер) 85,95-45,5, пластификатор 0,05-4,5 (РФ 2001135563);

- для регулирования биологического ритма животных и ускоренного созревания волосяного покрова у пушных зверей в ветеринарных имплантируемых препаратах, в состав которых входят действующее вещество мелатонин либо мелатонин в смеси с психотропными веществами, биодеструктируемая полимерная основа и пластификатор. Заявлены две лекарственные композиции ветеринарного препарата следующего состава, %: а) мелатонин 10-40, циакрин-ЭО (полимер) 89,95-55,5, пластификатор 0,05-4,5, б) мелатонин 7-25, психотропное средство 7-25, циакрин-ЭО (полимер) 85,95-45,5, пластификатор 0,05 - 4,5 (РФ 2096044);

- в составе средства, обладающего антистрессорным, ноотропным, антивирусным и иммуностимулирующим действием, содержащего синергически действующие ингредиенты: нонапептид DSIP с последовательностью аминокислот Trp-Ala-Gly-Asp-Ala-Ser-Gly-Glu и генно-инженерный альфа-интерферон (реаферон) в соотношении DSIP - 1 мг реаферон - 1103-1104 ME. Средство может дополнительно содержать глицин, дипептид карнозин и мелатонин, в массовом соотношении на 1 мг: DSIP - 1 глицин - (20-40), карнозин - (3-30), мелатонин - (10-50), реаферон - (1103-1104) МЕ (РФ 2001115934);

- для лечения артериальной гипертонии используется N-ацетил-5-метокситриптамин (мелатонин) или мелатонин в комбинации с другими гипотензивными средствами. Средство не обладает нежелательными побочными действиями, эффективно снижает артериальное давление и особенно эффективно для лечения пожилых пациентов (РФ 2134108);

- для стимулирования мейоза половых клеток указанным клеткам in vivo, ex vivo или in vitro вводят эффективное количество соединения, которое вызывает накопление эндогенного вещества, активирующего мейоз, до уровня, при котором индуцируется мейоз. Соединение, которое вызывает накопление эндогенного вещества, активирующего мейоз, представляет собой мелатонин (РФ 97116491);

- в фармацевтической композиции, содержащей в качестве активного ингредиента, по крайней мере, одно вещество, ингибирующее NO-синтетазу, и, по крайней мере, одно вещество, улавливающее реакционноспособные формы кислорода, и необязательно фармацевтически приемлемый носитель, где в качестве улавливателя реакционноспособных форм кислорода может использоваться мелатонин (РФ 9910679);

- для лечения алекситимии (нарушений распознавания и описания своих собственных ощущений) при стенокардии больным в возрасте 55-60 лет дополнительно к стандартному лечению стенокардии назначают мелатонин в дозе 1,5 мг один раз в сутки на ночь в течение 10 дней, что снижает уровень алекситимии, улучшает сон, приводит к прекращению приступов стенокардии в ночное время (РФ 2203053);

- для лечения атопического дерматита назначают антигистаминные препараты, дезинтоксикационную терапию, местные глюкокортикоидсодержащие мази и иммуномодулирующий препарат гормон эпифиза мелатонин в дозе 3 мг в 21.00 час курсом в 21 день. Способ обеспечивает эффективность лечения за счет снижения содержания уровня IgE (РФ 2268737);

- для снижения риска заболевания раком молочной железы путем удлинения фолликулярной фазы менструального цикла и его общей продолжительности, что обеспечивается ежедневным введением мелатонина в эффективной дозе, в том числе в сочетании с прогестагеном и/или эстрогеном (RU 2067001);

- для предупреждения зачатия путем ингибирования овуляции у женщин детородного возраста назначают прием мелатонина в дневной дозе 2 - 1000 мг на 70 кг массы тела или композиции, содержащей смесь мелатонина в количестве 2 - 1000 мг и прогестагена в количестве 7,5 - 2500 мг, или смесь мелатонина и эстрогена в количестве 2 - 100 мг, или смесь мелатонина, прогестагена и эстрогена по различным схемам (РФ 2114621);

- для лечения нарушений сна используются производные мелатонина (РФ 2146140);

- применение мелатонина для активирования у субъекта гипоталамуса, чтобы повысить уровень гормона, высвобождающего гормон роста (GHRH), в сыворотке крови, который в свою очередь приводит к повышению секреции гормона роста (GH) и последующему повышению уровня инсулиноподобного фактора роста 1 (IGF-1) в сыворотке крови, для приготовления терапевтической композиции для лечения у людей симптомов повышенной утомляемости и истощения, синдрома «перегорания», синдрома хронической усталости, депрессии, болезни Альцгеймера, синдрома раздраженной прямой кишки, остеопороза, диабета 2-го типа или для терапии, направленной на замедление старения, иммунной терапии, или для стимулирующего восстановления после физических тренировок, или для увеличения роста и повышения иммунитета у животных (РФ 2006114757);

- применение мелатонина для лечения наркомании, а также больных с симптомами зависимости, или невосприимчивости, или привыкания к лекарствам группы бензодиазепинов (РФ 97113435, РФ 2182001);

- применение мелатонина в составе фармацевтической композиции, включающей, по крайней мере, одно нейролептическое соединение и мелатонин в количестве, эффективном для уменьшения интенсивности проявления или предотвращения симптомов развития поздней дискинезии (ЕА 004057).

Авторами не обнаружено публикаций, где исследовалась бы способность мелатонина корректировать вызванные высокой температурой нарушения в репродуктивных органах.

Раскрытие изобретения

Сущность предлагаемого способа коррекции нарушений в репродуктивных органах, вызванных высокой температурой (общей управляемой гипертермией - далее ОУГ), заключается в том, что после воздействия ОУГ в организм вводят мелатонин. Мелатонин предотвращает спазм артерий яичников; уменьшает выраженность венозного застоя и нормализует венозный кровоток; уменьшает степень выраженности нарушений лимфотока. Мелатонин уменьшает степень выраженности нарушений фолликулогенеза на 7-е сутки. Мелатонин восстанавливает объемную плотность желтых тел яичников, находящихся на стадии пролиферации и васкуляризации; уменьшает степень выраженности падения объемной плотности желтых тел, находящихся на стадиях железистого метаморфоза и расцвета; уменьшает степень выраженности процессов дегенерации и атрезии желтых тел, находящихся на стадии обратного развития.

Перечень фигур

Фиг.1. Объемная плотность артерий яичника, %.

Фиг.2. Объемная плотность венозных сосудов яичника, %.

Фиг.3. Объемная плотность лимфатических сосудов яичника, %.

Фиг.4. Объемная плотность первичных фолликулов, %.

Фиг.5. Объемная плотность третичных фолликулов, %.

Фиг.6. Объемная плотность атретических фолликулов, %.

Фиг.7. Объемная плотность желтых тел (стадия пролиферации и васкуляризации), %.

Фиг.8. Объемная плотность желтых тел (стадия железистого метаморфоза).

Фиг.9. Объемная плотность желтых тел (стадия расцвета), %.

Фиг.10. Объемная плотность желтых тел (стадия обратного развития), %.

Осуществление изобретения

В эксперименте использовали 155 половозрелых самок крыс породы «Вистар» (возраст 3 месяца) с массой тела 180-200 грамм. Животные содержались в условиях вивария при температуре воздуха 20-22°С при стандартном рационе и свободном доступе к воде. С учетом влияния биологических ритмов на живые объекты все эксперименты проводились в зимне-весенний период в одно и то же время с 10 до 12 часов.

Крысы были разделены на 7 групп: одна группа интактная, контрольная (животных этой группы не подвергали ОУГ), три контрольные группы с ОУГ (животных подвергали ОУГ, а затем им вводили физиологический раствор) и три опытные группы с ОУГ (животных подвергали ОУГ, а затем им вводили мелатонин). Мелатонин вводили животным в режиме, указанном ниже. В том же режиме вводили физиологический раствор. Дополнительная информация о группах приведена ниже:

1-я группа - контрольная интактная, количество животных - 20;

2-я группа - контрольная с ОУГ (ОУГ+физиологический раствор), животных выводили из эксперимента на 3-и сутки, количество животных - 21,

3-я группа - контрольная с ОУГ (ОУГ+физиологический раствор), животных выводили из эксперимента на 7-е сутки, количество животных - 21,

4-я группа - контрольная с ОУГ (ОУГ+физиологический раствор), животных выводили из эксперимента на 14-е сутки, количество животных - 21,

5-я группа - опытная: ОУГ+мелатонин, животных выводили из эксперимента на 3-и сутки, количество животных - 25,

6-я группа - опытная: ОУГ+мелатонин, животных выводили из эксперимента на 7-е сутки, количество животных - 25,

7-я группа - опытная: ОУГ+мелатонин, животных выводили из эксперимента на 14-е сутки, количество животных - 22.

Животных, находящихся на стадии диэструс астрального цикла, подвергали общей управляемой гипертермии в соответствии со «Способом экспериментального моделирования общей гипертермии у мелких лабораторных животных» (Ефремов А.В., Пахомова Ю.В., Пахомов Е А., Ибрагимов Р.Ш., Шорина Г.Н. Патент РФ № 2165105).

Опытным группам животных вводили мелатонин ICN Biomedical inc. Учитывая длительность эстрального цикла крыс, первое введение мелатонина осуществляли в день проведения гипертермии, затем - в последующие 2-е суток (вечером после захода солнца, один раз в сутки). Введение мелатонина можно осуществлять в течение более длительного срока, например в течение 7 дней, чтобы обеспечить более выраженный терапевтический эффект.

Рабочий раствор мелатонина готовили следующим образом. В качестве исходного (маточного) брали препарат мелатонина, в котором 13,8 мг мелатонина содержались в 1,5 мл спиртового раствора. К 0,25 мл маточного раствора, содержавшего 2,3 мг мелатонина, добавляли 5 мл физиологического раствора. Мелатонин вводят в дозах 0,05-5,0 мг/кг, обеспечивающих терапевтический эффект. В эксперименте каждому опытному животному вводили подкожно по 0,2 мл физиологического раствора с мелатонином (0,1 мг мелатонина), что соответствует среднему значению в вышеуказанном диапазоне доз; каждому контрольному животному групп 2-4 вводили подкожно по 0,2 мл физиологического раствора.

Для проведения морфологического исследования животных выводили из эксперимента под эфирным наркозом в соответствии с Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных (Приказ Минздрава СССР от 12.08.1977) на 3, 7, 14 сутки после проведения ОУГ. В качестве объекта гистологического исследования использовали яичники, образцы которых фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина, обезвоживали в серии спиртов возрастающей концентрации и заключали в парафин. На санном микротоме готовили срезы толщиной 5-6 мкм, которые окрашивали гематоксилином Майера, эозином и изучали под бинокулярным микроскопом при увеличении 70x (объектив 10, окуляр 7).

Для морфометрического анализа использовали квадратную тестовую систему, вмонтированную в окуляр микроскопа и состоящую из 11 поперечных и 11 продольных линий и 121 точки. При проведении морфометрии использовали полуавтоматическое регистрирующее устройство. Методом точечного счета подсчитывали объемные плотности основных структурно-тканевых элементов яичников (примордиальных, первичных, вторичных, третичных, атретических фолликулов и желтых тел, а также спиральных артерий, сосудов венозного сплетения и лимфатических сосудов мозгового слоя яичника) и исследовали динамику их объемной плотности на 3, 7, 14 сутки от проведения ОУГ.

Морфометрические цифровые данные обрабатывали методом вариационной статистики с использованием пакета статистических программ «STATISTICA 5». Для определения статистических различий между сравниваемыми средними применяли критерий Стьюдента, различия считали достоверными при p<0,05.

Изучение эффективности коррекции мелатонином возникающих при ОУГ морфофункциональных изменений в сосудистом русле мозгового слоя яичников крыс показало следующее в отношении различных категорий сосудов.

Артерии

Объемная плотность артерий на 3-и сутки после воздействия ОУГ остается на уровне контроля; на 7-е сутки снижается (почти вдвое); на 14-е сутки она также ниже, чем в группе 1 (табл.1, фиг.1).

При введении мелатонина объемная плотность артерий на 3-и, 7-е, 14-е сутки после ОУГ остается на уровне контрольной группы 1 (табл.1, фиг.1).

Вены

Объемная плотность вен на 3-и сутки после воздействия ОУГ возрастает (в 2,5 раза), к 7-м суткам снижается до уровня контрольной группы 1, к 14-м суткам снижается до 38% от контрольной величины (в группе 1) (табл.1, фиг.2).

При ОУГ с последующей коррекцией мелатонином объемная плотность вен на 3-и сутки возрастает, но не так значительно, как в группе 2 (на 30%); на 7-е и 14-е сутки соответствует уровню контрольной группы 1 (табл.1, фиг.2).

Лимфатические сосуды

1. Объемная плотность лимфатических сосудов на 3-и сутки после ОУГ значительно увеличивается по отношению к контрольной группе 1 (в 4,6 раза); к 7-м суткам отмечается снижение объемной плотности лимфатических сосудов, однако она по-прежнему достоверно выше (в 2 раза), чем в контрольной группе 1; к 14-м суткам объемная плотность снижается до уровня контроля (табл.1, фиг.3).

При коррекции мелатонином объемная плотность лимфатических сосудов на 3-и сутки увеличивается по отношению к интактному контролю не так значительно, как в группе 2 (в 1,6 раз), к 7-м суткам она снижается до уровня контрольной группы 1, к 14-м суткам отмечено дальнейшее снижение до 60% от уровня группы 1. Отличия между группами 5 и 2, 6 и 3, 7 и 4 достоверны при p<0,05 (табл.1, фиг.3).

Таким образом, введение мелатонина после воздействия ОУГ вызывает следующие эффекты:

1) предотвращает спазм артерий;

2) корригирует дистонию венозных сосудов: уменьшает выраженность венозного застоя на 3-и сутки, нормализует венозный кровоток на 7-е и 14-е сутки;

3) уменьшает степень выраженности лимфостаза на третьи сутки, нормализует лимфоток на 7-е сутки.

При изучении изменений фолликулярного аппарата яичников после воздействия ОУГ на стадиях примордиальных, вторичных и третичных фолликулов эффекта от введения мелатонина не наблюдается. В отношении первичных и атретических фолликулов выявлено следующее.

1. Объемная плотность первичных фолликулов на 3-и сутки после перегревания снижается (до 43% от уровня контрольной группы 1), к 7-м суткам отмечено дальнейшее снижение до 6%, а к 14-м суткам объемная плотность первичных фолликулов восстанавливается до 55% от величины в контрольной группе 1 (табл.2, фиг.4).

При коррекции мелатонином изменения объемной плотности первичных фолликулов на 3-и сутки и 14-е сутки после воздействия аналогичны вышеуказанным, а на 7-е сутки снижение объемной плотности не столь значительно, как в соответствующей группе животных с введением физраствора (до 33% от уровня контроля). Отличие между группами 6 и 3 достоверно (табл.2, фиг.4).

2. Объемная плотность третичных фолликулов на 3-и сутки после воздействия ОУГ соответствует их объемной плотности в контрольной группе 1; на 7-е сутки происходит ее снижение на 60%; к 14-м суткам объемная плотность возрастает до значений, превышающих контрольный уровень на 33% (табл.2, фиг.5).

После введения мелатонина объемная плотность третичных фолликулов на 3-е сутки незначительно повышается; к 7-м суткам отмечено ее увеличение, превышающее уровень контроля на 66%; к 14-м суткам объемная плотность третичных фолликулов снижается и составляет уже 66% от уровня контрольной группы. Различия между группами 2 и 5, 3 и 6, 4 и 7 достоверны (табл.2, фиг.5).

3. Объемная плотность атретических фолликулов на 3-и сутки после ОУГ достоверно увеличивается (в 3 раза); на 7-е сутки отмечается резкое увеличение объемной плотности в 25 раз; к 14-м суткам отмечено незначительное снижение объемной плотности атретических фолликулов. При коррекции мелатонином на 3-и сутки наблюдается также достоверное увеличение объемной плотности атретических фолликулов; к 7-м суткам возрастание объемной плотности менее выражено по сравнению с группой 3 при достоверном отличии между группами 6 и 3; к 14-м суткам объемная плотность атретических фолликул сравнима с их объемной плотностью в группе 4 (табл.2, фиг.6).

Таким образом, при введении мелатонина после воздействия ОУГ на стадиях первичных, третичных и атретических фолликулов положительный эффект отмечается на 7-е сутки после ОУГ и заключается в том, что нарушения фолликулогенеза на этот срок значительно менее выражены.

Эффект воздействия мелатонина на различные стадии развития желтых тел яичников крыс состоит в следующем.

1. Объемная плотность желтых тел яичника в стадии пролиферации и васкуляризации на 3-и сутки после ОУГ остается на исходном уровне; к 7-м суткам снижается до нуля, а к 14-м суткам восстанавливается до 42% от исходной величины. После воздействия мелатонина объемная плотность желтых тел в стадии пролиферации и васкуляризации на 3-и сутки также остается на исходном уровне, к 7-м суткам снижается до нуля, а к 14-м суткам восстанавливается до уровня контроля (табл.2, фиг.7).

2. Объемная плотность желтых тел в стадии метаморфоза снижается к 3-м суткам до 30% от уровня контроля, к 7-м суткам падает до нуля, а к 14-м суткам восстанавливается до 14% от контроля. При коррекции мелатонином отмечается незначительное снижение объемной плотности желтых тел на 3-и сутки после ОУГ до 70% от уровня контроля; на 7-е сутки фиксируется дальнейшее снижение до 12%, а к 14-м суткам отмечается рост объемной плотности желтых тел до значений, составляющих 37% от исходного уровня. Экспериментальные данные по группам 5 и 2, 6 и 3, 7 и 4 имеют достоверные различия (табл.2, фиг.8).

3. Аналогичные изменения характерны и для желтых тел в стадии расцвета: на 3-и сутки - снижение объемной плотности в 3,2 раза; к 7-м суткам происходит дальнейшее снижение до нуля, которое сохраняется и на 14-е сутки. После введения мелатонина объемная плотность желтых тел снижается на 3-и сутки заметно меньше - в 1,8 раза от уровня контроля; на 7-е сутки отмечено дальнейшее снижение до 11% от уровня контроля; к 14-м суткам - восстановление до 34% от исходных величин, различия между группами 5 и 2, 6 и 3, 7 и 4 достоверны (табл.2, фиг.9).

4. Объемная плотность желтых тел в стадии обратного развития на 3-и сутки после ОУГ возрастает в 1,5 раза. На 7-е сутки превышение контрольного уровня составляет уже 5,6 раза (27,41% против 4,91% в контрольной группе 1). На 14-е сутки величина объемной плотности снижается до уровня 3-х суток. При коррекции мелатонином изменения объемной плотности желтых тел в стадии обратного развития на 3-и и 14-е сутки аналогичны вышеуказанным, на 7-е сутки - только в 2,2 раза выше уровня контрольной группы 1. Различие между группами 3 и 6 достоверно (табл.2, фиг.10).

Таким образом, введение мелатонина после воздействия ОУГ влияет на желтые тела яичников крыс на всех стадиях развития и приводит к следующим эффектам:

1) в стадии пролиферации и васкуляризации на 14-е сутки мелатонин восстанавливает объемную плотность желтых тел яичников до исходного уровня;

2) на стадиях железистого метаморфоза и расцвета положительный эффект от введения мелатонина отмечается во все сроки после ОУГ и проявляется в менее резком падении объемной плотности желтых тел на 3-и, 7-е и 14-е сутки;

3) положительный эффект от введения мелатонина на желтые тела в стадии расцвета отмечается во все сроки после ОУГ и проявляется в менее резком падении объемной плотности;

4) положительный эффект от введения мелатонина на желтые тела в стадии обратного развития отмечается на 7-е сутки и проявляется в менее резком возрастании их объемной плотности.

Таблица 1 Объемная плотность сосудов мозгового слоя яичников в различные сроки после общей управляемой гипертермии VV , % (M±m)
Структура яичника	Контроль	Гипертермия+физраствор	Гипертермия+мелатонин
3 сутки	7 сутки	14 сутки	3 сутки	7 сутки	14 сутки
1-я груп.	2-я гр.	3-я гр.	4-я гр.	5-я гр.	6-я гр.	7-я гр.
Артерии	0,73±0,11	0,73±0,13	0,39±0,08*#	0,48±0,09 *#	0,79±0,14	0,67±0,11#	0,84±0,15 #
Вены	2,66±0,20	6,83±0,60*#	2,44±0,33	1,01±0,17*#	3,47±0,26 *#	2,69±0,27	2,69±0,34#
Лимфатические сосуды	1,37±0,13	6,25±0,61*#	2,88±0,36 *#	1,74±0,24 #	2,16±0,25 *#	1,15±0,17 #	0,84±0,15 *#
* - достоверность различий по сравнению с контролем (группой 1), p<0,05 # - достоверность различий между группами 2 и 5, 3 и 6, 4 и 7, p<0,05. VV - объемная плотность, т.е. доля объема исследуемой структуры v в единице объема ткани V.

Таблица 2 Объемная плотность структур яичника VV , % (M±m)
Структура яичника	Контроль	Гипертермия+физраствор	Гипертермия+мелатонин
3 сут.	7 сут.	14 сут.	3 сут.	7 сут.	14 сут.
1-я груп.	2-я гр.	3-я гр.	4-я гр.	5-я гр.	6-я гр.	7-я гр.
Первичные фолликулы	0,51±0,04	0,22±0,01*	0,03±0,002*#	0,28±0,02*	0,22±0,02*	0,17±0,01*#	0,24±0,03*
Третичные фолликулы	6,49±0,62	6,60±0,32 #	2,61±0,22 *#	8,64±0,62 *#	7,67±0,51 #	10,80±0,95 *#	4,28±0,46 *#
Атретические тела	0,60±0,05	1,96±0,16 *#	15,04±1,30 *#	11,06±1,08 *	2,41±0,18 *#	5,8±00,60 *#	10,86±0,92 *
Желтое тело пролиферац. и васкуляризац.	13,28±1,34	14,72±1,30	0*	5,63±0,40 *#	12,88±1,1	0*	12,51±1,10#
Желтое тело железистого метаморфоза	16,22±1,46	4,65±0,36*#	0*#	2,21±0,09 *#	11,47±1,00 *#	1,96±0,25 *#	5,94±0,46 *#
Желтое тело расцвета	3,06±0,25	0,95±0,08 *#	0*#	0*#	1,66±0,12*#	0,34±0,04 *#	1,04±0,08 *#
Желтое тело обратное развитие	4,91±0,20	7,17±0,52*	27,41±2,45 *#	8,26±0,71 *	8,45±0,75 *	10,36±0,80 *#	8,16±0,49 *
* - достоверность различий по сравнению с контролем (группой 1), p<0,05 # - достоверность различий между группами 2 и 5, 3 и 6, 4 и 7, p<0,05