способ лечения и профилактики кокцидиозов норок

Формула изобретения

Способ лечения и профилактики кокцидиозов норок, включающий применение лечебного препарата в сочетании с пробиотиком, отличающийся тем, что в качестве лечебного препарата назначают толтразурил внутрь в дозе 30 мг/кг массы животного с лечебной целью два дня, а с профилактической - однократно, и в качестве пробиотика дают субалин в дозе 20 мг на животное в течение трех дней подряд.

Описание изобретения к патенту

Предлагаемое изобретение относится к области ветеринарной протозоологии, в частности, к разработке надежных средств для лечения и профилактики кокцидиозов норок.

Кокцидиозы - протозойные заболевания норок, песцов, лисиц, нутрий, рысей, хорьков, соболей и других плотоядных, вызываемые простейшими семейства Eimeriidae подсемейства Eimeriinae и Isosporinae с родами Eimeria, Isospora и другие. Возбудители локализуются в эпителиальных клетках слизистой оболочки тонкого отдела кишечника. Биологический цикл развития кокцидий характеризуется тремя стадиями: спорогония, шизогония и гаметогония. Спорогония происходит во внешней среде и относится к экзогенной стадии развития кокцидий, а шизогония и гаметогония совершаются в эпителиальных клетках кишечника и относятся к эндогенным стадиям развития. Зараженное кокцидиями животное выделяет во внешнюю среду этих простейших в стадии ооцист, которые покрыты плотной защитной оболочкой и сразу после выделения они не могут заразить других животных. Вначале ооцисты проходят процесс созревания или спорогонию, который проходит во внешней среде при оптимальной температуре, необходимой влажности и доступе кислорода (1). В ооцисте рода Eimeria формируется 4 спороцисты и в каждой из них по 2 спорозоита, а у представителей рода Isospora имеется 2 спороцисты, каждая из которых содержит 4 спорозоита. Спорулированные ооцисты называют зрелыми или инвазионными, и они способны заражать восприимчивых животных, в организме которых происходит развитие эндогенной стадии. У норок встречаются 7 видов кокцидий: Eimeria vison, E. furonis, E. mustelae, Isospora bigemina, I. laidlawi, I. eversmanni, I. canivelocis (2).

Ооцисты кокцидий в зависимости от вида имеют овальную, яйцевидную, круглую или эллипсовидную форму, величиной от 8 до 45 мкм. Покрыты они гладкой двухслойной оболочкой серого или желто-зеленого цвета, которая на одном из полюсов истончается, образуя микропиле.

Основным источником инвазии являются больные кокцидиозом животные. На неблагополучных фермах передача инвазии происходит путем прямого и непрямого контакта с больными животными. Молодняк часто заражается в подсосный период, и нередко у 10-15-дневных щенков в фекалиях обнаруживают возбудителей болезни. Вспышки кокцидиозов среди молодняка пушных зверей отмечают часто в результате различного рода стрессов, когда нормальная физиология и общая резистентность животных нарушена.

Снижение продуктивных качеств пушных зверей вследствие кокцидиозов продолжает ставить перед исследователями задачи совершенствования мер борьбы с инвазией, поэтому разработка способов лечения и профилактики данной инвазии - актуальны.

До последнего времени для борьбы с паразитическими простейшими применяли фармазин, нифулин, фуразолидон, ятрен, йодинол и метронидазол, которые были эффективны при эймериозе и недостаточно активны при изоспорозе(3).

Большой интерес представляет противопаразитарный препарат толтрозурил, который является универсальным в отношении многих видов кокцидий и всех внутриклеточных стадий развития инвазии. В птицеводстве при напольном содержании птиц с успехом применяется 2,5%-ный раствор препарата, который назначается с водой. Учитывая физиологические особенности желудка молодняка свиней для применения в свиноводстве была разработана 5%-ная суспензия препарата, которая показала высокую эффективность при изоспорозе (4).

В задачу наших исследований входило разработать эффективный способ лечения и профилактики кокцидиозов норок доступными средствами, учитывая отсутствие отрицательного действия на животных, нормализуя микрофлору кишечника после назначения препарата.

Решение поставленной задачи достигается тем, что в качестве лечебно-профилактического препарата (этиотропное лечение) при кокцидиозе норок был использован толтрозурил в форме 5%-ной суспензии, а для нормализации микрофлоры кишечника после дачи препарата назначали пробиотиксубалин (патогенетическая терапия).

Из доступных заявителю источников информации не известна указанная совокупность существующих признаков, позволяющая получать указанный технический результат, поэтому заявляемое изобретение соответствует условию патентоспособности «новизна».

Заявителю не известны средства аналогичного назначения, в которых были бы раскрыты отличительные признаки заявляемого изобретения с получением от использования его в какой-либо совокупности признаков указанного технического результата. Следовательно, заявляемое изобретение соответствует условию патентоспособности «изобретательский уровень».

Доказательства промышленной применимости заявляемого приводится в следующих примерах.

Пример 1. Определение оптимальной лечебной дозы толтрозурила при кокцидиозах норок.

Изучение лечебной эффективности оптимальной лечебной дозы толтрозурила при кокцидиозах норок проводили в лаборатории ВНИИ гельминтологии им. К.И.Скрябина и в неблагополучном по кокцидиозам звероводческом хозяйстве Московской области, согласно методическим рекомендациям (3).

Для опыта из числа спонтанно зараженных кокцидиями были отобраны 42 головы молодняка норок в возрасте 2-2,5 месяцев, которых распределяли на семь аналогичных групп по шесть животных в каждой. Животным первой и второй групп назначали толтрозурил в дозе по действующему веществу (ДВ) 25 мг/кг массы один и два дня с кормом после тщательного размешивания в форме 5%-ной суспензии. Животным третьей и четвертой групп толтрозурил давали в дозе по ДВ 30 мг/кг массы один и два дня с кормом. Толтрозурил в дозе 50 мг/кг массы с кормом задавали однократно животным пятой группы. Шестая группа животных получала метронидазол в дозе 20 мг/кг массы с кормом два раза в день в течение двух дней (базовый препарат). Животные седьмой группы препарат не получали и служили контролем. За время опыта животных всех групп содержали в аналогичных условиях, но изолированно по группам и кормили их по зоотехническим нормам.

Эффективность препаратов и разных доз определяли по результатам копроскопических исследований опытных животных через 10 и 30 дней после лечебного назначения.

Наблюдения, проведенные нами в период лечения и в последующие пять дней после, показали, что все подопытные животные поедали лечебный корм с разными дозами толтрозурила и рекомендованной дозой метронидазола охотно и быстро в течение 10-15 минут, как и корм без препарата. Каких-либо отклонений от нормы в состоянии и поведении подопытных животных, получавших толтрозурил и метронидазол, не отмечено. При исследовании через 10 и 30 дней после назначения толтрозурила в дозах 25 и 30 мг/кг массы два дня и 50 мг/кг однократно с кормом все норки были свободны от изоспор и эймерий. Экстенсэффективность 100% (табл.1). Норки, получавшие толтрозурил в дозе 25 и 30 мг/кг массы однократно были заражены изоспорами на 33,3 и 16,7%, соответственно. Экстенсэффективность толтрозурила в дозе 25 и 30 мг/кг массы при однократном назначении составила 66,7 и 83,3%, соответственно. Из животных шестой группы, получавших рекомендованную дозу метронидазола, при исследовании через 10 и 30 дней после лечения у одного животного обнаружены ооцисты изоспор. Отсюда экстенсинвазированность составила 16,7%, а экстенсэффективность - 83,3%. Зараженность животных контрольной группы за время опыта незначительно возросла по части эймериоза.

Полученные данные дают основание считать оптимальной дозой толтрозурила по ДВ 25 и 30 мг/кг массы два дня подряд с кормом или 50 мг/кг массы однократно, которые в течение 30 дней обеспечивают при изоспорозе и эймериозе 100%-ную эффективность. Рекомендованная доза метронидазола обеспечила 83,3%-ную экстенсэффективность при изоспорозе и 100%-ную при эймериозе.

Пример 2. Испытание оптимальной дозы толтрозурила при кокцидиозах взрослых норок.

Испытание оптимальной лечебной дозы толтрозурила проводили на спонтанно инвазированных кокцидиями взрослых норках, разделенных на три аналогичные группы по 5 голов в каждой. Животным первой группы назначали толтрозурил в дозе по ДВ 30 мг/кг массы с кормом два дня. Животным второй группы назначали рекомендованную дозу метронидазола в дозе 20 мг/кг массы с кормом два раза в день два дня подряд. Норки третьей контрольной группы препарат не получали.

Таблица 1 Эффективность толтрозурила и метронидазола при изоспорозе и эймериозе молодняка норок
Группа и препарат	Доза по ДВ мг/кг и кратность	Кол-во жив-х в группе	Экстенсинвазированность, %	Экстенсэффективность при, %
исходная	через 10 дн.	через 30 дн.	через 10 дн.	через 30 дн.
И*	Э*	И	Э	И	Э	И**	Э**	И	Э
Толтрозурил	25×1	6	100	33,4	33,3	0	33,3	0	66,7	100	66,7	100
Толтрозурил	25×2	6	100	50	0	0	0	0	100	100	100	100
Толтрозурил	30×1	6	100	33,4	16,7	0	16,7	0	83,3	100	83,3	100
Толтрозурил	30×2	6	100	50	0	0	0	0	100	100	100	100
Толтрозурил	50×1	6	100	50	0	0	0	0	100	100	100	100
Метронидазол	20×2×2	6	100	50	16,7	0	16,7	0	83,3	100	83,3	100
Контроль	-	6	100	33,4	100	33,4	100	50	-	-	-	-
Примечание И* - изоспорами, Э* - эймериями, И** - изоспорозе, Э** - эймериозе

Таблица 2 Эффективность толтрозурила и метронидазола при изоспорозе и эймериозе взрослых норок
Группа и препарат	Доза по ДВ мг/кг и кратность	Кол-во жив-х в группе	Экстенсинвазированность, %	Экстенсэффективность при, %
исходная	через 10 дн.	через 30 дн.	через 10 дн.	через 30 дн.
И*	Э*	И	Э	И	Э	И**	Э**	И	Э
Толтрозурил	30×2	5	40	100	0	0	0	0	100	100	100	100
Метронидазол	20×2×2	5	40	100	0	20	0	20	100	80	100	80
Контроль	-	5	40	100	40	100	40	100	-	-	-	-
Примечание И* - изоспорами, Э* - эймериями, И** - изоспорозе, Э** - эймериозе

Учет эффективности препаратов осуществляли по данным копроскопических исследований всех опытных животных через 10 и 30 дней после лечебного назначения. Оценка общего состояния опытных взрослых норок, получавших оптимальную дозу толтрозурила и рекомендованную дозу метронидазола, показала отсутствие каких-либо отклонений от нормы в их состоянии, корм с препаратами поедали охотно с небольшим остатком.

При исследовании через 10 и 30 дней после лечения толтрозурилом в дозе 30 мг/кг массы два дня с кормом все норки были свободны от эймерий и изоспор. Во второй группе одна норка, получавшая метронидазол, осталась зараженной эймериями (табл.2).

Результаты испытаний показали, что доза толтрозурила 30 мг/кг массы два дня с кормом является оптимальной для взрослых норок, которая в течение 30 дней обеспечивает 100%-ную эффективность при эймериозе и изоспорозе. Метронидазол в рекомендованной дозе обеспечил 80%-ную экстенсэффективность при эймериозе и 100%-ную при изоспорозе взрослых норок.

Пример 3. Определение оптимальной схемы назначения пробиотика субалина при кокцидиозах молодняка норок.

Опыт проводили на 25 спонтанно инвазированных кокцидиями молодняке норок 2-2,5-месячного возраста, которых разделили на 5 групп по 5 животных в каждой. Животным первой группы назначали пробиотик субалин в дозе 20 мг на голову с кормом один раз. Животным второй и третьей групп субалин назначали в течение двух и трех дней, а норкам четвертой группы отмеченную дозу субалина назначали с кормом в течение пяти дней. Животным пятой группы препарат не назначали, и они служили контролем. За время опыта норок всех групп содержали в аналогичных условиях и их кормление осуществляли по зоотехническим нормам.

За два дня до назначения субалина и через три дня после последней дачи препарата от каждого животного брали свежие пробы фекалий и в них определяли содержание энтеробактерий в стандартной массе - 1 г.

Следует отметить, что общее состояние норок разных групп, которым назначали субалин по разной схеме, оставалось в пределах физиологической нормы и мало чем отличалось от животных контрольной группы.

Таблица 3 Влияние субалина на микрофлору кишечника молодняка норок при кокцидиозах
Группа и препарат	Кол-во жив-х в группе	Доза по ДВ мг/кг и кратность	Экстенсинвазированность, %	Количество энтеробактерий в 1 г содержимого
И	Э	исходное	через 3 дня после последней дачи
Субалин	5	20×1	100	50	2,4×103	3,1×103
Субалин	5	20×2	100	50	2,3×103	3,7×104
Субалин	5	20×3	100	50	2,8×103	3,6×105
Субалин	5	20×5	100	50	1,9×103	3,2×105
Контроль	5	-	100	50	2,7×10 3	2,6×10 3

Результаты исследований показали, что количество энтеробактерий в стандартном объеме содержимого до назначения субалина колебалось от 1,9×10 ³ до 2,8×10³. После назначения субалина в первой группе количество энтеробактерий составило 3,1×10 ³. Во второй группе, которой субалин назначали в дозе 20 мг/голову два дня, количество энтеробактерий увеличилось и составило 3,7×10⁴. В третьей и четвертой группах, где норкам субалин назначали в дозе 20 мг/голову три и пять дней, количество энтеробактерий составило 3,6×10⁵ и 3,2×10 ⁵ соответственно. У животных контрольной группы показатели по содержанию энтеробактерий оставались на прежнем уровне.

Полученные результаты дают основание считать, что схема назначения субалина в дозе 20 мг/голову три дня с кормом является оптимальной при кокцидиозах молодняка норок.

Следует отметить, что бактерии, составляющие основу субалина, обладают высокой антагонистической активностью по отношению к патогенным и условно патогенным микроорганизмам, не влияют на представителей нормальной микрофлоры. Субалин незаменим при наличии дисфункции кишечника, вызванной кокцидиозной инвазией, когда в пораженные участки кишечной стенки проникает микрофлора, которая обостряет течение болезни, вызывая обширные некрозы слизистой, также для коррекции микрофлоры кишечника при дисбактериозах, возникающих на фоне хронических кокцидиозов. Несмотря на то, что бактерии, входящие в состав субалина, не оказывают прямого действия на кокцидий, тем не менее они играют весьма важную роль в деле восстановления нормальной микрофлоры кишечника после удаления паразитических простейших под действием толтрозурила (этиотропное лечение), вытесняются и патогенные микроорганизмы, заполняя их нишу полезной, которые синтезируют комплекс ферментов, стимулирующих и регулирующих пищеварение и способствующих лучшему усвоению корма (патогенетическая терапия).

Пример 4. Определение экономической эффективности применения толтрозурила с субалином при кокцидиозах молодняка норок.

Экономическую эффективность применения антикокцидийных препаратов при изоспорозе и эймериозе норок оценивали на 21 голове молодняка 2-6 месячного возраста, разделенные на три аналогичные группы по семь голов в каждой. Их исходная зараженность в 2-месячном возрасте изоспорами составила 100%, эймериями - 57,1%. Животным первой группы назначали толтрозурил в дозе 30 мг/кг массы с кормом два дня с последующим назначением субалина в дозе 20 мг/голову с кормом три дня. Животным второй группы задавали рекомендуемую дозу метронидазола 20 мг/кг массы дважды два дня с кормом с последующим назначением субалина в отмеченной дозе. Норок третьей группы лечению не подвергали.

Расчет экономической эффективности лечения норок при кокцидиозах толтрозурилом осуществляли в сравнении с базовым препаратом метронидазолом и контрольными животными по разнице текущих производственных затрат и стоимости полученной продукции звероводства за время опыта. За продукцию звероводства принимали пушнину. Оценку качества пушнины проводили после убоя всех опытных зверей в ноябре совместно со специалистами хозяйства по принятым ГОСТам.

Оценка общего состояния опытных щенят, получавших толтрозурил и метронидазол, показала отсутствие каких-либо отклонений от норм в их состоянии.

При исследовании через 10 и 30 дней после назначения толтрозурила с последующей дачей субалина щенята первой группы были свободны от кокцидий. Животные второй группы, получавшие метронидазол с субалином, были свободны от эймерий и на 14,3% заражены изоспорами.

Учет текущих производственных затрат на лечение животных показал, что обработка одного щенка норки 2-месячного возраста обходилась: 1 группа - толтрозурил 2,6 руб., субалин 2,1 руб., 2 группа - метронидазол 0,05 руб., субалин 2,1 руб. Общие затраты на лечение в 1-й группе составили 4,7 руб., во 2-й - 2,15 руб.

Результаты проведенных наблюдений показали, что пушнина, полученная от молодняка первой группы, которых лечили толтрозурилом с добавлением субалина, имела лучшие показатели и была оценена по 1208 руб. за одну шкурку. Пушнина, полученная от норок второй группы, которых лечили метронидазолом с добавлением субалина и не все освободились от изоспор, была оценена чуть хуже - по 1110 рублей за шкурку. А пушнина, полученная от зараженных изоспорами и эймериями норок, была оценена еще хуже - по 997 рублей за одну шкурку.

Полученные данные показали отрицательное влияние кокцидиозной инвазии на качество пушнины и необходимость назначения эффективных антикокцидийных препаратов.

Экономический эффект от применения толтрозурила с субалином при изоспорозе и эймериозе молодняка норок в расчете на одно обработанное животное по сравнению с метронидазолом составил 95,45 рублей, а при сравнении с контрольными животными - 206,2 руб.

Пример 5. Производственное испытание лечебной эффективности толтрозурила с последующим назначением субалина при кокцидиозах норок разного возраста.

В условиях звероводческого хозяйства Московской области, неблагополучного по кокцидиозам норок, в 2008 году проводили испытание лечебной эффективности толтрозурила совместно с субалином. Всего было проведено два испытания. Первое испытание проводили на молодняке норок 2,5-месячного возраста (87 голов), которые были спонтанно заражены изоспорами на 40,5-42,2% и эймериями на 17,8-22,2%. Второе испытание проводили на 72 взрослых норках, зараженных эймериями на 20-21,6% и изоспорами на 14,3-18,9% (табл.4).

Норкам обеих возрастных групп назначали толтрозурил в определенной нами оптимальной дозе 30 мг/кг массы два дня с кормом и в последующие три дня пробиотик субалин в дозе 20 мг/голову один раз в день. В качестве препарата сравнения использовали метронидазол в рекомендованной дозе (базовый препарат) 20 мг/кг массы два раза в день два дня с кормом и в последующие три дня субалин в отмеченной дозе.

Эффективность проведенного лечения определяли по данным выборочных копроскопических исследований 50% поголовья через 10 и 30 дней после назначения препаратов.

При исследовании в отмеченные сроки установлено, что молодняк норок, леченный толтрозурилом с последующим назначением субалина, был свободен от изоспор и эймерий. Экстенсэффективность 100%. Животные второй группы, обработанные рекомендованной дозой метронидазола с добавлением

Таблица 4 Производственное испытание толтрозурила с субалином и метронидазола при кокцидиозах норок разного возраста
Группа и препарат	Доза по ДВ мг/кг и кратность	Кол-во жив-х в группе	Экстенсинвазированность, %	Экстенсэффективность при, %
исходная	через 10 дн.	через 30 дн.	через 10 дн.	через 30 дн.
И*	Э*	И	Э	И	Э	И**	Э**	И	Э
Молодняк 2-5-месячного возраста
Толтрозурил +	30×2	45	42,2	22,2	0	0	0	0	100	100	100	100
Субалин	20×3
Метронидазол +	20×2х2	42	40,5	17,8	4,8	0	4,8	0	88,2	100	88,2	100
Субалин	20×3
Взрослые норки
Толтрозурил +	30×2	37	18,9	21,6	0	0	0	0	100	100	100	100
Субалин	20×3
Метронидазол +	20×2×2	35	14,3	20	0	2,8	0	2,8	100	86	100	86
Субалин	20×3
Примечание И* - изоспорами, Э* - эймериями, И** - изоспорозе, Э** - эймериозе

Таблица 5 Профилактическая эффективность толтрозурила и метронидазола при кокцидиозах молодняка норок
Группа и препарат	Доза по ДВ мг/кг и кратность	Кол-во жив-х в группе	Экстенсинвазированность, (%) дни после дачи препарата
10	30	40	50	60	70	80	90
И*	Э*	И	Э	И	Э	И	Э	И	Э	И	Э	И	Э	И	Э
Толтрозурил +	30×1	67	0	0	0	0	0	0	0	0	0	0	0	6,1	1,5	7,6	3,1	9,1
Субалин	20×3
Метронидазол +	20×2	65	0	0	0	0	0	6,7	8,3	6,7	11,7	10,2	11,7	13,6	15,2	13,6	15,2	183
Субалин	20×3
Контрольная	66	0	0	6,1	4,7	7,6	4,7	12,7	7,8	19,4	11,1	27,4	19,7	37,7	19,7	43,3	21,7
Примечание И* - изоспорами, Э* - эймериями

субалина были свободны от эймерий и на 4,8% заражены изоспорами. Экстенсэффективность метронидазола в производственном испытании при эймериозе норок равнялась 100%, при изоспорозе - 88,2%.

Взрослые норки после лечения толтрозурилом с последующим назначением субалина были свободны от кокцидий. Экстенсэффективность 100%. Метронидазол при изоспорозе взрослых норок показал 100%-ную эффективность, а при эймериозе - 86%-ную.

Результаты производственных испытаний подтвердили высокую эффективность толтрозурила с последующим назначением субалина при изоспорозе и эймериозе норок разного возраста.

Пример 6. Испытание профилактической эффективности толтрозурила с последующим назначением субалина при кокцидиозах молодняка норок.

Профилактическую эффективность толтрозурила по сравнению с метронидазолом при изоспорозе и эймериозе молодняка норок изучали в условиях неблагополучного по кокцидиозам норок звероводческого хозяйства. Щенкам первой группы (67 голов) на 5-й день от рождения назначали толтрозурил в дозе по ДВ 30 мг/кг массы в форме 5%-ной суспензии индивидуально внутрь из шприца без иголки, затем в последующие три дня - пробиотик субалин в дозе 20 мг/голову внутрь. Щенкам второй группы (65 голов) в эти же сроки назначали метронидазол в дозе 20 мг/кг дважды индивидуально и отмеченную дозу субалина.

Профилактическую эффективность толтрозурила по сравнению с метронидазолом определяли по результатам копроскопических исследований опытных животных через 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80 и 90 дней после их назначения.

Проведенные в период назначения и в последующие пять дней после наблюдения показали, что все опытные животные, получавшие толтрозурил с субалином и метронидазол с субалином, чувствовали себя хорошо. Каких-либо отклонений от нормы в состоянии опытных щенков норок, получавших отмеченные препараты, не установлено. Мы отмечаем нормальный рост и развитие щенков норок. Сохранность щенков в первой группе составила 97,0, во второй - 90,5 и в контроле - 84,5%.

При исследованиях по определению профилактической эффективности раннего назначения антикокцидийных препаратов нами установлено, что молодняк первой группы, получавший толтрозурил с субалином, был свободен от изоспор и эймерий при исследовании через 10, 20, 30, 40, 50 и 60 дней после дачи препарата. Через 70 дней после назначения толтрозурила подопытные щенята были заражены эймериями на 6,1%, а через 90 дней их экстенсинвазированность составила 9,1%. Через 80 и 90 дней после назначения толтрозурила зараженность изоспорами составила 1,5 и 3,1% (табл.5). После назначения метронидазола с субалином ооцисты эймерий и изоспор обнаружены у молодняка норок через 40 и 50 дней.

Таким образом, толтрозурил в дозе 30 мг/кг массы индивидуально при назначении молодняку норок на 5-й день после рождения, а в последующие три дня пробиотик субалин обеспечивает 100%-ную профилактическую эффективность при изоспорозе и эймериозе в течение 60-70 дней после применения.

Предложенный способ, включающий в себя применение антикокцидийного препарата толтрозурила с последующим назначением пробиотикасубалина, обеспечивает высокую лечебно-профилактическую и экономическую эффективность при кокцидиозах норок.

Источники информации

1. Арнастаускене Т.В. Кокцидии и кокцидиозы домашних и диких животных. Литвы. - Вильнюс, 1985.

2. Крылов М.В. Определение паразитических простейших. - СПб., 1996.

3. Методические рекомендации по борьбе с эймериозами и изоспорозами животных. - М.: РАСХН, 1994.

4. Сафиуллин Р.Т., Габдулин В.А. Эффективность байкокса при изоспорозе и эймериозе молодняка свиней. Ветеринария, М., 2000. - № 4. - С.28-32.