производные пиридина для лечения метаболических нарушений, связанных с устойчивостью к действию инсулина или гипергликемией

Формула изобретения

1. Соединение общей формулы (I)



где Ar представляет собой фенильную группу, замещенную пиперазином или бензо[d]тиазолом, с фенильной частью, соединенной с В, причем пиперазин или бензо[d]тиазол может быть незамещен или замещен заместителями, выбранными из алкила или ацетила;

В представляет собой -O-;

R¹ представляет собой водород;

R² представляет собой S(O) ₂R⁴ или C(O)(CH₂)_n-C(O)OR ⁵;

R³ представляет собой галоген;

R⁴ представляет собой арил, который может быть незамещен или замещен заместителями, выбранными из группы, включающей галоген, алкил, фторалкил, алкокси и трифторметокси;

R⁵ представляет собой водород;

n является целым числом от 1 до 3;

и его фармацевтически приемлемая соль.

2. Соединение по п.1, где Ar представляет собой фенильную группу, замещенную пиперазином или бензо[d]тиазолом, с фенильной частью, соединенной с В, где пиперазин или бензо[d]тиазол может быть незамещен или замещен заместителями, выбранными из алкила или ацетила;

В представляет собой -O-;

R ¹ представляет собой водород;

R² представляет собой S(O)₂R⁴;

R³ представляет собой галоген;

R⁴ представляет собой арил, который может быть незамещен или замещен заместителями, выбранными из группы, содержащей галоген, алкил, фторалкил, алкокси и трифторметокси; и

его фармацевтически приемлемая соль.

3. Соединение по п.2, где

Ar представляет собой фенильную группу, замещенную пиперазином, с фенильной частью, соединенной с В, где пиперазин может быть незамещен или замещен заместителями, выбранными из алкила или ацетила;

В представляет собой -O-;

R¹ представляет собой водород;

R² представляет собой S(O)₂R⁴;

R ³ представляет собой галоген;

R⁴ представляет собой арил, который может быть незамещен или замещен заместителями, выбранными из группы, содержащей галоген, алкил, фторалкил, алкокси и трифторметокси; и

его фармацевтически приемлемая соль.

4. Соединение по п.3, где

Ar представляет собой фенильную группу, замещенную пиперазином, с фенильной частью, соединенной с В, где пиперазин может быть незамещен или замещен заместителями, выбранными из алкила или ацетила;

В представляет собой -O-;

R¹ представляет собой водород;

R² представляет собой S(O)₂R⁴ ;

R³ представляет собой хлор;

R ⁴ представляет собой 4-метилфенил, 2-хлор-4-трифторметилфенил, 3-хлор-4-метилфенил, 3,4-диметоксифенил, 2,5-диметоксифенил, 4-метоксифенил, 4-трифторметоксифенил, 4-фторфенил, 2,4-дифторфенил, 2-фтор-4-хлорфенил, 2,4-дихлорфенил, 3,4-дихлорфенил или 2-хлор-4-трифторметилфенил; и

его фармацевтически приемлемая соль.

5. Соединение по п.4, где Ar представляет собой 4-(пиперазин-1-ил)фенил с фенильной частью, соединенной с В;

В представляет собой -O-;

R¹ представляет собой водород;

R ² представляет собой S(O)₂R⁴;

R³ представляет собой хлор;

R⁴ представляет собой 2,4-дихлорфенил; и

его фармацевтически приемлемая соль.

6. Соединение по п.4, где

Ar представляет собой 4-(4-ацетил-пиперазин-1-ил)фенил с фенильной частью, соединенной с В;

В представляет собой -O-;

R¹ представляет собой водород;

R² представляет собой S(O)₂R⁴;

R³ представляет собой хлор;

R⁴ представляет собой 4-метилфенил, 3,4-диметоксифенил, 2,5-диметоксифенил, 4-метоксифенил, 4-трифторметоксифенил, 4-фторфенил, 2,4-дифторфенил, 2,4-дихлорфенил, 3,4-дихлорфенил или 2-хлор-4-трифторметилфенил; и

его фармацевтически приемлемая соль.

7. Соединение по п.4, где

Ar представляет собой 3-(4-метил-пиперазин-1-ил)фенил с фенильной частью, соединенной с В;

В представляет собой -O-;

R¹ представляет собой водород;

R² представляет собой S(O)₂R⁴;

R³ представляет собой хлор;

R⁴ представляет собой 4-метоксифенил или 2,4-дифторфенил; и

его фармацевтически приемлемая соль.

8. Соединение по п.1, где

Ar представляет собой фенильную группу, замещенную бензо[d]тиазолом, с фенильной частью, соединенной с В, где бензо[d]тиазол может быть незамещен или замещен заместителями, выбранными из алкила или ацетила;

В представляет собой -O-;

R¹ представляет собой водород;

R² представляет собой S(O) ₂R⁴;

R³ представляет собой галоген;

R⁴ представляет собой арил, который может быть незамещен или замещен заместителями, выбранными из группы, содержащей галоген, алкил, фторалкил, алкокси и трифторметокси; и

его фармацевтически приемлемая соль.

9. Соединение по п.8, где

Ar представляет собой фенильную группу, замещенную бензо[d]тиазолом, с фенильной частью, соединенной с В, где бензо[d]тиазол может быть незамещен или замещен заместителями, выбранными из алкила или ацетила;

В представляет собой -O-;

R¹ представляет собой водород;

R² представляет собой S(O)₂R⁴;

R ³ представляет собой хлор;

R⁴ представляет собой арил, который может быть незамещен или замещен заместителями, выбранными из группы, содержащей галоген, алкил, фторалкил, алкокси и трифторметокси; и

его фармацевтически приемлемая соль.

10. Соединение по п.9, где

Ar представляет собой фенильную группу, замещенную бензо[d]тиазолом, с фенильной частью, соединенной с В, где бензо[d]тиазольная группа может быть незамещена или замещена заместителями, выбранными из алкила или ацетила;

В представляет собой -O-;

R¹ представляет собой водород;

R² представляет собой S(O) ₂R⁴;

R³ представляет собой хлор;

R⁴ представляет собой 4-метилфенил, 3,4-диметоксифенил, 2,5-диметоксифенил, 4-метоксифенил, 4-трифторметоксифенил, 4-фторфенил, 2,4-дифторфенил, 2,4-дихлорфенил, 3,4-дихлорфенил или 2-хлор-4-трифторметилфенил; и

его фармацевтически приемлемая соль.

11. Соединение по п.10, где

Ar представляет собой 6-(2-бензо[d]тиазол-2-ил)фенил с фенильной частью, соединенной с В;

В представляет собой -О-;

R¹ представляет собой водород;

R ² представляет собой S(O)₂R⁴;

R³ представляет собой хлор;

R⁴ представляет собой 4-метоксифенил, 2,4-дихлорфенил, 3,4-дихлорфенил или 2-хлор-4-трифторметилфенил; и

его фармацевтически приемлемая соль.

12. Соединение по п.1, где

Ar представляет собой фенильную группу, замещенную пиперазином, с фенильной частью, соединенной с В; где пиперазин может быть незамещен или замещен заместителями, выбранными из алкила или ацетила;

В представляет собой -O-;

R¹ представляет собой водород;

R² представляет собой С(O)(СН₂)_n-С(O)OR⁵;

R³ представляет собой галоген;

R ⁵ представляет собой водород;

n является целым числом от 1 до 3; и

его фармацевтически приемлемая соль.

13. Соединение по п.12, где

Ar представляет собой 4-(4-ацетил-пиперазин-1-ил)фенил с фенильной частью, соединенной с В;

В представляет собой -O-;

R¹ представляет собой водород;

R² представляет собой C(O)(CH₂)₂-C(O)OR⁵;

R³ представляет собой хлор;

R⁵ представляет собой водород; и

его фармацевтически приемлемая соль.

14. Соединение по п.1, где соединение представляет собой:

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,4-дихлорбензолсульфонамид,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-метоксибензолсульфонамид,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-3,4-диметокси-бензолсульфонамид,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,5-диметокси-бензолсульфонамид,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2-хлор-4-(трифторметил)бензолсульфонамид,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-3,4-дихлорбензолсульфонамид,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-(трифторметокси)бензолсульфонамид,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-метилбензолсульфонамид,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,4-дифторбензолсульфонамид,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-фторбензолсульфонамид,

2,4-дихлор-N-(5-хлор-6-(4-(пиперазин-1-ил)фенокси)пиридин-3-ил)бензолсульфонамид,

N-(5-хлор-6-(3-(4-метилпиперазин-1-ил)фенокси)пиридин-3-ил)-2,4-дифторбензолсульфонамид,

N-(5-хлор-6-(3-(4-метилпиперазин-1-ил)фенокси)пиридин-3-ил)-4-метоксибензолсульфонамид,

4-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-иламино)-4-оксобутановая кислота,

N-(6-(2-(бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,4-дихлорбензолсульфонамид,

N-(6-(2-(бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-метоксибензолсульфонамид,

N-(6-(2-(бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-3,4-дихлорбензолсульфонамид,

N-(6-(2-(бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2-хлор-4-(трифторметил)бензолсульфонамид; и

его фармацевтически приемлемая соль.

15. Соединение по п.1, где соединение представляет собой:

N-(6-(4-(4-Ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,4-дихлорбензолсульфонамид,

2,4-Дихлор-N-(5-хлор-6-(4-(пиперазин-1-ил)фенокси)пиридин-3-ил)бензолсульфонамид,

4-(6-(4-(4-Ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-иламино)-4-оксобутановая кислота; и

его фармацевтически приемлемая соль.

16. Способ получения соединения общей формулы (I)



где Ar представляет собой фенильную группу, замещенную пиперазином или бензо[d]тиазолом, с фенильной частью, соединенной с В, где пиперазин или бензо[d]тиазольная группа могут быть незамещены или замещены заместителями, выбранными из алкила или ацетила;

В представляет собой -O-;

R³ представляет собой галоген;

R¹ представляет собой Н, R ² представляет собой SO₂R⁴, и R ⁴ представляет собой арил, который может быть незамещен или замещен заместителями из группы, включающей галоген, алкил, фторалкил, алкокси и трифторметокси,

включающий этапы, на которых:

а) подвергают реакции соединение общей формулы (II)



где Hal представляет собой фтор, хлор, бром или йод, и R³ определен выше, с соединением формулы (III): Ar-ВН, где Ar и В определены выше, в присутствии основания, такого как карбонат цезия, для получения соединения общей формулы (IV)



где Ar, В и R³ определены выше;

b) подвергают нитросоединение формулы (IV) выше восстановлению для получения соответствующего аминосоединения общей формулы (V)



где Ar, В и R³ определены выше;

c) подвергают реакции аминосоединение общей формулы (V) с Hal-SO₂R⁴, где Hal представляет собой фтор, хлор, бром или йод, и R⁴ определен выше, в присутствии основания для получения соединения формулы (I); и

d) необязательно, преобразовывают полученное соединение в фармацевтически приемлемую соль.

17. Способ получения соединения общей формулы (I)



где Ar представляет собой фенильную группу, замещенную пиперазином, с фенильной частью, соединенной с В, где пиперазин может быть незамещен или замещен заместителями, выбранными из алкила или ацетила;

В представляет собой -O-;

R³ представляет собой галоген;

R¹ представляет собой Н, R² представляет собой C(O)(CH ₂)_n-C(O)OR⁵, n является целым числом от 1 до 3, и R⁵ представляет собой водород,

включающий этапы, на которых:

а) подвергают реакции соединение общей формулы (II)



где Hal представляет собой фтор, хлор, бром или йод, и R³ определен выше, с соединением формулы (III): Ar-ВН, где Ar и В определены выше, в присутствии основания, такого как карбонат цезия, для получения соединения общей формулы (IV)



где Ar, В и R³ определены выше;

b) подвергают нитросоединение формулы (IV) выше восстановлению для получения соответствующего аминосоединения общей формулы (V)



где Ar, В и R³ определены выше;

c) нагревают с обратным холодильником аминосоединение общей формулы (V) выше с ангидридом [(CH₂)_n(CO) ₂O] для получения соединения формулы (I), где R² представляет собой -С(O)(СН₂)_n-С(O)ОН, и n является целым числом от 1 до 3; и

d) необязательно, преобразовывают полученное соединение формулы (I) в фармацевтически приемлемую соль.

18. Фармацевтическая композиция для лечения метаболических нарушений, относящихся к устойчивости к действию инсулина или гипергликемии, содержащая терапевтически эффективное количество соединения общей формулы (I) по п.1 или ее фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.

19. Способ лечения метаболического нарушения, связанного с устойчивостью к действию инсулина или гипергликемией, содержащий введение млекопитающему при потребности терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) по п.1 или его фармацевтически приемлемой соли.

20. Способ по п.19, где метаболическое нарушение, связанное с устойчивостью к действию инсулина или гипергликемией, включает диабет 2 типа, ожирение, непереносимость глюкозы, дислипидемию, гиперинсулинемию, атеросклеротическое заболевание, синдром поликистоза яичников, коронарную болезнь артерий, гипертензию или неалкогольную жировую дистрофию печени.

21. Способ по п.20, где метаболическое нарушение, связанное с устойчивостью к действию инсулина или гипергликемией, включает диабет 2 типа.

22. Способ по п.20, где метаболическим нарушением, связанным с устойчивостью к действию инсулина или гипергликемией, является ожирение.

23. Применение соединения формулы (I) по п.1 или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарства для лечения метаболического нарушения, связанного с устойчивостью к действию инсулина или гипергликемией у млекопитающего.

24. Применение по п.23, где метаболическое нарушение, связанное с устойчивостью к действию инсулина или гипергликемией, включает: диабет 2 типа, ожирение, непереносимость глюкозы, дислипидемию, гиперинсулинемию, атеросклероз, синдром поликистоза яичников, заболевание коронарной артерии, гипертензию или неалкогольную жировую дистрофию печени.

25. Применение по п.24, где метаболическим нарушением, связанным с устойчивостью к действию инсулина или гипергликемией, является диабет 2 типа.

26. Применение по п.24, где метаболическим нарушением, связанным с устойчивостью к действию инсулина или гипергликемией, является ожирение.

27. Применение по п.23, где соединением формулы (I) является:

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,4-дихлорбензолсульфонамид,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-метоксибензолсульфонамид,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-3,4-диметокси-бензолсульфонамид,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,5-диметокси-бензолсульфонамид,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2-хлор-4-(трифторметил)бензолсульфонамид,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-3,4-дихлорбензолсульфонамид,

N-(6-(4-(4-апетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-(трифторметокси)бензолсульфонамид,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-метилбензолсульфонамид,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,4-дифторбензолсульфонамид,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-фторбензолсульфонамид,

2,4-дихлор-N-(5-хлор-6-(4-(пиперазин-1-ил)фенокси)пиридин-3-ил)бензолсульфонамид,

N-(5-хлор-6-(3-(4-метилпиперазин-1-ил)фенокси)пиридин-3-ил)-2,4-дифторбензолсульфонамид,

N-(5-хлор-6-(3-(4-метилпиперазин-1-ил)фенокси)пиридин-3-ил)-4-метоксибензолсульфонамид,

4-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-иламино)-4-оксобутановая кислота,

N-(6-(2-(бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,4-дихлорбензолсульфонамид,

N-(6-(2-(бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-метоксибензолсульфонамид,

N-(6-(2-(бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-3,4-дихлорбензолсульфонамид или

N-(6-(2-(бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2-хлор-4-(трифторметил)бензолсульфонамид; и

фармацевтически приемлемая соль.

28. Применение по п.23, где соединением формулы (I) является:

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,4-дихлорбензолсульфонамид,

2,4-дихлор-N-(5-хлор-6-(4-(пиперазин-1-ил)фенокси)пиридин-3-ил)бензолсульфонамид,

4-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-иламино)-4-оксобутановая кислота; и

его фармацевтически приемлемая соль.

Описание изобретения к патенту

Перекрестная ссылка на родственную заявку

Данная заявка связана с РСТ заявкой № PCT/IB2007/053817, которая называется: СПОСОБ УСТАНОВЛЕНИЯ СОЕДИНЕНИЙ, КОТОРЫЕ ДЕЙСТВУЮТ КАК СЕНСИБИЛИЗАТОРЫ ИНСУЛИНА, которая подана 20 сентября 2007.

Область изобретения

Данное изобретение относится к соединениям, которые применяют при лечении метаболических нарушений, связанных с устойчивостью к действию инсулина или гипергликемией.

Предпосылки изобретения

Избыточный вес и, в крайних случаях, ожирение, является распространенной медицинской проблемой. Это может быть частично из-за сидячего образа жизни и плохого питания (с высоким содержанием жиров и углеводов), а также во многих случаях из-за генетической предрасположенности. Ожирение является хорошо известным фактором риска для гипертензии, диабета 2 типа и сердечно-сосудистых заболеваний.

Диабет относится к патогенезу заболевания, который проистекает из многочисленных этиологических факторов и характеризуется повышенными уровнями глюкозы в плазме или гипергликемией натощак или после введения глюкозы на протяжении орального теста на толерантность к глюкозе. Устойчивая или неконтролируемая гипергликемия связана с повышенной и преждевременной болезненностью и летальным исходом. Часто аномальный гомеостаз глюкозы связан как прямо, так и косвенно с нарушениями липидного, липопротеинового и аполипопротеинового метаболизма и другим метаболическим и гемодинамическим заболеванием. Таким образом, пациенты с сахарным диабетом 2 типа подвергаются особенно повышенному риску макрососудистых и микрососудистых осложнений, включая ишемическую болезнь сердца, приступ, заболевание периферических сосудов, гипертензию, нефропатию, невропатию и ретинопатию. Таким образом, терапевтический контроль гомеостаза глюкозы, липидный метаболизм и гипертензия являются критически важными в клиническом контроле и лечении сахарного диабета. Существуют две общепризнанные формы диабета. При диабете 1 типа или инсулинозависимом сахарном диабете (IDDM) пациенты вырабатывают немного или вообще не вырабатывают инсулин, гормон, который регулирует использование глюкозы. При диабете 2 типа или инсулиннезависимом сахарном диабете (NIDDM), пациенты часто имеют такие уровни инсулина в плазме, которые являются такими же или даже выше по сравнению с субъектами без диабета; тем не менее у этих пациентов развита устойчивость к стимулирующему действию инсулина на глюкозу и липидный метаболизм в основных тканях, чувствительных к инсулину, которые являются мышцей, печенью и жировой тканью, и уровни инсулина в плазме, которые при их увеличении являлись недостаточными для преодоления четко выраженной устойчивости к действию инсулина. И ожирение, и диабет 2 типа характеризуются устойчивостью периферической ткани к действию инсулина.

Широкое распространение устойчивости к действию инсулина у субъектов, с непереносимостью глюкозы, долгое время являлось общепризнанным. Reaven et al. (American Journal of Medicine, 60, 80, 1976) применяли непрерывное вливание глюкозы и инсулина (методика фиксации инсулина/глюкозы) и оральные тесты на толерантность к глюкозе для того, чтобы показать, что устойчивость к действию инсулина существует в различных группах, не страдающих ожирением, некетотических субъектов. Эти субъекты находились в диапазоне от сомнительной толерантности к глюкозе до выраженной гипергликемии натощак. Диабетические группы в данных исследованиях включают как инсулинзависимые (тип 1), так и инсулиннезависимые (тип 2) субъекты.

Совпадающей с длительной устойчивостью к действию инсулина является более легко определяемая гиперинсулинемия, которую можно измерять точным определением циркуляцией плазменной концентрации инсулина в плазме субъектов. Гиперинсулинемия может присутствовать как результат устойчивости к действию инсулина, например, у полных субъектов и/или с диабетом (тип 2) и/или субъектов, нетолерантных к глюкозе, или у субъектов типа 1 как следствие избыточной дозы введенного инсулина по сравнению с нормальным физиологическим высвобождением гормона при помощи эндокринной железы.

Независимые факторы риска, такие как ожирение и гипертензия для атеросклеротических заболеваний, также связаны с устойчивостью к действию инсулина. Применяя комбинацию фиксации инсулина/глюкозы, меченного вливания глюкозы и непрямой калориметрии, показали, что устойчивость к действию инсулина наследственной гипертензии локализуется в периферических тканях (в основном, мышцах) и связана непосредственно с остротой гипертензии (Diabetes Care, 14, 173, 1991). В гипертензии ожирения устойчивость к действию инсулина вызывает гиперинсулинемию, которая набирается как механизм для ограничения дополнительного увеличения веса путем термогенеза, но инсулин также повышает ренальную реабсорбцию натрия и стимулирует симпатическую нервную систему в почках, сердце и сосудистой системе, создавая гипертензию.

Теперь оценили, что устойчивость к действию инсулина обычно является результатом дефекта в сигнальной системе инсулинового рецептора, в сайте послесвязывания инсулина с рецептором. Собранные научные доказательства, показывающие устойчивость к действию инсулина в основных тканях, которые отвечают на инсулин (мышца, печень, жировая ткань), настоятельно указывают на то, что дефект в сигнальной трансдукции инсулина находится на раннем этапе данного каскада, особенно при киназной активности инсулинового рецептора, которая кажется уменьшенной (Diabetalogia, 34 (12), 848-861, 1991).

В недавнем прошлом разработали новый класс лекарственных средств, которые действуют при помощи снижения периферической устойчивости к действию инсулина. Эти лекарственный средства являются лигандами для ядерного рецептора, гамма изоформы рецептора, активированного пролифератором пероксисом (PPAR гамма), который экспрессируется первично в жировой ткани. Эти лекарственные средства действуют как сенсибилизаторы инсулина при снижении сахара в крови и гиперинсулинемии. Самыми распространенными побочными эффектами этих активаторов PPAR гамма являются увеличение веса, отек, повышенный риск приступа и сердечного приступа.

Ожирение является заболеванием, которое характеризуется накоплением избытка жира в организме. Усиленная частота заболевания ожирением приводит к осложнениям, таким как гипертензия, диабет 2 типа, атеросклероз, дислипидемия, остеоартрит и некоторым формам рака.

Ожирение обычно определяется увеличенным весом тела и индексом массы тела (BMI). Люди с избыточным весом тела характеризуются устойчивостью периферической ткани к действию инсулина. Выражение «устойчивость к действию инсулина» относится к пониженному биологическому ответу к инсулину. У тучного человека устойчивость к действию инсулина часто компенсируется повышенным выделением инсулина из поджелудочной железы. Субъекты с ожирением проявляют гиперинсулинемию, непрямое доказательство периферической устойчивости к действию инсулина. Тем не менее организм может усилить выделение инсулина только до определенного уровня. Поэтому, если устойчивость к действию инсулина продолжает ухудшаться у человека с ожирением, в итоге организм больше не будет в состоянии дальше компенсировать стимуляцией выделения инсулина. В это время уровни инсулина в плазме имеют склонность падать, что в свою очередь приводит к повышению уровней глюкозы, таким образом ускоряя диабет 2 типа. Очевидно, это постепенное снижение выделения инсулина, что вызвано устойчивостью к действию инсулина, начавшееся при накоплении избыточного жира, является нежелательным для человека.

Таким образом, лекарственные средства, которые предупреждают накопление избыточного жира и ожирение, являются желаемыми. Отсюда, способы и процедуры идентификации соединений, которые останавливают развитие устойчивости к действию инсулина, являются применимыми для лечения людей с ожирением. Эти люди, посредством того, что имеют фармакологический контроль на устойчивость к действию инсулина, извлекут выгоду из таких типов лечения, имея меньшую частоту возникновения заболевания сердца, такого как повышенное кровяное давление, аномальные липидные профили и атеросклероз.

В патенте США № 6583157 раскрывают соединения хинолинила и бензотиазолила в качестве PPAR модуляторов.

В патенте США № 6403607 раскрывают производные сульфонамида, проявляющие эффекты при лечении пептической язвы и лекарственное средство, включающее производное в качестве активного ингредиента.

В патенте США № 6262112 и № 6573278 раскрывают арилсульфонамиды и аналоги, и их применение при лечении нейродегенеративных заболеваний.

Существует потребность в улучшении и альтернативных лекарствах для лечения метаболических нарушений, связанных с устойчивостью к действию инсулина или гипергликемией.

Краткое описание изобретения

Данное изобретение обеспечивает соединения, представленные общей формулой (I):

,

где Ar представляет собой фенильную группу, замещенную гетероциклилом или гетероарилом;

В представляет собой -O-, -S- или -NH-;

R¹ представляет собой водород;

R² представляет собой S(O)₂R⁴ или C(O)(CH₂) _n-C(O)OR⁵;

R³ представляет собой галоген, циано, (CO)OR⁶ или C(O)NR⁷ R⁸;

R⁴ представляет собой арил;

R⁵ представляет собой водород, (С₁-С₆)алкил или арил;

R ⁶ представляет собой водород или (С₁-С₄ )алкил;

R⁷ и R⁸ независимо представляют собой водород или (С₁-С₆)алкил;

n является целым числом от 1 до 3,

и их стереоизомеры, фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

Данное изобретение также относится к способу получения соединений общей формулы (I), их фармацевтически приемлемых солей, их фармацевтически приемлемых сольватов и фармацевтических композиций, содержащих их.

Данное изобретение относится к соединениям общей формулы (I), которые применяют при лечении метаболических нарушений, связанных с устойчивостью к действию инсулина или гипергликемией, способам применения таких соединений и к применению таких соединений.

По другому аспекту данного изобретения обеспечили способы изготовления лекарств, включая соединения общей формулы (I), которые применяют для лечения метаболических нарушений, связанных с устойчивостью к действию инсулина или гипергликемией.

Краткое описание фигур

Фигура 1: действие соединений на прием пищи у худой мыши.

Указано действие стандарта (Сибутрамин), соединения 1 и соединения 11 на прием пищи у худой C57Bl6/J мыши при 2, 4, 6 и 24 часовых промежутках после введений пищи.

Фигура 2: действие соединения 1 на суммарный прием пищи у мышей с диетиндуцированным ожирением.

Мышей с диетиндуцированным ожирением (DIO) обрабатывали или стандартом (Сибутрамин), или соединением 1 на протяжении 10 дней.

Фигура 3: действие соединения 1 на вес тела у мышей с диетиндуцированным ожирением.

Указано совокупное увеличение веса тела у мышей с диетиндуцированным ожирением (DIO), обрабатываемое или стандартом (Сибутрамин), или соединением 1 на протяжении 10 дней.

Подробное описание изобретения

Обозначения

Ниже изложены обозначения, которые применимы к выражениям, поскольку они применяются по всему описанию и приложенной формуле изобретения (если они не ограничены иначе значениями), или отдельно, или как часть большей группы.

Выражение "алкил" означает, если не указано другое, прямую или разветвленную цепь углеводородного радикала, которая может быть полностью насыщенной, моно- или полинасыщенной, имеющей от одного до восьми атомов углерода. Примеры насыщенных углеводородных радикалов включают группы, такие как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил, изобутил, втор-бутил и подобное. Ненасыщенной алкильной группой является та, что имеет одну или более двойных связей или тройных связей. Примеры ненасыщенных алкильных групп включают винил, 2-пропенил, кротил, 2-изопентенил, 2-(бутадиенил), 2,4-пентадиенил, 1,4-пентадиенил, этинил, 1- и 3-пропинил, 3-бутинил и подобное.

Если не указано иное, алкильные группы могут быть незамещенными или замещенными одним или более одинаковыми или разными заместителями. Любой вид заместителя, находящийся в замещенных алкильных остатках, может находиться в любом желаемом положении, обеспеченном так, что замещение не приводит к нестабильной молекуле. Замещенный алкил относится к алкильному остатку, в котором один или более, например 1, 2, 3, 4 или 5, атомов водорода замещены заместителями, например алкилом, галогеном, гидроксилом, ацилом, карбоксилом, алкоксилом, сложным эфиром, амино, амидо, ацетамидо, фторалкилом, аралкилом, ацилокси, арилом, гетероарилом, гетероциклилом и подобным.

Как применяют тут, выражение "алкоксил" или "алкокси" относится к алкильной группе, имеющей кислородный радикал, присоединенный к ней, где алкил таков, как определено выше. Выражения включают, таким образом, алкоксил или алкоксигруппы, которые замещены одной или более одинаковыми или разными группами. Типичные алкоксигруппы включают метокси, трифторметокси, этокси, пропокси, трет-бутоксигруппу.

Как применяют в данном описании, выражение "ацил" относится к любой группе или органическому радикалу, такому как алкил (который может быть в дальнейшем замещенным алкилом, алкокси, циклоалкиламино, гидрокси или гало), присоединенный к карбонильной группе, где алкил таков, как определено выше.

Выражение "гетероатом" относится к азоту, кислороду и сере. Нужно отметить, что полагают, что любой гетероатом с ненасыщенной валентностью имеет атом водорода для насыщения валентности.

Как применяют в данном описании, выражение "арил" относится к моноциклическому или бициклическому ароматическому кольцу, имеющему до 10 атомов углерода в кольце. Примеры арила включают фенил, нафтил, биенил и подобное. Если не указано другое, остатки арила, например фенил или нафтил, могут быть незамещенными или необязательно замещенными одним или более заместителями, например до пяти, одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогена, алкила, фторалкила, гидроксила, алкокси, трифторметокси, циано, амида, ацила, карбоксила, сульфонила, арила, гетероарила и гетероциклильной группы.

Остатки арила могут быть связаны через любое желаемое положение, и в замещенных остатках арила заместители могут размещаться в любом желаемом положении. Например, в монозамещенных остатках фенила заместитель может размещаться в положении 2, положении 3, положении 4 или положении 5. Если фенильная группа несет два заместителя, они могут размещаться в положении 2,3, положении 2,4, положении 2,5, положении 2,6, положении 3,4 или положении 3,5.

Выражение "гетероарил" означает, если не указано другое, арильные группы, которые содержат от одного до четырех гетероатомов, выбранных из N, О и S. Гетероатомы кольца могут находиться в любом необходимом количестве и в любом положении относительно друг друга, обеспечивая то, что полученная в итоге система гетероарила является стабильной.

Неограничивающие примеры гетероарильных групп включают пирролил, пиразолил, имидазолил, пиразинил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, фурил, тиенил, пиридил, пиримидил, бензотиазолил, бензимидазолил, бензоксазолил, хинолил, изохинолил, хиноксалинил и подобное.

Выражения "гетероциклил", "гетероциклический" "гетероцикл" и "гетероцикло" относятся к насыщенной или частично ненасыщенной моноцикличной или бицикличной системе кольца, включающей 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или 11, 12, 13 или 14 атомов кольца, в котором 1, 2, 3 или 4 являются одинаковыми или разными гетероатомами, выбранными из азота, кислорода и серы. Гетероциклильная группа может, например, иметь 1 или 2 кислородных атома, и/или 1 или 2 атома серы, и/или 1-4 атома азота в кольце. Моноциклические гетероциклильные группы включают 3-членные, 4-членные, 5-членные, 6-членные и 7-членные кольца. Пригодными примерами таких гетероциклильных групп являются пиперидинил, пиперазинил, тетрагидропиранил, морфолинил, тиомрфолинил, азепанил и подобное.

Бицикличные гетероциклильные группы могут включать два объединенных кольца, одним из которых является 5-, 6- или 7-членное гетероциклическое кольцо, а другим из которых является 5- или 6- членное карбоциклическое или гетероциклическое кольцо. Примерные бицикличные гетероцикличные группы включают тетрагидрохинолинил, тетрагидроизохинолинил, тетрагидроиндолил и подобное.

Если не указано другое, гетероарил и гетероциклильные группы могут быть незамещенными или замещенными одним или более (например, до 5), одинаковыми или разными заместителями. Примерами заместителей для кольцевых углеродных или кольцевых азотных атомов являются алкил, алкокси, галоген, гидроксил, гидроксиалкил, фторалкил, арилокси, амино, циано, амид, карбоксил, ацил, арил, гетероциклил и подобное. Заместители могут находиться в одном или более положений, обеспеченных так, что приводят к стабильной молекуле.

Выражение "арилалкил" означает включающий такие радикалы, в которых арильная или гетероарильная группа присоединены к алкильной группе (например, бензил, фенэтил и подобное).

Выражение "галоген" означает, если не указано иное, атом фтора, хлора, брома или йода.

Выражение "амино" относится к группе -NH₂, которая может быть необязательно замещенной алкилом, ацилом, циклоалкилом, арилом или гетероциклилом, где выражения алкил, ацил, арил или гетероциклил определены выше.

Будет понятно, что "замещение" или "замещенный" подразумевает условие, что замещение находится в соответствии с разрешенной валентностью замещенного атома и заместителя, а также приводит с стабильному соединению, которое быстро не подвергается преобразованию, например, при помощи перегруппировки, циклизации, отщепления и т.д.

Выражение "фармацевтически приемлемые соли" означает, что включаются соли активных соединений, которые получены с относительно нетоксическими кислотами или основаниями, в зависимости от отдельных заместителей, обнаруженных на соединениях, описанных тут. Когда соединения по данному изобретению содержат относительно кислотные функции, основно-аддитивные соли можно получить при контакте нейтральной формы таких соединений с достаточным количеством необходимого основания или в чистом, или в пригодном инертном растворителе. Примеры фармацевтически приемлемых основно-аддитивных солей включают соль натрия, калия, кальция, аммония, органического амино или магния, или подобную соль. Когда соединения по данному изобретению содержат относительно основные свойства, кислотно-аддитивные соли можно получить при контакте нейтральной формы таких соединений с достаточным количеством необходимой кислоты или в чистом, или в пригодном инертном растворителе. Примеры фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей включают такие, которые происходят из неорганических кислот, таких как соляная, бромистоводородная, азотная, угольная, моноуглеводородная, фосфорная, монофосфороводородная, дифосфороводородная, серная, моносероводородная, йодистоводородная или фосфорная кислоты, и подобное, а также соли, которые происходят от относительно нетоксических органических кислот, таких как уксусная, пропионовая, изомасляная, щавелевая, малеиновая, малоновая, бензойная, янтарная, пробковая, фумаровая, миндальная, фталевая, бензолсульфоновая, п-толилсульфоновая, лимонная, виннокаменная, метансульфоновая и подобное. Также включены соли аминокислот, такие как аргинат и подобное, и соли органических кислот, таких как глюкуроновая или галактуроновая кислота, и подобное. Определенные специфические соединения данного изобретения содержат и кислотные, и основные функции, что позволяет соединениям преобразовываться или в основно-, или в кислотно-аддитивные соли.

Нейтральная форма соединений может регенерироваться при контакте соли с основанием или кислотой и изолировать исходное соединение обычным способом. Исходная форма соединения может отличаться от различных форм соли в определенных физических формах, например, растворимостью в полярных растворителях.

Определенные соединения по данному изобретению могут существовать в несольватированных формах, а также в сольватированных формах, включая гидратные формы. Вообще, сольватированные формы и несольватированные формы включены в объем данного изобретения. Определенные соединения по данному изобретению могут существовать во множественных кристаллических или аморфных формах. Вообще, все физические формы находятся в объеме данного изобретения.

Кроме форм солей, данное изобретение обеспечивает соединения, которые находятся в форме пролекарства. Пролекарствами соединений, описанных тут, являются те соединения, которые быстро подвергаются химическим изменениям при физиологических условиях для обеспечения соединений по данному изобретению. Кроме того, пролекарства можно преобразовать в соединения по данному изобретению химическими или биохимическими способами в среде ех vivo. Например, пролекарства могут медленно преобразовываться в соединения по данному изобретению, когда помещены в резервуар с трансдермальным пластырем с пригодным ферментом или химическим реагентом.

Специалисты в данной области признают, что у соединений формулы (I) существуют стереоцентры. Соответственно, данное изобретение включает все возможные стереоизомеры и геометрические изомеры формулы (I) и включает не только рацемические соединения, но также вдобавок оптически активные изомеры. Когда соединение формулы (I) необходимо как один энантиомер, его можно получить или при помощи расщепления готового продукта, или стереоспецифическим синтезом, либо из изомерно чистого исходного материала, либо из любого подходящего промежуточного соединения. Расщепление готового продукта, промежуточного соединения или исходного материала можно выполнить при помощи обычных технологий. Кроме того, в ситуациях, когда возможны таутомеры соединений формулы (I), данное изобретение подразумевает включение всех таутомерных форм соединений.

Варианты осуществления

Варианты осуществления изобретения

Данное изобретение обеспечивает соединения, представленные общей формулой (I):

,

где Ar представляет собой фенильную группу, замещенную гетероциклилом или гетероарилом;

В представляет собой -O-, -S- или -NH-;

R¹ представляет собой водород;

R² представляет собой S(O)₂R⁴ или С(O)(СН₂) _n-С(O)OR⁵;

R³ представляет собой галоген, циано, (CO)OR⁶ или C(O)NR⁷ R⁸;

R⁴ представляет собой арил;

R⁵ представляет собой водород, (С₁-С₆)алкил или арил;

R ⁶ представляет собой водород или (С₁-С₄ )алкил;

R⁷ и R⁸ независимо представляют собой водород или (С₁-С₆)алкил;

n является целым числом от 1 до 3;

и их стереоизомеры, фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

В варианте осуществления данное изобретение обеспечивает соединения формулы (I),

где Ar представляет собой фенильную группу, замещенную гетероциклилом;

В представляет собой -O-, -S- или NH-;

R¹ представляет собой водород;

R² представляет собой S(O)₂R⁴ или C(O)(CH₂) _n-C(O)OR⁵;

R³ представляет собой галоген, циано, (CO)OR⁶ или C(O)NR⁷ R⁸;

R⁴ представляет собой арил;

R⁵ представляет собой водород, (С₁-С₆)алкил или арил;

R ⁶ представляет собой водород или (С₁-С₄ )алкил;

R⁷ и R⁸ независимо представляют собой водород или (С₁-С₆)алкил;

n является целым числом от 1 до 3,

и их стереоизомеры, фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

В варианте осуществления данное изобретение обеспечивает соединения формулы (I),

где Ar представляет собой группу, замещенную гетероциклилом;

В представляет собой кислород;

R¹ представляет собой водород;

R² представляет собой S(O) ₂R⁴;

R³ представляет собой галоген;

R⁴ представляет собой арил,

и их стереоизомеры, фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

В варианте осуществления данное изобретение обеспечивает соединения формулы (I),

где Ar представляет собой фенильную группу, замещенную гетероциклилом; например пиперазинил замещенный фенил с частью фенила, соединенной с В;

В представляет собой кислород;

R¹ представляет собой водород;

R ² представляет собой S(O)₂R⁴;

R³ представляет собой галоген, предпочтительно хлор;

R⁴ представляет собой замещенный или незамещенный фенил; например, фенил замещенный алкокси, галоген, циано, замещенный алкил или незамещенный алкил, такой как

метил или замещенный метил, замещенный фенил (например, 4-метилфенил, 2-хлор-4-трифторметилфенил или 3-хлор-4-метилфенил);

моно или диметокси замещенный фенил (например, 3,4-диметоксифенил, 2,5-диметоксифенил, 4-метоксифенил или 4-трифторметоксифенил);

галоген замещенный фенил, такой как фторзамещенный фенил (например, 4-фторфенил или 2,4-дифторфенил), хлорзамещенный фенил (например, 2,4-дихлорфенил, 3,4-дихлорфенил, 2-хлор-4-трифторметилфенил, 3-хлор-4-метилфенил), или хлор- и фторзамещенный фенил (например, 2-фтор-4-хлорфенил) или

4-цианофенил,

и их стереоизомеры, фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

В варианте осуществления данное изобретение обеспечивает соединение формулы (I),

где Ar представляет собой 4-(пиперазин-1-ил)фенил с частью фенила, соединенной с В;

В представляет собой кислород;

R ¹ представляет собой водород;

R² представляет собой S(O)₂R⁴;

R³ представляет собой хлор;

R ⁴ представляет собой 2,4-дихлорфенил,

и стереоизомер, фармацевтически приемлемая соль и сольват.

В варианте осуществления данное изобретение обеспечивает соединения формулы (I),

где Ar представляет собой 4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенил с частью фенила, соединенной с В;

В представляет собой кислород;

R¹ представляет собой водород;

R² представляет собой S(O) ₂R⁴;

R³ представляет собой хлор;

R⁴ представляет собой замещенный или неамещенный фенил, например фенил замещенный алкокси, галоген, циано, замещенный алкил или неамещенный алкил, такой как

метил замещенный фенил (например, 4-метилфенил);

моно или диметокси замещенный фенил (например, 3,4-диметоксифенил, 2,5-диметоксифенил, 4-метоксифенил или 4-трифторметоксифенил);

галоген замещенный фенил, такой как фторзамещенный фенил (например, 4-фторфенил или 2,4-дифторфенил), хлорзамещенный фенил (например, 2,4-дихлорфенил, 3,4-дихлорфенил или 2-хлор-4-трифторметилфенил),

и их стереоизомеры, фармацевтически приемлемый соли и сольваты.

В варианте осуществления данное изобретение обеспечивает соединения формулы (I),

где Ar представляет собой 3-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил с частью фенила, соединенной с В;

В представляет собой кислород;

R¹ представляет собой водород;

R² представляет собой S(O)₂ R⁴;

R³ представляет собой галоген;

R⁴ представляет собой 4-метоксифенил или 2,4-дифторфенил,

и их стереоизомеры, фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

В варианте осуществления данное изобретение обеспечивает соединения формулы (I),

где Ar представляет собой фенильную группу, замещенную гетероарилом;

В представляет собой -O-, -S- или NH-;

R¹ представляет собой водород;

R ² представляет собой S(O)₂R⁴ или С(O)(СН₂)_n-С(O)OR⁵;

R³ представляет собой галоген, циано, (CO)OR⁶ или C(O)NR⁷R⁸;

R⁴ представляет собой арил;

R⁵ представляет собой водород, (С₁-С₆)алкил или арил;

R⁶ представляет собой водород или (С ₁-С₄)алкил;

R⁷ и R⁸ независимо представляют собой водород или (С ₁-С₆)алкил;

n является целым числом от 1 до 3,

и их стереоизомеры, фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

В варианте осуществления данное изобретение обеспечивает соединения формулы (I),

где Ar представляет собой фенильную группу, замещенную гетероарилом;

В представляет собой кислород;

R ¹ представляет собой водород;

R² представляет собой S(O)₂R⁴;

R³ представляет собой галоген, предпочтительно хлор;

R⁴ представляет собой арил,

и их стереоизомеры, фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

В варианте осуществления данное изобретение обеспечивает соединения формулы (I),

где Ar представляет собой 6-(2-бензо[d]тиазол-2-ил)фенил с частью фенила, соединенной с В;

В представляет собой кислород;

R¹ представляет собой водород;

R ² представляет собой S(O)₂R⁴;

R³ представляет собой галоген, предпочтительно хлор;

R⁴ представляет собой замещенный или незамещенный фенил; такой как фенил замещенный алкокси, галоген, циано, замещенный алкил или незамещенный алкил, такой как

метил или замещенный-метил замещенный фенил (например, 4-метилфенил);

моно или диметокси замещенный фенил (например, 3,4-диметоксифенил, 2,5-диметоксифенил, 4-метоксифенил или 4-трифторметоксифенил);

галоген замещенный фенил, такой как фторзамещенный фенил (например, 4-фторфенил или 2,4-дифторфенил) или хлорзамещенный фенил (например, 2,4-дихлорфенил, 3,4-дихлорфенил или 2-хлор-4-трифторметилфенил),

и их стереоизомеры, фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

В варианте осуществления данное изобретение обеспечивает соединения формулы (I),

где Ar представляет собой 6-(2-бензо[d]тиазол-2-ил)фенил с частью фенила, соединенной с В;

В представляет собой кислород;

R¹ представляет собой водород;

R ² представляет собой S(O)₂R⁴;

R³ представляет собой хлор;

R⁴ представляет собой замещенный или незамещенный фенил, такой как фенил замещенный алкокси, галоген, циано, замещенный алкил или незамещенный алкил, такой как

монометокси замещенный фенил (например, 4-метоксифенил), или

хлорзамещенный фенил (например, 2,4-дихлорфенил, 3,4-дихлорфенил или 2-хлор-4-трифторметилфенил),

и их стереоизомеры, фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

В варианте осуществления данное изобретение обеспечивает соединения формулы (I),

где Ar представляет собой фенильную группу, замещенную гетероциклилом;

В представляет собой кислород;

R¹ представляет собой водород;

R² представляет собой C(O)(CH ₂)_n-C(O)OR⁵;

R ³ представляет собой галоген, циано, (CO)OR⁶ или C(O)NR⁷R⁸;

R⁵ представляет собой водород, (С₁-С₆)алкил или арил;

R⁶ представляет собой водород или (С₁-С₄)алкил;

R ⁷ и R⁸ независимо представляют собой водород или (С₁-С₆)алкил;

n является целым числом от 1 до 3,

и их стереоизомеры, фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

В варианте осуществления данное изобретение обеспечивает соединение формулы (I),

где Ar представляет собой 4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенил с частью фенила, соединенной с В;

В представляет собой кислород;

R¹ представляет собой водород;

R² представляет собой C(O)(CH ₂)₂-C(O)OR⁵;

R ³ представляет собой хлор;

R⁵ представляет собой водород,

и стереоизомер, фармацевтически приемлемую соль и сольват.

Соединения по данному изобретению выбраны из следующих, но не ограничиваются ими:

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,4-дихлорбензолсульфонамида,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-метоксибензолсульфонамида,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-3,4-диметокси-бензолсульфонамида,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,5-диметокси-бензолсульфонамида,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2-хлор-4-(трифторметил)бензолсульфонамида,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокеи)-5-хлорпиридин-3-ил)-3,4-дихлорбензолсульфонамида,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-(трифторметокси)бензолсульфонамида,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-метилбензолсульфонамида,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,4-дифторбензолсульфонамида,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-фторбензолсульфонамида,

2,4-дихлор-(5-хлор-6-(4-(пиперазин-1-ил)фенокси)пиридин-3-ил)бензолсульфонамида,

N-(5-хлор-6-(3-(4-метилпиперазин-1-ил)фенокси)пиридин-3-ил)-2,4-дифторбензол сульфонамида,

N-(5-хлор-6-(3-(4-метилпиперазин-1-ил)фенокси)пиридин-3-ил)-4-метоксибензол-сульфонамида,

4-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-иламино)-4-оксобутановой кислоты,

N-(6-(2-(бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,4-дихлорбензол-сульфонамида,

N-(6-(2-(бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-метоксибензол-сульфонамида,

N-(6-(2-(бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-3,4-дихлор-бензолсульфонамида,

N-(6-(2-(бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2-хлор-4-(трифторметил)бензолсульфонамида,

и их фармацевтически приемлемых солей и сольватов.

Пригодные соединения по данному изобретению выбраны, но не ограничиваются, из следующих:

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,4-дихлорбензолсульфонамида,

2,4-дихлор-N-(5-хлор-6-(4-(пиперазин-1-ил)фенокси)пиридин-3-ил)бензолсульфонамида,

4-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-иламино)-4-оксобутановой кислоты и

их фармацевтически приемлемых солей и сольватов.

Как применяют в данном описании, выражения "лечение" и "терапия" и подобное относятся к облегчению, замедлению прогрессии, профилактике, ослаблению или курсу лечения существующего заболевания (например, диабет 2 типа, ожирение или дислипидемия).

Выражение "терапевтически эффективное количество", как применяют тут, означает описание количества соединения по данному изобретению, эффективное при воспроизведении необходимого терапевтического ответа у отдельного пациента, страдающего от метаболических нарушений, связанных с устойчивостью к действию инсулина или гипергликемии.

Согласно другому аспекту данного изобретения обеспечены способы изготовления лекарств, включающие соединения общей формулы (I), которые применимы для лечения метаболических нарушений, связанных с устойчивостью к действию инсулина или гипергликемией.

Согласно другому аспекту данного изобретения обеспечены способы для изготовления лекарств, включающих соединения общей формулы (I), которые применимы для лечения метаболических нарушений, связанных с устойчивостью к действию инсулина или гипергликемией у млекопитающего, причем лекарства изготовлены для введения или последовательно, или одновременно с, по меньшей мере, одним другим фармацевтически активным соединением.

Тогда как является возможным, чтобы соединения по данному изобретению могли быть терапевтически введенными как исходное химическое вещество, является предпочтительным, чтобы активный ингредиент присутствовал в виде фармацевтического состава. Соответственно, данное изобретение дополнительно обеспечивает фармацевтический состав, включающий соединение формулы (I) или фармацевтически приемлемую соль, или сольват, или его пролекарство, например, вместе с одним или более его фармацевтически приемлемыми носителями и, необязательно, другими терапевтическими и/или профилактическими ингредиентами.

Фармацевтическая композиция может быть в формах, используемых обычно, таких как таблетки, пастилки, капсулы, порошки, сиропы, растворы, суспензии и подобное, специально сформулированных для орального, буккального, парентерального, трансдермального, ингаляционного, интраназального, трансмукозального, имплантного или ректального введения, тем не менее оральное введение является предпочтительным. Для буккального введения состав можно взять в форме таблеток или пастилок, сформулированных обычным способом. Таблетки и капсулы для орального введения могут содержать обычные наполнители, такие как связывающие агенты (например, сироп, камедь, желатин, сорбит, трагакант, крахмальный клей или поливинилпирролидон), наполнители (например, лактоза, сахар, микрокристаллическая целлюлоза, маисовый крахмал, фосфат кальция или сорбит), смазочные вещества (например, стеарат магния, стеариновая кислота, тальк, полиэтиленгликоль или диоксид кремния), дезинтегранты (например, картофельный крахмал или натриевая соль гликолята крахмала) или увлажняющие агенты, такие как лаурилсульфат натрия. Таблетки могут быть покрыты способами, известными в технике.

Альтернативно, соединения по данному изобретению могут быть включены в оральные жидкие препараты, такие как водные или масляные суспензии, растворы, эмульсии, сиропы или эликсиры, например. Более того, составы, содержащие эти соединения, могут быть представлены как сухой продукт для состава с водой или другим пригодным наполнителем перед применением. Такие жидкие препараты могут содержать обычные добавки, такие как суспендирующие агенты, такие как сорбитный сироп, метилцеллюлоза, сироп глюкозы/сахара, желатин, гидроксиэтилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза, стеарат алюминия в виде геля или гидрированные пищевые жиры; эмульгирующие агенты, такие как лецитин, моноолеат сорбита или камедь; неводные наполнители (которые могут включать пищевые масла), такие как миндальное масло, фракционированное кокосовое масло, масляные сложные эфиры, пропиленгликоль или этиловый спирт; консерванты, такие как метил или пропил п-гидроксибензоаты или сорбиновая кислота. Такие препараты также могут быть сформулированы как суппозитории, например, содержащие обычные суппозиторные основы, такие как кокосовое масло или другие глицериды. Кроме того, составы по данному изобретению могут быть сформулированы для парентерального введения инъекцией или непрерывной инфузией. Составы для инъекций могут принимать такие формы, как суспензии, растворы или эмульсии в масляных или водных носителях, и могут содержать агенты для состава, такие как суспендирующие, стабилизирующие и/или диспергирующие агенты. Альтернативно, активный ингредиент может быть в форме порошка для состава с пригодным носителем (например, стерильная, апирогенная вода) перед применением.

Составы по изобретению могут также быть сформулированы как запасные препараты. Такие составы длительного действия можно вводить имплантацией (например, подкожно или внутримышечно) или внутримышечной инъекцией. Соответственно, соединения по изобретению могут быть сформулированы с пригодными полимерными или гидрофобными материалами (как эмульсия в пригодном масле, например), ионообменными смолами или как умеренно растворимые производные, как умеренно растворимая соль, например.

Специалисты в данной области оценят то, что ссылки в данном описании для лечения распространяются на профилактику, а также лечение установленных заболеваний или симптомов. Более того, будет оценено, что количество соединения изобретения, которое требуется для применения при лечении, будет изменяться с природой состояния, которое лечат, и возрастом и состоянием пациента и, в конечном итоге, будет по усмотрению обслуживающего врача или ветеринара. В основном, тем не менее, применяемые дозы для лечения взрослых типично будут находиться в диапазоне 0,02-5000 мг в день или 1-1500 мг в день. Необходимая доза может приемлемо присутствовать в одноразовой дозе или как разделенные дозы, введенные при подходящих интервалах, например, как две, три, четыре или более поддоз в день.

Составы по данному изобретению могут содержать 0,1-99% активного ингредиента, более приемлемо 30-95% для таблеток и капсул и 3-50% для жидких препаратов.

Более того, вдобавок, по меньшей мере, к одному соединению общей формулы (I) в качестве активного ингредиента фармацевтические композиции могут также содержать один или более других терапевтически активных ингредиентов.

Согласно варианту осуществления данного изобретения обеспечили способ для лечения метаболических нарушений, связанных с устойчивостью к действию инсулина или гипергликемией, включающий введение млекопитающему при потребности терапевтически эффективного количества соединения формулы (I).

Согласно варианту осуществления данного изобретения обеспечили способ для лечения метаболических нарушений, связанных с устойчивостью к действию инсулина или гипергликемией, включающих диабет 2 типа, ожирение, непереносимость глюкозы, дислипидемию, гиперинсулинемию, атеросклеротическое заболевание, синдром поликистоза яичников, заболевание коронарной артерии, гипертензию, старение, неалкогольную жировую дистрофию печени, инфекции, рак и приступ, включающий введение млекопитающему при потребности терапевтически эффективного количества соединения формулы (I).

Согласно варианту осуществления данного изобретения обеспечили способ для лечения диабета 2 типа и нарушений, связанных с ним, включающий введение млекопитающему при потребности терапевтически эффективного количества соединения формулы (I).

Согласно варианту осуществления данного изобретения обеспечили способ для лечения ожирения и нарушений, связанных с ним, включающий введение млекопитающему при потребности терапевтически эффективного количества соединения формулы (I).

Согласно варианту осуществления данного изобретения обеспечили способ для лечения дислипидемии и нарушений, связанных с ней, включающий введение млекопитающему при потребности терапевтически эффективного количества соединения формулы (I).

Согласно варианту осуществления соединения по данному изобретению применимы для лечения метаболических нарушений, связанных с устойчивостью к действию инсулина или гипергликемией.

Согласно варианту осуществления соединения по данному изобретению применимы для лечения метаболических нарушений, связанных с устойчивостью к действию инсулина или гипергликемией, включающих диабет 2 типа, непереносимость глюкозы, дислипидемию, гиперинсулинемию, атеросклеротическое заболевание, синдром поликистоза яичников, заболевание коронарной артерии, гипертензию, старение, неалкогольную жировую дистрофию печени, инфекции, рак и приступ.

Согласно варианту осуществления соединения по данному изобретению применимы для лечения диабета 2 типа.

Согласно варианту осуществления соединения по данному изобретению применимы для лечения ожирения и связанных нарушений.

Согласно варианту осуществления соединения по данному изобретению применимы для лечения дислипидемии.

Репрезентативные соединения, применимые при лечении метаболических нарушений, связанных с устойчивостью к действию инсулина или гипергликемией, по данному изобретению, выбраны из следующих, но не ограничиваются ими:

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,4-дихлорбензолсульфонамида,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-метоксибензолсульфонамида,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-3,4-диметоксибензолсульфонамида,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,5-диметокси-бензолсульфонамида,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2-хлор-4-(трифторметил)бензолсульфонамида,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-3,4-дихлорбензолсульфонамида,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-(трифторметокси)бензолсульфонамида,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-метилбензолсульфонамида,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,4-дифторбензолсульфонамида,

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-фторбензолсульфонамида,

2,4-дихлор-N-(5-хлор-6-(4-(пиперазин-1-ил)фенокси)пиридин-3-ил)бензолсульфонамида,

N-(5-хлор-6-(3-(4-метилпиперазин-1-ил)фенокси)пиридин-3-ил)-2,4-дифторбензолсульфонамида,

N-(5-хлор-6-(3-(4-метилпиперазин-1-ил)фенокси)пиридин-3-ил)-4-метоксибензолсульфонамида,

4-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-иламино)-4-оксобутановой кислоты,

N-(6-(2-(бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,4-дихлорбензолсульфонамида,

Н-(6-(2-(бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-метоксибензолсульфонамида,

N-(6-(2-(бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-3,4-дихлор-бензолсульфонамида,

N-(6-(2-(бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2-хлор-4-(трифторметил)бензолсульфонамида и

их фармацевтически приемлемых солей и сольватов.

Пригодные соединения, применимые при лечении метаболических нарушений, связанных с устойчивостью к действию инсулина или гипергликемией, по данному изобретению выбраны из следующего, но не ограничиваются ними:

N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,4-дихлорбензолсульфонамида,

2,4-дихлор-N-(5-хлор-6-(4-(пиперазин-1-ил)фенокси)пиридин-3-ил)бензолсульфонамида,

4-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-иламино)-4-оксобутановой кислоты

и их фармацевтически приемлемых солей и сольватов.

Получение соединений

Согласно дополнительному аспекту изобретения обеспечили способ получения соединений общей формулы (I):

где Ar представляет собой фенильную группу, замещенную гетероциклилом или гетероарилом;

В представляет собой -O-, -S- или -NH-;

R¹ представляет собой водород;

R² представляет собой S(O)₂R⁴ или C(O)(CH₂) _n-C(O)OR⁵;

R³ представляет собой галоген, циано, (CO)OR⁶ или C(O)NR⁷ R⁸;

R⁴ представляет собой арил;

R⁵ представляет собой водород, (С₁-С₆)алкил или арил;

R⁶ представляет собой водород или (С₁-С ₄)алкил;

R⁷ и R⁸ независимо представляют собой водород или (С₁-С ₆)алкил;

n является целым числом от 1 до 3, и

их стереоизомеров, фармацевтически приемлемых солей и сольватов.

Соединения общей формулы (I) по данному изобретению можно получить или по аналогии со стандартными синтетическими способами, и особенно по (или по аналогии с) схеме 1.

Схема 1

Как показано на схеме 1, соединения по данному изобретению можно получить реакцией соединения формулы (II), где R³ определено выше и Hal выбрали из фтора, хлора, брома или йода, с соединением формулы (III), где Ar и В определены выше, в присутствии растворителя, такого как диметилформамид, диметилсульфоксид, тетрагидрофуран, диоксан или ацетонитрил, необязательно в присутствии основания, такого как карбонат цезия, карбонат калия, карбонат натрия, гидроксид натрия, гидроксид калия или фторид калия, для обеспечения соединения формулы (IV), где Ar, В и R³ определены выше. Нитрогруппу соединения формулы (IV) восстановили до соответствующей аминогруппы для получения соединения формулы (V), где Ar, В и R³ определены выше. Восстановление нитрогруппы можно проводить, применяя SnCl ₂, в растворителе, таком как этилацетат; или применяя Fe/HCl; или в присутствии газообразного водорода и катализатора, такого как Pd-C, Rh-C, Pt-C; или любым пригодным способом, известным в технике.

Соединение формулы (V) дополнительно преобразовали в необходимое соединение формулы (I), где R ² представляет собой -SO₂R⁴ и Ar, В, R¹, R³ и R⁴ определены выше, реакцией с Hal-SO₂R⁴, где Hal представляет собой фтор, хлор, бром или йод и R⁴ представлено выше, в присутствии пиридина или триэтиламина как основания и растворитель выбрали из ацетонитрила, дихлорметана, хлороформа, тетрахлорметана, тетрагидрофурана или диоксана.

Соединение формулы (V) можно также преобразовать в желаемое соединение формулы (I), где R² представляет собой -С(O)(СН₂)n-С(O)ОН и Ar, В, n, R¹ и R³ определены выше, нагреванием с обратным холодильником с ангидридом [(СН₂)_n (СО)₃О], в присутствии растворителя, выбранного из бензола, толуола, тетрагидрофурана или диоксана. Кислоту формулы (I) можно преобразовать в сложный эфир, где R² представляет собой -C(O)(CH₂)_n-C(O)OR⁵, где Ar, В, n, R¹ и R³ определены выше и R ⁵ представляет собой (С₁-С₄)алкил или арил, стандартными реакциями сложной этерификации, известными в литературе.

Соединения общей формулы I, где Ar, В, R¹ R² и R³, что определены выше, можно преобразовать в фармацевтически приемлемую соль стандартными процедурами, известными в литературе.

Соединения по данному изобретению можно получить, как показано в сопровождающих демонстрационных примерах. Следующие примеры изложены для иллюстрации синтеза некоторых отдельных соединений по данному изобретению и представления общего способа. Соответственно, следующий раздел с примерами никак не направлен ограничивать объем изобретения, предусмотренный тут.

Примеры

Список аббревиатур

HCl: соляная кислота;

POCl₃: оксихлорид фосфора;

Cs ₂CO₃: карбонат цезия

DCM: дихлорметан

DMF: диметилформамид

DMSO: диметилсульфоксид

СРМ: число импульсов в минуту

mpk: мг/кг.

od: один раз на день

bid: дважды в день

HEPES: N-(2-гидроксиэтил)пиперазин-N'-2-этансульфоновая кислота

Т.пл. (DSC): точка плавления (дифференциальная сканирующая калориметрия)

CMC: карбоксиметилцеллюлоза

Приготовление 1 2,3-дихлор-5-нитропиридина

Этап i. 2-Гидрокси-3-хлор-5-нитропиридин

2-Гидрокси-5-нитропиридин (1 г, 7,14 ммоль) добавляли частями к 4,5 мл концентрированной HCl при постоянном перемешивании и нагревали до 50°С. К этому медленно добавили раствор хлората натрия (266 мг, 2,5 ммоль) в воде (4 мл). Реакцию поддерживали при той же температуре еще дополнительно час и затем охладили до 0°С. Полученный осадок отфильтровали, тщательно промыли водой и высушили для получения 2-гидрокси-3-хлор-5-нитропиридина.

Выход 850 мг (68,2%); ¹Н NMR (DMSO-d₆) : 8,36 (d, 1H); 8,65 (d, 1H).

Этап ii. 2,3-Дихлор-5-нитропиридин

Хинолин (0,3 мл, 2,34 ммоль) добавили к POCl₃ (0,5 мл 4,68 ммоль) при 0°С под азотом. К этой перемешанной смеси добавили 2-гидрокси-3-хлор-5-нитропиридин (816 мг, 4,68 ммоль), полученный на этапе i выше. Реакционную смесь нагревали при 120°С на протяжении 2 часов, охладили до 0°С последующим добавлением ледяной водой. Полученный осадок отфильтровали, тщательно промыли водой и высушили для получения 2,3-дихлор-5-нитропиридина.

Выход 630 мг (70,3%); ¹H NMR (DMSO-d₆) : 8,94 (d, 1H); 9,16 (d, 1H).

Приготовление 2: 1-{4-[4-((5-амино-3-хлорпиридин-2-илокси)фенил]пиперазин-1-илэтанона

Этап i. Получение 1-{4-[4-((3-хлор-5-нитропиридин-2-илокси)фенил]пиперазин-1-илэтанона

Сухой диметилформамид (10 мл) добавили к 1-[4-(-гидрокси-фенил-пиперазин-1-ил]этанону (696 мг, 3,16 ммоль) с перемешиванием и добавили карбонат цезия (1,03 г, 3,16 ммоль) при комнатной температуре (25°С). Через 30 минут добавили 2,3-дихлор-5-нитропиридин (610 мг, 3,16 ммоль) (как получено в приготовлении 1) и перемешивание продолжали дополнительно 18 часов. Растворитель удалили под вакуумом и к полученной массе добавили воду (20 мл), экстрагировали этилацетатом, высушили над сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом для получения неочищенного продукта, который дополнительно очистили колоночной хроматографией (силикагель ~200 меш, 30% этилацетат в петролейном эфире) для получения названого соединения.

Выход 1,09 г (92,9%).

¹Н NMR (CDCl₃ ) : 2,01 (s, 3Н), 2,99 (t, 2H), 3,05 (t, 2H), 3,54 (s, 4H), 5,30 (s, 2H), 6,85 (d, 1H), 6,93 (d, 1H), 7,17 (s, 1H), 7,43 (s, 1H).

Этап ii. 1-{4-[4-((5-амино-3-хлорпиридин-2-илокси)фенил]пиперазин-1-илэтанона

Соединение этапа i (3,15 г, 8,34 ммоль) растворили в этилацетате (50 мл). Дигидрат хлорида олова (7,52 г, 33,36 ммоль) добавили при комнатной температуре (25°С) и перемешивание продолжали 18 часов. Растворитель удалили под вакуумом и добавили хлороформ (50 мл). 1 н. раствор гидроксида натрия добавляли, пока не получили прозрачный раствор. Отделенный органический слой отделили и экстрагировали хлороформом. Слой хлороформа промыли последовательно рассолом и водой, высушили над сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом для получения неочищенного продукта, который дополнительно очистили колоночной хроматографией (силикагель ~200 меш, 1% метанол в хлороформе) для получения названного соединения.

Выход 1,77 г (61,52%); ¹Н NMR (CDCl ₃) : 2,04 (s, 3H), 3,10 (m, 2H), 3,18 (m, 2H), 3,59 (brs, 4H), 5,32 (s, 2H), 7,05 (d, J=9Hz, 2H), 7,14 (d, J=9Hz, 2H), 8,6 (d, J=2,4 Hz, 1H), 8,95 (d, J=2,4 Hz, 1H); MS: 347 (M+1).

Приготовление 3: 5-хлор-6-(3-(4-метилпиперазин-1-ил)фенокси)пиридин-3-амина

3-(4-Метилпиперазин-1-ил)фенол подвергли реакции с 2,3-дихлор-5-нитропиридином (как получено в приготовлении 1), для получения 1-(3-(3-хлор-5-нитропиридин-2-илокси)фенил)-4-метилпиперазина, который в дальнейшем преобразовали в названное соединение согласно способу, описанному в приготовлении 2.

¹ Н NMR (CDCl₃) : 3,09 (t, J=4,5 Hz, 4H), 3,22 (t, J=4,5 Hz, 4H), 3,70 (s, 3Н), 5,17 (s, 2H), 6,36 (dd, J=2,5, 8,0 Hz, 1H), 6,46 (s, 1H), 6,55 (dd, J=1,5, 8,0 Hz, 1H), 7,06 (d, J=2,5 Hz, 1H), 7,11 (t, J=8, Hz, 1H), 7,63 (d, J=2,5 Hz, 1H); MS (ES): 319,01 (M+1).

Приготовление 4: 6-(2-(бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-амина

2-(Бензо[d]тиазол-2-ил)фенол подвергли реакции с 2,3-дихлор-5-нитропиридином для получения 2-(2-(3-хлор-5-нитропиридин-2- илокси)фенил)бензо[d]тиазола, который в дальнейшем преобразовали в 6-(2-(бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-амин согласно способу, описанному в приготовлении 2.

¹ Н NMR (DMSO-d₆) : 5,48 (s, 2H), 6,99 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,27 (d, J=2,5 Hz, 1H), 7,35 (t, J=7,5 Hz, 1H), 7,44 (t, J=7,5 Hz, 1H), 7,47 (d, J=2,5 Hz, 1H), 7,54 (m, 2H), 8,07 (d, J=8,0 Hz, 1H), 8,11 (d, J=8,0 Hz, 1H), 8,46 (d, J=7,0 Hz, 1H); MS: 354,11 (M+1).

Общая процедура приготовления соединений формулы (I)

К перемешанному раствору амина [полученному приготовлениями 1-4] (1 ммоль) в DCM добавили пиридин (1-3 ммоль), за которым последовали добавление замещенного бензолсульфонилхлорида (1 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре (25°С). Реакционную смесь разбавили, применяя DCM, промыли водой, высушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали. Неочищенный продукт очистили, применяя колоночную хроматографию (силикагель) для получения названного соединения.

Соединения примеров 1-10, 12, 13 и 15-18 получили данным способом. Общая процедура образования соли

Способ А: соединение формулы (I) растворили в смеси растворителей 1:1 этилацетата и DCM. К прозрачному раствору добавили 1 эквивалент соответствующей кислоты (такой как толуолсульфоновая кислота, или метансульфоновая кислота, или бензолсульфоновая кислота) и перемешивали на протяжении 30-45 минут при комнатной температуре (25°С). Осадок отфильтровали и охарактеризовали ¹H NMR и т.пл. (DSC).

Способ В: указанное соединение формулы (I) растворили в этаноле (большой избыток требовался для получения прозрачного раствора при нагревании). К прозрачному раствору добавили 1 эквивалент соответствующей кислоты (такой как толуолсульфоновая кислота, метансульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота). После нагревания с обратным холодильником на протяжении 3 часов растворитель удалили и полученное твердое вещество охарактеризовали ¹Н NMR и т.пл. (DSC).

Пример 1

N-(6-(4-(4-Ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,4-дихлорбензолсульфонамид (Соединение 1)

Названное соединение получили реакцией 1-(4-(4-(5-амино-3-хлорпиридин-2-илокси)фенил)пиперазин-1-ил)этанона (полученного согласно способу, описанному в приготовлении 2) и 2,4-дихлорбензол-1-сульфонилхлорида.

Т.пл. 215°С-216°С; ¹Н NMR (DMSO-d₆) : 2,02 (s, 3H), 3,02 (d, 4H), 3,55 (s, 4H), 6,94 (s, 4H), 7,57 (dd, 1H), 7,64 (d, 1H), 7,70 (d, 1H), 7,87 (d, 1H), 7,96 (d, 1H) 10,98 (s, 1H); MS (ES): 555,03 (M+1).

Соль натрия

Соединение примера 1 (250 мг) растворили в избыточном количестве (40-50 мл) метанола и реакционную смесь нагревали до 60°С для получения прозрачного раствора. К перемешанному раствору добавили 1,0 эквивалент гидроксида натрия как раствор в метаноле. Раствор кипятили с обратным холодильником 2-3 часа. После завершения реакции растворитель удалили и высушили.

Т.пл. 130°С-133°С; ¹H NMR (DMSO-d ₆): 7,88 (d, 1H), 7,60 (d, 1H), 7,46 (d, 1H), 7,43 (d, 1H), 7,40 (dd, 1H), 6,89-6,80 (m, 4H), 3,50 (brs, 4H), 3,04 (t, 2H), 2,97 (t, 2H), 1,97 (s, 3H); MS (ES): 577 [(M-1)+Na].

Пример 2

N-(6-(4-(4-Ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-метоксибензолсульфонамид (Соединение 2)

Названное соединение получили реакцией 1-(4-(4-(5-амино-3-хлорпиридин-2-илокси)фенил)пиперазин-1-ил)этанона (полученного согласно способу, описанному в приготовлении 2) и 4-метоксибензол-1-сульфонилхлорида.

¹ Н NMR (DMSO-d₆) : 1,97 (s, 3Н), 3,02 (d, 4H), 3,55 (s, 4H), 3,79 (s, 3H), 6,94 (s, 4H), 7,05-7,08 (m, 2H), 7,63-7,66 (m, 4H), 10,30 (s, 1H); MS (ES): 517,12 (M+1).

Пример 3

N-(6-(4-(4-Ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-3,4-диметокси-бензолсульфонамид (Соединение 3)

Названное соединение получили реакцией 1-(4-(4-(5-амино-3-хлорпиридин-2-илокси)фенил)пиперазин-1-ил)этанона (полученного согласно способу, описанному в приготовлении 2) и 3,4-диметоксибензол-1-сульфонилхлорида.

¹Н NMR (DMSO-d6) : 2,06 (s, 3Н), 3,02 (d, 4H), 3,55 (s, 4H), 3,74 (d, 6H), 6,94 (s, 4H), 7,05 (d, 1H), 7,19 (s, 1H), 7,25 (d, 1H), 7,64 (s, 2H) 10,26 (s, 1H); MS (ES): 545,16 (M-1).

Пример 4

N-(6-(4-(4-Ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,5-диметокси-бензолсульфонамид (Соединение 4)

Названное соединение получили реакцией 1-(4-(4-(5-амино-3-хлорпиридин-2-илокси)фенил)пиперазин-1-ил)этанона (полученного согласно способу, описанному в приготовлении 2) и 2,5-диметоксибензол-1-сульфонилхлорида.

¹Н NMR (DMSO-d₆) : 2,02 (s, 3H), 3,02 (s, 2H), 3,09 (s, 2H) 3,54 (d, 4H), 3,70 (s, 3Н), 3,78 (s, 3H) 6,93 (s, 4H), 7,14-7,20 (m, 3H)) 7,64 (d, 1H) 7,68 (d, 1H), 10,20 (s, 1H); MS (ES): 545,16 (M-1).

Пример 5

N-(6-(4-(4-Ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2-хлор-4-(трифторметил)бензолсульфонамид (Соединение 5)

Названное соединение получили реакцией 1-(4-(4-(5-амино-3-хлорпиридин-2-илокси)фенил)пиперазин-1-ил)этанона (полученного согласно способу, описанному в приготовлении 2) и 2-хлор-4-(трифторметил)бензол-1-сульфонилхлорида.

¹Н NMR (DMSO-d₆) : 2,01 (s, 3H), 3,02 (d, 4H), 3,54 (s, 4H), 6,93 (s, 4H), 7,69 (s, 2H), 7,8 (d, 1H), 8,13-8,2 (m, 2H), 11,08 (s, 1Н); MS (ES): 589,06 (M+1).

Пример 6

N-(6-(4-(4-Ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-3,4-дихлорбензолсульфонамид (Соединение 6)

Названное соединение получили реакцией 1-(4-(4-(5-амино-3-хлорпиридин-2-илокси)фенил)пиперазин-1-ил)этанона (полученного согласно способу, описанному в приготовлении 2) и 3,4-дихлорбензол-1-сульфонилхлорида.

¹ Н NMR (DMSO-d₆) : 2,02 (s, 3H), 3,03 (s, 2H), 3,1 (s, 2H), 3,55 (s, 4H), 6,92 (s, 4H), 7,62-7,69 (m, 3H)), 7,83 (d, 1H) 7,91 (d, 1H), 10,61 (s, 1H); MS (ES): 554,8 (M-1).

Пример 7

N-(6-(4-(4-Ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-(трифторметокси) бензолсульфонамид (Соединение 7)

Названное соединение получили реакцией 1-(4-(4-(5-амино-3-хлорпиридин-2-илокси)фенил)пиперазин-1-ил)этанона (полученного согласно способу, описанному в приготовлении 2) и 4-(трифторметокси)бензол-1-сульфонилхлорида.

¹Н NMR (DMSO-d₆) : 2,02 (s, 3H), 3,02 (s, 2H), 3,09 (s, 2H), 3,55 (s, 4H), 6,95 (s, 4H), 7,55 (d, 2H) 7,63-7,67 (m, 2H), 7,83 (d, 2H), 10,58 (s, 1H); MS (ES): 571,03 (M+1).

Пример 8

N-(6-(4-(4-Ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-метилбензолсульфонамид (Соединение 8)

Названное соединение получили реакцией 1-(4-(4-(5-амино-3-хлорпиридин-2-илокси)фенил)пиперазин-1-ил)этанона (полученного согласно способу, описанному в приготовлении 2) и 4-метилбензол-1-сульфонилхлорида.

¹ Н NMR (DMSO-d₆) : 2,02 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 3,02 (s, 2H), 3,09 (s, 2H), 3,55 (s, 4H), 6,94 (s, 4H), 7,34 (d, 2H), 7,58-7,63 (m, 4H)), 10,4 (s, 1H); MS (ES): 501,01 (M+1).

Пример 9

N-(6-(4-(4-Ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,4-дифторбензолсульфонамид (Соединение 9)

Названное соединение получили реакцией амин 1-(4-(4-(5-амино-3-хлорпиридин-2-илокси)фенил)пиперазин-1 -ил)этанона (полученного согласно способу, описанному в приготовлении 2) и 2,4-дифторбензол-1-сульфонилхлорида.

¹Н NMR (DMSO-d₆) : 2,02 (s, 3H), 3,01 (t, 2H), 3,08 (t, 2H), 3,55 (s, 4H), 6,95 (s, 4H), 7,22 (t, 1H), 7,51-7,59 (dt, 1H), 7,67 (d, 1H), 7,70 (d, 1H), 7,82-7,9 (m, 1H), 10,86 (s, 1H); MS (ES): 523,09 (M+1).

Пример 10

N-(6-(4-(4-Ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-фторбензолсульфонамид (Соединение 10)

Названное соединение получили реакцией 1-(4-(4-(5-амино-3-хлорпиридин-2-илокси)фенил)пиперазин-1-ил)этанона (полученного согласно способу, описанному в приготовлении 2) и 4-фторбензол-1-сульфонилхлорида.

¹ Н NMR (DMSO-d₆) : 2,02 (s, 3H), 3,01 (t, 2H), 3,08 (t, 2H), 3,55 (s, 4H), 6,95 (s, 4H), 7,37 (t, 2H), 7,64 (s, 2H), 7,75-7,80 (m, 2H), 10,48 (s, 1H); MS (ES): 505,1 (M+1).

Пример 11

2,4-Дихлор-N-(5-хлор-6-(4-(пиперазин-1-ил)фенокси)пиридин-3-ил)бензолсульфонамид (Соединение 11)

Названное соединение получили диацетилированием N-(6-(4-(4-ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,4-дихлорбензолсульфонамида (полученного согласно способу, описанному в примере 1), применяя концентрированную HCl в метаноле-воде.

N-(6-(4-(4-Ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,4-дихлорбензолсульфонамид (500 мг) растворили в метаноле (100 мл). Смесь нагревали до 50°С при перемешивании. К перемешанному раствору добавили 2 мл концентрированной HCl и 1 мл воды. Полученный раствор перемешивали 6-7 часов при 45-50°С. Растворитель удалили и к остатку добавили воду. Реакционную смесь сделали щелочной, применяя 1 н. раствор гидроксида натрия. Названное соединение осадили, отфильтровали и высушили под вакуумом при 60°С.

Выход 320 мг (69,3%); ¹Н NMR (DMSO-d₆) : 3,17 (brs, 4H), 3,19 (brs, 4H), 3,38 (m, 1H), 6,84-6,94 (m, 4H), 7,37 (d, 1H), 7,40-7,45 (m, 2H), 7,58 (d, 1H), 7,91 (d, 1H), 9,95 (s, 1H); MS: 513,1 (M-1).

Пример 12

N-(5-Хлор-6-(3-(4-метилпиперазин-1-ил)фенокси)пиридин-3-ил)-2,4-дифторбензолсульфонамид (Соединение 12)

Названное соединение получили реакцией 5-хлор-6-(3-(4-метилпиперазин-1-ил)фенокси)пиридин-3-амина (полученного согласно способу, описанному в приготовлении 3) и 2,4-дифторбензол-1-сульфонилхлорида.

¹ Н NMR (DMSO-d₆) : 3,21-3,33 (m, 8H), 3,69 (s, 3H), 6,34 (dd, 1H), 6,46 (d, 1H), 6,50 (d, 1H), 7,06 (t, 1H), 7,25 (dt, 1H), 7,50 (d, 1H), 7,64 (dt, 1H), 7,86 (d, 1H), 7,94 (d, 1H), 10,76 (s, 1H); MS (ES): 493,1 (M-1).

Пример 13

N-(5-Хлор-6-(3-(4-метилпиперазин-1-ил)фенокси)пиридин-3-ил)-4-метоксибензолсульфонамид (Соединение 13)

Названное соединение получили реакцией 5-хлор-6-(3-(4-метилпиперазин-1-ил)фенокси)пиридин-3-амина (полученного согласно способу, описанному в приготовлении 3) и 4-метоксибензол-1-сульфонилхлорида.

¹ Н NMR (DMSO-d₆) : 3,22 (t, 4Н), 3,33 (s, 4H), 3,69 (s, 3H), 3,78 (s, 3H), 6,34 (dd, 1H), 6,46 (s, 1H), 6,51 (d, 1H), 7,05-7,12 (m, 3H), 7,45 (d, 1H), 7,64 (d, 2H), 7,88 (d, 1H), 10,26 (s, 1H); MS (ES): 489,1 (M+1).

Пример 14

4-(6-(4-(4-Ацетилпиперазин-1-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-иламино)-4-оксобутановая кислота (Соединение 14)

Названное соединение получили реакцией 1-(4-(4-(5-амино-3-хлорпиридин-2-илокси)фенил)пиперазин-1-ил)этанона (полученного согласно способу, описанному в приготовлении 2) и дигидрофуран-2,5-диона в толуоле при температуре кипения. Реакционную смесь концентрировали и неочищенный продукт очистили колоночной хроматографией (силикагель).

¹Н NMR (DMSO-d₆) : 2,02 (s, 3H), 2,48 (t, 4H), 3,04 (d, 4H), 3,56 (s, 4H), 6,97 (s, 4H), 8,10 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 10,26 (s, 1H), 12,17 (s, 1H); MS (ES): 447,1 (M+1).

Пример 15

N-(6-(2-(Бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2,4-дихлорбензолсульфонамид (Соединение 15)

Названное соединение получили реакцией 6-(2-(бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-амина (полученного согласно способу, описанному в приготовлении 4) и 2,4-дихлорбензол-1-сульфонилхлорида.

¹ Н NMR (DMSO-d₆) : 7,26 (d, 1H), 7,39-7,46 (m, 2H), 7,49-7,54 (m, 3H), 7,68 (d, 2H), 7,76 (d, 1H), 7,80 (d, 1H), 7,95-7,98 (m, 2H), 8,06 (d, 1H), 8,39 (dd, 1H); MS (ES): 561,85 (M+1).

Пример 16

N-(6-(2-(Бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-4-метоксибензолсульфонамид (Соединение 16)

Названное соединение получили реакцией 6-(2-(бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-амина (полученного согласно способу, описанному в приготовлении 4) и 4-метоксибензол-1-сульфонилхлорида.

¹ Н NMR (DMSO-d₆) : 3,73 (s, 3H), 6,95 (d, 2H), 7,23 (d, 1H), 7,39-7,45 (m, 2H), 7,49-7,62 (m, 5H), 7,73 (d, 1H), 8,00 (d, 1H), 8,08 (d, 1H), 8,40 (d, 1H); MS (ES): 522,05 (M-1).

Пример 17

N-(6-(2-(Бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-3,4-дихлор-бензолсульфонамид (Соединение 17)

Названное соединение получили реакцией 6-(2-(бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-амина (полученного согласно способу, описанному в приготовлении 4) и 3,4-дихлорбензол-1-сульфонилхлорида.

¹ Н NMR (DMSO-d₆) : 7,28 (d, 1H), 7,40-7,60 (m, 6H), 7,67 (d, 1H), 7,82 (m, 2H), 7,96 (m, 1H), 8,05 (m, 1H), 8,36 (dd, 1H), 10,65 (s, 1H); MS (ES): 561,90 (M+1).

Пример 18

N-(6-(2-(Бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-ил)-2-хлор-4-(трифторметил)бензолсульфонамид (Соединение 18)

Названное соединение получили реакцией 6-(2-(бензо[d]тиазол-2-ил)фенокси)-5-хлорпиридин-3-амина (полученного согласно способу, описанному в приготовлении 4) и 2-хлор-4-(трифторметил)бензол-1-сульфонилхлорида.

¹Н NMR (DMSO-d₆) : 5,74 (s, 1H), 7,28 (d, 1H), 7,38-7,57 (m, 4H), 7,70 (s, 1H), 7,83 (d, 2H), 7,98 (d, 1H), 8,06 (d, 1H), 8,18 (d, 1H), 8,38 (d, 1H), 11,15 (s, 1H); MS (ES): 593,93 (M-1).

Фармакология

Пример 19

In vitro модель, проявляющая устойчивость к действию инсулина

Исследование задумывалось как в ссылке, British Journal of Pharmacology, 130, 351-58, 2000, описание которой включено ссылкой для изучения исследования.

Раствор соединения исследования (10 мкМ/мл) приготовили в DMSO.

Розиглитазон (0,1 мкМ в DMSO) применяли как стандарт.

Дифференциацию в адипоциты вызвали известными способами, как описано ниже (J. Biol. Chem., 260, 2646-2652, 1985), описание которых включено ссылкой для изучения дифференциации адипоцитов.

Для дифференциации использовали культуральную среду, содержащую 0,5 нМ 1-метил-3-изобутилксантина (IBMX), 0,25 мкМ дексаметазона, 5 мкг/мл инсулина (бычьего/человеческого), 10 мМ буфера HEPES (N-2-гидроксиэтилпиперазин-N-2-этансульфоновая кислота) и эмбриональную бычью сыворотку (FBS) 10% по объему в модифицированной по способу Дульбекко среде Игла (DMEM).

3Т3 L1 фибробласты посеяли в 24- или 6-луночных планшетах при плотности 0,5-2×10 ⁴ клеток/лунка и разрешили достичь максимальной конфлюентности.

Конфлюентные фибробласты подвергали культуральной среде на протяжении 2 дней. После этого периода применяли свежую культуральную среду (DMEM), содержащую только инсулин, добавили 10% FBS и культивировали на протяжении 4 дней с заменой среды каждые 2 дня. Через 7 дней культуры получили DMEM, содержащий 10% FBS без воздействия инсулина. К концу 8-10 дней больше чем 95% клеток стали дифференцироваными в адипоциты.

Зрелые адипоциты подвергли дексаметазону, 100 нМ, добавленному в этанол, в культуральной среде и инкубировали на протяжении 2 дней. На третий день раствор исследуемого соединения добавляли вместе с 100 нМ средой, содержащей дексаметазон, на протяжении 4 дней с заменой среды после каждых 2 дней. Контрольный носитель содержал 1% объем/объем DMSO (диметилсульфоксид). Розиглитазон применяли как стандарт и добавляли при концентрации 0,1 мкМ в DMSO, вместе с 100 нМ средой, содержащей дексаметазон, на протяжении 4 дней с заменой среды после каждых 2 дней. После всего периода 6 дней, клетки обработали для поглощения глюкозы следующим образом.

Устойчивые к инсулину адипоциты подвергали бессывороточному DMEM, содержащему 0,1% альбумина бычьей сыворотки, на протяжении 3-4 часов при 37°С в атмосфере СО₂. Исследуемое соединение также присутствовало на протяжении данного периода. Через 3-4 часа среду аспирировали и заменили на фосфатный буфер Кребса-Рингера (KRP) при рН 7,4 и на инсулин человека/свиньи, 200 нМ. Клетки инкубировали на протяжении 30 минут при 37°С. По истечении 30 минут 0,05 или 0,1 µCi ¹⁴С-2-деоксиглюкозы добавили в каждую лунку или 24- или 6-луночных планшетов соответственно и инкубировали точно 5 минут. Через точно 5 минут планшеты переместили в ледоформы и среду быстро аспирировали. Слой клетки промыли дважды ледяным фосфатно-буферным солевым раствором, (PBS), рН 7.4. В итоге слой клетки лизировали 150 мкл 0,1% додецилсульфатом натрия (SDS) и радиоактивность клеточного лизата исследовали в жидкостном сцинтилляционном счетчике. Неспецифическое поглощение глюкозы исследовали в лунках, подвергнутых действию цитохалазина В, ингибитора транспорта глюкозы. Соединения, которые показали статистически значимое увеличение в транспорте глюкозы/поглощении, что выражалось как СРМ/лунка выше уровня в клетках, подвергающихся действию носителя с инсулином, рассматривались как активные в данном исследовании. Граничный предел для активности в данном ИК (инфракрасном) исследовании определяли как увеличение в 1,50 раз носителя, значение исследования 1,0 для носителя. Активность также выражалась как % розиглитазона, который применяли как стандарт для сравнения. Статистические анализы выполнили, применяя непарный критерий Стьюдента.

Результаты подытожили в таблице 1.

Таблица 1
Активность соединений в модели, устойчивой к действию инсулина
№	№ соединения	Разы носителя*	% розиглитазона**
Стандарт	Розиглитазон	2,6±0,10	100
01	1	2,10±0,05	61,4
02	4	1,55±0,03	41,33
03	5	1,85±0,04	63,94
04	6	1,93±0,06	69,76
05	14	1,49±0,05	27,5
06	15	2,0±0,13	36,7
* кратность повышения активности, по сравнению носителем
** по сравнению с розиглитазоном

Заключение: характерные соединения по данному изобретению показывают активность, чувствительную к инсулину, в увеличенном поглощении глюкозы в модели, устойчивой к действию инсулина.

Пример 20

(а) Исследование трансактивации PPAR человека

Исследование проводили как в ссылке, Biochem. Biophys. Res. Comm. 175:865-871, 1991, описание которой включено ссылкой для изучения анализа.

Активность PPAR человека оценивали при помощи трансактивации, применяя репортерный ген люциферазы. Репортерная плазмида pBL-TK-люциферазы АОХ-3Х PPRE-TK-LUC содержит три копии ацил СоА оксидазы PPRE (пероксисом пролифератор-реагирующие элементы) крысы, клонированный в обратном направлении промотера тимидинкиназы (ТК) минимального вируса простого герпеса. Всю длину человеческого PPAR cDNA клонировали в pSG5 вектор экспрессии (Stratagene, Lo Jolla, CA).

HEK293 клетки посеяли в 24-луночные планшеты и вырастили в DMEM, дополненной 10% (объем/объем) FCS. Через 24 часа их трансфектировали с 100 нг рецептора hPPAR и 300 нг АОХ-3Х PPRE-LUC репортерного конструктора на лунку, применяя трансфекционный реагент Fugen 6 (Roche, Indianapolis, IN). Исследуемые соединения или розиглитазон (растворенный в DMSO) добавили через 24 часа после трансфекции. Контролем являлся 0,1% DMSO. Через 48 часов активность трансактивации исследовали при помощи исследования люциферазы, применяя реагент Steady Glow (Promega, Madison, WI). Результаты подытожили в таблице 2.

Таблица 2
Активность соединения 1 в исследовании трансактивации PPAR человека
№ соединения	Активность PPAR (% розиглитазона)
Розиглитазон	100
1	6,4

(b) Исследование PPAR мыши

Исследование проводили, как в ссылке. Blood, 104(5), 1361-8, 2004, описание которой включено ссылкой для изучения анализа.

3T3-L1 фибробласты посеяли в 6-луночных планшетах при плотности 4×10 клеток/лунка и культивировали в DMEM, содержащем 10% сыворотку теленка. Через 4-5 дней, когда клетки стали конфлюентными, соединение 1 добавили (из 20 мМ исходного раствора в DMSO) до заключительной концентрации 50 мкМ в DMEM, дополненном 10% FCS. Розиглитазон добавили (из 10 мМ исходного раствора) до заключительной концентрации 10 мкМ. Планшеты инкубировали на протяжении 72 часов при 37°С в CO₂ инкубаторе со свежей средой, содержащей исследуемые вещества, добавленные после первых 48 часов. После 72 часов, среду удалили; клеточный слой промыли и обработали для исследования PPAR согласно инструкции изготовителя (Active Motif, North America, California, USA). Активацию PPAR исследовали, применяя 96-луночное исследование ELISA согласно руководству (TransAM PPAR . Active Motif, Cat. 40196). Считывание исследования являлось продуктом абсорбции из спектрофотометра для исследования PPAR мыши. Вывод данных люминесценции записали для исследования PPAR человека.

Активность соединения выражали как относительную активность по сравнению с розиглитазоном, референтное соединение применяли как положительный контроль. Результаты подытожили в таблице 3.

Таблица 3
Активность соединения 1 в исследовании PPAR мыши
№ соединения	Активность PPAR (% розиглитазона)
Розиглитазон	100
1	5,1

Заключение: В исследованиях селективности PPAR для человека и мыши, соединения по данному изобретению не проявляло никакой активации PPAR .

Биологические эксперименты in vivo

Примечание: все экспериментальные процедуры над животными были одобрены комиссией по этическим нормам поведения с животными.

Соединения, которые были обнаружены активными при in vitro анализе [пример 19] подвергли in vivo оценке в животных моделях, устойчивых к действию инсулина.

Пример 21

Скрининг у мышей db/db BL/6J

Протокол разработали как в ссылках.

1. Metabolism, 53(12), 1532-1537, 2004.

2. American Journal of Hypertension, 17(5), Supplement 1, S32, 2004.

Описания этих двух ссылок включены ссылкой для изучения протокола.

Скрининг соединений основывался на их способности снижения уровней глюкозы в плазме у мышей db/db BL/6J с генетическим диабетом.

Самцов мышей db/db (полученных от Animal House of Nicholas Piramal Research Centre, Goregaon, Mumbai, India) использовали для изучения (вес тела в диапазоне 30-40 г и возраст 6-8 недель) и держали по восемь в клетке в отдельно вентилированных клетках при регулируемой температуре (22±1°С) и влажности (45±5%). Пища и вода были обеспечены ad libitum на протяжении их пребывания в лаборатории, за исключением четырех часов голодания перед собиранием образца крови. На протяжении всего периода изучения проходил 12 часовой цикл света и темноты.

Через 4 часа голодания от мышей собрали образцы крови. Мышей, показывающих уровни глюкозы в плазме от 300 до 500 мг/дл, разделили на группы (8-10 на группу), так что средние уровни глюкозы в плазме и изменения в группе для каждой группы были практически одинаковы. После группировки мыши в соответствующих группах получили обработку 0,5% носителем CMC (карбоксиметилцеллюлоза натрия), стандартным соединением или исследуемыми соединениями на протяжении 10 дней. Розиглитазон применяли как стандарт.

Через 4 часа голодания мышей анестезировали, применяя изофлуран (ингаляционный анестетик), и образцы крови собрали через ретроорбитальное сплетение. Собранные образцы крови центрифугировали при 7000 оборотов в минуту на протяжении 10 минут при 4°С; отделенную плазму применяли для оценки глюкозы в плазме, применяя диагностические наборы (Diasys, Germany). Уровни глюкозы в плазме обработанных групп нормализировали с контрольной группой, применяя следующую формулу, которая рассчитана для изменений в контрольной группе.

Формула, применяемая для нормализации:

*: {1 - (соотношение средних уровней глюкозы в плазме контрольной группы на 10 день до 0 дня) / (соотношение уровней глюкозы в плазме обработанной группы на 10 день до 0 дня)}×100.

Результаты подытожены в таблице 4.

Таблица 4
Снижение уровней глюкозы в плазме у генетически диабетических db/db BL/6J мышей
№	Исследуемые соединения у db/db мышей	Розиглитазон, исследуемый у db/db мышей
	№ соединения	Доза (10 дней)	Нормализация с контролем*	Доза (10 дней)	Нормализация с контролем *
01	1	100 мг/кг, 2 раза в день	46,07±4,55	5 мг/кг, 2 раза в день	55,73±4,46
02	14	100 мг/кг, 2 раза в день	Неактивно	5 мг/кг, 2 раза в день	53,34±4,11

Формула, применяемая для нормализации:

*: {1 - (соотношение средних уровней глюкозы в плазме контрольной группы на 10 день до 0 дня) / (соотношение уровней глюкозы в плазме обработанной группы на 10 день до 0 дня)}×100

Заключение: характерное соединение данного изобретения показало значительное снижение активности глюкозы в животной модели диабетиков.

Пример 22

Оценка противоожирения

Исследование проводили как в ссылке публикации международной заявки WO 2003086306, описание которой включено ссылкой для изучения исследования.

(a) Изучение острого состояния

Самцов мышей C57B 16/J, весом 20-25 г, поместили отдельно в виварий. Вода и пища (Amrut Laboratory Animal feed, Sangli, Maharashtra, India) были доступны ad libitum. За один день перед изучением животных взвесили и разделили на группы лечения, имеющие похожий средний вес тела. Для эксперимента животных лишили пищи на всю ночь на протяжении 16 часов. Им ввели лекарство дозой внутрибрюшинно с исследуемыми соединениями (100 мг/кг) или компаратор-стандарт (Сибутрамин, 3 мг/кг) в соляном носителе (10 мл/кг). Через полчаса после введения лекарственного средства животным дали предварительно взвешенное количество пищи из кормушки. Пищу, что осталась в кормушке, измеряли в различных точках времени. Оценивали эффект стандарта и исследуемых соединений на прием пищи у голодных худых мышей C57B 16/J при 2, 4, 6 и 24 часовых промежутках после введений пищи. Результаты указаны на фигуре 1.

Заключение: соединение 1 и Соединение 11 эффективны при ингибировании приема пищи мышей C57B 16/J на протяжении 2 часов после введения пищи (*** р<0,001 против контролей, обработанных носителем).

(b) Изучение хронического состояния

Исследование проводили как в ссылке, British Journal of Pharmacology, 132, 1898-1904, 2001, описание которой включено ссылкой для изучения исследования.

Самцов мышей C57B 16/J (возраст 3-4 недели) помещали в группах по 10 животных на клетку в виварий. Рацион с высоким содержанием жира (D12451 Research Diets Inc., New Brunswick, NJ 08901, USA, 45% ккал из жира) и воды обеспечивали ad libitum на протяжении 14 недель. После этого периода животных поместили отдельно в клетки. Животных взвесили и разделили на группы со сходным весом тела. Их акклиматизировали к экспериментальным методикам на протяжении 2 дней. Животным давали дозу лекарства внутрибрюшинно с исследуемым соединением (200 мг/кг) или стандартом (Сибутрамин, 3 мг/кг) в 10 мл/кг 0,5% CMC носителем от 10:00 ч до 12:00 ч. После введения лекарственного средства животным дали предварительно взвешенное количество пищи из кормушки. Вес порции, оставшейся в кормушке, и вес тела записывали ежедневно непосредственно перед дозированием. Подсчитывали изменение в весе и совокупный прием пищи. Результаты отображены на фигуре 2 и фигуре 3.

Заключения: 1. Соединение 1 являлось эффективным при снижении совокупного приема пищи у мышей с диетиндуцированным ожирением (DIO) на протяжении 10 дней лечения (***р<0,001, **р<0,01, *р<0,05 против контролей, обработанных носителем).

2. Соединение 1 являлось эффективным при снижении совокупной прибавки в весе у мышей с диетиндуцированным ожирением (DIO) на протяжении 10 дней лечения (***р<0,001, **р<0,01, *р<0,05 против контролей, обработанных носителем).

Следует отметить, что, как используется в данном описании и приложенной формуле изобретения, формы единственного числа также включают множественное число, кроме тех случаев, когда содержание четко диктует иначе. Таким образом, например, ссылка на композицию, содержащую "соединение" включает смесь двух или более соединений. Также нужно отметить, что выражение "или" главным образом применяется в данном смысле, включая "и/или", кроме тех случаев, когда содержание четко диктует иначе.

Все публикации и патентные заявки в данном описании являются указывающими на уровень специалиста данной области, к которому относится данное изобретение.

Изобретение было описано со ссылкой на различные специфические и предпочтительные варианты осуществления и технологии. Тем не менее должно быть понятно, что может быть сделано множество вариантов и модификаций, которые остаются в пределах сущности и объема изобретения.