способ получения препарата фортелизин, обладающего фибринолитическими свойствами, и его применение для лечения инфаркта миокарда

Формула изобретения

1. Способ получения препарата Фортелизин, обладающего фибринолитическими свойствами, включающий размораживание супернатанта, содержащего рекомбинантный белок с аминокислотной последовательностью стафилокиназы (РБСФ), полученный при культивировании штамма Escherichia coli MZ09, регистрационный номер В-10417 ВКПМ, выделение и хроматографическую очистку РБСФ на СМ-сефарозе с последующей хроматографической очисткой на DEAE-сефарозе, перевод в 0,3%-ный раствор NaCl, стерилизацию, фасовку, лиофильную сушку субстанции, введение стерилизованной лиофильной субстанции в реактор с мешалкой в соотношении 30 л воды для инъекций к 150 г субстанции, вводя сначала 2/3 воды, затем субстанцию, затем 1/3 воды, проведение стерилизующей фильтрации полученного раствора, наполнение и предварительную укупорку флаконов, проведение лиофильной сушки препарата и окончательной укупорки флаконов.

2. Применение препарата Фортелизин для лечения инфаркта миокарда путем введения внутривенно в дозе 15 мг (2235000 ME), при этом содержимое флакона 5 мг (745000 ME) перед введением препарата разводят в 5 мл 0,9%-ного раствора натрия хлорида.

3. Применение препарата Фортелизин для лечения инфаркта миокарда путем введения двумя болюсами - 10 мг (1490000 ME) одномоментно и через 30 мин - оставшиеся 5 мг (745000 ME) или путем введения 10 мг (1490000 ME) болюсно и оставшихся 5 мг (745000 ME) внутривенно инфузионно в 50 мл 0,9%-ного раствора натрия хлорида в течение 30 мин.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области биотехнологии, микробиологии и фармацевтической промышленности. Конкретно, изобретение относится к лекарственному препарату Фортелизин, обладающему фибринолитическими свойствами и получаемому из субстанции Фортеплазе, содержащей рекомбинантный белок с аминокислотной последовательностью стафилокиназы.

Сырьем для получения субстанции Фортеплазе является супернатант рекомбинантного белка с аминокислотной последовательностью стафилокиназы (РБСФ), полученный при культивировании штамма Escherichia coli MZ09, регистрационный номер В-10417 ВКПМ. Супернатант получают центрифугированием культуральной жидкости, затем его хранят в замороженном состоянии.

Рекомбинантный белок, содержащий аминокислотную последовательность стафилокиназы, состоит из 138 аминокислот (последовательность белка представлена SEQ ID NO:1). Эмпирическая формула - C₇₁₁H₁₃₇₂N₁₆₈ O₃₅₀S₁. Молекулярная масса 15,5 кДа.

Стафилокиназа, не являясь ферментом, активирует плазминоген с образованием стехиометрического комплекса в соотношении 1:1. При этом фортелизин реагирует только с плазминогеном, связанным с частично деградированным фибрином, находящимся в области тромба (т.н. -плазминоген), и не взаимодействует с плазминогеном в системном кровотоке, что обусловливает его фибринселективность. Образовавшийся комплекс фортелизин-плазминоген осуществляет превращение плазминогена в плазмин, который лизирует (растворяет) фибриновые сгустки в тромбе.

Фибринселективность препарата обусловлена также и высокой скоростью нейтрализации его комплекса с плазмином в плазме крови по сравнению с тромбом. В связи с этим, фибринолитический эффект препарата не сопровождается снижением фибриногена крови.

При применении препарата Фортелизин не образуются нейтрализующие антистафилокиназные антитела в связи с проведенными заменами аминокислот в иммунодоминантном эпитопе нативной стафилокиназы. В редких случаях может наблюдаться транзиторное образование антител к препарату Фортелизин (в низких титрах).

Лекарственный препарат Фортелизин представляет собой лиофилизированный порошок для приготовления стерильного раствора для внутривенного введения, 5 мг (750000 ME), показаниями к применению препарата служит острый инфаркт миокарда (в первые 6 часов от момента развития) в качестве фибринолитического средства у больных с инфарктом миокарда с подъемом сегмента ST согласно действующим Российским рекомендациям.

Отличить его можно по следующим признакам:

1. Образует зоны лизиса в фибриновом геле вследствие активации плазминогена.

2. При электрофорезе в полиакриламидном геле на электрофореграмме присутствует одна окрашенная полоса рекомбинантного белка с аминокислотной последовательностью стафилокиназы, соответствующей молекулярной массе 15,5 кДа.

3. Легко растворим в 0,9% растворе натрия хлорида. Время растворения содержимого 1 флакона (10 мг) менее 60 сек.

4. Значение рН для восстановленного раствора должно быть от 5,5 до 7.5.

5. Содержание воды не более 10%.

Получение субстанции Фортеплазе

Воду очищенную приготавливают на установке обратного осмоса AquaHard RQ 2500 (или аналогичной) и проводят деконтаминацию воды УФ-облучением.

Используемую посуду тщательно моют. Стеклянную бактериологическую посуду закрывают фольгой или пергаментной бумагой и стерилизуют сухим жаром в сушильно-стерилизационном шкафу при температуре 170-180°С в течение 2-2,5 часов.

Буферные растворы готовят в пластиковых емкостях с мешалкой следующим образом.

Приготовление уравновешивающего буферного раствора 0,02 М аммоний ацетата, рН 6,0 (УБ-1)

На весах отвешивают 0,0385±0,001 кг аммония ацетата. В промытую пластиковую тарированную емкость заливают 25 литров воды очищенной и при постоянном перемешивании засыпают навеску аммония ацетата. Перемешивают до полного растворения навески. Берут пробу и определяют рН. Требуемое значение рН 6,0±0,002. Добавлением уксусной кислоты доводят величину рН до требуемого значения. Очищенной водой доводят объем до 30 литров, и еще раз тщательно перемешав буферный раствор, контролируют величину рН.

Приготовление элюирующего буферного раствора 0,02 М аммоний ацетата, 0,4 М натрия хлористого, рН 6,0 (ЭБ-1)

На весах отвешивают 0,0385±0,001 кг аммония ацетата и 0,7±0,001 кг натрия хлористого.

В промытую пластиковую тарированную емкость заливают 25 литров воды очищенной и при постоянном перемешивании засыпают навеску аммония ацетата и натрия хлористого. Перемешивают до полного растворения навесок. Берут пробу и определяют рН. Требуемое значение рН 6,0±0,2. Добавлением уксусной кислоты доводят величину рН до требуемого значения. Очищенной водой доводят объем до 30 литров, и еще раз тщательно перемешав раствор, контролируют величину рН.

Приготовление уравновешивающего буферного раствора 0,01 М Трис, 0,0002 М ЭДТА, рН 8,0 (УБ-2)

На аналитических весах отвешивают 0,0605=0,0001 кг Трис и 0,00029±0,00001 кг двунатриевой соли этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА).

В промытую пластиковую тарированную емкость заливают 48 литров воды очищенной и при постоянном перемешивании засыпают навеску Трис и ЭДТА. Перемешивают до полного растворения навесок. Берут пробу и определяют рН. Требуемое значение рН 8,0±0,2. Добавлением уксусной кислоты доводят величину рН до требуемого значения. Очищенной водой доводят объем до 50 литров, и еще раз тщательно перемешав раствор, контролируют величину рН.

Приготовление элюирующего буферного раствора 0,01 М Трис, 0,0002 М ЭДТА, 1 М натрий хлористый, рН 8,0 (ЭБ-2)

На аналитических весах отвешивают 0,0605±0,0001 кг Трис и 0,00029±0,00001 кг двунатриевой соли этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА). На технических весах отвешивают 2,925±0,001 кг натрия хлористого.

В промытую пластиковую тарированную емкость заливают 48 литров воды очищенной и при постоянном перемешивании засыпают навески Трис, натрия хлористого и ЭДТА. Перемешивают до полного растворения навесок. Берут пробу и определяют рН. Требуемое значение рН 8,0±0,2. Добавлением уксусной кислоты доводят величину рН до требуемого значения. Очищенной водой доводят объем до 50 литров, и еще раз тщательно перемешав раствор, контролируют величину рН.

Замороженный супернатант РБСФ не менее чем за 12 часов до начала хроматографической очистки на СМ-сефарозе извлекают из морозильника и оставляют в хранилище при комнатной температуре для размораживания. Затем проводят хроматографическую очистку и выделение РБСФ из супернатанта.

Все технологические операции по очистке РБСФ с использованием колонок выполняют на хроматографическом препаративном комплексе «Axioma» низкого давления (или аналогичном).

Хроматографическую очистку РБСФ осуществляют последовательно в 2 этапа - хроматографическая очистка на СМ-сефарозе и хроматографическая очистка на DEAE-сефарозе,

Хроматографическая очистка на СМ-сефарозе

Для проведения работы используют препаративную стеклянную колонку «Axioma» ПСК-146-500 (или аналогичную), в которую загружают 5 л сорбента СМ-сефарозы.

В реактор объемом 60 л со сливным краном, расположенным снизу, загружают 5 л сорбента, заливают его десятикратным объемом очищенной воды и перемешивают (5±1) мин. Через (30±5) мин после остановки мешалки жидкость над осадком декантируют перистальтическим насосом. Операцию повторяют 2 раза.

В реактор с промытым сорбентом заливают 45 л очищенной воды, добавляют 5 л раствора УБ-1. Суспензию сорбента в УБ-1 при постоянном перемешивании подают через перистальтический насос на колонку. Заполнение колонки проводят в соответствии с инструкцией «Подготовка колонки с СМ-сефарозой к работе».

Хроматографическая очистка

Для хроматографической очистки используют препаративный хроматографический комплекс «Axioma». Принцип работы комплекса изложен в инструкции по эксплуатации прибора.

При помощи гибких шлангов формируют линию подачи растворов на колонку через хроматографический модуль.

При этом:

- шланг от клапана коллектора фракций «F1» опускают в воронку самотечной производственной канализации;

- для сбора материала используют клапаны коллектора фракций, соединив их шлангом с емкостями для сбора фракций;

- подсоединяют к клапанам ввода хроматографа три шланга, два из них на линейке клапанов А, один на линейке В. Клапаны распределительного коллектора соединяют шлангами с емкостями с буферами. Клапан для подачи раствора супернатанта РБСФ соединяют шлангом с емкостью с супернатантом РБСФ. Выход из хроматографического модуля соединительным шлангом подсоединяют к верхнему адаптеру колонки, а нижний адаптер колонки соединяется с клапаном на линейке В.

Запускают программу. В начале процесса клапаны должны быть открыты так, чтобы на колонку подавался уравновешивающий буфер УБ-1 по шлангу. Включают насос со скоростью подачи жидкости (0,9±0,1) л/мин. После уравновешивания колонки (35±5) л буфера на нее подают 20 л супернатанта РБСФ, переключая соответствующий клапан хроматографа.

Далее колонку с сорбентом промывают буферным раствором до падения оптической плотности при 280 нм до (0,2±0,05) оптических единиц (ОЕ).

Устанавливают автоматический режим управления процессом, выбрав в меню кнопку «AUTO». В открывшемся окне набирают номер цикла (протокола). Выставляют необходимые пределы измерения, программируют заданный градиент. Сорбированный материал снимают градиентом натрия хлористого (от 0 до 0,4 М) в том же буфере ЭБ-1, подающимся через клапан из реактора со скоростью 0,4 л/мин. Сбор фракций происходит автоматически.

Из каждой фракции (емкости) отбирают пробы и проводят контроль методом ПААГ-электрофореза с додецилсульфатом натрия.

Фракции, содержащие по результатам электрофореза РБСФ, объединяют, отбирают (2,5±0,01) мл пробы в пробирку и проводят спектрофотометрический контроль.

Показатели раствора РБСФ должны удовлетворять следующим требованиям:

- оптическая плотность при длине волны =280 нм (l=1 см) - не менее 1,0 оптической единицы;

- отношение OD₂₈₀/OD₂₅₄ - не менее 2,0.

Фракции объединяют и емкость с раствором передают на дальнейшую переработку.

Регенерация СМ-сефарозы

После каждого цикла очистки проводят регенерацию колонки с использованием 0,1 М гидроокиси натрия.

Один из распределительных клапанов хроматографического модуля подсоединяют к емкости со щелочью. Пропускают через колонну 15 л раствора щелочи, затем проводят отмывку очищенной водой до достижения значений рН (7,5±0,5) единиц.

Хроматографическая очистка РБСФ на DEAE-сефарозе

Подготовка сорбента

В тарированную емкость загружают 3 л сорбента, заливают его десятикратным объемом очищенной воды и перемешивают (5±1) мин. Через (30±5) мин жидкость над осадком декантируют перистальтическим насосом. Операцию повторяют 2 раза.

В емкость с промытым сорбентом заливают 10 л очищенной воды, добавляют 5 л раствора УБ-2. Суспензию сорбента в УБ-2 при постоянном перемешивании подают через перистальтический насос на колонку ПСК-100-500. Заполнение колонки проводят в соответствии с инструкцией.

Хроматографическая очистка

При помощи гибких шлангов соединяют верхний и нижний адаптеры колонки соответственно с входным и выходным клапанами хроматографического комплекса в соответствии с инструкцией по работе.

Запускают программу по ручному управлению работой хроматографа. В начале процесса клапаны должны быть открыты так, чтобы на колонку подавался уравновешивающий буфер (УБ-2). Включают насос и со скоростью подачи 0,4±0,005 л/мин начинают подачу УБ-2 на колонку. После уравновешивания колонки пропусканием через нее 6±1 л буфера УБ-2 переключают клапан и на колонку с DEAE-сефарозой подают раствор РБСФ.

Далее колонку с DEAE-сефарозой промывают буферным раствором (УБ-2) до падения оптической плотности при 280 нм до (0,2±0,05) оптических единиц.

Отработанные буферные растворы после выхода из хроматографического комплекса направляют в контейнер для отходов.

Затем переключают хроматографический комплекс на автоматический режим управления процессом. В открывшемся окне набирают номер протокола. Выставляют необходимые пределы измерения оптической плотности, рН и проводимости. Программируют градиент и время работы хроматографического комплекса.

Сорбированный на колонке РБСФ элюируют градиентом натрия хлористого (от 0 до 1 М) в том же буфере (УБ-2), подающемся на колонку со скоростью 0,2 л/мин. Сбор фракций происходит в автоматическом режиме. Согласно заданной программе происходит переключение клапанов коллектора.

Из каждой фракции (емкости) отбирают пробы и передают в производственную лабораторию для контроля чистоты РБСФ во фракциях методом электрофореза в ПААГ с додецилсульфатом натрия.

Фракции, пригодные для дальнейшей работы, должны содержать по результатам электрофореза чистый РБСФ (наличие одной окрашенной полосы белка, соответствующей молекулярной массе 15,5 кДа).

Содержание белка (Сб) рассчитывают по формуле:

(мг/мл),

где OD₂₈₀ - оптическая плотность анализируемого образца при длине волны 280 нм;

1,1 - коэффициент поглощения (соответствует оптической плотности раствора с концентрацией белка 1 мг в 1 мл при толщине слоя, равной 1 см, при длине волны 280 нм, мл (мг × см);

n - разбавление фракции раствора РБСФ в кювете;

В - толщина слоя, см (= для кюветы с толщиной оптического слоя 1 см).

Фракции чистого РБСФ с концентрацией не менее (0,5±0,01) мг/мл объединяют, перемешивают, отбирают (2,0±0,1) мл объединенной фракции и передают в контрольную лабораторию.

Показатели объединенной фракции должны удовлетворять следующим характеристикам:

- OD ₂₈₀ (l=1 см) - не менее 3 оптических единиц;

- отсутствие посторонних примесей по результатам ПААГ электрофореза.

Регенерация колонки

Цикл очистки DEAE-сефарозы проводят после 10 рабочих разделений. Сорбент в колонке промывают 6 л раствора 0,1 М гидроокиси натрия.

Пропускают через колонку 6 л раствора щелочи, затем проводят отмывку водой очищенной до достижения значений рН 7,5±0,5.

Переключают клапан и начинают подачу на колонку уравновешивающего буфера УБ-2. После того как величина рН раствора на выходе из колонки сравняется с рН УБ-2 и достигнет значения рН 8,0±0,2, процесс уравновешивания прекращают, колонка готова к работе.

Перевод РБСФ в 0,3% раствор NaCl на колонке с сефадексом G-25

Подготовка колонки с сефадексом G-25

Для проведения работы используют препаративную стеклянную колонку «Axioma» ПСК-146-700 (или аналогичную). Размеры колонки: диаметр 200 мм, высота 500 мм.

В тарированную емкость загружают 2 кг сорбента, заливают его 50 л очищенной воды и перемешивают вручную (5±1) мин. Оставляют на ночь для набухания сорбента.

Утром декантируют воду и заливают набухший сорбент 15 л 0,3% натрия хлористого.

Суспензию сефадекс G-25 в 0,3% растворе натрия хлористого при постоянном перемешивании подают через перистальтический насос на колонку. Заполнение колонки проводят в соответствии с инструкцией «Подготовка колонки с сефадексом G-25 к работе».

Перевод РБСФ в 0,3% натрий хлористый

Для перевода РБСФ в 0,3% натрий хлористый используют метод фильтрации через колонку с сефадексом G-25, уравновешенным 0,3% натрием хлористым.

При помощи гибких шлангов соединяют верхний и нижний адаптеры колонки с сефадексом G-25 соответственно с входным и выходным клапанами хроматографического комплекса в соответствии с инструкцией по работе.

Запускают программу по ручному управлению работой хроматографического комплекса. В начале процесса клапаны должны быть открыты так, чтобы на колонку подавался 0,3% раствор хлористого натрия. Включают насос со скоростью подачи 0,3% хлористого натрия 0,1±0,005 л/мин. После уравновешивания колонки пропусканием через нее 10±1 л 0,3% раствора хлористого натрия на колонку с сефадексом G-25 подают раствор РБСФ.

После нанесения всего РБСФ переключают клапан и начинают подачу на колонку 0,3% натрия хлористого. Начинают собирать фракции, когда поглощение при 280 нм на выходе из колонки будет выше 0,5 OE, и перестают собирать, когда поглощение при 280 нм на выходе раствора из колонки упадет до 0,3 OE.

Из каждой фракции (емкости) отбирают пробы и передают в производственную лабораторию для контроля чистоты РБСФ методом электрофореза в ПААГ с додецилсульфатом натрия.

Фракции, содержащие по результатам электрофореза чистый белок РБСФ (одна полоса при 15,5 кДа), объединяют, отбирают (2,5±0,01) мл пробы в пробирку и проводят спектрофотометрический контроль.

Показатели раствора РБСФ должны удовлетворять следующим требованиям:

- оптическая плотность при длине волны =280 нм (l=1 см) - не менее 1,0 оптической единицы.

При положительном заключении контрольной лаборатории емкости с раствором очищенного РБСФ объединяют в одной емкости и передают на стерилизующую фильтрацию и лиофильную сушку.

Регенерация колонки

После каждого цикла колонку с сефадексом G-25 отмывают 0,3% раствором натрия хлористого до поглощения при 280 нм не более 0,05, и показатели датчика проводимости на входе и выходе из колонки должны быть равными. Колонка готова к работе.

Лиофильная сушка, фасовка и маркировка

Раствор РБСФ перемешивают и фильтруют через фильтр для стерильной фильтрации с размером пор 0,2 мкм в стерильную приемную емкость. Отбирают пробу для проверки стерильности и разливают в стерильные кюветы для сушки слоем высотой не более 1-1,5 см. Кюветы закрывают стерильной салфеткой, помещают в морозильник на минус 40°С и замораживают в течение 24 часов.

Кюветы извлекают из морозильника и быстро переносят в предварительно охлажденную лиофильную сушку для сушки в асептических условиях. Снимают салфетку и в соответствии с инструкцией по сушке в течение 40-48 часов получают лиофильно высушенную стерильную субстанцию Фортеплазе.

Кюветы накрывают стерильной салфеткой и переносят в стерильный бокс с ламинарным шкафом с вертикальным потоком.

В предварительно взвешенные стерильные банки стерильным шпателем переносят лиофильно высушенную субстанцию Фортеплазе, укупоривают и после этого взвешивают наполненные банки с точностью до 0,1 г. По разности между весом пустой и заполненной банки определяют вес сухой субстанции Фортеплазе в упаковке. Заполняют этикетку, на которой указано название субстанции, дата изготовления, номер серии, количество в граммах, условия хранения и срок годности. Передают упаковку на карантинное хранение.

При положительном заключении по качеству субстанции препарат поступает на склад.

Субстанцию Фортеплазе хранят в защищенном от света месте при температуре 2-25°С.

Срок хранения 3 года.

Краткая схема производственного процесса и внутрипроизводственного контроля получения субстанции Фортеплазе:

Проводят оценку пирогенности и аномальной токсичности с использованием следующих доз.

Тест-доза для проверки на пирогенность 0,133 мг субстанции в 0,5 мл 0,9% раствора натрия хлорида для инъекций на 1 кг массы тела кролика. Вещество апирогенно.

Тест-доза для проверки на токсичность 312 мкг Фортеплазе в 0,5 мл 0,9% раствора натрия хлорида для инъекций на мышь. Вещество не токсично.

Приготовление лекарственного препарата Фортелизин, обладающего фибринолитическими свойствами

Для получения лекарственного средства Фортелизин используют субстанцию Фортеплазе.

Получают воду для инъекций.

Вода для инъекций, полученная на данной технологической стадии, должна удовлетворять всем требованиям ФС 42-2620-97.

Вода для инъекций используется в производстве для ополаскивания деталей оборудования, приемных емкостей «Millipore» (или аналогичных), реакторов для приготовления инъекционного раствора, ополаскивания флаконов и приготовления раствора субстанции Фортеплазе.

Приготовление раствора субстанции Фортеплазе

В реактор с мешалкой, рабочим объемом 160 л, вносят 20 литров воды для инъекций, затем 150 г субстанции Фортеплазе и воду для инъекций в количестве 10 л. Включают мешалку реактора (скорость мешалки 80 об/мин). Перемешивание продолжают в течение 15 мин, после чего мешалку реактора выключают. Отбирают пробу, фиксируют рН полученного раствора. рН должен находиться в пределах от 5,5 до 7,5. После этого определяют содержание белка в растворе до стерилизующей фильтрации и проводят стерилизующую фильтрацию.

Раствор должен соответствовать пунктам ФСП.

рН раствора должна находиться в пределах от 5,5 до 7,5.

Раствор должен быть прозрачным, бесцветным.

Проводится контроль количественного содержания белка (от 4,5 до 5,5 мг/флакон).

Проводится контроль стерильности раствора путем высева на питательные среды (тиогликолевую и бульон Сабуро) в количестве 20,0 мл из каждой накопительной емкости.

Розлив полученного раствора субстанции Фортеплазе производят в стерильные флаконы по 1 мл. Наполненные флаконы поступают на этап предварительной укупорки. Отбирают раствор на контроль стерильности в начале, середине и конце розлива. Предварительно укупоренные флаконы помещают в лиофильную установку для замораживания до температуры минус 40°С и дальнейшей сушки. Время высушивания 36-40 часов. Высушивание проводят при температуре не выше 20°С. Проводят окончательное укупоривание прессом и вальцовку алюминиевыми колпачкам flip-off. Проводят контроль на механические включения в три этапа в соответствии с РД 42-501-98. Прошедшие контроль завальцованные флаконы передают на стадию маркировки и упаковки.

Перед началом этикетирования оператор загружает приемочный стол просмотренными флаконами с продуктом и этикетками. На этикетке указывается наименование препарата, срок годности, № серии, дозировка. Запускает автомат, а затем собирает флаконы с наклеенными этикетками. Каждый флакон упаковывается в полимерную контурную упаковку, вкладывает в нее 1 ампулу с раствором натрия хлорида 0,9% - 5 мл и укладывает в картонную пачку - вторичная упаковка. После упаковки и маркировки проводят выборку для проведения контроля готового продукта на соответствие требованиям ФСП и помещают готовую продукцию на склад карантинного хранения. При получении паспорта на серию продукцию перемещают на склад готовой продукции.

В качестве растворителя для препарата Фортелизин используется натрия хлорид раствор для инъекций 0,9% - 5 мл.

Способ применения и дозы

Препарат применяют только для внутривенного введения.

Фортелизин вводится как можно раньше от момента возникновения клинической симптоматики острого инфаркта миокарда.

Фортелизин вводят внутривенно в дозе 15 мг (2235000 ME).

Содержимое флакона 5 мг (745000 ME) перед введением препарата разводится в 5 мл раствора натрия хлорида 0,9%.

Препарат рекомендуется вводить по двум схемам.

Первая схема: Фортелизин вводится двумя болюсами - 10 мг (1490000 ME) одномоментно и через 30 минут оставшиеся 5 мг (745000 ME).

Вторая схема: 10 мг (1490000 ME) вводится болюсно, оставшиеся 5 мг (745000 ME) вводятся внутривенно инфузионно в 50 мл раствора натрия хлорида 0,9% в течение 30 мин.

Препарат Фортелизин нельзя смешивать с другими лекарственными средствами в одном флаконе для инфузий или в общей системе для внутривенного введения.

Не выявлено клинически значимых взаимодействий препарата Фортелизин с другими препаратами, часто применяемыми у больных с острым инфарктом миокарда.

При одновременном применении препарата Фортелизин с антиагрегантными средствами и препаратами, влияющими на свертывающую систему крови, увеличивается риск развития кровотечений.