терапевтические композиции, содержащие специфический антагонист рецептора эндотелина и ингибитор pde5

Формула изобретения

1. Комбинация для лечения заболевания, в котором присутствует вазоконстрикция, содержащая соединение формулы (I)



или фармацевтически приемлемую соль этого соединения и по крайней мере одно соединение, обладающее PDE5-ингибирующими свойствами, или его фармацевтически приемлемую соль, для терапевтического применения, одновременно, раздельно или в течение периода времени.

2. Комбинация по п.1, в которой соединение, обладающее PDE5-ингибирующими свойствами, выбрано из силденафила, варденафила, тадалафила и уденафила.

3. Комбинация по п.2, в которой соединение, обладающее PDE5-ингибирующими свойствами, представляет собой тадалафил.

4. Комбинация по п.2, в которой соединение, обладающее PDE5-ингибирующими свойствами, представляет собой силденафил.

5. Комбинация по п.1, в которой заболевание, в котором присутствует вазоконстрикция, выбрано из гипертензии, легочной гипертензии, диабетической артериопатии, сердечной недостаточности, эректильной дисфункции и стенокардии.

6. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания, в котором присутствует вазоконстрикция, содержащая в качестве активных веществ соединение формулы (I) как описано по п.1 или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения формулы (I) в комбинации по крайней мере с одним соединением, обладающим PDE5-ингибирующими свойствами, или его фармацевтически приемлемой солью, а также по крайней мере один эксципиент.

7. Фармацевтическая композиция по п.6, в которой соединение, обладающее PDE5-ингибирующими свойствами, выбрано из силденафила, варденафила, тадалафила и уденафила.

8. Фармацевтическая композиция по п.7, в которой соединение, обладающее PDE5-ингибирующими свойствами, представляет собой тадалафил.

9. Фармацевтическая композиция по п.7, в которой соединение, обладающее PDE5-ингибирующими свойствами, представляет собой силденафил.

10. Применение соединения формулы (I) как описано по п.1 или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения формулы (I) в комбинации по крайней мере с одним соединением, обладающим PDE5-ингибирующими свойствами, или его фармацевтически приемлемой солью, для изготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения заболевания, в котором присутствует вазоконстрикция.

11. Применение по п.10, в котором соединение, обладающее PDE5-ингибирующими свойствами, выбрано из силденафила, варденафила, тадалафила и уденафила.

12. Применение по п.10, в котором заболевание, предназначенное для лечения, выбрано из гипертензии и легочной гипертензии.

Описание изобретения к патенту

Настоящее изобретение относится к продукту, содержащему соединение формулы (I):

или фармацевтически приемлемую соль этого соединения в комбинации по крайней мере с одним соединением, обладающим PDE5-ингибирующими свойствами, или его фармацевтически приемлемой солью, для терапевтического применения, одновременно, раздельно или в течение периода времени, для лечения заболевания, в котором присутствует вазоконстрикция.

В международной заявке на патент WO 02/053557 описаны антагонисты рецептора эндотелина, включающие соединение формулы (I), и применение указанных антагонистов рецептора эндотелина для лечения различных заболеваний, в которых присутствует вазоконстрикция (например, сердечная недостаточность, стенокардия, легочная и системная гипертензия и эректильная дисфункция).

Ингибиторы PDE-5 подробно были описаны в следующих патентных документах:

- US 5,250,534 (описаны производные пиразолопиримидинона в качестве ингибиторов PDE-5 и в том числе силденафил, а также их применение, среди прочего, при гипертензии и сердечной недостаточности) и ЕР 1097711 (описан в том числе силденафил при легочной гипертензии);

- WO 99/24433 (описан в том числе варденафил, а также применение его, среди прочего, при гипертензии, стенокардии и эректилной дисфункции);

- US 5,859,006 (описан в том числе тадалафин, а также применение его, среди прочего, при гипертензии, легочной гипертензии, ангины и острой сердечной недостаточности);

- WO 00/27848 (описан в том числе уденафил и его применение при импотенции).

Неожиданно было обнаружено, что комбинация соединения формулы (I) с соединением, обладающим PDE5-ингибирующими свойствами, приводит к неожиданному синергетическому эффекту при лечении заболеваний, в которых присутствует вазоконстрикция.

Следовательно, объектом настоящего изобретения является продукт, содержащий соединение формулы (I), как описано выше, или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения формулы (I), в комбинации по крайней мере с одним (и предпочтительно одним) соединением, обладающим PDE5-ингибирующими свойствами, или его фармацевтически приемлемой солью, для терапевтического применения, одновременно, раздельно или в течение периода времени, для лечения заболевания, в котором присутствует вазоконстрикция.

В следующих параграфах приведены определения различных терминов, использующихся в настоящем описании, и должны применяться одинаково в описании и в формуле изобретения, если иное явно не приведено в описании, обеспечивая более широкое или более узкое определение.

"PDE-5" обозначает в настоящем описании циклическую гуанозин 3',5'-монофосфат (цГМФ) фосфодиэстеразу типа 5.

"Одновременно" или "одновременный", в отношении терапевтического применения, обозначают в настоящем описании, что терапевтическое применение заключается во введении двух или более активных ингредиентов одним способом и в одно время.

"Раздельно" или "раздельный", в отношении терапевтического применения, обозначают в настоящем описании, что терапевтическое применение заключается во введении двух или более активных ингредиентов приблизительно в одно время по крайней мере двумя различными способами.

Терапевтическое введение "в течение периода времени" обозначает в настоящем описании введение двух или более ингредиентов в разное время, и в частности способ введения, в соответствии с которым полное введение одного из активных ингредиентов завершается перед началом введения другого или других. В этом способе возможно введение одного из активных ингредиентов в течение нескольких месяцев перед введением другого активного ингредиента или ингредиентов. В этом случае не происходит одновременного введения.

"Заболевание, в котором присутствует вазоконстрикция" обозначает в частности гипертензию, легочную гипертензию (включая легочную аретриальную гипертензию), диабетическую артериопатию, сердечную недостаточность, эректильную дисфункцию или стенокардию.

"Соединение, обладающее PDE5-ингибирующими свойствами" обозначает соединение, которое при проведении "теста на определение PDE5 IC₅₀", описанного в настоящем описании, имеет значение IC₅₀, равное или ниже 1 мкМ.

Конкретные примеры соединений, обладающих PDE5-ингибирующими свойствами, включают соединения, имеющие следующие структуры (наименования):

Термин "фармацевтически приемлемые соли" обозначает нетоксичные, неорганические или органические кислотные и/или основные аддитивные соли. В качестве ссылки см. статью "Salt selection for basic drugs", Int. J. Pharm., 1986, 33, cc.201-217.

Кроме того, любая ссылка на соединение формулы (I) или на соединение, обладающее PDE5-ингибирующими свойствами, должна пониматься как относящаяся также к фармацевтически приемлемым солям, если это является подходящим и целесообразным.

Предпочтительно, продукт в соответствии с настоящим изобретением является таким, что соединение формулы (I) и соединение, обладающее PDE5-ингибирующими свойствами, предназначены для терапевтического применения, которое осуществляют одновременно или в течение периода времени.

В соответствии с одним предпочтительным вариантом настоящего изобретения соединение формулы (I) и соединение, обладающее PDE5-ингибирующими свойствами, предназначены для одновременного введения.

В соответствии с другим предпочтительным вариантом настоящего изобретения соединение формулы (I) и соединение, обладающее PDE5-ингибирующими свойствами, предназначены для введения в течение периода времени.

Период времени, предназначенный для терапевтического применения продукта в соответствии с настоящим изобретением, может составлять по крайней мере одну неделю, и предпочтительно по крайней мере один или несколько месяцев (например, шесть месяцев). Этот период времени также может составлять всю жизнь пациента, принимающего продукт. Предпочтительно, введение соединения формулы (I) заменяется введением соединения, обладающего PDE5-ингибирующими свойствами, и интервал между таким введением не превышает два или три дня (и более предпочтительно не превышает одного дня).

Предпочтительно, соединение, обладающее PDE5-ингибирующими свойствами, выбрано из силденафила, варденафила, тадалафила и уденафила. Более предпочтительно, соединение, обладающее PDE5-ингибирующими свойствами, представляет собой силденафил или тадалафил.

В соответствии с одним особенно предпочтительным вариантом по изобретению соединение, обладающее PDE5-ингибирующими свойствами, представляет собой силденафил.

В соответствии с другим особенно предпочтительным вариантом по изобретению соединение, обладающее PDE5-ингибирующими свойствами, представляет собой тадалафил.

Способ введения соединения формулы (I) и способ введения соединения, обладающего PDE5-ингибирующими свойствами, предпочтительно являются одинаковыми. В частности, общим способом введения соединения формулы (I) и соединения, обладающего PDE5-ингибирующими свойствами, является внутривенное или пероральное введение (и особенно пероральное введение).

Хотя точные дозировки введения продукта в соответствии с настоящим изобретением будут определяться лечащим врачом, предполагается, что подходящей является дозировка от 0,05 до 2 мг (и предпочтительно от 0,1 до 1 мг) соединения формулы (I) на кг веса тела пациента вместе с дозировкой от 0,01 до 1 мг (и предпочтительно от 0,05 до 0,5 мг) тадалафила на кг веса тела пациента, причем оба соединения предназначены для перорального введения, или вместе с дозировкой от 0,1 до 2 мг (и предпочтительно от 0,2 до 1 мг) силденафила на кг веса тела пациента, причем оба соединения предназначены для перорального введения.

Предпочтительно, заболевание, предназначенное для лечения продуктом в соответствии с настоящим изобретением, выбрано из гипертензии, легочной гипертензии, диабетическое артериопатии, сердечной недостаточности, эректильной дисфункции и стенокардии. Более предпочтительно, заболевание, предназначенное для лечения продуктом в соответствии с настоящим изобретением, выбрано из гипертензии и легочной гипертензии. В частности, заболевание, предназначенное для лечения продуктом в соответствии с настоящим изобретением, представляет собой легочную гипертензии (и особенно легочную артериальную гипертензию).

Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, содержащей в качестве активных веществ соединение формулы (I):

или фармацевтически приемлемую соль этого соединения, в комбинации по крайней мере с одним (и предпочтительно одним) соединением, обладающим PDE5-ингибирующими свойствами, или его фармацевтически приемлемой солью, а также по крайней мере один эксципиент.

Настоящее изобретение также относится к применению соединения формулы (I):

или фармацевтически приемлемой соли этого соединения, в комбинации по крайней мере с одним (и предпочтительно одним) соединением, обладающим PDE5-ингибирующими свойствами, или его фармацевтически приемлемой солью, для изготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения заболевания, в котором требуется вазодиляция.

Кроме того, предпочтения, указанные для продукта в соответствии с настоящим изобретением, конечно, включают mutatis mutandis к фармацевтическим композициям и к применениям этого изобретения.

Конкретные варианты осуществления настоящего изобретения описаны в следующих примерах, которые служат для более подробное иллюстрации изобретения без ограничения его объема.

Примеры

Для иллюстрации полезности изобретения, комбинации соединения формулы (I), вводимого перорально в дозировке 0,3 мг/кг, с тадалафилом, вводимым перорально в дозировке 10 мг/кг, исследовали на двух различных моделях гипертензии, а именно на модели чувствительных к соли крыс Dahl и на модели крысы со спонтанной гипертензией. Кроме того, комбинация соединения формулы (I), вводимого перорально в дозировке 0,3 мг/кг, с силденафилом, вводимым перорально в дозировке 30 мг/кг, исследовали на модели крысы со спонтанной гипертензией. Использующиеся протоколы подробно приведены далее в разделе "Фармакологические свойства соединений по изобретению".

Фармакологические свойства соединений по изобретению

Экспериментальные способы, описанные далее, могут использоваться для иллюстрации фармакологических свойств соединений по изобретению.

Модель чувствительных к соли крыс Dahl

Чувствительных к соли крыс Dahl (Dahl-S) получали от Harlan (Нидерланды). Крыс помещали в группу в течение периода акклиматизации, и по одному после имплантации телеметрического устройства. Всех животных содержали в одинаковых условиях, и они имели свободный доступ к обычному гранулированному корму для крыс и воде. У чувствительных к соли крыс Dahl развивалась гипертензия только после приема соли. Их помещали на диету с высоким содержанием соли (8%) (Purina серия 5500). Через пять недель после начала введения соли телеметрическую систему имплантировали под анестезией ингаляцией 2,5% изофлурана (в 70% О₂ + 30% N₂O). В асептических условиях радиочастотный передатчик давления имплантировали в брюшную полость, и считывающий катетер встраивали в нисходящую аорту и продвигали острием вверх чуть ниже разветвления почечной артерии. Передатчик вшивали в брюшную мышечную ткань, и кожу закрывали. Приемник трансформировал радиочастотный сигнал в цифровые данные, которые пересылались на специальный персональный компьютер (Compaq, deskpro). Измерения артериального кровяного давления калибровали в помощью данных от ссылки давления окружающей среды. Телеметрические единицы получали от Data Sciences (St. Paul. MN, США).

Соединения вводили по крайней мере через 2 недели после имплантации телеметрической системы. Соединение формулы (I) и соединение, обладающее PDE5-ингибирующими свойствами, готовили в 5% гуммиарабике и вводили пипеткой в рот. Текущие действия соединения формулы (I), соединения, обладающего PDE5-ингибирующими свойствами и их комбинации на кровяное давление измеряли путем сбора данных с 5-минутными интервалами вплоть до 72 ч после перорального введения. Ежечасные значения кровяного давления рассчитывали для каждой крысы. Каждая крыса выступала в качестве своего собственного контроля, используя данные кровяного давления по крайней мере за 24 часа до введения лекарственного препарата. Две кривые (кровяное давление контрольного периода и кровяное давление периода лечения) строили на графике вместе, и рассчитывали площади под кривыми (АВС) от 0 до 72 часов. Чем выше АВС, тем сильнее действие тестируемого соединения на понижение кровяного давления.

Модель крысы со спонтанной гипертензией

Использовали ту же методику, как и для модели чувствительных к соли крыс Dahl, за исключение того, что крысами со спонтанной гипертензией (SHR) заменяли крыс Dahl-S, и что крысам SHR не давали никакой солевой диеты. Крыс SHR получали от Harlan (Нидерланды).

Тест на определение IC₅₀ PDE5:

Для оценки степени ингибировании активности PDE5 тестируемого соединения осуществляли следующий тест. Фермент фосфодиэстеразу-5 (PDE 5) выделяли из собранных кавернозальных тканей человека. Около 3 г этой ткани гомогенизировали с 12 мл буфера HEPES (20 мМ HEPES, 250 мМ сахарозы, 1 мМ EDTA, 1 мМ PMSF, рН 7,2) при 4°С. Раствор отфильтровывали через два слоя марли и центрифугировали (100,000×g) в течение 60 мин при 4°С. Супернатант отфильтровывали через фильтровальную бумагу 0,2 мкм и разделяли с помощью ВЭЖХ (Mono Q анионообменная колонка) с градиентом концентрации 0-500 мМ NaCl для элюирования изозимов PDE. Активность фермента измеряли для каждой фракции колонки следующим способом для разделения фракции PDE5, и ингибирование PDE5 тестируемым соединением измеряли, используя фракции PDE5. В пробирку объемом 1,5 мл добавляли 100 мкл реакционной смеси (15 мМ Tris-HCl, 5 мМ MgCl₂, 0,5 мг/мл БСА, рН 7,4) и соответствующее количество фракции тестируемого соединения и тестируемое соединение, и смесь хорошо перемешивали. К этому раствору добавляли ³Н-цАМФ или ³ Н-цГМФ (500 нМ, 2 мкСi/мл), смесь оставляли реагировать в инкубаторе при 30°С в течение около 1 часа, и реакцию останавливали помещением пробирки в кипящую воду на время от около 45 секунд до 2 мин. Затем пробирку погружали в ледяную баню на около 5 мин. В эту пробирку добавляли змеиный яд (1 мг/мл, 100 мкл) или 5-нуклеотидазу (0,1 единиц/пробирка), и смесь оставляли реагировать в инкубаторе при 37°С в течение 10 мин и погружали в ледяную баню. К анионообменной смоле (Bio-Rad смола, AG1-X2, 200-400 меш) добавляли 3-кратный объем метанола, смолу заранее промывали 0,5N раствором HCl, Н₂О, 0,5N раствором NaOH, Н ₂О, 0,5N раствором HCl и Н₂О по порядку, и значение рН доводили до 5. Затем 1 мл предварительно обработанной смолы распределяли в каждую пробирку при перемешивании. Смесь оставляли при 4°С на 15 мин при периодическом встряхивании и центрифугировали (10,000 об/мин) в течение около 5 мин для осаждения смолы. Супернатант (700 мкл) переносили в сосуд со сцинтилляционной жидкостью, и смешивали с 10 мл сцинтилляционной смеси. После стабилизации раствора выдерживанием в течение ночи, измеряли радиоактивность пробирки с помощью -счетчика.

Если тестируемое соединение обладало значением IC₅₀, равным или ниже 1 мкМ, считали, что оно обладает PDE5-ингибирующими свойствами в целях настоящей заявки. Если тестируемое соединение обладало значениями IC ₅₀ выше 1 мкМ, считали, что оно не обладает PDE5-ингибирующими свойствами в целях настоящей заявки.

Пример 1

Следуя методике теста, описанной ранее в разделе "модель чувствительных к соли крыс", пероральное введение соединения формулы (I) и тадалафила понижает кровяное давление у крыс Dahl-S: соединение формулы (I) (0,3 мг/кг) понижает кровяное давление, со значением АВС 256, и тадалафил (10 мг/кг) понижает кровяное давление, со значением АВС 310. АВС после перорального введения комбинации (соединение формулы (I) при 0,3 мг/кг и тадалафил при 10 мг/кг) составляет 923, демонстрируя синергетический эффект.

Пример 2

Следуя методике теста, описанной ранее в разделе "модель крысы со спонтанной гипертензией", пероральное введение соединения формулы (I) и тадалафила понижает кровяное давление у крыс SHR: соединение формулы (I) (0,3 мг/кг) понижает кровяное давление, со значением АВС 44, и тадалафил (10 мг/кг) понижает кровяное давление, со значением АВС 286. АВС после перорального введения комбинации (соединение формулы (I) при 0,3 мг/кг и тадалафил при 10 мг/кг) составляет 444, подтверждая синергетический эффект.

Пример 3

Следуя методике теста, описанной ранее в разделе "модель крысы со спонтанной гипертензией", пероральное введение соединения формулы (I) и силденафила понижает кровяное давление у крыс SHR: соединение формулы (I) (0,3 мг/кг) понижает кровяное давление, со значением 38 и силденафил (30 мг/кг) понижает кровяное давление, со значением 229. АВС после перорального введения комбинации (соединение формулы (I) при 0,3 мг/кг и силденафил при 30 мг/кг) составляет 317, подтверждая синергетический эффект.