способ очистки стауроспорина и способ получения n-бензоилстауроспорина

Формула изобретения

1. Способ очистки стауроспорина, включающий:

(a) получение раствора стауроспорина в первом растворителе, где первый растворитель представляет собой бензиловый спирт;

(b) внесение в раствор затравки очищенного стауроспорина во втором растворителе; и

(c) выделение продукта.

2. Способ по п.1, в котором второй растворитель выбран из группы, включающей этанол, ТГФ (тетрагидрофуран) или водный раствор этанола.

3. Способ получения N-бензоилстауроспорина, включающий:

(a) реакцию стауроспорина с бензойным ангидридом с образованием раствора;

(b) внесение в раствор затравки аморфного N-бензоилстауроспорина; и

(c) выделение продукта.

Описание изобретения к патенту

Настоящее изобретение относится к новой кристаллической форме II N-бензоилстауроспорина, способу получения кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина, композициям, содержащим кристаллическую форму II N-бензоилстауроспорина, и к применению кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина в методиках диагностики или медикаментозного лечения теплокровных животных, предпочтительно - людей.

Настоящее изобретение относится к аморфному N-бензоилстауроспорину, способу получения аморфного N-бензоилстауроспорина, композициям, содержащим аморфный N-бензоилстауроспорин, и к применению аморфного N-бензоилстауроспорина в методиках диагностики или медикаментозного лечения теплокровных животных, предпочтительно - людей.

Уровень техники

Лекарственное средство N-бензоилстауроспорин применяется в качестве противоопухолевого средства. В целом получение N-бензоилстауроспорина известно в данной области техники. Однако также известно, что различные полиморфные формы одного и того же лекарственного средства могут характеризоваться существенными различиями некоторых фармацевтически важных характеристик. Поэтому все еще требуются новые твердые формы N-бензоилстауроспорина и новые способы получения.

Краткое изложение сущности изобретения

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к кристаллической форме II N-бензоилстауроспорина. Предпочтительно, если кристаллическая форма II N-бензоилстауроспорина обладает рентгенограммой с пиком при угле рефракции 2-тета ( ), равном 8,7±0,2, как это показано на фиг.1.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции, которая содержит N-бензоилстауроспорин в твердой форме, в которой не менее 80 мас.% твердого N-бензоилстауроспорина представляет собой кристаллическую форму II, обладающую рентгенограммой с пиком при угле рефракции 2 , равном 8,7±0,2, как это показано на фиг.1. Приведены различные варианты осуществления.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, которая включает кристаллическую форму II N-бензоилстауроспорина и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель. Фармацевтическая композиция предпочтительно предназначена для перорального введения.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение также относится к аморфному N-бензоилстауроспорину, к способу получения аморфного N-бензоилстауроспорина и композициям, содержащим аморфный N-бензоилстауроспорин.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, которая включает профилактически или терапевтически эффективное количество аморфного N-бензоилстауроспорина и один или большее количество фармацевтически приемлемых инертных наполнителей. Фармацевтические композиции этого варианта осуществления настоящего изобретения можно приготовить, например, для перорального введения.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу очистки стауроспорина.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу получения N-бензоилстауроспорина по реакции стауроспорина с бензойным ангидридом. Этот способ также необязательно включает внесение в реакционный раствор затравки для получения аморфной или кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу получения аморфного N-бензоилстауроспорина, включающему распылительную сушку раствора, содержащего N-бензоилстауроспорин.

Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, которые включают профилактически или терапевтически эффективное количество аморфного N-бензоилстауроспорина, полученного описанным способом, и один или большее количество фармацевтически приемлемых инертных наполнителей.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу получения кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина, способ включает:

(a) получение раствора N-бензоилстауроспорина в протонном или апротонном растворителе;

(b) внесение затравки кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина и взаимодействие реакционной смеси со спиртовым растворителем с образованием осадка; и

(c) выделение осадка, который представляет собой кристаллическую форму II N-бензоилстауроспорина. Приведены различные варианты осуществления.

Краткое описание чертежей

На фиг.1 приведена порошковая рентгенограмма кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина.

На фиг.2 приведен характеристический инфракрасный спектр кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина.

На фиг.3 приведена порошковая рентгенограмма чистой аморфной формы N-бензоилстауроспорина.

На фиг.4 приведена порошковая рентгенограмма в основном аморфной формы N-бензоилстауроспорина.

Подробное описание изобретения

Если не приведено другое определение, то все технические и научные термины, использованные в настоящем изобретении, обладают такими же значениями, которые обычно подразумевает специалист с общей подготовкой в области техники, к которой относится настоящее изобретение. Хотя при осуществлении или проверке настоящего изобретения можно использовать любые методики и материалы, сходные с описанными в настоящем изобретении или эквивалентные им, описаны предпочтительные методики и материалы.

Термины для задач настоящего изобретения определены ниже.

Кристаллическое соединение, обозначенное в настоящем изобретении как "кристаллическая форма II", ниже в настоящем изобретении означает кристаллическую форму II N-бензоилстауроспорина. Ее характеризуют порошковой рентгенографией и/или инфракрасной спектроскопией. Она дополнительно описана ниже.

"Фармацевтически приемлемый" означает применимый для приготовления фармацевтической композиции, который обычно является нетоксичным и не является биологически нежелательным и включает приемлемые для применения в ветеринарии и/или фармацевтике.

"Антирастворитель" означает растворитель, который при добавлении к имеющемуся раствору вещества уменьшает растворимость этого вещества.

Термин "композиция" включает, но не ограничивается только ими, порошок, раствор, суспензию, гель, мазь, эмульсию и/или их смеси. Термин "композиция" включает продукт, содержащий указанные ингредиенты в указанных количествах, а также любой продукт, который прямо или косвенно образуется из комбинации указанных ингредиентов в указанных количествах. "Композиция" может содержать одно соединение или смесь соединений. "Соединение" является химическим веществом, которое включает молекулы одной и той же химической структуры.

Термин "фармацевтическая композиция" означает продукт, включающий активный ингредиент (ингредиенты), фармацевтически приемлемые инертные наполнители, которые образуют носитель, а также любой продукт, который прямо или косвенно образуется путем комбинирования, комплексообразования или агрегации любых двух или большего количества ингредиентов или путем диссоциации одного или большего количества ингредиентов или вследствие других типов реакций или взаимодействий одного или большего количества ингредиентов. В соответствии с этим фармацевтические композиции, предлагаемые в настоящем изобретении, включают любую композицию, полученную смешиванием активного ингредиента, дополнительного активного ингредиента (ингредиентов) и фармацевтически приемлемых инертных наполнителей.

Термин "инертный наполнитель" означает компонент фармацевтического продукта, который не является активным ингредиентом, такой как наполнитель, разбавитель или носитель. Инертные наполнители, которые применимы для приготовления фармацевтической композиции, предпочтительно обычно являются безопасными, нетоксичными и не являются биологически или в другом отношении нежелательными и являются приемлемыми для применения в ветеринарии, а также в фармацевтике. "Фармацевтически приемлемый инертный наполнитель" при использовании в настоящем описании и формуле изобретения включает один или более чем один такой инертный наполнитель.

"Терапевтически эффективное количество" означает количество соединения, которое при введении для лечения или предупреждения заболевания достаточно для такого для лечения или предупреждения заболевания. "Терапевтически эффективное количество" будет меняться в зависимости от соединения, заболевания и его тяжести и возраста, массы и т.п. подвергающегося лечению пациента.

При описании химической реакции термины "обработка", "введение во взаимодействие" и "введение в реакцию" в настоящем изобретении используются взаимозаменяемым образом и означают прибавление или смешивание двух или большего количества реагентов при подходящих условиях для получения указанного и/или желательного продукта. Следует понимать, что реакция, приводящая к получению указанного и/или желательного продукта, может необязательно приводить к ним непосредственно из комбинации этих двух реагентов, которые прибавлены первоначально, т.е. могут существовать один или большее количество промежуточных продуктов, которые образуются в смеси и которые в конечном счете приводят к получению указанного и/или желательного продукта.

Термин "в основном не содержащая" при указании композиции при использовании в настоящем изобретении означает, что композиция не содержит это вещество или оно не может быть обнаружено по методикам, известным специалистам в данной области техники.

Термин "аморфный" означает материал, который может в основном не содержать кристаллические примеси или содержать значительные количества кристаллических примесей. Аморфный материал, содержащий значительные количества кристаллических материалов в качестве примесей, в настоящем изобретении называется "в основном аморфный N-бензоилстауроспорин". Как показано на фиг.4, наличие кристаллических примесей не приводит к образованию на рентгенограмме выраженной гало-формы, типичной для аморфной формы, которая в основном не содержит кристаллического материала. Аморфный материал, который в основном не содержит кристаллических форм, в настоящем изобретении называется "чисто аморфный N-бензоилстауроспорин". На фиг.3 представлена порошковая рентгенограмма этой формы, на которой гало-форма свидетельствует о том, что кристаллическая структура в основном отсутствует. В областях, характерных для кристаллической формы, пики в основном отсутствуют.

Приведенные ниже примеры дополнительно иллюстрируют способы получения и "в основном аморфного N-бензоилстауроспорина", и "чисто аморфного N-бензоилстауроспорина".

N-бензоилстауроспорин известен под названием (9 ,10 ,11 ,13 )-N-(2,3,10,11,12,13-гексагидро-10-метокси-9-метил-1-окси-9,13,-эпокси-1Н,9Н-дииндоло[1,2,3-gh:3',2',1'-1m]пирроло[3,4-j][1,7]бензодиазонин-11-ил)-N-метилбензамид) и обладает следующей химической структурой:

В патенте US No. 5093330 (патент 5093330), во всей своей полноте включенном в настоящее изобретение в качестве ссылки, заявлен N-бензоилстауроспорин. Настоящее изобретение предпочтительно относится к конкретной форме, предпочтительно к такой, которая ниже в настоящем изобретении называется кристаллической формой II N-бензоилстауроспорина, соединения формулы (I), описанного выше, и к аморфным формам N-бензоилстауроспорина.

Разные твердые формы одного и того же лекарственного средства могут обладать разными характеристиками, включая характеристики, которые влияют на функциональные следствия их применения в качестве лекарственного средства, и они могут значительно различаться по таким фармацевтически важным характеристикам, как скорости растворения и биологическая доступность. Аналогичным образом, разные полиморфные формы могут обладать разными технологическими характеристиками, такими как гигроскопичность, сыпучесть и т.п., которые могут повлиять на их применимость в качестве фармацевтических компонентов для промышленного производства.

Порошковые рентгенограммы сняты на приборе Scintag INC Х1 с использованием парафокусирующей схемы Брэгга-Брентано. Рентгенограмма, приведенная на фиг.1, описана в таблице 1.

Таблица 1
Пики порошковой рентгенограммы формы II кристаллической модификации N-бензоилстауроспорина
2 (градусы)	Межплоскостное расстояние (Е)	Относительная интенсивность
3,4	26,1	средняя
6,0	14,8	средняя
7,8	11,3	средняя
8,7	10,1	высокая
9,2	9,6	средняя
9,7	9,1	средняя
10,1	8,8	средняя
10,4	8,5	низкая
11,2	7,9	средняя
12,6	7,0	средняя
14,1	6,3	средняя
15,7	5,7	средняя
16,8	5,3	средняя
18,2	4,9	средняя
18,9	4,7	средняя
19,3	4,6	средняя
19,6	4,5	высокая
20,2	4,4	высокая
24,5	3,6	средняя

Следует учитывать, что в зависимости от конкретного используемого дифрактометра, аналитика и методики приготовления образца предполагаются небольшие колебания наблюдаемых значений углов 2 и межплоскостных расстояний. Предполагаются более значительные колебания относительных интенсивностей пиков. Идентификация точной кристаллической формы соединения должна преимущественно основываться на наблюдаемых значениях углов 2 , а относительным интенсивностям пиков следует придавать меньшее значение.

Все углы 2 , приведенные в настоящем изобретении, характеризуются определенной относительной погрешностью. В предпочтительном варианте относительная погрешность для кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина составляет примерно ±0,2 для каждого пика.

Кристаллическую форму II N-бензоилстауроспорина также можно охарактеризовать с помощью инфракрасной спектроскопии. Кристаллическая форма II при исследовании с помощью инфракрасной спектроскопии (ИК) обладает характерной картиной поглощения, представленной на фиг.2. Исследование с помощью ИК-спектроскопии проведено на приборе Bruker IFS-55. При исследовании с помощью ИК-спектроскопии кристаллическая форма II N-бензоилстауроспорина обладает характеристичными поглощениями, которые можно отличить от поглощений других полиморфных форм, расположенными примерно при 789, 773, 743, 704, 1066, 1026, 1458, 1398, 1383, 1602, 1577, 1497, 1627, 1680, 2934 и 3055 см ^-1. Все характеристичные поглощения, приведенные в настоящем изобретении, обладают определенной относительной погрешностью. Относительная погрешность характеристичных поглощений в диапазоне 1900-800 см^-1 найдена равной примерно 2 см^-1 .

Одна или большее количество физических характеристик и/или спектроскопических характеристик могут являться основой для описания кристаллических или полиморфных форм N-бензоилстауроспорина.

Настоящее изобретение также относится к композиции, включающей твердый N-бензоилстауроспорин, который содержит по меньшей мере 80% кристаллической формы II в пересчете на полную массу твердого N-бензоилстауроспорина, содержащегося в композиции. Предпочтительной формой этой композиции является твердый порошкообразный N-бензоилстауроспорин, пригодный для применения в качестве активного ингредиента для приготовления фармацевтических препаратов. Остальная часть твердого N-бензоилстауроспорина, содержащегося в композиции, т.е. 20% или менее в пересчете на полную массу N-бензоилстауроспорина, может представлять собой, например, другие кристаллические формы N-бензоилстауроспорина. В одном предпочтительном варианте осуществления композиция содержит по меньшей мере 90% кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина в пересчете на полную массу твердого N-бензоилстауроспорина, содержащегося в композиции. В другом предпочтительном варианте осуществления композиция содержит по меньшей мере 95% кристаллической формы II в пересчете на полную массу твердого N-бензоилстауроспорина, содержащегося в композиции.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение также относится к способу очистки стауроспорина. Хотя настоящее изобретение не ограничивается какой-либо конкретной теорией, авторы установили, что способ включает:

(a) получение суспензии стауроспорина в спиртовом растворителе;

(b) взаимодействие суспензии с метансульфоновой кислотой с образованием раствора;

(c) дополнительное взаимодействие раствора с триэтиламином; и

(d) выделение продукта.

Способ дополнительно включает промывку продукта в протонном или апротонном растворителе. Неограничивающим примером протонного растворителя является этанол и неограничивающим примером апротонного растворителя является тетрагидрофуран (ТГФ). Настоящее изобретение также относится к способу, включающему:

(a) получение раствора неочищенного стауроспорина в протонном или апротонном растворителе;

(b) внесение в раствор затравки очищенного стауроспорина;

(c) взаимодействие реакционной смеси со спиртовым растворителем с образованием осадка; и

(d) выделение продукта, который представляет собой очищенный стауроспорин.

После очистки исходного материала материал можно превратить в кристаллическую форму II или аморфный N-бензоилстауроспорин. Материал можно превратить в кристаллическую форму II N-бензоилстауроспорина, способ включает:

(a) реакцию стауроспорина в спиртовом растворителе, таком как этанол, с бензойным ангидридом; и

(b) внесение в реакционный раствор затравки кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина для получения продукта;

(c) выделение продукта, который представляет собой кристаллическую форму II N-бензоилстауроспорина.

Материал можно превратить в аморфный N-бензоилстауроспорин посредством:

(a) реакции стауроспорина в растворителе, таком как этанол или ТГФ, с бензойным ангидридом; и

(b) внесения в реакционный раствор затравки аморфного N-бензоилстауроспорина для получения продукта;

(c) выделения продукта, который представляет собой аморфный N-бензоилстауроспорин.

Продукт можно несколько раз промыть растворителем и получить в основном аморфный N-бензоилстауроспорин.

Для получения в основном аморфного N-бензоилстауроспорина также можно использовать методику распылительной сушки.

Настоящее изобретение также относится к композиции, содержащей в основном аморфный N-бензоилстауроспорин. Настоящее изобретение также относится к композиции, содержащей чисто аморфный N-бензоилстауроспорин.

Настоящее изобретение также относится к способу получения кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина. Способ включает:

(а) получение раствора N-бензоилстауроспорина в протонном или апротонном растворителе;

(b) внесение в раствор затравки кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина;

(c) взаимодействие суспензии со спиртовым растворителем с образованием осадка; и

(d) выделение осадка, который представляет собой кристаллическую форму II N-бензоилстауроспорина.

Неограничивающие примеры протонных и апротонных растворителей представлены в приведенной ниже таблице:

	Примеры
	Бензиловый спирт
	Этанол
	Диметилсульфоксид (ДМСО)
	Диметилформамид (ДМФ)
	Тетрагидрофуран (ТГФ)
	Уксусная кислота
	Полиэтиленгликоль (ПЭГ 200)

Пики порошковой рентгенограммы кристаллической формы II, которые обладают интенсивностью от средней до низкой, полученные для указанных выше растворителей, могут немного меняться вследствие наличия молекул разных растворителей в кристаллической решетке.

В одном варианте осуществления N-бензоилстауроспорин растворяют в бензиловом спирте, осаждают путем прибавления затравки кристаллов кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина и прибавления этанола в качестве антирастворителя и получают кристаллическую форму II N-бензоилстауроспорина. Этот способ хорошо воспроизводится и полученный кристаллический продукт хорошо отфильтровывается. Содержание остаточного растворителя в В6 составляет примерно 4,3 мас./мас.% в случае бензилового спирта и 0,5-1 мас./мас.% в случае этанола. Схематически способ имеет вид:

Приведенные выше условия селективного получения отдельных кристаллических форм не являются единственными. Обычно можно менять параметры, такие как, например, массовое отношение количества соединения формулы (I) к количеству растворителя и антирастворителя.

Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим кристаллическую форму II или аморфный N-бензоилстауроспорин и фармацевтически приемлемый носитель. В дополнение к активному соединению фармацевтическая композиция включает один или большее количество фармацевтически приемлемых носителей, также известных как инертные наполнители, которые обычно не обладают фармацевтической активностью, но обладают различными полезными свойствами и могут, например, улучшать стабильность, стерильность фармацевтической композиции. Эти носители являются фармацевтически приемлемыми, что означает, что они не являются вредными для людей или животных при надлежащем применении и совместимы с другими ингредиентами в данном препарате. Носители могут быть твердыми, полужидкими или жидкими и могут быть объединены с соединением в объемной форме, но в конечном счете - в форме разовой дозы препарата, т.е. физически отдельной единицы, содержащей заданное количество активного ингредиента, такой как таблетка или капсула. Фармацевтические композиции в дополнение к соединению, предлагаемому в настоящем изобретении, могут включать одно или большее количество активных фармацевтических соединений.

Фармацевтические композиции могут находиться в форме суспензий, растворов, аэрозолей или твердых дозированных форм.

Фармацевтические композиции включают различные препараты, пригодные для разных путей введения, включая, но не ограничиваясь только ими, ингаляционное, пероральное, ректальное, парентеральное (включая подкожное, внутрикожное, внутримышечное и внутривенное), имплантационное и чрескожное введение. В каждом случае наиболее подходящий путь введения зависит от продолжительности патологического состояния субъекта, необходимой длительности лечения, характера и тяжести подвергающегося лечению патологического состояния и конкретной применяющейся композиции. Композиция может быть объемной или представлять собой разовую дозированную форму, и ее можно приготовить по методикам, хорошо известным в данной области техники для данной композиции.

Количество активного ингредиента, включенного в разовую дозированную форму, зависит от типа препарата, в котором содержится активный ингредиент. Фармацевтическая композиция обычно содержит от примерно 0,1 до примерно 99 мас.% активного ингредиента, предпочтительно - примерно от 1 до 50 мас.% для перорального введения и от примерно 0,2 до примерно 20 мас.% для парентерального введения.

Препараты, пригодные для перорального введения, включают капсулы (твердые и мягкие), облатки, лепешки, сиропы, суппозитории и таблетки, каждая из которых содержит заранее заданное количество активного соединения; порошки или гранулы, растворы или суспензии в водной или неводной жидкости; или эмульсии типа масло-в-воде или вода-в-масле. Такие препараты можно приготовить по любой подходящей фармацевтической методике, которая включает стадию объединения активного соединения с подходящим носителем или носителями. Количество активного ингредиента в разовой дозе препарата может быть таким, как указано в предшествующем уровне техники для препаратов N-бензоилстауроспорина.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение также относится к способам лечения с применением соединений и фармацевтических композиций, предлагаемых в настоящем изобретении. Соединения и композиции, предлагаемые в настоящем изобретении, можно вводить субъекту в количестве, эффективном для применения с целью лечения и предупреждения патологических состояний, указанных в патенте 5093330. Субъект означает человека или животного, предпочтительно - человека. Животные в контексте настоящего изобретения включают любое животное, которое безопасно лечить соединениями, предлагаемыми в настоящем изобретении. Наиболее примечательно то, что кристаллическая форма II и аморфный N-бензоилстауроспорин проявляют высокую антипролиферативную и противоопухолевую активность, что обусловлено ингибированием протеинкиназы С (ПКС), что может быть чрезвычайно полезным для лечения рака. Кроме того, осуществляющееся ими высокоселективное и активное ингибирование ПКС может привести для пациента к превосходным клиническим результатам, т.е. к приостановлению или подавлению прогрессирования заболевания при одинаково переносимых режимах. Возможные случаи применения включают различные солидные опухоли, а более предпочтительно, например, рак молочной железы, рак толстой кишки, рак яичников и лейкоз. Кроме того, можно проводить эффективное лечение этими композициями в разных других случаях, когда можно воздействовать на активность ПКС, включая множественную лекарственную устойчивость (МЛУ), которая является одним из основных затруднений при использующейся в настоящее время химиотерапии рака и воспалительных заболеваний в целом.

Настоящее изобретение предпочтительно относится к кристаллической форме II и аморфному N-бензоилстауроспорину, раскрытым в настоящем изобретении, предназначенным для лечения одного из указанных заболеваний или для приготовления фармакологического средства, предназначенным для их лечения.

Настоящее изобретение также относится к способу лечения теплокровных животных, страдающих от указанных заболеваний, предпочтительно - опухолевого заболевания, при котором количество кристаллической формы II или аморфного N-бензоилстауроспорина, которое эффективно для борьбы с соответствующим заболеванием, предпочтительно - количество, обладающее антипролиферативной, и предпочтительно - количество, обладающее противоопухолевой эффективностью, вводят теплокровным животным, нуждающимся в таком лечении. Настоящее изобретение также относится к применению кристаллической формы II или аморфного N-бензоилстауроспорина для ингибирования указанной выше ПКС или для получения фармацевтических композиций, предназначенных для применения при лечении организма человека или животного, предпочтительно - для лечения различных солидных опухолей, и более предпочтительно, например, рака молочной железы, рака толстой кишки, рака яичников и лейкоза. В зависимости от вида, индивидуального состояния, пути введения и клинической картины теплокровным животным, обладающим массой тела, равной примерно 70 кг, вводят эффективные дозы, например суточные дозы, составляющие примерно 1-2500 мг, предпочтительно - 1-1000 мг, более предпочтительно - 5-500 мг.

Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим препаратам, которые содержат эффективное количество, предпочтительно - количество, эффективное для предупреждения или лечения одного из указанных заболеваний, кристаллической формы II или аморфного N-бензоилстауроспорина формулы (I), совместно с фармацевтически приемлемыми носителями, которые пригодны для местного, энтерального, например перорального или ректального, или парентерального введения, и могут быть неорганическими или органическими и твердыми или жидкими. Для перорального введения предпочтительно использовать таблетки или желатиновые капсулы, содержащие активное вещество совместно с разбавителями, например лактозой, декстрозой, сахарозой, маннитом, сорбитом, целлюлозой и/или глицерином; и/или смазывающими агентами, например диоксидом кремния, тальком, стеариновой кислотой или ее солями, обычно стеаратом кальция или магния; и/или ПЭГ. Таблетки также могут содержать связующие, например алюмосиликат магния, крахмалы, обычно кукурузный, пшеничный или рисовый крахмал, желатин, метилцеллюлозу, натриевую соль карбоксиметилцеллюлозы и/или поливинилпирролидон; и, если необходимо, агенты, обеспечивающие распадаемость, например крахмалы, агар, альгиновую кислоту или ее соли, обычно альгинат натрия; и/или шипучие смеси, или адсорбенты, окрашивающие агенты, вкусовые добавки и подсластители. Фармакологически активные соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, также можно использовать в виде препаратов для парентерального введения или растворов для вливания. Такие растворы предпочтительно представляют собой изотонические водные растворы или суспензии, они могут готовиться перед применением, например, в случае лиофилизированных препаратов, содержащих активное вещество по отдельности или совместно с носителем, например маннитом. Фармацевтические вещества могут быть стерилизованы и/или могут содержать инертные наполнители, например консерванты, стабилизаторы, смачивающие агенты и/или эмульгаторы, солюбилизаторы, соли для регулирования осмотического давления и/или буферные вещества. Фармацевтические препараты, предлагаемые в настоящем изобретении, при необходимости могут содержать другие фармакологически активные вещества, такие как антибиотики, и их готовят по методикам, которые сами по себе известны, например по методикам смешивания, гранулирования, нанесения покрытия из сахара, растворения или лиофилизации, и они содержат примерно 1-100%, предпочтительно - от примерно 1% до примерно 20% активного вещества или веществ.

Настоящее изобретение дополнительно описано с помощью приведенных ниже примеров, в которых подробно описано получение препаратов соединений и композиций, предлагаемых в настоящем изобретении, а также их применение. Для специалистов в данной области техники должно быть очевидно, что можно внести множество изменений в материалы и способы без отклонения от объема и сущности настоящего изобретения. Приведенные ниже примеры не предназначены для наложения ограничений на объем настоящего изобретения, определенный выше в настоящем изобретении или в приведенной ниже формуле изобретения.

Примеры

Пример 1. Очистка стауроспорина В1 с получением стауроспорина В2 с использованием метансульфоновой кислоты и триэтиламина

В реактор помещают стауроспорин В1 и этанол. Суспензию нагревают примерно до 70°С. К суспензии прибавляют метансульфоновую кислоту и полученный раствор выдерживают. Прибавляют активированный уголь и Hyflo и смесь выдерживают. Суспензию фильтруют и прибор для фильтрования и осадок на фильтре несколько раз промывают этанолом. Прозрачный профильтрованный раствор переносят в другой реактор и охлаждают до примерно 60°С. К реакционной смеси медленно прибавляют триэтиламин, разбавленный этанолом. Затем суспензию охлаждают до примерно 20°С и выдерживают. Стауроспорин В2 выделяют фильтрованием. Продукт несколько раз промывают этанолом.

Пример 2. Очистка неочищенного стауроспорина В1 с получением стауроспорина В2 путем кристаллизации

В реактор помещают стауроспорин В1 и бензиловый спирт. Суспензию нагревают примерно до 85°С и выдерживают. К раствору прибавляют активированный уголь и Hyflo и смесь повторно выдерживают. Суспензию фильтруют примерно при 90°С. Прибор для фильтрования и осадок на фильтре несколько раз промывают бензиловым спиртом. Прозрачный профильтрованный раствор переносят в другой реактор и охлаждают до примерно 70°С. В раствор вносят затравку стауроспорина В2, суспендированную в этаноле. Затем к суспензии прибавляют этанол и суспензию затем охлаждают до примерно 0°С. Суспензию повторно выдерживают в течение не менее 2 ч примерно при 0°С. Стауроспорин В2 выделяют фильтрованием. Продукт несколько раз промывают этанолом.

Пример 3. Бензилирование стауроспорина В2 для получения в основном аморфного N-бензоилстауроспорина

В реактор помещают стауроспорин В2 с бензойным ангидридом, этанол и воду. Реакционную смесь нагревают до примерно 70°С и выдерживают. Раствор фильтруют и прибор для фильтрования и осадок на фильтре несколько раз промывают этанолом. Профильтрованный раствор переносят в другой реактор и охлаждают примерно до 60°С. К раствору медленно прибавляют воду. В раствор вносят затравку аморфного N-бензоилстауроспорина. Суспензию выдерживают, затем охлаждают примерно до 20°С, затем повторно выдерживают. N-Бензоилстауроспорин выделяют фильтрованием. Влажный осадок на фильтре N-бензоилстауроспорина несколько раз промывают абсолютным этанолом. Влажный осадок на фильтре после этого в приборе для фильтрования повторно суспендируют в этаноле, выдерживают примерно при 25°С, затем охлаждают примерно до 0-5°С и повторно выдерживают. Эту стадию способа можно повторить несколько раз. N-Бензоилстауроспорин выделяют фильтрованием. Влажный осадок на фильтре сушат в вакуумном сушильном шкафу при температуре, равной примерно 40°С, и вакууме, равном примерно 10-20 мбар, в течение примерно 24 ч и получают продукт: 35-40 г высушенного остатка на фильтре: 27 г от теоретического выхода. Выход: примерно 82% от теоретического в пересчете на 100% В1.

В этой реакции этанол можно заменить на ТГФ.

Пример 4. Бензилирование стауроспорина В2 для получения кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина В4

В реактор помещают стауроспорин В2 с бензойным ангидридом, абсолютный этанол и воду. Реакционную смесь нагревают примерно до 70°С и выдерживают. После завершения периода проведения реакции в реакционную смесь вносят затравку кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина, суспендированную в абсолютном этаноле. После выдерживания к суспензии медленно прибавляют абсолютный этанол и воду. Суспензию повторно выдерживают, затем охлаждают примерно до 0°С и затем кристаллическую форму II N-бензоилстауроспорина выделяют фильтрованием. Влажный осадок N-бензоилстауроспорина на фильтре несколько раз промывают абсолютным этанолом и затем сушат в вакуумном сушильном шкафу при температуре, равной 60°С, и вакууме, равном примерно 5-30 мбар, в течение примерно 16 ч и получают продукт: 39,70 г высушенного остатка на фильтре: 27,2 г от теоретического выхода. Выход: примерно 91,5% от теоретического в пересчете на 100% В1.

Пример 5. Приготовление кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина с использованием бензилового спирта и этанола

В реактор помещают неочищенный N-бензоилстауроспорин и бензиловый спирт. Смесь нагревают до 85°С и затем раствор выдерживают. Раствор охлаждают примерно до 70°С, затем вносят затравку очищенной кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина В6, суспендированную в этаноле. Затем прибавляют этанол и суспензию выдерживают, затем охлаждают примерно до 0°С, а после этого кристаллическую форму II N-бензоилстауроспорина выделяют фильтрованием. Влажный осадок на фильтре несколько раз промывают этанолом и сушат.

Пример 6. Приготовление кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина с использованием уксусной кислоты и этанола

В реактор помещают неочищенный N-бензоилстауроспорин и уксусную кислоту. Смесь нагревают примерно до 70°С и затем раствор выдерживают. Затем в раствор вносят затравку очищенной кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина В6, суспендированную в этаноле. Затем к суспензии прибавляют этанол и суспензию выдерживают, затем охлаждают примерно до 20°С, а после этого кристаллическую форму II N-бензоилстауроспорина выделяют фильтрованием. Влажный осадок на фильтре несколько раз промывают этанолом и сушат.

Пример 7. Приготовление кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина с использованием ПЭГ

В реактор помещают неочищенный N-бензоилстауроспорин и ПЭГ. Смесь нагревают примерно до 90°С и раствор выдерживают. Раствор охлаждают примерно до 70°С и вносят затравку очищенной кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина В6, суспендированную в этаноле. Затем медленно прибавляют смесь этанол/вода состава 1:1 и затем суспензию выдерживают и после этого охлаждают до 20°С. Кристаллическую форму II N-бензоилстауроспорина выделяют фильтрованием. Влажный осадок на фильтре несколько раз промывают этанолом и сушат.

Пример 8. Приготовление кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина с использованием ДМСО

В реактор помещают N-бензоилстауроспорин и ДМСО. Смесь нагревают примерно до 70°С и затем раствор выдерживают, а после этого вносят затравку очищенной кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина В6, суспендированную в этаноле. Затем к суспензии прибавляют этанол и суспензию выдерживают при 70°С, затем охлаждают примерно до 20°С. Суспензию повторно выдерживают, а затем кристаллическую форму II N-бензоилстауроспорина выделяют фильтрованием. Продукт несколько раз промывают этанолом и сушат.

Пример 9. Приготовление кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина с использованием ДМФ

В реактор помещают N-бензоилстауроспорин и ДМФ. Смесь нагревают примерно до 70°С, выдерживают и затем вносят затравку очищенной кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина В8 в этаноле. Затем к суспензии прибавляют этанол и суспензию выдерживают примерно при 70°С, а после этого ее охлаждают примерно до 20°С. Суспензию повторно выдерживают, а после этого кристаллическую форму II N-бензоилстауроспорина выделяют фильтрованием. Продукт несколько раз промывают этанолом и сушат.

Пример 10. Приготовление кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина с использованием ТГФ

В реактор помещают аморфный N-бензоилстауроспорин и ТГФ. Смесь нагревают примерно до 65°С, выдерживают и затем вносят затравку кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина В6 в ТГФ. Суспензию выдерживают, затем охлаждают примерно до 20°С и повторно выдерживают, а затем кристаллическую форму II N-бензоилстауроспорина выделяют фильтрованием. Продукт несколько раз промывают с помощью ТГФ и сушат.

Пример 11. Приготовление кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина с использованием этанола

В реактор помещают аморфный N-бензоилстауроспорин и этанол. Смесь нагревают примерно до 70°С, выдерживают и затем вносят затравку кристаллической формы II N-бензоилстауроспорина В6 в этаноле. Суспензию выдерживают, охлаждают примерно до 20°С и повторно выдерживают, а затем кристаллическую форму II N-бензоилстауроспорина выделяют фильтрованием. Продукт несколько раз промывают этанолом и сушат.

Пример 12. Эксперимент по распылительной сушке с получением аморфного РKС412

Загружаемый раствор получают растворением 10 г РKС412 (кристаллическая форма II) примерно в 160 г дихлорметана. Загружаемый раствор готов к распылению на капельки, из которых органический растворитель испаряется в сушильной камере с помощью нагретого азота, что приводит к образованию аморфного РKС412. Температура на входе устанавливается равной 60°С, а температура на выходе устанавливается равной 40°С. Содержание остаточного растворителя после распылительной сушки составляет примерно 1 мас./мас.%. РKС412 дополнительно сушат в вакууме и получают не содержащий растворителя материал.

Пример 13. Эксперимент по распылительной сушке с получением аморфного РKС412

Загружаемый раствор получают растворением 7 г РKС412 (кристаллическая форма II) примерно в 400 г ТГФ. Загружаемый раствор готов к распылению на капельки, из которых органический растворитель испаряется в сушильной камере с помощью нагретого азота, что приводит к образованию аморфного РKС412. Температура на входе устанавливается равной 110-120°С, а температура на выходе устанавливается равной 70-80°С. Содержание остаточного растворителя после распылительной сушки составляет примерно 3 мас./мас.%. РKС412 дополнительно сушат в вакууме и получают не содержащий растворителя материал.

Пример 14. Эксперимент по распылительной сушке с получением аморфного РKС412

Загружаемый раствор получают растворением 7 г РKС412 (кристаллическая форма II) примерно в 350 г смеси этанол/уксусная кислота 70:30 мас./мас. Загружаемый раствор готов к распылению на капельки, из которых органический растворитель испаряется в сушильной камере с помощью нагретого азота, что приводит к образованию аморфного РKС412. Температура на входе устанавливается равной 215°С, а температура на выходе устанавливается равной 120°С. Содержание остаточного растворителя после распылительной сушки составляет менее 0,5%. Обычная дополнительная сушка не требуется.

Пример 15. Таблетки, содержащие кристаллическую форму II N-бензоилстауроспорина

Таблетки, содержащие 100 мг указанного активного вещества, обычно готовят при следующем составе:

Состав	Количество (мг)
Активный ингредиент	100
Кристаллическая лактоза	240
Авицел	80
PVPPXL	20
Аэросил	2
Стеарат магния	5
Всего	447

Приготовление: активное вещество смешивают с носителями и прессуют на таблетирующей машине (Korsch ЕKО, диаметр штампа 10 мм).

Авицел представляет собой микрокристаллическую целлюлозу (FMC, Philadelphia, USA).

PVPPXL представляет собой сшитый поливинилпирролидон (BASF, Germany).

Аэросил представляет собой диоксид кремния (Degussa, Germany).

Пример 16. Капсулы, содержащие кристаллическую форму II N-бензоилстауроспорина

Капсулы, содержащие 100 мг указанного активного вещества, обычно готовят при следующем составе:

Состав	Количество (мг)
Активный ингредиент	100
Авицел	200
PVPPXL	15
Аэросил	2
Стеарат магния	1,5
Всего	318,5

Капсулы готовят путем смешивания компонентов и помещения смеси в капсулы из твердого желатина размера 1.