способ стимуляции репаративных и трофических процессов в коже

Формула изобретения

Способ стимуляции репаративных и трофических процессов в коже, включающий забор крови, центрифугирование с получением препарата плазмы, богатой тромбоцитами, внутридермальное введение полученного препарата в объеме на курс, определяемый степенью заболевания, отличающийся тем, что после проведения центрифугирования в препарате плазмы определяют количество активных тромбоцитов Та, и при значении 60<Та<80% вводят 3-5 мл за сеанс, при 40<Та<60% вводят 5-8 мл за сеанс, при Та<40% вводят 8-10 мл за сеанс, при Та>80% вводят 1-3 мл за сеанс.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, в частности к дерматологии и косметологии.

Метод плазмотерапии считается одним из актуальных и востребованных направлений развития современной эстетической медицины. Плазма представляет собой высокоактивную биологическую среду, в состав которой входят различные соли (электролиты), белки, липид, углеводы, продукты обмена, гормоны, ферменты, витамины и растворенные в ней газы. Показаниями к применению препаратов на основе аутологичной или аллогенной плазмы крови являются возрастные изменения кожи лица и тела, фотоповреждение, угревая болезнь, гипотрофические рубцы и стрии, диффузное поредение волос и др.

Известен способ омоложения кожи лица и шеи у женщин, включающий интрадермальное введение собственной нативной плазмы в область лица и шеи (Патент РФ № 2405572, МПК A61M 1/34, A61K 35/16, A61P 17/00, публ. 2010 г.). Для выполнения способа проводят плазмаферез в режиме прерывисто-поточной сепарации с забором 800-1000 мл крови, одновременно осуществляют интрадермальное введение нативной плазмы в общем объеме 5-10 мл.

Недостатками этого способа является его трудоемкость, необходимость проведения пациентке процедур плазмафереза, требующих наличия дорогостоящего оборудования и затрат времени, а также низкая эффективность способа вследствие недостаточного содержания биологически активных веществ в полученном препарате плазмы. Кроме того, способ подразумевает взятие у пациента достаточно большого объема цельной крови - до 1000 мл, что может негативно отразиться на состоянии здоровья женщины.

Известен способ стимуляции репаративных и трофических процессов в тканях организма (патент РФ № 02095067, МПК A61K 35/14, публ. 1997 г.), включающий введение аутологичного препарата крови, полученного вследствие агрегации тромбоцитов, выделенных с плазмой крови под воздействием тромбина, и отделения агрегантов центрифугированием.

Недостатками этого способа является необходимость манипуляций, связанных с необходимостью дополнительной стимуляции тромбоцитов тромбином; а также снижение эффективности препарата за счет удаления тромбоконцентрата, который в свою очередь содержит многочисленные биологически активные вещества и соответственно обладает выраженной биологической активностью, кроме того, авторами рекомендован парентеральный способ введения, включающий внутривенные инъекции лечебного препарата.

Наиболее близким к заявляемому является способ стимуляции репаративных процессов в коже (Ахмеров Р., Зарудий Р., Рычкова И., Бочкова О. Плазмолифтинг (Plasmolifting) - лечение возрастной атрофии кожи богатой тромбоцитами аутоплазмой // Эстетическая медицина. - 2011. - Том X, № 2. - С.181-187). Способ заключается в том, что осуществляют забор крови, центрифугируют с получением препарата плазмы, богатой тромбоцитами, а затем внутридермально вводят полученный препарат в объеме на курс, определяемый степенью заболевания. В этом способе венозную кровь в объеме 36 мл заготавливают в 4 пробирки объемом по 9 мл с антикоагулянтом (гепаринатом натрия), далее для получения БоТП кровь дважды центрифугируют: сначала 5 минут при скорости 500-800 об/мин, отделяют эритроцитарный сгусток, а затем надосадок центрифугируют повторно при 1000 об/мин в течение 5-7 мин, разделяют на 2 фракции: плазму, обогащенную тромбоцитами и плазму, обедненную тромбоцитами. Препарат БоТП вводится в дерму или подкожно.

Недостатками данного способа являются отсутствие возможности оценивать эффективность процедуры и индивидуализировать дозировку вводимого пациенту препарата БоТП, а также необходимость дополнительных манипуляций со взвесью тромбоцитов, связанных с двойным центрифугированием, отрицательно влияющим на морфофункциональное состояние тромбоцитов и снижающим биологическую активность БоТП.

Задачей предлагаемого изобретения является устранение вышеуказанных недостатков, сокращение времени получения лечебного препарата БоТП, повышение эффективности терапии за счет оценки биологической активности БоТП по количеству активных тромбоцитов, а также исключение необходимости использования дополнительного оборудования, дорогостоящих растворов и реактивов.

Для этого в способе стимуляции репаративных и трофических процессов в коже, включающем забор крови, центрифугирование с получением препарата плазмы богатой тромбоцитами, внутридермальное введение полученного препарата в объеме на курс, определяемый степенью заболевания, предложено после проведения центрифугирования в препарате плазмы определять количество активных тромбоцитов Ta, и при значении 60<Ta<80% вводить 3-5 мл за сеанс, при 40<Ta 60% вводить 5-8 мл за сеанс, при Ta 40% вводить 8-10 мл за сеанс, при Ta 80% вводить 1-3 мл за сеанс.

Использование богатой тромбоцитами плазмы (БоТП) позволяет значительно повысить эффективность проводимого лечения. При этом известно, что тромбоциты в плазме существуют в нескольких функциональных состояниях (неактивные, активные, дегенеративные).

В условиях физиологической нормы подавляющее большинство тромбоцитов представлено неактивными формами - плоскими, округлыми клетками дискоидной формы - дискоцитами. В процессе активации происходит сферализация дисков, связанная с перестройкой цитоскелета и структуры грануломера клеток, и последующее появление 1-3 коротких (меньше диаметра клетки) отростков (при низком уровне активности тромбоцитов) или 2-5 длинных (больше диаметра клетки) отростков-«антенн» (при высоком уровне активности). Эти тромбоциты составляют группу функционально активных клеток. Тромбоциты неправильной формы с неровной бугристой поверхностью, большим количеством отростков различной длины и многочисленными вакуолями относят к дегенеративно-измененным, исчерпавшим свой функциональный резерв клеткам.

Присутствие высокой концентрации активных тромбоцитов, реализующих через реакцию выброса секрецию уникального комплекса биологически активных соединений (факторов роста, антимикробных пептидов, серотонина, гистамина и т.д.) может многократно усилить лечебный эффект.

Обоснованием использования БоТП в лечении целого ряда дерматологических заболеваний являются регистрируемая нормализация процессов кератинизации; проявление выраженной противоспалительной активности, связанной с повышением в очаге воспаления хемотаксиса гранулоцитов, макрофагов и фибробластов; антибактериальное действие за счет присутствия в плазме антимикробного пептида дефензина-3 в бактериостатической концентрации; увеличение способности моноцитов к трансформации в макрофаги и клетки Лангерганса; повышение уровня RANTES (антимикробного пептида, регулятора Т-клеточной экспрессии и секреции) и липоксина А4 (метаболита арахидоновой кислоты, ингибирующего ряд эффектов лейкотриена, местное увеличение концентрации основных факторов роста, представленных тромбоцитарным фактором роста (PDGF), трансформирующим фактором роста (TGF), фактором роста эндотелия сосудов (VEGF) и эпидермальным фактором роста (EGF); оптимизация процессов регенерации, обеспечивающих профилактику формирования постакневых рубцов и коррекцию уже существующих.

На фиг.1, 2 представлены фототрихограммы до и после лечения, соответственно (пример 1); на фиг.3, 4 - то же, пример 2; на фиг 5, 6 - фото пациентки с угревой болезнью до и после лечения соответственно (пример 3); на фиг.7, 8 - то же, пример 4.

Способ осуществляется следующим образом.

У пациентов для получения БоТП заготавливают кровь из локтевой вены в объеме 20-30 мл. После однократного центрифугирования при 1000 об/мин в течение 5-7 минут получают плазму, обогащенную тромбоцитами, которую в дальнейшем используют по назначению. Забирают 100 мкл БоТП и с помощью фазово-интерференционного микроскопа исследуют живые тромбоциты в режиме реального времени, проводя анализ количества активных тромбоцитов. В среднем общее количество тромбоцитов в препарате БоТП составляет 0,8-1×10⁶ /мл.

По особенностям морфологической формы определяют количество активных тромбоцитов Ta в препарате плазмы, и при значении 60<Ta<80% от общего количества тромбоцитов, вводят 3-5 мл за сеанс, при 40<Ta 60% вводят 5-8 мл за сеанс, при Ta 40% вводят 8-10 мл за сеанс, при Ta 80% вводят 1-3 мл за сеанс.

Курс лечения составляет от 3 до 6 процедур в течение 1 года с интервалом не менее 3 недель между процедурами. Однако в ряде случаев при высоком содержании активных тромбоцитов в препарате выраженный эффект наблюдается уже после первой процедуры. Длительности эффекта БоТП сохраняется в течение 6-7 месяцев.

Эффективность предлагаемого способа стимуляции репаративных и трофических процессов в коже доказана на примере обследования и лечения в лечении угревой болезни (37 пациентов), диффузной и андрогенетической алопеции (65 пациентов), а также в коррекции возрастных изменений кожи (115 пациентов). Полученные результаты позволяют реализовать принцип индивидуализированного подхода к подбору дозы БоТП, оптимизировать методику лечения различных состояний и избежать нежелательных побочных эффектов.

Пример 1

Пациентка А., 31 год, диагноз: андрогенетическая алопеция. Жалобы на поредение волос в течение 5 лет. До начала лечения плотность волос в андрогензависимой зоне составляла 181/см². Процент волос в стадии телогена (выпадения) составил 24,5%, из них веллусных (пушковых) волос - 58%.

У пациентки для получения БоТП заготовили кровь из локтевой вены в объеме 20 мл, центрифугировали при 1000 об/мин в течение 7 минут, получили препарат плазмы, обогащенный тромбоцитами. Забрали 100 мкл БоТП и на фазово-интерференционном микроскопе исследовали живые тромбоциты в режиме реального времени: проводили анализ с определением общего количества тромбоцитов, которое составило 0,91×10⁶/мл, из них содержание активных тромбоцитов в БоТП составило 73%. Пациентке подкожно ввели 5 мл БоТП за 1 сеанс. Через 5 дней после процедуры отмечено прекращение выпадения волос. Через 3 сеанса, проводимых через 21 день, отмечено увеличение плотности волос до 200/см² . Процент волос в стадии телогена составил 32%), из них веллусных - 65%.

Фототрихограмма до начала лечения в андрогензависимой зоне:

Анагеновых всего 78,7%.

Телогеновых всего 21,3%.

Терминальных среди анагеновых - 89%.

Терминальных среди телогеновых - 50%.

Веллус среди анагеновых - 11%.

Веллус среди телогеновых - 50%.

Площадь - 27.0 кв.мм.

Всего волос - 174,1 на кв.см (терминальные - 81%, веллус - 19%).

Всего подсчитано - 47 волос

Фототрихограмма через 3 сеанса в андрогензависимой зоне:

Анагеновых всего 69,8%.

Телогеновых всего 30,2%.

Терминальных среди анагеновых - 95%.

Терминальных среди телогеновых - 31%.

Веллус среди анагеновых - 5%.

Веллус среди телогеновых - 69%.

Площадь - 27,0 кв.мм.

Всего волос - 200,0 на кв.см (терминальные - 76%, веллус - 24%).

Всего подсчитано - 54 волос.

Увеличение процента волос в стадии телогена можно объяснить увеличением плотности за счет веллуса, для которого характерна короткая стадия анагена. Получено визуальное подтверждение уменьшения зоны поредения волос. Участки улучшения роста волос, маркированные кругами синего цвета, представлены на фототрихограмме (фиг.1, 2).

Пример 2

Пациентка Д., 36 год. Диагноз: андрогенетическая алопеция. Жалобы на постепенно прогрессирующее выпадение и поредение волос в течение 3 лет. До начала лечения плотность волос в андрогензависимой зоне составляла 277/см². Процент волос в стадии телогена - 16,7%, из них веллусных 67%.

Получение БоТП проводили по указанному выше способу. Общее количество тромбоцитов в БоТП составило 0,85×10⁶/мл, содержание активных тромбоцитов - 57%. Пациентке подкожно ввели за 1 сеанс 7 мл БоТП. Через 6 дней после процедуры отмечено прекращение выпадения волос. Через 3 сеанса, которые были сделаны с интервалом 24 дня, отмечено увеличение плотности волос до 307/см² и снижение выпадения волос. Процент волос в стадии телогена - 10%, из них веллусных 88%. Отмечено хорошее утолщение волос.

Фототрихограмма до начала лечения в андрогензависимой зоне:

Анагеновых всего 83,3%.

Телогеновых всего 16,7%.

Терминальных среди анагеновых - 83%.

Терминальных среди телогеновых - 33%.

Веллус среди анагеновых - 17%.

Веллус среди телогеновых - 67%.

Площадь - 27,0 кв.мм.

Всего волос - 277,8 на кв.см, (терминальные - 76%, веллус - 24%.

Всего подсчитано - 75 волос

Фототрихограмма через 3 сеанса в андрогензависимой зоне:

Анагеновых всего 90,0%.

Телогеновых всего 10,0%.

Терминальных среди анагеновых - 86%.

Терминальных среди телогеновых - 12%.

Веллус среди анагеновых - 14%.

Веллус среди телогеновых - 88%.

Площадь - 27,0 кв.мм.

Всего волос - 307,4 на кв.см, (терминальные - 80%, веллус - 20%.

Всего подсчитано - 83 волоса.

Участки улучшения роста волос, после проведенных процедур, маркированные кругами синего цвета, представлены на фототрихограмме (фиг.3, 4).

Пример 3

Пациентка Т., 19 лет. Впервые угревые высыпания на лице появились в 19 лет. По поводу лечения акне была проведена следующая терапия: наружно - зинерит (2 раза в сутки в течение 1,5 месяцев), для смягчения и предотвращения раздражения кожи - лосьон клерасил. Результат проведенного лечения оказался незначительным. По шкале оценки выраженности симптомов угревой болезни по методу C.H.Cook et al. определена третья степень выраженности угревой болезни - на 1/2 поверхности лица имеются небольшие папулы, незначительное количество пустулезных элементов, кожа раздражена, инфильтраты единичны.

Получение БоТП проводили по указанному выше способу. Общее количество тромбоцитов в БоТП составило 0,8×10⁶/мл, содержание активных тромбоцитов - 38%. Пациентке подкожно ввели 9 мл БоТП на области вокруг воспалительных элементов. Отмечено значительное улучшение состояния своей кожи. Количество папулезных элементов уменьшилось, инфильтраты исчезли, гиперемия заметно ослабела (фиг.5, 6). Проведение повторных сеансов не потребовалось.

Пример 4

Пациентка Р., 46 лет, предъявляла жалобы на систематические высыпания папуло-пустулезных элементов, сопровождавшихся болевыми ощущениями, которые появлялись в периоральной области в последнюю неделю менструального цикла. Чтобы облегчить свое состояние пациентка пользовалась топическими антибактериальными средствами с противовоспалительным эффектом. Локально на угревые высыпания наносила салициловый спирт. В качестве гигиенического ухода за жирной кожей ежедневно применяла керато- и себорегулирующий крем с полигидроксикислотами (Keracnyl). Однако эффект от проводимой терапии сохранялся ненадолго.

Учитывая легкую степень выраженности угревой сыпи (не более 10 папуло-пустулезных высыпаний - «легкая степень» - по шкале оценки выраженности симптомов угревой болезни по методу C.H.Cook et al.).

Получение БоТП проводили по указанному выше способу. Общее количество тромбоцитов в БоТП составило 0,9×10⁶/мл, содержание активных тромбоцитов - 85%. Пациентке подкожно ввели 1,5 мл БоТП на области вокруг воспалительных элементов. Через 10 дней после процедуры пациентка отметила ярко-выраженный результат лечения. Клиническая ремиссия выражалась в разрешении папул, исчезновении плотных подкожных инфильтратов, выравнивания рельефа кожи (фиг.7, 8). Субъективно на коже лица уменьшились симптомы жирной себореи.

В связи с хорошим терапевтическим эффектом и клинической ремиссией, наступившей после первой же процедуры (в течение 2 месяцев с момента проведения сеанса плазмотерапии повторные высыпания не наблюдались), необходимость в последующих инъекциях отпала.

Предлагаемый способ обеспечивает достижение хорошего клинического эффекта и улучшение эстетического состояния кожных покровов, а также позволяет снять состояние психологического дискомфорта и повысить качество жизни пациентов.