замещенные амиды, фармацевтическая композиция на их основе, способ лечения заболевания, чувствительного к btk, способ повышения чувствительности раковых клеток к химиотерапии, способ уменьшения ошибок при приеме лекарства и улучшения соблюдения схемы лечения, способ ингибирования гидролиза атф, способ определения присутствия btk в образце и способ ингибирования активности в-клеток
| Классы МПК: | C07D241/08 с атомами кислорода, непосредственно связанными с атомами углерода кольца A61P35/00 Противоопухолевые средства |
| Автор(ы): | БЛОМГРЭН Питер А. (US), ЖИЧКИН Павел Е. (US), КАРРИ Кевин С. (US), КРОПФ Джеффри Е. (US), ЛИ Сэун Х. (US), Митчел Скотт А. (US), СТЭФФОД Даглас Дж. (US), СЮЙ Цзяньцзюнь (CN), ЧЖАО Чжундун (CA), ШМИТТ Арон С. (US) |
| Патентообладатель(и): | ДЖИЛИД КОННЕКТИКУТ, ИНК. (US) |
| Приоритеты: |
подача заявки:
2008-09-19 публикация патента:
27.12.2012 |
В настоящем изобретении описаны замещенные амиды, которые ингибируют Btk. Описаны фармацевтические композиции, включающие по меньшей мере одно из соединений вместе с по меньшей мере одной фармацевтически приемлемой средой, выбранной из носителей, вспомогательных компонентов и наполнителей. Описаны способы лечения больных, страдающих от ряда заболеваний, чувствительных к ингибированию активности Btk и/или активности В-клеток. Описаны способы определения присутствия Btk в образце. 8 н. и 50 з.п. ф-лы, 17 пр.
Формула изобретения
1. Замещенные амиды, охватываемые общей структурной формулой I
где Х представляет собой N или CR2 ,
Y представляет собой N или CR3,
Z представляет собой N или CR3, при условии, что только одно из X, Y и Z представляет собой N одновременно,
W представляет собой N,
V представляет собой СН,
R1 выбран из группы, включающей
, 
, 
, 
, 
, 
, 
,
, 
, 
, 
, 
, 
,
и 
,
R2 выбран из группы, включающей Н, СН3, F, Cl и CN,
R2' выбран из группы, включающей Н и F,
R3 выбран из группы, включающей Н, СН3, F, Cl, CN и ОСН3 ,
R3' выбран из группы, включающей Н, СН3, F, Cl, CN и ОСН3,
R4 представляет собой
;
m представляет собой 0 или 1,
n представляет собой 0 или 1,
R5 выбран из группы, включающей Н и C1-С6алкил, причем указанный алкил необязательно замещен по меньшей мере одним заместителем, выбранным из группы, включающей ОН, F и ОСН3, R6 выбран из группы, включающей Н и C1-С6алкил, или R5 и R6 необязательно взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 4-6-членного циклического кольца, имеющего 0-1 дополнительный атом N или О, причем необязательный дополнительный атом азота цикла необязательно замещен C1-С3алкилом и указанное циклическое кольцо необязательно замещено ОН, R7 выбран из группы, включающей Н и C1-С6алкил, причем указанный алкил необязательно замещен по меньшей мере одним заместителем, выбранным из группы, включающей ОН и O(С1-С4 алкил), или R6 и R7
необязательно взяты вместе с - N(R5)C(R9)(СН2 )nС(=O)N(R8)-группой посредством соответствующих атомов азота, к которым они непосредственно присоединены с образованием 6-членного циклического кольца,
R8 выбран из группы, включающей Н и C1-С6алкил, причем указанный алкил необязательно замещен по меньшей мере одним заместителем, выбранным из группы, включающей ОН, F и ОСН3, или R7 и R8 необязательно взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 4-6-членного циклического кольца, имеющего 0-1 дополнительный атом N или О, причем необязательный дополнительный атом азота цикла необязательно замещен C1-С3алкилом и указанное циклическое кольцо необязательно замещено ОН,
R9 выбран из группы, включающей Н и СН3,
R10 выбран из группы, включающей ОН, Н и C1-С3 алкил, необязательно замещенный N(R9)2,
R11 выбран из группы, включающей Н, СН3 , и
R12 представляет собой C1-С 3алкил,
или их фармацевтически приемлемые соли или сольваты либо их смесь.
2. Соединения по п.1, в которых R11 представляет собой СН3.
3. Соединения по п.2, в которых W представляет собой N, а V представляет собой СН.
4. Соединения по п.3, в которых Х представляет собой CR2.
5. Соединения по п.3, в которых Х представляет собой N.
6. Соединения по п.3, в которых Y представляет собой CR3.
7. Соединения по п.3, в которых Y представляет собой N.
8. Соединения по п.3, в которых Z представляет собой CR3.
9. Соединения по п.3, в которых Z представляет собой N.
10. Соединения по п.3, которые представляют собой соединения структурной формулы VIII
11. Соединения по п.10, в которых R2' представляет собой F.
12. Соединения по п.10, в которых R2' представляет собой Н.
13. Соединения по п.12, в которых R1 выбран из группы, включающей
, 
, , 
, 
и ;
R2 выбран из группы, включающей Н, СН3, F и Сl,
R3 выбран из группы, включающей Н, СН3, F и Сl,
R3' выбран из группы, включающей Н, СН3, F и Сl,
R5 выбран из группы, включающей Н и C1-С 6алкил,
R6 выбран из группы, включающей Н и C1-С6алкил, или R5 и R 6 необязательно взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 6-членного циклического кольца, имеющего 0-1 дополнительный атом N или О, причем необязательный дополнительный атом азота цикла необязательно замещен C1 -С3алкилом,
R8 выбран из группы, включающей Н и C1-С6алкил, или R7 и R8 необязательно взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 4-6-членного циклического кольца, имеющего 0-1 дополнительный атом N или О, причем необязательный дополнительный атом азота цикла необязательно замещен C1 -С3алкилом, R10 выбран из группы, включающей Н или C1-С3алкил, и R11 представляет собой СН3.
14. Соединения по п.12, в которых m означает 0, и n означает 0.
15. Соединения по п.14, в которых R1 выбран из группы, включающей , и .
16. Соединения по п.12, в которых R2 выбран из группы, включающей Н, СН3, F и Сl.
17. Соединения по п.15, в которых R2 выбран из группы, включающей СН3, F и Сl.
18. Соединения по п.17, в которых R2 представляет собой СН3.
19. Соединения по п.17, в которых R3 выбран из группы, включающей Н, СН3, F и Сl.
20. Соединения по п.19, в которых R3 представляет собой Н.
21. Соединения по п.20, в которых R3 выбран из группы, включающей Н, СН3, F, Сl и CN.
22. Соединения по п.21, в которых R3 представляет собой Н.
23. Соединения по п.21, в которых R5 выбран из группы, включающей Н и C1-С3алкил, необязательно замещенный ОН.
24. Соединения по п.21, в которых R 5 выбран из группы, включающей Н и C1-С 6алкил.
25. Соединения по п.23, в которых R6 выбран из группы, включающей Н и C1-С3 алкил.
26. Соединения по п.21, в которых R5 и R6 взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием азетидинила, N-метилпиперазинила, N-этилпиперазинила или морфолинила.
27. Соединения по п.23, в которых R 7 выбран из группы, включающей Н, метил, этил, -(СН 2)2OН и -(СН2)2OСН 3.
28. Соединения по п.23, в которых R6 и R7 взяты вместе с группой -N(R5)C(R 9)(CH2)nC(=O)N(R8) посредством соответствующих атомов азота, к которым они непосредственно присоединены с образованием
29. Соединения по любому из пп.1-28, в которых R 8 выбран из группы, включающей Н и C1-С 3алкил.
30. Соединения по любому из пп.1-26, в которых R7 и R8 взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 4-6-членного циклического кольца, имеющего 0-1 дополнительный атом N или О, причем необязательный дополнительный атом азота цикла необязательно замещен C1 -С3алкилом.
31. Соединения по любому из пп.1-26, в которых R7 и R8 взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 4- или 6-членного циклического кольца, имеющего 0-1 дополнительный атом N или О, причем необязательный дополнительный атом азота цикла необязательно замещен метилом или этилом, и указанное циклическое кольцо необязательно замещено ОН.
32. Соединения по п.31, в которых R7 и R8 взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием N-метилпиперазинила, N-этилпиперазинила, морфолинила или азетидинила, необязательно замещенного ОН.
33. Соединения по п.32, в которых R9 представляет собой Н.
34. Соединения по п.33, в которых R10 выбран из группы, включающей Н и СН3.
35. Соединения по п.34, в которых R10 представляет собой Н.
36. Соединения по п.1, выбранные из группы, включающей:
N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фторфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-(3-(6-(4-(1-(Этил(изопропил)амино)-2-((2-метоксиэтил)(метил)амино)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-(3-(6-(4-(1,2-бис(4-этилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-(3-(6-(4-(1,2-бис(4-этилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-5,6,7,8-тетрагидро-4Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-(3-(6-(4-(1-Этил-4-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид,
4-тpeт-бутил-N-(3-(6-(4-(1-этил-4-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)бензамид,
(S)-N-(3-(6-(4-(3-(Диметиламино)-2-(изопропил(метил)амино)-3-оксопропил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-(3-(6-(4-(3-(Диметиламино)-1-(изопропил(метил)амино)-3-оксопропил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид, N-(3-(6-(4-(1-амино-2-морфолино-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4-трет-бутилбензамид, 4-трет-бутил-N-(3-(6-(4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)бензамид, N-(3-(6-(4-(2-Aминo-1-(изoпpoпил(мeтил)aминo)-2-oкcoэтил)фeнилaминo)-
4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-(2-Метил-3-(4-метил-6-(4-(1-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-(3-(6-(4-(2-(Диметиламино)-1-(изопропил(метил)амино)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид,
4-трет-бутил-N-(3-(6-(4-(2-(диметиламино)-1-(изопропил(метил)амино)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)бензамид,
N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2,5-дифторфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид,
(S)-4-трет-бутил-N-(3-(6-(4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)бензамид,
(R)-4-трет-бутил-N-(3-(6-(4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)бензамид,
N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4-(этил(метил)амино)бензамид,
(R)-N-(3-(6-(4-(2-(Диметиламино)-1-(изопропил(метил)амино)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4-(1-этилциклопропил)бензамид,
4-трет-бутил-N-(3-(6-(4-(1-(4-этилпиперазин-1-ил)-2-морфолино-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)бензамид,
N-(3-(6-(4-(1-(4-Этилпиперазин-1-ил)-2-морфолино-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-(3-(6-(4-(1-(4-этилпиперазин-1-ил)-2-морфолино-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-5,6,7,8-тетрагидро-4Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-(3-(6-(4-(1,2-бис(4-этилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4-трет-бутилбензамид,
4-трет-бутил-N-(3-(6-(4-(2-(диметиламино)-1-(4-этилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)бензамид,
N-(3-(6-(4-(2-(Диметиламино)-1-(4-этилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-(3-(6-(4-(2-(Диметиламино)-1-(4-этилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-5,6,7,8-тетрагидро-4Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид,
4-трет-бутил-N-(3-(6-(4-(1-(4-этилпиперазин-1-ил)-2-((2-метоксиэтил)(метил)амино)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)бензамид,
N-(3-(6-(4-(1-(4-этилпиперазин-1-ил)-2-((2-метоксиэтил)(мeтил)aминo)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-(3-(6-(4-(1-(4-Этилпиперазин-1-ил)-2-((2-метоксиэтил)(метил)амино)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-5,6,7,8-тетрагидро-4Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-(3-(6-(4-(1-Изопропил-4-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-5,6,7,8-тетрагидро-4Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-(2-Хлор-3-(6-(4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4-(этил(метил)амино)бензамид,
N-(3-(6-(4-(1-(Этил(изопропил)амино)-2-морфолино-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-(3-(6-(4-(1-(Этил(изопропил)aминo)-2-(4-этилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-(3-(6-(4-(2-(Диметиламино)-1-(этил(изопропил)амино)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-{3-[6-({4-[2-(Азетидин-1-ил)-1-(морфолин-4-ил)-2-оксоэтил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-{2-Метил-3-[4-метил-6-({4-[(метилкарбамоил)(морфолин-4-ил)метил]фенил}амино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]фенил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-{3-[6-({4-[2-(Азетидин-1-ил)-1-[этил(пропан-2-ил)амино]-2-оксоэтил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-{3-[6-({4-[(Диметилкарбамоил)[этил(пропан-2-ил)амино]метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-{3-[6-({4-[1-(азетидин-1-ил)-2-(4-этилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-[3-(6-{[4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-{3-[6-({4-[Азетидин-1-ил(диметилкарбамоил)метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-[2-Метил-3-(4-метил-5-оксо-6-{[4-(1,2,4-триметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[5-Хлор-3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-{3-[6-({4-[Азетидин-1-ил(диметилкарбамоил)метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4-трет-бутилбензамид,
N-{3-[6-({4-[Азетидин-1-ил(диметилкарбамоил)метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-(3-{6-[(4-{Азетидин-1-ил[(2-гидроксиэтил)(метил)карбамоил]метил}фенил)амино]-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-{2-Метил-3-[4-метил-6-({4-[4-метил-3-оксо-1-(пропан-2-ил)пиперазин-2-ил]фенил}амино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]фенил}-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-{3-[6-({4-[(4-Этилпиперазин-1-ил)[(2-гидроксиэтил)(метил)карбамоил]метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-{3-[6-({4-[(Диэтилкарбамоил)(4-этилпиперазин-1-ил)метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид,
4-трет-бутил-N-(3-{6-[(4-{[этил(метил)карбамоил](4-этилпиперазин-1-ил)метил}фенил)амино]-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}-2-метилфенил)бензамид,
4-трет-бутил-N-{3-[6-({4-[(диэтилкарбамоил)(4-этилпиперазин-1 -ил)метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}бензамид,
N-[3-(6-{[4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-N-метил-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид, 4-трет-бутил-N-(2-метил-3-{4-метил-6-[(4-{1-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-(морфолин-4-ил)-2-оксоэтил}фенил)амино]-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил} фенил)бензамид,
N-{3-[6-({4-[2-(Азетидин-1-ил)-1-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-оксоэтил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4-трет-бутилбензамид,
N-{3-[6-({4-[1-(Азетидин-1-ил)-2-(морфолин-4-ил)-2-оксоэтил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-(3-{6-[(4-{Азетидин-1-ил[(2-гидроксиэтил)(метил)карбамоил]метил}фенил)амино]-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}-2-метилфенил)-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид,
4-трет-бутил-N-(2-метил-3-{4-метил-6-[(4-{1-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-(4-метилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтил}фенил)амино]-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}фенил)бензамид,
N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4-(1-метилциклопропил)бензамид,
N-(3-(6-(4-(1-Этил-4-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-5,6,7,8-тетрагидро-4Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид,
4-трет-бутил-N-(3-(6-(4-(1-изопропил-4-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)бензамид,
N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид,
(S)-N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид,
(R)-N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид, и
(S)-(+)-N-(3-(6-(4-(2-(Диметиламино)-1-(изопропил(метил)амино)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-N-метил-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-(3-{6-[(4-{1-[этил(метил)амино]-2-(4-этилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтил}фенил)амино]-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}-2-метилфенил)-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-6-[этил(метил)амино]пиридин-3-карбоксамид,
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фтор-5-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-{3-[6-({4-[2-(азетидин-1-ил)-1-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-оксоэтил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[3-(6-{[4-(4-этил-1-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[3-(6-{[4-(4-этил-1-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2,5-диметилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[5-хлор-3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-{3-[6-({4-(димeтилкapбaмoил)(мopфoлин-4-ил)мeтил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-{3-[6-({4-[(диэтилкарбамоил)(морфолин-4-ил)метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-(3-{6-[(4-{[этил(метил)карбамоил](морфолин-4-ил)метил}фенил)аминс]-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-(3-{6-[(4-{[(2-гидроксиэтил)(метил)карбамоил](морфолин-4-ил)метил}фенил)амино]-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-{3-[6-({4-[2-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-1-(морфолин-4-ил)-2-оксоэтил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-{3-[6-({4-[(диметилкарбамоил)(морфолин-4-ил)метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-{3-[6-({4-[(диэтилкарбамоил)(морфолин-4-ил)метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-{3-[6-({4-[2-(азетидин-1-ил)-1-(морфолин-4-ил)-2-оксоэтил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-{2-метил-3-[4-метил-6-({4-[(метилкарбамоил)(морфолин-4-ил)метил]фенил}амино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]фенил}-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-(3-{6-[(4-{[этил(метил)карбамоил](морфолин-4-ил)метил}фенил)амино]-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}-2-метилфенил)-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-(3-{6-[(4-{[(2-гидроксиэтил)(метил)карбамоил](морфолин-4-ил)метил}фенил)амино]-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}-2-метилфенил)-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид,
N-{3-[6-({4-[2-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-1-(морфолин-4-ил)-2-оксоэтил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид,
4-трет-бутил-N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-2-метоксибензамид,
N-[2-хлор-3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-5-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2,6-диметилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-5-метокси-2-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2,6-дифторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[5-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-фтор-2-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[2,6-дихлор-3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[6-хлор-3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[2-хлор-5-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[2-хлор-3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-фторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[2-циано-5-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[4-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-фторпиридин-2-ил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
4-трет-бутил-N-{3-[6-({4-[(S)-(диметилкарбамоил)[метил(пропан-2-ил)амино]метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}бензамид,
4-трет-бутил-N-{3-[6-({4-[(R)-(Диметилкарбамоил)[метил(пропан-2-ил)амино]метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}бензамид,
4-трет-бутил-N-[3-(6-{[4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-N-[3-(диметиламино)пропил]бензамид,
N-[6-хлор-3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1 -бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[5-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)пиридин-3-ил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[6-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)пиридин-2-ил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[2-хлор-3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[6-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-3-фторпиридин-2-ил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[6-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-5-фторпиридин-2-ил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-7-оксо-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-7-гидрокси-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
4-трет-бутил-N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-2-метилбензамид,
N-[3-(6-{[4-(1-этил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-фтор-2-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[3-(6-{[4-(1-этил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2,6-дифторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[3-(6-{[4-(1-этил-4-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2,6-дифторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[5-(6-{[4-(4-этил-1-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
4-трет-бутил-N-[6-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)пиридин-2-ил]бензамид,
N-[5-(6-{[4-(1-этил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[5-(6-{[4-(1,4-диэтил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[3-(6-{[4-(4-этил-1-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2,6-дифторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[5-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фторфенил]-7,7-дифтор-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[5-(6-{[4-(1-этил-4-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[6-(6-{[4-(1-этил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-3-фторпиридин-2-ил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[6-(6-{[4-(4-этил-1-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-3-фторпиридин-2-ил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[6-(6-{[4-(1-этил-4-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-3-фторпиридин-2-ил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[6-(6-{[4-(1,4-диэтил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-3-фторпиридин-2-ил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[3-(6-{[4-(1,4-диэтил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-фтор-2-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[3-(6-{[4-(4-этил-1-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-фтор-2-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-{5-[6-({4-[(2R)-1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-фторфенил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[3-(6-{[4-(1,4-диэтил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2,6-дифторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-{5-[6-({4-[(2S)-1,4-димeтил-3-oкcoпипepaзин-2-ил]фeнил}aминo)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-фторфенил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-{6-[6-({4-[(2S)-1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-3-фторпиридин-2-ил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-{6-[6-({4-[(2R)-1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-3-фторпиридин-2-ил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[2-фтор-5-(4-метил-6-{[4-(4-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фтор-6-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[3-(6-{[4-(1-этил-4-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-фтор-2-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[5-(6-{[4-(2,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-{5-[6-({4-[2-(азетидин-1-ил)-1-(диметиламино)-2-оксоэтил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-фторфенил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-{2-фтор-5-[6-({4-[1-(2-гидроксиэтил)-4-метил-3-оксопиперазин-2-ил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]фенил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[5-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фторфенил]-4,4-дифтор-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид,
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-4-гидрокси-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид, и
N-[3-(5-{[5-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид.
37. Фармацевтическая композиция в качестве лекарственного средства для лечения пациентов, страдающих заболеванием, чувствительным к ингибированию активности Btk (тирозинкиназа Брутона), включающая соединение по любому из пп.1-36 вместе с по меньшей мере одной фармацевтически приемлемой средой, выбранной из группы, включающей носители, вспомогательные компоненты и наполнители.
38. Фармацевтическая композиция по п.37, полученная в форме, выбранной из группы, включающей инъекционные жидкости, аэрозоли, крема, гели, таблетки, пилюли, капсулы, сиропы, офтальмологические растворы и трансдермальные пластыри.
39. Композиция по п.37, в которой заболевание, чувствительное к ингибированию активности Btk, представляет собой рак.
40. Композиция по п.37, в которой заболевание, чувствительное к ингибированию активности Btk, выбрано из группы, включающей нарушение костей, аллергические нарушения, аутоиммунные заболевания, воспалительные заболевания и острые воспалительные реакции.
41. Композиция по п.37, дополнительно включающая второй активный агент.
42. Способ лечения пациента с заболеванием, чувствительным к ингибированию активности Btk, включающий введение пациенту эффективного количества соединения по любому из пп.1-36.
43. Способ по п.42, в котором пациент является человеком.
44. Способ по п.42, в котором пациент является кошкой или собакой.
45. Способ по п.42, в котором заболеванием, чувствительным к ингибированию активности Btk, является рак.
46. Способ по п.42, в котором заболеванием, чувствительным к ингибированию активности Btk, является В-клеточная лимфома или лейкоз.
47. Способ по п.42, в котором эффективное количество указанного соединения вводят способом, выбранным из группы, включающей внутривенный, внутримышечный и парентеральный.
48. Способ по п.42, в котором эффективное количество указанного соединения вводят перорально.
49. Способ по п.42, в котором указанное заболевание выбрано из группы, включающей рак, нарушения костей, аутоиммунные заболевания, воспалительные заболевания, острые воспалительные реакции и аллергические нарушения.
50. Способ по п.49, дополнительно включающий введение пациенту эффективного количества второго активного агента.
51. Способ повышения чувствительности раковых клеток к химиотерапии, включающий введение пациенту, проходящему химиотерапию с использованием химиотерапевтического фактора, количества соединения по любому из пп.1-36, достаточного для повышения чувствительности раковых клеток к химиотерапевтическому фактору.
52. Способ уменьшения ошибок при приеме лекарства и улучшения соблюдения схемы лечения пациентом, проходящим лечение от заболевания, чувствительного к ингибированию активности Btk, включающий упаковывание фармацевтической композиции по п.37 вместе с инструкциями, которые включают информацию о противопоказаниях и побочных реакциях, относящуюся к указанной фармацевтической композиции.
53. Способ ингибирования гидролиза АТФ, включающий контактирование клеток, экспрессирующих Btk, с соединением по любому из пп.1-36, в количестве, достаточном для того, чтобы заметно снизить уровень гидролиза АТФ in vitro.
54. Способ по п.53, в котором клетки находятся в организме млекопитающего.
55. Способ по п.54, в котором млекопитающее является человеком.
56. Способ по п.54, в котором млекопитающее является кошкой или собакой.
57. Способ определения присутствия Btk в образце, включающий контактирование образца с соединением по любому из пп.1-36 в условиях, которые дают возможность детекции активности Btk, детекции уровня активности Btk в образце и на их основании определения присутствия или отсутствия Btk в образце.
58. Способ ингибирования активности В-клеток, включающий контактирование клеток, экспрессирующих Btk, с соединением по любому из пп.1-36 в количестве, достаточном для определяемого снижения активности В-клеток in vitro.
Описание изобретения к патенту
Область техники, к которой относится изобретение
Настояще изобретение относится к некоторым замещенным амидам и родственным соединениям, композициям, включающим данные соединения, и способам их применения.
Уровень техники
Протеинкиназы, самое большое семейство человеческих ферментов, охватывают значительно больше 500 белков. Тирозинкиназа Брутона (Btk) является членом семейства Тес тирозинкиназ и представляет собой регулятор раннего развития В-клеток, а также активации, передачи сигнала и выживаемости зрелых В-клеток.
Передача сигнала В-клеток через В-клеточный рецептор (BCR) может приводить к широкому кругу биологических продуктов, которые, в свою очередь, зависятот стадии развития В-клетки. Величина и продолжительность сигналов BCR должна точно регулироваться. Аберрантная BCR-опосредованная передача сигнала может вызывать нарушение регуляции активации В-клеток и/или образование патогенных аутоантител, приводящее к многочисленным аутоиммунным и/или воспалительным заболеваниям. Мутация Btk у человека приводит в результате к Х-сцепленной агаммаглобулинемии (XLA). Данное заболевание связано с нарушенным созреванием В-клеток, пониженной продукцией иммуноглобулина, аномальным независимым от Т-клеток иммунным ответам и заметному снижению постоянного кальциевого сигнала при стимуляции BCR.
Доказательство роли Btk в аллергических нарушениях, и/или аутоиммунном заболевании, и/или воспалительном заболевании получено на моделях с использованием Btk-недостаточных мышей. Например, в стандартных предклинических моделях на мышах системной красной волчанки (SLE) показано, что недостаточность Btk приводит к заметному ослаблению развития заболевания. Более того, Btk-недостаточные мыши могут быть также устойчивыми к развитию индуцированного коллагеном артрита и могут быть менее чувствительными к артриту, вызываемому Staphylococcus.
Масса доказательств поддерживает роль В-клеток и гуморальной иммунной системы в патогенезе аутоиммунных и/или воспалительных заболеваний. Терапевтические препараты на белковой основе (такие как ритуксан), разработанные для истощения В-клеток, представляют подход к лечению ряда аутоимунных и/или воспалительных заболеваний. Вследствие роли Btk в активации В-клеток ингибиторы Btk можно использовать в качестве ингибиторов опосредованной В-клетками патогенной активности (такой как продукция аутоантител).
Btk экспрессируется также в остеокластах, мастоцитах и моноцитах и, как показано, важна для функции данных клеток. Например, недостаточность Btk у мышей связана с нарушенной IgE-опосредованной активацией мастоцитов (заметным снижением высвобождения ФНО (фактор некроза опухолей)-
и других воспалительных цитокинов), и недостаточность Btk у человека связана с значительно пониженной продукцией ФНО- активированными моноцитами.
Таким образом ингибирование активности Btk можно использовать для лечения аллергических нарушений и/или аутоиммунных и/или воспалительных заболеваний, таких как: SLE, ревматоидный артрит, множественные васкулитиды, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура (ITP), злокачественная миастения, аллергический ринит и астма. Кроме того, показано, что Btk играет роль при апоптозе; таким образом, ингибирование активности Btk может быть эффективным при раке, а также при лечении В-клеточной лимфомы и лейкоза. Более того, поскольку Btk играет роль в функции остеокластов, ингибирование активности Btk можно использовать для лечения нарушений костей, таких как остеопороз.
Раскрытие изобретения
Настоящее изобретение предусматривает соединение формулы I:
и их фармацевтически приемлемые соли, сольваты и их смеси, причем Х выбрано из N и CR2;
Y выбрано из N и CR3;
Z выбрано из N и CR3, при условии, что только одно из X, Y и Z представляет собой N одновременно;
W выбрано из N и СН;
V выбрано из СН и N; при условии, что одно из W и V должно представлять собой N, и оба, W и V, не являются N;
R1 выбрано из:
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
,
, 
, 
, и 
;
R2 выбрано из Н, СН3 , F, Cl, CN, ОСН3, ОН и CF3;
R2' выбрано из Н и F;
R3 выбрано из Н, СН3, CF3, F, Cl, CN и ОСН 3;
R3' выбрано из Н, СН 3, F, Cl, CN и ОСН3;
R4 представляет собой
;
m выбрано из 0 и 1;
n выбрано из 0 и 1;
R5 выбрано из Н, С1 -С6алкила и С3-С6циклоалкила, причем указанный алкил необязательно замещен одним или более заместителей, выбранных из ОН, F и ОСН3;
R6 выбрано из Н и С1-С6алкила или R5 и R6 необязательно взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 4-6-членного циклического кольца, имеющего 0-1 дополнительный атом N, S или О, причем необязательный дополнительный атом азота цикла необязательно замещен С1-С3алкилом и указанное циклическое кольцо необязательно замещено ОН;
R7 выбрано из Н, С1-С6алкила и С3 -С6циклоалкила, причем указанный алкил необязательно замещен одним или более заместителей, выбранных из ОН и O(С 1-С4алкила) или R6 и R7 необязательно взяты вместе с -N(R5)C(R9 )(CH2)nC(=O)N(R8)-группой посредством соответствующих атомов азота, к которым они непосредственно присоединены с образованием 6-членного циклического кольца;
R8 выбрано из Н и С1-С6алкила, причем указанный алкил необязательно замещен одним или более заместителей, выбранных из ОН, F и ОСН3, или R 7 и R8 необязательно взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 4-6-членного циклического кольца, имеющего 0-1 дополнительный атом N, S или О, причем необязательный дополнительный атом азота цикла необязательно замещен С1 -С3алкилом и указанное циклическое кольцо необязательно замещено ОН;
R9 выбрано из Н и СН 3;
R10 выбрано из ОН, Н и С 1-С3алкила, необязательно замещенного N(R 9)2;
R11 выбрано из Н, СН3 и CF3; и
R12 представляет собой С1-С3алкил.
Предусматривают фармацевтическую композицию, содержащую соединение, соответствующее любой из формул I-IX, вместе с по меньшей мере одной фармацевтически приемлемой средой, выбранной из носителей, вспомогательных компонентов и наполнителей.
Предусматривают упакованную фармацевтическую композицию, содержащую фармацевтическую композицию, описанную в данном контексте, и инструкции по использованию композиции для лечения пациента, страдающего от заболевания, чувствительного к ингибированию активности Btk.
Предусматривают способ лечения пациента с заболеванием, чувствительным к ингибированию активности Btk, включающий введение пациенту эффективного количества соединения, соответствующего любой из формул I-IX.
Предусматривают способ лечения пациента с заболеванием, выбранным из рака, нарушений костей, аутоиммунных заболеваний, воспалительных заболеваний, острых воспалительных реакций и аллергических нарушений, включающий введение пациенту эффективного количества соединения, соответствующего любой из формул I-IX.
Предусматривают способ повышения чувствительности раковых клеток к химиотерапии, включающий введение пациенту, проходящему химиотерапию с использованием химиотерапевтического фактора, количества соединения, соответствующего любой из формул I-IX, достаточного для повышения чувствительности раковых клеток к химиотерапевтическому фактору.
Предусматривают способ уменьшения ошибок при приеме лекарства и улучшения соблюдения схемы лечения пациентом, проходящим лечение от заболевания, чувствительного к ингибированию активности Btk, причем способ включает получение упакованного фармацевтического препарата, описанного в данном контексте, в котором инструкции дополнительно содержат информацию о противопоказаниях и побочных реакциях, относящуюся к упакованной фармацевтической композиции.
Предусматривают способ ингибирования гидролиза АТФ, причем способ включает контактирование клеток, экспрессирующих Btk, с соединением, соответствующим любой из формул I-IX, в количестве, достаточном для того, чтобы заметно снизить уровень гидролиза АТФ in vitro.
Предусматривают способ определения присутствия Btk в образце, включающий контактирование образца с соединением, соответствующим любой из формул I-IX, в условиях, которые дают возможность определить активность Btk, определить уровень активности Btk в образце и на их основании установить присутствие или отсутствие Btk в образце.
Предусматривают способ ингибирования активности В-клеток, включающий контактирование клеток, экспрессирующих Btk, с соединением, соответствующим любой из формул I-IX, в количестве, достаточном для того, чтобы определяемо понизить активность В-клеток in vitro.
Как используют в настоящем определении, предусматривают, что в основном следующие слова и выражения имеют значения, как представлено ниже, за исключением случаев, когда контекст, в котором их используют, указывает на иное. Следующие сокращения и термины имеют указанные значения на протяжении всего материала.
Как используют в данном контексте, когда какая-либо переменная больше одного раза встречается в химической формуле, ее определение в каждом случае независимо от ее определения в каждом другом появлении. В соответствии с принятой практикой значение какого-либо и конкретного объекта в патентах касательно, например, какой-либо киназы либо соединения или конкретной киназы или соединения, включает одну или более киназ или соединений. Разорванная связь 
указывает на точку присоединения.
Как используют в данном контексте, термин "алкил" охватывает неразветвленную цепь и разветвленную углеводородную цепь, имеющую указанное количество атомов углерода. Например, термин С1-С6 алкил охватывает алкил, как с неразветвленной, так и с разветвленной цепью из 1-6 атомов углерода. Примеры алкильных групп включают метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, 2-пентил, изопентил, неопентил, гексил, 2-гексил, 3-гексил, 3-метилпентил и т.п. Когда называют алкильный остаток, имеющий специфическое количество атомов углерода, предусматривают, что должны быть охвачены все геометрические изомеры, имеющие данное количество атомов углерода; таким образом, например, полагают, что термин "бутил" включает н-бутил, втор-бутил, изобутил и трет-бутил; термин "пропил" включает н-пропил и изопропил.
Как используют в данном контексте, термин "модуляция" относится к изменению активности киназы в качестве прямого или непрямого ответа на присутствие соединений, описанных в данном контексте, относительно активности киназы в отсутствие соединения. Изменение может представлять собой повышение активности или снижение активности и может быть обусловлено взаимодействием соединения с одним или более других факторов, которые, в свою очередь, воздействуют на активность киназы. Например, присутствие соединения, может, в частности, повышать или снижать активность киназы путем непосредственного связывания с киназой, являясь причиной (прямо или косвенно) того, что другой фактор повышает или снижает активность киназы, или путем (прямого или косвенного) увеличения или уменьшения количества киназы, присутствующей в клетке или организме.
Соединения, соответствующие какой-либо из формул I-IX, включают, но без ограничения перечисленным, оптические изомеры формул I-IX, их рацематы и другие смеси. В данных случаях отдельные энантиомеры или диастереомеры, т.е. оптически активные формы, можно получить асимметричным синтезом или путем разделения рацематов. Разделение рацематов можно осуществить, например, с помощью принятых способов, таких как кристаллизация в присутствии растворителя или хроматография с использованием, например, колонки для хиральной высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Кроме того, соединения включают Z- и Е-формы (или цис- и транс-формы) соединений с двойными углерод-углеродными связями. Когда соединения находятся в различных таутомерных формах, химические структуры, соответствующие настоящему изобретению, включают все таутомерные формы соединения. Соединения также включают кристаллические формы, содержащие полиморфы и клатраты.
Настоящее изобретение включает, но без ограничения перечисленным, соединения, соответствующие формулам I-IX, и их фармацевтически приемлемые формы. Фармацевтически приемлемые формы соединений, приведенные в данном контексте, включают фармацевтически приемлемые соли, сольваты, пролекарственные формы и их смеси. В ряде вариантов осуществления соединения, описанные в данном контексте, находятся в форме фармацевтически приемлемых солей. Соединения, соответствующие данному изобретению, остаются частью данного изобретения, даже когда они находятся в форме химической ассоциации с другими химическими молекулами в виде хелата или нековалентного комплекса. Термины "соединение" и "химическая структура" в данном контексте используют взаимозаменяемо.
Термин "фармацевтически приемлемые соли" включают, но без ограничения перечисленным, соли, образованные с неорганическими кислотами, такие как гидрохлорат, фосфат, дифосфат, гидробромат, сульфат, сульфинат, нитрат и подобные соли, а также соли, образованные с органической кислотой, такие как малат, малеат, фумарат, тартрат, сукцинат, цитрат, ацетат, лактат, метансульфонат, п-толуолсульфонат, 2-гидроксиэтилсульфонат, бензоат, салицитат, стеарат и алканоат, такой как ацетат, НООС-(СН 2)n-СООН, где n означает 0-4, и подобные соли. Аналогично фармацевтически приемлемые катионы включают, но без ограничения перечисленным, натрий, калий, кальций, алюминий, литий и аммоний.
Кроме того, если соединение получают в виде кислотно-аддитивной соли, свободное основание можно получить подщелачиванием раствора кислой соли. Напротив, если продукт представляет собой свободное основание, аддитивную соль, в частности фармацевтически приемлемую аддитивную соль, можно получить путем растворения свободного основания в подходящем органическом растворителе и обработки раствора кислотой в соответствии с принятыми способами получения кислотно-аддитивных солей из основных соединений. Компетентные специалисты в области техники будут иметь в виду различные способы синтеза, которые можно использовать для получения нетоксичных фармацевтически приемлемых аддитивных солей.
Как отмечено выше, пролекарственные формы также входят в объем настоящего изобретения, например сложно-эфирные или амидные производные соединений, соответствующих любой из формул I-IX. Термин "пролекарственные формы" включают любые соединения, которые становятся соединениями, соответствующими какой-либо из формул I-IX, при введении пациенту, например, после метаболического процессинга пролекарственной формы. Примеры пролекарственных форм включают, но без ограничения перечисленным, ацетат, формиат и бензоат и подобные производные функциональных групп (такие как спиртовые или аминные группы) в соединениях, соответствующих какой-либо из формул I-IX.
Термин "сольват" относится к химической структуре, образованной при взаимодействии растворителя и соединения. Подходящие сольваты представляют собой фармацевтически приемлемые сольваты, такие как гидраты, в том числе моногидраты и гемигидраты.
Термин "хелат" относится к химической структуре, образованной координацией соединения с ионом металла в двух (или более) точках. Данный ион металла включает Са++ и Mg++.
Термин "нековалентный комплекс" относится к химической структуре, образованной при взаимодействии соединения и другой молекулы, причем ковалентная связь не формируется между соединением и молекулой. Например, комплексирование может осуществляться посредством взаимодействия Ван дер Ваальса, водородной связи и электростатических взаимодействий (называемых также ионным связыванием).
Термин "водородная связь" относится к форме ассоциации между электроотрицательным атомом (известным также как акцептор водородной связи) и водородом, присоединенным к второму относительно электроотрицательным атомом (известным также как донор водородной связи). Подходящие донор и акцепторы водородной связи вполне объяснены в медицинской химии (см. монографию G.С.Pimentel and A.L.McClellan, The Hydrogen Bond (Водородная связь), Freeman, San Francisco, 1960; статью R.Taylor and O.Kennard, "Hydrogen Bond Geometry in Organic Crystals" (Геометрия водородных связей в органических кристаллах), Accounts of Chemical Research, 17, стр.320-326 (1984)).
Термин "активный фактор" используют для обозначения химической структуры, которая обладает биологической активностью. В ряде вариантов осуществления "активный фактор" представляет собой соединение, имеющее фармацевтическое применение. Например, активный фактор может представлять собой противораковый лекарственный препарат.
Термин "терапевтически эффективное количество" соединения, соответствующего данному изобретению, означает количество, эффективное при введении больному человеку или нечеловеку для получения терапевтического положительного действия, такого как облегчение симптомов, замедление развития заболевания или предупреждение заболевания, например, терапевтически эффективное количество может представлять собой количество, достаточное для снижения симптомов заболевания, чувствительного к ингибированию активности Btk. В ряде вариантов осуществления терапевтически эффективное количество представляет собой количество, достаточное для уменьшения симптомов рака, симптомов нарушений костей, симптомов аллергического нарушения, симптомов аутоиммунного и/или воспалительного заболевания или симптомов острой воспалительной реакции. В ряде вариантов осуществления терапевтически эффективное количество представляет собой количество, достаточное для уменьшения числа определяемых раковых клеток в организме, определяемого замедления или остановки роста раковой опухоли. В ряде вариантов осуществления терапевтически эффективное количество представляет собой количество, достаточное для сокращения раковой опухоли. В ряде случаев у пациента, страдающего от рака, могут не проявляться симптомы поражения. В ряде вариантов осуществления терапевтически эффективное количество соединения/химической структуры представляет собой количество, достаточное для предупреждения значительного повышения либо значительного понижения определяемого уровня раковых клеток или раковых маркеров в крови, сыворотке или тканях пациента. В описанных в данном контексте способах лечения аллергических нарушений и/или аутоиммунных и/или воспалительных заболеваний и/или острых воспалительных реакций терапевтически эффективное количество может также представлять собой количество, достаточное при введении пациенту для заметного замедления развития заболевания или предупреждения проявления у пациента, которому вводят соединение/химическую структуру, симптомов аллергических нарушений и/или аутоиммунного и/или воспалительного заболевания и/или острой воспалительной реакции. В ряде описанных в данном контексте способов лечения аллергических нарушений и/или аутоиммунных и/или воспалительных заболеваний и/или острых воспалительных реакций терапевтически эффективное количество может также представлять собой количество, достаточное для получения определяемого снижения количества маркерного белка или типа клеток в крови или сыворотке пациента. Например, в ряде вариантов осуществления терапевтически эффективное количество представляет собой количество соединения/химической структуры, описанных в данном контексте, достаточное для существенного снижения активности В-клеток. В другом примере в ряде вариантов осуществления терапевтически эффективное количество представляет собой количество соединения, соответствующего любой из формул I-IX, достаточное для существенного уменьшения количества В-клеток. В другом примере в ряде вариантов осуществления терапевтически эффективное количество представляет собой количество соединения, соответствующего любой из формул I-IX, достаточное для снижения уровня антитела к ацетилхолиновому рецептору в крови пациента, больного злокачественной миастенией.
Термин "ингибирование" указывает на существенное снижение исходной активности биологической активности или процесса. Термин "ингибирование активности Btk" относится к снижению активности Btk как прямой или косвенной реакции на присутствие соединения, соответствующего любой из формул I-IX, относительно активности Btk в отсутствие данного соединения. Снижение активности может быть обусловлено непосредственным взаимодействием соединения с Btk или быть обусловленным взаимодействием данного соединения с одним или более других факторов, которые, в свою очередь, воздействуют на активность Btk. Например, присутствие соединения может снижать активность Btk путем непосредственного связывания с Btk, являясь причиной (прямо или косвенно) того, что другой фактор снижает активность Btk, или путем (прямого или косвенного) уменьшения количества Btk, присутствующей в клетке или организме.
Ингибирование активности Btk также относится к наблюдаемому ингибированию активности Btk в стандартном биохимическом анализе на активность Btk, таком как нижеописанный анализ гидролиза АТФ. В ряде вариантов осуществления соединение, соответствующее любой из формул I-IX, имеет значение IC50 меньше или равное 1 мкмоль. В ряде вариантов осуществления соединение, соответствующее любой из формул I-IX, имеет значение IC50 меньше или равное менее чем 25 нмоль. В ряде вариантов осуществления соединение, соответствующее любой из формул I-IX, имеет значение IC50 меньше или равное 5 нмоль.
Термин "ингибирование активности В-клеток" относится к снижению активности В-клеток в качестве прямой или косвенной реакции на присутствие соединения, соответствующего любой из формул I-IX, относительно активности В-клеток в отсутствие данного соединения. Снижение активности может быть обусловлено непосредственным взаимодействием соединения с Btk или с одним или более других факторов, которые, в свою очередь, воздействуют на активность В-клеток.
Ингибирование активности В-клеток также относится к наблюдаемому ингибированию экспрессии CD86 в стандартном анализе, таком как нижеописанный анализ. В ряде вариантов осуществления соединение, соответствующее любой из формул I-IX, имеет значение IC50 меньше или равное 10 мкмоль. В ряде вариантов осуществления соединение, соответствующее любой из формул I-IX, имеет значение IC50 меньше или равное менее чем 0,5 мкмоль. В ряде вариантов осуществления соединение, соответствующее любой из формул I-IX, имеет значение IC50 меньше или равное 100 нмоль.
Термин "активность В-клеток" также включает активацию, перераспределение, реорганизацию или кэппинг одного или более различных В-клеточных мембранных рецепторов, например CD40, CD86 и Toll-подобных рецепторов TLR (в частности, TLR4), или связанных с мембраной иммуноглобулинов, например, IgM, IgG и IgD. Большинство В-клеток также имеет мембранные рецепторы к Fc-области IgG в форме либо комплексов антиген-антитело, либо агрегированных IgG. В-клетки также несут мембранные рецепторы к активированным компонентам комплемента, например, C3b, C3d, C4 и Clq. Данные различные мембранные рецепторы и связанные с мембраной иммуноглобулины обладают мобильностью мембраны и могут подвергаться перераспределению и кэппингу, которые могут инициировать сигнальную трансдукцию.
Активность В-клеток также включает синтез или продукцию антител или иммуноглобулинов. Иммуноглобулины синтезируются группами В-клеток и имеют общие структурные признаки и структурные элементы. Выделяют пять классов иммуноглобулинов, т.е. IgG, IgA, IgM, IgD и IgE, на основе структурных различий их тяжелых цепей, включая последовательность аминокислот и длину полипептидной цепи. Антитела к заданному антигену могут быть выявлены во всех или нескольких классах иммуноглобулинов, или они могут быть ограничены одним классом или подклассом иммуноглобулина. Аутоантитела или аутоиммунные антитела могут аналогичным образом принадлежать к одному или нескольким классам иммуноглобулинов. Например, ревматоидные факторы (антитела к IgG) наиболее часто распознаются как иммуноглобулин IgM, но могут быть также IgG или IgA.
Кроме того, предусматривают также, что активность В-клеток включает серию событий, приводящую к клональной экспансии (пролиферации) В-клеток из В-лимфоцитов-предшественников и дифференцировке в синтезирующие антитела плазматические клетки, что происходит в сочетании со связыванием антигена и сигналами цитокинов от других клеток.
Термин "ингибирование пролиферации В-клеток" относится к ингибированию пролиферации патологических В-клеток, таких как раковые В-клетки, например В-клетки лимфомы, и/или ингибированию нормальных не пораженных болезнью В-клеток. Термин "ингибирование пролиферации В-клеток" указывает на отсутствие увеличения или любое существенное уменьшение количества В-клеток in vitro или in vivo. Таким образом, ингибированием пролиферации В-клеток in vitro было бы любое существенное уменьшение количества В-клеток в образце in vitro, контактировавшем с соединением, соответствующим любой из формул I-IX, по сравнению с подходящим образцом, не контактировавшим с данным соединением.
Ингибирование пролиферации В-клеток также относится к заметному ингибированию пролиферации В-клеток в стандартном анализе включения тимидина для пролиферации В-клеток, таком как анализ, описанный в данном контексте. В ряде вариантов осуществления соединение, соответствующее любой из формул I-IX, имеет значение IC50 меньше или равное 10 мкмоль. В ряде вариантов осуществления соединение, соответствующее любой из формул I-IX, имеет значение IC50 меньше или равное менее чем 500 нмоль. В ряде вариантов осуществления соединение, соответствующее любой из формул I-IX, имеет значение IC50 меньше или равное 50 нмоль.
Термин "аллергия" или "аллергическое нарушение" относится к приобретенной гиперчувствительности к субстанции (аллергену). Аллергические состояния включают экзему, аллергический ринит или острый насморк, сенную лихорадку, бронхиальную астму, крапивницу (сыпь) и пищевые аллергии и другие атопические состояния.
Термин "астма" относится к нарушению дыхательной системы, характеризующемуся воспалением, сужением дыхательных путей и повышенной реактивностью дыхательных путей в отношении вдыхаемых агентов. Астма часто, хотя не исключительно, ассоциирована с атопическими или аллергическими симптомами.
Под определением "существенный" понимают любое определяемое изменение, которое статистически значимо в стандартном параметрическом тесте статистической значимости, таком как Т-критерий Стьюдента, где р<0,05.
"Заболевание, чувствительное к ингибированию активности Btk" представляет собой заболевание, в котором ингибирование Btk-киназы обеспечивает терапевтический положительный эффект, такой как облегчение симптомов, уменьшение развития заболевания, предупреждение или задержка начала заболевания или подавление патологической активности ряда типов клеток (моноцитов, остеокластов, В-клеток, мастоцитов, миелоидных клеток, базофилов, макрофагов, нейтрофилов и дендритных клеток).
Термин "лечить или лечение" означает любое лечение заболевания у пациента, включающее:
a) подавление заболевания;
b) замедление или остановку развития клинических симптомов; и/или
c) ослабление заболевания, т.е. являться причиной регрессии клинических симптомов.
Термин "предупреждать или предупреждение" заболевания означает являться причиной того, что клинические симптомы заболевания не развиваются.
Термин "пациент" относится к животному, такому как млекопитающее, которое было или будет объектом лечения, наблюдения или эксперимента. Способы, соответствующие изобретению, можно использовать как в лечении человека, так и в ветеринарных приложениях. В ряде вариантов осуществления пациент является млекопитающим, в ряде вариантов осуществления пациент является человеком и в ряде вариантов осуществления пациент выбран из кошек и собак.
Предусматривают соединение формулы I:
и его фармацевтически приемлемые соли, сольваты и смеси, где
Х выбрано из N и CR 2;
Y выбрано из N и CR3;
Z выбрано из N и CR3; при условии, что только одно из X, Y и Z одновременно представляет собой N;
W выбрано из N и СН;
V выбрано из СН и N; при условии, что одно из W и V должно представлять собой N и
оба, W и V, не являются N;
R1 выбрано из:
, 
, 
, , , 
, 
, , 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, и 
;
R2 выбрано из Н, СН3 , F, Cl, CN, ОСН3, ОН и CF3;
R2' выбрано из Н и F;
R3 выбрано из Н, СН3, CF3, F, Cl, CN и ОСН 3;
R3' выбрано из Н, СН 3, F, Cl, CN и ОСН3;
R4 представляет собой
;
m выбрано из 0 и 1;
n выбрано из 0 и 1;
R5 выбрано из Н, С1 -С6алкила и С3-C6циклоалкила, причем указанный алкил необязательно замещен одним или более заместителей, выбранных из ОН, F, и ОСН3;
R6 выбрано из Н и С1-С6алкила или R5 и R6 необязательно взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 4-6-членного циклического кольца, имеющего 0-1 дополнительный атом N, S или О, причем необязательный дополнительный атом азота цикла необязательно замещен С1-С3алкилом и указанное циклическое кольцо необязательно замещено ОН;
R7 выбрано из Н, С1-С6алкила и С3 -C6циклоалкила, причем указанный алкил необязательно замещен одним или более заместителей, выбранных из ОН и О(C 1-C4алкила), или R6 и R7 необязательно взяты вместе с группой -N(R5)C(R 9)(CH2)nC(=O)N(R8)- посредством соответствующих атомов азота, к которым они непосредственно присоединены, с образованием 6-членного циклического кольца;
R8 выбрано из Н и С1-С6алкила, причем указанный алкил необязательно замещен одним или более заместителей, выбранных из ОН, F и ОСН3, или R 7 и R8 необязательно взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 4-6-членного циклического кольца, имеющего 0-1 дополнительный атом N, S или О, причем необязательный дополнительный атом азота цикла необязательно замещен С1 -С3алкилом и указанное циклическое кольцо необязательно замещено ОН;
R9 выбрано из Н и СН 3;
R10 выбрано из ОН, Н и С 1-С3алкила, необязательно замещенного N(R 9)2;
R11 выбрано из Н, СН3 и CF3; и
R 12 представляет собой С1-С3алкил.
В ряде вариантов осуществления R11 представляет собой СН3. В ряде вариантов осуществления R11 представляет собой Н.
В ряде вариантов осуществления R12 представляет собой С1-С2 алкил.
В ряде вариантов осуществления W представляет собой N и V представляет собой СН (см. формулу I-а, где R 1, R2', R4, R10, X, Y и Z такие, как определено в Формуле I).
В ряде вариантов осуществления W представляет собой СН и V представляет собой N (см. формулу I-b, где R 1, R2', R4, R10, X, Y и Z такие, как определено в формуле I).
В ряде вариантов осуществления Х представляет собой CR2.
В ряде вариантов осуществления соединения, соответствующие настоящему изобретению, имеют формулу II, где R1, R2, R2', R 4, R10, X, Y и Z такие, как определено в формуле I.
В ряде вариантов осуществления Х представляет собой N.
В ряде вариантов осуществления соединения, соответствующие настоящему изобретению, имеют формулу III, где R1, R2', R3, R3' , R4 и R10 такие, как определено в формуле I.
В ряде вариантов осуществления Y представляет собой CR3'.
В ряде вариантов осуществления соединения, соответствующие настоящему изобретению, имеют формулу IV, где R1, R2', R3' , R4, R10, Х и Z такие, как определено в формуле I.
В ряде вариантов осуществления Y представляет собой N.
В ряде вариантов осуществления соединения, соответствующие настоящему изобретению, имеют формулу V, где R1, R2, R2', R3 , R4 и R10 такие, как определено в формуле I.
В ряде вариантов осуществления Z представляет собой CR3.
В ряде вариантов осуществления соединения, соответствующие настоящему изобретению, имеют формулу VI, где R1, R2', R3, R 4, R10, Х и Y такие, как определено в формуле I.
В ряде вариантов осуществления Z представляет собой N.
В ряде вариантов осуществления соединения, соответствующие настоящему изобретению, имеют формулу VII, где R1, R2, R2', R3' , R4, R10 и Z такие, как определено в формуле I.
В ряде вариантов осуществления соединения, соответствующие настоящему изобретению, имеют формулу VIII, где R1, R2, R2', R3 , R3', R4 и R10 такие, как определено в формуле I.
В ряде вариантов осуществления R 2' представляет собой Н.
В ряде вариантов осуществления R2' представляет собой F. В ряде вариантов осуществления соединения, соответствующие настоящему изобретению, имеют формулу IX, где:
R1 выбрано из:
, 
, 
, , 
, , и .
R2 выбрано из Н, СН3 , F и Cl;
R3 выбрано из Н, СН 3, F и Cl;
R3' выбрано из Н, СН3, F и Cl;
R4 представляет собой
;
m выбрано из 0 и 1;
n выбрано из 0 и 1;
R5 выбрано из Н и С1-С6алкила;
R6 выбрано из Н и С1-С6алкила, или R 5 и R6 необязательно взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 6-членного циклического кольца, имеющего 0-1 дополнительный атом N, S или О, причем необязательный дополнительный атом азота цикла необязательно замещен С1 -С3алкилом;
R7 выбрано из Н и С1-С6алкила, причем указанный алкил необязательно замещен одним или более заместителей, выбранных из ОН и O(С1-С4алкила); или R6 и R7 необязательно взяты вместе с группой -N(R 5)C(R9)(CH2)nC(=O)N(R 8) посредством соответствующих атомов азота, к которым они непосредственно присоединены, с образованием 6-членного циклического кольца;
R8 выбрано из Н и С1 -С6алкила, или R7 и R8 необязательно взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 4-6-членного циклического кольца, имеющего 0-1 дополнительный атом N, S или О, причем необязательный дополнительный атом азота цикла необязательно замещен С1-С3алкилом;
R9 выбрано из Н и СН3; и
R10 выбрано из Н и С1-С 3алкила.
В ряде вариантов осуществления m означает 0. В ряде вариантов осуществления n означает 0.
В ряде вариантов осуществления R1 выбрано из:
,
,
,
, ,
, и .
В ряде вариантов осуществления R 1 выбрано из:
,
, и
.
В ряде вариантов осуществления R 2 выбрано из СН3, F, Cl и Н.
В ряде вариантов осуществления R2 выбрано из СН 3, F, Cl и CN. В ряде вариантов осуществления R2 выбрано из СН3, F и Cl. В ряде вариантов осуществления R2 представляет собой СН3.
В ряде вариантов осуществления R3 выбрано из Н, СН 3, F и Cl. В ряде вариантов осуществления, R3 представляет собой Н. В ряде вариантов осуществления R3 выбрано из F и Cl. В ряде вариантов осуществления R3 выбрано из СН3 и ОСН3.
В ряде вариантов осуществления R3 выбрано из Н, СН 3, F и Cl. В ряде вариантов осуществления R3 выбрано из Н, СН3, F, Cl и CN. В ряде вариантов осуществления R3 представляет собой Н. В ряде вариантов осуществления R3 выбрано из СН3 и F. В ряде вариантов осуществления R3 выбрано из Cl и CN.
В ряде вариантов осуществления R5 выбрано из Н и С 1-С3алкила, необязательно замещенного ОН. В ряде вариантов осуществления R5 выбрано из Н и С 1-С6алкила. В ряде вариантов осуществления R 5 выбрано из Н и С1-С3алкила. В ряде вариантов осуществления R5 выбрано из Н, метила, этила и -(СН2)2ОН. В ряде вариантов осуществления R5 выбрано из Н, метила и этила.
В ряде вариантов осуществления R6 выбрано из Н и С 1-С3алкила. В ряде вариантов осуществления R 6 выбрано из Н, метила, этила, н-пропила и изо-пропила. В ряде вариантов осуществления R6 выбрано из Н, метила и этила.
В ряде вариантов осуществления R 5 и R6 взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 4- или 6-членного циклического кольца, имеющего 0-1 дополнительный атом N, S или О, причем необязательный дополнительный атом азота цикла необязательно замещен С1 -С3алкилом. В ряде вариантов осуществления R5 и R6 взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 6-членного циклического кольца, имеющего 0-1 дополнительный атом N, S или О, причем необязательный дополнительный атом азота цикла необязательно замещен С1 -С3алкилом. В ряде вариантов осуществления R5 и R6 взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием азетидинила, N-метилпиперазинила, N-этилпиперазинила или морфолинила. В ряде вариантов осуществления R5 и R6 взяты вместе в атомом азота, к которому они присоединены, с образованием N-метилпиперазинила или N-этилпиперазинила.
В ряде вариантов осуществления R7 выбрано из Н, метила, этила, -(СН2) 2ОН и -(СН2)2ОСН3. В ряде вариантов осуществления R7 выбрано из Н, метила, -(СН 2)2ОН и -(СН2)2ОСН 3. В ряде вариантов осуществления R6 и R 7 взяты вместе с группой -N(R5)C(R9 )(CH2)nC(=O)N(R8) посредством соответствующих атомов азота, к которым они непосредственно присоединены, с образованием 6-членного циклического кольца (например,
В ряде вариантов осуществления R8 выбрано из Н и С1-С3алкила. В ряде вариантов осуществления R8 выбрано из Н, метила и этила. В ряде вариантов осуществления R7 и R8 взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 4-6-членного циклического кольца, имеющего 0-1 дополнительный атом N, S или О, причем необязательный дополнительный атом азота цикла необязательно замещен С1-С3алкилом. В ряде вариантов осуществления R7 и R8 взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием 4- или 6-членного циклического кольца, имеющего 0-1 дополнительный атом N или О, причем необязательный дополнительный атом азота цикла необязательно замещен метилом или этилом, и указанное циклическое кольцо необязательно замещено ОН. В ряде вариантов осуществления R7 и R 8 взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием N-метилпиперазинила, N-этилпиперазинила, морфолинила или азетидинила, необязательно замещенного ОН. В ряде вариантов осуществления R7 и R8 взяты вместе с атомом азота, к которому они присоединены, с образованием морфолинила или азетидинила.
В ряде вариантов осуществления R9 представляет собой Н. В ряде вариантов осуществления R9 представляет собой метил.
В ряде вариантов осуществления R10 выбрано из Н и СН 3. В ряде вариантов осуществления R10 представляет собой Н. В ряде вариантов осуществления R10 представляет собой -(СН2)3N(CH3)2 . В ряде вариантов осуществления R10 представляет собой ОН.
В R5-R8 и R 10, когда необязательно замещенный алкил или циклическое кольцо являются замещенными, в ряде вариантов осуществления имеется 1-3 заместителя и они могут замещать любой атом Н. В R5 -R8 и R10 в ряде вариантов осуществления циклические кольца являются насыщенными.
В ряде вариантов осуществления R1 содержит тиофеновый цикл, слитый с 5, 6, 7 или 8-членным циклом, как показано в данном контексте. В ряде вариантов осуществления R1 содержит фениленовый или бензоцикл, как показано в данном контексте. В ряде вариантов осуществления R5, R6, R 7 и/или R8 образуют циклическое кольцо и в ряде вариантов осуществления R5, R6, R7 и/или R8 нециклические, как показано в данном контексте.
В ряде вариантов осуществления соединение формулы I выбрано из
N-(3-(6-(4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фторфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамида;
N-(3-(6-(4-(1-(Этил(изопропил)амино)-2-((2-метоксиэтил)(метил)амино)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-(3-(6-(4-(1,2-бис(4-этилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-(3-(6-(4-(1,2-бис(4-этилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-5,6,7,8-тетрагидро-4Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-(3-(6-(4-(1-Этил-4-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид;
4-трет-бутил-N-(3-(6-(4-(1-этил-4-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)бензамид;
(S)-N-(3-(6-(4-(3-(Диметиламино)-2-(изопропил(метил)амино)-3-оксопропил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-(3-(6-(4-(3-(Диметиламино)-1-(изопропил(метил)амино)-3-оксопропил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-(3-(6-(4-(1-амино-2-морфолино-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4-трет-бутилбензамид;
N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b] тиофен-2-карбоксамид;
4-трет-бутил-N-(3-(6-(4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)бензамид;
N-(3-(6-(4-(2-Амино-1-(изопропил(метил)амино)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-(2-Метил-3-(4-метил-6-(4-(1-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-(3-(6-(4-(2-(Диметиламино)-1-(изопропил(метил)амино)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид;
4-трет-бутил-N-(3-(6-(4-(2-(диметиламино)-1-(изопропил(метил)амино)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)бензамид;
N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2,5-дифторфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид;
(S)-4-трет-бутил-N-(3-(6-(4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил) фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)бензамид;
(R)-4-трет-бутил-N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)бензамид;
N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4-(этил(метил)амино)бензамид;
(R)-N-(3-(6-(4-(2-(Диметиламино)-1-(изопропил(метил)амино)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4-(1-этилциклопропил)бензамид;
4-трет-бутил-N-(3-(6-(4-(1-(4-этилпиперазин-1-ил)-2-морфолино-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)бензамид;
N-(3-(6-(4-(1-(4-Этилпиперазин-1-ил)-2-морфолино-2-оксоэтил) фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-(3-(6-(4-(1-(4-этилпиперазин-1-ил)-2-морфолино-2-оксоэтил) фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-5,6,7,8-тетрагидро-4Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-(3-(6-(4-(1,2-бис(4-этилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4-трет-бутилбензамид;
4-трет-бутил-N-(3-(6-(4-(2-(диметиламино)-1-(4-этилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)бензамид;
N-(3-(6-(4-(2-(Диметиламино)-1-(4-этилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-(3-(6-(4-(2-(Диметиламино)-1-(4-этилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-5,6,7,8-тетрагидро-4Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид;
4-трет-бутил-N-(3-(6-(4-(1-(4-этилпиперазин-1-ил)-2-((2-метоксиэтил)(метил)амино)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)бензамид;
N-(3-(6-(4-(1-(4-Этилпиперазин-1-ил)-2-((2-метоксиэтил)(метил)амино)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-(3-(6-(4-(1-(4-Этилпиперазин-1-ил)-2-((2-метоксиэтил)(метил)амино)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-5,6,7,8-тетрагидро-4Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-(3-(6-(4-(1-Изопропил-4-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-5,6,7,8-тетрагидро-4Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-5-фтор-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-(2-Хлор-3-(6-(4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4-(этил(метил)амино)бензамид;
N-(3-(6-(4-(1-(Этил(изопропил)амино)-2-морфолино-2-оксоэтил) фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-(3-(6-(4-(1-(Этил(изопропил)амино)-2-(4-этилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метил фенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-(3-(6-(4-(2-(Диметиламино)-1-(этил(изопропил)амино)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-{3-[6-({4-[2-(Азетидин-1-ил)-1-(морфолин-4-ил)-2-оксоэтил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-{2-Метил-3-[4-метил-6-({4-[(метилкарбамоил)(морфолин-4-ил)метил]фенил}амино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]фенил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-{3-[6-({4-[2-(Азетидин-1-ил)-1-[этил(пропан-2-ил)амино]-2-оксоэтил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-{3-[6-({4-[(Диметилкарбамоил)[этил(пропан-2-ил)амино]метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4Н,5Н,6Н,7Н,8H-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-{3-[6-({4-[1-(азетидин-1-ил)-2-(4-этилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-[3-(6-{[4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-{3-[6-({4-[Азетидин-1-ил(диметилкарбамоил)метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-[2-Метил-3-(4-метил-5-оксо-6-{[4-(1,2,4-триметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[5-Хлор-3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-{3-[6-({4-[Азетидин-1-ил(диметилкарбамоил)метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4-трет-бутилбензамид;
N-{3-[6-({4-[Азетидин-1-ил(диметилкарбамоил)метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-(3-{6-[(4-{Азетидин-1-ил[(2-гидроксиэтил)(метил)карбамоил]метил}фенил)амино]-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-{2-Метил-3-[4-метил-6-({4-[4-метил-3-оксо-1-(пропан-2-ил)пиперазин-2-ил]фенил}амино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]фенил}-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-{3-[6-({4-[(4-Этилпиперазин-1-ил)[(2-гидроксиэтил)(метил)карбамоил]метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-{3-[6-({4-[(Диэтилкарбамоил)(4-этилпиперазин-1-ил)метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид;
4-трет-бутил-N-(3-{6-[(4-{[этил(метил)карбамоил](4-этилпиперазин-1-ил)метил}фенил)амино]-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}-2-метилфенил)бензамид;
4-трет-бутил-N-{3-[6-({4-[(диэтилкарбамоил)(4-этилпиперазин-1-ил)метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}бензамид;
N-[3-(6-{[4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-N-метил-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
4-трет-бутил-N-(2-метил-3-{4-метил-6-[(4-{1-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-(морфолин-4-ил)-2-оксоэтил}фенил)амино]-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}фенил)бензамид;
N-{3-[6-({4-[2-(Азетидин-1-ил)-1-[метил (пропан-2-ил)амино]-2-оксоэтил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4-трет-бутилбензамид;
N-{3-[6-({4-[1-(Азетидин-1-ил)-2-(морфолин-4-ил)-2-оксоэтил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-(3-{6-[(4-{Азетидин-1-ил[(2-гидроксиэтил)(метил)карбамоил]метил}фенил)амино]-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}-2-метилфенил)-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид;
4-трет-бутил-N-(2-метил-3-{4-метил-6-[(4-{1-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-(4-метилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтил}фенил)амино]-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}фенил)бензамид;
N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4-(1-метилциклопропил)бензамид;
N-(3-(6-(4-(1-Этил-4-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-5,6,7,8-тетрагидро-4Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид;
4-трет-бутил-N-(3-(6-(4-(1-изопропил-4-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)бензамид;
N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид;
(S)-N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид;
(R)-N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид; и
(S)-(+)-N-(3-(6-(4-(2-(Диметиламино)-1-(изопропил(метил)амино)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-N-метил-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-(3-{6-[(4-{1-[этил(метил)амино]-2-(4-этилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтил}фенил)амино]-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}-2-метилфенил)-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-6-[этил(метил)амино]пиридин-3-карбоксамид;
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фтор-5-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-{3-[6-({4-[2-(азетидин-1-ил)-1-[метил(пропан-2-ил)амино]-2-оксоэтил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[3-(6-{[4-(4-этил-1-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[3-(6-{[4-(4-этил-1-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2,5-диметилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[5-хлор-3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-{3-[6-({4-[(диметилкарбамоил)(морфолин-4-ил)метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-{3-[6-({4-[(диэтилкарбамоил)(морфолин-4-ил)метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-(3-{6-[(4-{[этил(метил)карбамоил](морфолин-4-ил)метил}фенил)амино]-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-(3-{6-[(4-{[(2-гидроксиэтил)(метил)карбамоил](морфолин-4-ил)метил}фенил)амино]-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-{3-[6-({4-[2-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-1-(морфолин-4-ил)-2-оксоэтил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-{3-[6-({4-[(диметилкарбамоил)(морфолин-4-ил)метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-{3-[6-({4-[(диэтилкарбамоил)(морфолин-4-ил)метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-{3-[6-({4-[2-(азетидин-1-ил)-1-(морфолин-4-ил)-2-оксоэтил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-{2-метил-3-[4-метил-6-({4-[(метилкарбамоил)(морфолин-4-ил)метил]фенил}амино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]фенил}-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-(3-{6-[(4-{[этил(метил)карбамоил](морфолин-4-ил)метил}фенил)амино]-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}-2-метилфенил)-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-(3-{6-[(4-{[(2-гидроксиэтил)(метил)карбамоил](морфолин-4-ил)метил}фенил)амино]-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}-2-метилфенил)-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид;
N-{3-[6-({4-[2-(3-гидроксиазетидин-1-ил)-1-(морфолин-4-ил)-2-оксоэтил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}-4Н,5Н,6Н,7Н,8Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид;
4-трет-бутил-N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-2-метоксибензамид;
N-[2-хлор-3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-5-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2,6-диметилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-5-метокси-2-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2,6-дифторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[5-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-фтор-2-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[2,6-дихлор-3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[6-хлор-3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[2-хлор-5-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[2-хлор-3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-фторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[2-циано-5-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[4-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-фторпиридин-2-ил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
4-трет-бутил-N-{3-[6-({4-[(S)-(диметилкарбамоил)[метил(пропан-2-ил)амино]метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}бензамид;
4-трет-бутил-N-{3-[6-({4-[(R)-(диметилкарбамоил)[метил(пропан-2-ил)амино]метил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-метилфенил}бензамид;
4-трет-бутил-N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-N-[3-(диметиламино)пропил]бензамид;
N-[6-хлор-3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[5-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)пиридин-3-ил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[6-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)пиридин-2-ил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[2-хлор-3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[6-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-3-фторпиридин-2-ил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[6-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-5-фторпиридин-2-ил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-7-оксо-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-7-гидрокси-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
4-трет-бутил-N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-2-метилбензамид;
N-[3-(6-{[4-(1-этил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-фтор-2-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[3-(6-{[4-(1-этил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2,6-дифторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[3-(6-{[4-(1-этил-4-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2,6-дифторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[5-(6-{[4-(4-этил-1-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
4-трет-бутил-N-[6-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)пиридин-2-ил]бензамид;
N-[5-(6-{[4-(1-этил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[5-(6-{[4-(1,4-диэтил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[3-(6-{[4-(4-этил-1-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2,6-дифторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[5-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фторфенил]-7,7-дифтор-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[5-(6-{[4-(1-этил-4-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[6-(6-{[4-(1-этил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-3-фторпиридин-2-ил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[6-(6-{[4-(4-этил-1-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-3-фторпиридин-2-ил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[6-(6-{[4-(1-этил-4-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-3-фторпиридин-2-ил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[6-(6-{[4-(1,4-диэтил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-3-фторпиридин-2-ил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[3-(6-{[4-(1,4-диэтил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-фтор-2-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[3-(6-{[4-(4-этил-1-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-фтор-2-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-{5-[6-({4-[(2R)-1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-фторфенил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[3-(6-{[4-(1,4-диэтил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2,6-дифторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-{5-[6-({4-[(2S)-1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-фторфенил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-{6-[6-({4-[(2S)-1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-3-фторпиридин-2-ил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-{6-[6-({4-[(2R)-1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-3-фторпиридин-2-ил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[2-фтор-5-(4-метил-6-{[4-(4-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фтор-6-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[3-(6-{[4-(1-этил-4-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-фтор-2-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[5-(6-{[4-(2,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фторфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-{5-[6-({4-[2-(азетидин-1-ил)-1-(диметиламино)-2-оксоэтил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-2-фторфенил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-{2-фтор-5-[6-({4-[1-(2-гидроксиэтил)-4-метил-3-оксопиперазин-2-ил]фенил}амино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]фенил}-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[5-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-фторфенил]-4,4-дифтор-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[3-(6-{[4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фенил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил]-4-гидрокси-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид;
N-[3-(5-{[5-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид, и
их фармацевтически приемлемые соли, сольваты и смеси.
Осуществление изобретения
Настоящие соединения, описанные в данном контексте, являются сильными ингибиторами Btk. Вне связи с какой-либо теорией некоторые соединения обладают улучшенными свойствами в виде повышенной эффективности (как измеряют посредством, например, ингибирования Btk в цельной крови и ингибирования активации В-клеток у мышей).
Способы получения новых соединений, описанных в данном контексте, будут очевидны для обычного специалиста в области техники, подходящие способы описывают, например, на схемах реакций и в примерах, представленных ниже, и в нижеприведенных ссылках. См., также, заявку США No. 11/371180 (US 2006/0229337), поданную 9 марта 2006 г., которая включена в данном контексте в виде ссылки во всей полноте.
Реакционная схема 1
Согласно реакционной схеме 1, стадии 1, к суспензии соединения формулы 201, бис(пинаколат)диборона, и основания, такого как ацетат калия, добавляют приблизительно 0,03 эквивалента комплекса [1,1'бис(дифенилфосфино)-ферроцен]дихлорпалладий (II) с дихлорметаном (1:1). Реакцию нагревают при приблизительно 85°С в течение приблизительно 20 часов. Продукт, соединение формулы 203, выделяют и необязательно очищают.
Согласно реакционной схеме 1, стадии 2, 10% палладий на угле добавляют к смеси соединения формулы 203 в полярном протонном растворителе, таком как метанол. К смеси добавляют газообразный водород. Реакцию перемешивают при баллонном давлении водорода при комнатной температуре в течение приблизительно 13 часов. Продукт, соединение формулы 205, выделяют и необязательно очищают.
Согласно реакционной схеме 1, стадии 3, раствор приблизительно эквивалента соединения формулы 206 в инертном растворителе, таком как дихлорметан, добавляют порциями к раствору соединения формулы 205 и основания, такого как триэтиламин, в инертном растворителе, таком как дихлорметан. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение приблизительно 16 часов. Продукт, соединение формулы 207, выделяют и необязательно очищают.
Реакционная схема 2
Согласно реакционной схеме 2, стадии 1, смесь соединения Формулы 301, избыток (например, приблизительно 1,2 эквивалента) бис(неопентилгликолято)диборона и приблизительно 0,3 эквивалента комплекса 1:1 [1,1'-бис(дифенилфосфино)-ферроцен]дихлорпалладия с дихлорметаном и основание, такое как ацетат калия, в инертном растворителе, таком как диоксан, нагревают с обратным холодильником в течение приблизительно 3 часов. Продукт, соединение формулы 303, выделяют и необязательно очищают.
Согласно реакционной схеме 2, стадии 2, смесь соединения Формулы 303 и 10% палладия на угле в инертном растворителе, таком как этилацетат, метанол, обрабатывают 40 psi (фунт/дюйм2, 2,8 кг/см 2) водорода в течение приблизительно 2 ч при комнатной температуре. Продукт, соединение формулы 305, выделяют и необязательно очищают.
Согласно реакционной схеме 1, стадии 3, раствор соединения Формулы 305 и основания, такого как триэтиламин, в инертном растворителе, таком как ТГФ (тетрагидрофуран) обрабатывают введением по каплям приблизительно одного эквивалента кислого хлорида Формулы 306 и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение приблизительно 15 минут. Продукт, соединение формулы 307, выделяют и необязательно очищают.
Реакционная схема 3
Согласно реакционной схеме 3, стадии 1, смесь соединения Формулы 501, приблизительно один эквивалент соединения NH2-R13 и инертного основания, такого как 1-метил-2-пирролидинон, нагревают при приблизительно 130°С в течение приблизительно 1 часа. Продукт, соединение формулы 503, выделяют и необязательно очищают, причем R13 представляет собой
Согласно реакционной схеме 3, стадии 2, смесь соединения Формулы 503, избытка (такого как приблизительно 1,2 эквивалента) соединения формулы 107, приблизительно 0,05 эквивалента тетракис(трифенилфосфин) палладия и основания, такого как 1 Н карбонат натрия, в инертном растворителе, таком как 1,2-диметоксиэтан, нагревают при приблизительно 100°С в запечатанной емкости высокого давления в течение приблизительно 16 часов. Продукт, соединение формулы 505, выделяют и необязательно очищают.
В ряде вариантов осуществления соединения, соответствующие какой-либо из формул I-IX, применяют в качестве фармацевтической композиции или препарата. Соответственно, изобретение предусматривает фармацевтические препараты, включающие соединение, соответствующее любой из формул I-IX, и их фармацевтически приемлемые соли, сольваты и смеси вместе с по меньшей мере одной фармацевтически приемлемой средой, выбранной из носителей, вспомогательных компонентов и наполнителей.
Фармацевтически приемлемые среды должны быть достаточно высокой чистоты и достаточно низкой токсичности, чтобы они стали приемлемыми для введения животному, которое проходит лечение. Среда может быть инертной или она может обладать фармацевтическими преимуществами. Количество среды, используемой в сочетании с соединением, достаточно для обеспечения удобного количества материала для введения на унифицированную дозу соединения.
Примерами фармацевтически приемлемых носителей или их компонентов являются сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; целлюлоза и ее производные, такие как натрий карбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза и метилцеллюлоза; порошковый трагакант, солод, желатин, тальк, твердые смазывающие компоненты, такие как стеариновая кислота и стеарат магния, сульфат кальция, синтетические масла, растительные масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло, кунжутное масло, оливковое масло и кукурузное масло; полиолы, такие как пропиленгликоль, глицерин, сорбит, манит и полиэтиленгликоль, альгиновая кислота, растворы фосфатных буферов, эмульгаторы, такие как TWEENS, смачивающие агенты, такие как лаурилсульфат натрия, красители, вкусовые добавки, компоненты для таблетирования, стабилизаторы, антиоксиданты, консерванты, апирогенная вода, изотонический солевой раствор и растворы фосфатных буферов.
В фармацевтическую композицию могут быть включены необязательные активные агенты, которые существенно не нарушают активность соединения, соответствующего настоящему изобретению.
Эффективные концентрации соединения, соответствующего любой из формул I-IX, и их фармацевтически приемлемые соли, сольваты и смеси, смешивают с подходящей фармацевтически приемлемой средой. В случаях, когда соединение проявляет недостаточную растворимость, можно использовать способы солюбилизации соединений. Данные способы известны компетентным специалистам в области техники и включают, но без ограничения перечисленным, использование сорастворителей, таких как диметилсульфоксид (ДМСО), использование поверхностно-активных веществ, таких как TWEEN, или растворение в водном бикарбонате натрия.
После смешивания или добавления соединения, соответствующего какой-либо из формул I-IX, полученная в результате смесь может представлять собой раствор, суспензию, эмульсию или тому подобное. Форма полученной в результате смеси зависит от ряда факторов, включая предусматриваемый способ введения и растворимость соединения в выбранной среде. Эффективную концентрацию, достаточную для облегчения симптомов заболевания, которое лечат, можно установить эмпирически.
Соединения, соответствующие какой-либо из формул I-IX, можно вводить перорально, местно, парентерально, внутривенно, путем внутримышечной инъекции, посредством ингаляции или спрея, подъязычно, чрескожно, путем защечного введения, ректально, в виде офтальмического раствора или иными средствами, в лекарственных унифицированных препаратах.
Лекарственные препараты, подходящие для перорального применения, включают, например, таблетки, пастилки, лепешки, водные или масляные суспензии, дисперсные порошки или гранулы, эмульсии, твердые или мягкие капсулы или сиропы либо эликсиры. Композиции, предназначенные для перорального применения, можно получить согласно любому известному в области техники способу изготовления фармацевтических композиций, и данные композиции могут содержать один или более компонентов, таких как подсластители, вкусовые добавки, красители и консерванты, для получения фармацевтически элегантных и приятных на вкус препаратов. В ряде вариантов осуществления пероральные препараты содержат от 0,1 до 99% соединения, соответствующего любой из формул I-IX. В ряде вариантов осуществления пероральные препараты содержат по меньшей мере 5% (масс.%) соединения формулы I. Некоторые варианты осуществления содержат от 25% до 50% или от 5% до 75% соединения, соответствующего любой из формул I-IX.
Композиции для перорального применения включают также жидкие растворы, эмульсии, суспензии, порошки, гранулы, эликсиры, настойки, сиропы и т.п. Фармацевтически приемлемые носители, подходящие для получения данных композиций, хорошо известны в области техники. Пероральные препараты могут содержать консерванты, вкусовые добавки, подсластители, такие как сахароза или сахарин, компоненты, маскирующие вкус и красители.
Типичные компоненты носителей для сиропов, эликсиров, эмульсий и суспензий включают этанол, глицерин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, жидкая сахароза, сорбит и вода. Сиропы и эликсиры можно получить с подсластителями, например, с глицерином, пропиленгликолем, сорбитом или сахарозой. Данные препараты могут также содержать средство, уменьшающее раздражение.
Соединения, соответствующие какой-либо из формул I-IX, могут быть включены в пероральные жидкие препараты, такие как, например, водные или масляные суспензии, растворы, эмульсии, сиропы или эликсиры. Более того, препараты, содержащие данные химические вещества, могут быть представлены в виде сухого продукта, предназначенного для восстановления водой или другой подходящей средой перед применением. Данные жидкие препараты могут содержать принятые дополнительные компоненты, такие как суспендирующие агенты (например, сироп сорбита, метилцеллюлозу, глюкозу/агар, сироп, желатин, гидроксиэтилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу, гель стеарата алюминия и гидрированные пищевые жиры), эмульгаторы (например, лецитин, сорбитмоноолеат или акацию), неводные среды, которые могут включать пищевые масла (например, миндальное масло, фракционированное кокосовое масло, сложные силиловые эфиры, пропиленгликоль и этиловый спирт) и консерванты (например, метил- или пропил- п-гидроксибензоат и сорбиновую кислоту).
Для суспензии типичные суспендирующие агенты включают метилцеллюлозу, натрий карбоксиметилцеллюлозу, AVICEL RC-591, трагакант и альгинат натрия; типичные смачивающие агенты включают лецитин и полисорбат 80, и типичные консерванты включают метилпарабен и бензоат натрия.
Водные суспензии содержат активный материал(ы) в смеси с наполнителями, подходящими для приготовления водных суспензий. Данные наполнители включают суспендирующие агенты, например натрий карбоксиметилцеллюлозу, метилцеллюлозу, гидропропилметилцеллюлозу, альгинат натрия, поливинилпирролидон, камедь трагаканта и камедь акации; диспергирующие и смачивающие агенты; природные фосфатиды, например лецитин, или продукты конденсации алкиленоксида с жирными кислотами, например полиоксиэтиленстеарат, или продукты конденсации этиленоксида с алифатическими спиртами с длинной цепью, например гептадекаэтиленоксицетанол, или продукты конденсации этиленоксида с частичными сложными эфирами, полученными из жирных кислот и гекситола, такие как полиоксиэтиленсорбитоловый заместитель, или продукты конденсации этиленоксида с частичными сложными эфирами, полученными из жирных кислот и гекситоловых ангидридов, например полиэтиленсрбитановый заместитель. Водные суспензии могут также содержать один или более консервантов, например, этил или н-пропил-п-гидроксибензоат.
Масляные суспензии можно получить суспендированием активных ингредиентов в растительном масле, например арахисовом масле, оливковом масле, кунжутном масле или кокосовом масле, либо в минеральном масле, таком как вазелиновое масло. Масляные суспензии могут содержать сгуститель, например пчелиный воск, твердый парафин или цетиловый спирт. Можно добавить подсластители, такие как вышепредставленные, и вкусовые вещества для получения пероральных препаратов с приятным вкусом. Данные композиции можно законсервировать добавлением антиоксиданта, такого как аскорбиновая кислота.
Фармацевтические композиции, соответствующие изобретению, могут быть также в форме эмульсий типа масло в воде. Масляная фаза может представлять собой растительное масло, например оливковое масло или арахисовое масло, либо минеральное масло, например вазелиновое масло, или их смеси. Подходящие эмульгирующие агенты могут представлять собой природные камеди, например камедь акации или камедь трагаканта, природные фосфатиды, например соевый, лецитин и сложные эфиры или частичные сложные эфиры, полученные из жирных кислот и гекситола, ангидриды, например сорбитмоноолеат, и продукты конденсации указанных частичных сложных эфиров с этиленоксидом, например полиоксиэтиленсорбитмоноолеат.
Диспергирующиеся порошки и гранулы, подходящие для получения водной суспензии при добавлении воды, представляют собой активный ингредиент в смеси с диспергирующим или смачивающим агентом, суспендирующим агентом и одним или более консервантов. Подходящие диспергирующие или смачивающие агенты и суспендирующие агенты проиллюстрированы уже упомянутыми выше.
Таблетки, как правило, содержат принятые фармацевтически приемлемые вспомогательные компоненты, например инертные разбавители, такие как карбонат кальция, карбонат натрия, манит, лактоза и целлюлоза; связующие агенты, такие как крахмал, желатин и сахароза; разрыхлители, такие как крахмал, альгиновая кислота и кроскармелоза; смазывающие агенты, такие как стеарат магния, стеариновая кислота и тальк. Скользящие агенты, такие как диоксид кремния, можно использовать для улучшения характеристик сыпучести порошковой смеси. Красители, такие как красители FD&C, могут быть добавлены для внешнего вида. Подсластители и вкусовые добавки, такие как аспартам, сахарин, ментол, перечная мята и фруктовые вкусовые добавки, могут представлять собой эффективные вспомогательные компоненты для жевательных таблеток. Капсулы (включая препараты с определенным временем высвобождения и замедленным высвобождением), как правило, включают один или более вышеописанных твердых разбавителей. Выбор компонентов носителя часто зависит от вторичных признаков, например вкуса, стоимости и стабильности при хранении.
Данные композиции могут быть также покрыты принятыми способами, как правило рН или времязависимыми покрытиями, так что соединение высвобождается в желудочно-кишечном тракте вблизи от требуемого местного применения или в различные периоды времени для удлинения требуемого действия. Данные лекарственные формы, как правило, включают, но без ограничения перечисленным, один или более компонентов из ацетатфталатцеллюлозы, поливинилацетатфталата, фталатгидроксипропилметилцеллюлозы, этилцеллюлозы, покрытий Eudragit, восков и шеллака.
Препараты для перорального применения могут быть также представлены в виде твердых желатиновых капсул, в которых активный ингредиент смешан с инертным твердым разбавителем, например карбонатом кальция, фосфатом кальция или каолином, либо в виде мягких желатиновых капсул, в которых активный ингредиент смешан с водной или масляной средой, например арахисовым маслом, вазелиновым маслом или оливковым маслом.
Фармацевтические композиции могут находиться в форме стерильной инъекционной водной или масляной суспензии. Данную суспензию можно приготовить согласно известному уровню техники при использовании тех подходящих диспергирующих или смачивающих агентов и суспендирующих агентов, которые упомянуты выше. Стерильный инъекционный препарат может также представлять собой стерильный инъекционный раствор или суспензию в нетоксичной исходно приемлемой среде, например, такой как раствор в 1,3-бутандиоле. В число приемлемых сред, которые могут быть использованы, входят вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, стерильные нелетучие масла традиционно используют в качестве растворителя или суспендирующей среды. Для данной цели можно использовать любое мягкое нелетучее масло, включая синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, жирные кислоты, такие как олеиновая кислота, могут быть использованы для получения инъекционных препаратов.
Соединения, соответствующие какой-либо из формул I-IX, можно ввести парентерально в стерильной среде. Парентеральное введение включает подкожные инъекции, внутривенную, внутримышечную, интратекальную инъекцию или способы инфузии. Соединения, соответствующие какой-либо из формул I-IX, в зависимости от используемых среды и концентрации, могут быть либо суспендированы, либо растворены в среде. Благоприятно, что вспомогательные компоненты, такие как анестезирующие средства, консерванты и забуферивающие агенты, можно растворить в среде. Во многих композициях для парентерального введения носитель содержит по меньшей мере 90 масс.% от всей композиции. В ряде вариантов осуществления носитель для парентерального введения выбран из пропиленгликоля, этилолеата, пирролидона, этанола и кунжутного масла.
Соединения, соответствующие какой-либо из формул I-IX, можно также ввести в форме суппозиториев для ректального введения лекарственного препарата. Данные композиции можно получить смешиванием лекарственного препарата с подходящим нераздражающим наполнителем, который является твердым при обычных температурах, но жидким при ректальной температуре, и, вследствие этого, будет плавиться в прямой кишке, высвобождая лекарственный препарат. Данные материалы включают масло какао и полиэтиленгилколи.
Соединения, соответствующие какой-либо из формул I-IX, можно приготовить для местного или наружного применения, например для местного нанесения на кожу и слизистые оболочки, такие как в глазах, в форме гелей, кремов и лосьонов, и предназначенные для введения в глаз. Композиции для местного применения могут находиться в любой форме, включая, например, растворы, кремы, мази, гели, лосьоны, молочко, очищающие средства, увлажняющие средства, спреи, кожные пластыри и т.п.
Данные растворы можно приготовить в виде 0,01%-10% изотонических растворов, рН 5-7, с использованием подходящих солей. Можно также приготовить соединения, соответствующие какой-либо из формул I-IX, предназначенные для чрескожного введения, в виде чрескожного пластыря.
Композиции для местного применения, содержащие соединение, соответствующее любой из формул I-IX, можно смешать с рядом материалов-носителей, хорошо известных в области техники, таких как, например, вода, спирты, гель алоэ вера, аллантоин, глицерин, витамины А и Е в масле, минеральное масло, пропиленгликоль, миристилпропионат PPG-2 и т.п.
Другие материалы, подходящие для применения в носителях для местных препаратов, включают, например, смягчающие компоненты, растворители, увлажнители, сгустители и порошки. Примерами каждого из данных типов материалов, которые можно использовать отдельно или в виде смесей одного или более материалов, являются следующие материалы.
Репрезентативные смягчающие компоненты включают стеариловый спирт, глицерилмонорицинолеат, глицерилмоностеарат, пропан-1,2-диол, бутан-1,3-диол, масло норки, цетиловый спирт, изо-пропилизостеарат, стеариновую кислоту, изо-бутилпальмитат, изоцетилстеарат, олеиловый спирт, изопропиллаурат, гексиллаурат, децилолеат, октадекан-2-ол, изоцетиловый спирт, цетилпальмитат, диметилполисилоксан, ди-н-бутилсебацинат, изопропилмиристат, изопропилпальмитат, изопропилстеарат, бутилстеарат, полиэтиленгликоль, метиленгликоль, ланолин, кунжутное масло, кокосовое масло, арахисовое масло, касторовое масло, ацетилированные ланолиновые спирты, нефть, минеральное масло, бутилмиристат, изостеариновая кислота, пальмитиновая кислота, изопропиллинолеат, лауриллактат, миристиллактат, децилолеат и миристилмиристат; пропелленты, такие как пропан, бутан, изо-бутан, диметиловый эфир, диоксид углерода и оксид азота; растворители, такие как этиловый спирт, метиленхлорид, изо-пропанол, касторовое масло, моноэтиловый эфир этиленгликоля, монобутиловый эфир диэтиленгликоля, моноэтиловый эфир диэтиленгликоля, диметилсульфоксид, диметилформамид, тетрагидрофуран; увлажнители, такие как глицерин, сорбит, натрий 2-пирролидон-5-карбоксилат, растворимый коллаген, дибутилфталат и желатин, и порошки, такие как мел, тальк, фуллерова земля, каолин, крахмал, камеди, коллоидный диоксид кремния, полиакрилат натрия, тетраалкиламмониймонтмориллониты, триалкилариламмониймонтмориллониты, химически модифицированный силикат магния алюминия, органически модифицированная монтмориллонитовая глина, гидратированный силикат алюминия, плавленый оксид кремния, карбоксивиниловый полимер, натрий карбоксиметилцеллюлоза и этиленгликольмоностеарат.
Соединения, соответствующие какой-либо из формул I-IX, можно также применять местно в форме липосомальных доставляющих систем, таких как маленькие однослойные пузырьки, большие однослойные пузырьки и многослойные пузырьки. Липосомы можно сформировать из множества фосфолипидов, таких как холестерин, стеариламин и фосфатидилхолины.
Другие композиции, используемые для получения системной доставки соединения, включают подъязычные, защечные и назальные лекарственные формы. Данные композиции, как правило, включают одну или более растворимых субстанций наполнителей, таких как сахароза, сорбит и манит, и связующие компоненты, такие как акация, микрокристаллическая целлюлоза, карбоксиметилцеллюлоза и гидроксипропилметилцеллюлоза. Вышеописанные скользящие агенты, смазывающие компоненты, подсластители, красители, антиоксиданты и вкусовые добавки также могут быть включены.
Композиции для ингаляции, как правило, могут быть представлены в форме раствора, суспензии или эмульсии, которую можно ввести в виде сухого порошка или в форме аэрозоля при использовании принятого пропеллента (например, дихлордифторметана или трихлорфторметана).
Композиции, соответствующие настоящему изобретению, могут также необязательно содержать усилитель активности. Усилитель активности можно выбрать из широкого круга молекул, которые действуют различными путями, для усиления или чтобы они не зависели от терапевтических эффектов настоящих соединений. Конкретные классы усилителей активности включают усилители проникновения через кожу и усилители всасывания.
Фармацевтические композиции, соответствующие изобретению, могут также содержать дополнительные активные агенты, которые можно выбрать из широкого круга молекул, которые могут действовать различными путями, для усиления терапевтических эффектов соединения, соответствующего любой из формул I-IX. Данные необязательные другие активные агенты, когда они присутствуют, как правило, используют в композициях, соответствующих изобретению, на уровне, лежащем в интервале 0,01% до 15%. Некоторые варианты осуществления содержат от 0,1% до 10% от массы композиции. Другие варианты осуществления содержат от 0,5% до 5% от массы композиции.
Изобретение включает упакованные фармацевтические препараты. Данные упакованные препараты включают фармацевтическую композицию, содержащую соединение, соответствующее любой из формул I-IX, и их фармацевтически приемлемые соли, сольваты и смеси, а также инструкции по применению композиции для лечения млекопитающего (как правило, больного человека). В ряде вариантов осуществления инструкции являются инструкциями по использованию фармацевтической композиции для лечения пациента, страдающего от заболевания, чувствительного к ингибированию активности Btk и/или ингибированию активности В-клеток и/или миелоидных клеток. Изобретение может включать представление информации по предписаниям, например, для пациента или поставщика системы здравоохранения, или в виде этикетки в упакованном фармацевтическом препарате. Информация по предписаниям может включать, например, информацию относительно эффективности, дозировки и введения, противопоказаний и побочных реакций, касающуюся фармацевтического препарата.
Во всех вышеописанных случаях соединения, соответствующие какой-либо из формул I-IX, можно применять в виде монотерапии, в виде смесей или в комбинации с другими активными агентами.
Соответственно изобретение включает способ лечения пациента, например млекопитающего, такого как человек с заболеванием, чувствительным к ингибированию активности Btk, включающий введение пациенту с данным заболеванием, эффективного количества соединения, соответствующего любой из формул I-IX, и его фармацевтически приемлемых солей, сольватов и их смесей.
В той мере, в которой Btk участвует в заболевании, облегчение заболевания, симптомов заболевания, предупредительное и профилактическое лечение входит в объем данного изобретения. В ряде вариантов осуществления соединения, соответствующие какой-либо из формул I-IX, могут также ингибировать другие киназы, так что облегчение заболевания, симптомов заболевания, предупредительное и профилактическое лечение состояний, связанных с данными киназами, также входит в объем данного изобретения.
Способы лечения включают также ингибирование активности Btk и/или ингибирование активности В-клеток и/или миелоидных клеток путем ингибирования связывания или гидролиза АТФ посредством Btk или какого-либо другого механизма in vivo у пациента, страдающего заболеванием, чувствительным к ингибированию активность Btk, путем введения эффективной концентрации соединения, соответствующего любой из формул I-IX, и его фармацевтически приемлемых солей, сольватов и их смеси. Примером эффективной концентрации будет такая. Эффективную концентрацию можно установить экспериментально, например, путем анализа концентрации соединения в крови, или теоретически, путем расчета биодоступности.
В ряде вариантов осуществления состояние, чувствительное к ингибированию активности Btk и/или активности В-клеток и/или миелоидных клеток, представляет собой рак, нарушение костей, аллергическое нарушение и/или аутоиммунное и/или воспалительное заболевание и/или острая воспалительная реакция.
Изобретение включает способ лечения больного раком, нарушением костей, аллергическим нарушением и/или аутоиммунным и/или воспалительным заболеванием и/или острой воспалительной реакцией путем введения эффективного количества соединения, соответствующего любой из формул I-IX, и его фармацевтически приемлемых солей, сольватов и смесей.
В ряде вариантов осуществления состояний и заболевания, на которые можно воздействовать, используя соединения, соответствующие какой-либо из формул I-IX, включают, но без ограничения перечисленным:
аллергические нарушения, в том числе, но без ограничения перечисленным, экзему, аллергический ринит или насморк, сенную лихорадку, бронхиальную астму, крапивницу (сыпь) и пищевые аллергии и другие атопические состояния;
аутоиммунные и/или воспалительные заболевания, включая, но без ограничения перечисленным, псориаз, болезнь Крона, синдром воспаленной кишки, болезнь Шегрена, отторжение тканевого трансплантата и гиперактивное отторжение трансплантированных органов, астму, системную красную волчанку (и ассоциированный гломерулонефрит), дерматомиозит, рассеянный склероз, склеродерму, васкулит (ANCA-ассоциированный и другие васкулитиды), аутоиммунные гемолитические и тромбоцитопенические состояния, синдром Гудпасчера (и ассоциированный гломерулонефрит и легочное кровотечение), атеросклероз, ревматоидный артрит, остеоартрит, хроническая идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура (ITP), болезнь Аддисона, болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера, сахарный диабет (типа 1), септический шок, злокачественную миастению, язвенный колит, апластическую анемию, кишечное заболевание, связанное с непереносимостью глиадина, грануломатоз Вегенера и другие заболевания, в которых клетки и антитела образуются из собственных тканей пациента и направлены на них;
острые воспалительные реакции, включая, но без ограничения перечисленным, солнечные ожоги кожи, воспалительное заболевание тазовых органов, воспалительная болезнь кишки, уретрит, увеит, синусит, пневмонию, энцефалит, менингит, миокардит, нефрит, остеомиелит, миозит, гепатит, гастрит, энтерит, дерматит, гингивит, аппендицит, панкреатит и холецистит;
рак, включая, но без ограничения перечисленным, гематологические злокачественные заболевания, такие как В-клеточная лимфома и лимфобластный лейкоз, острый миелогенный лейкоз, хронический миелогенный лейкоз, хронический и острый лимфолейкоз, лейкоз волосковых клеток, болезнь Ходжкина, лимфома не-Ходжкина, множественная миелома и другие болезни, которые характеризуются раком крови или лимфатической системы, и нарушения костей, включая, но без ограничения перечисленным, остеопороз.
Btk представляет собой известный ингибитор апоптоза в В-клетках лимфомы. Дефектный апоптоз вносит вклад в патогенез и лекарственную устойчивость при лейкозах и лимфомах человека. Таким образом, далее предусматривают способ стимуляции или индукции апоптоза в клетках, экспрессирующих Btk, включающий контактирование клетки с соединением, соответствующим любой из формул I-IX, его фармацевтически приемлемыми солями, сольватами и смесями.
Изобретение предусматривает способы лечения, в которых соединение, соответствующее любой из формул I-IX, и его фармацевтически приемлемые соли, сольваты и смеси или композиция (например, его фармацевтическая композиция), представляет собой единственный активный агент, который дают пациенту, а также включает способы лечения, в которых соединение, соответствующее любой из формул I-IX, и его фармацевтически приемлемые соли, сольваты и смеси или композицию (например, его фармацевтическую композицию) дают пациенту в комбинации с одним или более дополнительных активных агентов. Дополнительный активный агент(ы) можно давать пациенту последовательно или постоянно с соединением или композицией, соответствующей настоящему изобретению.
Изобретение предусматривает способы лечения ревматоидного артрита, системной красой волчанки, рассеянного склероза и/или астмы, в которых соединение, соответствующее любой из формул I-IX, и его фармацевтически приемлемые соли, сольваты и смеси, представляет собой единственный активный агент, который дают пациенту, а также включает способы лечения ревматоидного артрита, системной красой волчанки, рассеянного склероза и/или астмы, в которых соединение, соответствующее любой из формул I-IX, и его фармацевтически приемлемые соли, сольваты и смеси дают пациенту в комбинации с одним или более дополнительных активных агентов.
Таким образом, в одном варианте осуществления изобретение предусматривает способ лечения рака, нарушения костей, аллергического нарушения, и/или аутоиммунного и/или воспалительного заболевания, и/или острой воспалительной реакции, который включает введение нуждающемуся в этом пациенту эффективного количества соединений, соответствующих какой-либо из формул I-IX, и их фармацевтически приемлемых солей, сольватов и смесей совместно со вторым активным агентом, который может быть использован для лечения рака, нарушений костей, аллергического нарушения и/или аутоиммунного и/или воспалительного заболевания и/или острой воспалительной реакции. Например, второй агент может представлять собой противовоспалительный агент. Лечение вторым активным агентом можно проводить до, одновременно или после лечения соединением, соответствующим любой из формул I-IX, и его фармацевтически приемлемой солью, сольватом и их смесью. В ряде вариантов осуществления соединение, соответствующее любой из формул I-IX, и его фармацевтически приемлемые соли, сольваты и смеси комбинируют с другим активным агентом в одной лекарственной форме. Подходящие противоопухолевые лекарственные препараты, которые можно использовать в комбинации с соединением, соответствующим любой из формул I-IX, включают, но без ограничения перечисленным, химиотерапевтические агенты, например митомицин С, карбоплатин, таксол, цисплатин, паклитаксел, этопозид, доксорубицин или комбинация, включающая по меньшей мере один из вышеописанных химиотерапевтических агентов. Можно также использовать радиотерапевтические противоопухолевые агенты в виде монотерапии или в комбинации с химиотерапевтическими агентами.
Соединения, соответствующие какой-либо из формул I-IX, можно использовать как химиосенсибилизаторы, и, таким образом, их можно использовать в комбинации с другими химиотерапевтическими лекарственными препаратами, в частности лекарственными препаратами, которые индуцируют апоптоз.
В данном контексте предусматривают также способ повышения чувствительности раковых клеток к химиотерапии, включающий введение пациенту, проходящему химиотерапию, химиотерапевтического агента совместно с соединением, соответствующим любой из формул I-IX, и его фармацевтически приемлемыми солями, сольватами и их смесями, в количестве, достаточном для повышения чувствительности раковых клеток к химиотерапевтическому агенту.
Примеры других химиотерапевтических лекарственных препаратов, которые можно использовать в комбинации с настоящими соединениями, включают ингибиторы топоизомеразы I (камптотецин или топотекан), ингибиторы топоизомеразы II (например, дауномицин и этопозид), алкилирующие агенты (например, циклофосфамид, мелфалан и BCNU), тубулин направленные агенты (например, таксол и винбалстин), биологические агенты (например, антитела, такие как антитело к CD20, IDEC 8, иммунотоксины и цитокины), ингибиторы тирозинкиназы (например, гливек) и т.п. Данные примеры других химиотерапевтических лекарственных препаратов, которые можно использовать в комбинации с настоящими соединениями, также включают R-CHOP (циклофосфамид (называемый также цитоксан/неосар), доксорубицин (или адриамицин), винкристин (онковин) и преднизолон), ICE (ифосфамид, карбоплатин и этопозид), DHAP (дексаметазон, цисплатин и цитарабин), ESHAP (этопозид, метилпреднизолон, цитарабин и цисплатин), гемцитабин, ритуксан®, треанда®, хлорамбуцил, флударабин, алемтуцумаб и т.п.
В данном контексте включены способы лечения, например лечения аутоиммунных и/или воспалительных заболеваний, в которых соединение, соответствующее любой из формул I-IX, и его фармацевтически приемлемые соли, сольваты и смеси вводят в комбинации с противовоспалительными агентами. Противовоспалительные агенты включают, но без ограничения перечисленным, NSAID, неспецифические и СОХ-2-специфические ингибиторы фермента циклооксигеназы, соединения золота, кортикостероиды, метотрексат, антагонисты рецепторов фактора некроза опухолей (ФНО), иммунодепрессанты и метотрексат.
Примеры NSAID включают, но без ограничения перечисленным, ибупрофен, фларбипрофен, напроксен и напроксен натрий, диклофенак, комбинации диклофенака натрия и мисопростола, сулиндак, оксапрозин, дифлунисал, пироксикам, индометацин, этодолак, фенопрофен кальций, кетопрофен, набуметон натрий, сульфасалазин, толметин натрий и гидроксихлороквин. Примеры NSAID включают также СОХ-2-специфические ингибиторы (т.е. соединение, которое ингибирует СОХ-2 с IC50, что по меньшей мере в 50 раз ниже, чем IC50 для СОХ-1), такие как целекоксиб, валдекоксиб, лумиракоксиб, эторикоксиб и/или рофекоксиб.
В другом варианте осуществления противовоспалительным агентом является салицилат. Салицилаты включают, но без ограничения перечисленным, ацетилсалициловую кислоту или аспирин, салицилат натрия, а также холинсалицилат и салицилат магния.
Противовоспалительный агент может также представлять собой кортикостероид. Например, кортикостероид может быть выбран из кортизона, дексаметазона, метилпреднизолона, преднизолона, преднизолона фосфата натрия и преднизона.
В дополнительных вариантах осуществления противовоспалительный терапевтический агент представляет собой соединение золота, такое как тиомалат золота натрия или ауранофин. Изобретение включает также варианты осуществления, в которых противовоспалительный агент представляет собой метаболический ингибитор, такой как ингибитор дигидрофолатредуктазы, такой как метотрексат, или ингибитор дигидрооротатдегидрогеназы, такой как лефлуномид. Второй противовоспалительный агент, который можно использовать в комбинации с одним или более соединений, соответствующих настоящему изобретению, включает биологические компоненты и пероральные агенты для лечения ревматоидного артрита.
Другие варианты осуществления изобретения относятся к комбинациям, в которых по меньшей мере одно противовоспалительное соединение представляет собой моноклональное антитело к С5 (такое как экулицумаб или пекселицумаб), антагонист ФНО, такой как энтанерцепт, инфликсимаб и адалимумаб (Хумира®), которые представляют собой моноклональные антитела к ФНО- .
Еще ряд других вариантов осуществления изобретения относится к комбинациям, в которых по меньшей мере один активный агент представляет собой соединение иммунодепрессанта, такое как метотрексат, лефлуномид, циклоспорин, такролимус, азатиоприн или микофенолят мофетил.
Еще ряд других вариантов осуществления изобретения относится к комбинациям с Ритуксаном ® (Ритуксимабом) или другими агентами, которые работают путем избирательного истощения В-клеток CD20+.
Уровни доз порядка величины, например, от 0,1 мг до 140 мг/кг массы тела/день можно использовать при лечении вышеуказанных состояний (0,5 мг - 7 г/пациента/день). Количество активного ингредиента, которое можно смешивать с носителем для получения лекарственной формы для однократного применения, будет варьироваться в зависимости от хозяина, которого лечат, и конкретного способа введения. Унифицированные лекарственные формы будут, как правило, содержать от 1 мг до 500 мг активного ингредиента.
Частота дозирования может также варьироваться в зависимости от используемого соединения и конкретного заболевания, которое лечат. В ряде вариантов осуществления, например, для лечения аллергического нарушения и/или аутоиммунного и/или воспалительного заболевания, используют схему дозирования 4 раза в день или меньше. В ряде вариантов осуществления используют схему дозирования 1 или 2 раза в день. Однако следует иметь в виду, что специальный уровень дозировки для какого-либо конкретного пациента будет зависеть от ряда факторов, включая активность используемого специфического соединения, возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол, диету, время введения, путь введения и скорость выведения, комбинацию лекарственных препаратов и тяжесть конкретного заболевания у пациента, проходящего лечение.
Меченую форму соединения, соответствующего изобретению, можно использовать в качестве диагностического агента для идентификации и/или получения соединений, которые обладают функцией модуляции активности киназы, как описано в данном контексте. Соединения, соответствующие изобретению, можно дополнительно использовать для подтверждения, оптимизации и стандартизции биоанализов.
Под термином "меченый" в данном контексте понимают, что в соединение либо прямым, либо непрямым образом введена метка, которая дает определяемый сигнал, например радиоизотоп, флуоресцентная метка, фермент, антитела, частицы, такие как магнитные частицы, хемолюминесцентная метка или специфические связывающие молекулы и т.п. Специфические связывающие молекулы включают пары, такие как биотин и стрептавидин, дигоксин и антидигоксин и т.п. Для специфического связывания членов комплементарный член должен, как правило, быть помечен молекулой, которая обеспечивает детекцию, в соответствии с известными способами, как указано выше. Метка может прямым или непрямым образом давать определяемый сигнал.
Далее изобретение иллюстрируют с помощью следующих неограничивающих примеров.
Пример 1
Схема 1а
Метил 2-(4-Нитрофенил)ацетат (соединение 1)
В одногорлую круглодонную колбу объемом 1 л, снабженную магнитной мешалкой и оросительным конденсатором, вносят 4-нитрофенилуксусную кислоту (14,1 г, 77,5 ммоль), безводный метанол (130 мл) и концентрированную серную кислоту (12,0 мл, 216 ммоль) и нагревают реакционную смесь с обратным холодильником в течение 16 часов. После этого реакцию концентрируют досуха при пониженном давлении. Полученный в результате остаток распределяют между водой (500 мл) и диэтиловым эфиром (200 мл) и разделяют слои. Водную фазу экстрагируют диэтиловым эфиром (100 мл). Объединенные органические фазы промывают насыщенным водным карбонатом натрия и сушат над сульфатом магния и осушитель удаляют фильтрованием. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении и сушат до постоянной массы под вакуумом с получением при выходе 96% соединения 1 (14,6 г) в виде твердого вещества белого цвета: ТП (температура плавления) 45-46°С: Данные 1H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, CDCl3) дельта 8,19 (d, 2H, J=8,5 Гц), 7,46 (d, 2H, J=8,5 Гц), 3,75 (s, 2H), 3,73 (s, 3H). Ссылка: Tetrahedron 2002, 58, 10113.
Метил 2-бром-2-(4-нитрофенил)ацетат (соединение 2).
В одногорлую круглодонную колбу объемом 1 л, снабженную магнитной мешалкой и оросительным конденсатором, вносят соединение 1 (10,6 г, 54.1 ммоль), четыреххлористый углерод (120 мл), N-бромсукцинимид (10,7 г, 59,9 ммоль) и азобисизобутилнитрил (275 мг, 1,67 ммоль) и нагревают реакционную смесь с обратным холодильником в течение 18 часов. После этого реакцию охлаждают до комнатной температуры и выливают в гептан (120 мл). Полученную в результате суспензию фильтруют и осадок на фильтре промывают гептаном (40 мл). Фильтрат концентрируют при пониженном давлении и полученный в результате остаток подвергают экспресс-хроматографии с получением соединения 2 с выходом 72% (10,7 г) в виде прозрачного масла: Данные 1H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, CDCl 3) дельта 8,23 (d, 2H, J=9 Гц), 7,74 (d, 2H, J=9,0 Гц), 5,40 (s, 1H), 3,82 (s, 3H); MC (ESI-) m/z 272 (M-H). Ссылка: Tetrahedron 2002, 58, 10113.
1,4-Диметил-3-(4-нитрофенил)пиперазин-2-он (соединение 3).
Одногорлую круглодонную колбу объемом 100 мл, снабженную магнитной мешалкой, продувают азотом, вносят N1,N2-диметилэтан-1,2-диамин (1,61 г, 18,2 ммоль), этанол (5 мл) и соединение 2 (500 мг, 1,82 ммоль) и перемешивают реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа. После этого реакционную смесь упаривают при пониженном давлении и полученный в результате остаток очищают колоночной экспресс-хроматографией с получением соединения 3 с выходом 89% (404 мг) в виде масла желтого цвета: Данные 1H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, ДМСО-d6 ) дельта 8,18 (d, 2Н, J=8,5 Гц), 7,60 (d, 2H, J=8,5 Гц), 3,87 (s, 1H), 3,61 (td, 1H, J=12,0, 4,0 Гц), 3,26 (ddd, 1H, J=12,0, 4,0, 2,5 Гц), 3,02 (ddd, 1H, J=12,0, 4,0, 2,5 Гц), 2,84 (s, 3H), 2,64 (td, 1H, J=12,0, 4,0 Гц), 2,06 (s, 3H).
3-(4-Аминофенил)-1,4-диметилпиперазин-2-он (соединение 4).
Одногорлую круглодонную колбу объемом 50 мл, снабженную магнитной мешалкой, продувают азотом и вносят соединение 3 (200 мг, 0,80 ммоль), этанол (5 мл) и 10% палладий на угле (50% влажности, 4 мг по сухой массе). Реакционную колбу продувают газообразным водородом и реакционную смесь перемешивают под давлением баллонного водорода в течение 2 часов. После этого колбу продувают азотом. Катализатор удаляют фильтрованием через слой Celite 521 и осадок на фильтре промывают этанолом (10 мл). Фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением соединения 4 с выходом 94% (166 мг) в виде бесцветного масла: Данные 1H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, ДМСО-d6) дельта 6,89 (d, 2H, J=8,5 Гц), 6,47 (d, 2H, J=8,5 Гц), 4,94 (s, 2H), 3,53 (td, 1H, J=12,0, 4,0 Гц), 3,44 (m, 1H), 3,21 (dt, 1H, J=12,0, 4,0 Гц), 2,92 (dt, 1H, J=12,0, 4,0 Гц), 2,82 (s, 3Н), 2,02 (s, 3Н); MS (ESI+) m/z 220 (M+H).
5-бром-3-гидрокси-1-метил-1Н-пиразин-2-он, соль бромисто-водородной кислоты (соединение 5).
Трехгорлую круглодонную колбу объемом 500 мл, снабженную механической мешалкой и оросительным конденсатором, продувают азотом и вносят 2-(метиламино)ацетонитрил (23,4 г, 220 ммоль) и метиленхлорид (200 мл). Суспензию обрабатывают оксалилбромидом (50,0 г, 231 ммоль) и реакцию нагревают до кипения с обратным холодильником. Через 2,5 дня полученную в результате смесь охлаждают до 0°С и фильтруют. Осадок на фильтре промывают метиленхлоридом (2×30 мл) и сушат до постоянной массы под вакуумом с получением соединения 5 с выходом 79% (49,4 г) в виде твердого вещества оранжевого цвета: ТП 161-162°С; Данные 1H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, ДМСО-d6) дельта 12,00 (s, 1H), 5,11 (s, 1H), 2,95 (s, 3Н); MS (ESI+) m/z 205 (M-Br).
4,4,5,5-Тетраметил-2-(2-метил-3-нитрофенил)-[1,3,2]диоксаборолан (соединение 6).
Трехгорлую круглодонную колбу объемом 1 л, снабженную механической мешалкой и терморегулятором, продувают азотом и вносят 2-бром-6-нитротолуол (60,2 г; 278 ммоль), бис(пинаколято)диборон (85,2 г; 336 ммоль), ацетат калия (82,4 г; 840 ммоль) и ДМСО (320 мл). Через полученную в результат суспензию пропускают поток азота в течение 30 минут, затем добавляют [1,1'бис(дифенилфосфино)-ферроцен] дихлорпалладий (II), затем добавляют комплекс с дихлорметаном (1:1) (7,60 г; 9,30 ммоль) и нагревают реакцию при 85°С в течение 20 час. После этого смесь охлаждают до температуры окружающей среды, выливают в смесь воды (1300 мл) и MtBE (500 мл) и обрабатывают Cellpure P65 (150 см3). Полученную в результате суспензию фильтруют через слой Cellpure P65 (200 см3), нанесенный на фриттованную воронку (ID 185 мм). Осадок на фильтре промывают MtBE (3×180 мл) и отделяют органический слой фильтрата, промывают водой (3×1 л) и сушат над сульфатом натрия. После того как отфильтровывают сульфат натрия, фильтрат концентрируют и очищают экспресс-хроматографией с получением 4,4,5,5-тетраметил-2-(2-метил-3-нитрофенил)-[1,3,2]диоксаборолана (соединение 6) в виде твердого вещества светло-желтого цвета: ТП 52-53°С; МС (APCI+) m/z 264 (М+Н).
2-Метил-3-(4,4,5,5-тетрамет-2-ил)-фениламин (соединение 7).
В круглодонную колбу объемом 500 мл, снабженную магнитной мешалкой, вносят 4,4,5,5-Тетраметил-2-(2-метил-3-нитрофенил)-[1,3,2]диоксаборолан (соединение 6) (8,44 г; 32,1 ммоль) и метанол (150 мл). Реакционную колбу дважды опорожняют и снова наполняют аргоном. Затем к раствору добавляют 10% палладий на угле (50% влажности, 425 мг по сухой массе) и реакционную колбу трижды опорожняют и снова наполняют водородом. Затем реакцию перемешивают под давлением баллонного водорода при комнатной температуре в течение 13 часов. После этого колбу дважды опорожняют и снова наполняют аргоном, затем фильтруют через слой Celite 521 и фильтрат концентрируют в вакууме. Полученный в результате остаток сушат под высоким вакуумом в течение 1 дня с получением количественного выхода (8,16 г) 2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-фениламина (соединение 7) в виде твердого вещества белого цвета: ТП 110-112°С; МС (ESI+) m/z 234 (М+Н).
4,5,6,7-Тетрагидро-бензо[b]тиофен-2-карбонилхлорид (соединение 8).
4,5,6,7-Тетрагидро-бензо[b]тиофен-2-карбоновую кислоту (1,0 г, 5,50 ммоль) растворяют в дихлорметане [ДХМ] (25 мл), который содержит 5 капель N,N-диметилформамида [ДМФ], под азотом и охлаждают до 0°С. Оксалилхлорид (13,7 мл 2,0 М раствора в ДХМ) добавляют с помощью шприца и позволяют нагреваться до КТ (комнатной температуры) в течение 1 часа. Затем весь растворитель удаляют при пониженном давлении, и полученное в результате масло восстанавливают из толуола (3×20 мл), чтобы удалить остаточный оксалилхлорид. Затем остаток растворяют в этилацетате и промывают насыщенным бикарбонатом натрия (1×100 мл), затем промывают насыщенным хлоридом натрия (1×100 мл) и сушат над сульфатом натрия. Раствор затем фильтруют и концентрируют при пониженном давлении с получением 4,5,6,7-тетрагидро-бензо[b]тиофен-2-карбонилхлорида (соединение 8) в виде твердого вещества не совсем белого цвета (1,03 г).
[2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-фенил]-амид 4,5,6,7-тетрагидро-бензо[b]тиофен-2-карбоновой кислоты (соединение 9).
2-Метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2] диоксаборолан-2-ил)-фениламин (соединение 7) (1,20 г, 5,16 ммоль, 1,0 эквив.) и пиридин (0,42 мл, 25,8 ммоль) растворяют в ДХМ (40 мл) при 0°С в атмосфере азота. Затем порциями добавляют 4,5,6,7-тетрагидро-бензо[b]тиофен-2-карбонилхлорид (соединение 8) (1,03 г, 5,16 ммоль) в течение 5 минут и позволяют протекать реакции при нагревании до КТ в течение 60 минут. Затем весь растворитель удаляют при пониженном давлении, и полученное в результате масло восстанавливают из толуол (3×20 мл) для удаления остаточного пиридина. Затем остаток растворяют в этилацетате и промывают гидроксидом натрия (1 н., 1×100 мл), затем промывают насыщенным хлоридом натрия (1×100 мл) и сушат над сульфатом натрия. Затем раствор затем фильтруют и концентрируют при пониженном давлении с получением [2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-фенил]-амида 4,5,6,7-тетрагидро-бензо[b]тиофен-2-карбоновой кислоты (соединение 9) в виде твердого вещества не совсем белого цвета (1,87 г).
Натрий 4-метил-6-(2-метил-3-(4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамидо)фенил)-3-оксо-3,4-дигидропиразин-2-олат (соединение 10).
В трехгорлую круглодонную колбу объемом 250 мл, снабженную механической мешалкой, оросительным конденсатором и входом для азота, вносят 1,4-диоксан (100 мл) и водный 2,0 М карбонат натрия (15 мл, 29,5 ммоль). После барботирования азотом полученного в результате раствора в течение 15 минут добавляют соединение 5 (8,44 г, 29,5 ммоль), соединение 9 (12,9 г, 32,5 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладий (2,38 г, 2,06 ммоль) и затем нагревают реакционную смесь с обратным холодильником в течение 20 часов. После этого реакцию охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через слой Celite 521. Осадок на фильтре промывают раствором 1:1 метанола/метиленхлорида (350 мл) и отбрасывают осадок на фильтре. При выстаивании в фильтрате образуется осадок и данное твердое вещество отфильтровывают. Осадок на фильтре тритурируют этилацетатом (50 мл), фильтруют и сушат под вакуумом. Полученное в результате твердое вещество суспендируют в воде (75 мл), фильтруют и осадок на фильтре промывают водой (25 мл). Осадок на фильтре сушат до постоянной массы с получением соединения 10 с выходом 53% (6,57 г) в виде твердого вещества светло-желтого цвета: ТП 225-230°С. Данные 1H-ЯМР-спектроскопии (500 МГц, ДМСО-d6) дельта 9,73 (s, 1Н), 7,66 (s, 1Н), 7,21 (m, 1H), 7,16 (m, 2H), 6,37 (s, 1Н), 2,75 (m, 2H), 2,61 (m, 2H), 2,20 (s, 3Н), 1,77 (m, 4H); MS (ESI+) m/z 418 (M+H).
N-(3-(6-бром-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид (соединение 11)
Одногорлую круглодонную колбу объемом 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и оросительным конденсатором, продувают азотом и вносят соединение 10 (6,55 г, 15,7 ммоль) и безводный метиленхлорид (60 мл). К полученной в результате суспензии добавляют оксибромид фосфора (9,95 г, 34,3 ммоль) и N,N-диметилформамид (190 мг, 2,60 ммоль) и затем реакцию нагревают с обратным холодильником в течение 4 часов. После этого реакционную смесь выливают в 10% водный раствор карбоната натрия (100 мл) и добавляют метиленхлорид (75 мл). Полученную в результате суспензию фильтруют через Celite 521 и разделяют слои. Водный слой экстрагируют метиленхлоридом (2×100 мл) и объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный в результате остаток тритурируют раствором 2:1 этилацетата/гексанов (10 мл) и фильтруют. Осадок на фильтре промывают раствором 2:1 этилацетата/гексанов (20 мл) и сушат до постоянной массы под вакуумом с получением соединения 11 с выходом 50% (3,59 г) в виде твердого вещества светло-желтого цвета: ТП 240-241°С. Данные 1H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, ДМСО-d6) дельта 9,86 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 7,28 (m, 3H), 3,57 (s, 3Н), 2,76 (t, 2H, J=5,5 Гц), 2,61 (t, 2H, J=5,5 Гц), 2,18 (s, 3Н), 1,76 (m, 4H); MS (ESI+) m/z 458 (M+H).
N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид (соединение 12).
В одногорлую круглодонную колбу объемом 25 мл, снабженную магнитной мешалкой и оросительным конденсатором, вносят соединение 4 (160 мг, 0,73 ммоль), соединение 11 (304 мг, 0,66 ммоль), карбонат цезия (475 мг, 1,46 ммоль) и 1,4-диоксан (10 мл). После барботирования полученного в результате раствора азотом в течение 30 минут добавляют Xantphos (32 мг, 0,056 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (30 мг, 0,033 ммоль) и нагревают реакционную смесь с обратным холодильником в течение 16 часов. После этого реакцию охлаждают до комнатной температуры и концентрируют при пониженном давлении. Полученный в результате остаток абсорбируют на силикагеле и очищают экспресс-хроматографией с получением остатка, который далее очищают препаративной обращенно-фазовой ВЭЖХ с получением соединения 12 с выходом 30% (143 мг) в виде твердого вещества желтого цвета: ТП 155-156°С; Данные 1H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, ДМСО-d6) дельта 9,82 (s, 1H), 9,43 (s, 1H), 8,08 (d, 2H, J=7,5 Гц), 7,68 (s, 1H), 7,32 (d, 2H, J=7,5 Гц), 7,27-7,32 (m, 3Н), 7,24 (s, 1H), 4,88 (bs, 1H), 3,42-3,75 (m, 4H), 3,59 (s, 3Н), 2,95 (s, 3Н), 2,76 (m, 2H), 2,61 (m, 5H), 2,28 (s, 3Н), 1,78 (m, 4H); MS (ESI+) m/z 597 (M+H).
Пример 2
Схема 2
3,5-дибром-1-метил-2(1/Н)пиразинон (соединение 13).
(J.Heterocycl. Chem. 1983, 20, 919)
В трехгорлую круглодонную колбу объемом 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и оросительным конденсатором, вносят 1,2-дихлорбензол (100 мл) и оксалилбромид (60,6 г; 281 ммоль). К раствору добавляют метиламиноацетонитрил (7,01 г; 65,8 ммоль) и реакцию нагревают под азотом до 80°С. Через 18 часов полученную в результате смесь охлаждают до комнатной температуры, упаривают при пониженном давлении и полученный в результате остаток очищают экспресс-хроматографией с получением 3,5-дибром-1-метил-2(1Н)пиразинона (соединение 13) (2,87 г, 16%) в виде твердого вещества не совсем белого цвета: ТП 94-95°С; МС (ESI+) m/z 267 (М+Н).
5-бром-3-(4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-1-метилпиразин-2(1Н)-он (соединение 14).
В трехгорлую круглодонную колбу объемом 100 мл, снабженную механической мешалкой и оросительным конденсатором, вносят соединение 4 (780 мг, 3,56 ммоль), соединение 13 (998 мг, 3,73 ммоль), карбонат цезия (2,36 г, 7,26 ммоль) и 1,4-диоксан (40 мл). После барботирования азотом полученного в результате раствора в течение 30 минут добавляют Xantphos (0,162 г, 0,281 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (0,15 г, 0,165 ммоль) и нагревают реакционную смесь с обратным холодильником в течение 16 часов. После этого реакцию охлаждают до комнатной температуры и концентрируют при пониженном давлении. Полученный в результате остаток абсорбируют на силикагеле и очищают экспресс-хроматографией с получением соединения 14 с выходом 57% (818 мг) в виде твердого вещества оранжевого цвета: ТП 206-207°С; Данные 1 H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, CDCl3) дельта 8,27 (bs, 1H), 7,72 (dd, 1H, J=2,0, 8,5 Гц), 7,36 (dd, 2H, J=2,0, 8,5 Гц), 6,73 (s, 1H), 3,71 (m, 1H), 3,69 (s, 1H), 3,52 (s, 3H), 3,21 (m, 1H), 3,01 (m, 1H), 2,97 (s, 3H), 2,67 (m, 1H), 2,19 (s, 3H); MS (ESI+) m/z 406 (M+H).
5-(3-амино-2-метилфенил)-3-(4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-1-метилпиразин-2(Н)-он (соединение 15).
В трехгорлую круглодонную колбу объемом 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, оросительным конденсатором и входом для азота вносят соединение 14 (2,50 г, 6,16 ммоль), соединение 7 (1,79 г, 7,70 ммоль), 1,4-диоксан (70 мл) и раствор карбоната натрия (1,96 г, 18,5 ммоль) в воде (14 мл). После барботирования азота через полученную в результате смесь в течение 30 минут добавляют тетракис(трифенилфосфин)палладий (711 мг, 0,62 ммоль) и затем реакционную смесь нагревают с обратным холодильником в течение 11 часов. После этого реакцию охлаждают до комнатной температуры и добавляют 2 н. хлористо-водородную кислоту (70 мл), затем этилацетат (70 мл). Смесь перемешивают в течение 0,5 часа и затем фильтруют через слой Celite 521. Органический слой фильтрата отделяют и экстрагируют 2 н. хлористо-водородной кислотой (2×30 мл). Кислотные экстракты объединяют и промывают этилацетатом (4×50 мл). Затем водный раствор интенсивно перемешивают с этилацетатом (100 мл) при добавлении порциями твердого карбоната натрия пока не достигнут рН 12. Водный слой отделяют и экстрагируют этилацетатом (2×100 мл). Объединенные органические слои промывают солевым раствором (70 мл) и сушат над сульфатом магния. Осушитель удаляют фильтрованием и фильтрат концентрируют при пониженном давлении и сушат в вакуумной печи при 49°С в течение 24 часов с получением соединения 15 с выходом 86% (2,32 г) в виде пены янтарного цвета: ТП 133-134°С; Данные 1H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, CDCl3) дельта 8,29 (s, 1H), 7,80 (d, 1H, J=8,5 Гц), 7,29 (d, 2H, J=8,5 Гц), 7,05 (t, 1H, J=8,0 Гц), 6,79 (d, 1H, J=7,5 Гц), 6,73 (d, 1H, J=7,5 Гц), 6,68 (s, 1H), 3,72 (s, 3Н), 3,64 (m, 1H), 3,20 (m, 1H), 3,01 (m, 1H), 2,99 (s, 3Н), 2,66 (m, 1H), 2,24 (s, 3Н), 2,17 (s, 3Н); MS (ESI+) m/z 433,3 (M+H).
7-оксо-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоновая кислота (соединение 16).
Одногорлую круглодонную колбу объемом 25 мл, снабженную магнитной мешалкой, продувают азотом и вносят 4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоновую кислоту (3,00 г, 16,5 ммоль), уксусную кислоту (40 мл) и воду (40 мл). Раствор нитрата аммония церия (IV) (36,1 г, 65,9 ммоль) в уксусной кислоте (40 мл) добавляют по каплям и перемешивают реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа. После этого реакционную смесь выливают в воду (200 мл) и экстрагируют метиленхлоридом (3×200 мл). Органические экстракты объединяют, сушат над сульфатом натрия, фильтруют и удаляют растворитель при пониженном давлении с получением соединения 16 с выходом 72% (2,35 г) в виде твердого вещества желтого цвета: ТП 174-175°С; Данные 1H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, ДМСО-d6) дельта 13,60 (bs, 1H), 7,68 (s, 1H), 2,86 (t, 2H, J=6,0 Гц), 2,59 (t, 2H, J=6,0 Гц), 2,08 (квинтет, 2Н, J=6,0 Гц).
N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-7-оксо-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид (соединение 17).
Одногорлую круглодонную колбу объемом 50 мл, снабженную магнитной мешалкой, продувают азотом и вносят соединение 15 (249 мг, 1,27 ммоль), соединение 16 (500 мг, 1,16 ммоль), N,N-диизопропилэтиламин (600 мг, 4,64 ммоль) и безводный ДМФ (5 мл). Добавляют бензотриазол-1-ил-окси-трис(диметиламино)фосфонийгексафторфосфат (ВОР, 616 мг, 1,39 ммоль) и перемешивают реакцию в течение 4 часов. После этого реакцию разводят водой (10 мл) и полученную в результате суспензию фильтруют. Осадок на фильтре растворяют в метиленхлориде (20 мл) и раствор промывают 10% водной лимонной кислотой (10 мл), насыщенным водным бикарбонатом натрия (10 мл) и водой (10 мл) и сушат над сульфатом натрия. Осушитель удаляют фильтрованием и растворитель упаривают при пониженном давлении. Полученный в результате остаток очищают экспресс-хроматографией с получением соединения 17 с выходом 52% (370 мг) в виде твердого вещества белого цвета: ТП 154-155°С; Данные 1 H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, CD2Cl2) дельта 8,31 (s, 1H), 7,81 (dd, 1H, J=7,5, 1,5 Гц), 7,76-7,72 (m, 3Н), 7,50 (s, 1H), 7,28-7,23 (m, 4H), 6,73 (s, 1H), 3,64 (td, 1H, J=11,5, 4,5 Гц), 3,57 (s, 1H), 3,55 (s, 3Н), 3,14 (dt, 1H, J=11,5, 3,5 Гц), 2,93 (m, 1H), 2,88-2,86 (m, 5H), 2,62-2,57 (m, 3Н), 2,36 (s, 3Н), 2,17 (m, 2H), 2,09 (s, 3Н); MS (ESI+) m/z 611,2 (M+H).
N-(3-(6-(4-(1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-7-гидрокси-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид (соединение 18).
Одногорлую круглодонную колбу объемом 50 мл, снабженную магнитной мешалкой, продувают азотом и вносят соединение 17 (250 мг, 0,409 ммоль) и метанол (10 мл). Полученный в результате раствор охлаждают до 0°С и добавляют борогидрид натрия (31 мг, 0,819 ммоль). После перемешивания реакции при комнатной температуре в течение 2 часов растворитель упаривают при пониженном давлении. Полученный в результате остаток очищают экспресс-хроматографией с получением соединения 18 с выходом 88% (220 мг) в виде твердого вещества белого цвета: ТП 165-166°С; Данные 1H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, CD2 Cl2) дельта 8,38 (s, 1H), 7,90 (d, 1H, J=7,5 Гц), 7,81 (d, 2H, J=8,5 Гц), 7,71 (s, 1H), 7,39 (s, 1H), 7,34-7,27 (m, 4Н), 6,80 (s, 1H), 4,94 (m, 1H), 3,72 (td, 1H, J=11,5, 4,5 Гц), 3,65 (s, 1H), 3,62 (s, 3Н), 3,21 (m, 1H), 3,01 (m, 1H), 2,95 (s, 3Н), 2,76-2,62 (m, 3Н), 2,43 (s, 3H), 2,22-2,13 (m, 5H), 2,02 (m, 1H), 1,83 (m, 2H); MS (ESI+) m/z 595,2 (M+H).
Примеры 3А и 3В
N-(3-(6-(4-((2R)-1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид (соединение 19).
N-(3-(6-(4-((2S)-1,4-Диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид (соединение 20).
Рацемическую смесь (соединение 12) подвергают хиральному разделению на Chiralcel-AD-H (60% изопропанол в гептане с добавлением 0,1% трифторуксусной кислоты) с получением индивидуальных энантиомеров в точке 4,6 минут (соединение 20) ((-)изомер) ([ ]D 25=-37,8° (с=3,75, CHCl3), ТП=181-183°С) и в точке 9,2 минуты (соединение 19) ((+)изомер) ([
]D 25=+38,8° (с=3,57, CHCl3), ТП=180-182°С). Альтернативно рацемическую смесь (соединение 12) подвергают хиральному разделению на Chiralpak AD (75% изопропанол в гептане, при 1 мл/мин) и собирают индивидуальные энантиомеры с 17 по 27 минуту (соединение 20) ((-)изомер) и с 27 по 60 минуту (соединение 19) ((+)изомер).
Альтернативно рацемическую смесь (соединение 4) подвергают разделению на Chiralpak AD (30% изопропанол/гептан 0,1% трифторуксусная кислота) с получением индивидуальных энантиомеров на 5,4 минуты (S-изомер) и 14,9 минут (R-изомер). Затем получают индивидуальные изомеры 19 и 20 с использованием общих способов синтеза, описанных в Примере 1 или Примере 2.
5-бром-3-(4-((S)-1,4-диметил-3-оксопиперазин-2ил)фениламино)-1-метилпиразин-2(1Н)-он ((S)-14).
В одногорлую круглодонную колбу объемом 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и оросительным конденсатором, вносят (-)-1,4-диметил-3-(4-аминофенил)пиперазин-2-он (8,2 г, 37,3 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиразин-2(1Н)-он (10,0 г, 37,3 ммоль) и i-PrOH (100 мл). Затем добавляют триэтиламин (5,72 мл, 41 ммоль, 1,1 экв.) и полученную в результате суспензию нагревают при 80°С в течение 16 часов. На следующий день наблюдают густую суспензию. Реакцию охлаждают до комнатной температуры, затем концентрируют в вакууме до приблизительно 20 мл общего объема. В данный момент добавляют 20 мл 2 М раствора Na2 CO3, затем 100 мл воды. Затем смеси дают возможность перемешиваться в течение 2 часов при комнатной температуре. Твердое вещество не совсем белого цвета затем собирают на фриттованную воронку и дают высохнуть на воздухе в течение ~1 часа. Твердые вещества возвращают в реакционную колбу и добавляют 100 мл смеси диэтиловый эфир/гексаны (1:1) и тритурируют суспензию при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем твердое вещество белого цвета собирают на фриттованную воронку, сушат на фильтре в вакууме в течение 1 часа, затем переносят в круглодонную колбу и сушат под вакуумом в течение ночи. Получают твердые вещества белого цвета, 12,88 г (85%).
5-бром-3-(4-((R)-1,4-диметил-3-оксопиперазин-2ил)фениламино)-1-метилпиразин-2(1Н)-он (соединение (R)-14)
(R)-изомер соединения 14 можно получить из (+)-изомера 1,4-диметил-3-(4-аминофенил)пиперазин-2-она, используя этот же способ.
Пример 4
Схема 4
трет-бутил 4-((1S,2S)-2,3-дигидрокси-1-изопропил(метил)амино)пропил)-фенилкарбамат (соединение 21).
В одногорлую круглодонную колбу объемом 50 мл, снабженную магнитной мешалкой, вносят D-(+)-глицеральдегид (чистота 90%, 1,62 г, 16,2 ммоль), этанол (16 мл), N,N-метилизопропиламин (1,19 г, 16,3 ммоль) и 4-(трет-бутоксикарбониламино)-фенилбороновую кислоту (3,85 г, 16,2 ммоль). Колбу закрывают тефлоновой пробкой и перемешивают реакционную смесь в течение 3 дней. После этого смесь упаривают досуха при пониженном давлении. Остаток растворяют в 10 мл 2 М водного гидросульфата натрия (20,0 ммоль). Полученный в результате раствор экстрагируют метил трет-бутиловым эфиром (2×150 мл) и подщелачивают водный слой добавлением карбоната натрия (2,76 г, 20,0 ммоль). Суспензию экстрагируют эфиром (2×50 мл) и органические экстракты объединяют и сушат над сульфатом натрия. После удаления осушителя фильтрованием раствор упаривают при пониженном давлении с получением соединения 21 с выходом 69% (3,79 г) в виде твердого вещества белого цвета: ТП 61-80°С; Данные 1H ЯМР-спектроскопии (300 МГц, ДМСО-d6 ) дельта 9,23 (br s, 1H), 7,33 (d, 2H, J=8,4 Гц), 7,16 (d, 2H, J=8,5 Гц), 4,58 (t, 1H, J=5,3 Гц), 4,22 (d, 1H, J=4,7 Гц), 3,96 (quintet, 1H, J=5,4 Гц), 3,49 (d, 1H, J=6,2 Гц), 3,30 (m, 1H), 3,15 (m, 1H), 2,83 (septet, 1H, J=6,5 Гц), 2,06 (s, 3Н), 1,47 (s, 9H), 0,85 (d, 3Н, J=6,6 Гц), 0,79 (d, 3Н, J=6,5 Гц); MS (ESI+) m/z 339 (M+H).
(S)-2-(4-(трет-бутоксикарбониламино)фенил)-2-(изопропил(метил)амино)уксусная кислота (соединение 22).
В одногорлую круглодонную колбу объемом 100 мл, снабженную магнитной мешалкой, вносят соединение 21 (1,01 г, 3,00 ммоль), ацетонитрил (6 мл), четыреххлористый углерод (6 мл), воду (9 мл) и рутений (III) хлорид моногидрат (39 мг, 0,17 ммоль) и полученную в результате смесь перемешивают в течение 10 минут. Реакцию охлаждают до -9°С и добавляют перйодат натрия (2,56 г, 12,0 ммоль). Смесь медленно охлаждают до 0°С более 1,5 часов и затем перемешивают при 0°С в течение 1 часа и фильтруют. Осадок на фильтре промывают ледяной водой (2×5 мл) и фильтрат разводят дополнительным количеством воды (20 мл). Водный слой отделяют, его кислотность подводят до рН 5,8 и его упаривают досуха. Остаток тритурируют водой (10 мл) и полученную в результате суспензию фильтруют. Осадок на фильтре промывают водой (2×1 мл) и метил-трет-бутиловым эфиром (2×5 мл) и сушат в течение ночи при пониженном давлении с получением соединения 22 с выходом 13% (121 мг) в виде твердого вещества белого цвета: Данные 1H ЯМР-спектроскопии (300 МГц, ДМСО-d6 ) дельта 9,40 (s, 1H), 7,41 (d, 2H, J=8,8 Гц), 7,36 (d, 2H, J=8,8 Гц), 4,19 (s, 1H), 3,27 (septet, 1H, J=6,6 Гц), 2,21 (s, 3H), 1,47(s, 9H), 1,13 (d, 3H, J=6,6 Гц), 1,09 (d, 3H, J=6,6 Гц); MS (ESI+) m/z 323 (M+H).
(S)-2-(4-Аминофенил)-2-(изопропил(метил)амино)-N,N-диметилацетамид (соединение 23).
Одногорлую круглодонную колбу объемом 25 мл, снабженную магнитной мешалкой, продувают азотом и вносят соединение 22 (116 мг, 0,36 ммоль), 1-гидрокси-7-азабензотриазол (50 мг, 0,37 ммоль), N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимид гидрохлорид (208 мг, 1,08 ммоль) и ДМФ (2 мл) и охлаждают смесь до 0°С. Добавляют 2 М раствор диметиламина в ТГФ (0,3 мл, 0,6 ммоль) и реакции позволяют медленно нагреваться до комнатной температуры в течение ночи. Добавляют раствор карбоната натрия (2,00 г) в воде (10 мл) и экстрагируют смесь гексанами (3×30 мл). Гексановые экстракты объединяют, сушат над сульфатом натрия, фильтруют и упаривают досуха. Полученный в результате неочищенный продукт смешивают с метиленхлоридом (1 мл) и 4 М раствором хлористого водорода в диоксане (10 мл). Полученную в результате эмульсию интенсивно перемешивают в течение 1 часа при комнатной температуре. После этого растворители упаривают при пониженном давлении и полученный в результате остаток обрабатывают водой (2 мл), затем карбонатом натрия (1,0 г) и затем экстрагируют MtBE (10 мл). Экстракт упаривают и остаток очищают экспресс-хроматографией на силикагеле с получением соединения 23 с выходом 58% (53 мг) в виде масла светло-желтого цвета: Данные 1H ЯМР-спектроскопии (300 МГц, CDCl3/CD3OD) дельта 7,20 (d, 2H, J=8,5 Гц), 6,69 (d, 2H, J=8,5 Гц), 4,56 (s, 1H), 3,02 (s, 3H), 2,97 (m, 1H), 2,91 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,03 (d, 3H, J=6,7 Гц), 1,00 (d, 3H, J=6,6 Гц).
(S)-(+)-N-(3-(6-(4-(2-(Диметиламино)-1-(изопропил(метил)амино)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид (соединение 24).
В трехгорлую круглодонную колбу объемом 15 мл, снабженную магнитной мешалкой, входом для азота и оросительным конденсатором, вносят соединение 23 (53 мг, 0,212 ммоль), соединение 11 (98 мг, 0,212 ммоль), карбонат цезия (152 мг, 0,468 ммоль) и 1,4-диоксан (3 мл). После барботирования азотом полученного в результате раствора в течение 30 минут добавляют Xantphos (10,4 мг, 0,018 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (9,70 мг, 0,010 ммоль) и нагревают реакционную смесь с обратным холодильником в течение 3 часов. После этого реакцию охлаждают до комнатной температуры, фильтруют и осадок на фильтре промывают метиленхлоридом (2×25 мл). Затем фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток очищают колоночной хроматографией с получением соединения 24 (68 мг, 52%) в виде твердого вещества желтого цвета: ТП 133-134°С; Данные 1H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, ДМСО-d6 ) дельта 9,79 (brs, 1H), 9,19 (brs, 1H), 7,93 (d, 2H, J=8,5 Гц), 7,68 (s, 1H), 7,30 (m, 5H), 7,20 (s, 1H), 4,56 (s, 1H), 3,55 (s, 3H), 3,01 (s, 3H), 2,84 (m, 1 H), 2,76 (m, 5H), 2,63 (t, 2H, J=5,5 Гц), 2,28 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,79 (m, 4H), 0,91 (m, 6H); MS (ESI+) m/z 627,5 (M+H); [ ]25 D+24,0° (с 0,25, хлороформ).
Пример 5
Схема 5
2-[4-(трет-бутоксикарбониламино)фенил]-2-[изопропил(метил)амино]уксусная кислота (соединение 25).
В одногорлую круглодонную колбу объемом 50 мл, снабженную магнитной мешалкой, вносят глиоксиловую кислоту (618 мг, 6,72 ммоль), толуол (20 мл), N,N-изопропилметиламин (486 мг, 6,60 ммоль) и 4-(трет-бутоксикарбониламино)фенилбороновую кислоту (1,58 г, 6,66 ммоль). Реакцию закрывают пластиковой пробкой в атмосфере азота и перемешивают при комнатной температуре в течение 7 дней. После этого реакцию концентрируют при пониженном давлении. Полученный в результате остаток подвергают экспресс-хроматографии с получением соединения 25 с выходом 62% (1,34 г) в виде твердого вещества светло-желтого цвета: ТП 320°С, Данные 1 H ЯМР-спектроскопии (300 МГц, ДМСО-d6) дельта 9,42 (s, 1H), 7,42 (d, 2H, J=8,7 Гц), 7,37 (d, 2H, J=8,7 Гц), 4,23 (s, 1H), 3,28 (m, 1H), 3,17 (s, 1H), 2,23 (s, 3Н), 1,47 (s, 9H), 1,15 (d, 3H, J=6,6 Гц), 1,11 (d, 3H, J=6,6 Гц); MS (ESI+) m/z 323 (M+H).
Этил 2-[4-(трет-Бутоксикарбониламино)фенил]-2-[изопропил(метил)амино]ацетат (соединение 26).
Одногорлую круглодонную колбу объемом 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, продувают азотом и вносят соединение 25 (1,50 г, 4,66 ммоль), ТГФ (45 мл), 1-гидрокси-7-азабензотриазол (1,27 г, 9,32 ммоль) и 1-этил-3-[3-диметиламино)пропил]-карбодиимид гидрохлорид (1,79 г, 9,32 ммоль) и реакционная смесь перемешивают в течение 15 минут. Добавляют этанол (429 мг, 9,32 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (57 мг, 0,47 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение следующих 16 часов. После этого реакцию распределяют между водой (40 мл) и метиленхлоридом (50 мл). Слои разделяют и водную фазу экстрагируют метиленхлоридом (2×30 мл). Органические экстракты объединяют и сушат над сульфатом натрия. Осушитель удаляют фильтрованием и растворитель упаривают при пониженном давлении. Полученный в результате остаток сушат до постоянной массы под вакуумом с получением соединения 26 с выходом 73% (1,20 г) в виде твердого вещества белого цвета: ТП 87-88°С; Данные 1H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, ДМСО-d6) дельта 9,35 (s, 1H), 7,40 (d, 2H, J=7,5 Гц), 7,28 (d, 2H, J=7,5 Гц), 4,16 (s, 1H), 4,05 (m, 2H), 2,80 (septet, 1H, J=6,5 Гц), 2,02 (s, 3Н), 1,47 (s, 9H), 1,11 (t, 3H, J=7,0 Гц), 0,94 (d, 3H, J=6,5 Гц), 0,88 (d, 3H, J=6,5 Гц); MS (ESI+) m/z 351 (M+H).
Этил 2-(4-Аминофенил)-2-[изопропил(метил)амино]ацетат (соединение 27).
В одногорлую круглодонную колбу объемом 100 мл, снабженную магнитной мешалкой, вносят соединение 26 (1,19 г, 3,40 ммоль) и 4 М хлористый водород в 1,4-диоксане (15,0 мл, 60 ммоль) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 4 часов. После этого реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении и полученный в результате остаток распределяют между 10% водным карбонатом натрия (100 мл) и метиленхлоридом (75 мл). Слои разделяют и водную фазу экстрагируют метиленхлоридом (2×75 мл). Объединенные органические экстракты сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении с получением соединения 27 с выходом 81% (878 мг) в виде твердого вещества оранжевого цвета: ТП 70-71°С; Данные 1H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, ДМСО-d6) дельта 7,02 (d, 2H, J=7,5 Гц), 6,49 (d, 2H, J=7,5 Гц), 5,07 (bs, 2H), 4,07-3,97 (m, 3H), 2,81 (септет, 1Н, J=6,5 Гц), 1,99 (s, 3H), 1,11 (t, 3H, J=7,0 Гц), 0,92 (d, 3H, J=6,5 Гц), 0,85 (d, 3H, J=6,5 Гц); MS (ESI+) m/z 251 (M+H).
Этил 2-(4-{6-[3-(4-трет-Бутилбензамидо)-2-метилфенил]-4-метил-3-оксо-3,4-дигидропиразин-2-иламино}фенил)-2-[изопропил(метил)амино]ацетат (соединение 28).
В одногорлую круглодонную колбу объемом 50 мл, снабженную магнитной мешалкой, входом для азота и оросительным конденсатором, вносят соединение 27 (435 мг, 1,74 ммоль), 4-трет-бутил-N-{2-метил-3-(4,4,5,5,-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-фенил)-бензамид (717 мг, 1,58 ммоль), карбонат цезия (1,13 г, 3,48 ммоль) и 1,4-диоксан (15 мл). После барботирования азотом полученного в результате раствора в течение 20 минут добавляют Xantphos (78 мг, 0,134 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (72 мг, 0,079 ммоль) и нагревают реакционную смесь с обратным холодильником в течение 16 часов. После этого реакцию охлаждают до комнатной температуры, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный в результате остаток очищают экспресс-хроматографией с получением соединения 28 с выходом 43% (430 мг) в виде твердого вещества желтого цвета: ТП 119-120°С; Данные 1 H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, ДМСО-d6) дельта 9,88 (s, 1H), 9,24 (s, 1H), 7,97 (d, 2H, J=8,5 Гц), 7,95 (d, 2H, J=8,5 Гц), 7,55 (d, 2H, J=8,5 Гц), 7,37 (dd, 1H, J=6,5, 3,5 Гц), 7,31 (d, 2H, J=8,5 Гц), 7,28 (m, 2H), 7,22 (s, 1H), 4,18 (s, 1H), 4,04 (m, 2H), 3,56 (s, 3H), 2,81 (септет, 1H, J=6,5 Гц), 2,29 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,33 (s, 9H), 1,11 (t, 3H, J=7,0 Гц), 0,94 (d, 3H, J=6,5 Гц), 0,88 (d, 3H, J=6,5 Гц); MS (ESI+) m/z 624 (M+H).
2-(4-{6-[3-(4-трет-Бутилбензамидо)-2-метилфенил]-4-метил-3-оксо-3,4-дигидропиразин-2-иламино}фенил)-2-[изопропил(метил)амино]уксусная кислота (соединение 29).
В одногорлую круглодонную колбу объемом 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и оросительным конденсатором, вносят соединение 28 (400 мг, 0,642 ммоль), ТГФ (5 мл) и этанол (5 мл). Добавляют раствор гидроксида лития (124 мг, 10,2 ммоль) в воде (5 мл) и смесь нагревают при 60°С в течение 48 часов. После этого реакцию охлаждают до комнатной температуры и смесь медленно подкисляют до рН 4,0 10% водной лимонной кислотой. Полученный в результате осадок фильтруют и осадок на фильтре промывают водой (20 мл), затем тритурируют смесью 1:10 метиленхлорид/этилацетата (20 мл). Полученный в результате остаток сушат до постоянной массы под вакуумом при 45°С с получением соединения 29 с выходом 55% (210 мг) в виде твердого вещества не совсем белого цвета: ТП 197-198°С; Данные 1H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, ДМСО-d6) дельта 9,91 (s, 1Н), 9,29 (s, 1Н), 7,99 (d, 2Н, J=8,5 Гц), 7,95 (d, 2Н, J=8,5 Гц), 7,55 (d, 2Н, J=8,5 Гц), 7,39 (d, 2Н, J=8,5 Гц), 7,35 (dd, 1 H, J=7,0, 1,5 Гц), 7,32-7,28 (m, 2Н), 7,24 (s, 1Н), 4,23 (s, 1Н), 3,56 (s, 3H), 3,30 (m, 1Н), 2,30 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 1,33 (s, 9H), 1,13 (d, 3H, J=6,5 Гц), 1,10 (d, 3H, J=6,5 Гц); MS (ESI+) m/z 596 (M+H).
4-трет-бутил-N-(3-(6-(4-(1-(изопропил(метил)амино)-2-(4-метилпиперазин-1-ил)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)бензамид (соединение 30).
В запечатанную пробирку, снабженную магнитной мешалкой, вносят соединение 29 (100 мг, 0,168 ммоль), 1-метилпиперазин (14,6 мг, 0,168 ммоль), ДМФ (3 мл), основание Хьюнига (65,1 мг, 0,503 ммоль) и ВОР (74,3 мг, 0,168 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 26 часов. Большую часть растворителя удаляют путем роторного испарения и полученный в результате остаток растворяют в этилацетате (100 мл). Раствор промывают водой (15 мл × 3), сушат над MgSO4, фильтруют и удаляют растворитель в вакууме. Хроматографией на колонке с силикагелем (MeOH:CH2Cl 2=5:95) получают соединение 30 в виде твердого вещества светло-желтого цвета, 25 мг (22%). Данные 1H ЯМР-спектроскопии (300 МГц, CDCl3) дельта 8,45 (s, 1 Н), 8,09 (s, 1 H), 7,95 (s, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,85 (m, 2H), 7,75 (m, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,40 (m, 2H), 7,19-7,23 (m, 2H), 6,79 (s, 1H), 5,19 (s, 1H), 3,62 (s, 3H), 3,40 (широкий s, 2H), 3,21 (широкий s, 2H), 2,26-2,50 (m, 9H), 2,18 (s, 3H), 1,92 (широкий s, 2H), 1,34 (s, 9H), 1,25-1,31 (m, 6H) ppm; MS (ESI+) m/z 678,19 (M+H).
Пример 6
3-(4-Нитрофенил)-5,6-дигидропиразин-2(1Н)-он (соединение 31).
В одногорлую круглодонную колбу объемом 50 мл, снабженную магнитной мешалкой, продувают азотом, вносят этил 4-нитрофенилпируват (223 мг, 1,00 ммоль), 3 элемента молекулярного сита (4-8 меш, 3 Å) и безводный метанол (10 мл). Полученный в результате раствор охлаждают до 0°С на ледяной бане и по каплям добавляют 1,2-этилендиамин (63 мг, 1,05 ммоль). После завершения добавления реакцию перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа. После этого полученную в результате суспензию фильтруют и осадок на фильтре промывают холодным метанолом (2×5 мл). Осадок на фильтре сушат в печи при 50°С в течение ночи под вакуумом с получением соединения 31 с выходом 89% (196 мг) в виде твердого вещества белого цвета: ТП 191-192°С; Данные 1H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, ДМСО-d6) дельта 8,63 (bs, 1H), 8,26 (d, 2H, J=8,0 Гц), 8,09 (d, 2H, J=8,0 Гц), 3,88 (t, 2H, J=6,5 Гц), 3,37 (m, 2H); MS (ESI+) m/z 220 (M+H).
4-Этил-3-(4-нитрофенил)пиперазин-2-он (соединение 32).
Одногорлую круглодонную колбу объемом 10 мл, снабженную магнитной мешалкой, продувают азотом, вносят соединение 31 (2,78 г, 12,7 ммоль), ацетальдегид (727 мг, 16,5 ммоль) и безводный метанол (40 мл). Добавляют раствор цианоборогидрида натрия (2,4 г, 38 ммоль) и безводный хлорид цинка (2,6 г, 19,1 ммоль) в безводном метаноле (40 мл) и перемешивают реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа. После этого добавляют 1 н. водный гидроксид натрия (25 мл) и упаривают метанол при пониженном давлении. Оставшийся водный раствор экстрагируют этилацетатом (3×100 мл). Органические слои объединяют, промывают водой (100 мл) и солевым раствором (100 мл) и сушат над сульфатом магния. Осушитель удаляют фильтрованием и фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением соединения 32 с выходом 98% (3,20 г) в виде масла желтого цвета: Данные 1H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, ДМСО-d6) дельта 8,18 (d, 2H, J=8,5 Гц), 8,02 (d, 1H, J=4,0 Гц), 7,66 (d, 2H, J=8,5 Гц), 4,06 (s, 1H), 3,39 (td, 1H, J=12,0, 4,0 Гц), 3,22 (m, 1H), 3,07 (dt, 1H, J=12,0, 3,0 Гц), 2,50 (m, 1H), 2,37 (m, 1H), 2,21 (m, 1H), 0,91 (t, 3H, J=8,5 Гц); MS (ESI+) m/z 250 (M+H).
3-(4-Аминофенил)-4-этилпиперазин-2-он (соединение 33).
Одногорлую круглодонную колбу объемом 25 мл, снабженную оросительным конденсатором и магнитной мешалкой, продувают азотом и вносят соединение 32 (210 мг, 0,89 ммоль), этанол (6 мл), порошковое железо (-325 меш, 491 мг, 8,93 ммоль) и 2 н. хлористо-водородную кислоту (0,70 мл, 1,40 ммоль) и смесь нагревают с обратным холодильником в течение 60 минут. После этого реакцию охлаждают до комнатной температуры и добавляют порошковый карбонат натрия (3,03 г, 22,0 ммоль). Полученную в результате суспензию фильтруют и осадок на фильтре промывают этанолом (4×10 мл). Фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением соединения 33 с выходом 100% (185 мг) в виде твердого вещества белого цвета: ТП 153-154°С; Данные 1Н ЯМР-спектроскопии (300 МГц, ДМСО-d6) дельта 7,74 (d, 1Н, J=2,7 Гц), 6,90 (d, 2H, J=8,4 Гц), 6,47 (d, 2H, J=8,4 Гц), 4,95 (bs, 2H), 3,45 (m, 1Н), 3,42 (s, 1Н), 3,14 (m, 1Н), 2,89 (m, 1Н), 2,44 (m, 1Н), 2,02 (s, 3H); MS (ESI+) m/z 206 (M+H).
5-бром-3-(4-(1-этил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино]-1-метилпиразин-2(1Н)-он (соединение 34)
В одногорлую круглодонную колбу объемом 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и оросительным конденсатором, вносят соединение 33 (450 мг, 2,05 ммоль), изопропанол (5 мл), соединение 13 (603 мг, 2,26 ммоль) и DL-10-камфорсульфоновую кислоту (813 мг, 3,50 ммоль) и затем реакционную смесь перемешивают с обратным холодильником в течение 16 часов. После этого реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, фильтруют и осадок на фильтре промывают изопропанолом (10 мл). Полученное в результате твердое вещество растворяют в метиленхлорид/метаноле (3:1), абсорбируют на силикагеле и очищают экспресс-хроматографией с получением соединения 34 с выходом 79% (654 мг) в виде твердого вещества оранжевого цвета: ТП 152-153°С; Данные 1Н ЯМР-спектроскопии (500 МГц, CDCl3) 8,28 (bs, 1H), 7,73 (d, 2H, J=8,5 Гц), 7,43 (d, 2H, J=8,5 Гц), 6,74 (s, 1H), 5,90 (d, 1H, J=3,5 Гц), 4,12 (s, 1H), 3,60 (m, 1H), 3,52 (s, 3Н), 3,36 (m, 1H), 3,12 (m, 1H), 2,60 (m, 2H), 2,28 (m, 1H), 1,00 (t, 3H, J=7,0 Гц); MS (ESI+) m/z 406,0 (M+H).
N-(3-(6-(4-(1-Этил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-фтор-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид (соединение 35)
В одногорлую круглодонную колбу объемом 100 мл, снабженную магнитной мешалкой, оросительным конденсатором и входом для азота, вносят 1,4-диоксан (13 мл), воду (3 мл) и карбонат натрия (417 мг, 3,93 ммоль). После барботирования азотом полученной в результате смеси в течение 15 минут добавляют соединение 34 (150 мг, 0,370 ммоль), N-(6-фтор-2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид (192 мг, 0,460 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (75 мг, 0,065 ммоль) и затем нагревают реакционную смесь с обратным холодильником в течение 5 часов. После этого реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, фильтруют и осадок на фильтре промывают диэтиловым эфиром (10 мл). Полученное в результате твердое вещество растворяют в метиленхлорид/метаноле (10:1), абсорбируют на силикагель и очищают экспресс-хроматографией с получением соединения 35 с выходом 41% (93 мг) в виде твердого вещества желтого цвета: ТП 179-180°С; Данные 1 H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, CDCl3) дельта 8,31 (bs, 1 Н), 7,79 (d, 2H, J=8,5 Гц), 7,39 (m,3H), 7,33 (m, 1H), 7,22 (s, 1H), 7,04 (t, 1H, J=8,0 Гц), 6,68 (s, 1H), 5,80 (d, 1H, J=3,5 Гц), 3,99 (s, 1H), 3,65 (s, 3Н), 3,64 (m, 1H), 3,36 (m, 1H), 3,11 (m, 1H), 2,82 (t, 2H, J=6,0 Гц), 2,66 (t, 2H, J=6,0 Гц), 2,59 (m, 2H), 2,36 (s, 3Н), 2,27 (m, 1H), 1,85 (m, 4H), 0,99 (t, 3Н, J=7,0 Гц); MC (ESI+) m/z 615,3 (M+H).
Пример 7
Схема 7
2,6-дибромпиридин-3-диазоний тетрафторборат (соединение 36).
Трехгорлую круглодонную колбу объемом 500 мл, снабженную магнитной мешалкой, входом для азота и дополнительной воронкой, продувают азотом и вносят 2,6-дибром-3-аминопиридин (25,0 г, 99,2 ммоль) и 1,2-диметоксиэтан (70 мл) и охлаждают раствор до -10°С, используя ледяную/ацетоновую баню. Раствор трифторида бора-диэтилэтерата (21,1 г, 148 ммоль) в 70 мл 1,2-диметоксиэтана добавляют с такой скоростью, чтобы поддерживать внутреннюю температуру реакции ниже -5°С. После завершения добавления по каплям добавляют раствор трет-бутилнитрата (12,2 г, 118 ммоль) в 70 мл 1,2-диметоксиэтана, поддерживая внутреннюю температуру реакции ниже -5°С. Реакцию перемешивают в течение следующего 1 часа при -10°С. После этого реакцию фильтруют и осадок на фильтре промывают гексанами (3×75 мл) и сушат при комнатной температуре на воздухе в течение 24 часов с получением соединения 36 с выходом 98% (34,1 г) в виде твердого вещества белого цвета: ТП 130-131°С; Данные 1H ЯМР-спектроскопии (300 МГц, ДМСО-d6 ) дельта 7,72 (d, 1H, J=9,6 Гц), 5,66 (d, 1H, J=9,6 Гц).
2,6-дибром-3-фторпиридин (соединение 37).
В одногорлую круглодонную колбу объемом 1 л, снабженную оросительным конденсатором, открытым в воздух, вносят соединение 36 (4,00 г, 11,4 ммоль), которое равным образом распределяют на дне колбы, и помещают в масляную баню при комнатную температуру. Баню нагревают до 80°С в течение 20 минут, затем температуру бани постепенно повышают до 130°С в течение 30 минут, пока не произойдет разложение при температуре масляной бани 130°С. После видимого разложения всего порошка (твердое вещество превращается в липкую массу и прекращается выделение газа) реакцию охлаждают до комнатной температуры и полученный в результате остаток экстрагируют диэтиловым эфиром (3×75 мл), декантируя эфирные экстракты. Органические экстракты объединяют, промывают насыщенным водным бикарбонатом натрия (200 мл) и сушат над сульфатом натрия. Осушитель удаляют фильтрованием, и фильтрат концентрируют при пониженном давлении при комнатной температуре с получением соединения 37 с выходом 100% (3,00 г) в виде твердого вещества желтого цвета: ТП 47-48°С; Данные 1H ЯМР-спектроскопии (300 МГц, CDCl3) дельта 7,44 (dd, 1 Н, J=3,3, 8,4 Гц), 7,31 (m, 1H).
N-(6-бром-3-фторпиридин-2-ил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид (соединение 38).
В трехгорлую круглодонную колбу объемом 1 л, снабженную механической мешалкой, оросительным конденсатором и входом для азота вносят 1,4-диоксан (56 мл), соединение 37 (3,00 г, 11,7 ммоль), 4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид (1,29 г, 7,12 ммоль) и карбонат цезия (5,09 г, 15,6 ммоль). После барботирования азотом полученного в результате раствора в течение 30 минут добавляют Xantphos (350 мг, 0,605 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)-дипалладий(0) (326 мг, 0,365 ммоль) и нагревают реакционную смесь с обратным холодильником в течение 2 часов. После этого реакцию охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через слой Celite 521. Осадок на фильтре промывают метиленхлоридом (50 мл). Фильтрат концентрируют при пониженном давлении и полученный в результате остаток очищают колоночной хроматографией, используя 500 см3 двуокиси кремния и элюируя 5% EtOAc/гексанами с получением соединения 38 с выходом 37% (940 мг) в виде твердого вещества белого цвета: Rf=0,55 (20% этилацетат в гексанах); Данные 1H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, CDCl3) 7,80 (bs, 1Н), 7,38 (m, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,32 (dd, 1H, J=3,0, 8,0 Гц), 2,81 (t, 2H, J=6,5 Гц), 2,64 (t, 2H, J=6,0 Гц), 1,85 (m, 4H); MS (ESI+) m/z 355,1 (M+H) и N-(6-бром-5-фторпиридин-2-ил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид с выходом 34% в виде твердого вещества белого цвета: Rf=0,85 (20% этилацетат в гексанах); Данные 1H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, CDCl3) дельта 8,29 (dd, 1H, J=3,5, 9,0 Гц), 8,24 (bs, 1H), 7,47 (dd, 1H, m), 7,33 (s, 1H), 2,81 (t, 2H, J=6,5 Гц), 2,64 (t, 2H, J=6,0 Гц), 1,85 (m, 4H); MS (ESI+) m/z 355,1 (M+H).
3-(4-(4-Этил-1-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-1-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиразин-2(1Н)-он (соединение 39)
Одногорлую круглодонную колбу объемом 25 мл, снабженную магнитной мешалкой и терморегулятором, продувают азотом и вносят 5-бром-3-(4-(4-этил-1-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-1-метилпиразин-2(1Н)-он (225 мг, 0,536 ммоль), бис(4,4,5,5-тетраметилпинаколято)диборон (170 мг, 0,671 ммоль), ацетат калия (210 мг, 2,06 ммоль) и 1,4-диоксан (10 мл). Поток азота пропускают через полученную в результате суспензию в течение 30 минут. Затем добавляют Pd(dppf)Cl 2.CH2Cl2 (15 мг, 0,016 ммоль) и реакцию перемешивают при нагревании с обратным холодильником в течение 3 часов. После этого смесь охлаждают до температуры окружающей среды, распределяют между водой (40 мл) и этилацетатом (60 мл) и фильтруют через слой Celite 521. Органическую фазу отделяют, сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток тритурируют диэтиловым эфиром (5 мл) и фильтруют суспензию. Осадок на фильтре сушат под вакуумом при комнатной температуре с получением неочищенного соединения 39, которое непосредственно используют в следующей реакции: МС (ESI+) m/z 468,2 (М+Н).
N-(6-(6-(4-(4-Этил-1-метил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-3-фторпиридин-2-ил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид (соединение 40)
В трехгорлую круглодонную колбу объемом 25 мл, снабженную магнитной мешалкой, оросительным конденсатором и входом для азота вносят 1,4-диоксан (7 мл), раствор карбоната натрия (163 мг, 2,08 ммоль) в воде (1 мл), соединение 38 (183 мг, 0,515 ммоль) и соединение 39 (0.537 ммоль, предполагая количественный выход). После барботирования азотом полученной в результате смеси в течение 30 минут добавляют тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (60 мг, 0,052 ммоль) и нагревают реакционную смесь с обратным холодильником в течение 4 часов. После этого реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, и добавляют 2 н. хлористо-водородную кислоту (20 мл), затем метиленхлорид (20 мл). Водный слой отделяют, промывают метиленхлоридом (2×25 мл) и затем подщелачивают до рН 9 насыщенным водным карбонатом натрия. Затем водный слой экстрагируют метиленхлоридом (3×25 мл) и органические экстракты объединяют и сушат над сульфатом натрия. Осушитель удаляют вакуумной фильтрацией и фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением соединения 40 с выходом 30% (83 мг) в виде твердого вещества желтого цвета: ТП 155-156°С; Данные 1 H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, CDCl3) дельта 8,27 (bs, 1H), 7,95 (dd, 1H, J=3,5, 8,5 Гц), 7,84 (m, 3H), 7,72 (s, 1H), 7,55 (t, 1H, J=9,0 Гц), 7,46 (m, 3H), 4,01 (s, 1H), 3,72 (m, 2H), 3,64 (s, 3H), 3,49 (m, 1H), 3,40 (m, 1H), 3,38 (m, 1H), 3,24 (m, 1H), 2,83 (t, 2H, J=6,0 Гц), 2,67 (m, 3H), 1,86 (m, 4H), 1,16 (t, 3H, J=7,5 Гц); MS (ESI+) m/z 616,3 (M+H).
Пример 8
Схема 8
5-бром-1-метил-3-нитропиридин-2-он (соединение 41).
Круглодонную колбу объемом 1 л, снабженную магнитной мешалкой, продувают азотом и вносят 5-бром-3-нитро-2-гидроксипиридин (24,0 г, 0,11 моль), безводный ДМФ (280 мл) и порошковый карбонат натрия (-350 меш, 33,4 г, 0,24 моль) и перемешивают суспензию в течение 15 минут при температуре окружающей среды. После этого добавляют метилйодид (17,1 г, 0,124 моль) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 часов. Затем реакционную смесь разводят водой (750 мл) и экстрагируют этилацетатом (3×1,0 л). Органические экстракты объединяют, промывают солевым раствором (500 мл) и сушат над сульфатом натрия. После удаления осушителя фильтрацией фильтрат упаривают досуха при пониженном давлении. Полученный в результате остаток очищают экспресс-хроматографией на диоксиде кремния с получением соединения 41 с выходом 85% (21,7 г) в виде твердого вещества желтого цвета: ТП 122-123°С; Данные 1H ЯМР-спектроскопии (300 МГц, CDCl3 ) дельта 8,37 (d, 1Н, J=2,7 Гц), 7,26 (s, 1H), 3,68 (s, 3H); MS (ESI+) m/z 234 (M+H).
3-амино-5-бром-1-метилпиридин-2-он (соединение 42).
Трехгорлую круглодонную колбу объемом 1 л, снабженную механической мешалкой и оросительным конденсатором, продувают азотом и вносят соединение 41 (21,7 г, 93,3 ммоль), этанол (305 мл), порошок железа (-325 меш, 52,1 г, 933 ммоль) и 2 н. хлористо-водородную кислоту (50 мл, 100 ммоль) и смесь нагревают в течение 2 часов при 60°С.После этого реакцию охлаждают до комнатной температуры и добавляют карбонат натрия до получения рН 8, как определяют с помощью бумаги для определения рН. Полученную в результате суспензию фильтруют и осадок на фильтре промывают этанолом (4×100 мл). Фильтрат концентрируют при пониженном давлении с получением твердого вещества коричневого цвета. Данное твердое вещество очищают колоночной хроматографией на силикагеле с получением соединения 42 с выходом 77% (14,5 г) в виде порошка не совсем белого цвета: ТП 104-105°С; Данные 1H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, ДМСО-d6 ) дельта 7,15 (d, 1 Н, J=2,5 Гц), 6,46 (d, 1 Н, J=2,5 Гц), 5,45 (bs, 2H), 3,40 (s, 3H); MS (ESI+) m/z 203 (M+H).
N-(3-(5-амино-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-метилфенил)-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид (соединение 43)
При использовании того же общего способа, что описан для получения соединения 10, соединение 42 (3,67 г) дает соединение 43 с выходом 28% (2,10 г) в виде твердого вещества желтого цвета: ТП 210-211°С; Данные 1H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, ДМСО-d6) дельта 9,78 (bs, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,25 (dd, 1H, J=1,5, 8,0 Гц), 7,21 (t, 1H, J=7,5 Гц), 7,09 (dd, 1H, J=1,0, 7,0 Гц), 6,89 (d, 1H, J=2,0 Гц), 6,43 (d, 1H, J=2,5 Гц), 5,19 (bs, 2H), 3,49 (s, 3Н), 2,75 (m, 2H), 2,62 (m, 2H), 2,12 (s, 3Н), 1,77 (m, 4H); МС (ESI+) m/z 394 (М+Н).
N-[3-(5-{[5-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-метилфенил]-4,5,6,7-тетрагидро-1-бензотиофен-2-карбоксамид (соединение 44).
В закрытую пробирку объемом 48 мл, снабженную магнитным перемешивающим стержнем вносят соединение 43 (0,20 г, 0,5 ммоль), 3-(6-хлорпиридин-3-ил)-1,4-диметилпиперазин-2-он (0,185 г, 0,8 ммоль), Pd2(dba)3 (0,032 г, 0,035 ммоль), 9,9-диметил-4,5-бис(дифенилфосфино) ксантен (0,030 г, 0,05 ммоль) и Cs2CO3 (0,326 г, 1,0 ммоль) в диоксане (10 мл). После дегазации смеси в течение 15 минут ее нагревают при 95°С в течение 16 часов. Затем реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и выливают в H2O (10 мл). К данной смеси добавляют дихлорметан (10 мл) и разделяют слои. Водную фазу экстрагируют дихлорметаном (3×10 мл) и объединенные органические экстракты промывают H2O (5 мл) и солевым раствором (5 мл), сушат (Na 2SO4) и концентрируют. Неочищенную смесь очищают колоночной хроматографией, градиент 0-10%, МеОН в дихлорметане/эфир (1/1), с получением 0,10 г (34%) соединения 44 в виде твердого вещества; МС (ESI+) m/z 596 (М+Н).
Пример 9
Схема 9
Этил 2-(4-Этилпиперазин-1-ил)-2-(4-(4-метил-6-(2-метил-3-(5,6,7,8-тетрагидро-4Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамидо)фенил)-3-оксо-3,4-дигидропиразин-2-иламино)фенил)ацетат (соединение 45).
При использовании того же способа, что описан для получения соединения 10, реакция этил 2-(4-(6-бром-4-метил-3-оксо-3,4-дигидропиразин-2-иламино)фенил)-2-(4-этилпиперазин-1-ил)ацетата (1,33 г) с N-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3-диоксолан-2-ил)фенил)-5,6,7,8-тетрагидро-4Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамидом (1,26 г) дает соединение 45 с выходом 73% (1,39 г) в виде желто-коричневой пены: ТП 168-170°С; Данные 1H ЯМР-спектроскопии (300 МГц, CDCl3) дельта 8,34 (s, 1Н), 7,92 (d, 1Н, J=7,8 Гц), 7,80 (d, 2H, J=8,7 Гц), 7,54 (s, 1H), 7,39 (d, 2H, J=8,7 Гц), 7,39 (s, 1Н), 7,27 (t, 1Н, J=8,1 Гц), 7,18 (dd, 1Н, J=7,8, 1,2 Гц), 6,74 (s, 1Н), 4,14 (m, 2H), 3,91 (s, 1Н), 3,60 (s, 3H), 2,87 (t, 2H, J=5,7 Гц), 2,76 (t, 2H, J=5,7 Гц), 2,61 (br s, 8H), 2,32 (s, 3H), 1,88 (m, 2H), 1,77 (m, 4H), 1,17 (t, 3H, J=7,2 Гц), 1,05 (t, 3H, J=7,2 Гц); MS (ESI+) m/z 683 (M+H).
2-(4-Этилпиперазин-1-ил)-2-(4-(4-метил-6-(2-метил-3-(5,6,7,8-тетрагидро-4Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамидо)фенил)-3-оксо-3,4-дигидропиразин-2-иламино)фенил)уксусная кислота (соединение 46).
При использовании того же способа, что описан для получения соединения 29, омыление соединения 45 (1,29 г) дает соединение 46 с выходом 97% в виде твердого вещества не совсем белого цвета: ТП 168-170°С; Данные 1 H ЯМР-спектроскопии (300 МГц, ДМСО-d6) дельта 9,79 (s, 1H), 9,25 (s, 1 Н), 7,96 (d, 2H, J=7,5 Гц), 7,70 (s, 1H), 7,29 (m, 6H), 3,86 (m, 1H), 3,71 (s, 3Н), 3,37 (q, 2H, J=7,2 Гц), 2,81 (m, 2H), 2,69 (m, 2H), 2,42 (br s, 8H), 2,19 (s, 3Н), 1,83 (br s, 2H), 1,61 (br s, 4H), 0,95 (t, 3Н, J=7,2 Гц); МС (ESI+) m/z 655 (M+H).
N-(3-(6-(4-(1-(4-Этилпиперазин-1-ил)-2-((2-гидроксиэтил)(метил)амино)-2-оксоэтил)фениламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-метилфенил)-5,6,7,8-тетрагидро-4Н-циклогепта[b]тиофен-2-карбоксамид (соединение 47).
При использовании того же способа, что описан для получения соединения 30, реакция соединения 46 (307 мг) с 2-(метиламино)этанолом (71 мг) дает соединение 47 с выходом 37% (125 мг) в виде твердого вещества белого цвета: ТП 163-165°С; Данные 1H ЯМР-спектроскопии (500 МГц, CDCl3) дельта 8,33 (s, 1Н), 7,90 (d, 1Н, J=8,0 Гц), 7,80 (d, 2H, J=9,0 Гц), 7,62 (s, 1H), 7,48 (m, 1H), 7,41 (s, 1H), 7,35 (d, 2H, J=8,5 Гц), 7,27 (t, 1H, J=8,0 Гц), 7,17 (d, 1H, J=7,5 Гц), 6,74 (s, 1H), 4,15 (s, 1H), 3,72 (m, 2H), 3,62 (m, 1H), 3,61 (s, 3Н), 3,50 (m, 2H), 3,02 (s, 3Н), 2,87 (t, 2H, J=5,5 Гц), 2,75 (t, 2H, J=5,5 Гц), 2,56 (m, 8H), 2,40 (s, 3Н), 1,88 (m, 2H), 1,74 (m, 2H), 1,65 (m, 2H), 1,09 (t, 3Н, J=7,0 Гц); МС (ESI+) m/z 712 (M+H).
Пример 10
Следующие соединения получают, используя способы, аналогичные описанным в Примерах 1-9.
Пример 11. Биохимический анализ Btk
Распространенным способом стандартного биохимического анализа киназы Btk, который можно использовать для тестирования соединений, описанных в данной заявке, является следующий.
Получают не содержащую фермент Btk основную смесь, включающую буфер для киназы, участвующей в передаче клеточного сигнала IX (25 мМ Трис-HCl, рН 7,5, 5 мМ -глицерофосфат, 2 мМ дитиотрейтол, 0,1 мМ Na3 VO4, 10 нМ MgCl2), 0,5 мкМ субстрата 2 биотинилированного пептида Promega PTK и 0,01% BSA (бычий сывороточный альбумин). Получают содержащую фермент Btk основную смесь, включающую буфер для киназы, участвующей в передаче клеточного сигнала IX, 0,5 мкМ субстрата 2 биотинилированного пептида PTK, 0,01% BSA и 100 нг/лунку (0,06 мкг/лунку) фермента Btk. Фермент Btk получают следующим образом: человеческую Btk дикого типа полной длины (регистрационный номер NM-000061) с С-концевым V5 и меткой 6х His субклонируют в вектор pFastBac для получения бакуловируса, несущего данную Btk с меченым эпитопом. Генерацию бакуловируса осуществляют на основе инструкций фирмы Invitrogen, детально описанных в ее опубликованном протоколе "Bac-toBac Baculovirus Expression Systems" (Бакуловирусные экспрессирующие системы Bac-toBac) (No по каталогу 10359-016 и 10608-016). Вирус пассажа 3 используют, чтобы инфицировать клетки Sf9 с целью сверхэкспрессии рекомбинантного белка Btk. Затем белок Btk очищают до гомогенности, используя колонку Ni-NTA. Чистота конечного белкового препарата превышает 95%, основываясь на чувствительном окрашивании Sypro-Ruby. Раствор 200 мкМ АТФ готовят в воде и подводят до рН 7,4 с помощью 1 н. NaOH. Соединения в количестве 1,25 мкл в 5% ДМСО переносят в 96-луночный полистироловый планшет Costar 1/2 площади. Соединения тестируют раздельно и с помощью 11-точечной дозозависимой кривой (исходная концентрация 10 мкМ; разведение 1:2). Не содержащую фермент основную смесь (в качестве отрицательного контроля) и содержащую фермент основную смесь в количестве 18,75 мкл переносят в соответствующие лунки в 96-луночном полистироловом планшете Costar площади 1/2. 5 мкл 200 мкМ АТФ добавляют к данной смеси в 96-луночном полистироловом планшете Costar площади 1/2 для получения конечной концентрации АТФ 40 мкМ. Реакции позволяют инкубироваться в течение 1 часа при комнатной температуре. Реакцию останавливают буфером для детекции Perkin Elmer IX, содержащим 30 мМ ЭДТА (этилендиаминтетрауксусная кислота), 20 нМ SA-APC и 1 нМ Ab (антитело) РТ66. Планшет читают, используя флуоресценцию с разрешением во времени, с помощью Perkin Elmer Envision при использовании возбуждающего фильтра 330 нм, эмиссионного фильтра 665 нм и 2-го эмиссионного фильтра 615 нм. Затем рассчитывают значения IC50. Альтернативно, можно использовать анализ Lanthascreen для оценки активности Btk по количественному определению фосфорилированного пептидного продукта. Уровень FRET, которая происходит между флуоресцеином на пептидном продукте и тербием на антителе для детекции, снижается при добавлении ингибиторов Btk, которые уменьшают фосфорилирование пептида. В конечном объеме реакции 25 мкл Btk(h) (0,1 нг/25 мкл реакции) инкубируют с 50 мМ Hepes рН 7,5, 10 мМ MgCl2, 2 мМ MnCl2 , 2 мМ DTT (дитиотрейтол), 0,2 мМ NaVO4, 0,01% BSA и 0,4 мкМ флуоресцеин поли-GAT. Реакцию инициируют добавлением АТФ до 25 мкМ (Km АТФ). После инкубирования в течение 60 минут при комнатной температуре реакцию останавливают добавлением конечной концентрации 2 нМ антитела для детекции Tb-PY20 в 60 мМ ЭДТА в течение 30 минут при комнатной температуре. Детекцию проводят на приборе Perkin Elmer Envision с возбуждением при 340 нм и эмиссии при 495 и 520 нм.
Пример 12
Анализ Btk на клетках Ramos
Другим распространенным способом стандартного клеточного анализа киназы Btk, который можно использовать для тестирования соединений, описанных в данной заявке, является следующий.
Клетки Ramos инкубируют при густоте 0,5×107 клеток/мл в присутствии тест-соединения в течение 1 часа при 37°С. Затем клетки стимулируют инкубированием с 10 мкг/мл F(ab)2 к человеческому IgM в течение 5 минут при 37°С. Клетки осаждают, лизируют, проводят анализ белка на осветленном лизате. Равные количества белка из каждого образца подвергают SDS-PAGE (электрофорез в полиакриламидном геле с использованием додецилсульфата натрия) и вестерн-блоттингу либо с антителом к фосфо-Btk(Tyr223) (Cell Signaling Technology No 3531; Epitomics, No по каталогу 2207-1), либо с антителом к фосфо-Btk(Tyr551) (BD Transduction Labs No 558034) с целью оценки аутофосфорилирования Btk или с антителом к Btk (BD Transduction Labs No 611116) для контроля общих количеств Btk в каждом лизате.
Пример 13
Анализ пролиферации В-клеток
Распространенным способом стандартного клеточного анализа пролиферации В-клеток, который можно использовать для тестирования соединений, описанных в данной заявке, является следующий.
В-клетки очищают из селезенок мышей Balb/c в возрасте 8-16 недель, используя набор для выделения В-клеток (Miltenyi Biotech, No по каталогу 130-090-862). Тестируемые соединения разводят в 0,25% ДМСО и инкубируют с 2,5×10 5 очищенных В-клеток селезенки мышей в течение 30 минут перед добавлением 1 мкг/мл антитела к IgM мыши (Southern Biotechnology Associates No no каталогу 1022-01) в конечном объеме 100 мкл. После инкубирования в течение 24 часов добавляют 1 мкКи 3H-тимидина и инкубируют планшеты в течение дополнительных 36 часов перед сбором, используя протокол изготовителя для системы анализа поглощения SPA[3Н]-тимидина (Amersham Biosciences No RPNQ0130). Флуоресценцию на основе SPA-частиц подсчитывают на микро- -счетчике (Wallace Triplex 1450, Perkin Elmer).
Пример 14
Анализ пролиферации Т-клеток
Распространенным способом стандартного анализа пролиферации Т-клеток, который можно использовать для тестирования соединений, описанных в данной заявке, является следующий.
Т-клетки очищают из селезенок мышей Balb/c в возрасте 8-16 недель, используя набор для выделения Т-клеток пэннингом (Miltenyi Biotech, No no каталогу 130-090-861). Тестируемые соединения разводят в 0,25% ДМСО и инкубируют с 2,5×105 очищенных Т-клеток селезенки мышей в конечном объеме 100 мкл в прозрачных планшетах с плоским дном, предварительно покрытых в течение 90 минут при 37°С 10 мкг/мл каждого из антител, к CD3 (ВО No 553057) и к CD28 (BD No 553294). После инкубирования в течение 24 часов добавляют 1 мкКи 3H-тимидина и инкубируют планшеты в течение дополнительных 36 часов перед сбором, используя протокол изготовителя для системы анализа поглощения SPA[ 3Н]-тимидина (Amersham Biosciences No RPNQ 0130). Флуоресценцию на основе SPA-частиц подсчитывают на микро- -счетчике (Wallace Triplex 1450, Perkin Elmer).
Пример 15
Анализ ингибирования CD86
Распространенным способом стандартного клеточного анализа ингибирования активности В-клеток, который можно использовать для тестирования соединений, описанных в данной заявке, является следующий.
Суммарные спленоциты мышей очищают из селезенок мышей Balb/c в возрасте 8-16 недель путем лизиса красных кровяных клеток (BD Pharmingen No555899). Тестируемые соединения разводят в 0,5% ДМСО и инкубируют с 1,25×106 спленоцитов в конечном объеме 200 мкл в прозрачных планшетах с плоским дном (Falcon 353072) в течение 60 минут при 37°С. Затем клетки стимулируют добавлением 15 мкг/мл IgM (Jackson ImmunoResearch 115-006-020) и инкубируют в течение 24 часов при 37°С, 5% СО2. После инкубирования в течение 24 часов клетки переносят в прозрачные 96-луночные планшеты с коническим дном и осаждают центрифугированием при 1200×g×5 минут. Клетки предварительно блокируют CD16/CD32 (BD Pharmingen No 553142) с последующим тройным окрашиванием CD19-FITC (BD Pharmingen No 553785), CD86-PE (BD Pharmingen No 553692) и 7AAD (BD Pharmingen No 51-6898 IE). Клетки подвергают сортингу на BD FACSCalibur и пропускают на популяции CD19+/7AAD-. Уровни поверхностной экспрессии CD86 на пропускаемой популяции измеряют относительно концентрации тест-соединения.
Пример 16
Анализ выживаемости клеток B-ALL
Следующее представляет собой способ стандартного исследования выживаемости клеток B-ALL с использованием снятия показаний ХТТ для измерения числа жизнеспособных клеток. Данный анализ можно использовать для тестирования соединений, раскрытых в данной заявке, на их способность ингибировать выживаемость клеток B-ALL в культуре. Одной из линий человеческого В-клеточного острого лимфобластного лейкоза, которую можно использовать, является SUP-B 15, линия человеческих пре-В-клеток ALL, которая имеется в АТСС (американской коллекции типовых культур).
Клетки пре-B-ALL SUP-B15 помещают во множество 96-луночных планшетов для микротитрования в 100 мкл среды Iscove's + 20% FBS (сыворотка телячьих эмбрионов) в концентрации 5×105 клеток/мл. Затем добавляют тест-соединения в конечной концентрации 0,4% ДМСО. Клетки инкубируют при 37°С с 5% СО2 до 3 дней. Через 3 дня клетки разделяют в соотношении 1:3 в свежие 96-луночные планшеты, содержащие тест-соединение, и позволяют расти в течение дополнительных 3 дней. После каждого 24-часового периода в одну из повторностей 96-луночных планшетов добавляют 50 мкл раствора XTTn (Roche) и проводят считывания поглощения в точках 2, 4 и 20 часов согласно инструкциям изготовителя. Затем берут результат считывания, проведенного с OD (оптической плотностью) для клеток, обработанных только ДМСО, в линейной области анализа (0,5-1,5) и измеряют долю жизнеспособных клеток в лунках, обработанных соединением, относительно клеток, обработанных только ДМСО.
Пример 17
Соединения, раскрытые в примерах выше, тестируют в биохимическом анализе Btk, описанном в данном контексте (см. Пример 11) и все из данных соединений Формулы I, раскрытые в вышеприведенных примерах, проявляют значение IC50 меньше или равное 2 мкмоль и некоторые из данных соединений демонстрируют значение IC50 меньше или равное 1 мкмоль. Некоторые из данных соединений демонстрируют значение IC50 меньше или равное 25 нМ. Некоторые из данных соединений демонстрируют значение IC50 меньше или равное 5 нМ.
Некоторые из соединений, раскрытых в примерах выше, тестируют в анализе пролиферации В-клеток (как описано в Примере 13), и они демонстрируют значение IC50 меньше или равное 10 мкмоль. Некоторые из данных соединений демонстрируют значение IC50 меньше или равное 500 нМ. Некоторые из данных соединений демонстрируют значение IC 50 меньше или равное 50 нМ в данном анализе.
Некоторые соединения, раскрытые в данном контексте, демонстрируют ингибирование пролиферации Т-клеток, которая по меньшей мере в три раза и в ряде случаев - в 10 раз или даже в 100 раз выше, чем значения IC50 данных соединений в плане ингибирования пролиферации В-клеток.
Некоторые из соединений, раскрытых в данном контексте, тестируют в анализе ингибирования активности В-клеток (в условиях, описанных в примере 15), и они демонстрируют значение IC50 меньше или равное 10 мкмоль. Некоторые из данных соединений демонстрируют значение IC 50 меньше или равное 0,5 мкмоль. Некоторые из данных соединений демонстрируют значение IC50 меньше или равное 100 нМ в данном анализе.
Некоторые из соединений, раскрытых в данном контексте, тестируют в анализе выживаемости клеток В-клеточного лейкоза (в условиях, описанных в Примере 16), и они демонстрируют значение IC50 меньше или равное 10 мкмоль.
Некоторые из соединений, раскрытых в данном контексте, демонстрируют как биохимическую активность, так и активность на клеточной основе. Например, некоторые из соединений, раскрытых в данном контексте, демонстрируют значение IC50 меньше или равное 1 мкмоль в биохимическом анализе Btk, описанном в данном контексте (см. Пример 11) и значение IC50 меньше или равное 10 мкмоль в по меньшей мере одном из анализов на основе клеток (отличных от анализа на Т-клетках), описанных в данном контексте (см. Примеры 12, 13, 15 или 16). Некоторые из данных соединений демонстрируют значение IC 50 меньше или равное 50 нМ в биохимическом анализе Btk, описанном в данном контексте (см. Пример 11), и значение IC 50 меньше или равное 500 нМ в по меньшей мере одном из анализов на основе клеток (отличных от анализа на Т-клетках), описанных в данном контексте (см. Примеры). Некоторые из данных соединений демонстрируют значение IC50 меньше или равное 10 нМ и значение IC50 меньше или равное 100 нМ в по меньшей мере одном анализе на основе клеток (отличном от анализа на Т-клетках), описанном в данном контексте (см. Примеры 12, 13, 15 или 16).
В то время как представлен и описан ряд вариантов осуществления, в них могут быть осуществлены различные модификации и замены, не выходя из сущности и объема изобретения. Например, в целях толкования формулы изобретения не предусматривают, чтобы представленные ниже пункты формулы изобретения были ограничены каким-либо образом более узкими рамками, чем их буквальное изложение, и, таким образом, иллюстративные варианты осуществления из описания не предназначены для перевода в пункты формулы изобретения. Соответственно, следует иметь в виду, что настоящее изобретение описано в качестве иллюстрации, а не ограничений объема формулы изобретения.
Класс C07D241/08 с атомами кислорода, непосредственно связанными с атомами углерода кольца
-лактамазы - патент 2462450
Класс A61P35/00 Противоопухолевые средства
