стабилизация радиофармацевтических композиций

Формула изобретения

1. Стабилизированная радиофармацевтическая композиция, содержащая:

(1) ¹⁸F-меченное соединение;

(2) эффективное стабилизирующее количество гентизиновой кислоты или ее соли с биосовместимым катионом;

(3) водную биосовместимую среду-носитель;

где радиоактивная концентрация ¹⁸F в среде-носителе находится в диапазоне 10-100000 МБ к/мл, и рН композиции находится в диапазоне 4,0-9,5.

2. Радиофармацевтическая композиция по п.1, где ¹⁸F-меченное соединение выбрано из [ ¹⁸F]FDG (2-[¹⁸F]фтор-2-дезокси-D-глюкозы), [ ¹⁸F]-фтор-ДОФА (3,4-дигидроксифенилаланина), [¹⁸ F]-фторэстрадиола, 3'-[¹⁸F]-фтортимидина, 5-[ ¹⁸F]фторурацила, [¹⁸F]фтордофамина, [¹⁸ F]фторнорэпинефрина, 2 -карбометокси-3 -(4-иодфенил)нортропана ([¹⁸F]CFT), N-[ ¹⁸F]-фторпропил-2 -карбометокси-3 -иодфенил)нортропана ([¹⁸F]FP-CIT), 2-(1-(6-((2-[ ¹⁸F]фторэтил)(метил)амино)нафталин-2-ил)этилиден)малонитрила ([¹⁸F]FDDNP), 2-(3-[¹⁸F]-фтор-4-метиламино-фенил)-бензотиазол-6-ола, 2-(2-[¹⁸F]-фтор-4-метиламино-фенил)-бензотиазол-6-ола, (Е)-4-(2-(6-(2-(2-(2-[¹⁸F]фторэтокси)этокси)пиридин-3-ил)винил)-N,N-диметилбензоламина ([¹⁸F]AV-19), [¹⁸F][4-(2-{4-[2-(2-фтор-этокси)-этокси]-фенил}-винил)-фенил]-метил-амина, [¹⁸F]{4-[2-(4-{2-[2-(2-фтор-этокси)-этокси]-этокси}-фенил)-винил]-фенил}-метил-амина, [¹⁸F][(4-{2-[4-(2-{2-[2-(2-фтор-этокси)-этокси]-этокси}-этокси)-фенил]-винил}-фенил)-метил-амина и [¹⁸F][[4-(2-{4-[2-(2-{2-[2-(2-фтор-этокси)-этокси]-этокси}-этокси)-этокси]-фенил}-винил)-фенил]-метил-амина.

3. Радиофармацевтическая композиция по п.1, где ¹⁸ F-меченное соединение представляет собой [¹⁸F]FDG.

4. Радиофармацевтическая композиция по п.1, где количество гентизиновой кислоты составляет 0,01-10,0 мг/мл, предпочтительно 0,1-5,0 мг/мл, наиболее предпочтительно 0,5-5,0 мг/мл, при этом особенно предпочтительно количество 2,5 мг/мл.

5. Радиофармацевтическая композиция по п.1, где рН композиции находится в диапазоне 4,5-8,5, предпочтительно 4,5-7,0, наиболее предпочтительно 4,5-6,3.

6. Радиофармацевтическая композиция по любому из пп.1-5, где радиоактивная концентрация ¹⁸F в среде-носителе находится в диапазоне 10-25000 МБк/мл.

7. Способ получения стабилизированной радиофармацевтической композиции, включающий смешивание:

(1) ¹⁸F-меченного соединения в биосовместимой среде-носителе с

(2) эффективным стабилизирующим количеством гентизиновой кислоты или ее соли с биосовместимым катионом;

где радиоактивная концентрация ¹⁸F в среде-носителе находится в диапазоне 10-100000 МБк/мл, и рН полученной композиции находится в диапазоне 4,0-9,5.

8. Способ по п.7, включающий дополнительную стадию стерилизации.

9. Способ по п.7, где ¹⁸F-меченное соединение выбрано из [¹⁸F]FDG, [¹⁸F]-фтор-ДОФА, [¹⁸F]-фторэстрадиола, 3'-[¹⁸F]-фтортимидина, 5-[¹⁸F]фторурацила, [¹⁸F]фтордофамина, [¹⁸F]фторнорэпинефрина, 2 -карбометокси-3 -(4-иодфенил)нортропана ([¹⁸F]CFT), N-[ ¹⁸F]-фторпропил-2 -карбометокси-3 -(4-иодфенил)нортропана ([¹⁸F]FP-CIT), 2-(1-(6-((2-[ ¹⁸F]фторэтил)(метил)амино)нафталин-2-ил)этилиден)малонитрила ([¹⁸F]FDDNP), 2-(3-[¹⁸F]-фтор-4-метиламино-фенил)-бензотиазол-6-ола, 2-(2-[¹⁸F]-фтор-4-метиламино-фенил)-бензотиазол-6-ола, (E)-4-(2-(6-(2-(2-(2-[¹⁸F]фторэтокси)этокси)пиридин-3-ил)винил)-N,N-диметилбензоламина ([¹⁸F]AV-19), [¹⁸F][4-(2-{4-[2-(2-фтор-этокси)-этокси]-фенил}-винил)-фенил]-метил-амина, [¹⁸F]{4-[2-(4-{2-[2-(2-фтор-этокси)-этокси]-этокси}-фенил)-винил]-фенил}-метил-амина, [¹⁸F][(4-{2-[4-(2-{2-[2-(2-фтор-этокси)-этокси]-этокси}-этокси)-фенил]-винил}-фенил)-метил-амина и [¹⁸F][(4-(2-{4-[2-(2-{2-[2-(2-)фтор-этокси)-этокси]-этокси}-этокси)-этокси]-фенил}-винил)-фенил]-метил-амина.

10. Способ по п.7, где ¹⁸F-меченное соединение представляет собой [¹⁸F]FDG.

11. Способ по п.7, где количество гентизиновой кислоты составляет 0,01-10,0 мг/мл, предпочтительно 0,1-5,0 мг/мл, наиболее предпочтительно 0,5-5,0 мг/мл, при этом особенно предпочтительно количество 2,5 мг/мл.

12. Способ по п.7, где рН композиции находится в диапазоне 4,5-8,5, предпочтительно 4,5-7,0, наиболее предпочтительно 4,5-6,3.

13. Способ по любому из пп.7-12, где радиоактивная концентрация ¹⁸F в среде-носителе находится в диапазоне 10-25000 МБк/мл.

14. Применение гентизиновой кислоты или ее соли с биосовместимым катионом для стабилизации радиофармацевтической композиции по любому из пп.1-6 против радиолиза.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к стабилизированным ¹⁸ F-меченным радиофармацевтическим композициям, к способам их изготовления и к новому применению гентизиновой кислоты или ее соли.

¹⁸F имеет период полураспада 109,7 минут, и это означает, что получение ¹⁸F-содержащих радиофармацевтических веществ осуществляют как можно ближе к месту клинического применения и партиями относительно больших размеров, принимая в расчет распад во время доставки пациенту. Применение окончательной стерилизации радиофармацевтических веществ с использованием цикла автоклавирования также приводит к нестабильности ¹⁸F-содержащих радиофармацевтических веществ. Общепринятым механизмом дефторирования ¹⁸ F-меченного радиофармацевтического вещества in vitro является радиолиз ¹⁸F-визуализирующего агента в водном растворе. В водных средах радиоактивный распад приводит к образованию форм кислорода с высокой реакционной способностью, которые взаимодействуют с органическими молекулами. Реакционно-способные формы возникают в результате разложения водного растворителя и представляют собой свободные радикалы, такие как гидроксильный или супероксидный свободные радикалы.

Гентизиновая кислота описана ранее в качестве стабилизатора для применения в лиофилизированных наборах для получения ^99mTc-содержащих радиофармацевтических веществ, например, в US 4497744.

В WO 02/04030 описаны стабильные радиофармацевтические композиции, содержащие радиофармацевтическое вещество (при этом радиоактивный изотоп выбран из ^99mTc, ¹³¹I, ¹²⁵I, ¹²³I, ^117mSn, ¹¹¹In, ⁹⁷ Ru, ²⁰³Pb, ⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga, ⁸⁹Zr, ⁹⁰Y, ¹⁷⁷Lu, ¹⁴⁹Pm, ¹⁵³Sm, ¹⁶⁶Ho, ³²P, ²¹¹ At, ⁴⁷Sc, ¹⁰⁹Pd, ¹⁰⁵Rh, ¹⁸⁶Re, ¹⁸⁸Re, ⁶⁰Cu, ⁶² Cu, ⁶⁴Cu и ⁶⁷Cu) и эффективное стабилизирующее количество замещенного ароматического соединения.

Применение гентизиновой кислоты и ее солей для стабилизации содержащих радиоактивный йод радиофармацевтических веществ описано в WO 2007/007021.

Применение ловушек радикалов, таких как гентизиновая кислота, для увеличения выходов при включении радиоактивного фтора в соли иодония описано в WO 2005/061415.

Стабилизированные композиции ¹⁸F-меченных радиофармацевтических веществ описаны в данной области техники, в частности стабилизированные композиции 2-[¹⁸F]фтор-2-дезокси-D-глюкозы ([¹⁸F]FDG), направленные на решение проблемы радиолиза. Например, в WO 2004/043497 описана стабилизация радиофармацевтического вещества, содержащего [¹⁸F]FDG, с использованием этилового спирта, а в WO 03/090789 описан способ улучшения одной или более физических/химических характеристик, таких как пониженный радиолиз и способность к автоклавированию раствора [¹⁸F]DG, путем добавления буфера.

Применение ¹⁸ F-меченных радиофармацевтических веществ в клинике быстро нарастает в связи с внедрением в качестве способа визуализации in vivo позитронно-эмиссионной томографии (PET), в частности, в последние годы значительно возросло применение [¹⁸F]FDG в качестве радиоактивного визуализирующего агента для клинического обследования или для диагностических целей. Соответственно, чтобы удовлетворить такой повышенный спрос, возникает необходимость в получении ¹⁸F-меченных радиофармацевтических веществ, таких как [ ¹⁸F]FDG, партиями больших объемов, что в свою очередь представляет собой более трудную задачу по сравнению с обычно изготавливаемыми партиями, которые удовлетворяют стандартам радиохимической чистоты (RCP), предусматриваемым регулирующими органами (см., например, Европейскую фармакопею 01/2005:1325). Следовательно, все еще существует необходимость в дополнительных способах стабилизации ¹⁸F-меченных радиофармацевтических веществ, например [¹⁸F]FDG.

В первом аспекте настоящего изобретения предложена стабилизированная радиофармацевтическая композиция, содержащая:

(1) ¹⁸F-меченное соединение;

(2) эффективное стабилизирующее количество гентизиновой кислоты или ее соли с биосовместимым катионом;

(3) водную биосовместимую среду-носитель,

где радиоактивная концентрация ¹⁸F в этой среде-носителе находится в диапазоне 10-100000 МБк/мл, и рН композиции находится в диапазоне 4,0-9,5.

Термин "¹⁸ F-меченное соединение" обозначает ¹⁸F-меченное соединение, которое подходит для детектирования посредством РЕТ-визуализации внутри субъекта-млекопитающего, соответственно человека. ¹⁸F-меченное соединение предпочтительно не является пептидом. Под термином "не является пептидом" понимают соединение, которое не содержит каких-либо пептидных связей, то есть амидной связи между двумя аминокислотными остатками.

¹⁸F-меченными соединениями, подверженными наибольшему риску радиолиза, являются соединения, которые применяют с минимальным количеством присутствующего нерадиоактивного соединения-носителя, например, когда нерадиоактивное соединение также является биологически активным, и поэтому ожидается, что оно будет конкурировать с ¹⁸F-меченным соединением in vivo. В подобных случаях отсутствия добавленного носителя или при высоких уровнях удельной активности, когда радиоактивная концентрация относительно высока, риск радиолиза увеличивается.

Под "гентизиновой кислотой" понимают 2,5-дигидроксибензойную кислоту:

Гентизиновая кислота и ее соли, такие как гентизат натрия, поступают в продажу от широкого круга поставщиков, например, Sigma-Aldrich Ltd, UK.

Под термином "биосовместимый катион" понимают положительно заряженный противоион, который образует соль с ионизированной отрицательно заряженной группой, где указанный положительно заряженный противоион также является нетоксичным и, следовательно, подходит для введения в организм млекопитающего, особенно организм человека. Примеры подходящих биосовместимых катионов включают: катионы щелочных металлов натрия или калия, щелочноземельных металлов кальция и магния и ион аммония. Предпочтительными биосовместимыми катионами являются катионы натрия и калия, наиболее предпочтительно натрия. Предпочтительно композиции по настоящему изобретению содержат гентизиновую кислоту или гентизат натрия, которые могут быть использованы по отдельности или в смеси.

Термин "эффективное стабилизирующее количество" обозначает количество, эффективное для стабилизации ¹⁸F-меченного соединения против радиолиза. Это означает, что гентизиновая кислота или ее соль является главным средством стабилизации. Тем не менее, в композиции могут присутствовать другие стабилизаторы, но гентизиновая кислота или ее соль является доминирующим средством стабилизации.

Предпочтительно гентизиновая кислота или ее соль является единственным присутствующим в радиофармацевтической композиции стабилизатором. Гентизиновую кислоту или ее соль удобно использовать в концентрации 0,01-10,0 мг/мл, предпочтительно 0,1-5,0 мг/мл, наиболее предпочтительно 0,5-5,0 мг/мл, при этом особенно предпочтительна концентрация 2,5 мг/мл. Поскольку возрастающие концентрации гентизиновой кислоты будут приводить к понижению рН композиции, при более высоких концентрациях гентизиновой кислоты может потребоваться корректировка рН или использование буфера.

"Водная биосовместимая среда-носитель" представляет собой текучую среду, особенно жидкость, в которой ¹⁸F-меченное соединение суспендируют или растворяют таким образом, чтобы композиция была физиологически приемлемой, то есть ее можно было бы вводить в организм млекопитающего без токсичности или чрезмерного дискомфорта. Водной биосовместимой средой-носителем является подходящим образом инъецируемая жидкость-носитель, такая как стерильная апирогенная вода для инъекций; водный раствор, такой как физиологический раствор (который предпочтительно может быть сбалансирован таким образом, чтобы конечный продукт для инъекций был либо изотоническим, либо негипотоническим); водный раствор одного или более регулирующих тоничность веществ (например, солей катионов плазмы крови с биосовместимыми противоионами), сахаров (например, глюкозы или сахарозы), сахарных спиртов (например, сорбита или маннита), гликолей (например, глицерина) или других неионных полиолов (например, полиэтиленгликолей, пропиленгликолей и тому подобного). Что касается радиофармацевтических композиций по настоящему изобретению, то рН композиции удобно регулировать, используя соответствующую водную биосовместимую среду-носитель, подходящую для внутривенной инъекции, соответственно в диапазоне 4,0-9,5, более соответствует диапазон 4,5-8,5, предпочтительно 4,5-7,0, наиболее предпочтительно 4,5-6,3.

В том случае, когда радиофармацевтическим веществом является [ ¹⁸F]FDG, водная биосовместимая среда-носитель предпочтительно представляет собой смешанный водный раствор растворителя, содержащий до 5% (об./об.) этанола, при этом остальное содержимое в процентах составляет водный буферный раствор согласно требованиям Европейской фармакопеи, например фосфатный буфер.

Радиоактивная концентрация (RAC) ¹⁸F в этой среде находится в диапазоне 10-100000 МБк/мл. Предпочтительно RAC находится в диапазоне 10-25000 МБк/мл. Чем выше RAC, тем больше риск радиолиза, и, следовательно, больше значимость эффективных стабилизаторов по настоящему изобретению. В обычной практике RAC на момент изготовления является наивысшей, при этом наличие радиоактивного распада означает, что RAC значительно понижается за время изготовления фармацевтической композиции, тестирования, упаковки и доставки покупателю.

Для удобства радиофармацевтические композиции по настоящему изобретению поставляют в шприце клинической марки или в контейнере, который снабжен герметичным уплотнителем, подходящим для однократного или многократного прокалывания иглой для подкожных инъекций (например, обжатой крышкой с герметизирующей прокладкой) с поддержанием при этом стерильной целостности. Такие контейнеры могут содержать однократные дозы ("стандартная доза") или многократные дозы для пациентов. Подходящие контейнеры включают герметично закрываемый сосуд, который позволяет поддерживать стерильную целостность и/или радиоактивную безопасность, в то же время допускающий добавление и отбор растворов с помощью шприца. Таким предпочтительным контейнером является флакон с герметизирующей прокладкой, у которого газонепроницаемая крышка обжата дополнительным укупорочным средством (обычно из алюминия). Такие контейнеры имеют дополнительное преимущество, заключающееся в том, что крышка при желании может выдерживать вакуум, например, для замены заполняющего свободное пространство газа или дегазирования растворов.

Когда радиофармацевтическое вещество поставляют в контейнере для многократных доз, такие контейнеры предпочтительно включают отдельный большой флакон (например, объемом 10-30 см³), который содержит достаточное количество радиофармацевтического вещества для многократных предназначенных для пациента доз. Стандартные предназначенные для пациента дозы могут, таким образом, быть отобраны в шприцы клинической марки с различными промежутками времени в течение срока годности препарата, находящегося в большом флаконе, в соответствии с клинической ситуацией.

Шприцы для радиофармацевтических веществ сконструированы для включения однократной дозы для человека или "стандартной дозы" и поэтому предпочтительно представляют собой шприц одноразового применения или другой шприц, подходящий для клинического применения. Такие шприцы возможно могут быть снабжены предохранительным кожухом (для шприца) для защиты оператора от дозы радиоактивного излучения. Такие подходящие кожухи в шприцах для радиофармацевтических веществ известны в данной области техники, и в продаже имеются различные конструкции и предпочтительно на основе свинца или вольфрама.

Кроме того, радиофармацевтическая композиция возможно может содержать дополнительные компоненты, такие как антимикробный консервант, рН-регулирующий агент или наполнитель. Под термином "антимикробный консервант" понимают агент, который ингибирует рост потенциально вредных микроорганизмов, таких как бактерии, дрожжи или плесневые грибы. Антимикробный консервант также может демонстрировать некоторые бактерицидные свойства в зависимости от дозы. Основная роль антимикробного(ых) консерванта(ов) по настоящему изобретению состоит в ингибировании роста любого такого микроорганизма в радиофармацевтической композиции. Подходящий(е) антимикробный(е) консервант(ы) включает(ют): парабены, то есть метил-, этил-, пропил- или бутилпарабен, или их смеси; бензиловый спирт; фенол; крезол; цетримид и тиомерсал. Предпочтительными антимикробными консервантами являются парабены.

Термин "рН-регулирующий агент" означает соединение или смесь соединений, полезных для обеспечения того, чтобы рН радиофармацевтической композиции находился в пределах, приемлемых (приблизительно рН 4,0-8,5) для введения человеку или млекопитающему. Такие подходящие рН-регулирующие агенты включают фармацевтически приемлемые буферы, такие как трициновый, фосфатный буфер или буфер на основе ТРИСа (то есть трис(гидроксиметил)аминометана), и фармацевтически приемлемые основания, такие как карбонат натрия, бикарбонат натрия или их смеси. Для [¹⁸F]FDG предпочтительным буфером является фосфатный буфер.

Под термином "наполнитель" понимают фармацевтически приемлемый наполнитель, который может облегчить работу с материалом в процессе изготовления продукта. Подходящие наполнители включают неорганические соли, такие как хлорид натрия, и растворимые в воде сахара или сахарные спирты, такие как сахароза, мальтоза, маннит или трегалоза.

Радиофармацевтические композиции по настоящему изобретению могут быть изготовлены в асептических условиях производства с получением желаемого стерильного апирогенного продукта. Радиофармацевтические композиции также могут быть изготовлены в нестерильных условиях с последующей окончательной стерилизацией с использованием, например, гамма-облучения, автоклавирования, обработки сухим жаром, мембранной фильтрации (иногда называемой стерильной фильтрацией) или химической обработки (например, этиленоксидом). ¹⁸F-меченное соединение соответственно получают из предшественника. "Предшественник" соответственно включает нерадиоактивный аналог синтетического соединения, имеющий в своей химической структуре компонент (Y), который сконструирован таким образом, чтобы осуществлялась химическая реакция по Y с подходящей химической формой радиоактивного изотопа ¹⁸F и которая могла бы быть проведена за минимальное количество стадий (идеально в одну стадию) и без необходимости в значительной очистке (идеально без какой-либо дальнейшей очистки) с получением желаемого радиоактивного продукта. Удобно, чтобы можно было получать такие предшественники с хорошей степенью химической чистоты. Подходящие предшественники и их получение хорошо известны в данной области техники, и по ним приведены обзоры, например, в Handbook of Radiopharmaceuticals, Radiochemistry and Applications, Ed. M.J. Welch and C.S. Redvanly, Pub. John Wiley and Sons Ltd, UK.

Источником ¹⁸ F наиболее предпочтительно является [¹⁸F]фторид-ион, но в некоторых случаях может быть использован электрофильный источник ¹⁸F, такой как [¹⁸F]фтор, или [¹⁸F]-CH₃COOF, или [¹⁸F]-OF ₂. Получают [¹⁸F]FDG традиционно с использованием химических операций, основанных на операциях, описанных в Hamacher et al., Journal of Nuclear Medicine, 27, (1986), стр.235-283. Однако данный способ получения ¹⁸F-меченного соединения не рассматривается как часть настоящего изобретения.

Стабилизированную радиофармацевтическую композицию по изобретению предпочтительно хранят в среде, из которой удален газообразный кислород.

Под фразой "среда, из которой удален газообразный кислород" понимают то, что были предприняты соответствующие стадии для поддержания абсолютно минимального уровня кислорода:

(а) если радиофармацевтическая композиция находится в растворе, то газообразный кислород вытесняют из раствора и предпринимают стадии, чтобы гарантировать поддержание газа над раствором в состоянии без кислорода. Это делается потому, что среда охватывает как сам раствор, так газообразную атмосферу, с которой раствор контактирует;

(б) в процессе изготовления радиофармацевтической композиции применяют не содержащие кислород растворы и реакционные сосуды.

Удаление газообразного кислорода может быть осуществлено различными способами, известными в данной области техники, например, посредством длительной продувки раствора биосовместимого носителя химически нереакционноспособным газом с целью вытеснения всего растворенного кислорода; посредством дегазирования вместе с циклами замораживания-оттаивания раствора биосовместимого носителя с использованием химически нереакционноспособного газа или посредством лиофилизации в случае, когда используемой газовой атмосферой является такой нереакционноспособный газ.

Под термином "химически нереакционноспособный газ" понимают газ, который будет использован в химических операциях для создания "инертной атмосферы", как это понимается в данной области техники. Такой газ не вступает легко в реакции окисления или восстановления (как это делают, например, кислород и водород, соответственно) или в другие химические реакции с органическими соединениями (как это делает, например, хлор) и, следовательно, является совместимым с большим разнообразием синтетических соединений, не взаимодействуя с находящимся в контакте с ним синтетическим соединением даже при длительном хранении в течение многих часов или даже недель. Такие подходящие газы включают азот или такие инертные газы, как гелий или аргон. Предпочтительно химически нереакционноспособный газ представляет собой азот или аргон. Наиболее предпочтительно, химически нереакционноспособный газ тяжелее воздуха, что обеспечит поддержание защитной атмосферы над стабилизируемой композицией. Поэтому предпочтительным химически нереакционноспособным газом является аргон. С целью гарантирования отсутствия попадания газообразного кислорода в раствор, из которого удален кислород, заполняющий пространство над стабилизатором газ либо поддерживают в условиях положительного давления нереакционноспособного газа, либо стабилизатор помещают в газонепроницаемый контейнер (как описано выше), при этом заполняющим пространство газом является химически нереакционноспособный газ. Химически нереакционноспособные газы марки "для фармацевтического применения" имеются в продаже.

В следующем аспекте настоящего изобретения предложен способ получения стабилизированной радиофармацевтической композиции, включающий смешивание:

(1) ¹⁸ F-меченного соединения в биосовместимой среде-носителе с

(2) эффективным стабилизирующим количеством гентизиновой кислоты или ее соли с биосовместимым катионом;

где радиоактивная концентрация ¹⁸F в среде-носителе находится в диапазоне 10-100000 МБк/мл, и рН полученной композиции находится в диапазоне 4,0-9,5.

Хронометрирование введения гентизиновой кислоты или ее соли должно быть таковым, чтобы смешивание происходило как можно быстрее после получения ¹⁸F-меченного соединения, поскольку чем дольше ¹⁸F-меченное соединение находится в растворе в отсутствие стабилизатора, тем выше риск радиолиза.

Предпочтительно гентизиновую кислоту или ее соль предоставляют в растворе и в среде, из которых удален газообразный кислород. Способы удаления газообразного кислорода описаны выше. ¹⁸F-меченное соединение в биосовместимой среде-носителе и радиофармацевтический продукт также возможно могут поддерживаться в среде, из которой удален газообразный кислород.

В следующем аспекте настоящего изобретения предложен способ получения стабилизированной радиофармацевтической композиции, которая описана выше, включающий дополнительную стадию стерилизации. Стадия стерилизации может быть осуществлена путем подвергания стабилизированной радиофармацевтической композиции циклу термической стерилизации или с использованием гамма-облучения, автоклавирования, обработки сухим жаром, мембранной фильтрации (иногда называемой стерильной фильтрацией) или химической обработки (например, этиленоксидом).

В следующем аспекте настоящего изобретения предложено применение гентизиновой кислоты или ее соли с биосовместимым катионом для стабилизации против радиолиза радиофармацевтической композиции, содержащей ¹⁸F-меченное соединение в водной биосовместимой среде-носителе, как определено выше, при этом радиоактивная концентрация ¹⁸F в среде-носителе находится в диапазоне 10-100000 МБк/мл, и рН полученной композиции находится в диапазоне 4,0-9,5.

Это применение является особенно важным для водной биосовместимой среды-носителя в форме, подходящей для введения человеку в качестве радиофармацевтического вещества, то есть в стерильной форме, как описано выше.

Теперь данное изобретение будет проиллюстрировано посредством Примеров.

ПРИМЕРЫ

Для определения стабильности композиции определяли радиохимическую чистоту образцов [ ¹⁸F]FDC-содержащей композиции по окончании синтеза (EOS) (end of synthesis) и по окончании срока хранения (Expiry), то есть через 10 часов хранения при 22°С±3°С.

Способы

Буфер

Фосфатный буфер, изотонический, рН 5,7.

Синтез [¹⁸ F]FDG-содержащих композиций

[¹⁸F]FDG получали на аппарате для автоматизированного синтеза (TRACERlab Fx, GE Healthcare, Germany) с получением раствора партии

[¹⁸F]FDG в изотоническом фосфатном буфере (рН 5,7). Побочным продуктом этого синтеза является 2-[¹⁸F]фтор-2-дезокси-D-манноза ([¹⁸F]FDM).

К серии флаконов добавляли количество стабилизатора, растворенного в буфере. Раствор партии [¹⁸F]FDG затем разливали в эти флаконы и стерилизовали нагреванием при 134°С в течение 210 секунд.

Тестирование стабильности

Метод тонкослойной хроматографии (TLC)

На момент EOS (в пределах 2 часов) готовили 100-кратное разведение тестируемого раствора путем добавления 10 мкл образца к 990 мкл объема воды для инъекций. После перемешивания на TLC-пластинку наносили 2 мкл образца.

Через 10 часов после синтеза готовили 10-кратное разведение путем добавления 20 мкл образца к 180 мкл объема воды для инъекций. После перемешивания на TLC-пластинку наносили 3 мкл образца.

В пределах 1-3 часов после приготовления определяли радиохимическую чистоту (RCP) по TLC. Флаконы хранили при 22°С±3°С и через 10 часов после синтеза снова определяли RCP по TLC.

Первоначально RCP также измеряли посредством высокоэффективной жидкостной хроматографии (HPLC) путем введения 20 мкл образца в колонку Dionex Carbopac, используя 0,1 М NaOH в качестве элюента.

В дополнительных примерах (3-6) для определения RCP использовали только TLC.

Результаты

Пример 1

Раствор партии [¹⁸F]FDG в пересчете на всю партию на момент EOS содержал 45 ГБк в 19 мл (RAC 2370 МБк/мл).

Флакон	Объем (мл)	Рассчитанное количество добавки	RCP (EOS) [18F]-FDG + [18F]-FDM	RCP (на момент EOS + 1 ч) [18F]-FDG + [18 F]-FDM
HPLC	TLC	HPLC	TLC
Контроль	1,2	нет	94,8	94,3	95,5	93,2
3	2,0	2,5 мг/мл ацетона	97,4	96,0	97,6	95,2
4	2,0	5 мг/мл ацетона	97,4	96,5	97,8	95,8
5	2,0	20 мг/мл ацетона	97,9	96,8	98,4	96,3
6	2,0	2,5 мг/мл этанола	98,7	He опред.	99,0	97,5
7	2,0	5 мг/мл этанола	98,6	98,0	99,2	97,8
8	2,0	20 мг/мл этанола	98,8	98,1	99,2	97,4
9	2,0	3 мг/мл гентизиновой кислоты	98,3	97,4	98,5	97,0
10	2,0	6 мг/мл гентизиновой кислоты	98,7	97,5	98,8	97,5
*) Остаточные растворители: 39 мкг/мл EtOH и 32 мкг/мл ацетона

Вывод: ацетон оказывает слабый стабилизирующий эффект. Этанол и гентизиновая кислота оказывают более сильный стабилизирующий эффект, чем ацетон.

В Примерах 2, 3 и 4 исследовали стабилизирующий эффект разных концентраций гентизиновой кислоты (GA), используя партии, содержащие менее 50 ГБк на момент EOS.

Пример 2

Раствор партии [¹⁸F]FDG в пересчете на всю партию на момент EOS содержал 36 ГБк в 10,9 мл (RAC 3300 МБк/мл).

Флакон	Объем (мл)	Добавка	RCP (EOS) [18F]-FDG + [18F]-FDM	RCP (на момент Expiry) [18F]-FDG + [18F]-FDM
HPLC	TLC	HPLC	TLC
Контроль	1,2	нет *)	98,1	96,6	95,9	94,3
9	1,0	0,1 мг/мл GA	98,1	97,1	98,5	96,5
11	1,0	0,25 мг/мл GA	98,2	98,3	98,5	97,0
10	1,0	0,5 мг/мл GA	98,2	97,0	-	96,8
*) Остаточные растворители: 122 мкг/мл ЕЮН и 66 мкг/мл ацетона

Пример 3

Раствор партии [¹⁸F]FDG в пересчете на всю партию на момент EOS содержал 43 ГБк в 17 мл (RAC 2500 МБк/мл).

Флакон*)	Объем (мл)	Добавка	RCP (EOS) [18F]-FDG + [18F]-FDM	RCP (на момент Expiry) [18F]-FDG + [18F]-FDM
TLC	TLC
Контроль	1,2	нет*)	97,5		95,7
10	1,0	0,05% гентизиновой кислоты	-		98,0
11	1,0	0,1% гентизиновой кислоты	98,7		98,4
*) 154 мкг/мл EtOH + 89 мкг/мл ацетона

Пример 4

Раствор партии [¹⁸F]FDG в пересчете на всю партию на момент EOS содержал 40 ГБк в 17 мл (RAC 2350 МБк/мл).

Флакон*)	Объем (мл)	Добавка	RCP(EOS) [18F]-FDG + [18F]-FDM	RCP (на момент Expiry) [18F]-FDG + [18F]-FDM
TLC	TLC
QC		нет *)	94,4		93,7
4		1 мг/мл гентизиновой кислоты	97,8		97,8
5		2 мг/мл гентизиновой кислоты	97,8		97,9
*) 39 мкг/мл EtOH + 32 мкг/мл ацетона; QC = контроль качества

Вывод

Для трех небольших партий (общая активность менее 50 ГБк на момент EOS) эффект возрастающих количеств гентизиновои кислоты исследовали путем последовательного сравнения диапазонов 0,1-0,5 мг/мл, 0,5-1 мг/мл и 1-2 мг/мл гентизиновой кислоты. Во всех случаях было обнаружено, что большее количество было более эффективным.

Примеры 5 и 6 выполняли для определения стабилизирующего эффекта гентизиновои кислоты для партий больших объемов и с большими радиоактивными концентрациями.

Пример 5

Раствор партии [¹⁸F]FDG в пересчете на всю партию на момент EOS содержал 43,3 ГБк в 12,1 мл (RAC 3578 МБк/мл).

Флакон	об. FDG (мл)	Добавление	Общий объем (мл)	Стабилизаторы в конечной смеси	RCP (EOS) [18F]-FDG+[18F]-FDM	RCP (EOS+10 ч) [18F]-FDG+[18F]-FDM
TLC	TLC
1	1,2	100 мкл конечного буфера	1,3	нет добавки *)	95,5	94,5
4	1,2	120 мкл 2,5%-ного EtOH	1,3	1 мг/мл EtOH	97,4	97,2
5	1,2	120 мкл 5%-ного EtOH	1,3	1,5 мг/мл EtOH	97,8	97,5
6	1,2	120 мкл GA (27 мг/мл)	1,3	2,5 мг/мл GA *)	98,4	98,5
*) Остаточный после синтеза этанол приблизительно 0,1 мг/мл

Вывод

Абсолютное количество стабилизатора во флаконе 5 и 6 почти одно и то же (приблизительно 2 мг/мл). RCP на момент EOS+10 ч на 1% выше в случае GA, что указывает на то, что GA является лучшим стабилизатором, чем этанол.

Пример 6

Раствор партии [¹⁸F]FDG в пересчете на всю партию на момент EOS содержал 85,6 ГБк в 15,8 мл (RAC 5418 МБк/мл).

Флакон	Об. FDG (мл)	Добавление	Общий объем (мл)	Стабилизаторы в конечной смеси	RCP (EOS) [18F]-FDG+[18F]-FDM	RCP (EOS+10 ч) [18F]-FDG+[18F]-FDM
TLC	TLC
1	2,0	200 мкл буфера	2,2	0,5 мг/мл EtOH (нет добавки)	95,7	94,2
6	2,0	200 мкл GA (27 мг/мл)	2,2	2,5 мг/мл GA *)	98,3	98,1
*) Флакон № 6 также содержит остаточный после синтеза этанол (приблизительно 0,5 мг/мл)