алкалоидные составы

Формула изобретения

1. Состав для повышения эффективности трансдермальной доставки алкалоидов, содержащий:

(i) алкалоид, имеющий группу третичного амина, и

(ii) смесь монотокоферилфосфата и дитокоферилфосфата.

2. Состав по п.1, в котором алкалоид представляет собой атропин или морфин.

3. Фармацевтическая композиция для повышения эффективности трансдермальной доставки алкалоидов, содержащая эффективное количество алкалоида, имеющего группу третичного амина, смесь монотокоферилфосфата и дитокоферилфосфата, а также фармацевтически приемлемый наполнитель.

4. Применение алкалоида, имеющего группу третичного амина, и смеси монотокоферилфосфата и дитокоферилфосфата при изготовлении состава для повышения эффективности трансдермальной доставки алкалоидов.

5. Способ повышения эффективности трансдермальной доставки алкалоида, содержащий реагирование алкалоида, имеющего группу третичного амина, со смесью монотокоферилфосфата и дитокоферилфосфата.

Описание изобретения к патенту

Настоящее изобретение относится к составам, содержащим один или более алкалоидов. Более конкретно, но не исключительно, оно относится к составам, содержащим один или более алкалоидов и одно или более фосфатных производных агентов электронного переноса.

Предпосылки создания изобретения.

Те места данного описания изобретения, где упоминаются или обсуждаются документ, акт или источник информации, не предполагают допущения, что такой документ, акт или источник информации определяют дату приоритета. Это всего лишь общеизвестные сведения, или же они связаны с попыткой решить какую-либо проблему, касающуюся предмета настоящего описания изобретения.

Алкалоиды.

Использование алкалоидов в медицине имеет долгую историю. Эти соединения, которые первоначально извлекались из растений, представляют собой азотистые соединения, оказывающие физиологическое действие на человеческий организм как лекарства или яды. Термин "алкалоиды" в том смысле, в котором он используется в данном описании и в формуле изобретения, включает все природные и синтетические активные соединения, содержащие первичные, вторичные или третичные амины в качестве заместителей. Амин может быть введен в одно или два кольца, однако могут использоваться и нециклические структуры. Например, такие соединения включают:

- третичные амины, которые:

- являются алициклическими и имеют атом азота как общий элемент трех колец (например, морфин, атропин, хинин); или

- являются циклическими, где азот присутствует в одном кольце, причем он алкилирован (например, никотин, фенспирид); или

- не имеют циклической структуры, включающей азот (например, флюразепан);

- вторичные амины, в которых азот включен в алициклическую структуру (например, конлин, фендилин) или линейную структуру (например, эпинефрин);

- первичные амины (например, эфидрин);

- пиридины (например, никотин);

- производные метамидина;

- хинолины (например, цинхонин); и

- гуанидины (например, аргинин).

Большинство алкалоидов не растворяется в воде, но растворяется в органических растворителях. Однако все алкалоиды являются основными соединениями и взаимодействуют с кислотами с образованием кристаллических солей, которые, как правило, по крайней мере, частично водорастворимы. Обычно алкалоиды применяют в виде солей либо перорально, либо посредством внутривенной инъекции. Алкалоиды представляют собой класс веществ, которые, как правило, не вводят чрескожно, так как гидрофильный характер солей обычно ограничивает чрескожную транспортировку. Примерами клинически полезных алкалоидов, которые не вводятся чрескожно, являются морфин и атропин.

Кроме того, желательно улучшить пероральную доставку алкалоидов, поскольку представляется, что большинство из них действует через лимфатическую систему.

Местное введение.

Местное введение означает нанесение лекарства непосредственно на часть тела и включает чрескожное введение (нанесение на кожу) и трансбуккальное введение (нанесение на внутреннюю поверхность ротовой полости).

Кожа является крупнейшим органом тела и защищает внутренние органы от внешних химических, физических и патологических опасностей. Нормальная кожа подразделяется на три слоя: эпидермис, дерма и подкожная ткань. Внешний ороговевший слой эпидермиса, stratum corneum, характеризуется прочностью, гибкостью, высоким электрическим сопротивлением и сухостью, которая препятствует проникновению и размножению микроорганизмов. Этот ороговевший слой является также основным препятствием для абсорбции лекарства через кожу.

Метод чрескожной доставки представляет собой нанесение лекарств в чистом виде или в составах, включающих вещества, которые усиливают скорость транспортировки через кожу. Традиционно средствами чрескожной доставки являются мази, кремы, припарки и пластыри, которые обеспечивают эффективный контакт с кожей. Позднее эту технологию усовершенствовали, превратив пластырь в "накладку", которая лучше прилипает к коже и улучшает регулирование скорости транспортировки.

Признано, что чрескожная доставка имеет ряд потенциальных преимуществ, в том числе достижение таких же уровней в крови, какие достигаются при медленном внутривенном вливании, но без связанных с ним сложностей, лучшее регулирование абсорбции и метаболизма по сравнению с пероральным введением, непрерывность действия лекарств, в особенности короткоживущих, аналогичная эффективность при снижении дозировки лекарства, благодаря исключению первого прохода печени, меньший риск недостаточной или избыточной дозировки; а также лучшая совместимость с организмом пациента благодаря упрощению режима дозирования.

Не всякое лекарство можно вводить чрескожно с достаточно высокой скоростью, позволяющей достичь уровней в крови, терапевтически полезных для системного лечения. Например, лекарства с одинаковыми молекулярными весами и размерами могут поглощаться через кожу с разными скоростями. Для улучшения поглощения через кожу разработаны различные интенсификаторы и способы составления составов. Однако при этом проявляется озабоченность относительно долгосрочного риска, так как повышенная способность лекарства к проникновению достигается за счет повреждения имеющего огромное значение защитного слоя кожи.

Применяющиеся стратегии совершенствования чрескожного лечения дают успешные результаты не для всех лекарств, поэтому остается поле для их дальнейшего улучшения. В частности, существует потребность в системах чрескожной доставки лекарств, способных доставлять алкалоиды.

Увеличивается также интерес к трансбуккальной доставке, поскольку этот метод доставки позволяет избежать метаболизма в печени, который представляет собой проблему при пероральном введении. В этом варианте доставки лекарство формируется в виде таблетки или лепешки, которая кладется под язык. Оболочка ротовой полости не имеет аналога ороговевшего слоя кожи, поэтому вводить лекарства трансбуккальным способом не так трудно, но этот метод введения используют не часто, поскольку скорость транспортировки лекарства может быть низкой, не позволяющей достичь эффективного результата.

В прошлом проводились работы с целью улучшить местное введение лекарств. Например, в международной патентной заявке PCT/AU03/00998 раскрывается носитель фармацевтических средств, содержащий комплекс фосфатного производного фармацевтически приемлемого соединения, например, токоферилфосфатов лауриламинодипропионовой кислоты. В заявке PCT/AU03/00998 описывается токоферилфосфат, образующий комплекс с комплексообразователем, выбранным из группы, состоящей из амфотерных поверхностно-активных веществ, катионных поверхностно-активных веществ, аминокислот с азотными радикалами и белков, богатых такими аминокислотами. Показано, что такой носитель повышает эффективность местного введения тестостерона, эстрогена, атропина и морфина. Однако, что касается атропина и морфина, желательно дальнейшее повышение эффективности при введении через кожу.

Пероральное введение.

Многие лекарства вводятся перорально, однако большое количество потенциально полезных лекарств нельзя вводить этим способом, так как они не способны проходить сквозь стенки кишечника. Следует понимать, что такие вещества, как жиры, эффективно транспортируются через кишечник, но многие другие, например, токоферол, транспортируются плохо.

Существует потребность в системах, которые повысят эффективность перорального введения алкалоидов.

Сущность изобретения.

Обнаружено, что эффективность введения алкалоидного соединения существенно улучшается, если оно образует комплекс непосредственно с фосфатным производным агента электронного переноса. Например, эффективность введения морфина повышалась, когда он образовывал комплекс непосредственно с токоферилфосфатом.

В соответствии с настоящим изобретением предлагается алкалоидный состав, содержащий продукт реакции одного или нескольких алкалоидов с одним или несколькими фосфатными производными одного или нескольких агентов электронного переноса.

Предпочтительно фосфатное производное агента электронного переноса выбирается из группы, состоящей из одного или нескольких фосфатных производных токоферола.

Алкалоидный состав предпочтительно вводится местно или перорально.

Согласно второму аспекту изобретения, предлагается метод повышения эффективности действия алкалоида, содержащий реагирование алкалоида с одним или несколькими фосфатными производными одного или нескольких агентов электронного переноса.

Настоящее изобретение предусматривает также использование продукта реакции одного или нескольких алкалоидов с одним или несколькими фосфатными производными одного или нескольких агентов электронного переноса вместе с инертными наполнителями, применяемыми при изготовлении лекарственных составов.

Настоящее изобретение предлагает также фармацевтический состав, содержащий продукт реакции одного или нескольких алкалоидов с одним или несколькими фосфатными производными одного или нескольких агентов электронного переноса, например фосфатными производными токоферола.

Предпочтительно алкалоид выбирается из группы, состоящей из третичных аминов, которые (1) являются алициклическими с атомом азота как общим членом трех колец (например, морфин, атропин, хинин); (2) являются циклическими, в которых азот включен в одно кольцо и алкилирован (например, никотин, фенспирид); или (3) не имеют циклической структуры, включающей азот (например, флюразепан). Более конкретно, алкалоид выбирается из группы, в которую входят атропин, хинин, опиоиды, такие как морфин, фентанил, никотин, фенспирид, флюразепан и кодеин.

Термин "агент электронного переноса" в данном документе означает класс химических соединений, которые могут быть фосфорилированы и которые (в нефосфорилированном виде) могут принимать электрон с образованием относительно стабильного молекулярного радикала или принимать два электрона, что позволяет соединению участвовать в обратимой окислительно-восстановительной системе. Среди примеров классов агентов электронного переноса, которые могут быть фосфорилированы, можно назвать гидроксихроманы, в том числе альфа-, бета, гамма- и дельта-токолы в энантиомерной и рацемической форме; хинолы, которые являются восстановленными формами витамина К1 и убихинона; гидроксикаратиноиды, в том числе ретинол; кальциферол и аскорбиновую кислоту. Предпочтительно агент электронного переноса выбирается из группы, состоящей из токоферола и других токолов, ретинола, витамина К1 и их смесей. Более предпочтительно агент электронного переноса выбирается из группы, состоящей из токолов и их смесей. Токолы включают все изомеры производных 6:гидрокси2:метилхромана (структурная формула приводится ниже), где R₁, R ₂ и R₃ могут быть водородом или метильными группами, то есть производными -5:7:8-триметила, -5:8-диметила, -7:8-диметила и -8-метила. У токоферолов R₄ замещен 4:8:12-триметилтридецильной группой, включая различные стереоизомеры и оптические изомеры (хиральные центры обозначены *). У токотриенолов R₄ замещен 4:8:12-триметилтридека-3:7:11-триеновой группой, а позиция 2 может быть стереоактивной, например, она может быть занята стереоизомерами R или S. Более предпочтительным агентом электронного переноса является -токоферол.

,

Термин "фосфатные производные" используется здесь для обозначения соединений, ковалентно связанных посредством кислорода с атомом фосфора фосфатной группы, так что образуется связь углерод - кислород - фосфор. Атом кислорода, как правило, берется из гидроксильной группы агента электронного переноса. Этот термин охватывает кислотные формы фосфорилированных агентов электронного переноса, соли фосфатов, в том числе металлические соли, например натриевые, магниевые, калийные и кальциевые, а также любые другие производные, в которых протон фосфата заменен на другие заместители, такие как этильные либо метильные группы или фосфатидильные группы. Термин включает смеси фосфатных производных, особенно полученные в результате реакций фосфорилирования, а также каждое из фосфатных производных по отдельности. Например, термин включает смесь монотокоферилфосфата (ТР) и дитокоферилфосфата (Т2Р), а также ТР и Т2Р по отдельности. Смеси, пригодные для использования, описаны в международной патентной заявке PCT/AU01/01475.

Термин "фосфатные производные" не включает комплексы фосфатных производных с комплексообразователем, выбранным из группы, состоящей из амфотерных поверхностно-активных веществ, катионных поверхностно-активных веществ, аминокислот, имеющих азотные функциональные группы, и белков, богатых такими аминокислотами.

Предпочтительно одно или более фосфатных производных одного или более агентов электронного переноса выбирается из группы, состоящей из монотокоферилфосфата, дитокоферилфосфата и их смесей. Более предпочтительно одно или более фосфатных производных одного или более агентов электронного переноса представляет собой смесь монотокоферилфосфата и дитокоферилфосфата.

В некоторых ситуациях возникает необходимость использовать такое фосфатное производное, как фосфатид, обладающий дополнительными свойствами, например лучшей растворимостью в воде. Фосфатидильные производные являются аминоалкильными производными органических фосфатов. Эти производные можно получить из аминов, имеющих структуру R₁R₂N(CH₂)_nOH, где n - целое число от 1 до 6, a R₁ и R₂ могут представлять собой либо Н, либо короткие алкильные цепи с 3 или менее атомами углерода. R₁ и R₂ могут быть одинаковыми или различными.

Фосфатидильные производные получают путем замещения гидроксильного протона агента электронного переноса фосфатом, который затем реагирует с амином, таким как этаноламин или N,N-диметиламин, с образованием фосфатидильного производного агента электронного переноса.

В одном из методов получения фосфатидильных производных используется основный растворитель, такой как пиридин или триэтиламин с хлорокисью фосфора, для получения промежуточного соединения, которое затем реагирует с гидроксигруппой амина с образованием соответствущего фосфатидильного производного, такого как дигидрофосфат Р-холила Р-токоферила.

Алкалоидный состав может вводиться людям или животным в различных лекарственных формах, таких как пищевые добавки, энтеральное питание, парентеральные лекарственные формы, свечи, формы доставки через нос, формы доставки через кожу, в том числе накладки и кремы, формы трансбуккальной доставки. Пероральная или трансбуккальная доставка особенно подходит для алкалоидов с низкой растворимостью в воде.

Предпочтительно составы алкалоидов для перорального приема, соответствующие данному изобретению, дополнительно содержат энтеральное покрытие. Энтеральное покрытие защищает комплексы от кислотной среды желудка. Составы для перорального приема могут иметь форму таблеток, порошков, жевательных таблеток, капсул, оральных суспензий, суспензий, эмульсий или жидкостей, составов детского питания, энтерального питания, нутрацевтиков и функционального питания.

Лекарственная форма может содержать любые добавки, обычно используемые в приготовлении этой лекарственной формы, такие как крахмал или полимерные связующие, подсластители, красящие вещества, эмульгаторы, покрытия и т.п. Еще одной пригодной добавкой является комплекс фосфатных производных агентов электронного переноса, который используется, если требуются дополнительные свойства, такие как повышенная стабильность или улучшенная доставляемость.

Термин "комплексы фосфатных производных" относится к продукту реакции одного или более фосфатных производных агентов электронного переноса с одним или более комплексообразователей, выбранных из группы, состоящей из амфотерных поверхностно-активных веществ, катионных поверхностно-активных веществ, аминокислот, имеющих азотные функциональные группы, и белков, богатых этими аминокислотами, как описано в международной патентной заявке PCT/AU01/01476, включенной в данный документ путем отсылки. Если используется такая добавка, важно обеспечить избыток агента электронного переноса в составе. Другие возможные добавки очевидны для специалистов в этой области.

Краткое описание чертежей.

Фиг.1 - график влияния различных составов с атропином на частоту сердечных сокращений у свиней. Данные представляют собой кумулятивные средние величины за 10-минутные периоды и скорректированы на базовое значение (среднее за 1 час до применения) с помощью ковариатного анализа.

Фиг.2 - типичная кривая зависимости дифференциалов частоты сердечных сокращений от времени. Данные взяты при повторном эксперименте 1 по свинье 1, которая получала препарат С (т.е. это была самая первая свинья из использовавшихся в экспериментах). Применение препарата начиналось в 0 минут и продолжалось 6 минут. Период, за который усреднялись дифференциалы, показан прямыми линиями.

Фиг.3 - график влияния различных базовых кремов на частоту сердечных сокращений у свиней. Данные представляют собой кумулятивные средние величины за 10-минутные периоды и скорректированы на базовое значение (среднее за 1 час до применения) с помощью ковариатного анализа.

Фиг.4 - типичная кривая зависимости частоты сердечных сокращений от времени. Данные взяты при повторном эксперименте 1 по свинье 1, которая получала препарат С (т.е. это была самая первая свинья из использовавшихся в экспериментах). Применение препарата начиналось в 0 минут и продолжалось 6 минут. Период, за который усреднялись дифференциалы, показан прямыми линиями.

Фиг.5 - график влияния лечения на время реакции вздрагивания после введения теплового зонда.

Фиг.6 - график влияния доз морфина 1,35; 2,7 и 5,4 мг/кг в составе ТРМ-01/М на замедление отдергивания лапы; испытания проводились в период до 8 часов.

Примеры осуществления изобретения.

Ниже мы описываем различные варианты и аспекты изобретения на конкретных примерах, не носящих ограничительного характера.

Пример 1

В этом примере исследуется чрескожное введение свиньям атропина в составе, соответствующем изобретению. Конкретнее, исследуется воздействие проникновения через кожу атропина, нанесенного в виде геля, на частоту сердечных сокращений у свиней.

Методы и материалы

Атропин (20 мг/кг) при испытаниях применялся в составе указанных ниже базовых кремов. Помимо компонентов, перечисленных ниже, все кремы содержали следующее: 12% трехпроцентного раствора наполнителя Ultrez-10 Carbomer, 0,25% триэтаноламина, 0,1% консерванта Surcide DMDMH и деионизированную воду, которая дополняла до 100%.

Композиции F, Н и J в комбинации с атропином дают состав, соответствующий изобретению. Композиции В, D и Е дают составы, соответствующие прежнему уровню техники, а композиции А, С и I иллюстрируют влияние наполнителей лекарств.

Код	Композиция
А	1,27% препарата Deriphat 160
В	7,5% 40-процентного динатрийлаурилиминодипропионатмонотокоферилфосфата и лаурилиминодипропионатдитокоферилфосфата
С	0,77% аргинина
D	7,5% 40-процентного аргининмонотокоферилфосфата и аргининдитокоферилфосфата
Е	7,5% 40-процентного аргининмонотокоферилфосфата
F	3% монотокоферилфосфата
G	3% монотокоферилфосфата и дитокоферилфосфата
Н	7,5% динатрийлаурилиминодипропионатмонотокоферилфосфата
I	1,5% триэтаноламина
J	токоферилфосфат и дитокоферилфосфат

В данном эксперименте использовались десять самцов гибридных (породы Крупная белая × Лендрейс) свиней (начальный средний вес 51,5 кг, конечный средний вес 61,0 кг). За четыре дня до исследования их взвесили и разместили случайным образом в отдельные клетки (1,75 м × 0,65 м) в экспериментальном блоке на период акклиматизации. Во время этого периода щетину на спинах свиней остригли машинкой для стрижки животных (фирма Oster - США), а затем регулярно брили обычной человеческой электробритвой (Philishave HQ5041 - Philips Aust Pty Ltd). На грудную клетку свиней надели эластичные ремни, чтобы они привыкли носить мониторы сердечного ритма. В начале эксперимента отобрали десять свиней, которые лучше всех адаптировались к окружающей обстановке и регулярному обращению с ними, и разместили их так, чтобы они не находились в соседних клетках. Такое физическое разделение свиней было необходимо во избежание конфликта между сигналами мониторов сердечного ритма, которые работали на одной и той же частоте. Эти десять свиней были разделены на две группы по пять животных (нечетные и четные номера), которые использовались в эксперименте попеременно, через день.

Таким образом, за два последовательных дня лечения проводилось повторение эксперимента. При каждом повторении эксперимента десять свиней случайным образом относились к одной из десяти групп лечения, так что каждая свинья использовалась для регистрации данных в пяти случаях, и каждый вид лечения применялся пять раз.

В каждый день измерений примерно в 08:00 пять свиней, участвовавших в эксперименте, взвешивали, надевали на них мониторы сердечного ритма и начинали регистрацию частоты сердечных сокращений с интервалами в 1 минуту. Для снятия данных о частоте сердечных сокращений использовались предназначенные для людей мониторы сердечного ритма (Polar Sport Tester РЕ4000 - Polar Electro, Финляндия). Грудные ремни с встроенными датчиками и передающими устройствами охватывали грудную клетку свиней сразу за передними ногами. На ремни в области контакта с датчиком был нанесен ультразвуковой гель (Virbac Aust Pty Ltd), обеспечивавший получение хорошего сигнала ритма сердечных сокращений. Второй ремень из эластика шириной 100 мм с "липучкой" накладывался на передающий ремень. Он защищал передающий ремень от физических повреждений и имел карман, куда помещался записывающий блок монитора (похожий на ручные часы) на период регистрации сигнала. Затем на спине у свиней выбривали электробритвой участок, где с помощью шаблона и нестирающегося маркера размечали прямоугольную зону нанесения препарата площадью 172,5 см² (75×230 мм). После этого животным давали корм в расчете 100 г/кг живого веса ^0.75 (например, для свиньи весом 55 кг=2020 г/день). Нанесение лекарства начиналось не раньше чем через час после начала регистрации частоты сердечных сокращений. Три работника в резиновых перчатках наносили каждый из испытываемых составов шприцами по 5 мл. При этом работник втирал состав в кожу свиньи, в то время как его помощник направлял на область нанесения теплый воздух из электрического фена для волос. Втирание прекращали приблизительно через 8-10 минут, когда поверхность кожи становилась липкой на ощупь. Затем на область нанесения состава накладывали три (10×12 см) прозрачные повязки (Tegadenn - 3М Health Care, США). После нанесения лекарства свиней оставляли в покое на оставшиеся 6-7 часов периода регистрации. Шприцы и перчатки, использовавшиеся при нанесении, взвешивали до и после нанесения для точного вычисления доз, которые фактически получили животные. По завершении периода нанесения мониторы сердечного ритма и прозрачные повязки снимали, а область нанесения лекарства промывали теплой водой с небольшим количеством жидкого средства для мытья рук.

Результаты исследований приведены в таблицах

Таблица 1.
Влияние различных препаратов с атропином на среднюю частоту сердечных сокращений за 60-минутные периоды
	А	В	С	D	Е	F	G	Н	I	J	кэд*	2
Частота сердечных сокращений
-60-0 мин	148	147	148	154	148	152	151	149	150	146	5,52	0,916
0-60 мин	173	155	176	155	165	162	180	170	155	154	9,33	0,007
60-120 мин	186	170	184	169	170	175	196	190	164	165	10,91	0,011
120-180 мин	161	156	162	154	148	165	168	171	144	153	10,46	0,124
180-240 мин	145	148	146	149	139	156	152	164	144	149	9,87	0,353
240-300 мин	144	146	150	142	147	147	146	155	139	136	7,93	0,471
300-360 мин	143	142	144	131	137	142	147	150	135	136	7,60	0,271
Разность по сравнению с базисной линией (ударов/мин)
0-60 мин	24,2	8,7	28,5	1,1	16,1	10,3	30,7	20,0	4,9	7,1	10,41	0,021
60-120 мин	37,8	22,8	35,6	14,1	21,7	22,6	46,8	40,9	13,2	19,0	12,58	0,045
120-180 мин	13,0	8,9	13,2	-1,4	-0,8	12,8	20,1	21,2	-6,8	8,0	11,71	0,196
*кожно-эритемная доза

Таблица 3.
Влияние различных препаратов базового крема на среднюю частоту сердечных сокращений за 60-минутные периоды
	А	В	С	D	E	F	G	Н	I	J	кэд	2
Частота сердечных сокращений (ударов/мин)
-60-0 мин	146	147	147	143	145	127	145	135	124	132	11,1	0,283
0-60 мин	139	140	129	144	138	123	142	120	123	128	10,7	0,141
60-120 мин	125	132	124	137	134	122	139	120	120	132	10,9	0,587
120-180 мин	128	126	126	131	135	119	130	125	119	124	6,7	<0,001
180-240 мин	125	121	132	134	129	121	132	122	114	122	8,7	0,358
240-300 мин	137	122	130	132	120	112	139	130	121	122	9,0	0,040
300-360 мин	131	120	132	127	116	110	134	126	110	125	6,0	<0,001
Разность по сравнению с базисной линией (ударов/мин)
0-60 мин	-4,4	-5,1	-16,5	1,4	-6,6	-6,3	-2,7	-12,5	-0,9	-5,8	6,16	0,162
60-120 мин	-16,7	-15,3	-20,1	-3,8	-10,3	-7,0	-6,5	-13,7	-5,5	-4,4	11,44	0,708
120-180 мин	-15,0	-16,0	-21,1	-9,9	-9,8	-9,8	-15,8	-8,3	-4,1	-8,6	12,62	0,971

Обсуждение и выводы.

Эти данные показывают, что чрескожное применение атропина увеличивает частоту сердечных сокращений у свиньи, причем максимум имеет место примерно через 60 минут после нанесения средства. Данные показывают также, что базовые кремы сами по себе не увеличивают частоту сердечных сокращений и что эффект препаратов обусловлен только атропином.

Препарат G, содержащий смесь токоферилфосфата и дитокоферилфосфата, обеспечивает наилучшую систему доставки для атропина. При его использовании частота сердечных сокращений увеличивалась и оставалась устойчивой в течение более долгих периодов, чем при использовании других препаратов. Это показано в таблице 1, где под заглавием "Разность по сравнению с базисной линией" величины в периоды 0-60 и 60-120 мин являются самыми высокими для препарата G. Таблица 1 показывает, что препарат G имеет устойчивую более высокую эффективность, чем у препаратов с той же концентрацией атропина, содержащих лаурилиминодипропионаттокоферилфосфаты.

Оценка данных, приведенная в таблице 2, говорит об устойчивой повышенной эффективности состава G по сравнению с составом Н в отношении логарифма пиковой частоты сокращений, логарифма времени до пика и, что еще более важно, логарифма восходящего наклона и логарифма нисходящего наклона.

Кроме того, состав, соответствующий изобретению, не вызывал воспаления; таким образом, представляется, что он может длительно контактировать с кожей, не раздражая ее.

Пример 2.

В данном примере исследовался эффект чрескожного введения морфина свиньям. Кожа свиней имеет те же свойства, что и человеческая, поэтому свинья является отличной моделью для изучения чрескожной доставки лекарств.

Целью данного исследования была оценка уровня обезболивания, который измерялся по задержке реакции, а именно вздрагивания хвоста, на источник тепла (62°С), помещенного на крестец, после чрескожного введения свиньям морфина.

Данные испытаний на вздрагивание анализировались с помощью программы REML (Остаточное максимальное подобие), где лечение и время рассматривались как фиксированная модель, а свинья, повторный эксперимент и время реакции на временном нуле - как вероятностная модель. Первоначально данные анализировались необработанными, но поскольку имелись некоторые смещенные данные на время через 6 часов, для них затем были взяты логарифмы для анализа. Оба способа анализа дали в основном одинаковую интерпретацию данных.

Испытывались следующие составы:

Код	Состав
AGM	Морфин в составе G, описанном в примере 1.
AG	Состав G без морфина.
АНМ	Морфин в составе Н, описанном в примере 1.
АН	Состав Н без морфина.

В целом время реакции вздрагивания для свиней, которым был введен препарат AGM, было больше, чем после введения любого из других препаратов (2,63; 2,88; 4,82 и 3,17 секунд для препаратов AG, АН, AGM и АНМ, таблица 4). Интересно, что время реакции было наибольшим через 6 часов после нанесения препарата (фиг.5), что говорит об устойчивом эффекте, особенно по сравнению с контролем AG. В этом контексте результат испытаний на реакцию вздрагивания у свиней, получивших AGM, через 6 часов был на 133% лучше по сравнению со свиньями, получившими AG. Есть свидетельство, что препарат АНМ давал большее время реакции через 2 часа после нанесения по сравнению с контролем АН, но этот результат не был устойчивым. АНМ не обеспечивал устойчивых результатов, которые были получены с AGM.

Итак, данные демонстрируют, что чрескожное введение морфина в составе, соответствующем изобретению (AGM), обеспечивает быстрое и устойчивое обезболивание, измерявшееся как задержка реакции (вздрагивания хвоста) на приложение тепла в течение от 1 до 6 часов. Кроме того, состав, соответствующий изобретению, не вызывал воспаления. Таким образом, представляется, что он может длительно контактировать с кожей, не раздражая ее.

Таблица 4.
Влияние лечения на реакцию вздрагивания хвоста после приложения теплового зонда (секунды)1
Время после нанесения лекарства (час)	Значимость ( 2)
	1	2	4	6	кэд1	Лечение	Время	Леч × Вр
AG	1,83	2,69	3,26	2,75	1,087	<0,001	0,062	0,45
АН	2,10	2,34	3,60	3,50
AGM	3,96	3,40	5,49	6,42
АНМ	2,85	3,87	2,97	3,00
AG	(0,260)	(0,411)	(0,461)	(0,413)	0,0858	0,003	0,011	0,85
АН	(0,313)	(0,335)	(0,465)	(0,438)
AGM	(0,460)	(0,470)	(0,570)	(0,622)
АНМ	(0,410)	(0,466)	(0,440)	(0,458)
1 В скобках даны логарифмированные значения.
2 Стандартная погрешность разности для произведения время × лечение. Для получения эффектов лечения и времени умножить на 0,511 и 0,497 соответственно.

Пример 3.

В данном примере исследуется воздействие различных составов, соответствующих изобретению, на чрескожную доставку морфина крысам по сравнению с контролем, в качестве которого использовался связанный в комплекс токоферилфосфат.

Методика

Животные: Находящиеся в сознании крысы Sprague Dawley (~280 г) n=6 в одной группе.

Состав вводимого чрескожно препарата: Морфин НСl, производитель Glaxo Australia Pty Ltd (номер по каталогу 22284). Из гидрохлорида добавлением карбоната калия был получен морфин свободное основание. Этот процесс выполнялся в университете Монаша (Морфин·НСl нельзя использовать в кремах, поэтому применялось свободное основание).

Морфин (10 мг/кг) применялся в каждом из составов, приведенных в таблице 5. Эффект измерялся по задержке реакции крысы на тепло (отдергивание лапы); допускалось, что эта задержка вызвана действием морфина.

Таблица 5.
Составы с токоферилфосфатами
Ингредиент	Назначение	Vital-ET	TP/T 2P	TPM-01	TPM-01/M
Динатрий-токоферилфосфат	Агенты чрескожной доставки	2,00%	2,00%	2,00%	7,20%
Дитокоферил-фосфат		1,00%	1,00%	1,00%	3,60%
Лаурилдиамино-пропионовая кислота	Комплексообразователь	3,00%	-	-	-
Морфин-НСl USP-NF	Активный ингредиент	-	-	-	5,4%
Ultrez-10 carbomer-3% раствор	Наполнитель	0,36%	0,36%	-	-
Carbomer 934 USP-NF	-	-	-	0,36%	0,36%
Триэтаноламин (троламин) USP	Наполнитель	0,25%	0,25%	0,25%	0,25%
Surcide DMDMH	Консервант	0,10%	0,10%	-	-
Germall 115	Консервант	-	-	-	-
Methylparaben USP-NF, BP	Консервант	0,10%	-	0,10%	0,10%
Очищенная вода USP-NF	Растворитель	до 100%	до 100%	до 100%	до 100%

Базовые гели, использовавшиеся в качестве контролей, содержали все ингредиенты, кроме токоферилфосфата. Препарат Vital ET в этом эксперименте не использовался и приводится здесь для сравнения компонентов Vital ET и состава, соответствующего изобретению.

Метод испытаний:

Использовался подошвенный анальгезиометр, предназначенный для быстрой и эффективной оценки уровня обезболивания у мелких лабораторных животных. Это устройство служит для прикладывания источника тепла (~45°С от инфракрасного света) к задней лапе животного и измерения времени, через которое оно отдернет лапу (задержка отдергивания лапы). Нагревательная пластина обеспечивает постоянную температуру поверхности, которая контролируется встроенным термометром с точностью 0.1°С; имеется также таймер с точностью 0.1 секунды. Животное помещают на нагревательную пластину, окруженную прозрачной акриловой клеткой, и прослеживают реакцию отдергивания лапы. Увеличенное время реакции служит показателем обезболивания.

По меньшей мере, за 24 часа до приложения накладки для чрескожной доставки препарата крысам на заднюю часть спины наносили крем для удаления волос (под анестезией). Находящиеся в сознании крысы Sprague Dawley (~400 граммов) получали морфин в дозе 10 мг морфина·НСl на кг веса тела. Лекарственный состав содержал 10% весовых морфина·HCl, так что крысе весом 0,2 кг наносили 20 мг состава, в которых содержалось 2 мг морфина·HCl. С утра производили одно нанесение препарата, после чего измеряли степень обезболивания в различные моменты времени. Кожу, на которую наносилось лекарство/носитель, затем покрывали повязкой Tegaderm. Все животные проходили тест на обезболивание до и после получения морфина.

Результаты:

На фиг.6 представлены результаты применения каждого из составов. Они демонстрируют увеличение времени реакции, указывающее на обезболивание, в зависимости от дозы. Контрольное испытание, в котором применялся гель с морфином, но без ТРМ, свидетельствует о том, что ТРМ необходим для действия пути чрескожной доставки. Результаты выражаются как изменение времени отдергивания по сравнению с контрольными значениями, измеренными у крыс, получивших неполный состав (т.е. без морфина или без ТРМ), а также со значениями, измеренными в ноль времени у крыс, получавших полный состав, т.е. ТРМ-01/М).

Выводы:

Состав, использовавшийся в этом исследовании, содержал смесь ТР/Т2Р (или ТРМ), морфин·НСl и другие наполнители, перечисленные в таблице 5. Состав не содержал лаурилдиаминопропионовой кислоты.

Фиг.6 демонстрирует четкую реакцию на дозу и устойчивый эффект. Результаты сравнения с 2 типами контроля (то есть контрольный гель, содержащий только базовые наполнители, без морфина и без смеси ТР/Т2Р, и контрольный гель с базовыми наполнителями и морфином, но без ТР/Т2Р) показывают, что морфин доставляется лучше всего, когда в состав входит смесь ТР/Т2Р.

Слово "содержащий" и его формы в том смысле, в каком они используются в данном описании и формуле изобретения, не ограничивают заявляемое изобретение и не исключают различных вариантов и дополнений. Специалистам будут очевидны возможности модификаций и совершенствования изобретения. Такие модификации и улучшения входят в объем данного изобретения.