промышленный способ получения фармакопейного диосмина и его кристаллическая форма (варианты)

Формула изобретения

1. Промышленный способ получения фармакопейного диосмина, включающий удаление нежелательных примесей, отличающийся тем, что диосмин-сырец растворяют в безводном алифатическом спирте в присутствии алкоголята или гидроксида щелочного металла, при этом диосмин переходит в раствор, который отделяют от не растворившихся окрашенных примесей, затем из раствора диосмина отгоняют часть растворителя вместе с легколетучими побочными продуктами, упаренный раствор подкисляют до рН 4÷5,5 и осаждают кристаллы диосмина, которые отделяют от маточного раствора, затем сушат под вакуумом и дополнительно измельчают, при этом получают моногидрат диосмина C₂₈H₃₂O₁₅·H₂ O светло-желтого цвета с чистотой свыше 97%, размером частиц 4 мкм в стабильной кристаллической форме.

2. Способ получения моногидрата диосмина по п.1, отличающийся тем, что в качестве спирта используют предпочтительно изопропанол, более предпочтительно этанол, еще более предпочтительно метанол или их смеси.

3. Способ получения моногидрата диосмина по п.1, отличающийся тем, что диосмин-сырец растворяют в безводном алифатическом спирте при соотношении 1:5÷1:100.

4. Способ получения моногидрата диосмина по п.1, отличающийся тем, что диосмин-сырец растворяют в присутствии алкоголята или гидроксида щелочного металла, взятого в количестве 1÷20 моль на 1 моль диосмина.

5. Способ получения моногидрата диосмина по п.1, отличающийся тем, что диосмин растворяют в течение 0,2÷3 ч.

6. Способ получения моногидрата диосмина по п.1, отличающийся тем, что в качестве алкоголята или гидроксида щелочного металла используют алкоголят или гидроксид лития, предпочтительно калия, более предпочтительно натрия или их смеси.

7. Способ получения моногидрата диосмина по п.1, отличающийся тем, что диосмин-сырец растворяют в присутствии метилата натрия.

8. Способ получения моногидрата диосмина по п.1, отличающийся тем, что диосмин-сырец растворяют в присутствии гидроксида калия.

9. Способ получения моногидрата диосмина по п.1, отличающийся тем, что кристаллы моногидрата диосмина измельчают на вихревой мельнице.

10. Способ получения моногидрата диосмина по п.1, отличающийся тем, что кристаллы моногидрата диосмина измельчают на струйной мельнице.

11. Способ получения фармакопейного диосмина, включающий удаление нежелательных примесей, отличающийся тем, что диосмин-сырец растворяют в безводном алифатическом спирте в присутствии алкоголята или гидроксида щелочного металла, при этом диосмин переходит в раствор, который отделяют от не растворившихся окрашенных примесей, затем из раствора диосмина отгоняют часть растворителя вместе с легколетучими побочными продуктами, упаренный раствор подкисляют до рН 4÷5,5 и осаждают кристаллы диосмина, которые отделяют от маточного раствора, содержащего остаточные примеси флавоноидов, выделенные кристаллы диосмина сушат под вакуумом при температуре 40-60°С, измельчают на вихревой мельнице, измельченные кристаллы дополнительно сушат при температуре свыше 110°С в течение 17-30 ч, при этом получают безводный диосмин светло-желтого цвета с чистотой свыше 97% и размером частиц 4 мкм в метастабильной кристаллической форме C₂₈ H₃₂O₁₅.

12. Способ получения безводного диосмина по п.11, отличающийся тем, что в качестве спирта используют предпочтительно изопропанол, более предпочтительно этанол, еще более предпочтительно метанол или их смеси.

13. Способ получения безводного диосмина по п.11, отличающийся тем, что диосмин-сырец растворяют в безводном алифатическом спирте при соотношении 1:5÷1:100.

14. Способ получения безводного диосмина по п.11, отличающийся тем, что диосмин-сырец растворяют в присутствии алкоголята или гидроксида щелочного металла взятого в количестве 1÷20 моль на 1 моль диосмина.

15. Способ получения безводного диосмина по п.11, отличающийся тем, что диосмин растворяют в течение 0,2÷3 ч.

16. Способ получения безводного диосмина по п.11, отличающийся тем, что в качестве алкоголята или гидроксида щелочного металла используют алкоголят или гидроксид лития, предпочтительно калия, более предпочтительно натрия или их смеси.

17. Способ получения безводного диосмина по п.11, отличающийся тем, что диосмин-сырец растворяют в присутствии метилата натрия.

18. Способ получения безводного диосмина по п.11, отличающийся тем, что диосмин-сырец растворяют в присутствии гидроксида калия.

19. Способ получения безводного диосмина по п.11, отличающийся тем, что кристаллы моногидрата диосмина измельчают на вихревой или струйной мельнице.

20. Способ получения безводного диосмина по п.11, отличающийся тем, что измельченные кристаллы диосмина дополнительно сушат при температуре 140°С в течение 24 ч.

21. Кристаллическая форма моногидрата диосмина, характеризующаяся пиками порошковой дифракции рентгеновских лучей при 2 : 12.29; 15.70; 16.32; 19.83; 21.44; 22.47; 22.76; 25.07.

22. Кристаллическая форма моногидрата диосмина по п.21, характеризующаяся параметрами значимых пиков порошковой дифракции рентгеновских лучей:

п/п	Угол 2 (°)	d (Å)	d (±Å)	I/Imax (%)
1	5.30	16.65	0.09	4
2	7.14	12.37	0.08	7
3	7.84	11.27	0.08	7
4	8.14	10.85	0.07	5
5	8.60	10.27	0.07	13
6	11.41	7.75	0.05	5
7	12.29	7.19	0.05	54
8	13.29	6.66	0.04	7
9	13.77	6.43	0.04	21
10	15.70	5.64	0.03	94
11	16.11	5.50	0.03	14
12	16.32	5.43	0.02	35
13	17.26	5.13	0.02	6
14	18.33	4.84	0.02	5
15	18.83	4.71	0.02	23
16	19.44	4.56	0.02	5
17	19.83	4.47	0.02	100
18	20.02	4.43	0.02	15
19	20.95	4.24	0.02	17
20	21.44	4.14	0.02	40
21	22.47	3.95	0.02	57
22	22.76	3.90	0.02	59
23	23.42	3.80	0.02	16
24	24.01	3.70	0.02	27
25	24.42	3.64	0.02	12
26	25.07	3.55	0.02	48
27	26.35	3.38	0.02	20
28	27.79	3.21	0.02	17
29	28.08	3.18	0.02	11
30	28.92	3.08	0.02	19
31	32.13	2.78	0.02	11
32	37.48	2.40	0.02	16

23. Кристаллическая форма моногидрата диосмина по п.21, характеризующаяся порошковой рентгеновской дифрактограммой в соответствии с фиг.1.

24. Кристаллическая форма моногидрата диосмина по п.21, характеризующаяся дериватограммой в соответствии с фиг.3.

25. Кристаллическая форма безводного диосмина, характеризующаяся пиками порошковой дифракции рентгеновских лучей при значениях угла 2 : 12.31; 13.89; 15.68; 16.82; 18.77; 19.86; 21.51; 22.69; 23.76; 24.26; 24.74; 29.03.

26. Кристаллическая форма безводного диосмина по п.25, характеризующаяся параметрами значимых пиков порошковой дифракции рентгеновских лучей:

п/п	Угол 2 (°)	d (Å)	d(±Å)	I/Imax (%)
1	5.39	16.37	0.09	5
2	7.43	11.88	0.08	9
3	7.82	11.30	0.08	6
4	8.39	10.53	0.07	7
5	8.66	10.20	0.07	7
6	11.83	7.47	0.05	3
7	12.31	7.18	0.05	49
8	13.89	6.37	0.04	25
9	15.68	5.65	0.03	80
10	16.82	5.27	0.02	23
11	17.37	5.10	0.02	5
12	18.77	4.72	0.02	29
13	19.86	4.47	0.02	100
14	20.99	4.23	0.02	14
15	21.51	4.13	0.02	29
16	22.08	4.02	0.02	15
17	22.69	3.92	0.02	64
18	23.76	3.74	0.02	22
19	24.26	3.67	0.02	17
20	24.74	3.60	0.02	19
21	25.07	3.55	0.02	19
22	26.01	3.42	0.02	9
23	26.39	3.37	0.02	16
24	27.06	3.29	0.02	7
25	27.89	3.20	0.02	7
26	28.26	3.16	0.02	7
27	28.62	3.12	0.02	7
28	29.03	3.07	0.02	14
29	29.99	2.98	0.02	7
30	30.59	2.92	0.02	4
31	32.95	2.72	0.02	3
32	33.40	2.68	0.02	3
33	34.09	2.63	0.02	5

27. Кристаллическая форма безводного диосмина по п.25, характеризующаяся порошковой рентгеновской дифрактограммой в соответствии с фиг.4.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области фармацевтической химии и касается фармацевтического препарата диосмин, который применяют при лечении венозной и лимфатической недостаточности нижних конечностей, повышенной проницаемости капилляров, при снятии острого геморроидального приступа, а также может быть использовано для снижения уровня глюкозы в крови.

Изобретение относится к промышленному способу получения фармакопейного диосмина в виде моногидрата химического соединения 7-[[6-O-(6-дезокси-альфа-L-маннопиранозил)-бета-D-глюкопиранозил]окси]-5-гидрокси-2-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-4Н-1-бензопиран-4-она и к его кристаллической форме.

Изобретение относится к промышленному способу получения фармакопейного безводного диосмина и к его кристаллической форме.

Изобретение относится к промышленному способу получения фармакопейного диосмина микронизированного с размером частиц 4 мкм.

Впервые о выделении диосмина из растений, а также о синтезе его из гесперидина, выделенного из кожуры цитрусовых плодов, было опубликовано в журналах: Helv. Chim. Acta. - Vol.8, pp.519-536 (1925); Ber. - 76, 452 (1943).

Диосмин получают из природного флавоноида гесперидина обработкой его галогенами в основной среде с последующей нейтрализацией кислотой до выпадения в осадок целевого продукта. Гесперидин выделяют из кожуры цитрусовых плодов щелочной экстракцией, при этом получают продукт, загрязненный примесями - сопутствующими флавоноидами, такими как изорхойфолин или линарин, имеющими структуру, близкую к гесперидину, и незначительным количеством окрашенных органических соединений. При превращении гесперидина в диосмин получают диосмин-сырец, который также содержит различные примеси, включающие исходные продукты: гесперидин и сопутствующие ему флавоноиды и в незначительных количествах галоген, в свободном или в связанном состоянии, и органические растворители, а также побочные продукты: ацетоизованиллон или диосметин, образующиеся при расщеплении диосмина под воздействием щелочи или кислоты. Диосмин-сырец из-за присутствия даже в незначительных количествах примесей может иметь серый или коричневый цвет, при этом сам диосмин относится к классу флавоноидов и является представителем флавонов, имеющих желтую окраску. На основании многочисленных исследований установлено, что примеси в зависимости от их структуры и количественного содержания значительно влияют на фармакологические свойства лекарственных препаратов, как правило, изменяя их эффективность или вызывая побочное действие. Поэтому фармакопейный диосмин, получаемый из диосмина-сырца, жестко регламентирован по содержанию примесей, определяемых высокоэффективной жидкостной хроматографией и визуально по цвету. Кроме того, для производства готовых лекарственных средств используют диосмин в виде порошка с различной степенью дисперсности.

Известны различные способы получения высокоочищенного диосмина из диосмина-сырца в зависимости от состава примесей.

В патенте СН 602778 заявлен промышленный способ получения диосмина, основанный на бромировании ацетилированного гесперидина бромом с последующим дегалогенированием раствором щелочи и осаждении конечного продукта уксусной кислотой. Получают диосмин-сырец с содержанием остаточного брома 0,5%. Способ предусматривает очистку диосмина-сырца от брома обработкой смесью водной щелочи с метанолом и пиридином, при этом получают диосмин с содержанием остаточного брома 0,07%.

В патенте DE 2740950 превращение гесперидина в диосмин осуществляют йодированием в органическом основном растворителе с отделением фильтрацией побочных продуктов реакции. Согласно способу одновременно проводят дегидройодирование и очистку целевого продукта от примесей растворением йод-производного в водно-метанольной щелочи с последующим подкислением уксусной кислотой.

В патенте ES 465156 превращение гесперидина в диосмин осуществляют йодом в органическом азотсодержащем основном растворителе в водно-щелочной среде. Получают диосмин-сырец с т.пл. 270°С. Способ предусматривает очистку диосмина-сырца растворением в водно-этанольной щелочи, с последующим отделением нерастворимых примесей фильтрацией и подкислением фильтрата уксусной кислотой до выпадения осадка диосмина, который отделяют от раствора, промывая на фильтре теплой водой и метанолом. После очистки получают диосмин с т.пл. 280°С.

В патенте IT 1191620 превращение гесперидина в диосмин осуществляют йодом в апротонном полярном растворителе в присутствии органического основания с последующим разбавлением реакционной смеси водой и кристаллизацией диосмина в присутствии метанола. Получают диосмин с содержанием свободного йода 0,1%, связанного йода 3%, растворителей 0,005%.

В патенте FR 2760015 приведен промышленный способ превращения гесперидина в диосмин обработкой смесью йодида щелочного металла и сильной минеральной кислоты в растворе диметилсульфоксида. Способ предусматривает очистку переосаждением диосмина уксусной кислотой из разбавленного раствора щелочи или морфолина. Получают диосмин с чистотой 86,4%.

В патенте FR 2760016 приведен лабораторный способ превращения гесперидина в диосмин, который осуществляют дегидрированием йодом в чистом пиридине, совмещая стадии йодирования и дегидройодирования. После очистки раствором водной щелочи с уксусной кислотой получают диосмин с чистотой 90%.

В патенте FR 2782518 приведен промышленный способ превращения гесперидина в диосмин обработкой йодом в растворе пиридина с использованием гидроксида или карбоната щелочного или щелочноземельного металла и морфолина. После очистки раствором водной щелочи с последующей нейтрализацией серной кислотой получают диосмин, содержащий менее 0,02% остаточного йода и менее 0,005% пиридина.

В патенте FR 2798932 описывается способ очистки диосмина-сырца, содержащего 0,15% остаточного йода и 0,4% сульфатной золы, металлами. Исходный диосмин-сырец переводят в фенолят растворением в водной щелочи, добавляют порошок цинка, затем отделяют раствор от примесей и осаждают чистый диосмин из раствора разбавленной минеральной кислотой. Получают диосмин с содержанием остаточного йода 0,0075% и сульфатной золы менее 0,1%.

Недостатком приведенных выше патентов является использование водно-щелочных растворов, которые не позволяют полностью удалить сопутствующие природные органические соединения, растворимые или частично растворимые в водно-щелочной среде. При этом, как правило, получают диосмин не соответствующий регламентируемым требованиям по цвету.

В Европейской фармакопее описана субстанция «Диосмин» в виде серовато-желтого или светло-желтого гигроскопичного порошка, содержащего индивидуального соединения C₂₈H₃₂O₁₅ не менее 90% в пересчете на безводное вещество. Однако на рынок фармацевтических субстанций поступают коммерческие образцы диосмина отвечающие требованиям фармакопеи по суммарному содержанию примесей, определяемых высокоэффективной жидкостной хроматографией (не более 10,0%), но не отвечающих при этом требованиям по содержанию окрашенных примесей, которые придают диосмину серую или коричневую окраску.

В заявке PCT/IN2009/00717 приведен способ получения фармакопейно чистого диосмина из гесперидина, который включает обработку гесперидина йодом в пиридине или диметилформамиде в присутствии щелочи с последующей отгонкой растворителя и получение реакционной массы, содержащей диосмин и побочные продукты. Для получения чистого диосмина реакционную массу кипятят в метаноле, при этом основная часть сопутствующих флавоноидов, побочных органических соединений и растворителей переходит в раствор, в осадке остается диосмин, который отделяют от спиртового раствора и получают диосмин-сырец. Очистку диосмина-сырца от примесей осуществляют следующим образом:

а) диосмин-сырец обрабатывают раствором тиосульфата натрия со щелочью, при этом удаляют окрашенные неорганические примеси, включая остаточный свободный йод, из водно-щелочного раствора подкислением осаждают диосмин;

б) диосмин после стадии «а» перекристаллизовывают из водного диметилформамида, при этом удаляют остаточные сопутствующие флавоноиды, которые остаются в маточном растворе диметилформамида;

в) диосмин после стадии «б» растворяют в водной щелочи с последующей отгонкой части воды, при этом вместе с водой удаляют летучие побочные продукты, в упаренный щелочной раствор добавляют воду и древесный уголь, на котором сорбируют остаточные окрашенные неорганические и органические примеси. Очищенный раствор диосмина подкисляют до рН 1,8-4,0, при этом осаждают пастообразный диосмин, который отделяют от маточного раствора, сушат и получают фармакопейный диосмин с чистотой 99,9%.

Недостатком этого способа получения диосмина является многостадийность процесса очистки диосмина-сырца от примесей с использованием разнообразных реагентов.

В последнее время ужесточились требования к фармацевтическим субстанциям со стороны производителей готовых лекарственных препаратов, касающиеся свойств, характеризующих их кристаллическую структуру и гранулометрический состав (размер и форма кристаллов), от которых зависят физико-химические, фармакотехнологические и биофармацевтические свойства субстанций. Изменяя размеры частиц и кристаллическую форму, можно увеличить биодоступность фармацевтической субстанции и сократить эффективную дозу готового лекарственного средства, содержащего данную субстанцию, избежав при этом возникновения нежелательных побочных эффектов при приеме лекарства.

Известно, что диосмин проявляет низкую биодоступность, что приводит к значительному увеличению суточной дозы диосмина и длительному курсу лечения. Для повышения биодоступности диосмина используют микронизированный диосмин, который получают ультразвуковой микронизацией (CONSILIUM MEDICUM. - 2006. V.04. - № 1).

В Европейской фармакопее описана субстанция «Диосмин» в виде гигроскопичного порошка серовато-желтого или светло-желтого цвета. В описании приведена молекулярная формула C₂₈H₃₂O₁₅, то есть безводная форма диосмина, при этом указано допустимое содержание влаги не более 6%. Известно, что безводный гигроскопичный продукт, поглощая воду из воздуха, может превратиться в гидратную форму, что также может привести к изменениям кристаллической структуры, физико-химических и биофармацевтических свойств.

В вышеприведенных способах получения диосмина из гесперидина ничего не сообщается о кристаллической структуре получаемого диосмина, при этом неизвестно, получают ли диосмин в безводной или гидратной форме. В статьях, опубликованных в журнале J. Chem. Soc. - 633 (1956) и J. Chem. Soc. - 4008 (1959), описан кристаллический моногидрат диосмина, выделенный из коры Zanthoxylum avicennae экстракцией петролейным эфиром и метанолом, с последующей 4-кратной перекристаллизацией из водного пиридина с углем. Авторы не приводят описания свойств кристаллической структуры получаемого диосмина, при этом гидратная форма диосмина установлена только на основании результатов элементного анализа.

Основной задачей настоящего изобретения является разработка простого в технологическом исполнении и удобного для промышленного использования способа получения фармакопейного диосмина с чистотой свыше 97% в виде порошка светло-желтого цвета в стабильно воспроизводимой кристаллической форме.

Задачей настоящего изобретения также является определение характеристик кристаллической структуры стабильно воспроизводимой кристаллической формы диосмина.

Поставленная задача решена тем, что в известном промышленном способе получения фармакопейного диосмина из диосмина-сырца удаляют нежелательные примеси следующим образом. Диосмин-сырец растворяют в безводном алифатическом спирте в присутствии алкоголята или гидроксида щелочного металла с последующим отделением спиртового раствора диосмина от не растворившихся окрашенных неорганических и органических примесей, затем из спиртового раствора диосмина отгоняют часть растворителя, при этом удаляют летучие побочные продукты. Упаренный спиртовой раствор диосмина подкисляют до рН 4,0-5,5, при этом выпадают кристаллы диосмина, которые отделяют от маточного раствора, содержащего остаточные сопутствующие флавоноиды. Кристаллы диосмина сушат под вакуумом при температуре 40-60°С и дополнительно измельчают. Получают фармакопейный диосмин светло-желтого цвета с чистотой свыше 97% и размером частиц 4 мкм в стабильно воспроизводимой кристаллической форме.

В результате исследования кристаллической формы диосмина методами порошкового рентгено-структурного анализа (фиг.1, фиг.2) и дифференциально-термического анализа (фиг.3) установлено, что согласно предлагаемому способу получают стабильно воспроизводимую кристаллическую форму моногидрата диосмина С₂₈Н ₃₂О₁₅·Н₂О.

Стабильная кристаллическая форма моногидрата диосмина характеризуется значимыми дифракционными пиками на порошковой рентгеновской дифрактограмме при значениях угла 2 : 12.29; 15.70; 16.32; 19.83; 21.44; 22.47; 22.76; 25.07 (фиг.1).

Изучение дериватограммы кристаллической формы моногидрата диосмина (фиг.3) показало, что при нагревании при температуре до 110°С происходит удаление свободной воды, которая характеризует влажность продукта, что позволяет получить сухой моногидрат диосмина. При дальнейшем повышении температуры до 130°С происходит удаление кристаллизационной воды с эндоэффектом, при этом кристаллическая форма моногидрата диосмина переходит в кристаллическую форму безводного диосмина, который при нормальных условиях самопроизвольно, поглощая влагу из воздуха, превращается в моногидрат. На основании проведенных исследований разработан промышленный способ получения фармакопейного безводного диосмина в стабильно воспроизводимой метастабильной кристаллической форме.

Промышленный способ получения фармакопейного безводного диосмина из диосмина-сырца включает растворение диосмина-сырца в безводном алифатическом спирте в присутствии алкоголята или гидроксида щелочного металла с последующим отделением спиртового раствора диосмина от не растворившихся окрашенных неорганических и органических примесей. Затем из спиртового раствора диосмина отгоняют часть растворителя, при этом удаляют летучие побочные продукты. Упаренный спиртовой раствор диосмина подкисляют до рН 4,0-5,5, при этом выпадают кристаллы диосмина, которые отделяют от маточного раствора, содержащего остаточные сопутствующие флавоноиды. Кристаллы диосмина сушат под вакуумом при температуре 40-60°С и измельчают. Измельченные кристаллы диосмина дополнительно сушат при температуре свыше 110°С и получают фармакопейный безводный диосмин светло-желтого цвета с чистотой свыше 97% и размером частиц 4 мкм в стабильно воспроизводимой кристаллической форме С₂₈Н₃₂О₁₅.

Получают безводный диосмин в виде гигроскопичного порошка, который при нахождении на воздухе в течение 72 часов переходит в стабильную кристаллическую форму моногидрата диосмина, что подтверждено результатами повторных измерений методами порошкового рентгено-структурного анализа и дифференциально-термического анализа. Таким образом, предлагаемым способом получают метастабильную кристаллическую форму безводного диосмина.

Метастабильная кристаллическая форма безводного диосмина характеризуется значимыми дифракционными пиками на порошковой рентгеновской дифрактограмме при значениях угла 2 : 12.31; 13.89; 15.68; 16.82; 18.77; 19.86; 21.51; 22.69; 23.76; 24.26; 24.74; 29.03 (фиг.4).

На фиг.1 показана порошковая рентгеновская дифрактограмма стабильной кристаллической формы моногидрата диосмина в области углов рассеяния при значениях 2 в интервале 4÷50°.

На фиг.2 показана пространственная конформация стабильной кристаллической формы моногидрата диосмина в кристалле.

На фиг.3 показана термогравиметрическая дифференциальная термограмма стабильной кристаллической формы моногидрата диосмина.

На фиг.4 показана порошковая рентгеновская дифрактограмма метастабильной кристаллической формы безводного диосмина в области углов рассеяния при значениях 2 в интервале 4÷50°.

На фиг.5 показана пространственная конформация метастабильной кристаллической формы безводного диосмина в кристалле.

На фиг.6 показана характерная область порошковой рентгеновской дифрактограммы в области углов рассеяния при значениях 2 в интервале 14,5÷17,5°, наложением дифрактограмм образцов стабильной кристаллической формы моногидрата диосмина и метастабильной кристаллической формы безводного диосмина.

Линия 1 - образец стабильной кристаллической формы моногидрата диосмина.

Линия 2 - образец метастабильной кристаллической формы безводного диосмина.

Промышленный способ получения фармакопейного диосмина в стабильно воспроизводимой стабильной кристаллической форме моногидрата диосмина осуществляют растворением диосмина-сырца в безводном алифатическом спирте C₁-C₄ при соотношении 1:5÷1:100 в присутствии алкоголята или гидроксида щелочного металла в количестве 1÷20 моль на 1 моль диосмина в течение 0,2÷3 час. Спиртовой раствор диосмина отделяют от не растворившихся окрашенных неорганических и органических примесей фильтрованием. Затем из раствора частично отгоняют растворитель вместе с легколетучими побочными продуктами и подкисляют упаренный раствор до рН 4÷5,5, при этом осаждают кристаллы диосмина, которые отделяют от маточного раствора, содержащего остаточные примеси диосметина и гесперидина. Выделенные кристаллы сушат под вакуумом при температуре 40-60°С и получают кристаллический продукт, основная масса которого 90%, имеет размер частиц 14 мкм (табл.1). Затем выделенный диосмин дополнительно измельчают на вихревой или струйной мельнице и получают кристаллический порошок светло-желтого цвета с чистотой свыше 97%, основная масса которого ~90%, имеет размер частиц 4 мкм (табл.2).

Таблица 1
Соответствие размеров частиц (D) заданным значениям весовой доли (Р) стабильной кристаллической формы моногидрата диосмина до измельчения
D, мкм	0,51	0,78	1,35	1,68	2,81	4,08	5,35	8,87	13,4	300
Р, %	5	10	20	25	40	50	60	75	90	100

Таблица 2
Соответствие размеров частиц (D) заданным значениям весовой доли (Р) стабильной кристаллической формы моногидрата диосмина после измельчения
D, мкм	0,30	0,40	0,61	0,72	1,05	1,31	1,64	2,25	3,92	300
Р, %	5	10	20	25	40	50	60	75	90	100

Использование безводного алифатического спирта обеспечивает очистку диосмина от нерастворимых примесей, ухудшающих цвет диосмина, к которым относят галогены в свободном или связанном состоянии и другие неорганические и органические соединения, сопутствующие исходному гесперидину.

Использование безводного алифатического спирта способствует быстрому созреванию осадка диосмина, который легко отделяют от раствора. В качестве алифатического спирта C₁-C ₄ используют предпочтительно изопропанол, более предпочтительно этанол, еще более предпочтительно метанол или смеси этих спиртов.

Диосмин-сырец растворяют в алифатическом спирте при соотношении 1:5÷1:100. Уменьшение соотношения менее чем 1:5 приводит к неполному растворению диосмина, а увеличение соотношения свыше 1:100 приводит к растворению помимо диосмина нежелательных примесей.

Диосмин-сырец растворяют в течение 0,2÷3 часов. Уменьшение времени растворения диосмина-сырца менее чем 0,2 часа не позволяет полностью растворить диосмин. При растворении в течение 3 часов диосмин полностью растворяется. При увеличении времени растворения свыше 3 часов в раствор переходят нежелательные примеси.

Использование алкоголята или гидроксида щелочного металла в количестве 1÷20 моль на 1 моль диосмина способствует растворению диосмина в алифатическом спирте. При этом плохо растворимые в этих условиях окрашенные сопутствующие органические соединения, а также связанный галоген, содержащийся в продуктах йодирования диосмина, отделяют от раствора диосмина. Уменьшение количества алкоголята или гидроксида щелочного металла менее 1 моля снижает растворимость диосмина, при значении количества алкоголята или гидроксида щелочного металла 20 моль происходит полное растворение диосмина. В качестве алкоголята щелочного металла используют изопропилат, предпочтительно этилат, более предпочтительно метилат, а в качестве щелочного металла используют литий, более предпочтительно калий, еще более предпочтительно натрий.

Для осаждения диосмина из спиртового раствора добавляют кислоту до рН 4÷5,5, в растворе остаются примеси флавоноидов, в основном диосметин и гесперидин. Снижение значения рН<4 приводит к усиленному образованию диосметина, при этом образуется плохо фильтрующийся осадок диосмина. Увеличение рН>5,5 приводит к неполному осаждению диосмина. В качестве кислоты используют минеральную или органическую кислоту, предпочтительно фосфорную, серную, более предпочтительно соляную, угольную, еще более предпочтительно уксусную кислоту.

Выделенные из раствора кристаллы диосмина сушат под вакуумом при температуре 40-60°С, что обеспечивает удаление свободной воды, характеризующей влажность продукта, и проведение измельчения диосмина на струйной или вихревой мельнице.

Предлагаемый промышленный способ позволяет получить фармакопейный диосмин светло-желтого цвета с чистотой свыше 97% и размером частиц 4 мкм в стабильно воспроизводимой стабильной кристаллической форме моногидрата C₂₈H₃₂O₁₅·H ₂O.

Промышленный способ получения фармакопейного диосмина в стабильно воспроизводимой метастабильной кристаллической форме безводного диосмина осуществляют так же, как и способ получения стабильной кристаллической формы моногидрата диосмина, но дополнительно после измельчения проводят сушку при температуре свыше 110°С, предпочтительно при 140°С в течение 17-30 часов, предпочтительно 24 часа.

Нагревание стабильной кристаллической формы моногидрата диосмина при температуре свыше 110°С обеспечивает удаление кристаллизационной воды с изменением кристаллической решетки. При нагревании до температуры 140°С и выдерживании при этой температуре в течение 17 часов происходит удаление 90% кристаллизационной воды, увеличение времени выдерживания до 24 часов обеспечивает полное удаление кристаллизационной воды. Переход моногидрата диосмина в безводный диосмин установлен на основании анализа порошкограмм кристаллических форм моногидрата и безводного диосмина, полученных в исследуемых интервалах температуры и времени процесса сушки моногидрата диосмина. При этом соотношение гидратной и безводной форм диосмина пропорционально соотношению значимых пиков гидратной и безводной форм диосмина на порошкограмме в области углов рассеяния при значениях 2 в интервале 14,5÷17,5° (фиг.6).

Предлагаемый промышленный способ позволяет получить фармакопейный безводный диосмин формулы C₂₈H₃₂O₁₅ светло-желтого цвета с чистотой свыше 97% и размером частиц 4 мкм в стабильно воспроизводимой метастабильной кристаллической форме.

Полученные предлагаемыми способами образцы стабильной кристаллической формы моногидрата диосмина и метастабильной кристаллической формы безводного диосмина исследованы методом порошковой рентгеновской дифракции. Измерения проведены при следующих условиях: дифрактометр Huber/Guinier G670, CuK ₁-излучение, =1.54059 Å, съемка на просвет в области углов 4-80° 2 , напряжение 45 кВ, ток 35 мА, ширина щели после изогнутого германиевого монохроматора 2 мм, координатный неподвижный детектор в виде пластины, чувствительной к рентгеновскому излучению (IP, Image Plate). Измерения стабильной кристаллической формы моногидрата диосмина проведены в течение 6 часов, а метастабильной кристаллической формы безводного диосмина - в герметичной упаковке в течение 2 часов. Полученные экспериментальные данные обработаны с помощью программного комплекса MRIA.

На основании исследования порошковой рентгеновской дифрактограммы (фиг.1) установлено, что стабильная кристаллическая форма моногидрата диосмина характеризуется значимыми дифракционными пиками на порошковой рентгеновской дифрактограмме при значениях угла 2 : 12.29; 15.70; 16.32; 19.83; 21.44; 22.47; 22.76; 25.07.

Порошковая рентгеновская дифрактограмма стабильной кристаллической формы моногидрата диосмина отражает дифракционные пики, которые характеризуют следующие показатели (табл.3): межплоскостное расстояние (d), углы дифракции (2 ), относительная интенсивность (I/Imax).

Таблица 3
Основные характеристики порошковой рентгеновской дифрактограммы стабильной кристаллической формы моногидрата диосмина
п/п	Угол 2 (°)	d (Å)	d (±Å)	I/Imax (%)
1	5.30	16.65	0.09	4
2	7.14	12.37	0.08	7
3	7.84	11.27	0.08	7
4	8.14	10.85	0.07	5
5	8.60	10.27	0.07	13
6	11.41	7.75	0.05	5
7	12.29	7.19	0.05	54
8	13.29	6.66	0.04	7
9	13.77	6.43	0.04	21
10	15.70	5.64	0.03	94
11	16.11	5.50	0.03	14
12	16.32	5.43	0.02	35
13	17.26	5.13	0.02	6
14	18.33	4.84	0.02	5
15	18.83	4.71	0.02	23
16	19.44	4.56	0.02	5
17	19.83	4.47	0.02	100
18	20.02	4.43	0.02	15
19	20.95	4.24	0.02	17
20	21.44	4.14	0.02	40
21	22.47	3.95	0.02	57
22	22.76	3.90	0.02	59
23	23.42	3.80	0.02	16
24	24.01	3.70	0.02	27
25	24.42	3.64	0.02	12
26	25.07	3.55	0.02	48
27	26.35	3.38	0.02	20
28	27.79	3.21	0.02	17
29	28.08	3.18	0.02	11
30	28.92	3.08	0.02	19
31	32.13	2.78	0.02	11
32	37.48	2.40	0.02	16

На основании исследования порошковой рентгеновской дифрактограммы (фиг.4) установлено, что метастабильная кристаллическая форма безводного диосмина характеризуется значимыми дифракционными пиками на порошковой рентгеновской дифрактограмме при значениях угла 2 : 12.31; 13.89; 15.68; 16.82; 18.77; 19.86; 21.51; 22.69; 23.76; 24.26; 24.74; 29.03.

Порошковая рентгеновская дифрактограмма метастабильной кристаллической формы безводного диосмина включает дифракционные пики, характеризующиеся данными, приведенными в табл.4.

Таблица 4
Основные характеристики порошковой рентгеновской дифрактограммы метастабильной кристаллической формы безводного диосмина
п/п	Угол 2 (°)	d (Å)	d (±Å)	I/Imax (%)
1	5.39	16.37	0.09	5
2	7.43	11.88	0.08	9
3	7.82	11.30	0.08	6
4	8.39	10.53	0.07	7
5	8.66	10.20	0.07	7
6	11.83	7.47	0.05	3
7	12.31	7.18	0.05	49
8	13.89	6.37	0.04	25
9	15.68	5.65	0.03	80
10	16.82	5.27	0.02	23
11	17.37	5.10	0.02	5
12	18.77	4.72	0.02	29
13	19.86	4.47	0.02	100
14	20.99	4.23	0.02	14
15	21.51	4.13	0.02	29
16	22.08	4.02	0.02	15
17	22.69	3.92	0.02	64
18	23.76	3.74	0.02	22
19	24.26	3.67	0.02	17
20	24.74	3.60	0.02	19
21	25.07	3.55	0.02	19
22	26.01	3.42	0.02	9
23	26.39	3.37	0.02	16
24	27.06	3.29	0.02	7
25	27.89	3.20	0.02	7
26	28.26	3.16	0.02	7
27	28.62	3.12	0.02	7
28	29.03	3.07	0.02	14
29	29.99	2.98	0.02	7
30	30.59	2.92	0.02	4
31	32.95	2.72	0.02	3
32	33.40	2.68	0.02	3
33	34.09	2.63	0.02	5

Различие между кристаллическими формами моногидрата диосмина и безводного диосмина наглядно иллюстрирует порошковая рентгеновская дифрактограмма в характерной области углов рассеяния при значениях 2 в интервале 14,5÷17,5° (фиг.6), полученная наложением дифрактограмм стабильной кристаллической формы моногидрата диосмина и метастабильной кристаллической формы безводного диосмина.

Различие кристаллических форм моногидрата и безводного диосмина подтверждают значения параметров элементарной ячейки:

для стабильной кристаллической формы моногидрата диосмина: а, b, с (в ангстремах): а=24,77±0,02, b=22,56±0,02, с=4.991±0,005;

для метастабильной кристаллической формы безводного диосмина: а, b, с (в ангстремах): а=23,79±0,02, b=22,58±0,02, с=4.934±0,005.

В соответствии с наблюдаемыми значениями кристаллографических параметров установлено, что кристаллические структуры стабильной кристаллической формы моногидрата диосмина и метастабильной кристаллической формы безводного диосмина относятся к ромбическому типу.

Идентификация кристаллических форм диосмина проведена на основании наблюдаемых значений основных кристаллографических параметров: координат атомов (а, b, с) и расстояний (а) между кристаллографическими плоскостями (табл.5, табл.6).

Таблица 5
Кристаллографические параметры стабильной кристаллической формы моногидрата диосмина
Формула	C28 H32O15·H2O
Сингония	Ромбическая
Пр. гр.	Р21 2121
а (Å)	24.77(2)
b (Å)	22.56(2)
с (Å)	4.991(7)
V (Å3)	2745(2)
Z	4
Dx (г/см3)	1.516
Излучение, длина волны (Å)	CuKa1, 1.54059
Порошкограмма: 2 min - 2 max, шаг измерений (°)	5.00-80.00, 0.01
Rp	0.0113
Rwp	0.0156
Rexp	0.0101
2	2.345
где Пр. гр. - пространственная группа симметрии;
V - объем элементарной ячейки;
Z - число молекул в элементарной ячейке;
Dx - рентгеновская плотность;
Rp, Rwp, Rexp - факторы недостоверности.

Таблица 6
Кристаллографические параметры метастабильной кристаллической формы безводного диосмина
Формула	C28 H32O15
Сингония	Ромбическая
Пр. гр.	P212121
а (Å)	23.79(2)
b (Å)	22.58(2)
с (Å)	4.934(7)
V (Å3)	2651(3)
Z	4
Dx (г/см3)	1.525
Излучение, длина волны (Å)	CuKa1, 1.54059
Порошкограмма: 2 min - 2 max, шаг измерений (°)	5.00-80.00, 0.01
Rp	0.0168
Rwp	0.0211
Rexp	0.0135
2	2.910

На основании данных координат и параметров изотропных тепловых колебаний неводородных атомов (табл.7) определена пространственная конформация стабильной кристаллической формы моногидрата диосмина в кристалле (фиг.2).

Таблица 7
Параметры изотропных тепловых колебаний неводородных атомов стабильной кристаллической формы моногидрата диосмина
Атом	x	y	z	Uiso, Å-2
O1	-0.0770(3)	0.2289(4)	0.039(2)	0.062(3)
С2	-0.1139(5)	0.2715(6)	0.106(3)	0.064(5)
С3	-0.1039(5)	0.3129(6)	0.304(3)	0.074(5)
С4	-0.0542(5)	0.3121(6)	0.458(3)	0.075(5)
С5	0.0367(4)	0.2632(6)	0.500(3)	0.058(5)
С6	0.0724(5)	0.2185(6)	0.420(3)	0.075(6)
С7	0.0558(5)	0.1774(5)	0.222(3)	0.066(5)
С8	0.0054(5)	0.1806(6)	0.093(3)	0.075(6)
С9	-0.0289(5)	0.2257(6)	0.176(3)	0.058(5)
C10	-0.0147(5)	0.2683(5)	0.371(3)	0.054(5)
С11	-0.1623(5)	0.2672(6)	-0.065(3)	0.070(5)
С12	-0.1989(5)	0.3150(6)	-0.078(3)	0.066(5)
С13	-0.2423(5)	0.3128(6)	-0.257(3)	0.070(5)
С14	-0.2507(5)	0.2620(6)	-0.422(3)	0.074(6)
С15	-0.2133(5)	0.2157(6)	-0.418(3)	0.060(5)
С16	-0.1697(5)	0.2180(6)	-0.239(3)	0.073(5)
O17	0.0945(3)	0.1366(3)	0.1477(18)	0.054(3)
С18	0.0863(5)	0.1008(6)	-0.082(3)	0.059(5)
С19	0.1402(5)	0.0689(6)	-0.132(3)	0.063(5)
С20	0.1326(5)	0.0208(6)	-0.348(3)	0.058(5)
С21	0.0847(5)	-0.0192(6)	-0.286(3)	0.060(5)
С22	0.0340(4)	0.0187(6)	-0.241(3)	0.051(5)
O23	0.0447(3)	0.0592(4)	-0.0185(19)	0.059(3)
С24	-0.0151(6)	-0.0174(6)	-0.155(3)	0.061(5)
O25	-0.0601(3)	0.0200(3)	-0.0867(19)	0.048(3)
С26	-0.0743(5)	0.0237(6)	0.193(3)	0.056(5)
С27	-0.1235(5)	0.0652(6)	0.212(4)	0.079(6)
С28	-0.1744(5)	0.0334(6)	0.111(3)	0.070(6)
С29	-0.1809(5)	-0.0250(6)	0.263(4)	0.072(5)
С30	-0.1309(5)	-0.0636(6)	0.205(3)	0.055(5)
O31	-0.0842(3)	-0.0328(4)	0.310(2)	0.065(3)
O32	-0.2765(3)	0.3600(3)	-0.273(2)	0.058(3)
O33	-0.2936(3)	0.2671(3)	-0.5989(19)	0.052(3)
С34	-0.3006(5)	0.2197(5)	-0.793(3)	0.055(5)
O35	-0.0431(3)	0.3490(3)	0.6435(19)	0.058(3)
O36	0.0505(3)	0.3023(4)	0.6926(18)	0.064(3)
O37	0.1819(3)	0.1090(3)	-0.219(2)	0.061(3)
O38	0.1803(3)	-0.0149(3)	-0.365(2)	0.059(3)
O39	0.0763(3)	-0.0606(4)	-0.5020(19)	0.055(3)
O40	-0.1300(3)	0.0816(4)	0.4922(19)	0.057(3)
O41	-0.2198(3)	0.0717(3)	0.160(2)	0.063(3)
O42	-0.2299(3)	-0.0522(3)	0.166(2)	0.060(3)
С43	-0.1343(5)	-0.1239(6)	0.342(3)	0.056(5)
O44	0.2111(3)	-0.0581(3)	0.1433(19)	0.052(3)

Неводородные атомы представлены сферами смещений 50% вероятности.

На основании данных координат и параметров изотропных тепловых колебаний неводородных атомов (табл.8) определена пространственная конформация метастабильной кристаллической формы безводного диосмина в кристалле (фиг.5). В данном случае для неводородных атомов получен один и тот же параметр изотропных тепловых колебаний U_iso, который имеет значение 0.064(7) Å^-2 .

Таблица 8
Параметры изотропных тепловых колебаний неводородных атомов метастабильной кристаллической формы безводного диосмина
Атом	х	y	z
O1	-0.0635(6)	0.2258(6)	0.001(3)
С2	-0.1010(8)	0.2697(9)	0.058(5)
С3	-0.0919(8)	0.3090(8)	0.265(5)
С4	-0.0409(9)	0.3047(8)	0.425(5)
С5	0.0485(8)	0.2493(8)	0.508(5)
С6	0.0845(8)	0.2032(8)	0.436(5)
С7	0.0696(8)	0.1648(8)	0.225(5)
С8	0.0196(8)	0.1711(9)	0.076(5)
С9	-0.0144(8)	0.2193(9)	0.144(6)
C10	-0.0020(8)	0.2580(9)	0.357(5)
С11	-0.1494(8)	0.2656(8)	-0.126(5)
С12	-0.1854(9)	0.3142(8)	-0.159(5)
С13	-0.2296(8)	0.3114(7)	-0.340(6)
С14	-0.2386(8)	0.2604(7)	-0.499(5)
С15	-0.2047(8)	0.2103(8)	-0.464(5)
С16	-0.1603(9)	0.2140(8)	-0.277(5)
O17	0.1101(5)	0.1225(5)	0.172(4)
С18	0.1027(8)	0.0867(8)	-0.059(5)
С19	0.1574(9)	0.0521(8)	-0.100(5)
С20	0.1499(8)	0.0042(8)	-0.318(5)
С21	0.0993(8)	-0.0344(9)	-0.250(5)
С22	0.0477(8)	0.0060(8)	-0.222(5)
O23	0.0576(6)	0.0469(5)	-0.001(3)
С24	-0.0052(8)	-0.0271(9)	-0.138(5)
O25	-0.0499(6)	0.0133(5)	-0.075(3)
С26	-0.0663(8)	0.0182(8)	0.201(5)
С27	-0.1169(7)	0.0613(8)	0.201(5)
С28	-0.1705(8)	0.0292(8)	0.104(5)
С29	-0.1787(7)	-0.0283(9)	0.264(5)
С30	-0.1261(7)	-0.0651(8)	0.214(5)
O31	-0.0789(5)	-0.0349(5)	0.338(3)
O32	-0.2645(5)	0.3586(5)	-0.362(3)
O33	-0.2840(5)	0.2645(5)	-0.666(3)
С34	-0.2913(8)	0.2162(8)	-0.848(5)
С43	-0.1187(8)	-0.1279(8)	0.280(5)
O35	-0.0336(5)	0.3389(5)	0.625(3)
O36	0.0599(6)	0.2866(5)	0.712(3)
O37	0.2000(5)	0.0919(5)	-0.189(3)
O38	0.1981(5)	-0.0338(5)	-0.320(3)
O39	0.0900(5)	-0.0794(5)	-0.446(3)
O40	-0.1272(5)	0.0794(5)	0.474(3)
O41	-0.2142(5)	0.0715(5)	0.157(3)
O42	-0.2293(6)	-0.0569(5)	0.170(3)
С43	-0.1187(8)	-0.1279(8)	0.280(5)

Неводородные атомы представлены сферами смещений 50% вероятности.

Приведенные ниже примеры иллюстрируют данное изобретение, но не ограничивают его.

Пример 1

4 кг диосмина-сырца коричневого цвета, содержащего 96,8% диосмина и окрашенные примеси, суспендируют в 150 л метилового спирта и добавляют 4,7 кг метилата натрия в течение 20 минут. При этом диосмин переходит в спиртовой раствор, который отделяют от не растворившихся окрашенных неорганических и органических примесей фильтрацией с промывкой на фильтре спиртом и водой. Из спиртового раствора частично отгоняют растворитель и в упаренный раствор добавляют уксусную кислоту до рН ~5,5, при этом выпадают кристаллы диосмина, которые отделяют от маточного раствора, содержащего примеси: диосметин, гесперидин, ацетоизованиллон, 6-йододиосмин и изорхойфолин. Затем кристаллы сушат при температуре 60°С под вакуумом в течение 3 часов и измельчают на вихревой мельнице. Получают 3,4 кг моногидрата диосмина в стабильной кристаллической форме светло-желтого цвета с чистотой 98,9%, размером частиц 4 мкм, т.пл. 284°С (с разл.).

Пример 2

4 кг диосмина-сырца коричневого цвета, содержащего 96,8% диосмина и окрашенные примеси, добавляют к раствору 4,5 кг гидроксида натрия в 300 л этилового спирта и перемешивают в течение 2 часов. При этом диосмин переходит в спиртовой раствор, который фильтруют от не растворившихся окрашенных неорганических и органических примесей с промывкой на фильтре водным спиртом. Из спиртового раствора частично отгоняют растворитель и в упаренный раствор добавляют соляную кислоту до рН ~4, при этом выпадают кристаллы диосмина, которые отделяют от маточного раствора. Затем кристаллы сушат при температуре 40°С под вакуумом в течение 3 часов и измельчают на струйной мельнице. Получают 3,4 кг моногидрата диосмина светло-желтого цвета с чистотой 98,6%, размером частиц 4 мкм, т.пл. 282-284°С (с разл.).

Пример 3

1 кг диосмина-сырца коричневого цвета, содержащего 96,8% диосмина и окрашенные примеси, добавляют к раствору 1 кг гидроксида калия в 100 л изопропилового спирта и выдерживают при перемешивании в течение 3 часов. Спиртовой раствор фильтруют от не растворившихся окрашенных неорганических и органических примесей. Из спиртового раствора частично отгоняют растворитель и в упаренный раствор добавляют серную кислоту до выпадения кристаллов диосмина при рН ~4,5. Затем кристаллы отделяют от маточного раствора, сушат при температуре 60°С под вакуумом в течение 3 часов и измельчают на струйной мельнице. Получают 0,8 кг моногидрата диосмина светло-желтого цвета с чистотой 98,2%, размером частиц 4 мкм, т.пл. 280-282°С (разл.).

Пример 4

1 кг диосмина-сырца коричневого цвета, содержащего 96,8% диосмина и окрашенные примеси, добавляют к раствору 1 кг гидроксида калия в 100 л смеси изопропилового и метилового спиртов (1:1) и выдерживают при перемешивании в течение 3 часов. Спиртовой раствор фильтруют от не растворившихся окрашенных неорганических и органических примесей. Из спиртового раствора частично отгоняют растворитель и в упаренный раствор добавляют фосфорную кислоту до выпадения кристаллов диосмина при рН ~4,5. Затем кристаллы отделяют от маточного раствора, сушат при температуре 60°С под вакуумом в течение 3 часов и измельчают на струйной мельнице. Получают 0,8 кг моногидрата диосмина светло-желтого цвета с чистотой 98,2%, размером частиц 4 мкм, т.пл. 280-282°С (разл.).

Пример 5

1.0 кг стабильной кристаллической формы моногидрата диосмина, полученный в примерах 1-3, выдерживают при температуре 140°С в течение 24 часов и затем просеивают через сито. Получают 0.95 кг метастабильной кристаллической формы безводного диосмина. Характеристика готового продукта представлена на фиг.4-6. Полученный продукт необходимо хранить в таре, защищенной от влаги воздуха.