способ получения натриевой соли 3-сульфата аллобетулина

Формула изобретения

Способ получения натриевой соли 3-сульфата аллобетулина формулы:



отличающийся тем, что сульфатирование аллобетулина проводят в N,N-диметилформамиде комплексом SO₃-диметилформамид при температуре 30-50°C в течение 4-5 ч с последующей обработкой 75%-ным водно-этанольным раствором, содержащим 4% гидроксида натрия до рН 7-8 и выделением целевого продукта.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается способа получения натриевой соли 3-сульфата аллобетулина формулы (I), представляющего интерес для фармацевтической промышленности и медицины в качестве ингибитора комплемента.

Известно, что тритерпеноиды: бетулин, аллобетулин, бетулиновая и олеаноловая кислоты и многие их производные проявляют высокую и разнообразную биологическую активность. Однако низкая растворимость этих веществ в большинстве растворителей и нерастворимость в воде препятствуют практическому применению и изучению их биологической активности.

Известно, что сульфатированные производные таких тритерпеноидов, как бетулин, олеаноловая, эхиноцистовая и бетулиновая кислоты, хорошо растворимы в воде и проявляют высокую противоопухолевую и противовоспалительную активность и являются ингибиторами комплемента [Bureeva S., Andia-Pravdivy J., Symon A., Bichucher A., Moskaleva V., Popenko V., Shpak A., Shvets V., Kozlov L., Kaplun A. Selective inhibition of the interaction of C1q with immunoglobulins and the classical pathway of the complement activation by steroids and triterpenoids sulfates // J. Bioorganic and medicinal chemistry. - 2007. - Vol.15, № 10. - P.3489-3498; RU 2243233, опубл. 27.12.2004; Гришковец В.И. Синтез сульфатов тритерпеноидов с использованием комплекса SO₃-диметилсульфоксид // Химия природных соединений. 1999. № 1. С.91-93].

Известен способ выделения некоторых биологически активных сульфатированных производных бетулина из листьев Schefflera octophylla [Kitajima J., Shindo M., Tanaka Y. Two new triterpenoid sulfates from the leaves of schefflera octophylla // Chem. Pharm. Bull. 1990. Vol.38, № 3. P.714-716].

Однако низкое содержание сульфатированных тритерпеноидов в листьях Schefflera octophylla, сложность их выделения и разделения на индивидуальные соединения ограничивает их использование в практической медицине.

Известны способы сульфатирования таких тритерпеноидов, как бетулин и бетулиновая кислота [RU 2243233, опубл. 27.12.2004]. К смеси серной кислоты и уксусного ангидрида в пиридине при температуре от 18 до 90°С прибавляют тритерпеноид и перемешивают в течение 30-60 минут. Затем реакционную смесь нейтрализуют, осадок неорганических солей отфильтровывают, раствор упаривают досуха. Полученные кристаллы сульфата тритерпеноида промывают водой и сушат.

К недостаткам данного способа следует отнести использование токсичных реагентов: пиридина и труднодоступного уксусного ангидрида.

Наиболее близким по назначению к предлагаемому изобретению является способ получения 3-сульфатов олеаноловой, эхиноцистовой и бетулиновой кислот, заключающийся в сульфатировании тритерпеновой кислоты в диметилсульфоксиде комплексом, предварительно приготовленным при взаимодействии жидкого SO₃ с диметилсульфоксидом при комнатной температуре, разбавлении реакционной массы 10-кратным объемом ледяной воды. 3-Сульфат тритерпеновой кислоты извлекают экстрагированием бутанолом. Выделение 3-сульфата тритерпеновой кислоты проводят хроматографически на силикагеле L при элюировании смесью хлороформ-этанол (5:1) насыщенной водой [Гришковец В.И. Синтез сульфатов тритерпеноидов с использованием комплекса SO ₃-диметилсульфоксид // Химия природных соединений. - 1999. - № 1. - С.91-93].

Недостатками описанного выше способа являются сложность технологического исполнения, связанная с получением и использованием жидкого SO₃, а также сложный и продолжительный процесс выделения 3-сульфата тритерпеновой кислоты, заключающийся в использовании колоночной хроматографии.

Задача изобретения - синтез новых сульфатированных тритерпеноидов, упрощение процесса получения и расширение арсенала сульфатирующих реагентов для синтеза сульфатированных тритерпеноидов.

Технический результат изобретения - синтез нового 3-сульфата аллобетулина в виде натриевой соли, расширение арсенала сульфатирующих реагентов, упрощение процесса за счет исключения изпользования жидкого SO₃.

Технический результат достигается тем, что в способе получения натриевой соли 3-сульфата аллобетулина согласно изобретению сульфатирование аллобетулина проводят в N,N-диметилформамиде комплексом SO ₃-диметилформамид при температуре 30-50°С в течение 4-5 часов с последующей обработкой 75% водно-этанольным раствором, содержащим 4% гидроксида натрия до рН 7-8, и выделением целевого продукта.

Способ осуществляют следующим образом.

Сначала готовят сульфатирующий комплекс SO₃ -диметилформамид. К N,N-диметилформамиду при интенсивном перемешивании и охлаждении до температуры -5-0°С прибавляют по каплям хлорсульфоновую кислоту. Далее в сульфатирующий комплекс медленно прибавляют аллобетулин, смесь нагревают до 30-50°C и перемешивают при этой температуре в течение 4-5 часов. Затем реакционную массу охлаждают до температуры 10-15°C и при перемешивании нейтрализуют до рН 7-8, прибавляя 75%-ный водно-этанольный раствор, содержащий 4% гидроксида натрия. Выпавшую в осадок неорганическую соль отделяют фильтрованием, фильтрат концентрируют под вакуумом до полного удаления растворителя и получают 3-сульфат аллобетулина в виде натриевой соли.

Состав натриевой соли 3-сульфата аллобетулина подтвержден элементным анализом. Найдено, %: S 5,69; 6,01; C₃₀H₄₉O₅SNa. Вычислено, %: S 5,88. Строение подтверждено ИК и ЯМР ¹³С-спектрами. В ЯМР ¹³С спектре натриевой соли 3-сульфата аллобетулина химический сдвиг сигнала атома углерода С-3 наблюдается в слабом поле при 86,15 м.д. по сравнению с положением его в спектре исходного аллобетулина при 78,26 м.д.

Аллобетулин получен известным способом - нагреванием бетулина в бутаноле в присутствии ортофосфорной кислоты [RU 2174126, опубл. 27.09.2001].

Способ сульфатирования подтверждается конкретным примером.

В трехгорлую колбу объемом 100 мл, снабженную мешалкой, термометром и капельной воронкой, загружают 50 мл N,N-диметилформамида и при интенсивном перемешивании и охлаждении при температуре -5-0°С прибавляют по каплям 1 мл хлорсульфоновой кислоты. После того как вся хлорсульфоновая кислота прибавлена, при перемешивании медленно порциями загружают 4,42 г (0,01 моль) аллобетулина, колбу нагревают на водяной бане до 40°С и поддерживают эту температуру в течение 4 часов. Затем реакционную массу охлаждают до температуры 10-15°С и при перемешивании нейтрализуют до рН 7-8, прибавляя 75%-ный водно-этанольный раствор, содержащий 4% гидроксида натрия. Выпавшую в осадок неорганическую соль отделяют фильтрованием, фильтрат концентрируют под вакуумом до полного удаления растворителя и получают 3-сульфат аллобетулина в виде натриевой соли. Выход продукта составил 5,0 г (92%).

Таким образом, предлагаемый способ позволяет получать новый водорастворимый тритерпеноид - натриевую соль 3-сульфата аллобетулина простым экологичным способом. Кроме того, расширен арсенал сульфатирующих реагентов.