способ стимуляции кишечной флоры

Формула изобретения

1. Применение, по меньшей мере, одного микроорганизма и, по меньшей мере, одного неусваиваемого олигосахарида, включающего галактоолигосахариды, для изготовления композиции для энтерального введения грудному ребенку, рожденному с помощью кесарева сечения, где композиция содержит, по меньшей мере, один вид Bifidobacteria, выбранный из группы, состоящей из Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium adolescentis и Bifidobacterium longum.

2. Применение по п.1, где композиция представляет собой смесь для вскармливания грудного ребенка, рожденного с помощью кесарева сечения.

3. Применение по п.1 или 2, где композицию вводят грудному ребенку, рожденному с помощью кесарева сечения, получающему грудное молоко.

4. Применение по п.1 или 2, где композицию вводят грудному ребенку, рожденному с помощью кесарева сечения, в течение одной недели после рождения.

5. Применение по п.1 или 2, где композиция предназначена для стимулирования развития здоровой кишечной флоры грудного ребенка, рожденного с помощью кесарева сечения.

6. Применение по п.5, где композиция является сухой композицией и сухую композицию смешивают с питательно или фармацевтически приемлемой жидкостью до введения композиции грудному ребенку, рожденному с помощью кесарева сечения.

7. Применение по п.1, где композиция предназначена для стимулирования кишечной флоры грудного ребенка, рожденного с помощью кесарева сечения, введением указанной композиции грудному ребенку в течение 100 ч после рождения.

8. Применение по п.1, где композиция предназначена для стимулирования кишечной флоры грудного ребенка, рожденного с помощью кесарева сечения, ректальным введением указанной композиции грудному ребенку в возрасте менее 3 лет.

9. Способ изготовления детского питания, пригодного для грудного ребенка, рожденного с помощью кесарева сечения, включающий смешивание:

a. грудного молока; и

b. композиции, определенной в п.1.

Описание изобретения к патенту

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к способам вскармливания и к композициям для введения грудным детям, рожденным с помощью кесарева сечения.

Уровень техники, предшествующий изобретению

При создании детского питания для грудных детей в качестве золотого стандарта принимают грудное молоко. Ингредиенты, а именно, полученные не от человека, как правило, комбинируют для того, чтобы имитировать композиционные признаки и физиологическое воздействие грудного молока.

Одним из важнейших аспектов грудного молока является обеспечение энергией и жидкостью грудного ребенка. Помимо обеспечения энергией грудное молоко содержит множество дополнительных компонентов, целью которых является поддержание здоровья грудного ребенка. Например, грудное молоко содержит пребиотическое волокно, которое стимулирует развитие здоровой кишечной флоры. Здоровая кишечная флора оказывает сильное позитивное воздействие на грудного ребенка, такое как снижение частоты возникновения инфекционных заболеваний и укрепление иммунной системы.

Некоторые коммерчески доступные молочные смеси для детского питания содержат ингредиенты, стимулирующие развитие кишечной флоры. Например, смеси для детского питания могут содержать пребиотические волокна или живые пробиотические организмы. Пребиотические волокна, как правило, проходят непереваренными через верхние отделы желудочно-кишечного тракта и избирательно стимулируют рост полезных бактерий в толстой кишке. Живые пробиотические бактерии увеличивают число определенных бактерий в кишечнике.

В ЕР 1105002 описывается пребиотическая углеводная смесь, включающая один или более растворимых олигосахаридов и один или более растворимых полисахаридов, по меньшей мере, с 80 масс.% любого из пребиотиков.

В WO 2005039319 описывается препарат, включающий Bifidobacterium breve и смесь из неусваиваемых углеводов для искусственного вскармливания или частичного грудного вскармливания грудных детей, а также применение его для лечения или предотвращения иммунных расстройств у детей, находящихся на искусственном вскармливании или частичном грудном вскармливании.

Краткое описание изобретения

Как правило, детское питание создают таким образом, чтобы имитировать развитие кишечной флоры грудного ребенка, получающего грудное молоко, подразумевая, что все грудные дети реагируют аналогичным образом на грудное молоко и смеси для детского питания. Однако авторы настоящего изобретения обнаружили, что субпопуляция грудных детей, а именно те дети, которые были рожденным с помощью кесарева сечения, реагирует отличным образом, потому что кишечная флора при рождении была полностью отличной от кишечной флоры грудных детей, прошедших при рождении через родовой канал. А именно, профиль и содержание видов Bifidobacteria у грудных детей, рожденных с помощью кесарева сечения, отличается от профиля и содержания видов Bifidobacteria в кишечнике у грудных детей, прошедших при рождении через родовой канал.

Авторы настоящего изобретения исследовали кишечную флору новорожденных, рожденных с помощью кесарева сечения, и новорожденных, прошедших при рождении через родовой канал. Неожиданно было обнаружено, что существуют значительные различия между этими двумя группами в составе кишечной флоры. А именно, у грудных детей, прошедших при рождении через родовой канал, в кишечнике содержится, по меньшей мере, около трех различных видов Bifidobacteria, в то время как у грудных детей, рожденных с помощью кесарева сечения, отсутствует большинство важных видов Bifidobacteria.

Также было обнаружено, что у грудных детей, рожденных с помощью кесарева сечения, в частности, отсутствуют Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium adolescentis и Bifidobacterium longum. Эти виды присутствовали в флоре большинства грудных детей, прошедших при рождении чрез родовой канал.

Поскольку кишечная флора играет важнейшую роль в развитии грудного ребенка, а именно, в стимуляции иммунной системы и резистентности к инфекциям, то крайне важно стимулировать здоровое развитие кишечной флоры у грудных детей, рожденных с помощью кесарева сечения.

Кроме того, в кишечной флоре новорожденных, рожденных с помощью кесарева сечения, отсутствует биологическое разнообразие. У грудных детей, рожденных с помощью кесарева сечения, был обнаружен только один или два различных вида Bifidobacteria, в то время как в кишечной флоре грудных детей, прошедших при рождении через родовой канал, содержится несколько различных видов Bifidobacteria. Авторы настоящего изобретения полагают, что эти наблюдения указывают на существенный недостаток вариативности видов в желудочно-кишечном тракте у грудных детей, рожденных с помощью кесарева сечения. Биологическое разнообразие очень важно для достижения требуемых физиологических эффектов и оптимальной стимуляции здоровья грудного ребенка.

Natren^® производит пробиотический продукт Life Star^®, который разработан специально для грудных детей и подходит для грудных детей, рожденных с помощью кесарева сечения. Life Star^® производится с Bifidobacterium infantis. Поскольку продукт Life Star^® содержит только один вид Bifidobacteria, его положительное воздействие на грудных детей очень ограничено.

Особенно неожиданным оказалось также наблюдение, что улучшение состояния здоровья грудных детей может быть достигнуто даже в том случае, когда грудные дети находятся на грудном вскармливании. В случае, когда грудные дети были рождены с помощью кесарева сечения, грудное молоко (в большинстве случаев) является наилучшим питанием для них. Однако грудное молоко не дает мгновенного результата в получении кишечной флоры, аналогичной кишечной флоре грудных детей, прошедших при рождении через родовой канал. Кроме того, настоящий способ также был успешно использован для грудных детей, находившихся на грудном вскармливании.

Следовательно, целью настоящего изобретения является, в частности: а) повышение обеспеченности определенными видами кишечной флоры грудных детей, рожденных с помощью кесарева сечения; b) увеличение биологического разнообразия микроорганизмов кишечной флоры; и/или с) стимуляция роста полезных микроорганизмов, а именно, Bifidobacteria.

Следовательно, в одном аспекте настоящее изобретение относится к способу стимуляции здорового развития кишечной флоры грудных детей, рожденных с помощью кесарева сечения, введением композиции, содержащей:

- по меньшей мере, два различных микроорганизма;

- по меньшей мере, один микроорганизм и, по меньшей мере, один неусваиваемый олигосахарид; или

- по меньшей мере, два различных вида Bifidobacteria, подвиды или штаммы.

Микроорганизмы повышают биологическое разнообразие флоры грудных детей, в то время как неусваиваемые олигосахариды стимулируют развитие и рост врожденных и введенных микроорганизмов.

Композиция для введения по настоящему изобретению, предпочтительно, содержит множество различных видов бактерий, предпочтительно, множество видов Bifidobacteria, что в результате приводит к оптимальной стимуляции кишечной флоры грудных детей, рожденных с помощью кесарева сечения.

Детальное описание изобретения

Настоящее изобретение относится к способу вскармливания грудных детей, указанный способ включает энтеральное введение композиции грудному ребенку, рожденному с помощью кесарева сечения, указанная композиция включает: а) по меньшей мере, два различных микроорганизма; или b) по меньшей мере, один микроорганизм и, по меньшей мере, один неусваиваемый олигосахарид; или с) по меньшей мере, два различных вида Bifidobacteria, подвидов или штаммов.

В дополнительном аспекте настоящее изобретение относится к способу стимулирования здоровья грудного ребенка, рожденного с помощью кесарева сечения, включающему введение грудному ребенку не позднее чем через 100 часов после рождения композиции, содержащей микроорганизмы и/или неусваиваемые олигосахариды.

В другом дополнительном аспекте настоящее изобретение относится к способу получения питания для грудных детей, подходящего для грудного ребенка, рожденного с помощью кесарева сечения, включающему смешивание: А) грудного молока; и В) композиции, содержащей: i) по меньшей мере, два различных микроорганизма; или ii) по меньшей мере, один микроорганизм и, по меньшей мере, один неусваиваемый олигосахарид; или iii) по меньшей мере, два различных вида Bifidobacteria, подвиды или штаммы.

В другом дополнительном аспекте настоящее изобретение относится к композиции, включающей, по меньшей мере, четыре вида Bifidobacteria, подвиды или и/или штаммы, выбранных из группы, состоящей из Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium thermophilum, Bifidobacterium gallicum, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium angulatum, Bifidobacterium pseudocatenulatum, Bifidobacterium thermacidophilum и Bifidobacterium longum.

Также настоящее изобретение относится к композиции, включающей от 5 до 25 энергетических % белка; от 25 до 60 энергетических % жира; от 30 до 70 энергетических % углеводов; по меньшей мере, два различных вида Bifidobacteria и, по меньшей мере, один вид Lactobacillus.

Также настоящее изобретение относится к контейнеру с объемом жидкости от 0,5 до 50 мл, содержащему композицию для введения грудному ребенку, включающую, по меньшей мере, два различных микроорганизма; по меньшей мере, один микроорганизм и, по меньшей мере, один неусваиваемый олигосахарид; или, по меньшей мере, два различных вида Bifidobacteria, подвиды или штаммы.

В другом дополнительном аспекте настоящее изобретение относится к способу стимулирования развития здоровой кишечной флоры у грудного ребенка, включающему этапы: А) смешивания I) питательно или фармацевтически приемлемой жидкости; и II) сухой композиции, где сухая композиция II включает, по меньшей мере, два различных микроорганизма и, по меньшей мере, один неусваиваемый олигосахарид; или, по меньшей мере, два различных вида Bifidobacteria, подвиды или штаммы; и В) введение композиции, полученной на этапе а) грудному ребенку, рожденному с помощью кесарева сечения.

Композиция по настоящему изобретению представляют собой предпочтительно питательные и/или фармацевтические композиции, подходящие для введения грудным детям.

Кесарево сечение

Настоящее изобретение относится к энтеральному введению композиции, содержащей микроорганизм, грудным детям, рожденным с помощью кесарева сечения. Кесарево сечение (к-сечение) представляет собой хирургическую процедуру, когда грудного ребенка извлекают через разрез, сделанный в брюшной стенке матери и затем в стенке матки. Кесарево сечение, как правило, проводят в тех случаях, когда оно более безопасно для матери или грудного ребенка, чем прохождение ребенка через родовой канал. В других случаях женщина может выбрать между кесаревым сечением и прохождением ребенка через родовой канал.

Разнообразие

Композиция по настоящему изобретению содержит, по меньшей мере, два различных микроорганизма; или, по меньшей мере, один микроорганизм и, по меньшей мере, один неусваиваемый олигосахарид; или, по меньшей мере, два различных вида Bifidobacteria, подвиды или штаммы. Микроорганизмы предпочтительно представляют собой бактерии и/или дрожжи. Предпочтительно, микроорганизмы по настоящему изобретению являются пробиотиками, то есть, при введении человеку или животному оказывают положительное воздействие на хозяина, улучшая свойства местной микрофлоры. Указанные выше композиции главным образом нацелены на повышение разнообразия и/или количества микроорганизмов в желудочно-кишечном тракте грудного ребенка, рожденного с помощью кесарева сечения. Это оказывает положительное воздействие на грудного ребенка, обеспечивая сильное положительное воздействие на здоровье.

Используемый здесь термин «различные микроорганизмы» относится к микроорганизмам, принадлежащим к различным семействам и/или видам. Предпочтительно различные микроорганизмы представляют собой различные бактерии. Предпочтительно различные микроорганизмы представляют собой различные виды. Например, предпочтительно, композиция по настоящему изобретению включает или содержит Bifidobacterium breve (B. breve) и Bifidobacterium catenulatum (B. catenulatum). B. breve и B. catenulatum здесь рассматриваются, как два различных вида бактерий. Виды бактерий не рассматриваются, как различные, если они представляют собой различные подвиды. Например, у Lactobacillus delbrueckii подвиды delbrueckii и у Lactobacillus delbrueckii подвиды bulgaricus не рассматриваются, как два различных подвида. Композиция по настоящему изобретению содержит, по меньшей мере, два различных микроорганизма, предпочтительно, по меньшей мере, бактерии двух различных видов. Предпочтительно композиция по настоящему изобретению содержит, по меньшей мере, три различных вида, более предпочтительно, по меньшей мере, четыре различных вида. Предпочтительно, использованные микроорганизмы или виды бактерий представляют собой пробиотики.

В одном варианте воплощения настоящего изобретения композиция содержит, по меньшей мере, два различных вида Bifidobacteria, подвиды или штаммы. Композиция по настоящему изобретению предпочтительно включает, по меньшей мере, один, более предпочтительно, по меньшей мере, два, еще более предпочтительно, по меньшей мере, три, наиболее предпочтительно, по меньшей мере, четыре различных штамма Bifidobacterium. Композиция по настоящему изобретению предпочтительно включает, по меньшей мере, один, более предпочтительно, по меньшей мере, два, еще более предпочтительно, по меньшей мере, три, наиболее предпочтительно, по меньшей мере, четыре различных подвида Bifidobacterium. Например, у Bifidobacterium animalis подвиды animalis и у Bifidobacterium animalis подвиды lactis представляют собой различные подвиды. B. Breve M16V и B. Breve R0070 представляют собой различные штаммы.

Микроорганизмы

Предпочтительно композиция по настоящему изобретению содержит, по меньшей мере, один микроорганизм, выбранный из группы, состоящей из молочнокислых бактерий, бацилл и дрожжей, предпочтительно, по меньшей мере, одну молочнокислую бактерию, выбранную из группы, состоящей из Carnobacterium, Enterococcus, Lactobacillus, Leuconostoc, Oenococcus, Pediococcus, Streptococcus, Tetragenococcus, Vagocococcus и Weissella и Bifidobacteria. Композиция по настоящему изобретению предпочтительно включает, по меньшей мере, один, более предпочтительно, по меньшей мере, два, еще более предпочтительно, по меньшей мере, три, наиболее предпочтительно, по меньшей мере, четыре различных микроорганизма.

Предпочтительно композиция по настоящему изобретению включает, по меньшей мере, один вид, выбранный из семейства Bifidobacteria, более предпочтительно, по меньшей мере, два, еще более предпочтительно, по меньшей мере, три, еще более предпочтительно, по меньшей мере, четыре, наиболее предпочтительно, по меньшей мере, пять видов из семейства Bifidobacteria. Bifidobacteria представляет собой грамм положительные, анаэробные, палочковидные бактерии. Виды Bifidobacterium по настоящему изобретению имеют, по меньшей мере, 95% идентичность 16 S рибосомальной последовательности РНК при сравнении со штаммом соответствующих видов Bifidobacterium, более предпочтительно, по меньшей мере, 97% идентичность, как определено в руководстве по этому предмету, например, Sambrook, J., Fritsch, E.F., and Maniatis, T. (1989), Molecular Cloning, A Laboratory Manual, 2^nd ed., Cold Spring Harbor (N.Y.) Laboratory Press. Предпочтительно использованная Bifidobacteria также описана в Scardovi, V. Genus Bifidobacterium. p.1418-p.1434. In: Bergey`s manual of systematic Bacteriology. Vol. 2. Sneath, P.H.A., N.S. Mair, M.E. Sharpe and J.G. Holt (ed.). Baltimore: Williams & Wilkins. 1986.635 p.

Композиция по настоящему изобретению предпочтительно включает, по меньшей мере, один, более предпочтительно, по меньшей мере, два, еще более предпочтительно, по меньшей мере, три, наиболее предпочтительно, по меньшей мере, четыре различных подвида Bifidobacterium, предпочтительно выбранных из группы, состоящей из Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium thermophilum, Bifidobacterium gallicum, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium angulatum, Bifidobacterium pseudocatenulatum, Bifidobacterium thermacidophilum и Bifidobacterium longum.

Более предпочтительно композиция по настоящему изобретению включает, по меньшей мере, один, более предпочтительно, по меньшей мере, два, еще более предпочтительно, по меньшей мере, три, наиболее предпочтительно, по меньшей мере, четыре различных подвида Bifidobacterium, предпочтительно выбранных из группы, состоящей из Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium adolescentis и Bifidobacterium longum. Наиболее предпочтительно композиция по настоящему изобретению содержит Bifidobacterium breve и/или Bifidobacterium catenulatum.

В дополнительном предпочтительном варианте воплощения настоящего изобретения композиция включает, по меньшей мере, один, более предпочтительно, по меньшей мере, два, еще более предпочтительно, по меньшей мере, три, наиболее предпочтительно, по меньшей мере, четыре подвида Bifidobacterium. В другом дополнительном предпочтительном варианте воплощения настоящего изобретения композиция включает, по меньшей мере, один, более предпочтительно, по меньшей мере, два, еще более предпочтительно, по меньшей мере, три, наиболее предпочтительно, по меньшей мере, четыре штамма Bifidobacterium.

В дополнительном предпочтительном варианте воплощения настоящего изобретения композиция содержит молочнокислые бактерии, предпочтительно, по меньшей мере, бактерии, выбранные из группы, состоящей из Lactobacilli, Lactococci и Streptococci. Более предпочтительно композиция по настоящему изобретению содержит, по меньшей мере, одну бактерию, выбранную из группы, состоящей из Lactobacillus plantarum, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus casei, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus lactis, Streptococcus thermophilus и Lactobacillus paracasei. Повышенное биологическое разнообразие дополнительно обладает стимулирующим воздействием на здоровье новорожденного.

Композиция по настоящему изобретению предпочтительно содержит от 10¹ до 10¹³ колониеобразующих единиц (КОЕ) микроорганизмов на грамм сухой массы композиции по настоящему изобретению, предпочтительно, от 10² до 10¹², более предпочтительно, от 10³ до 10¹⁰. Предпочтительно композиция по настоящему изобретению содержит от 10¹ до 10 ¹³ колониеобразующих единиц (КОЕ) Bifidobacteria на грамм сухой массы композиции по настоящему изобретению, предпочтительно, от 10² до 10¹², более предпочтительно, от 10³ до 10¹².

Способ по настоящему изобретению предпочтительно включает введение порции, содержащей от 10¹ до 10¹³ КОЕ микроорганизмов, более предпочтительно, от 10² до 10¹¹, наиболее предпочтительно, от 10³ до 10¹⁰ . Предпочтительно способ по настоящему изобретению включает введение порции, содержащей от 10¹ до 10¹³ КОЕ Bifidobacteria, более предпочтительно, от 10² до 10¹², наиболее предпочтительно, от 10³ до 10¹¹ .

Олигосахариды

Используемый здесь термин «неусваиваемые олигосахариды» относится к олигосахаридам/углеводам, которые не усваиваются или частично усваиваются в кишечнике под воздействием кислот или пищеварительных ферментов, присутствующих в верхних отделах желудочно-кишечного тракта человека (тонкий кишечник и желудок), которые ферментируются кишечной флорой человека. Предпочтительно неусваиваемые олигосахариды по настоящему изобретению имеют степень полимеризации (СП) от 2 до 100, предпочтительно СП от 2 до 50.

Предпочтительно неусваиваемые олигосахариды по настоящему изобретению представляют собой пребиотические волокна. Используемый здесь термин «пребиотические волокна» относится к неусваиваемым волокнам, которые оказывают положительное воздействие на хозяина, избирательно стимулируя рост и/или активность одного или ограниченного числа видов бактерий в толстой кишке.

Предпочтительно неусваиваемые олигосахариды по настоящему изобретению являются растворимыми. Используемый здесь термин «растворимые», относящийся к полисахаридам, волокнам или олигосахаридам, подразумевает, что вещество, по меньшей мере, на 50% растворимо согласно способу, описанному L. Prosky et al., J. Assoc. Off. Anal. Chem. 71, 1017-1023 (1988).

Предпочтительно композиция по настоящему изобретению содержит, по меньшей мере, один олигосахарид, выбранный из группы, состоящей из галактоолигосахаридов, неусваиваемых декстринов, ксилоолигосахаридов, арабиноолигосахаридов, глюкоолигосахаридов, манноолигосахаридов, изомальтоолигосахаридов и фруктоолигосахаридов.

Используемый термин «фруктоолигосахарид» относится к полисахаридному углеводу, включающему цепочку, по меньшей мере, с 3 ß-связанными фруктозными единицами со СП от 3 до 300, предпочтительно, от 20 до 150. Предпочтительным для использования является инулин. Инулин доступен под торговой маркой «Raftilin HP^®», (Orafti). Среднее СП фруктоолигосахарида предпочтительно составляет, по меньшей мере, 15, более предпочтительно, по меньшей мере, 20 или более, вплоть до 300. В инулине фруктозные единицы связаны с ß(2 l) связью.

Неусваиваемые полидекстрины относятся к устойчивым к перевариванию (мальто)декстринам или к устойчивой к перевариванию полидекстрозе со СП от 10 до 50, предпочтительно, от 10 до 20. Неусваиваемые полидекстрины включают (1 4), (1 6)глюкозидные связи и 1 2 и 1 3 связи. Неусваиваемые полидекстрины, например, доступны под торговой маркой «Fibersol 2^®» от Matsutami Inductries или Litesse^® от Danisco.

Авторы настоящего изобретения обнаружили, что галактоолигосахариды могут быть успешно использованы в композиции по настоящему изобретению, поскольку эти олигосахариды особенно эффективны для стимуляции роста Bifidobacteria. Следовательно, в предпочтительном варианте воплощения композиция по настоящему изобретению содержит галактоолигосахариды. Используемый здесь термин «галактоолигосахариды» относится к неусваиваемым сахаридам, в которых, по меньшей мере, 30% сахаридных единиц являются галактозными единицами, предпочтительно, по меньшей мере, 50%, более предпочтительно, по меньшей мере, 60%. Предпочтительно сахариды галактоолигосахаридов являются ß-связанными, как в случае грудного молока.

Предпочтительно композиция по настоящему изобретению содержит галактоолигосахариды, выбранные из группы, состоящей из трансгалактоолигосахаридов, лакто-N-тетраозы (LNT) и лакто-N-неотетраозы (нео-LNT). В особенно предпочтительном варианте воплощения настоящего изобретения способ включает введение трансгалактоолигосахаридов ([галактоза]_n-глюкоза; где n представляет собой целое число от 1 до 60, то есть, 2, 3, 4, 5, 6, ., 59, 60; предпочтительно, n выбрано из 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10). Трансгалактоолигосахариды (ТОС) доступны, например, под торговой маркой Vivinal^TM (Borculo Domo Ingredients, Netherlands). Предпочтительными сахаридами являются трансгалактоолигосахариды, связанные ß-связью.

Предпочтительно композиция по настоящему изобретению содержит от 0,5 до 75 грамм неусваиваемых растворимых олигосахаридов на 100 грамм сухой массы, предпочтительно от 0,5 до 50 грамм. Предпочтительно композиция по настоящему изобретению включает от 0,1 до 95 грамм галактоолигосахаридов на 100 грамм сухой массы, предпочтительно от 0,1 до 50 грамм.

Предпочтительно способ по настоящему изобретению включает введение порции, содержащей от 0,5 до 25 грамм, предпочтительно от 0,1 до 5 грамм. Предпочтительно способ по настоящему изобретению включает введение порции, содержащей от 0,5 до 25 грамм галактоолигосахаридов, предпочтительно от 0,1 до 5 грамм галактоолигосахаридов.

Авторы настоящего изобретения также обнаружили, что смесь длинноцепочечных неусваиваемых олигосахаридов и короткоцепочечных неусваиваемых олигосахаридов синергично стимулируют рост здоровой кишечной флоры, в частности, Bifidobacteria. Следовательно, композиция по настоящему изобретению предпочтительно содержит, по меньшей мере, два олигосахарида с различной средней степенью полимеризации (СП). Предпочтительны массовые соотношения:

а. (неусваиваемые олигосахариды с СП от 2 до 5) : (неусваиваемые олигосахариды с СП 6, 7, 8 и/или 9)>1; и

b. (неусваиваемые олигосахариды с СП от 10 до 60) : (неусваиваемые олигосахариды с СП 6, 7, 8 и/или 9)<1.

Предпочтительно оба массовых соотношения выше 2, еще более предпочтительно выше 5.

Для дополнительного улучшения олигосахариды предпочтительно имеют относительно высокое содержание короткоцепочечных олигосахаридов, поскольку они сильнее стимулируют рост Bifidobacteria. Следовательно, по меньшей мере, 10 масс.% олигосахаридов в композиции по настоящему изобретению имеют СП от 2 до 5 (то есть 2, 3, 4 и/или 5) и, по меньшей мере, 5 масс.% имеют СП от 10 до 60. Предпочтительно, по меньшей мере, 50 масс.%, более предпочтительно, по меньшей мере, 75 масс.% олигосахаридов имеют СП от 2 до 9 (то есть 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 и/или 9).

Для улучшения биологического разнообразия и стимуляции роста многочисленных кишечных организмов композиция по настоящему изобретению предпочтительно включает два олигосахарида с различной структурой. Композиция по настоящему изобретению включает, по меньшей мере, два различных олигосахарида, где гомологичность олигосахаридов в сахаридных единицах составляет менее, чем около 90%, предпочтительно, менее 50%, еще более предпочтительно менее 25%, еще более предпочтительно менее 5%. Используемый здесь термин «гомологичность» означает совокупный процент одинаковых сахаридных единиц в различных олигосахаридах, например, олигосахарид 1 (OL1) имеет структуру фрук-фрукт-глю-гал и, таким образом, включает 50% фрук, 25% галл и 25% глю. Олигосахарид 2 (OL2) имеет структуру фрук-фрук-глю и, таким образом, включает 66% фрук, 33% глю. Таким образом, различные олигосахариды имеют гомологичность 75% (50% фрук + 25% глю).

Предпочтительно композиция по настоящему изобретению содержит галактоолигосахариды и фруктополисахариды.

Применение

Композицию по настоящему изобретению предпочтительно вводят энтерально, более предпочтительно перорально.

Композиция по настоящему изобретению предпочтительно представляет собой жидкость. Используемый здесь термин «энтерально» также включает в объем понятия ректальное или анальное введение.

При получении грудными детьми молочной смеси для детского питания, композиция по настоящему изобретению с микроорганизмами и необязательно, включающая, по меньшей мере, один неусваиваемый олигосахарид, предпочтительно включается в молочную смесь для детского питания. Пробиотик и/или пребиотик могут быть раздельно введены в молочную смесь для детского питания. При получении новорожденными питания через трубку, микроорганизмы могут быть подходящим образом включены в питание, введенное через трубку. Стимуляция разнообразия очень важна, таким образом, настоящее изобретение также относится к питательной композиции, включающей от 5 до 25 энергетических % белка; от 25 до 60 энергетических % жира; от 30 до 70 энергетических % углеводов; по меньшей мере, два различных вида Bifidobacteria и, по меньшей мере, один вид Lactobacillus.

При получении грудным ребенком грудного молока композиция по настоящему изобретению может быть подходящим образом смешана с грудным молоком. Следовательно, настоящее изобретение также относится к способу получения детского питания, подходящего для грудных детей, рожденных с помощью кесарева сечения, включающему: А) грудное молоко; и В) композицию, включающую: (i) по меньшей мере, два различных микроорганизма; или (ii) по меньшей мере, один микроорганизм и, по меньшей мере, один неусваиваемый олигосахарид; или (iii) по меньшей мере, два различных вида Bifidobacteria, подвиды или штаммы. Предпочтительные характеристики В) приведены здесь выше.

В дополнительном предпочтительном варианте воплощения настоящего изобретения композицию вводят грудному ребенку в очень маленьком объеме, например, «инокулирование» грудного ребенка. Предпочтительно композицию по настоящему изобретению грудному ребенку вводят шприцем, пипеткой или трубкой, предпочтительно непосредственно после рождения. В дополнительном предпочтительном варианте воплощения настоящего изобретения композицию вводят ректально или анально грудному ребенку, рожденному с помощью кесарева сечения, предпочтительно в форме суппозитория, пилюли или таблетки. Следовательно, настоящее изобретение также относится к суппозиторию, пилюле или таблетке, подходящей для ректального введения грудному ребенку в возрасте менее одного года, где указанный суппозиторий, пилюля или таблетка содержит микроорганизмы и/или неусваиваемые олигосахариды, предпочтительно композицию по настоящему изобретению, такую, как описано выше.

В дополнительном предпочтительном варианте воплощения настоящее изобретение относится к способу стимулирования кишечной флоры грудного ребенка, включающему ректальное введение грудному ребенку в возрасте менее 3 лет композиции, включающей микроорганизмы и/или неусваиваемые олигосахариды. Предпочтительно возраст грудного ребенка составляет менее 1 года, более предпочтительно менее 2 недель. Предпочтительно грудной ребенок, рожден с помощью кесарева сечения. Предпочтительно эта композиция для ректального введения содержит указанную выше композицию.

Эта процедура имеет преимущество, состоящее в том, что нет вмешательства в практику нормального кормления грудью, и имеет очень большое сходство с инокуляцией при прохождении через родовой канал, которое происходит в процессе рождения. Настоящее изобретение также относится к способу стимуляции здоровья грудного ребенка, рожденного с помощью кесарева сечения, включающему введение грудному ребенку не позднее, чем через 100 часов после рождения, предпочтительно не позднее, чем через 72 часа после рождения, наиболее предпочтительно не позднее, чем через 48 часов после рождения композиции, содержащей микроорганизмы и/или неусваиваемые олигосахариды.

Композиция предпочтительно подходит для введения непосредственно после рождения. Следовательно, в дополнительном предпочтительном варианте воплощения настоящее изобретение относится к контейнеру, включающему жидкую композицию в объеме от 0,5 до 50 мл, содержащему композицию по настоящему изобретению. Жидкость с микроорганизмами по настоящему изобретению необязательно скомбинированная с неусваиваемыми олигосахаридами, может быть подходящим образом использована в способе по настоящему изобретению. Предпочтительно объем жидкости составляет от 0,5 до 25 мл. Этот объем предпочтительно очень мал, поскольку в ином случае его невозможно ввести при кормлении или поении грудного ребенка.

Аналогично в объем настоящего изобретения входит контейнер с восстанавливаемой сухой композицией, содержащей композицию по настоящему изобретению, где контейнер имеет объем от 0,5 до 50 мл. Предпочтительно контейнер снабжен инструкцией для восстановления порошка в небольшом объеме жидкости, например, воды.

Таким образом, настоящее изобретение также относится к способу стимулирования развития здоровой кишечной флоры у грудного ребенка, включающему этапы: А) смешивания I) а именно, питательно или фармацевтически приемлемой жидкости; и II) сухой композиции, где сухая композиция II включает, по меньшей мере, два различных микроорганизма; или, по меньшей мере, один микроорганизм и, по меньшей мере, один неусваиваемый олигосахарид; или, по меньшей мере, два различных вида Bifidobacteria, подвиды или штаммы; и В) введение композиции, полученной на этапе а) грудному ребенку, рожденному с помощью кесарева сечения.

Предпочтительно композицию по настоящему изобретению вводят грудному ребенку первого года жизни, предпочтительно в возрасте не позднее двух недель после рождения, еще более предпочтительно в возрасте не позднее одной недели после рождения, наиболее предпочтительно не позднее, чем через 48 часов после рождения.

ПРИМЕРЫ

Пример 1: Молекулярная характеристика кишечного микробиота грудных детей, прошедших через родовой канал, по сравнению с грудными детьми, рожденными с помощью кесарева сечения

Исследовали влияние способа рождения (кесарево сечение по сравнению с прохождением через родовой канал) на состав кишечных микроорганизмов на третьем дне жизни с использованием ПЦР (PCR) с методом денатурирующего градиентного гель-электрофореза (DGGE) и ПЦР (PCR) с методом температурного градиентного гель-электрофореза (TGGE). Могут быть использованы оба этих метода анализа вместе со специфической амплификацией для десяти видов Bifidobacterium.

После получения письменного согласия от матерей двадцати трех новорожденных, рожденных с помощью кесарева сечения, и прошедших при рождении через родовой канал, они были включены в исследование. На третий день жизни были получены образцы фекалий. Была выделена микробная ДНК и исследована согласно Favier et al, Environ Microbiol 2002; 68:219-226 и Satokari et al, Appl Environ Microbiol 2001; 67:504-513; Satorkari et al System Appl Microbiol 2003; 26:572-584.

Результаты детекции Bifidobacteria в образцах фекалий новорожденных, рожденных с помощью кесарева сечения, полученные на третий день жизни, приведены в таблице 1. Результаты детекции Bifidobacteria в образцах фекалий новорожденных, прошедших при рождении через родовой канал, полученные на третий день жизни, приведены в таблице 2.

Можно увидеть, что микрофлора грудных детей, рожденных с помощью кесарева сечения, сильно отличается от микрофлоры грудных детей, прошедших при рождении через родовой канал. Обнаружение различий по присутствующим видам микроорганизмов способствовало созданию авторами настоящего изобретения композиций и способов по настоящему изобретению.

Эти результаты указывают на преимущества использования композиции и способа по настоящему изобретению, например, способа вскармливания детей, рожденных с помощью кесарева сечения, со стимуляцией здоровой кишечной флоры и, следовательно, профилактикой инфекций и стимулированием здоровья иммунной системы.

Таблица 1
Дети, рожденные с помощью кесарева сечения
Ново- рожден- ный	B. breve	B. infantis	B. dentium	B. angulatum	B. bifidum	B. lactis	B. catenula- tum group	B. adoles- centis	B. longum	B. gallicum
1	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
2	-	-	-	-	-	-	-	-	++	-
3	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
4	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
5	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
6	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
7	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
8	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
9	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
10	-	-	-	-	-	-	-	-	-	++
11	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
12	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
13	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
16	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
17	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
18	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
19	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
20	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
21	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
22	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
23	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
(-)= нет амплификации (+/-)= слабая амплификация (+)= положительная амплификация (++)= сильная амплификация

Таблица 2
Дети, прошедшие при рождении через родовой канал
Ново- рожден- ный	B. breve	B. infantis	B. dentium	B. angulatum	B. bifidum	B. lactis	B. catenula- tum group	B. adoles- centis	B. longum	B. gallicum
1а	-	+	-	-	-	-	-	-	++	-
2а	+/-	-	-	-	++	-	++	-	++	-
3а	-	-	-	-	-	-	+	-	-	-
4а	+/-	-	-	-	-	-	++	+	+	-
5а	+/-	-	-	-	++	-	++	-	++	++

6а	-	-	-	-	+/-	-	++	-	++	-
7а	-	-	-	-	+/-	-	++	++	-	-
8а	++	++	-	-	-	-	+	++	-	-
9а	-	-	-	-	-	-	+	++	+	-
10а	++	-	-	-	-	-	+	+	-	-
11а	++	-	-	-	++	-	++	-	++	-
12а	+	+	-	-	+	-	+	-	++	-
13а	+/-	-	-	-	-	-	+	-	+	-
16а	-	-	-	-	-	-	++	-	+	-
17а	+/-	-	-	-	+	-	+	-	+	-
18а	+/-	-	-	-	+	-	+	-	+	-
19а	+	-	-	-	-	-	+	-	+	-
20а	-	-	-	-	-	-	+	-	+	-
21а	-	-	-	-	-	-	+	++	+	-
22а	-	+	-	-	-	-	++	-	+	-
23а	+	-	-	-	++	-	++	-	+	-
(-)= нет амплификации (+/-)= слабая амплификация (+)= положительная амплификация (++)= сильная амплификация

Пример 2: Ферментация галактоолигосахаридов in vitro в фекалиях грудных детей

Цель: Оценка способности галактоолигосахаридов (GOS) и комбинации GOS и инулина оказывать благоприятное воздействие на активность молочнокислых бактерий проводилась с использованием in vitro не полной динамики периодической ферментации с использованием фекалий грудных детей. Определяли количество лактата, как продукта ферментации молочнокислых бактерий, включая Bifidobacteria.

Способ: Свежие фекалии получали от здоровых детей, находящихся на искусственном вскармливании. Свежий фекальный материал, полученный от детей в возрасте от 1 до 4 месяцев, объединяли и помещали на 1 час в консервирующую среду (забуфференную пептоном 20,0 г/л, L-Цистеин-HCl 0,5 г/л, тиогликоллат натрия 0,5 г/л, таблетка резазурина 1/л, рН 6,7) и хранили при температуре 4ºС максимум 2 часа перед началом эксперимента по ферментации.

Законсервированный раствор фекалий центрифугировали при 13000 оборотов в минуту в течение 15 минут. Отделяли супернатант и фекалии смешивали со средой McBain & MacFarlane (вода, забуфференная пептоном 3,0 г/л, экстракт дрожжей 2,5 г/л, муцин (щеточная кайма) 0,8 г/л, Триптон 3,0 г/л, L-Цистеин-HCl 0,4 г/л, соли желчных кислот 0,05 г/л, K₂HPO₄ ·3H₂O 2,6 г/л, NaHCO₃ 0,2 г/л, NaCl 4,5 г/л, MgSO₄.7H₂O 0,5 г/л, CaCl₂ 0,228 г/л, FeSO₄ 0,005 г/л), типичной для кишечной среды, в массовом соотношении 1:5.

При t=0 15 мл фекальной суспензии комбинировали с 500 мг пребиотика в емкости и тщательно перемешивали. Использовали контроль без введения пребиотика. Пребиотик вводили по следующей схеме:

Среда:	1	2	3
GOS:	0	500	450
Инулин:	0	0	50

В качестве источника GOS использовали Vivinal GOS (Borculo Domo). В качестве источника инулина использовали RaftilinHP (Orafti).

15 мл перенесли в диализную трубку в 250 мл емкости, заполненной 250 мл забуференной среды (K₂HPO₄.3H₂ O 2,6 г/л, NaHCO₃ 0,2 г/л, NaCl 4,5 г/л, MgSO ₄.7H₂O 0,5 г/л, CaCl₂ 0,228 г/л, FeSO₄.7H₂O 0,005 г/л, pH 6,3(?)). Емкость закупоривали и выдерживали при температуре 37ºC. По 1 мл образцов брали через 3 часа из диализной трубки и из диализного буфера шприцем для подкожных инъекций и хранили при температуре минус 18ºC. Эксперименты повторяли дважды.

Лактат определяли ферментативно с использованием набора для определения L-молочной кислоты с помощью D- и L-лактат-дегидрогеназы (Boehringer Mannheim, Mannheim, Germany).

Результаты и заключения: Результаты выражены через количество лактата, полученного на г введенного пребиотика. Результаты показали, что количество лактата повышалось, когда микрофлора грудных детей ферментировала GOS или смесь GOS и инулина. Когда пребиотик не вводили, то продуцирование лактата не наблюдалось. При введении только GOS в качестве пребиотика, лактат продуцировался в количестве 0,1801 ммоль/г. При введении комбинации GOS и инулина, лактат продуцировался в количестве 0,2119 ммоль на г пребиотика.

Результаты показывают, что олигосахариды стимулируют у грудных детей рост и/или активность молочнокислых бактерий, включая Bifidobacteria. Эти результаты указывают на преимущество использования неусваиваемых олигосахаридов, а именно, галактоолигосахаридов в композиции по настоящему изобретению и способе по настоящему изобретению, то есть в способе кормления детей, рожденных с помощью кесарева сечения.

Пример 3: Способ кормления детей, рожденных с помощью кесарева сечения

Через два дня после рождения грудному ребенку, рожденному с помощью кесарева сечения, вводили питательную композицию, содержащую на 100 мл детского питания: 1,6 грамм белка, 3,6 грамма жира, 6,4 грамма усваиваемых углеводов (по существу, лактозы), 0,8 грамм неусваиваемых углеводов, из которых трансгалактоолигосахаридов 0,60 грамм, 0,07 грамм инулина, 1×10 ⁹ КОЕ Bifidobacterium breve, 1×10⁹ КОЕ Bifidobacterium catenulatum, 1×10⁹ КОЕ Bifidobacterium longum и 1×10⁹ КОЕ Lactobacillus paracasei.

Пример 4: Упакованная композиция

Упакованная композиция, где упаковка указывает, что продукт по существу подходит для питания грудным детям, рожденным с помощью кесарева сечения, путем перорального введения, указанная композиция включает Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium longum, галактоолигосахариды и инулин.

Пример 5: Упакованная композиция

Композиция по Примеру 4, где композиция, объемом 10 мл, упакована в шприц.

Пример 6: Ректальное введение

Пилюля, подходящая для ректального введения грудному ребенку в возрасте не позднее двух недель после рождения, включает галактоолигосахариды и Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum.