мазевая композиция для местного применения с противоугревой фармакологической активностью

Формула изобретения

Мазевая композиция для местного применения с противоугревой фармакологической активностью на основе ретиноида, характеризующаяся тем, что она содержит изотретиноин, -токоферол, воск эмульсионный, масло вазелиновое, глицерин, этанол и воду при следующем соотношении компонентов, мас.%:

изотретиноин	0,05-0,1
-токоферол	0,025-0,2
Воск эмульсионный	6,0-10,0
Вазелиновое масло	4,0-6,0
Глицерин	5,0-15,0
Этанол	7,0-15,0
Вода дистиллированная	до 100,0

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к фармации и касается создания мазевой композиции для местного применения, содержащей изотретиноин - активную фармацевтическую субстанцию с себостатическим и кератолитическим эффектами, - предназначенной для патогенетического лечения угрей.

Угри являются распространенным кожным заболеванием, поражающим, в основном, лиц юного и молодого возраста. Нередко угри становятся фактором, снижающим самооценку молодого человека и препятствующим его социальной адаптации. В настоящее время наиболее эффективными средствами для лечения угрей являются препараты, содержащие ретиноиды, т.к. эти вещества тормозят процесс терминальной дифференцировки себоцитов, что приводит к уменьшению размеров сальных желез [1] и снижению выработки кожного сала [2]. Обладая также кератолитическим действием, ретиноиды способствуют отшелушиванию рогового слоя фолликулярного и интерфолликулярного эпителия, облегчают высвобождение содержимого из сально-волосяных комплексов, снижают количество Propionibacterium acnes и грамм-отрицательных микроорганизмов, оказывают противовоспалительное действие [3].

Таким образом, лечение угрей с применением средств, содержащих ретиноиды, является патогенетическим, так как эти вещества обладают фармакологической активностью в отношении основных патогенетических звеньев этого заболевания.

Наиболее эффективными противоугревыми ретиноидами в настоящее время являются ретиноевые кислоты - полностью транс-ретиноевая кислота (международное непатентованное название - третиноин) и 13-цис-ретиноевая кислота (международное непатентованное название - изотретиноин). На наш взгляд, использование в противоугревых наружных средствах изотретиноина предпочтительнее вследствие его меньшей токсичности. Так, есть сведения, что он обладает меньшими местно-раздражающими свойствами, чем третиноин [4], и, что очень важно - меньшими тератогенными эффектами [5]. Кроме того, изотретиноин является естественной биологически активной формой витамина А; он без дополнительных биохимических превращений в организме может распознаваться клеточными рецепторами и проникать внутрь клеток-мишеней [6].

Известен препарат «Ретиноевая мазь», приготовленный на водоэмульсионной основе, в состав которого входят изотретиноин (0,01%, 0,05% или 0,1%), а в качестве антиоксидантов бутилокситолуол (син. - бутилгидрокситолуол, БОТ) и бутилоксианизол (син. - бутилгидроксианизол, БОА) [7]. В экспериментах на животных было показано, что накожные в течение двух недель аппликации ретиноевой мази приводят к статистически значимому уменьшению размеров сальных желез, изменению их клеточного состава в сторону увеличения доли недифференцированных себоцитов, разрыхлению и истончению рогового слоя [8]. При лечении ретиноевой мазью пациентов с папуло-пустулезными и комедональными угрями была продемонстрирована ее высокая терапевтическая эффективность [9, см. 1].

Ретиноиды представляют собой нестойкие, легко окисляющиеся соединения, в связи с чем препараты, в состав которых они входят, должны содержать компоненты, препятствующие их деструкции. В качестве последних чаще всего используют антиоксиданты - бутилгидрокситолуол (БОТ) и бутилгидроксианизол (БОА). Однако им присущи и некоторые нежелательные эффекты, например, потенциальные канцерогенные свойства [10, 11], способность повышать уровень холестерина, оказывать раздражающее действие на кожу, глаза и слизистые оболочки [12], что влечет дополнительный риск при работе с этими веществами. По этой причине их содержание в лекарственных средствах и пищевых продуктах должно быть регламентировано [13].

Таким образом, поиск современных нетоксичных антиоксидантов, желательно, природного или близкого к природному происхождения, эффективно тормозящих распад ретиноидов в составе лекарственных препаратов, является актуальным.

Задачей настоящего изобретения является разработка мазевой композиции с противоугревым эффектом, лишенной указанных недостатков.

Существует много патентов (зарубежных), защищающих состав противоугревых косметических средств и лекарственных препаратов, содержащих ретиноиды (третиноин, изотретиноин, ретиналь, ретинол и его эфиры), стабилизированные -токоферолом и др. вспомогательными веществами [бутил-гидрокситолуол (БОТ), бутилгидроксианизол (БОА), этиледиаминтетрауксусная кислота (ЭДТА), витамин С и др.]; как правило, эти композиции представляют собой гидрогели и эмульсии «масло в воде».

Аналогом заявляемого средства является патент RU 2111745 (Hoffman-La Roche), в котором описана жидкая композиция, содержащая изотретиноин (0,05-0,2%) и -токоферол (0,005-5,0%) [14]. Известен также европейский патент ЕР 0439042 (Hoffman la Roch AG), описывающий растворы, которые могут в дальнейшем использоваться для приготовления гелей, в состав одного из которых входят изотретиноин (0,05%), -токоферол (0,01%) в сочетании с динатриевой солью ЭДТА, лецитином, гликохолевой кислотой и др. [15].

Наиболее близким по медицинским показаниям и технической сущности к заявленной композиции является патент RU 2004240 (Препарат для лечения конглобатной формы угревой болезни и заболеваний кожи, связанных с нарушением кератинизации), содержащий биологически активную фармацевтическую субстанцию - изотретиноин, а в качестве стабилизаторов - бутилокситолуол (син. - бутилгидрокситолуол, БОТ) и бутилоксианизол (син. -бутилгидроксианизол, БОА) [16].

С целью улучшения качества препарата, профиля безопасности и потребительских свойств из состава были удалены антиоксиданты БОТ и БОА, а также было снижено содержание вазелинового масла для уменьшения жирности кожи после аппликации мази.

В соответствии с изобретением описывается мазевая композиция для местного применения с противоугревой активностью, содержащая ретиноид изотретиноин, антиоксидант -токоферол, в качестве жировой фазы мазевой основы - вазелиновое масло, в качестве эмульгатора - эмульсионный воск, а также спирт этиловый, глицерин и воду при следующем соотношении компонентов, масс.%:

Изотретиноин	0,05-0,1
-токоферол	0,025-0,2
Воск эмульсионный	6,0-10,0
Вазелиновое масло	4,0-6,0
Глицерин	5,0-15,0
Спирт этиловый	7,0-15,0
Вода очищенная	до 100,0

Композиция уменьшает или устраняет угревую сыпь.

Применение -токоферола позволяет избежать использования таких компонентов, как БОТ и БОА при сохранении высоких противоугревых и эксплуатационных свойств лекарственного препарата.

Лабораторные исследования

Эксперимент 1

В заявляемый состав мазевой композиции -токоферол введен с целью стабилизации ретиноида, и поэтому на первом этапе лабораторных исследований стабильность изотретиноина была изучена на примере модельных смесей.

Цель: изучить устойчивость субстанции изотретиноин, стабилизированной -токоферолом.

Объект исследования составили модельные смеси - субстанция изотретиноин в вазелиновом масле без антиоксиданта (1) - контроль - и аналогичная комбинация, отличающаяся наличием в ней 0,025% -токоферола (2) -. Начальная концентрация изотретиноина в модельных смесях равнялась 0,05%. Образцы были заложены на «ускоренное старение» в стеклянных банках с широким горлом при свободном доступе воздуха в условиях повышенной температуры (60°С).

Метод: спектрофотометрия по отношению к раствору стандартного образца.

Результат количественного определения 13цРК в этих смесях представлен в таблице 1.

Таблица 1
Динамика содержания изотретиноина в модельных смесях без антиоксиданта и с -токоферолом в качестве антиоксиданта в условиях хранения при 60°С и свободном доступе воздуха
Срок хранения, сут	Количество изотретиноина в модельной смеси, %
	без -токоферола	с -токоферолом
1	0,0447	0,0472
15	0,0385	0,0451
19	0,0395	0,046
34	0,0387	0,0451
41	0,0371	0,0475
53	0,0359	0,0469
63	0,0349	0,045
70	0,0342	0,045
83	0,0358	0,0455
137	0,0345	0,0446
183	0,0343	0,0435
203	0,0335	0,0433
257	0,0318	0,0417

Как видно из представленных данных, содержание изотретиноина в модельной смеси, не содержащей антиоксиданта, медленно снижается. За 257 дней эксперимента начальная концентрация субстанции снизилась с 0,0447% до 0,0318%, т.е. на 30%. За этот же период содержание изотретиноина в смеси с -токоферолом снизилось с 0,0472% до 0,0417%, т.е. на 12%.

Для сравнительной оценки стабилизирующей активности -токоферола первоначальное содержание изотретиноина было взято за 100%, и его снижение в процессе ускоренного хранения также выразили в процентах. Полученные результаты представлены на рисунке 1, из которого следует, что снижение концентрации изотретиноина в смеси без стабилизатора идет линейно и описывается уравнением регрессии. Коэффициент корреляции между содержанием изотретиноина в смесях (без -токоферола и с -токоферолом) и сроком их хранения составляет 0,860 и 0,897 соответственно, что свидетельствует о наличии тесной взаимосвязи между этими параметрами. Как показали расчеты, -токоферол тормозит разрушение изотретиноина в 2,6 раза.

Таким образом, эксперимент доказал, что -токоферол обладает стабилизирующим эффектом по отношению к изотретиноину. Его содержание в модельной смеси в количестве 0,025% повышает устойчивость субстанции в 2,6 раза.

Эксперимент 2

Цель: установить продолжительность стабильности фармацевтической субстанции (изотретиноин) в составе мазевых композиций, содержащих разные концентрации -токоферола.

Объект исследования составили образцы мазевых композиций с 0,1% изотретиноина, не содержащих -токоферол (контроль) и содержащих в качестве стабилизатора разные количества -токоферола (от 0,025 до 0,25%). Для установления оптимальной концентрации -токоферола, обеспечивающего стабильность изотретиноина в мазях, изготовленные образцы мазей были заложены на ускоренное хранение при 40°С. Критерием стабильности лекарственного средства служили результаты количественного определения субстанции в препарате, полученные в различные сроки его хранения. Продолжительность наблюдения за сериями при соответствующем перерасчете соответствовала 2,5 годам экспериментального хранения. Выявление в конце этого периода удовлетворительного качества препарата должно служить гарантией стабильности лекарственного средства в течение 2 лет.

Метод: высокоэффективная жидкостная хроматография.

Технология приготовления мази

1. Необходимое количество воды помещают в реактор 1 и нагревают до 80°С.

2. Параллельно в реактор 2 помещают необходимые количества вазелинового масла (часть от общего содержания в препарате) и эмульсионного воска. Нагревают до температуры 75°С, расплавляя загруженные вещества.

3. В небольшое количество вазелинового масла помещают расчетные количества изотретиноина и -токоферола. Смесь тщательно перемешивают.

4. После расплавления жировых компонентов основы (п.2) в реактор 2 добавляют смесь изотретиноина и -токоферола (п.3) и перемешивают до растворения субстанции.

5. В реактор 1 (п.1) опускают головку гомогенизатора, включают его (8-10 тыс об./мин) и при активном перемешивании смеси медленно, тонкой струйкой добавляют расплав жировых компонентов мази (п.4). Через 2-5 минут [в зависимости от объема использованного реактора (0,5-3,0 л)] после смешивания всех компонентов препарата мазь окончательно гомогенизируют. Спустя 2-5 минут в реактор добавляют смесь этанола и глицерина, после чего мазь дополнительно гомогенизируют в течение 2 минут.

6. В связи с тем, что мазь содержит термолабильные компоненты (изотретиноин, -токоферол), разрушение которых усиливается при высоких температурах, ее следует принудительно охладить. После охлаждения мази до 35-40°С ее передают на участок фасовки в тубы.

Мазь должна храниться при температуре от 2 до 8°С. Замораживание не допускается.

Примеры приготовления конкретных композиций

Пример 2.

В реактор 1 с эффективной загрузкой в 100 кг мази отмеривают 65,7 л очищенной воды и нагревают ее до температуры 75-80°С.

В реактор 2 отвешивают 8 кг эмульсионного воска, 5 кг вазелинового масла, включают двигатель рамной мешалки и, нагревая смесь до температуры 75-80°С, расплавляют ее.

В специальную емкость отвешивают 1 кг вазелинового масла, 0,10 кг изотретиноина и 0,20 кг -токоферола. Нагревают смесь до температуры 50-55°С, тщательно перемешивают и переносят в реактор 2.

Перемещение липофильных компонентов мази осуществляют с помощью встроенного с систему реакторов роторно-пульсационного аппарата проточного типа. Смешивание компонентов двух реакторов продолжают в течение 20 минут, до получения однородной эмульсии, в которую постепенно добавляют смесь 10 кг этилового спирта и 10 кг глицерина.

Полученную смесь окончательно гомогенизируют в течение 15 минут, охлаждают до температуры 30-35°С и фасуют в алюминиевые тубы.

Аналогично (по такой же схеме) получены мази (примеры 3, 4, 5, 6), состав которых представлен в таблице 2.

Состав изучаемых мазей представлен в таблице 2.

Таблица 2
Состав мазей с изотретиноином без антиоксиданта и с -токоферолом, добавленным в различной концентрации
Номер примера	Количество ингредиента в мази, %
	Изотретиноин	Вазелиновое масло	Эмульсионный воск	-токоферол
1	0,1	47,5	2,5	0
2	0,1	47,5	2,5	0,025
3	0,1	47,5	2,5	0,05
4	од	47,5	2,5	0,10
5	0,1	47,5	2,5	0,20
6	0,1	47,5	2,5	0,20

Результаты количественного определения концентраций фармацевтической субстанции - изотретиноина - в этих мазях на разных сроках хранения представлены в таблице 3.

Таблица 3
Концентрация изотретиноина в мазях, стабилизированных -токоферолом, при определении срока их годности по методике «ускоренного старения» (показатель качества по ФСП - от 0,09 до 0,11%)
Срок экспериментального	Содержание изотретиноина в мазях,%
	Пример 1	Пример 2	Пример 3	Пример 4-	Пример 5
хранения, мес; в скобках - соответствующий срок по ФСП	без -токоферола	0,025% -токоферола	0,05% -токоферола	0,1% -токоферола	0,2% -токоферола
После изготовления	0,10	0,11	0,11	0,10	0,10
6 (0,5 года)	0,80	0,10	0,09	0,095	0,09
12 (1 год)	0,034	0,10	0,09	0,093	0,095
18 (1,5 года)	0,028	0,092	0,092	0,091	0,091
24 (2 года)	0,025	0,093	0,09	0,092	0,092
30 (2,5 года)	0,022	0,095	0,092	0,095	0,091

Анализ результатов определения показателей качества ретиноевой мази с разным содержанием антиоксиданта показывает, что мазь без -токоферола не удовлетворяет требованиям ФСП уже через 0,5 года экспериментального хранения. Препарат бракуется по низкому значению показателя «Количественное содержание» изотретиноина в мази и по показателю «Посторонние примеси». Добавление в мазь а-токоферола предотвращает разрушение изотретиноина. Как следует из представленных в таблице данных, -токоферол в концентрации от 0,025 до 0,2% от веса мази в условиях определения сроков годности по методике «Ускоренного старения» обеспечивает сохранность изотретиноина в мазевой композиции в допустимом пределе (не ниже 0,09%).

Литература

1. Ноздрин В.К, Альбанова В.И., Сазыкина Л.Н. Морфогенетический подход к лечению угрей ретиноидами. - М.: ЗАО Ретиноиды , 2005. - 127 с.

2. Zouboulis С.С., Korge В., Akamatsu H.et al. Effects of 13-cis-retinoic acid, all-trans-retinoic acid and acitretin on the proliferation, lipid synthesis and keratin expression of cultured human sebocytes in vitro // J. Invest. Dermatol. - 1991. - Vol.96, No. 5. - P.792-797.

3. Harms M. Systemic isotretinoin (active ingredient of Roaccutane). A unique therapeutic effect and its implications in the pathogenesis of acne. - Edit. Roche. -Basel (Switzerland), 1994. - 93 c.

4. Забненкова O.B. Поверхностные химические пилинги // Докл. Научно-практ. Конф. «Использование химических пилингов в дерматокосметологии», 6-7 декабря 2002 г., Москва. - http:// www. http://Estemed.ru/press/publication-profahayel.php.

5. Kochlar D.M., Penner J.D., Tellone C.I. Comparative teratogenic activities of two retinoids: Effects on palate and limb development // teratogenesis, Carcinogenesis and mutagenesis. - 2005. - Vol.4. - N 4. - P.377-387.

6. Ноздрин В.И. Морфофункциональные проявления реактивных изменений эпителиально-, миелоидно- и лимфоидноклеточных популяций при введении в организм производных ретиноевой кислоты: Автореф. дис. д-ра мед. н. - М., 1989. - 48 с.

7. Альманах Ретиноиды . - М.: ЗАО Ретиноиды , 1997. - Вып.4. - С.3-8.

8. Белоусова Т.А., Альбанова В.К, Жучков С.А. и др. Гистоструктурные проявления дерматотропной активности ретиноевой мази // Рос.ж. кожн. и вен. болезней. - 2005. - № 2 - С.61-66.

9. Иванов О.Л., Грабовская О.В. Клиническая эффективность ретиноевой мази при кожных заболеваниях // Альманах Ретиноиды . - М.: ЗАО Ретиноиды , 1997. - Вып.4. - С.50-55.

10. Inai К., Kobuke Т., Nambu S. et al. Hepatocellular tumorigenicity of butilated hydroxytoluene administered orally to B6C3F1 mice // Jpn. J. Cancer Res. (Gann). - 1988. - Vol.79. - P.49-58.

11. Kahl R., Kappus H. Toxicology of the synthetic antioxidants BHA and BHT in comparison with the natural antioxidant vitamin E // Z. fur Lebensmittel-Untersuchung und-Forchung. - 1993. - Bd. 196, N 4. - S.329-338.

12. Решение Комиссии Таможенного союза от 19 мая 2011 г. № 646. О проекте Требований к маркировке лекарственных средств. - г.Минск.

13. СанПиН 2.3.2.1293-03. - П.3.4.4.

14. Патент RU 2111745. - Опубл. 27.05.98.

15. Патент ЕР 0439042 - Опубл. 31.07.91.

16. Патент RU 2004240. - Опубл. 15.12.93.