способ получения доцетаксела

Формула изобретения

1. Способ получения доцетаксела взаимодействием промежуточного продукта (I)



с ди-трет-бутилдикарбонатом, где указанный промежуточный продукт получен:

а) взаимодействием 2-(2,4-диметоксифенил)-3-(2-нитробензолсульфенил)-4(S)-фенил-5(R)-оксазолидинкарбоновой кислоты (V)



c 10-деацетил-бис-7,10-трихлорацетилбаккатином III (VI)



для получения 10-деацетил-7,10-бис-трихлорацетилбаккатин(III)-13-илового эфира 2-(2,4-диметоксифенил)-3-(2-нитробензолсульфенил)-4(S)-фенил-5(R)-оксазолидинкарбоновой кислоты (VII)



b) гидролизом трихлорацетильных групп в положениях 7 и 10 соединения формулы (VII) для получения 10-деацетилбаккатин(III)-13-илового эфира 2-(2,4-диметоксифенил)-3-(2-нитробензолсульфенил)-4(S)-фенил-5(R)-оксазолидинкарбоновой кислоты (VIII)



с) обработкой соединения формулы (VIII) кислотой с получением 10-деацетил-N-дебензоилпаклитаксела (I).

2. Способ по п.1, где взаимодействие промежуточного продукта (I) с ди-трет-бутилдикарбонатом проводится в растворителях, выбранных из спиртов, хлорированных углеводородов или из смесей в отсутствие основания.

3. Способ по п.1 или 2, где доцетаксел очищен перекристаллизациями из смесей этанол/вода и/или ацетон/углеводород.

Описание изобретения к патенту

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к способу получения доцетаксела со степенью чистоты более 99% посредством взаимодействия промежуточного продукта (I), полученного способом согласно настоящему изобретению, с ди-трет-бутилдикарбонатом, а также к фармацевтическим композициям, включающим указанный доцетаксел высокой чистоты.

Уровень техники

Способ, включающий реакцию этерификации оксазолидинов формулы (II)

и 10-деацетилбаккатина формулы (III), защищенного в положениях 7 и 10,

с получением сложных эфиров формулы (IV)

был описан в публикации WO 94/07877 для синтеза синтона (I), описанного в литературе в начале 90-х годов (F. Guéritte-Voege et al., J. Med. Chem. 34, 992, 1991).

Высвобождение аминогруппы в положении 3' и гидроксильных групп в положениях 2', 7' и 10 сложных эфиров формулы (IV) приводит к получению синтона (I).

В частности, в соответствии с указанной выше заявкой на патент, группы R могут представлять собой водород, алкил, алкокси или различным образом замещенный фенил, и R₁ представляет собой алкил, замещенный одним или несколькими атомами хлора. Группы G представляют собой алкилсилил или R₁ -O-CO- группы, где R₁ принимает значения, определенные выше.

Исходя из промежуточных продуктов формулы (IV) функциональные гидроксильная и амино-группы высвобождаются восстановлением с цинком и кислотами и, когда группы G представляют собой алкилсилил, функциональные гидроксильные группы высвобождаются обработкой кислотой, например, фтористоводородной кислотой.

Сущность изобретения

Настоящее изобретение в первом варианте осуществления относится к способу получения 10-деацетил-N-дебензоилпаклитаксела (I),

включающему следующие стадии:

а) взаимодействие 2-(2,4-диметоксифенил)-3-(2-нитробензолсульфенил)-4(S)-фенил-5(R)-оксазолидинкарбоновой кислоты (V)

c 10-деацетил-бис-7,10-трихлорацетилбаккатином III (VI)

для получения 10-деацетил-7,10-бис-трихлорацетилбаккатин(III)-13-илового эфира (2-(2,4-диметоксифенил)-3-(2-нитрофензолсульфенил)-4(S)-фенил-5(R)-оксазолидинкдарбоновой кислоты (VII)

b) гидролиз трихлорацетильных групп в положениях 7 и 10 соединения формулы (VII) для получения 10-деацетилбаккатин(III)-13-илового эфира 2-(2,4-диметоксифенил)-3-(2-нитробензолсульфенил)-4(S)-фенил-5(R)-оксазолидинкарбоновой кислоты (VIII)

с) обработка соединения формулы (VIII) кислотой с получением 10-деацетил-N-дебензоилпаклитаксела (I).

Изобретение предоставляет также в качестве новых промежуточных продуктов 10-деацетил-7,10-бис-трихлорацетилбаккатин(III)-13-иловый эфир 2-(2,4-диметоксифенил)-3-(2-нитробензолсульфенил)-4(S)-фенил-5(R)-оксазолидинкарбоновой кислоты (VII) и 10-деацетилбаккатин(III)-13-иловый эфир 2-(2,4-диметоксифенил)-3-(2-нитробензолсульфенил)-4(S)-фенил-5(R)-оксазолидинкарбоновой кислоты (VIII).

Изобретение также относится к способу получения 10-деацтил-бис-7,10-трихлорацетилбаккатина (III) с содержанием соответствующих 7- или 10-моно-трихлорацетил-производных менее 0,1%, согласно ВЭЖХ, включая хроматографию реакционной смеси на силикагеле.

Еще одним предметом изобретения является предоставление доцетаксела со степенью чистоты более 99%, а также фармацевтических композиций, включающих данное соединение.

Описание изобретения

Настоящее изобретение относится к способу синтеза синтона (I)

с высоким выходом и/или чистотой. Кроме того, способа не требует применения загрязняющих реагентов или реагентов, работа с которыми затруднена, таких как цинк или фтористоводородная кислота.

Способ включает взаимодействие 2-(2,4-диметоксифенил)-3-(2-нитробензолсульфенил)-4(S)-фенил-5(R)-оксазолидинкдарбоновой кислоты (V)

с 10-деацетил-бис-7,10-трихлорацетилбаккатином Ш (VI)

с получением сложного эфира (VII)

после удаления из которого функциональных амино- и гидроксильных групп получают синтон (I).

Соединение формулы (VII) является новым соединением и составляет еще один предмет настоящего изобретения.

В данном синтезе в равной степени применимы как 2R-, так и 2S-оксазолидиновая кислота (V), а также смесь этих соединений, поскольку хиральный центр в положении 2 оксазолинового цикла удаляется из промежуточного продукта (VII) в процессе удаления гидроксильной и амино-функциональностей. Другими словами, относительное соотношение между диастереоизомерами не влияет на характеристику синтеза.

Оксозолидиновая кислота (V) легко получается кислотной обработкой соответствующих солей щелочных металлов, получение которых раскрыто в публикации WO 03/087077 А1.

По сравнению с другими оксазолидиновыми кислотами кислота (V) характеризуется значительной стабильностью, что позволяет без труда осуществлять этерификацию синтона (VI).

Кроме того, после реакции этерификации высвобождение функциональных амино- и гидроксильной групп, присутствующих в кислотном остатке, может легко осуществляться обработкой кислотами без необходимости применения жестких условий.

Таксансинтон (VI) может быть получен из природного продукта метаболизма 10-деацетилбаккатина III через этерификацию положений 7 и 10 обработкой активированными производными трихлоруксусной кислоты в соответствии с известными способами этерификации. Предпочтительно синтон (VI) получают взаимодействием с хлорангидридом трихлоруксусной кислоты при температуре около 0°С с использованием пиридина в качестве растворителя. Предпочтительно 10-деацетил-бис-7,10-трихлорацетилбаккатина III (VI) очищен от соответствующих 7- и 10-монотрихлорацетилэфиров с помощью хроматографии на силикагеле или эквивалентными способами. Остаточное количество указанных примесей не должно превышать 0,1% согласно определению по % соотношению ВЭЖХ-пиков.

В соответствии с настоящим изобретением этерификация (VI) оксазолидиновой кислотой (V) с получением (VII) может осуществляться в присутствии агента конденсации, такого как диимид, например дициклогексилкарбодиимид, и активирующего агента, например 4-диметиламинопиридина или 4-пирролидинопиридина, в растворителе, выбранном из простого эфира, такого как этиловый эфир, диизопропиловый эфир, тетрагидрофуран или диоксан; сложного эфира, такого как этил-, пропил- или бутилацетат; ароматического углеводорода, такого как бензол, толуол или о-, м-, п-ксилол; или галогенированного алифатического углеводорода, например, метиленхлорида, хлороформа или дихлорэтана. Проведение этерификации в метиленхлориде при температуре примерно 20°С является особенно преимущественным.

Для получения синтона (I) из сложного эфира (VII) необходимо удалить трихлорацетильные группы из положений 7 и 10 и высвободить функциональные амино- и гидроксильную группы из оксазолидинового остатка.

Как указано выше, функциональные амино- и гидроксильные группы могут легко высвобождаться из оксазолидинового остатка обработкой кислотой. И наоборот, гидролиз сложных эфиров трихлоруксусной кислоты может удобно проводиться мягкой обработкой щелочью, предпочтительно взаимодействием с гидроксидом аммония.

Было показано, что если высвобождение функциональных амино- и гидроксильной групп из оксазолидинового остатка проводится первым, имеет место существенное перемещение трихлорацетильной группы из баккатинового остатка в свободную функциональную аминогруппу с последующим образованием трихлорацетамидофункции, которая может подвергаться превращению в аминофункцию только в условиях, которые бы были неблагоприятными для образования структуры баккатинового остова. Поэтому для получения синтона (I) необходимо сначала удалить трихлоруксусные группы в положениях 7 и 10 в (VII) с получением сложного эфира (VIII).

Кроме того, соединение формулы (VIII) является новым и представляет собой дополнительный предмет настоящего изобретения. Предпочтительно, удаление трихлоруксусных групп проводится при комнатной температуре обработкой гидроксидом аммония в тетрагидрофуране в качестве растворителя.

Высвобождение функциональных амино- и гидроксильной групп проводится обработкой кислотами, предпочтительно водной соляной кислотой в спиртовом растворителе, например в метаноле, при температуре примерно 20°С. После разбавления водой и удаления продуктов побочных реакций с органическими растворителями, такими как алифатические углеводороды и галогенированные алифатические углеводороды, например н-гексан и метиленхлорид, синтон (I) выделяют подщелачиванием водной фазы, экстракцией в органическом растворителе, например метиленхлориде или этилацетате, концентрированием и осаждением в алифатическом углеводороде, таком как н-гексан. Способ согласно настоящему изобретению обеспечивает получение синтона (I) с чистотой более 98% без хроматографической очистки.

Доцетаксел преимущественно может быть получен из указанного промежуточного продукта со степенью чистоты более 99%, предпочтительно более 99,4% взаимодействием с ди-трет-бутилдикарбонатом.

Реакция предпочтительно проводится в растворителях, таких как спирты (метанол, этанол, изопропанол, предпочтительно этанол), хлорированные углеводороды (метиленхлорид, хлороформ, предпочтительно метиленхлорид) или их смеси, в отсутствие оснований.

Способ является полезным, поскольку доцетаксел может быть получен с высокой степенью чистоты без трудоемкой хроматографической очистки кристаллизацией из подходящих растворителей, предпочтительно из смеси этанол/вода и/или ацетон/углеводород. Доцетаксел, полученный с использованием способа согласно настоящему изобретению, характеризуется степенью чистоты более 99% (ВЭЖХ, % (площ.)) и содержанием 7-эпи-доцетаксела и 10-дегидродоцетаксела менее 0,1% каждого (ВЭЖХ, % площ.).

Более подробно изобретение будет проиллюстрировано с помощью представленных далее примеров.

ПРИМЕРЫ

Пример 1. 10-Деацетил-7,10-бис-трихлорацетилбаккатин III (VI)

10-Деацетилбаккатин III (15 г) обрабатывают 6,6 мл трихлорацетилхлорида в 60 мл пиридина при 0-5°С в течение 1 часа при перемешивании. Смесь разбавляют 100 мл метиленхлорида и 100 мл 4N соляной кислоты. Фазы разделяют и органический слой промывают 100 мл 4N соляной кислоты и 50 мл насыщенного водного раствора хлорида натрия. Органическую фазу концентрируют в вакууме и остаток переносят в 100 мл толуола. Продукт (VI) собирают фильтрованием и сушат в вакууме при 50°С. Полученный продукт растворяют при 35°С в CH₂Cl₂ (80 мл) и очищают колоночной хроматографией с использованием 800 г Kiesegel 60 Merck (элюент: CH₂Cl₂). Фракции объединяют (ТСХ: CH₂Cl₂) и анализируют ВЭЖХ. Общее содержание моно 7- и 10-трихлорацетилбаккатина III должно составлять менее 0,1%. Очищенное соединение (VI) осаждают в толуоле, получая целевой продукт (17,8 г, 21,4 ммоль, 660/26/В, А% чистота: 99%, выход: 78%).

Пример 2. 10-Деацетил-7,10-бис-трихлорацетилбаккатин(III)-13-иловый эфир 2-(2,4-диметоксифенил)-3-(2-нитробензолсульфенил)-4(S)-фенил-5(R)-оксазолидинкарбоновой кислоты

Раствор, состоящий из 10,3 г (V) в форме натриевой соли и 100 мл воды, охлаждают до 0-5°С и значение рН доводят до 2-3 с помощью 2М раствора бисульфата натрия. Реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 15 минут и затем добавляют CH₂Cl₂ (70 мл). Фазы разделяют и водный слой экстрагируют CH₂Cl₂ (1x50 мл). Объединенные органические фазы промывают насыщенным раствором NaCl (1х25 мл) (360 г/л) и сушат над безводным MgSO ₄ (3 г, KF 0,12%). Раствор фильтруют и фильтрат упаривают в вакууме при комнатной температуре до объема 100 мл. К полученному раствору желтого цвета добавляют 12 г (VI) и затем 0,175 г (1,42 ммоль) диметиламинопиридина (DMAP) и после завершения растворения 5,88 г дициклогексилкарбодиимида (DCC). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение часа. ТСХ показывает отсутствие исходного (VI) (этилацетат/гексан = 1/2, обнаружение распылением с раствором, содержащим H₂SO₄ (31 мл), молибдат аммония (19 г), (NH₄)₄Ce(SO ₄)₄ 2H₂O (1,9 г) и воду (500 мл), при нагревании до 130°С в течение 5 минут). Образовавшийся осадок дициклогексилмочевины (DCU) отфильтровывают и промывают CH₂Cl₂ (1х20 мл). Хлорметиленовый раствор упаривают досуха, получая 24 г (VII).

Пример 3. 10-деацетилбаккатин(III)-13-иловый эфир 2-(2,4-диметоксифенил)-3-(2-нитробензолсульфенил)-4(S)-фенил-5(R)-оксазолидинкарбоновой кислоты (VIII)

Раствор 24 г (VII) в 100 мл тетрагидрофурана упаривают в вакууме, остаток переносят в 150 мл тетрагидрофурана (ТГФ) и смесь упаривают в вакууме до объема 100 мл.

К полученной смеси при комнатной температуре в течение 5 минут добавляют концентрированный гидроксид аммония (33% NH₄OH, 1,8 мл, 30 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение двух часов. ТСХ смеси показывает отсутствие соединения (VII) (этилацетат/гексан: 4/4). Раствор упаривают в вакууме и остаток переносят в МеОН (125 мл). Суспензию перемешивают в течение 2 часов. Осадок фильтруют через фильтр из пористого стекла и промывают (10 мл) МеОН, получая соединения (VIII) (13 г, 12 ммоль, ВЭЖХ А% = 93%, выход 84%). Маточную жидкость, содержащую 9,3 г остатка, утилизируют.

Пример 4. 10-Деацетил-N-дебензоилпаклитаксел (I)

Суспензию 13 г (VIII) в 260 мл метанола при перемешивании обрабатывают в течение 30 минут при комнатной температуре при перемешивании 4,2 мл концентрированной соляной кислотой, разбавленной 130 мл метанола. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение четырех часов, после чего суспензия становится прозрачным раствором желтого цвета. ТСХ смеси показывает отсутствие соединения (VIII) (этилацетат/гексан: 4/3). Раствор медленно разбавляют водой (350 мл) (для предотвращения образования осадка) и гомогенный раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут. К реакционной смеси добавляют CH₂ Cl₂ (200 мл), фазы разделяют и водный слой снова экстрагируют CH₂Cl₂ (2х100 мл). Органические фазы удаляют. Водоспиртовую фазу охлаждают до 0-5°С и разбавляют CH ₂Cl₂(1х100 мл). К полученной смеси с энергичным перемешиванием при 0-5°С по каплям добавляют концентрированный раствор аммиака (3,1 мл, NH₄OH) (в результате температура повышается на 1 град.) до достижения рН 7-8. Двухфазную реакционную смесь перемешивают при указанной температуре в течение 20 минут, затем фазы разделяют и водный слой экстрагируют CH₂ Cl₂ (5x100 мл).

Объединенные органические слои упаривают в вакууме до объема 100 мл и затем перемешивают при комнатной температуре продукт, в процессе чего происходит кристаллизация продукта. Осадок отфильтровывают через фильтр из пористого стекла и затем сушат в вакууме при 40°С, получая 7,5 г указанного в заголовке соединения.

Пример 5. Получение доцетаксела

Соединение (I) (16 г, анализ чистоты ВЭЖХ: 90,57%, 20,49 ммоль) растворяют в смеси абсолютного EtOH и CH₂Cl₂ (1:1, 320 мл) и к полученному раствору добавляют бледно-желтоватый раствор ди-трет-бутилдикарбоната (ВОС)₂О в CH₂Cl ₂ (24,18 ммоль, 5,27 г, растворенные в 5 мл CH₂ Cl₂). После завершения добавления реакционную смесь перемешивают в течение 16 часов при комнатной температуре. ТСХ показывает отсутствие соединения (I) (CH₂Cl₂ /МеОН = 9/1, обнаружение распылением с раствором, содержащим H₂SO₄ (31 мл), молибдат аммония (19 г) и (NH₄)₄Ce(SO₄)₄ 2 H₂O (1,9 г) в воде (500 мл), и нагрев до 130°С в течение 5 минут). CH₂Cl₂ отгоняют и к полученному раствору добавляют уксусную кислоту (0,39 мл). Этанольный кислотный раствор нагревают до 50°С и к полученному раствору добавляют чистую воду (320 мл). Смесь выдерживают при 50°С в течение часа и при комнатной температуре в течение 2 часов. Осадок отфильтровывают с использованием фильтра из пористого стекла, переносят в вакуумную печь и выдерживают в вакууме при 40°С в течение ночи, получая 16,75 г получистого доцетаксела, и 1 г маточной жидкости удаляют.

Сырой продукт дважды перекристаллизовывают, полученный доцетаксел растворяют при 50°С в 95% этаноле (160 мл) и добавляют уксусную кислоту (0,39 мл). К смеси добавляют чистую воду (320 мл) и полученную смесь выдерживают в течение часа при 50°С и в течение дополнительных 2 часов при комнатной температуре. Осадок отфильтровывают с использованием фильтра из пористого стекла, переносят в вакуумную печь и выдерживают в вакууме при 40°С в течение ночи, получая 15,25 г доцетаксела, и 0,4 г маточной жидкости удаляют. Вторую кристаллизацию проводят повторным растворением продукта при 30°С в ацетоне (150 мл) и добавлением гептана (150 мл). Смесь выдерживают при комнатной температуре в течение трех часов. Осадок отфильтровывают с использованием фильтра из пористого стекла, переносят в вакуумную печь и выдерживают в вакууме при 40°С в течение ночи, получая 13,9 г доцетаксела (чистота согласно ВЭЖХ более 99,4%, содержание 7-эпидоцетаксела <0,1%; содержание 10-дегидродоцетаксела <0,1%).

Пример 6. Альтернативное получение доцетаксела

Де-ВОС доцетаксел (30,0 г, 42 ммоль, чистота 98% согласно ВЭЖХ, 0,2% 7-эпиизомера) загружают в реактор объемом 1 л и затем добавляют 60 мл дихлорметана, 150 мл абсолютного этанола и 73 мкл ледяной уксусной кислоты (3% мол.) при 25°С с получением суспензии.

К полученной суспензии при 25°С по каплям добавляют ВОС-ангидрид (11,0 г, 51 ммоль), получая после завершения добавления прозрачный раствор.

По истечении 3 часов реакцию гасят ледяной уксусной кислотой (0,7 мл, 30% моль.) и дихлорметан отгоняют при 30°С в вакууме. После этого добавляют абсолютный этанол (90 мл) и затем отгоняют его в таких же условиях.

Прозрачный раствор нагревают до 50°С и к раствору по каплям в течение 3 часов добавляют воду (570 мл). Суспензию перемешивают при 50°С в течение 1 часа и затем охлаждают до 25°С и перемешивают при указанной температуре в течение 16 часов.

Твердый белый осадок отфильтровывают и промывают дважды раствором воды (40 мл) и абсолютного этанола (18 мл).

Сырой продукт переносят в реактор с 250 мл этанола и 630 мкл ледяной уксусной кислоты.

Смесь нагревают до 50°С, при этом происходит полное растворение реагентов. К полученному раствору по каплям в течение двух часов добавляют воду (570 мл). Затем смесь охлаждают в течение 1 часа до 25°С, спустя 90 минут суспензию фильтруют на Gooch P3 и промывают раствором воды (40 мл) и абсолютного этанола (18 мл).

Доцетаксел, полученный в виде твердого белого вещества, сушат в вакууме при 55°С в течение 16 часов, конечная масса высушенного твердого вещества составляет 32,6 г.

Сырой доцетаксел (5,0 г, 6,2 ммоль) загружают в реактор объемом 500 мл и растворяют при 50°С в ацетоне (50 мл).

К раствору медленно в течение примерно 1 часа при 50°С добавляют н-гептан (50 мл). Суспензию, полученную таким образом, перемешивают в течение часа при 50°С, затем охлаждают до 25°С и перемешивают при указанной температуре в течение 16 часов.

Суспензию фильтруют на gooch P3, промывают один раз н-гептаном (15 мл) и сушат при 55°С в вакууме в течение 16 часов, получая 4,40 г доцетаксела в виде твердого белого вещества (выход 89%, чистота согласно ВЭЖХ >99,5%, содержание 7-эпидоцетаксела <0,10%, 10-дегидродоцетаксела <0,10%).

Краткое описание фигур

На Фиг.1 представлена рентгенограмма образца, полученного в соответствии с методикой примера 5.

На Фиг.2 представлена DSC термограмма образца, полученного в соответствии с методикой примера 5.