пиримидинзамещенные производные пурина, фармацевтическая композиция на их основе, способ ингибирования протеинкиназ, способ лечения или профилактики заболеваний, чувствительных к ингибированию протеинкиназ и способ лечения пролиферативных заболеваний

Формула изобретения

1. Соединение формулы (I):



где

R¹ выбран из группы, включающей Н, галоген и С₁-С₆алкил,

R² выбран из группы, включающей Н, CN, необязательно замещенный С₁-С₁₂алкил, необязательно замещенный С₃-С₁₂циклоалкил, необязательно замещенный С₂-С₁₂гетероциклоалкил, необязательно замещенный С₆-С₁₈арил, необязательно замещенный С ₁-С₁₂алкилокси, COR⁸, COOH, COOR ⁸, CONR⁸R⁹ и ацил,

причем если R² представляет собой необязательно замещенный С₆-С₁₈арил, указанный необязательный заместитель выбран из F и СН₃, если R² представляет собой необязательно замещенный С₁-С₁₂алкил, указанный необязательный заместитель выбран из СН₃ , ОСН₃ и O-С(СН₃)₃, если R ² представляет собой необязательно замещенный С₃ -С₁₂циклоалкил, указанный необязательный заместитель представляет собой СН₃; если R² представляет собой необязательно замещенный С₂-С₁₂гетероциклоалкил, указанный необязательный заместитель выбран из группы, состоящей из СООС(СН₃)₃, СО(СН₂)₂ СН₃, COPh и CO(5-метилтиофен-2-ил),

R ³ и R⁴ каждый независимо выбран из группы, включающей Н, С₁-С₆алкил и OR⁸,

R⁶ выбран из группы, включающей Н, ОН, OR⁸ , СН₂ОН, NH₂ и NR⁸R⁹ , или

R⁸ и R⁹, когда взяты вместе с атомами, к которым они присоединены, формируют циклическую группу,

каждый R⁸ и R⁹ независимо выбран из группы, включающей Н и С₁-С₁₂ алкил;

каждый R² независимо представляет собой C₁-С₆алкил,

q представляет собой целое число, выбранное из группы, включающей 0 и 1,

Х представляет собой группу формулы (CR¹⁰ ₂)_m,

каждый R¹⁰ независимо выбран из группы, включающей Н и C₁-C ₆ алкил,

m представляет собой целое число, выбранное из группы, включающей 0, 1, 2 и 3,

причем С₂ -С₁₂гетероциклоалкил содержит по меньшей мере один гетероатом, выбранный из группы, состоящей из О, N и S, в по меньшей мере одном кольце, причем каждое кольцо является от 3-х до 10-членным, или их фармацевтически приемлемые соли или N-оксиды.

2. Соединение по п.1, в котором q представляет собой 0.

3. Соединение по п.1, в котором R³ представляет собой Н.

4. Соединение по п.1, в котором R⁴ представляет собой Н.

5. Соединение по п.1, в котором m выбрано из группы, включающей 0, 1 и 2.

6. Соединение по п.1, в котором m представляет собой 0.

7. Соединение по п.1, в котором m представляет собой 1.

8. Соединение по п.7, в котором один R¹⁰ представляет собой Н, а Х представляет собой группу формулы:



где R¹⁰ такой, как определено в п.1.

9. Соединение по п.1, охватываемое общей структурной формулой:



где R¹, R², R⁶ и R¹⁰ такие, как определено в п.1.

10. Соединение по п.1, в котором R¹⁰ выбран из группы, включающей Н, метил, этил, пропил, изопропил и бутил.

11. Соединение по п.1, в котором R¹⁰ выбран из группы, включающей Н, метил и этил.

12. Соединение по п.1, в котором R ¹ представляет собой Н.

13. Соединение по п.1, в котором R⁶ выбран из группы, включающей NH₂ и NR⁸R⁹, где R⁸ и R⁹ такие, как определено в п.1.

14. Соединение по п.1, в котором R⁶ представляет собой NH₂.

15. Соединение по п.1, в котором R² выбран из группы, включающей Н, циано, необязательно замещенный С₁-С ₁₂алкил, необязательно замещенный С₃-С₁₂ циклоалкил, необязательно замещенный С₂-С₁₂ гетероциклоалкил и необязательно замещенный С₆-С ₁₈арил, где указанные необязательные заместители такие, как определено в п.1.

16. Соединение по п.15, в котором необязательно замещенный С₆-С₁₈арил представляет собой группу формулы:



где р представляет собой целое число, выбранное из группы, включающей 0, 1, 2, 3, 4 и 5;

каждый R ¹³ независимо выбран из группы, включающей Н, F и метил.

17. Соединение по п.15, в котором необязательно замещенный С₆-С₁₈арил представляет собой группу формулы:



где R¹³ такой, как определено в п.16;

s представляет собой целое число, выбранное из группы, включающей 0, 1, 2, 3 и 4;

r представляет собой целое число, выбранное из группы, включающей 1, 2 и 3.

18. Соединение по п.1, в котором R² выбран из группы, включающей метил, этил, изопропил, пропил, 3,3-диметил-пропил, циклопропил, циклопентил, 3-метилциклопентил, циклогексил, 4-метилциклогексил, бутил, втор-бутил, изобутил, 3,3-диметил-бутил, 2-этил-бутил, пентил, пент-4-енил, гексил, гептил, октил, циано, метоксиметил, бутоксиметил, трет-бутоксиметил и тетрагидрофуран-3-ил.

19. Соединение по п.1, выбранное из группы, включающей:











или их фармацевтически приемлемая соль.

20. Фармацевтическая композиция для лечения состояния у млекопитающего, в котором ингибирование одной или более протеинкиназ, выбранных из группы, включающей серин-треониновую протеинкиназу, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент и киназу PI3K, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент, предотвращает, замедляет или дает улучшение патологии или симптоматики такого состояния, включающая соединение по любому из пп.1-19 и фармацевтически приемлемый растворитель, наполнитель или носитель.

21. Способ ингибирования протеинкиназы, выбранной из группы, включающей серин-треониновую протеинкиназу, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент и киназу PI3K, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент, включающий воздействие на протеинкиназу, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент и/или ее кофактор(ы) эффективного количества соединения по любому из пп.1-19.

22. Способ по п.21, в котором серин-треониновая протеинкиназа, или ее фрагмент, или комплекс является mTOR протеинкиназой или ее фрагментом, комплексом или функциональным эквивалентом.

23. Способ по п.21, в котором протеинкиназа является киназой PI3K, или ее фрагментом, или комплексом, или функциональным эквивалентом.

24. Способ лечения или профилактики состояния у млекопитающего, в котором ингибирование одной или более протеинкиназ, выбранных из группы, включающей серин-треониновую протеинкиназу, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент и киназу PI3K, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент, предотвращает, замедляет или дает улучшение патологии или симптоматики такого состояния, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-19.

25. Способ по п.24, в котором серин-треониновая протеинкиназа, или ее фрагмент, или комплекс является mTOR протеинкиназой, или ее фрагментом, или комплексом, или функциональным эквивалентом.

26. Способ по п.24, в котором протеинкиназа является киназой PI3K, или ее фрагментом, или комплексом, или функциональным эквивалентом.

27. Способ по п.24, в котором состояние представляет собой рак.

28. Способ по п.24, в котором заболевание представляет собой предраковое состояние или гиперплазию.

29. Способ по п.24, в котором состояние представляет собой аутоиммунное или воспалительное заболевание или заболевание, обусловленное чрезмерной неоваскуляризацией.

30. Способ профилактики или лечения пролиферативного состояния у субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-19 субъекту.

31. Способ по п.30, в котором состояние представляет собой рак.

Описание изобретения к патенту

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к соединениям пурина, которые могут использоваться в качестве ингибиторов киназ. В частности, настоящее изобретение относится к 2-(морфолин-4-ил), 6-(пиримидин-5-ил) замещенным производным пурина, способам их получения, фармацевтическим композициям, включающим указанные соединения, и использованию указанных соединений при лечении некоторых заболеваний/физиологических состояний, связанных с киназами.

Уровень техники

Поиск ингибиторов киназ показал себя плодотворной областью для исследования полезных фармацевтически активных веществ. Киназы, которые также известны как фосфотрансферазы, являются ферментами, которые передают фосфорнокислые группы от высокоэнергетических молекул донора (например, АТФ) к определенным целевым молекулам (обычно называемым субстратами) в процессе, который называют фосфорилированием. Одна из наиболее больших групп киназ - протеинкиназы, которые действуют на и модифицируют активность определенных белков.

В результате указанной активности протеинкиназы вовлечены во многие клеточные процессы, такие как передача сигналов и подвержение клетки биохимическим реакциям в метаболизме. Определенные клеточные сигнальные процессы были определены как важные во многих заболеваниях, поэтому эффективное ингибирование определенных процессов передачи сигналов клетки обладает потенциалом для остановки развития указанных физиологических условий. Соответственно, киназы представляются привлекательными для лекарственных химиков, поскольку условия для ингибиторов киназы потенциально позволяют контролировать определенные сигнальные процессы, приводя таким образом к контролю определенных заболеваний.

Одно семейство киназ, связанных с нежелательными физиологическими условиями в организме, является семейством фосфатидилинозитол 3-киназ (PI3K), которые вовлечены в широкий диапазон клеточных событий, таких как миграция клеток, клеточная пролиферация, онкогенная трансформация, выживание клеток, сигнальная трансдукция и внутриклеточное перемещение белков. Указанное семейство киназ недавно было центром крупного исследования, направленного на развивающиеся методы лечения для ряда симптомов, таких как пролиферативные заболевания, например рак, иммунные и воспалительные заболевания, заболевания, вызываемые чрезмерной неоваскуляризацией и отторжением трансплантата.

Семейство фосфатидилинозитол 3-киназ (PI3K) - группа ферментов, которые производят фосфатидилинозитоловые вторичные мессенджеры . Эти липиды впоследствии включаются в широкий диапазон физиологических процессов. В клетках млекопитающих большое семейство PI3K было разделено на три класса, называемые как I, II и III, у каждого из которых есть свои собственные особенности с точки зрения молекулярной структуры и субстрат-специфичности. Предпочтительным субстратом in vivo для класса I PI3K является фосфатидилинозитол-4,5 бифосфат, который фосфорилируется с получением фосфатидилинозитол-3,4,5 трифосфата. Далее класс I подразделен на классы IA и IB PI3K-киназ. Класс ферментов IA состоит из любой из каталитических субъединиц (р110 , р110 , или р110 ), связанных в комплекс с любой из регулирующих субъединиц (р85 , р85 или р55 ). Существует только один фермент класса IB PI3K, он состоит из р110 каталитической и р101 регуляторной субъединиц. Есть также три класса II PI3K-киназ (CII , CII , и CII ) и один класс III PI3K-киназ (Vps34).

Класс I PI3K-киназ являются наиболее изученными членами семейства и являются ключевыми участниками множества внутриклеточных сигнальных путей, которые интегрируют множество сигналов, инициированных многими факторами роста. Ферменты IA класса активируются тирозинкиназами (например, рецепторами фактора роста), антиген-рецепторами и цитокиновыми рецепторами, в то время как класс ферментов IB активируется рецепторами, сопряженными с G-белками (GPCR рецепторы). В ответ на активацию PI3K-киназы генерируют липидные вторичные мессенджеры, которые связываются с и активизируют определенные белки в различных путях трансдукции сигнала. Пути трансдукции сигнала остаются активными до дефосфорилирования вторичных липидных мессенджеров PI3K ферментами фосфатаз, в частности онкоген-PTEN.

Сигнальный путь PI3K крайне важен для многих аспектов роста клеток и выживания через его регулирование широко расходящихся физиологических процессов, которые включают развитие клеточного цикла, дифференцирование, транскрипцию, трансляцию и апоптоз. Конститутивная активация пути PI3K вовлечена и в патогенез и в прогрессирование широкой разновидности раковых новообразований, и сейчас есть быстро накапливающиеся данные, которые окончательно демонстрируют, что передача сигналов PI3K часто дерегулирована при раковых заболеваниях. Считается, что дерегуляция передачи сигналов PI3K происходит двумя различными способами. Первым является увеличение передачи сигналов PI3K в результате активации генных мутаций, увеличения и сверхэкспрессии PI3K-киназ или обратных рецепторов, которые активизируют PI3K-киназы. Например, PI3K каталитическая субъединица увеличена и сверхэкспрессируется при раке яичек и раке шейки матки. Точно так же обратные рецепторы тирозинкиназ, которые активизируют PI3K, обычно мутируют, возрастает их количество и сверхэкспрессируются, например, EGFR при раке груди, яичек или легких.

Кроме того, активация эффекторов, влияющих на PI3K, может также способствовать дерегуляции пути PI3K, например Akt/PKB (протеинкиназа В) сверхэкспрессирована и активирована при раке груди, раке поджелудочной железы и раке яичек. Кроме того, члены Ras-семейства, которые вовлечены в активацию PI3K, часто мутируют, например, при колоректальном раке и раке поджелудочной железы. Второй механизм разрегуляции PI3K включает потерю фосфатазы супрессора опухоли PTEN, которая происходит при многих агрессивных опухолях головного мозга, эндометриальном раке и раке молочной железы, а также при меланоме.

Одним из специфичных клеточных сигнальных путей, опосредованных семейством PI3K киназ, является путь фосфатидилинозитол 3-киназный (PI3K)/Akt путь. Этот путь критически вовлечен в опосредование продолжительности жизни клетки и является главным сигнальным компонентом, регулирующимся тирозинкиназами рецептора клеточного роста (RTK-киназы). RTK-киназы фактора клеточного роста активируют класс-IA PI3K, который является гетеродимером, состоящим из р85 регулирующей и р110 каталитической субъединиц. Малый GТРазный Ras-белок может также рекрутировать и активизировать PI3K через прямое связывание с р110. В клеточной мембране PI3K катализирует генерацию липидного вторичного мессенджера фосфатидилинозитол-3,4,5-трифосфата (РIP3). Впоследствии, PIP3 включает другие влияющие молекулы - в частности серин-треониновые киназы Akt и PDK1, посредством связывания с их плекстрин-гомологичными (РН) доменами. В мембране Akt частично активируется посредством фосфорилирования треонина в 308 положении в его петле активации PDK1. Дополнительное фосфорилирование по серину 473 в С-конце Akt приводит к ее полной активации. Akt в свою очередь регулирует широкий диапазон целевых белков, один из которых является относящейся к млекопитающему целью Рапамицина (известный как mTOR). Уровни PIP3 в клетке строго отрегулированы, и действие некоторых липидных фосфатаз быстро его уменьшает. Особенно интересна фосфатаза PTEN, которая преобразовывает PIP3 обратно в PIP2 и таким образом отключает передачу сигналов PI3K. Сигнальный путь PI3K-Akt регулирует множество нормальных клеточных процессов, включая клеточную пролиферацию, продолжительность жизни клеток, клеточный рост и подвижность - процессы, которые важны для образования опухолей.

Роль пути PI3K/Akt в онкогенезе была также экстенсивно исследована, и было установлено, что мутации или альтернативная экспрессия большинства компонентов указанного пути были широко вовлечены во многие раковые образования. Амплификация гена р110 происходит при некоторых случаях рака яичек человека, также увеличение Akt найдено при раке яичников, груди и раке ободочной кишки. Кроме того, активирование мутаций в р85 было обнаружено при раке яичников и раке ободочной кишки. Наиболее важный белок PTEN был идентифицирован как главный супрессор человеческих опухолей, и мутации потери функции в гене PTEN чрезвычайно распространены при спорадической глиобластоме, меланоме, раке простаты, эндометриальных карциномах, и значительный процент опухолей груди, рака легких и лимфомы также несут мутации PTEN. Таким образом, через множество механизмов, высокий процент человеческих раковых образований обладает активированной передачей сигналов PI3K. Значительно, что показана важная роль mTOR при онкогенной трансформации, вызванной PI3K и Akt.

В дополнение к основательным коррелятивным данным, представленным выше, прямое доказательство участия разрегулированной PI3K сигнализации при раке получено на генетических моделях мышей. Например, у мышей с конститутивно активизированной р85 регуляторной субъединицей PI3K развивается злокачественная лимфома, когда совпадает с р53-нокаутированными мышами. Также, ретровиральное введение Akt и Ras вызывало развитие глиобластом у мышей. Объединенные, все эти данные дают твердую проверку правильности для развития новых противораковых стратегий на PI3K-киназы. Действительно недавний интерес к ингибиторам PI3K, связанный со многими соединениями, развивающийся и теперь, продемонстрировал противоопухолевую активность на моделях животных. Наиболее передовые соединения теперь проходят клинические испытания фазы I. Соответственно соединения, которые являются ингибиторами PI3K, как ожидали бы, покажут интересную биологическую активность, поскольку у ингибиторов PI3K есть потенциал для блокировки PI3K/Akt сигнального пути и, таким образом, создания основы для терапии в заболеваниях, включающих разрегуляцию этого пути.

Кроме того, изоформы PI3k-киназ р110 и р110 регулируют различные аспекты иммунных и воспалительных ответов. Следовательно, есть большой интерес к роли передача сигналов PI3k-киназ в области иммунных и воспалительных заболеваний, так же как и в области отторжения трансплантатов.

Другая область, которая вызвала интерес, была область серин-треониновых протеинкиназ. Одной из серин-треониновых протеинкиназ, которая вызвала значительный интерес, является mTOR.

mTOR - серин-треониновая протеинкиназа с молекулярной массой 289 килодальтон, которая является PI3K-подобной киназой, связанная с митогенетическими стимулами и питательным статусом при клеточном росте и делении. mTOR была обнаружена во время исследований, проводимых для понимания механизма действия рапамицина. После входа в клетки рапамицин связывается с его внутриклеточной мишенью FKBP12, и затем образовавшийся комплекс связывается и специфично ингибирует mTOR. mTOR была поэтому также названа FKBP-RAP ассоциированный белок (FRAP), RAP FKBP12 (RAFT1) мишень и RAP мишень (RAPT1). Клетки, ответственные за отторжение органа, прекращают расти из-за способности рапамицина замедлять анаболические сигналы, скоординированные mTOR. Так как ингибирование роста клеток представляет собой эффективную цель для лечения рака, проектирование новых лекарств, которые ингибируют mTOR, потенциально будет иметь терапевтическое значение.

У человека mTOR опосредует анаболические сигналы из 2 источников, а именно питательные вещества, которые проходят в клетку, и активированные рецепторы фактора роста. mTOR существует по крайней мере в двух различных комплексных соединениях: рапамицин-чувствительное комплексное соединение, называемое как mTOR комплекс 1 (mTORC1), определяемый его взаимодействием со вспомогательным белковым раптором (регулирующий вспомогательный белок mTOR). Нормальная активация mTOR приводит к увеличению трансляции белка, потому что mTORC1 фосфорилирует и активизирует регуляторы трансляции: эукариотический инициирующий фактор 4Е-связывающий белок 1 и рибосомную р70 S6 киназу. Таким образом, ингибируя mTOR, рапамицин вызывает уменьшение фосфорилирования этих эффекторов и снижение синтеза белка, эффективно блокируя предростовые действия mTOR.

Второе комплексное соединение, mTOR комплекс 2 (mTORC ₂), является рапамицин-нечувствительным и определяется его взаимодействием с риктором (рапамицин-нечувствительный компаньон mTOR). mTORC2 вовлечен в регулирование киназы про-выживания Akt/PKB, фосфорилируя ее по положению S473. Вместе с фосфорилированием PDK1 по положению Т308 фосфорилирование S473 необходимо для полной активации Akt. Недавние исследования указывают, что пролонгированная обработка рапамицином в некоторых клетках также подавляет трансляцию и функцию TORC2 по ингибированию Akt и что это свойство рапамицина способствует антиапоптотическим эффектам препарата. mTOR - также один из главных даунстрим эффекторов пути фосфатидилинозитол 3-киназ (PI3K)/Akt, и поэтому ингибирование mTOR обеспечивает дальнейшую возможность ингибировать, по крайней мере частично, путь PI3K/Akt.

Дополнительный метаболический путь, на который влияет mTOR, который особенно важен при почечной клеточной карциноме, включает в себя гипоксия-индуцируемый фактор (HIF). Обычно, при заболевании фон Гиппеля-Линдау в чистых клетках рака почки можно наблюдать, что происходит накопление чувствительных к кислороду факторов транскрипции HIF-1 и HIF-2. Накопление этих факторов приводит к увеличенной стимуляции фактора роста эндотелия сосудов (VEGF), фактора роста тромбоцитов и трансформирующего фактора роста. Этот эффект увеличивается активацией mTOR, который стимулирует и функцию стабилизации белка и функцию трансляции белков и, таким образом, увеличивает активность HIF-1.

Также было установлено, что продукты гена туберозно-склерозного комплекса TSC1 и TSC2 функционируют вместе, ингибируя mTOR-зависимую передачу сигналов старения. Мутации этих генов происходят при туберозном склерозе, и потеря их функции представляет собой еще один путь, который приводит к увеличенной активности mTOR и увеличивает продуцирование VEGF. TSC2 также регулирует HIF. Таким образом, исследования, оценивающие воздействие TSC1 и TSC2 мутаций, демонстрируют связь увеличенного VEGF и активизированных mTOR путей, приводящих к регенерации тканей.

В настоящее время четыре mTOR ингибитора были проверены в клинических исследованиях: прототип рапамицина и три рапамицин производных, CCI-779 (темсирлимус), RAD001 (эверолимус) и АР23573. Рапамицин, который также называют сирлимус, является естественным антибиотиком, продуцированным Streptomyces hygroscopicus. Первоначально он был разработан как фунгицидный препарат, направленный против Candida albicans, Cryptococcus neoformans и Aspergillus fumigatus. Позже рапамицин был исследован как иммунодепрессивный агент, и эти исследования помогли в понимании механизма его действия. Как противораковое средство рапамицин показал способность ингибирования роста нескольких крысиных и человеческих линий раковых клеток с дозозависимым характером, а также в культурах ткани и в моделях ксенотрансплантата. Для шестидесяти линий опухолевых клеток, скринированных в Национальном Онкологическом институте США, общая чувствительность к препарату была замечена при дозах менее чем 2000 нанограммов/мл, наиболее достоверных в клеточных линиях опухоли при лейкемии, опухоли яичников, раке груди, раке центральной нервной системы и мелкоклеточном раке легкого. Кроме того, рапамицин ингибирует онкогенную трансформацию клеток человека, вызванную PI3K или Akt, и показывает ингибирование метастатического роста опухоли и антиангиогенные эффекты in vivo на моделях мыши.

Основанные на этих доклинических результатах были проведены клинические испытания рапамицина в качестве лекарства от рака, а также были разработаны аналоги рапамицина с более благоприятными фармацевтическими свойствами. CCI-779, более растворимое в воде эфирное производное рапамицина, было идентифицировано исследователями фармацевтической компании Вайет Айерст (Wyeth Ayerst) как нецитотоксический агент, который задерживал пролиферацию опухолевых клеток. В нетоксичных дозах CCI-779 сам продемонстрировал противоопухолевую активность или в комбинации с цитостатическими агентами во множестве моделей рака человека, таких как глиомы, рабдомиосаркома, примитивная нейроэктодермальная опухоль, такая как медуллобластома, линии клеток рака органов, расположенных в области головы и шеи, простаты, рака молочной железы и рака поджелудочной железы. Обработка мышей CCI-779 замедляет активность p70S6K и уменьшает неопластическую пролиферацию. Как с рапамицин, PTEN-дефицитные человеческие опухоли более чувствительны к CCI-779-зависимому ингибированию роста, чем PTEN-экспрессирующие клетки. В частности, исследования in vitro в группе восьми человеческих клеточных линий рака молочной железы показали, что шесть из восьми изученных линий рака ингибировались CCI-779 с IC₅₀ в диапазоне ниже наномолярного. Две линии, однако, показали резистентность с IC₅₀>1 мкМ. Восприимчивые клеточные линии были эстроген-рецептор положительными или сверхэкспрессирующими HER-2/Neu, или у них отсутствовал продукт гена супрессора опухоли PTEN. Основная токсичность CCI-779 включала дерматологическую токсичность и умеренную миелосупрессию (главным образом тромбоцитемию).

RAD001, 40-O-(2-гидроксиэтил)-рапамицин, является другим аналогом рапамицина, который можно принимать перорально. Его противоопухолевая активность была исследована в различных человеческих линиях раковых клеток in vitro и в моделях ксенотрансплантата in vivo с IC₅₀ в пределах от 5-1800 нМ. В данной модели были показаны p70S6K ингибирование и противоопухолевые эффекты с оптимальным действием, достигнутым при приеме 2,5 мг/кг/день при меланоме, раке легких, раке поджелудочной железы и карциноме ободочной кишки. Точно так же RAD001 продемонстрировал зависимую от концентрации противоопухолевую активность в сингенной модели карциномы поджелудочной железы крысы с нерегулярным планом дозирования. RAD001 также показал антиангиогенную активность и ингибирование пролиферации эндотелиальных сосудистых клеток человека. Токсичность, о которой сообщают для RAD001, включает гиперхолестеринемию, гипертриглицеридемию, умеренную лейкоцитопению и тромбоцитопению. В исследованиях фазы I, выполненных на пациентах с развитым раком, RAD001 показал хороший профиль безопасности с умеренной токсичностью смягчения кожи и слизистой токсичностью до 30 мг еженедельно. Предварительные результаты эффективности показали объективный ответ у пациентов с немелкоклеточной карциномой легкого.

АР23573 - наиболее новый аналог рапамицина, о котором сообщают в клинических исследованиях. Это - содержащее фосфор соединение, синтезированное при помощи моделируемых вычислительных исследований. АР23573, как открыли, был устойчив в органических растворителях, водных растворах при множестве значений рН и в плазме и цельной крови, in vitro и in vivo и обладал сильным ингибированием разнообразных человеческих линий опухолевых клеток как in vitro так и в ксенотрансплантатах, внедренных в чистых мышей, один или в комбинации с цитостатическими или целенаправленными агентами. В клинических исследованиях фазы I AP23573 назначали внутривенно ежедневно в течение 5 дней каждые 2 недели. Дозолимитируемая токсичность - 3 ротовых мукозита серьезной степени, случившиеся во время первого цикла. Другие побочные эффекты более мягки, включая меньшинство более мягких случаем мукозита, усталость, тошноту, сыпь, анемию, нейтрофилопению, диарею, гиперлипидемию и тромбоцитопению. Предварительная противоопухолевая активность наблюдалась при всех значениях доз.

Таким образом существует множество исследований, которые демонстрируют, что mTOR ингибиторы могут улучшить выживание больного раком. Однако рапамицин и его аналоги не показали универсальную противоопухолевую активность в ранних клинических исследованиях. Ответы на лечение варьируются среди различных типов рака от низкого, от меньше чем 10% у пациентов с глиобластомами и поздней стадии рака клеток почки, до высокого, приблизительно для 40% у пациентов с лимфомой из клеток мантийной зоны. Знание статуса PTEN и PI3K/Akt/mTOR-связанного метаболического пути могло бы помочь при выборе типов опухоли, которые ответят на mTOR ингибиторы. Кроме того, вследствие того что много типов опухоли до сих пор не отвечают на терапию только рапамицин производными, важно продолжить поиск факторов, предсказывающих устойчивость или чувствительность к mTOR ингибиторам. Особенно интересными будут молекулы, которые непосредственно ингибируют активность mTOR киназы, предполагается, что такие молекулы будут ингибировать и mTORC1 и mTORC2. Такой ингибитор мог бы быть полезным для лечения опухолей с увеличенным фосфорилированием Akt и мог бы уменьшать рост, пролиферацию и эффекты выживания, которые связаны с активацией Akt. Если mTOR-риктор - главный активатор Akt-зависимых процессов выживания клеток, такой препарат мог бы запустить апоптоз в опухолевых клетках, которые адаптированы к Akt-зависимым регулирующим механизмам.

Кроме того, mTOR ингибиторы показали высокую эффективность при профилактике резекции органов после трансплантации посредством воздействия на иммунные реакции, демонстрируя потенциал для обработки аутоиммунных и воспалительных заболеваний наравне с раком.

Принимая во внимание роль изоформ РВК-киназы в качестве ключевых компонентов нисходящих сигнальных путей ангиогенных факторов роста, таких как VEGF, FGF и PDGF, так же как и ангиогенных цитокинов, и принимая во нимание роль mTOR в регулировании сосудистого эндотелиального фактора роста (VEGF), PI3K-киназные и mTOR ингибиторы обладают потенциалом для лечения заболеваний, обусловленных патологической неоваскуляризацией. Это происходит во время опухолегенеза, воспалительных состояниях, таких как ревматоидный артрит и глазные неоваскулярные заболевания, например возрастная макулярная дегенерация (AMD), ретинальные сосудистые заболевания (окклюзия вен и диабетическая ретинопатия) и другие всевозможные пролиферативные сосудистые нарушения.

mTOR и PI3K были идентифицированы как протеинкиназы, которые вовлечены во многие нарушения, и соединения, которые направлены на одну или несколько этих киназ, должны показать полезную биологическую активность. Соответственно, соединения, которые являются mTOR и/или PI3K ингибиторами, есть потенциал для разработки на их основе биологически активных соединений, которые, как ожидается, будут иметь улучшенные полезные фармацевтические свойства при лечении пролиферативных заболеваний, таких как рак, иммунные и воспалительные заболевания, заболевания, вызванные чрезмерной неоваскуляризацией, и отторжение трансплантата органа.

Составы, которые ингибируют и mTOR и PI3K одновременно, как ожидается, обеспечат сильный антипролиферативный, ангиогенный и противоопухолевый эффекты, так как эти соединения действуют сразу на нескольких этапах PI3K/Akt/mTOR метаболического пути. Несколько ингибиторов этого типа в настоящее время исследуются в клинических условиях впервые (например, BEZ235, XL765, GDC0941, РХ866, SF1126).

Раскрытие изобретения

Существующее изобретение предусматривает пиримидинзамещенные производные пурина формулы (I):

где:

R¹ выбран из группы, включающей: Н, галоген или необязательно замещенный C₁-C₆ алкил;

R² выбран из группы, включающей Н, галоген, OH, NO₂, CN, NH₂, необязательно замещенный С₁-С ₁₂ алкил, необязательно замещенный C₂-C ₁₂ алкенил, необязательно замещенный C₂-C ₁₂ алкинил, необязательно замещенный C₂-C ₁₂ гетероалкил, необязательно замещенный С₃-С ₁₂ циклоалкил, необязательно замещенный С₃-С ₁₂ циклоалкенил, необязательно замещенный C₂ -C₁₂ гетероциклоалкил, необязательно замещенный C ₂-C₁₂ гетероциклоалкенил, необязательно замещенный C₆-C₁₈ арил, необязательно замещенный С ₁-С₁₈ гетероарил, необязательно замещенный С ₁-С₁₂ алкилокси, необязательно замещенный C ₂-C₁₂ алкенилокси, необязательно замещенный C₂-C₁₂ алкинилокси, необязательно замещенный С₂-С₁₀ гетероалкилокси, необязательно замещенный С₃-С₁₂ циклоалкилокси, необязательно замещенный С₃-С₁₂ циклоалкенилокси, необязательно замещенный C₂-C₁₂ гетероциклоалкилокси, необязательно замещенный C₂-C₁₂ гетероциклоалкенилокси, необязательно замещенный C₆-C₁₈ арилокси, необязательно замещенный C₁-C₁₈ гетероарилокси, необязательно замещенный С₁-С₁₂алкиламино, SR⁸, SO₃H, SO₂NR⁸ R⁹, SO₂R⁸, SONR⁸R ⁹, SOR⁸, COR⁸, COOH, COOR⁸ , CONR⁸R⁹, NR⁸COR⁹ , NR⁸COOR⁹, NR⁸SO2R⁹ , NR⁸CONR⁸R⁹, NR⁸ R⁹ или арил;

R³ и R ⁴ каждый независимо выбраны из группы, включающей Н, F, Cl, Br, OH, необязательно замещенный С₁-С₆ алкил, OR⁸, OCOR⁸, CH₂OH, NH ₂, NR⁸R⁹, NR⁸COR⁹ и NR⁸SO₂R⁹;

R⁶ выбран из группы, включающей Н, OH, OR⁸ , , OCOR⁸, CH₂OH, NH₂, NR ⁸R⁹, , , NR⁸COR⁹ и NR⁸SO ₂R⁹;

каждый R⁸ и R ⁹ независимо выбраны из группы, включающей Н, необязательно замещенный С₁-С₁₂ алкил, необязательно замещенный C₂-C₁₂ алкенил, необязательно замещенный C₂-C₁₂ алкинил, необязательно замещенный C₂-C₁₀ гетероалкил, необязательно замещенный С₃-С₁₂ циклоалкил, необязательно замещенный С₃-С₁₂ циклоалкенил, необязательно замещенный C₂-C₁₂ гетероциклоалкил, необязательно замещенный C₂-C₁₂ гетероциклоалкенил, необязательно замещенный C₆-C₁₈ арил и необязательно замещенный С₁-С₁₈ гетероарил; или

R⁸ и R^9, когда взяты вместе с атомами, к которым они присоединены, формируют необязательно замещенную циклическую часть;

представляет собой защитную группу для кислорода;

каждый представляет собой независимо защитную группу для азота;

каждый R^z независимо выбран из группы, включающей C₁-C₆ алкил, гало-C₁ -C₆ алкил, гидрокси-C₁-C₆ алкил, C₁-C₆ алкилокси C₁-C₆ алкил, циано C₁-C₆ алкил, аминоС₁ -C₆алкил, С₁-C₆алкиламиноС ₁-С₆алкил, и ди(С₁-C₆алкил)aминoC ₁-C₆алкил;

q представляет собой целое число, выбранное из группы, включающей 0, 1, 2, 3 и 4;

X представляет собой группу формулы (CR¹⁰ ₂)_m;

каждый R ¹⁰ независимо выбран из группы, включающей: Н и необязательно замещенный C₁-С₆ алкил;

m является целым числом, выбранным из группы, включающей 0, 1, 2, 3 и 4;

или их фармацевтически приемлемую соль, N-оксид или пролекарство.

Как с любой группой структурно связанных соединений, которые обладают специфической полезностью, некоторые воплощения вариантов соединений Формулы (I) особенно полезны в их практическом применении по настоящему изобретению.

В различных воплощениях q представляет собой целое число, выбранное из группы, включающей 0, 1, 2, 3 и 4. В некоторых воплощениях q равно 4. В некоторых воплощениях q равно 3. В некоторых воплощениях q равно 2. В некоторых воплощениях q равно 1. В некоторых воплощениях q равно 0.

В некоторых воплощениях, где q отлично от 0, каждый R^z может быть выбран из группы, включающей F, Cl, Br, метил, трифторометил и этил. R^z заместитель может быть присоединен в 2, 3, 5 или 6 положении морфолинового кольца и при условиях, когда есть множественные R^z заместители, каждый R^z заместитель находится независимо от других таким образом, чтобы где есть многократные R^z заместители, тогда два из R^z заместителей могли быть расположены на том же самом углероде на морфолиновом кольце, или каждый заместитель может находиться на различных атомах углерода.

В некоторых воплощениях q равно 1, и R^z заместитель находится в 3 положении морфолинового кольца. Это предусматривают соединения формулы (Ia):

или их фармацевтически приемлемая соль или пролекарство;

где R¹, R² , R³, R⁴, R⁶, R^z и Х определены выше.

В некоторых воплощениях соединений изобретения q равно 0. Это предусматривают соединения формулы (Ib):

или их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства;

где R¹, R² , R³, R⁴, R⁶ и Х определены выше.

В некоторых воплощениях R³ выбран из группы, включающей Н, OR⁸ и необязательно замещенный C₁-С₆ алкил.

В некоторых воплощениях R³ представляет собой OR⁸, где R⁸ представляет необязательно замещенный C ₁-С₆ алкил. Примеры групп R³ этого типа включают метокси, трифторометокси, этокси, изопропокси, пропокси или бутокси. В некоторых воплощениях R³ представляет собой метокси.

В некоторых воплощениях R³ представляет собой необязательно замещенный C₁-С ₆алкил. Примеры групп R³ этого типа включают метил, трифторометил, этил, пропил, изопропил или бутил. В некоторых воплощениях R³ представляет собой метил.

В некоторых воплощениях R³ выбран из группы, включающей Н, метокси или метил. В некоторых воплощениях R³ представляет собой Н.

В некоторых воплощениях R⁴ выбран из группы, включающей Н, F, Cl, Br, ОН и NH₂ . В некоторых воплощениях R⁴ представляет собой Н.

В некоторых воплощениях соединений, в особенности соединений формулы (I), (Ia) и (Ib), R³ и R⁴ оба представляют собой Н.

В некоторых воплощениях изобретения q равно 0, R³ представляет собой Н, и R⁴ представляет собой Н. Это предусматривают соединения формулы (Ic):

или их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства;

где R¹, R² , R⁶ и Х, как определено выше.

В некоторых воплощениях соединений, содержащих группу R⁸, R ⁸ выбран из Н или C₁-С₆алкил. В некоторых воплощениях R⁸ представляет собой метил. В некоторых воплощениях R⁸ представляет собой Н.

В некоторых воплощениях соединений, содержащих группу R⁹ , R⁹ выбран из Н или C₁-С₆алкил. В некоторых воплощениях R⁹ представляет собой метил. В некоторых воплощениях R⁹ представляет собой Н.

Как заявлено выше, Х представляет собой группу формулы (CR¹⁰ ₂)_m. В некоторых воплощениях соединений формулы (I), (Ia), (Ib) и (Ic) m выбрано из группы, включающей 0, 1 и 2. В некоторых воплощениях m представляет собой 0 или 1. В некоторых воплощениях m представляет собой 0. В некоторых воплощениях m представляет собой 1.

В некоторых воплощениях q равно 0, R³ представляет собой Н, R ⁴ представляет собой Н, и m представляет собой 0. Это предусматривают соединения формулы (II):

или их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства;

где R¹, R² и R⁶, как определено выше.

В некоторых воплощениях q равно 0, R³ представляет собой Н, R ⁴ представляет собой Н, и m представляет собой 1. Это предусматривают соединения формулы (III):

или их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства;

где R¹, R² , R⁶ и R¹⁰, как определено выше.

В некоторых воплощениях соединений формулы (I), (Ia), (Ib), (Ic) и (III) каждый R¹⁰ представляет собой Н. В других воплощениях каждый R¹⁰ независимо представляет собой необязательно замещенный C₁-С₆алкил. В некоторых воплощениях один R¹⁰ представляет собой Н и другой СН₃. В некоторых воплощениях один R ¹⁰ представляет собой Н, и другой R¹⁰ представляет собой Н или необязательно замещенный C₁-С₆ алкил.

В некоторых воплощениях соединений формулы (I), (Ia), (Ib), (Ic) и (III) m представляет собой 1, один R ¹⁰ представляет собой Н, и Х представляет собой группу формулы:

В некоторых воплощениях изобретения R³ и R⁴ представляют собой Н, m представляет собой 1, q равно 0, и один R¹⁰ представляет собой Н. Это предусматривают соединения формулы (IV):

или их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства,

где R¹, R² , R⁶ и R¹⁰, как определено выше.

В некоторых воплощениях соединений, содержащих R¹⁰ , в особенности соединений формулы (I), (Ia), (Ib), (Ic), (III) и (IV), R¹⁰ выбран из группы, включающей Н, C ₁-С₆галоалкил, C₁-С₆гидроксиалкил и C₁-С₆алкил. В некоторых воплощениях R ¹⁰ выбран из группы, включающей метил, этил, пропил, изопропил и бутил. В некоторых воплощениях R¹⁰ выбран из группы, включающей Н, метил и этил.

В некоторых воплощениях соединений изобретения, в особенности соединений формулы (I), (Ia), (Ib), (Ic), (II), (III) и (IV), R¹ выбран из группы, включающей Н, Br, метил, этил, изопропил, пропил, 3,3-пропил-этан, бутил, изобутил, 3,3-бутил-этан, 2-бутил-этил, пентил и гексил. В некоторых воплощениях R¹ выбран из группы, включающей Н, метил и этил. В некоторых воплощениях R¹ представляет собой Н. В некоторых воплощениях R¹ представляет собой метил. В некоторых воплощениях R¹ представляет собой этил. В некоторых воплощениях R¹ представляет собой Br.

В некоторых воплощениях соединений изобретения, в особенности соединений формулы (I), (Ia), (Ib), (Ic), (II), (III) и (IV), R⁶ выбран из группы, включающей Н, NH ₂ и NR⁸R⁹, где R⁸ и R ⁹, как определено выше. В некоторых воплощениях R⁶ представляет собой NH₂.

В некоторых воплощениях соединений изобретения, в особенности соединений (I), (Ia), (Ib), (Ic), (II), (III) и (IV), R² выбран из группы, включающей Н, циано, необязательно замещенный С ₁-С₁₂алкил, необязательно замещенный С₂ -С₁₂ алкенил, необязательно замещенный С₂ -С₁₂гетероалкил, необязательно замещенный С₃ -С₁₂ циклоалкил, необязательно замещенный С₂ -С₁₂гетероциклоалкил, необязательно замещенный С ₆-С₁₈арил и необязательно замещенный С₁ -С₁₈гетероарил.

В некоторых воплощениях R² представляет собой необязательно замещенный С ₆-С₁₈арил. В некоторых воплощениях R² представляет собой необязательно замещенный С₆-С ₁₈ арил, представляет собой группу формулы:

где р представляет собой целое число, выбранное из группы, включающей 0, 1, 2, 3, 4 и 5;

каждый R¹³ независимо выбран из группы, включающей Н, галоген, ОН, NO₂, CN, NH₂, необязательно замещенный С₁-С₁₂алкил, необязательно замещенный С ₂-С₁₂алкенил, необязательно замещенный С ₂-С₁₂алкинил, необязательно замещенный C ₂-C₁гетероалкил, необязательно замещенный С ₃-С₁₂циклоалкил, необязательно замещенный С ₂-С₁₂ гетероциклоалкил, необязательно замещенный С₂-С₁₂гетероциклоалкенил, необязательно замещенный С₆-С₁₈арил, необязательно замещенный С₁-С₁₈гетероарил, необязательно замещенный С₁-С₁₂алкилокси, необязательно замещенный С₂-С₁₂алкенилокси, необязательно замещенный С₂-С₁₂алкинилокси, необязательно замещенный С₂-С₁₀гетероалкилокси, необязательно замещенный С₃-С₁₂циклоалкилокси, необязательно замещенный С₃-С₁₂циклоалкенилокси, необязательно замещенный С₂-С₁₂гетероциклоалкилокси, необязательно замещенный С₂-С₁₂гетероциклоалкенилокси, необязательно замещенный С₆-C₁₈ арилокси, необязательно замещенный С₁-С₁₈гетероарилокси, необязательно замещенный С₁-С₁₂ алкиламино, SR⁸, SO₃H, SO₂NH₂ , SO₂R⁸, SONH₂, SOR⁸ , COR⁸, COOH, COOR⁸, CONR⁸R ⁹, NR⁸COR⁹, NR⁸COOR ⁹, NR⁸SO₂R⁹, NR⁸ CONR⁸R⁹, NR⁸R⁹ и ацил;

где R⁸ и R⁹, как определено выше.

Фенильная группа может быть не замещена или может быть необязательно замещена по меньшей мере одной подходящей группой заместителей. Если фенильная группа замещена, тогда может быть 1, 2, 3, 4 или 5 групп заместителей. В некоторых воплощениях р равно 0, 1 или 2. В других воплощениях р равно 1. В некоторых воплощениях р равно 2.

В некоторых воплощениях R² необязательно замещенный С₆-C₁₈ арил представляет собой группу формулы

где R¹³, как определено выше;

s представляет собой целое число, выбранное из группы, включающей 0, 1, 2, 3 и 4;

r представляет собой целое число, выбранное из группы, включающей 1, 2 и 3.

В некоторых воплощениях r равно 1, и необязательно замещенный С₆-C₁₈ арил представляет собой группу формулы:

где R¹³ и s, как определено выше.

В некоторых воплощениях r равно 2, и необязательно замещенный С₆-С₁₈арил представляет собой группу формулы:

где R¹³ и s, как определено выше.

В некоторых воплощениях s выбрано из группы, включающей 0, 1 и 2. В некоторых воплощениях s равно 0. В некоторых воплощениях s равно 1. В некоторых воплощениях s равно 2.

Каждый заместитель R¹³ может быть любым подходящим заместителем. В некоторых воплощениях каждый R ¹³ независимо выбран из группы, включающей Н, F, СН ₃, СН₂СН₃, ОСН₃, CN, OCF ₃, СО₂СН₃, NO₂, NH ₂, NHCOCH₃, NHSO₂CH₃, NHCH₂CH₃ и CF₃.

В некоторых воплощениях R¹ представляет собой Н, R ³ представляет собой Н, R⁴ представляет собой Н, R⁶ представляет собой NH₂, Х представляет сбой (СН₂)_m, где m равно 0, и R² представляет собой группу формулы:

Это предусматривают соединения формулы (V):

или их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства;

где R¹³ и р, как определено выше.

В некоторых воплощениях R¹ представляет собой Н, R³ представляет собой Н, R⁴ представляет собой Н, R⁶ представляет собой NH₂, X представляет собой (СН₂) _m, где m равно 1, и R² представляет собой группу формулы:

Это предусматривают соединения формулы (Va):

или их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства;

где R¹³, R ¹⁰ и р, как определено выше.

В некоторых воплощениях соединений формулы (I), (Ia), (Ib), (Ic), (II), (III) и (IV) R² выбран из группы, включающей циано, необязательно замещенный C₁-C₁₂алкил и необязательно замещенный С₂-С₁₂гетероалкил.

В некоторых воплощениях соединений формулы (I), (Ia), (Ib), (Ic), (II), (III) и (IV) R² выбран из группы, включающей метил, этил, изопропил, пропил, 3,3-пропил-этан, бутил, сек-бутил, изобутил, 3,3-бутил-этан, 2-бутил-этил, пентил, гексил, гептил и октил.

В некоторых воплощениях соединений формулы (I), (Ia), (Ib), (Ic), (II), (III) и (IV) R² представляет собой необязательно замещенную метиловую группу формулы:

где R²⁰, R²¹ и R²² каждый независимо выбраны из группы, включающей Н, Cl, Br, F, ОН, NO₂, CN, NH₂, необязательно замещенный С₁-С₁₂алкил, необязательно замещенный С₂-С₁₂гетероалкил, необязательно замещенный С₃-С₁₂циклоалкил, необязательно замещенный С₂-С₁₂гетероциклоалкил, необязательно замещенный С₆-C₁₈арил и необязательно замещенный С ₁-С₁₈гетероарил; или любые по меньшей мере два из R²⁰, R²¹ и R²², когда взяты вместе с углеродным атомом, к которому они присоединены, формируют циклический остаток.

В некоторых воплощениях каждый R²⁰, R²¹ и R²² независимо выбраны из группы, включающей Н, Cl, Br, F, ОН, NO₂ , CN, NH₂, метил, этил, пропил, изопропил, бутил, пентил, метоксиметил, 2-метоксиэтил, 3-метоксипропил, 2-этоксиэтил, 3-этоксипропил, аминометил, 2-аминоэтил, 3-аминопропил, 4-аминобутил, 5-аминопентил, метиламинометил, 2-метиламиноэтил, 3-метиламинопропил, 4-метиламинобутил, 5-метиламинопентил, этиламинометил, 2-этиламиноэтил, 3-этиламинопропил, 4-этиламинобутил, 5-этиламинопентил, диметиламинометил, 2-диметиламиноэтил, 3-диметиламинопропил, 4-диметиламинобутил, 5-диметиламинопентил, диэтиламинометил, 2-диэтиламиноэтил, 3-диэтиламинопропил, 4-диэтиламинобутил и 5-диэтиламинопентил.

В некоторых воплощениях R² представляет собой необязательно замещенный С₃-С₁₂циклоалкил. В некоторых воплощениях R² выбран из группы, включающей циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил. В некоторых воплощениях R² представляет собой циклопропил.

В некоторых воплощениях R² представляет собой необязательно замещенный С ₂-С₁₂гетероциклоалкил.

В некоторых воплощениях R² выбран из группы, включающей необязательно замещенный пирролидин-1-ил, необязательно замещенный пирролидин-2-ил, необязательно замещенный пирролидин-3-ил, необязательно замещенный диоксолан-2-ил, необязательно замещенный диоксолан-3-ил, необязательно замещенный тетрагидрофуран-2-ил, необязательно замещенный тетрагидрофуран-3-ил, необязательно замещенный пиперидин-1-ил, необязательно замещенный пиперидин-2-ил, необязательно замещенный пиперидин-3-ил, необязательно замещенный пипперидин-4-ил, необязательно замещенный морфолин-2-ил, необязательно замещенный морфолин-3-ил, необязательно замещенный 1,4, диоксолан-2-ил, необязательно замещенный тиоморфолин-2-ил, необязательно замещенный тиоморфолин-3-ил, необязательно замещенный тиоморфолин-4-ил, необязательно замещенный пиперазин-1-ил и необязательно замещенный пиперазин-2-ил.

В некоторых воплощениях необязательно замещенная С₂-С₁₂гетероциклоалкил группа выбрана из группы, включающей:

где R²³ независимо выбран из группы, включающей Н, необязательно замещенный С₁ -С₁₂алкил, необязательно замещенный C₂-C ₁₂алкенил, необязательно замещенный C₂-C ₁₂алкинил, необязательно замещенный C₂-C ₁₂гетероалкил, необязательно замещенный С₃-С ₁₂циклоалкил, необязательно замещенный С₃-С ₁₂циклоалкенил, необязательно замещенный C₂-C ₁₂гетероциклоалкил, необязательно замещенный C₂ -C₁₂ гетероциклоалкенил, необязательно замещенный С₆-С₁₈арил, необязательно замещенный С ₁-С₁₈гетероарил, необязательно замещенный С ₁-С₁₂алкилокси, необязательно замещенный C ₂-C₁₂алкенилокси, необязательно замещенный C ₂-C₁₂алкинилокси, необязательно замещенный С ₂-С₁₀гетероалкилокси, необязательно замещенный С₃-С₁₂циклоалкилокси, необязательно замещенный С₃-С₁₂циклоалкенилокси, необязательно замещенный C₂-C₁₂гетероциклоалкилокси, необязательно замещенный C₂-C₁₂гетероциклоалкенилокси, необязательно замещенный С₆-С₁₈арилокси, необязательно замещенный С₁-С₁₈гетероарилокси, необязательно замещенный С₁-С₁₂алкиламино, SO₂NR²⁴R²⁵, SOR²⁴ , SO₂R²⁴, SONR²⁴R²⁵ , SOR²⁴, COR²⁴, COOH, COOR²⁴ и CONR²⁴R²⁵;

каждый R ²⁴ и R²⁵ независимо выбраны из группы, включающей Н, необязательно замещенный С₁-С₁₂алкил, необязательно замещенный C₂-C₁₂алкенил, необязательно замещенный C₂-C₁₂алкинил, необязательно замещенный С₂-С₁₀гетероалкил, необязательно замещенный С₃-С₁₂циклоалкил, необязательно замещенный С₃-С₁₂циклоалкенил, необязательно замещенный C₂-C₁₂ гетероциклоалкил, необязательно замещенный C₂-C₁₂ гетероциклоалкенил, необязательно замещенный С₆-С₁₈арил и необязательно замещенный С₁-С₁₈гетероарил.

В некоторых воплощениях необязательно замещенная С₂ -С₁₂гетероциклоалкил группа выбрана из группы, включающей:

где R²³,как определено выше.

В некоторых воплощениях R²³ выбран из группы, включающей Н, COR²⁴ и COOR²⁴ .

В некоторых воплощениях R²⁴ выбран из группы, включающей Н, необязательно замещенный С₁ -С₁₂алкил, необязательно замещенный С₆-С ₁₈арил и необязательно замещенный С₁-С₁₈ гетероарил. В некоторых воплощениях R²⁴ представляет собой C₁-C₆ алкил.

В некоторых воплощениях R² представляет собой необязательно замещенный C₂-C₁ гетероалкил. В некоторых воплощениях C₂-C₁₂ гетероалкил группа выбрана из группы, включающей гидроксиС₁-С₆алкил, С₁ -С₆алкилоксиС₁-С₆алкил, аминоС ₁-С₆алкил, С₁-С₆алкиламиноС ₁-С₆алкил и ди(С₁-С₆алкил)аминоС ₁-С₆алкил. Примеры возможных значений R ²,представляющего собой C₂-C ₁₂ гетероалкил, включают гидроксиметил, оксиэтил, гидроксипропил, гидроксибутил, гидроксипентил, метоксиметил, 2-метоксиэтил, 3-метоксипропил, 2-этоксиэтил, 3-этоксипропил, аминометил, 2-аминоэтил, 3-аминопропил, 4-аминобутил, 5-аминопентил, метиламинометил, 2-метиламиноэтил, 3-метиламинопропил, 4-метиламинобутил, 5-метиламинопентил, этиламинометил, 2-этиламиноэтил, 3-этиламинопропил, 4-этиламинобутил, 5-этиламинопентил, диметиламинометил, 2-диметиламиноэтил, 3-диметиламинопропил, 4-диметиламинобутил, 5-диметиламинопентил, диэтиламинометил, 2-диэтиламиноэтил, 3-диэтиламинопропил, 4-диэтиламинобутил и 5-диэтиламинопентил.

В некоторых воплощениях R² представляет собой COOR⁸,где R⁸ , как определено выше. В некоторых воплощениях R² представляет собой COOR⁸, и R⁸ представляет собой С₁-С₁₂алкил. Примеры групп этого типа включают COOCH₃, СООСН₂СН₃ и т.п.

В некоторых воплощениях R² представляет собой CONR⁸R⁹, где каждый R⁸ и R⁹ независимо выбраны из группы, включающей Н, необязательно замещенный С₁-С₁₂алкил, необязательно замещенный C₂-C₁₂алкенил, необязательно замещенный C₂-C₁₂алкинил, необязательно замещенный С₂-С₁₀гетероалкил, необязательно замещенный С₃-С₁₂циклоалкил, необязательно замещенный С₃-С₁₂циклоалкенил, необязательно замещенный C₂-C₁₂гетероциклоалкил, необязательно замещенный C₂-C₁₂гетероциклоалкенил, необязательно замещенный C₆-C₁₈арил и необязательно замещенный С₁-С₁₈гетероарил, или

R⁸ и R⁹, когда взяты вместе с атомами, к которым они присоединены, формируют необязательно замещенный циклический остаток.

В некоторых воплощениях изобретения, когда R² представляет собой CONR ⁸R⁹, тогда R⁸ и R⁹ каждый независимо выбраны из группы, включающей Н, С₁-С ₁₂алкил, С₃-С₁₂ циклоалкил и С ₁-С₁₈арил. Примеры групп R² этого типа включают CONHCH(СН₃)₂, СОNН циклопропил и СОNН фенил.

В некоторых воплощениях, когда R² представляет собой CONR⁸R⁹ , тогда R⁸ и R⁹, когда взяты вместе с атомами, к которым они присоединены, формируют циклический остаток. Примеры групп R² этого типа включают:

где R²⁶ независимо выбран из группы, включающей Н, необязательно замещенный С₁ -С₁₂алкил, необязательно замещенный C₂-C ₁₂алкенил, необязательно замещенный C₂-C ₁₂алкинил, необязательно замещенный C₂-C ₁₂гетероалкил, необязательно замещенный С₃-С ₁₂циклоалкил, необязательно замещенный С₃-С ₁₂циклоалкенил, необязательно замещенный C₂-C ₁₂гетероциклоалкил, необязательно замещенный C₂ -C₁₂ гетероциклоалкенил, необязательно замещенный C₆-С₁₈арил, необязательно замещенный С ₁-С₁₈гетероарил, необязательно замещенный С ₁-С₁₂алкилокси, необязательно замещенный C ₂-C₁₂алкенилокси, необязательно замещенный C ₂-C₁₂алкинилокси, необязательно замещенный С ₂-С₁₀гетероалкилокси, необязательно замещенный С₃-С₁₂циклоалкилокси, необязательно замещенный С₃-С₁₂циклоалкенилокси, необязательно замещенный C₂-C₁₂гетероциклоалкилокси, необязательно замещенный C₂-C₁₂ гетероциклоалкенилокси, необязательно замещенный С₆-С₁₈арилокси, необязательно замещенный С₁-С₁₈гетероарилокси, необязательно замещенный С₁-С₁₂ алкиламино, Н, SO₂NR²⁷R²⁸, SO₂ R²⁷, SONR²⁷R²⁸, SOR²⁷ , COR²⁷, COOH, COOR²⁷ и CONR²⁷ R²⁸;

каждый R²⁷ и R ²⁸ независимо выбраны из группы, включающей Н, необязательно замещенный С₁-С₁₂алкил, необязательно замещенный C₂-C₁₂алкенил, необязательно замещенный C₂-C₁₂алкинил, необязательно замещенный С₂-С₁₀гетероалкил, необязательно замещенный С₃-С₁₂циклоалкил, необязательно замещенный С₃-С₁₂циклоалкенил, необязательно замещенный C₂-C₁₂ гетероциклоалкил, необязательно замещенный C₂-C₁₂ гетероциклоалкенил, необязательно замещенный C₆-С₁₈арил и необязательно замещенный С₁-С₁₈гетероарил.

В некоторых воплощениях R² выбран из группы, включающей метил, этил, изопропил, пропил, 3,3-пропил-этан, циклопропил, циклопентил, 3-метилциклопентил, циклогексил, 4-метилциклогексил, бутил, сек-бутил, изобутил, 3,3-бутил-этан, 2-бутил-этил, пентил, пент-4-енил, гексил, гептил, октил, циано, метоксиметил, бутоксиметил, трет-бутоксиметил и тетрагидрофуран-3-ил.

Многие, если не все, варианты, обсужденные выше, могут быть необязательно замещены. Если переменная необязательно замещена, тогда в некоторых воплощениях каждый дополнительный заместитель независимо выбран из группы, включающей галоген, =O, =S, -CN, -NO₂, -CF₃ , -OCF₃, алкил, алкенил, алкинил, галоалкил, галоалкенил, галоалкинил, гетероалкил, циклоалкил, циклоалкенил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкенил, арил, гетероарил, циклоалкилалкил, гетероциклоалкилалкил, гетероарилалкил, арилалкил, циклоалкилалкенил, гетероциклоалкилалкенил, арилалкенил, гетероарилалкенил, циклоалкилгетероалкил, гетероциклоалкилгетероалкил, арилгетероалкил, гетероарилгетероалкил, гидрокси, гидроксиалкил, алкилокси, алкилоксиалкил, алкилоксициклоалкил, алкилоксигетероциклоалкил, алкилоксиарил, алкилоксигетероарил, алкилоксикарбонил, алкиламинокарбонил, алкенилокси, алкинилокси, циклоалкилокси, циклоалкенилокси, гетероциклоалкилокси, гетероциклоалкенилокси, арилокси, фенокси, бензилокси, гетероарилокси, арилалкилокси, амино, алкиламино, ациламино, аминоалкил, ариламино, сульфониламино, сульфиниламино, сульфонил, алкилсульфонил, арилсульфонил, аминосульфонил, сульфинил, алкилсульфинил, арилсульфинил, аминосульфиниламиноалкил, -С(=O)OH, -С(=O)R^a, -С(=O)OR^a, C(=O)NR ^aR^b, C(=NOH)R^a, C(=NR^a )NR^bR^c, NR^aR^b, NR ^aC(=O)R^b, NR^aC(=O)OR^b, NR^aC(=O)NR^bR^c, NR^a C(=NR^b)NR^cR^d, NR^a SO₂R^b, -SR^a, SO₂NR ^aR^b, -OR^a, ОС(=O)NR^aR ^b, ОС(=O)R^a и ацил,

где R ^a, R^b, R^c и R^d каждый независимо выбран из группы, включающей Н, С₁-С ₁₂алкил, С₁-С₁₂ галоалкил, C ₂-C₁₂алкенил, C₂-C₁₂алкинил, С₁-С₁₀ гетероалкил, С₃-С ₁₂циклоалкил, С₃-С₁₂циклоалкенил, С₁-С₁₂ гетероциклоалкил, С₁-С ₁₂ гетероциклоалкенил, С₆-С₁₈арил, С₁-С₁₈ гетероарил и арил, или любые по меньшей мере два R^a, R^b, R^c и R^d, когда взяты вместе с атомами, к которым они присоединены, формируют гетероциклическое ядро с 3-12 кольцевыми атомами.

Альтернативно, два смежных необязательных заместителя могут, когда взяты вместе с атомами, к которым они присоединены, формировать циклическую систему, такую как необязательно замещенный С₃-С₁₂циклоалкил или необязательно замещенный С₂-С₁₂гетероциклоалкил.

В некоторых воплощениях каждый дополнительный заместитель независимо выбран из группы, включающей: F, Cl, Br, =O, =S, -CN, -NO ₂, алкил, алкенил, гетероалкил, галоалкил, алкинил, арил, циклоалкил, гетероциклоалкил, гетероарил, гидрокси, гидроксиалкил, алкокси, алкиламино, аминоалкил, ациламино, фенокси, алкоксиалкил, бензилокси, алкилсульфонил, арилсульфонил, аминосульфонил, -C(O)OR ^a, СООН, SH и ацил.

В некоторых воплощениях каждый дополнительный заместитель независимо выбран из группы, включающей: F, Br, Cl, =O, =S, метил-CN, трифторометил, этил, 2,2,2-трифтороэтил, изопропил, пропил, 2 пропила этил, 3,3 пропила этан, бутил, изобутил, 3,3 бутила этан, 2 бутила этил, пентил, 2-метил-пентил, пент-4-енил, гексил, гептил, октил, фенил, NH ₂, -NO₂, фенокси, гидрокси, метокси, трифторометокси, этокси и метилендиокси.

В дополнение к соединениям Формулы I раскрытые воплощения настоящего изобретения также направлены на их фармацевтически приемлемые соли, фармацевтически приемлемые N-оксиды, фармацевтически приемлемые пролекарства и фармацевтически активные метаболиты заявленных соединений и фармацевтически приемлемые соли таких метаболитов.

Изобретение также относится к фармацевтическим композициям, включающим соединения по настоящему изобретению с фармацевтически приемлемым носителем, растворителем или инертным наполнителем.

В дополнительном аспекте настоящее изобретение предусматривает метод ингибирования протеинкиназы, выбранной из группы, включающей серин-треониновую протеинкиназу, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент и PI3K киназу, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент, способ, включающий обработку протеинкиназы, или ее фрагмента, или комплекса, или функционального эквивалента и/или ее кофактора(ов) эффективным количеством соединений по изобретению.

Соединения, раскрытые здесь, могут действовать непосредственно и исключительно на молекулу киназы, или ее комплекс, или фрагмент с целью ингибирования биологической активности. Однако подразумевается, что соединения по изобретению могут также действовать по крайней мере частично на кофакторы, которые вовлечены в процесс фосфорилирования. Известные кофакторы киназы включают различные ионы (такие, как цинк и кальций), липиды (такие, как фосфатидилсерин) и диацилглицеролы.

В некоторых воплощениях протеинкиназа представляет собой серин-треониновую протеинкиназу, или фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент. В некоторых воплощениях изобретения серин-треониновая протеинкиназа, или ее фрагмент, или комплекс представляет собой mTOR протеинкиназу, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент. В некоторых воплощениях серин-треониновая протеинкиназа представляет собой mTORC1, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент.

В некоторых воплощениях протеинкиназа представляет собой PI3K киназу, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент. В некоторых воплощениях PI3K киназа, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент представляет собой PI3K киназу класса I, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент.

В одном воплощении способ воздействия на по меньшей мере одну протеинкиназу соединением по изобретению включает введение указанного соединения в млекопитающее, содержащее по меньшей мере одну указанную протеинкиназу.

В еще одном дополнительном аспекте изобретение предусматривает использование соединений по изобретению для ингибирования по меньшей мере одной протеинкиназы, выбранной из группы, включающей серин-треониновую протеинкиназу, или фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент и PI3K киназу, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент.

В некоторых воплощениях протеинкиназа представляет собой серин-треониновую протеинкиназу, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент. В некоторых воплощениях серин-треониновая протеинкиназа, или ее фрагмент, или комплекс представляет собой mTOR протеинкиназу, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент. В некоторых воплощениях серин-треониновая протеинкиназа представляет собой mTORC1, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент.

В некоторых воплощениях протеинкиназа представляет собой PI3K киназу, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент. В некоторых воплощениях PI3K киназа, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент представляет класс I PI3K, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент.

В еще одном дополнительном аспекте изобретение предусматривает способ лечения или профилактики заболеваний у млекопитающего, при которых ингибирование по меньшей мере одной протеинкиназы, выбранной из группы, включающей серин-треониновую протеинкиназу, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалента и киназу PI3K, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент, предотвращает, ингибирует или улучшает патологию или симптоматику патологических состояний, при этом способ включает введение терапевтически эффективного количества соединения по изобретению.

В некоторых воплощениях протеинкиназа представляет собой серин-треониновую протеинкиназу, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент. В некоторых воплощениях серин-треониновая протеинкиназа, или ее фрагмент, или комплекс представляет собой mTOR протеинкиназу, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент. В некоторых воплощениях серин-треониновая протеинкиназа представляет собой mTORC1, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент.

В некоторых воплощениях протеинкиназа представляет собой PI3K киназу, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент. В некоторых воплощениях PDK киназа, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент представляет собой PI3K киназу класса I, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент.

В некоторых воплощениях указанное заболевание представляет собой рак. В некоторых воплощениях рак выбран из группы, включающей рак крови, такой как миелопролиферативные нарушения: идиопатический миелофиброз, истинная полицитемия, эссенциальная тромбоцитемия, хроническая миелоидная лейкемия), миелоидная метаплазия, хроническая миеломоноцитарная лейкемия, острая лимфоцитарная лейкемия, острая эритробластическая лейкемия, Ходжкинская и Неходжкинская лимфома, лимфома В-клеток, острая лейкемия Т-клеток, миелодиспластический синдром, нарушения клеток плазмы, лейкоз ворсистых клеток, саркома Капоши, лимфома и гиперпролиферативные заболевания, такие как псориаз и рестеноз; рак гинекологических органов, такой как карцинома груди, рак яичников, рак шейки матки, рак влагалища и рак вульвы, эндометриальная гиперплазия; рак желудочно-кишечного тракта, такой как колоректальный рак, полипы, рак печени, рак желудка, рак поджелудочной железы, рак желчного пузыря; рак мочевых путей, такой как рак простаты, рак почки; рак мочевого пузыря, рак мочеиспускательных путей, рак мужского полового члена; рак кожи, такой как меланома; мозговая опухоль, такая как глиобластома, нейробластома, астроцитома, эпендинома, глиома ствола мозга, медуллобластома, менингиома, астроцитома, олигодендроглиома; рак органов, расположенных в области головы и шеи, такой как носоглоточная карцинома, гортанная карцинома; рак дыхательных путей, такой как карцинома легкого (крупноклеточный и мелкоклеточный рак легкого), мезотелиома; болезни глаз, такие как ретинобластома; мышечно-скелетные заболевания, такие как остеосаркома, мышечно-скелетная неоплазма; плоскоклеточная карцинома и фиброидная опухоль. В других воплощениях соединения настоящего изобретения могут использоваться для лечения предраковых состояний или гиперплазии, включая семейный аденоматозный полипоз, колоректальные аденоматозные полипы, миелоидную дисплазию, внутриматочную дисплазию, внутриматочную гиперплазию с атипией, цервикальную дисплазию, влагалищную интраэпителиальную неоплазию, доброкачественную гиперплазию простаты, папилломы гортани, актинический кератоз и кератоз, возникающий от старческих бородавок, себорейный кератоз и кератоакантому.

В некоторых воплощениях указное заболевание представляет собой аутоиммунное или воспалительное заболевание или заболевание, вызванное чрезмерной неоваскуляризацией. Болезни, которые были соотнесены с некоторой степенью аутоиммунной этиологии или включающие патологическое воспаление и реакции образования новых сосудов, выбраны из группы, включающей следующие заболевания: острый диссеминированный энцефаломиелит, болезнь Аддисона, агаммаглобулинемия, агранулоцитоз, аллергическая астма, аллергический энцефаломиелит, аллергический ринит, очаговая алопеция, сенильная алопеция, анеритроплазия, анкилозирующий спондилит, синдром антитела антифосфолипида, синдром аортита, апластическая анемия, аллергический дерматит, аутоиммунная гемолитическая анемия, аутоиммунный гепатит, аутоиммунный оофорит, болезнь Балу, диффузный токсический зоб, болезнь Бехчета, бронхиальная астма, болезнь Кастлемана, глютеновая болезнь, болезнь Шагаса, хроническая воспалительная демиелинизирующая мультиневропатия, синдром Черга-Страусса, синдром Когана, воспаление роговицы, корническая лейкома, миокардит Коксаки, склеродерма, болезнь Крона, кожная эозинофилия, кожная Т-лимфоцитарная лимфома, дерматит мультиформная эритрема, дерматомиозит, диабетическая ретинопатия, постинфарктный синдром (аутоиммунное осложнение инфаркта миокарда - синдром Дресслера), эпителиальная дистрофия роговицы, экзематозный дерматит, эозинофильный фасциит, эозинофильный гастроэнтерит, буллезный эпидермолиз, синдром Эванса, фиброзный альвеолит, гестациозный пемфигоид, гломерулонефрит, синдром Гудпасчура, РТПХ (реакция трансплантат против хозяина ), болезнь Грейвса, синдром Гийена-Барре, синдром Хашимото, гемолитический мочевой синдром, герпетический кератит, ихтиоз обыкновенный, идиопатическая интерстициальная пневмония, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура, воспалительные заболевания кишечника, синдром Кавасаки, кератит, кератоконъюнктивит, синдром Ламберта-Итона, лейкодермия обыкновенная, плоский лишай, склерозирующий лишай, болезнь Лайма, зависимый линейный дерматоз (герпертиформный дерматит), дистрофия желтого пятна сетчатки, мегалобластическая анемия, болезнь Меньера, язва Мурена, болезнь Муча-Хаберманна, дерматомиозит, рассеянный склероз, астенический бульбарный паралич, некротический энтероколит, глазной нейромиелит, буллезный мукосинехиальный атрофический дерматит, синдром пляшущих глаз (миоклония), тиреоидит Орда, пароксизмальная ночная гемоглобинурия, острая невропатия (радикулит) плечевого сплетения, пемфигус, периодонтит, болезнь Аддисона-Бирмера (пернициозная анемия), пыльцевая аллергия (поллиноз), плюригландулярный аутоиммунный синдром, задний увеит, первичный желчный цирроз, проктит, псевдомембранозный колит, псориаз, легочная эмфизема, пиодермия, синдром Рейтера, хронические заболевания нарушения функций (проводимости) дыхательных путей, ревматизм, инфектартрит, саркоидоз, склерит, синдром Сезари, ксеродерматоз (синдром Шегрена или синдром сухого рта), подострый септический эндокардит, системная эритрематозная волчанка, синдром Такаясу (неспецифический аортоартериит), височный артериит, синдром Толоса-Ханта, сахарный диабет 1-го типа, язвенный колит, крапивница, весенний конъюнктивит, витилиго, синдром Вогта-Каянаги-Харада и гранулематоз Вегенера.

В еще одном аспекте изобретение обеспечивает использование соединений изобретения в получении лекарства для лечения заболевания у животного, при котором ингибирование одной или более протеинкиназ, выбранных из группы, включающей серин-треониновую протеинкиназу, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент и киназу PI3K, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент, предотвращает, замедляет или дает улучшение патологии или симптоматики такого заболевания.

В другом аспекте существующее изобретение обеспечивает использование соединений изобретения или фармацевтически приемлемой соли, N-оксида или пролекарства для лечения заболеваний, при которых ингибирование одной или более протеинкиназ, выбранных из группы, включающей серинтреонин, или его фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент и киназу PI3K, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент, предотвращает, замедляет или дает улучшение патологии или симптоматики такого заболевания.

В некоторых воплощениях изобретения протеинкиназа - это серин-треониновая протеинкиназа, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент. В некоторых воплощениях серин-треониновая протеинкиназа, или ее фрагмент, или комплекс - это mTOR протеинкиназа, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент. В некоторых воплощениях серин-треониновая протеинкиназа представляет собой mTORC1, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент.

В некоторых воплощениях протеинкиназа - это киназа PI3K, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент. В некоторых воплощениях киназа PI3K, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент представляет собой PI3K киназу класса I, или ее фрагмент, или комплекс, или функциональный эквивалент.

В другом аспекте существующее изобретение обеспечивает способ профилактики или лечения пролиферативных заболеваний у пациентов, включающий введение терапевтически эффективного количества соединений изобретения.

В другом аспекте существующее изобретение обеспечивает использование соединений изобретения в приготовлении лекарства для лечения пролиферативных заболеваний у пациентов.

В некоторых воплощениях заболевание представляет собой рак. В некоторых воплощениях рак выбран из группы, включающей рак крови, такой как миелопролиферативные нарушения, такие как идиопатический миелофиброз, истинная полицитемия (болезнь Вакеза-Ослера), эссенциальная тромбоцитемия, хроническая миелоидная лейкемия, миелоидная метаплазия, хроническая миеломоноцитарная лейкемия, острая лимфоцитарная лейкемия, острая эритробластическая лейкемия, Ходжкинская и Неходжкинская лимфома, лимфома В-клеток, острая лейкемия Т-клеток, миелодиспластический синдром, нарушения клеток плазмы, лейкоз ворсистых клеток, саркома Капоши, лимфома и гиперпролиферативные заболевания, такие как псориаз и рестеноз; рак гинекологических органов, таких как карцинома груди, рак яичников, рак шейки матки, рак влагалища и рак вульвы, эндометриальная гиперплазия; рак желудочно-кишечного тракта, такой как злокачественное новообразование толстой кишки, полипы, рак печени, рак желудка, рак поджелудочной железы, рак желчного пузыря; рак мочевых путей, такой как рак простаты, рак почки; рак мочевого пузыря, рак мочеиспускательных путей, рак мужского полового члена; рак кожи, такой как меланома; мозговая опухоль, такая как глиобластома, нейробластома, астроцитома, эпендинома, глиома ствола мозга, медуллобластома, менингиома, астроцитома, олигодендроглиома; рак органов, расположенных в области головы и шеи, такой как носоглоточная карцинома, гортанная карцинома; рак дыхательных путей, такой как карцинома легкого (крупноклеточный и мелкоклеточный рак легких), мезотелиома; глазные болезни, такие как ретинобластома; мышечно-скелетные заболевания, такие как остеосаркома, мышечно-скелетная неоплазма; сквамозноклеточная карцинома и фиброидная опухоль.

Эти и другие признаки существующего изобретения охватываются настоящим изобретением, как было описано, и для указанной цели.

Осуществление изобретения

В настоящем описании использовано множество терминов, которые известны квалифицированному специалисту. Однако в целях ясности большинству терминов ниже дано определение.

Использующийся в настоящем изобретении термин незамещенный означает, что нет никакого заместителя или что единственный заместитель представляет собой водород.

Термин необязательно замещенный , используемый в настоящем изобретении, обозначает, что группа может или не может быть дополнительно замещена или присоединена (для того, чтобы сформировать конденсированную полициклическую систему) одной или более неводородными группами заместителей. В определенных воплощениях замещающие группы представляют собой одну или более групп, независимо выбранных из группы, включающей галоген, =O, =S, -CN, -NO₂, -CF₃, -OCF ₃, алкил, алкенил, алкинил, галоалкил, галоалкенил, галоалкинил, гетероалкил, циклоалкил, циклоалкенил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкенил, арил, гетероарил, циклоалкилалкил, гетероциклоалкилалкил, гетероарилалкил, арилалкил, циклоалкилалкенил, гетероциклоалкилалкенил, арилалкенил, гетероарилалкенил, циклоалкилгетероалкил, гетероциклоалкилгетероалкил, арилгетероалкил, гетероарилгетероалкил, гидрокси, гидроксиалкил, алкилокси, алкилоксиалкил, алкилоксициклоалкил, алкилоксигетероциклоалкил, алкилоксиарил, алкилоксигетероарил, алкилоксикарбонил, алкиламинокарбонил, алкенилокси, алкинилокси, циклоалкилокси, циклоалкенилокси, гетероциклоалкилокси, гетероциклоалкенилокси, арилокси, фенокси, бензилокси, гетероарилокси, арилалкилокси, амино, алкиламино, ациламино, аминоалкил, ариламино, сульфониламино, сульфиниламино, сульфонил, алкилсульфонил, арилсульфонил, аминосульфонил, сульфинил, алкилсульфинил, арилсульфинил, аминосульфиниламиноалкил, -С(=O)ОН, -С(=O)R^a, -С(=O)OR^a, C(=O)NR ^aR^b, C(=NOH)R^a, C(=NR^a )NR^bR^c, NR^aR^b, NR ^aC(=O)R^b, NR^aC(=O)OR^b, NR^aC (=O)NR^bN^c, NR^a C(=NR^b)NR^cR^d, NR^a SO₂R^b, -SR^a, SO₂NR ^aR^b, -OR^a, OC(=O)NR^aR ^b, ОС(=O)R^a и ацил,

причем R ^a, R^b, R^c и R^d каждый независимо выбраны из группы, включающей H, С₁-С ₁₂алкил, С₁-С₁₂ галоалкил, C ₂-C₁₂алкенил, C₂-C₁₂алкинил, С₂-С₁₀ гетероалкил, С₃-С ₁₂циклоалкил, С₃-С₁₂циклоалкенил, C₂-C₁₂гетероциклоалкил, C₂-C ₁₂ гетероциклоалкенил, С₆-С₁₈арил, С₁-С₁₈ гетероарил и ацил, или любые два или больше из R^a, R^b, R^c и R ^d, взятые вместе с атомами, к которым они присоединены, формируют гетероциклическое ядро с 3-12 кольцевыми атомами.

В некоторых воплощениях каждый дополнительный заместитель независимо выбран из группы, включающей: галоген, =O, =S, -CN, -NO₂, -CF₃, -OCF₃, алкил, алкенил, алкинил, галоалкил, галоалкенил, галоалкинил, гетероалкил, циклоалкил, циклоалкенил, гетероциклоалкил, гетероциклоалкенил, арил, гетероарил, гидрокси, гидроксиалкил, алкилокси, алкилоксиалкил, алкилоксиарил, алкилоксигетероарил, алкенилокси, алкинилокси, циклоалкилокси, циклоалкенилокси, гетероциклоалкилокси, гетероциклоалкенилокси, арилокси, гетероарилокси, арилалкил, гетероарилалкил, арилалкилокси, амино, алкиламино, ациламино, аминоалкил, ариламино, сульфонил, алкилсульфонил, арилсульфонил, аминосульфонил, аминоалкил, -СООН, -SH и ацил.

Примеры предпочтительных дополнительных заместителей включают F, Cl, Br, I, СН₃, СН₂ СН₃, O, ОСН₃, CF₃, OCF₃ , NO₂, NH₂ и CN.

Определение многих заместителей в изобретении включает понятие группа может быть концевой группой или сшивающей группой . Это означает ситуацию, когда группа представляет собой линкер между двумя другими частями молекулы, так же как и тот случай, когда группа является терминальным остатком. Например, используя термин алкил некоторые публикации использовали бы термин алкилен для связывающей группы, и, следовательно, в этих других публикациях есть различие между условиями алкил (концевая группа) и алкилен (связывающая группа). В настоящем изобретении нет такого различия, и каждая из используемых групп может быть или связывающей группой или концевой группой.

Ацил означает R-C(=O) - группу, в которой группа R может представлять собой алкил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил или гетероарил группу, как определено в настоящем изобретении. Примеры арила включают ацетил и бензоил. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через углерод карбонила.

Ациламино означает R-C(=O)-NH- группу, в которой группа R может представлять собой алкил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил или гетероарил группу, как определено в настоящем изобретении. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через атом азота.

Алкенил как группа или часть группы обозначает группу алифатического углеводорода, содержащую по крайней мере одну двойную связь углерод-углерод, который может быть прямым или разветвленным, предпочтительно имеющим 2-12 атомов углерода, более предпочтительно 2-10 атомов углерода, наиболее предпочтительно 2-6 атомов углерода, в нормальной цепи. Группа может содержать множество двойных связей в нормальной цепи, и ориентация каждой может быть независимо Е или Z. Примеры алкенильной группы включают, но не ограничены, винил, пропенил, бутенил, пентенил, гексенил, гептенил, октенил и ноненил. Группа может быть концевой группой или связывающей группой.

Алкенилокси относится к алкенил-O- группе, в которой алкенил, как определено выше. Предпочтительные алкенилокси группы - C ₁-С₆ алкенилокси группы. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа является концевой группой, она присоединена к остатку молекулы через кислородный атом.

Алкил как группа или часть группы относится к прямой или разветвленной группе алифатического углеводорода, предпочтительно С₁ -С₁₂ алкил, более предпочтительно С₁-С ₁₀ алкил, наиболее предпочтительно C₁-C ₆, если иначе не отмечено. Примеры подходящего прямого и разветвленного C₁-C₆ алкильного заместителя включают метил, этил, н-пропил, 2-пропил, н-бутил, вторичный бутил, трет-бутил, гексил и т.п. Группа может быть концевой группой или связывающей группой.

Алкиламино включает и моноалкиламино и диалкиламино, если не указано другого. Моноалкиламино означает алкил-Н-группу, в которой алкил, как определено в настоящем изобретении. Диалкиламино означает (алкил)₂N- группа, в которой каждый алкил может быть одинаковым или различным и каждый, как определено в настоящем изобретении для алкила. Алкил группа - предпочтительно C₁-С₆ алкил группа. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через атом азота.

Алкиламинокарбонил относится к группе формулы (алкил)_х(H) _yNC(=O), в которой алкил, как определено в настоящем изобретении, х означает 1 или 2, и сумма x+y=2. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через углерод карбонила.

Алкилокси относится к алкил-O- группе, в которой алкил, как определено в настоящем изобретении. Предпочтительно алкилокси - C₁ -С₆алкилокси. Примеры включают, но не ограничены, метокси и этокси группы. Группа может быть концевой группой или связывающей группой.

Алкилоксиалкил относится к алкилокси-алкил- группе, в которой алкилокси и алкил группы, как определено в настоящем изобретении. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через алкил группу.

Алкилоксиарил относится к алкилокси-арил- группе, в которой алкилокси и арил группы, как определено в настоящем изобретении. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через арил группу.

Алкилоксикарбонил относится к алкил-O-С(=O)- группе, в которой алкил, как определено в настоящем изобретении. Алкил группа предпочтительно C₁-С₆ алкил группа. Примеры включают, но не ограничены, метоксикарбонил и этоксикарбонил. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через углерод карбонила.

Алкилоксициклоалкил относится к алкилокси-циклоалкил-группе, в которой алкилокси и циклоалкил группы, как определено в настоящем изобретении. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через циклоалкил группу.

Алкилоксигетероарил относится к алкилокси-гетероарил- группе, в которой алкилокси и гетероарил группы, как определено в настоящем изобретении. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через гетероарил группу.

Алкилоксигетероциклоалкил относится к алкилокси-гетероциклоалкил-группе, в которой алкилокси и гетероциклоалкил группы, как определено в настоящем изобретении. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через гетероциклоалкил группу.

Алкилсульфинил означает алкил-S-(=О)- группу, в которой алкил, как определено в настоящем изобретении. Алкил группа предпочтительно C₁ -С₆ алкил группа. Примеры алкилсульфинил групп включают, но не ограничены, метилсульфинил и этилсульфинил группы. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через атом серы.

Алкилсульфонил относится к алкил-S(=O)₂- группе, в которой алкил, как определено выше. Алкил группа предпочтительно C ₁-С₆алкил группа. Примеры таких групп включают, но не ограничены метилсульфонил и этилсульфонил группы. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через атом серы.

Алкинил как группа или часть группы означает группу алифатического углеводорода, содержащую тройную связь углерод-углерод, который может быть прямым или разветвленным, предпочтительно имеющим 2-12 атомов углерода, более предпочтительно 2-10 атомов углерода, более предпочтительно 2-6 атомов углерода в нормальной цепи. Примеры таких групп включают, но не ограничены, этинил и пропинил. Группа может быть концевой группой или связывающей группой.

Алкинилокси относится к алкинил-O- группе, в которой алкинил, как определено в настоящем изобретении. Предпочтительные алкинилокси группы - группы C₁-С₆алкинилокси. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через кислородный атом.

Аминоалкил означает NH₂-алкил- группу, в которой алкил группа, как определено в настоящем изобретении. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через алкил группу.

Аминосульфонил означает NH₂-S(=O)₂- группу. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через атом серы.

Арил как группа или часть группы обозначает (i) произвольно замещенный моноциклический или конденсированный полициклический, ароматический карбоцикл (кольцевая структура, имеющая кольцевые атомы, которые все являются углеродом), предпочтительно имеющий от 5 до 12 атомов в кольце. Примеры арил групп включают фенил, нафтил и т.п.; (ii) произвольно замещенный частично насыщенный бициклический ароматический карбоциклический остаток, в котором фенил и С_5-7 циклоалкил или C_5-7 циклоалкенил группы конденсированы вместе и формируют циклическую структуру, такую как тетрагидронафтил, инденил или инданил. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Обычно группа арила - группа С₆-C₁₈арила.

Арилалкенил означает арил-алкенил- группу, в которой арил и алкенил, как определено в настоящем изобретении. Примеры арилалкенил групп включают фенилаллил. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через алкенил группу.

Арилалкил означает арил-алкил- группу, в которой арил и алкил группы, как определено в настоящем изобретении. Предпочтительные арилалкил группы содержат группу С_1-5алкил. Типичные арилалкил группы включают бензил, этоксифенил, 1-нафталенметил и 2-нафталенметил. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через алкил группу.

Арилалкилокси относится к арил-алкил-O- группе, в которой алкил и арил, как определено в настоящем изобретении. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через кислородный атом.

Ариламино включает и моноариламино и диариламино группу, если не указано иначе. Моноариламино означает группу формулы арилNН-, в которой арил, как определено в настоящем изобретении. Диариламино означает группу формулы (арил)₂N-, где каждый арил может быть одинаковым или различным и каждый, как определено в настоящем изобретении для арила. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через атом азота.

Арилгетероалкил означает арил-гетероалкил- группу, в которой арил и гетероалкил группы, как определено в настоящем изобретении. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через гетероалкил группу.

Арилокси относится к арил-O- группе, в которой арил, как определено в настоящем изобретении. Предпочтительно арилокси представляет собой С₆-С₁₈арилокси, более предпочтительно С₆-С₁₀арилокси. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через кислородный атом.

Арилсульфонил означает арил-S-(=O)₂- группу, в которой группа арила, как определено в настоящем изобретении. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через атом серы.

Связь - связь между атомами в соединении или молекуле. Связь может быть одинарной связью, двойной связью или тройной связью.

Циклоалкенил означает неароматическую моноциклическую или мультициклическую кольцевую систему, содержащую по крайней мере одну двойную связь углерод-углерод и предпочтительно имеющую от 5-10 атомов углерода в кольце. Типичные моноциклические циклоалкенил кольца включают циклопентенил, циклогексенил или циклогептенил. Циклоалкенил группа может быть замещена одной или более группами заместителей, циклоалкенил группа обычно представляет собой С₃-С ₁₂ алкенил группу. Группа может быть концевой группой или связывающей группой.

Циклоалкил относится к насыщенному моноциклическому, или конденсированному, или спиро полициклическому карбоциклу, предпочтительно содержащему от 3 до 9 атомов углерода в кольце, такому как циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и т.п., если не указано иначе. Он включает моноциклические системы, такие как циклопропил и циклогексил, бициклические системы, такие как декагидронафталин, и полициклические системы, такие как адамантан. Циклоалкил группа обычно представляет собой С₃-С₁₂ алкил группу. Группа может быть концевой группой или связывающей группой.

Циклоалкилалкил означает циклоалкил-алкил - группу, в которой циклоалкил и алкил группы, как определено в настоящем изобретении. Типичные моноциклоалкилалкил группы включают циклопропилметил, циклопентилметил, циклогексилметил и циклогептилметил. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через алкил группу.

Циклоалкилалкенил означает циклоалкил-алкенил- группу, в которой циклоалкил и алкенил группы, как определено в настоящем изобретении. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через алкенил группу.

Циклоалкилгетероалкил означает циклоалкил-гетероалкил- группу, в которой циклоалкил и гетероалкил группы, как определено в настоящем изобретении. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через гетероалкил группу.

Циклоалкилокси относится к циклоалкил-O- группе, в которой циклоалкил, как определено в настоящем изобретении. Предпочтительно циклоалкилокси представляет собой C₁-С₆циклоалкилокси. Примеры указанных групп включают, но не ограничены, циклопропанокси и циклобутанокси. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через кислородный атом.

Циклоалкенилокси относится к циклоалкенил-O- группе, в которой циклоалкенил, как определено в настоящем изобретении. Предпочтительно циклоалкенилокси представляет собой C₁-С₆циклоалкенилокси. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через кислородный атом.

Галоалкил относится к алкил группе, как определено в настоящем изобретении, в которой один или больше водородных атомов были замещены атомом галогена, выбранным из группы, состоящей из фтора, хлора, Br и иода. У галоалкил группы обычно формула C_nH _(2n+1-m)X_m, где каждый Х независимо выбран из группы, включающей F, Cl, Br и I. В группах этого типа n обычно от 1 до 10, более предпочтительно от 1 до 6, наиболее предпочтительно 1-3. m обычно 1-6, более предпочтительно 1-3. Примеры галоалкил групп включают фторометил, дифторометил и трифторометил.

Галоалкенил относится к алкенил группе, как определено в настоящем изобретении, в которой один или больше водородных атомов были замещены атомом галогена, независимо выбранным из группы, состоящей из F, Cl, Br и I.

Галоалкинил относится к алкинил группе, как определено в настоящем изобретении, в которой один или больше водородных атомов были замещены атомом галогена, независимо выбранным из группы, состоящей из F, Cl, Br и I.

Галоген представляет собой хлор, фтор, бром или иод.

Гетероалкил относится к прямой или разветвленной алкил группе, предпочтительно имеющей от 2 до 12 углеродных атомов, более предпочтительно 2-6 углеродных атомов в цепи, в которой один или больше атомов углерода (и любых связанных водородных атомов) каждый независимо замещен гетероатомной группой, выбранной из С, О, Р и NR , где R выбран из группы, включающей Н, необязательно замещенный С₁-С₁₂алкил, необязательно замещенный С ₃-С₁₂циклоалкил, необязательно замещенный С ₆-С₁₈арил и необязательно замещенный С₁ -С₁₈ гетероарил. Типичные гетероалкилы включают алкил эфиры, вторичные и третичные алкил амины, амиды, алкил сульфиды и т.п. Примеры гетероалкилов также включают гидроксиС₁ -С₆алкил, С₁-С₆алкилоксиС ₁-С₆алкил, аминоС₁-С₆алкил, С₁-С₆алкиламиноС₁-С₆ алкил и ди-(C₁-С₆алкил)-аминоС₁ -С₆алкил. Группа может быть концевой группой или связывающей группой.

Гетероалкилокси относится к гетероалкил-O- группе, в которой гетероалкил, как определено в настоящем изобретении. Предпочтительно гетероалкилокси представляет собой С₂-С₆гетероалкилокси. Группа может быть концевой группой или связывающей группой.

Гетероарил сам по себе или как часть группы относится к группам, содержащим ароматическое кольцо (предпочтительно 5- или 6-членное ароматическое кольцо), имеющее один или более гетероатомов в качестве кольцевых атомов в ароматическом кольце вместе с остальными кольцевыми атомами, являющимися атомами углерода. Подходящие гетероатомы включают азот, кислород и серу. Примеры гетероарила включают тиофен, бензотиофен, бензофуран, бензимидазол, бензоксазол, бензотиазол, бензизотиазол, нафто [2,3-b] тиофен, фуран, изоиндолизин, ксантолен, ксантолен, пиррол, имидазол, пиразол, пиридин, пиразин, пиримидин, пиридазин, тетразол, индол, изоиндол, lH-индазол, пурин, хинолин, изохинолин, фталазин, нафтиридин, хиноксалин, циннолин, карбазол, фенантридин, акридин, феназин, тиазол, изотиазол, фентиазин, оксазол, изооксазол, фуразан, феноксазин, 2-, 3- или 4-пиридил, 2-, 3-, 4-, 5- или 8-хинолил, 1-, 3-, 4- или 5-изохинолинил, 1-, 2- или 3-индолил и 2- или 3-тиенил. Гетероарил группа - обычно C₁-C₁₈ гетероарил группа. Группа может быть концевой группой или связывающей группой.

Гетероарилалкил означает гетероарил-алкил группу, в которой гетероарил и алкил группы, как определено в настоящем изобретении. Предпочтительные гетероарилалкил группы содержат остатки низших алкилов. Типичные гетероарилалкил группы включают пиридилметил. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через алкил группу.

Гетероарилалкенил означает гетероарил-алкенил- группу, в которой гетероарил и алкенил группы, как определено в настоящем изобретении. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через алкенил группу.

Гетероарилгетероалкил означает гетероарил-гетероалкил-группу, в которой гетероарил и гетероалкил группы, как определено в настоящем изобретении. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через гетероалкил группу.

Гетероарилокси относится к гетероарил-O- группе, в которой гетероарил, как определено в настоящем изобретении. Предпочтительно гетероарилокси представляет собой С₁-С₁₈ гетероарилокси. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через кислородный атом.

Гетероциклический относится к насыщенному, частично ненасыщенному или полностью ненасыщенному моноциклическому, бициклическому или полициклическому кольцу, содержащему по крайней мере один гетероатом, выбранный из группы, состоящей из азота, серы и кислорода в качестве кольцевых атомов. Примеры гетероциклических групп включают гетероциклоалкил, гетероциклоалкенил и гетероарил.

Гетероциклоалкенил относится к гетероциклоалкил группе, как определено в настоящем изобретении, но содержащему по крайней мере одну двойную связь. Гетероциклоалкенил группа обычно представляет собой С ₂-С₁₂ гетероциклоалкенил группу. Группа может быть концевой группой или связывающей группой.

Гетероциклоалкил относится к насыщенному моноциклическому, бициклическому или полициклическому кольцу, содержащему по крайней мере один гетероатом, выбранный из азота, серы, кислорода, состоящему предпочтительно из от 1 до 3 гетероатомов по крайней мере в одном кольце. Каждое кольцо предпочтительно 3-10-членное, более предпочтительно 4-7-членное. Примеры подходящих гетероциклоалкил заместителей включают пирролидил, тетрагидрофурил, тетрагидротиофуранил, пиперидил, пиперазил, тетрагидропиранил, морфилино, 1,3-диазапан, 1,4-диазапан, 1,4-оксозепан и 1,4-оксотиапан. Гетероциклоалкил группа обычно - С₂ -С₁₂гетероциклоалкил группа. Группа может быть концевой группой или связывающей группой.

Гетероциклоалкилалкил относится к гетероциклоалкил-алкил - группе, в которой гетероциклоалкил и алкил группы, как определено в настоящем изобретении. Типичные гетероциклоалкилалкил группы включают (2-тетрагидрофурил) метил, (2-тетрагидротиофуранил) метил. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через алкил группу.

Гетероциклоалкилалкенил относится к гетероциклоалкил-алкенил- группе, в которой гетероциклоалкил и алкенил группы, как определено в настоящем изобретении. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через алкенил группу.

Гетероциклоалкилгетероалкил означает гетероциклоалкил-гетероалкил-группу, в которой гетероциклоалкил и гетероалкил группы, как определено в настоящем изобретении. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через гетероалкил группу.

Гетероциклоалкилокси относится к гетероциклоалкил-O- группе, в которой гетероциклоалкил, как определено в настоящем изобретении. Предпочтительно гетероциклоалкилокси - C₁-С₆гетероциклоалкилокси. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через кислородный атом.

Гетероциклоалкенилокси относится к гетероциклоалкенил-O- группе, в которой гетероциклоалкенил, как определено в настоящем изобретении. Предпочтительно гетероциклоалкенилокси - C₁-С₆ гетероциклоалкенилокси. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через кислородный атом.

Гидроксиалкил относится к алкил группе, как определено в настоящем изобретении, в которой один или больше водородных атомов замещены ОН группой. гидроксиалкил группа обычно имеет формулу C_nH _(2n+1-x)(OH)_x. В группах этого типа n обычно от 1 до 10, более предпочтительно от 1 до 6, наиболее предпочтительно 1-3. х обычно 1-6, более предпочтительно 1-3.

Низший алкил в качестве группы подразумевает, если иначе не указано, группу алифатического углеводорода, который может быть прямым или разветвленным, имеющим 1-6 атомов углерода в цепи, более предпочтительно 1-4 атомов углерода, таких как метил, этил, пропил (н-пропил или изопропил) или бутил (н-бутил, изобутил или трет-бутил). Группа может быть концевой группой или связывающей группой.

Сульфинил означает R-S(=O) - группу, в которой группа R может быть ОН, алкил, циклоалкил, гетероциклоалкил; арил или гетероарил группа, как определено в настоящем изобретении. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через атом серы.

Сульфиниламино означает R-S(=O)-NH- группу, в которой группа R может быть ОН, алкил, циклоалкил, гетероциклоалкил; арил или гетероарил группа, как определено в настоящем изобретении. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через атом азота.

Сульфонил означает R-S(=O)₂- группу, в которой группа R может быть ОН, алкил, циклоалкил, гетероциклоалкил; арил или гетероарил группа, как определено в настоящем изобретении. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через атом серы.

Сульфониламино означает R-S(=O)₂-H- группу. Группа может быть концевой группой или связывающей группой. Если группа - концевая группа, она присоединена к остатку молекулы через атом азота.

Подразумевается, что в семейство соединений Формулы (I) входят изомерные формы, включая диастереоизомеры, энантиомеры, таутомеры и геометрические изомеры в Е или Z конфигурации или смесь Е и Z изомеров. Также подразумевается, что некоторые изомерные формы, такие как диастереоизомеры, энантиомеры и геометрические изомеры, могут быть разделены физическими и/или химическими методами любым квалифицированными в области техники специалистом.

Некоторые из соединений раскрытых воплощений могут существовать как единственные стереоизомеры, рацематы и/или смеси энантиомеров и/или диастереомеров. Все указанные единственные стереоизомеры, рацематы и их смеси входят в объем настоящего изобретения.

Дополнительно, формула (I) используется для того, чтобы охватить, где это возможно, форму сольватов, так же как и форму несольватированных соединений. Таким образом, каждая формула включает соединения, имеющие обозначенную структуру, включая как гидратированные, так и негидратированные формы.

Термин фармацевтически приемлемые соли относится к солям, которые сохраняют желательную биологическую активность вышеупомянутых соединений и включают фармацевтически приемлемые кислотные соли и основные соли. Подходящие фармацевтически приемлемые кислотные соли соединений Формулы (I) могут быть получены с помощью минеральной кислоты или органической кислоты. Примеры таких минеральных кислот - соляная, серная и фосфорная кислота. Соответствующие органические кислоты могут быть выбраны из алифатических, циклоалифатических, ароматических, гетероциклических карбоновых и сульфоновых классов органических кислот, примерами которых являются муравьиная, уксусная, пропионовая, янтарная, гликолевая, глюконовая, молочная, оксиянтарная, винная, лимонная, фумаровая, малеиновая, алкилсульфоновая, арилсульфоновая кислоты. Дополнительная информация относительно фармацевтически приемлемых солей может быть найдена в Remington s Pharmaceutical Sciences, 19th Edition, Mack Publishing Co., Easton, PA 1995. В случае средств, которые являются твердыми частицами, квалифицированному специалисту очевидно, что соединения по изобретению, средства и соли могут существовать в различных кристаллических или полиморфных формах, каждая из которых находится в рамках существующего изобретения и специфических формул.

Пролекарство означает соединение, которое подвергается преобразованию в соединение формулы (I) внутри биологической системы, обычно метаболическими средствами (например, гидролизом, отщеплением или окислением). Например, эфирное пролекарство соединения формулы (I) содержащее гидроксильную группу может быть конвертируемым гидролизом in vivo в родительскую молекулу. Подходящие сложные эфиры соединений формулы (I), содержащие гидроксильные группы, включают, например, ацетаты, цитраты, лактаты, тартраты, малонаты, оксалаты, салицилаты, пропионаты, сукцинаты, фумараты, малеаты, метилен-бис- -гидроксинафтоаты, гестисаты, изотианаты, ди-р-толуолтартраты, метансульфонаты, гестисатсульфонаты, бензолсульфонаты, р-толуенсульфонаты, циклогексилсульфаматы и квинаты. Как другой пример эфирного пролекарства соединений формулы (I), содержащего карбоксильную группу, может быть конвертируемым гидролизом in vivo в родительскую молекулу. (Примеры эфирных пролекарств - описаны F.J.Leinweber, Drug Metab. Res., 18:379, 1987.) Точно так же ацильное пролекарство соединений формулы (I), содержащее аминогруппы, может быть конвертируемым гидролизом в естественных условиях до родительской молекулы (множество примеров пролекарств для этих и других функциональных групп, включая амины, описаны в Prodrugs: Challenges and Rewards (Parts 1 and 2); Ed V. Stella, R.Borchardt, M.Hageman, R.Oliyai, H.Maag and J Tilley; Springer, 2007).

Термин кислород блокирующая группа означает группу, которая может предотвратить реакцию кислородной группы во время промежуточных реакций защищенного соединения и которая может быть с легкостью удалена, когда необходимо. В одном воплощении блокирующая группа является удаляемой при физиологических условиях естественными метаболическими процессами. Примеры кислород блокирующих групп включают ацильные группы, такие как ацетил, эфиры, такие как метоксиметиловый эфир, -метоксиэтоксиметиловый эфир, р-метоксибензиловый эфир, метилтиометиловый эфир, пивалоил, тетрагидропиран и эфиры силила, такие как триметилсилил, трет-бутил диметиловый силил и триизопропил силил.

Термин азотная блокирующая группа означает группу, которая может предотвратить реакцию азотной группы во время промежуточных реакций защищенного соединения и которая может быть с легкостью удалена, когда необходимо. В одном воплощении блокирующая группа является удаляемой при физиологических условиях естественными метаболическими процессами. Примеры подходящих азотных блокирующих групп, которые могут использоваться, включают формил, тритил, фталимидо, ацетил, трихлороацетил, хлороацетил, бромоацетил, иодоацетил; группы блокирования уретанового типа, такие как бензилоксикарбонил, 4-фенилбензилоксикарбонил, 2-метилбензилоксикарбонил, 4-метоксибензилоксикарбонил, 4-фторобензилоксикарбонил, 4-хлоробензилоксикарбонил, 3-хлоробензилоксикарбонил, 2-хлоробензилоксикарбонил, 2,4-дихлоробензилоксикарбонил, 4-бромобензилоксикарбонил, 3-бромобензилоксикарбонил, 4-нитробензилоксикарбонил, 4-цианобензилоксикарбонил, трет-бутоксикарбонил, 2-изопропоксикарбонил (с 4 фенилфениленами), 1,1-дифенилэт-1-илоксикарбонил, 1,1-дифенилпроп-1-илоксикарбонил, 2-фенилпроп-2-илоксикарбонил, 2-(р-толуил)-проп-2-илоксикарбонил, циклопентанилоксикарбонил, 1-метилциклопентанилоксикарбонил, циклогексанилоксикарбонил, 1-метилциклогексанилоксикарбонил, 2-метилциклогексанилоксикарбонил, 2-(4-толуилсульфоно)-этоксикарбонил, 2-(метилсульфоно) этоксикарбонил, 2-(трифенилфосфино)-этоксикарбонил, фторилметоксикарбонил, 2-(триметилсилил)этоксикарбонил, аллилоксикарбонил, 1-(триметилсилилметил) проп-1-енилоксикарбонил, 5-бензизоксалилметоксикарбонил, 4-ацетоксибензилоксикарбонил, 2,2,2-трихлороэтоксикарбонил, 2-этинил-2-пропоксикарбонил, циклопропилметоксикарбонил, 4-(дециклокси) бензилоксикарбонил, изоборнилоксикарбонил, 1-пиперидилоксикарбонил и т.п.; группа бензоилметилсульфоно, 2-нитрофенилсульфенил, дифенилфосфин оксид и т.п. Фактическая используемая азот блокирующая группа не важна, пока промежуточная азотная группа устойчива к условиям последующей реакции или реакций и может быть выборочно удалена при необходимости, в основном не разрушая остаток молекулы, включая другие азот блокирующие группы. Другие примеры этих групп можно найти в: Greene, Т.W. and Wuts, P.G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, Second edition; Wiley-Interscience: 1991; Chapter 7; McOmie, J.F.W. (ed.). Protective Groups in Organic Chemistry, Plenum Press, 1973; and Kocienski, P.J., Protecting Groups, Second Edition, Theime Medical Pub., 2000.

Термин терапевтически эффективное количество или эффективное количество является количеством, достаточным для полезного эффекта или желательных клинических результатов. Эффективное количество можно вводить в одном или более введении. Эффективное количество обычно достаточно для того, чтобы смягчить, улучшить, стабилизировать, полностью обратить, замедлить или задержать прогрессию заболевания.

Термин функциональный эквивалент используется для включения вариантов определенных разновидностей протеинкиназ, описанных в настоящем изобретении. Подразумевается, что у киназ могут быть изоформы, такие что, несмотря на то что первичная, вторичная, третичная или четверичная структура данной изоформы киназы отличается от основной формы киназы, молекула тем не менее обладает такой же биологической активностью, как основная форма протеинкиназы. Изоформы могут быть результатом нормальных аллельных вариаций в пределах популяции и включать мутации, такие как аминокислотная замена, делеция, вставка, усечение или дублирование. Также в значение термина функциональный эквивалент включены варианты, получившиеся на уровне транскрипции. У многих киназ (включая JAK2 и CDK2) есть изоформы, которые происходят из различных вариантов транскриптов. Также известно, что у FLT3 есть изоформа, которая является результатом пропуска экзона при транскрипции. Другие функциональные эквиваленты включают киназы, подвергнутые посттрансляционным модификациям, таким как гликозилирование.

Определенные соединения изобретения включают следующие:

или их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства.

Соединения изобретения обладают способностью ингибировать активность определенных протеинкиназ. Способность ингибировать активность протеинкиназы может быть результатом действия соединений изобретения непосредственно и исключительно на молекулу киназы для ингибирования биологической активности. Однако подразумевается, что соединения могут также действовать по крайней мере частично на кофакторы рассматриваемой киназы, которые вовлечены в процесс фосфорилирования. Соединения могут обладать активностью против протеинкиназы PI3K, или ее фрагмента, или комплекса, или функционального эквивалента.

Соединения изобретения могут обладать активностью против определенных серин-треониновых протеинкиназ, таких как mTOR, или их фрагмента, или комплекса, или функционального эквивалента.

Ингибирование протеинкиназы может быть определено любым из многих известных из уровня техники способов. Например, если ингибирование протеинкиназы проводится in vitro, желательно, чтобы соответствующее количество соединений изобретения могло быть добавлено к раствору, содержащему киназу. При необходимых условиях для ингибирования активности киназы у млекопитающего, ингибирование киназы обычно включает введение соединений по изобретению млекопитающему, содержащему киназу.

Соответственно, соединения изобретения могут найти множество применений, в которых может быть использована их способность ингибировать протеинкиназы упомянутого выше типа. Например, соединения могут использоваться для того, чтобы ингибировать серин-треониновую протеинкиназу. Соединения также могут использоваться в лечении или профилактики заболеваний у млекопитающего, у которого ингибирование протеинкиназы и/или ее кофактора предупреждает, ингибирует или улучшает состояние патологии или симптоматики заболевания.

Раскрытые составы обладают свойствами, полезными при лечении пролиферативных заболеваний. Пример такого заболевания - рак. Предполагается, что у соединений будет способность лечить как твердые, так и жидкие опухоли. В некоторых воплощениях изобретения рак, который могут лечить соединения существующего изобретения, включает солидные опухоли и рак крови.

Использующийся здесь термин рак является общим термином, предназначенным для того, чтобы охватить обширное количество заболеваний, которые характеризуются нерегулируемым ненормальным ростом клеток. Ожидается, что соединения изобретения будут полезны в лечении различных видов рака, включая, но не ограничиваясь, рак костей, мозга и опухолей ЦНС, рак молочной железы, злокачественное новообразование толстой кишки, рак эндокринной системы, включая рак коры надпочечников, рак поджелудочной железы, рак гипофиза, рак щитовидной железы, рак паращитовидной железы, рак тимуса, рак желудочно-кишечных органов, рак печени, рак внепеченочных желчных протоков, карциноидная опухоль желудочно-кишечных органов, рак желчного пузыря, рак мочеполовых органов, рак гинекологических органов, рак органов, расположенных в области головы и шеи, лейкемии, миеломы, гематологические нарушения, рак легкого, лимфомы, глазной рак, рак кожи, саркомы мягкой ткани, саркому Капоши, рак мочевой системы.

Типичный рак, который можно лечить соединениями настоящего изобретения, включает рак крови, такой как миелопролиферативные заболевания (идиопатический миелофиброз, полицитемия истинная, эссенциальная тромбоцитопения, хроническая миелоидная лейкемия), миелоидная метаплазия, хроническая миеломоноцитарная лейкемия, острая лимфоцитарная лейкемия, острая эритробластическая лейкемия, Ходжкинская и Неходжкинская лимфома, лимфома В-клеток, острая лейкемия Т-клеток, миелодиспластический синдром, нарушения клеток плазмы, лейкоз ворсистых клеток, саркома Капоши, лимфома и гиперпролиферативные заболевания, такие как псориаз и рестеноз; рак гинекологических органов, такой как карцинома груди, рак яичников, рак шейки матки, рак влагалища и рак вульвы, эндометриальная гиперплазия; рак желудочно-кишечного тракта, такой как злокачественные новообразования толстой кишки, полипы, рак печени, рак желудка, рак поджелудочной железы, рак желчного пузыря; рак мочевых путей, такой как рак простаты, рак почки; рак мочевого пузыря, рак мочеиспускательных путей, рак мужского полового члена; рак кожи, такой как меланома; мозговая опухоль, такая как глиобластома, нейробластома, астроцитома, эпендинома, глиома ствола мозга, медуллобластома, менингиома, астроцитома, олигодендроглиома; рак органов, расположенных в области головы и шеи, такой как носоглоточная карцинома, гортанная карцинома; рак дыхательных путей, такой как карцинома легкого (крупноклеточный и мелкоклеточный рак легких), мезотелиома; болезнь глаз, такая как ретинобластома; мышечно-скелетные заболевания, такие как остеосаркома, мышечно-скелетная неоплазма; сквамозноклеточная карцинома и фиброидная опухоль. Соединения настоящего изобретения могут также использоваться для лечения предраковых состояний или гиперплазии, включая семейный аденоматозный полипоз, колоректальные аденоматозные полипы, миелоидную дисплазию, внутриматочную дисплазию, внутриматочную гиперплазию с атипией, цервикальную дисплазию, влагалищную интраэпителиальную неоплазию, доброкачественную гиперплазию простаты, папилломы гортани, актинический кератоз и кератоз, возникающий от старческих бородавок, себорейный кератоз и кератоакантому.

Также ожидается, что соединения изобретения будут полезны в лечении аутоиммунного или воспалительного заболевания или заболевания, вызванного чрезмерной неоваскуляризацией. Болезни, которые были соотнесены с некоторой степенью аутоиммунной этиологии или включающие патологическое воспаление и реакции образования новых сосудов, выбраны из группы, включающей следующие заболевания: острый диссеминированный энцефаломиелит, болезнь Аддисона, агаммаглобулинемия, агранулоцитоз, аллергическая астма, аллергический энцефаломиелит, аллергический ринит, очаговая алопеция, сенильная алопеция, анеритроплазия, анкилозирующий спондилит, синдром антитела антифосфолипида, синдром аортита, апластическая анемия, аллергический дерматит, аутоиммунная гемолитическая анемия, аутоиммунный гепатит, аутоиммунный оофорит, болезнь Балу, диффузный токсический зоб, болезнь Бехчета, бронхиальная астма, болезнь Кастлемана, глютеновая болезнь, болезнь Шагаса, хроническая воспалительная демиелинизирующая мультиневропатия, синдром Черга-Страусса, синдром Когана, воспаление роговицы, корническая лейкома, миокардит Коксаки, склеродерма, болезнь Крона, кожная эозинофилия, кожная Т-лимфоцитарная лимфома, дерматит мультиформная эритрема, дерматомиозит, диабетическая ретинопатия, постинфарктный синдром (аутоиммунное осложнение инфаркта миокарда- синдром Дресслера), эпителиальная дистрофия роговицы, экзематозный дерматит, эозинофильный фасциит, эозинофильный гастроэнтерит, буллезный эпидермолиз, синдром Эванса, фиброзный альвеолит, гестациозный пемфигоид, гломерулонефрит, синдром Гудпасчура, РТПХ (реакция трансплантат против хозяина ), болезнь Грейвса, синдром Гийена-Барре, синдром Хашимото, гемолитический мочевой синдром, герпетический кератит, ихтиоз обыкновенный, идиопатическая интерстициальная пневмония, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура, воспалительные заболевания кишечника, синдром Кавасаки, кератит, кератоконъюнктивит, синдром Ламберта-Итона, лейкодермия обыкновенная, плоский лишай, склерозирующий лишай, болезнь Лайма, зависимый линейный дерматоз (герпертиформный дерматит), дистрофия желтого пятна сетчатки, мегалобластическая анемия, болезнь Меньера, язва Мурена, болезнь Муча-Хаберманна, дерматомиозит, рассеянный склероз, астенический бульбарный паралич, некротический энтероколит, глазной нейромиелит, буллезный мукосинехиальный атрофический дерматит, синдром пляшущих глаз (миоклония), тиреоидит Орда, пароксизмальная ночная гемоглобинурия, острая невропатия (радикулит) плечевого сплетения, пемфигус, периодонтит, болезнь Аддисона-Бирмера (пернициозная анемия), пыльцевая аллергия (поллиноз), плюригландулярный аутоиммунный синдром, задний увеит, первичный желчный цирроз, проктит, псевдомембранозный колит, псориаз, легочная эмфизема, пиодермия, синдром Рейтера, хронические заболевания нарушения функций (проводимости) дыхательных путей, ревматизм, инфектартрит, саркоидоз, склерит, синдром Сезари, ксеродерматоз (синдром Шегрена или синдром сухого рта), подострый септический эндокардит, системная эритрематозная волчанка, синдром Такаясу (неспецифический аортоартериит), височный артериит, синдром Толоса-Ханта, сахарный диабет 1-го типа, язвенный колит, крапивница, весенний конъюнктивит, витилиго, синдром Вогта-Каянаги-Харада и гранулематоз Вегенера.

Соединения изобретения могут также использоваться для приготовления лекарств для лечения заболеваний у млекопитающего, при которых ингибирование протеинкиназы может предотвратить, ингибировать или улучшить патологию или симптоматику заболевания. Соединения изобретения могут также использоваться для приготовления лекарств для лечения или профилактики связанных с киназой нарушений.

Введение соединений, соответствующих формуле (I) людям, может быть любым из принятых способов для тонкокишечного введения, например, такое как оральное, или ректальное, или парентеральное введение, такое как подкожное, внутримышечное, внутривенное и кожное. Ведение может быть посредством болюса или через постоянную или прерывистую инфузию. Активное соединение обычно включено в фармацевтически приемлемый носитель или растворитель в количестве, достаточном для того, чтобы обеспечить пациенту терапевтически эффективную дозу. В различных воплощениях соединение ингибитора может быть избирательно или более токсичным для быстро пролиферирующих клеток, таких как, например, злокачественные опухоли, чем к нормальным клеткам.

В использовании соединений изобретения они могут вводится в любой форме или любым способом, который обеспечивает биодоступность указанных соединений. Квалифицированный в уровне техники получения соединений специалист может без труда выбрать необходимую форму и способ введения в зависимости от специфических особенностей выбранного соединения, состояния лечения, стадии состояния лечения и других соответствующих обстоятельств. Дополнительную информацию можно получить из работы Remingtons Pharmaceutical Sciences, 19th edition, Mack Publishing Co. (1995).

Соединения настоящего изобретения могут применяться самостоятельно или в форме фармацевтической композиции в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем, растворителем или инертным наполнителем. Соединения изобретения, несмотря на самостоятельную эффективность, обычно сформулированы и применяются в форме их фармацевтически приемлемых солей, поскольку эти формы обычно более устойчивы, более легко кристаллизуются и обладают увеличенной растворимостью.

Соединения, однако, обычно используются в форме фармацевтических композиций, которые сформулированы в зависимости от желательного способа введения. Как таковое в некоторых воплощениях существующее изобретение раскрывает фармацевтическую композицию, включающую соединение формулы (I) и фармацевтически приемлемый носитель, растворитель или инертный наполнитель. Композиции получены способами, известными в уровне техники.

Изобретение в других воплощениях обеспечивает фармацевтическую упаковку или набор, включающий одну или более емкостей, наполненных одним или более ингредиентов фармацевтических композиций изобретения. В такой упаковке или наборе может находиться емкость с дозированными единицами средств или одного средства. Наборы могут включать композицию, включающую активное вещество либо в виде концентрата (включая лиофилизированные композиции), который может быть разбавлен до использования, или им можно обеспечить концентрации, необходимые для использования, например, в виде ампул, которые могут включать одну или более дозировок. Удобно, когда в наборах одиночные дозы могут находиться в стерильных ампулах так, чтобы врач мог использовать ампулы непосредственно, при этом в ампулах будут желательное количество и концентрация одного или нескольких средств. Совместно с такой емкостью или емкостями могут быть различные письменные материалы, такие как инструкции по использованию или уведомление в форме, предписанной правительственным агентством, регулирующим производство, использование или продажу фармацевтических препаратов или биологических продуктов, в котором отражалась бы апробация производства лекарства, его использование или продажа, в том числе и по рецептам врача.

Соединения изобретения могут использоваться или применяться в комбинации с одним или более дополнительным лекарственным средством для лечения вышеперечисленных нарушений или заболеваний. Компоненты могут выписываться как в составе композиции, так и отдельными частями этой композиции. Если применение будет осуществляться названными отдельными частями, то соединения согласно изобретению могут применяться последовательно или одновременно с другим лекарственным средством или средствами.

В дополнение к способности применяться в комбинации с одним или более дополнительными препаратами соединения изобретения могут использоваться в комбинированной терапии. При этом соединения обычно применяются в комбинации друг с другом. Таким образом одно или более соединений изобретения могут применяться одновременно в любой комбинации (как комбинированный препарат) или последовательно для того, чтобы достигнуть желательного эффекта. Это особенно желательно, когда терапевтический профиль каждого соединения отличается таким образом, что комбинированный эффект этих двух препаратов обеспечивает улучшенный терапевтический результат.

Фармацевтические соединения настоящего изобретения для парентеральной инъекции включают фармацевтически приемлемые стерильные водные или неводные растворы, коллоидные растворы, суспензии или эмульсии, так же как стерильные порошки для разведения в стерильные инъекционные растворы или коллоидные растворы непосредственно перед использованием. Примеры подходящих водных и неводных носителей, растворителей, растворителей или транспортных средств включают воду, этиловый спирт, многоатомные спирты (такие, как глицерин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль и т.п.), их подходящие смеси, растительные масла (такие, как оливковое масло) и инъецируемые органические сложные эфиры, такие как этилолеат. Необходимая текучесть может быть поддержана, например, при помощи покрытия материалами, такими как лецитин, обеспечением необходимой величины частиц в случае коллоидных растворов или при помощи поверхностно-активных веществ.

Эти композиции могут также содержать вспомогательные средства, такие как консервирующие средства, смачивающие вещества, эмульгаторы и диспергирующие агенты. Профилактика действия микроорганизмов может быть обеспечена включением различных антибактериальных и антифунгицидных средств, например парааминобензойной кислоты, хлоробутанола, сорбиновой кислоты фенола и т.п. Также может быть желательно включать изотонические средства, такие как сахар, хлористый натрий и т.п. Длительная абсорбция инъекционной фармацевтической формы может быть обеспечена включением средств, которые задерживают поглощение, таких как моностеарат алюминия или желатин.

Если желательно, а также для более эффективной доставки в организме, соединения могут быть инкорпорированы в системы медленного высвобождения или целевой доставки, такие как полимерные матрицы, липосомы и микросферы.

Инъецируемые соединения могут стерилизоваться, например, фильтрацией через бактериальный фильтр или включением стерилизующих средств в форме стерильных твердых композиций, которые могут быть растворены или диспергированы в стерильной воде или другой стерильной инъецируемой среде непосредственно перед использованием.

Твердые формы дозировки для перорального приема включают капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В указанных твердых формах дозировки активное соединение смешано с по крайней мере одним инертным, фармацевтически приемлемым наполнителем или носителем, таким как лимоннокислый натрий или дикальцийфосфат и/или а) наполнители или растворители, такие как крахмал, лактоза, сахароза, глюкоза, маннитол и кремневая кислота, b) связывающие компоненты, такие как, например, карбоксиметилцелюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидон, сахароза или камедь, с) увлажнители, такие как глицерин, d) дезинтегрирующие средства, такие как агар-агар, углекислый кальций, картофель или крахмал тапиоки, альгиновая кислота, некоторые силикаты или углекислый натрий, е) ингибиторы раствора, такие как парафин, f) катализаторы абсорбции, такие как четвертичные аммониевые основания, g) смачивающие вещества, такие как, например, цетиловый спирт и моностеарат глицерина, h) абсорбирующие вещества, такие как каолин и бентонитовая глина, и i) любриканты, такие как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия, и их смеси. В случае капсул, таблеток и пилюль, форма дозировки может также включать буферные средства.

Твердые композиции подобного типа могут также использоваться в качестве наполнителей в мягко- и твердонаполненных капсулах желатина, с использованием таких инертных наполнителей, как лактоза или молочный сахар, так же как высокомолекулярные полиэтиленгликоли и т.п.

Твердые формы дозировки таблеток, драже, капсул, пилюль, и гранул могут быть получены с покрытиями и оболочками, такими как кишечнорастворимые оболочки и другие покрытия, известные в фармацевтической технологии изготовления таблеток. Они могут дополнительно содержать рентгеноконтрастные средства и могут также быть композициями, такими, что они высвобождают активный ингредиент(ы) только, или избирательно, в определенной части кишечника, необязательно с пролонгированным характером высвобождения. Примеры заливки композиций, которые могут использоваться, включают полимерные вещества и воск.

Активные соединения могут также быть в микрокапсульной форме, если необходимо, с одним или более вышеупомянутых инертных наполнителей.

Жидкие формы дозировки для перорального приема включают фармацевтически приемлемые эмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. В дополнение к активным соединениям жидкие формы дозировки могут содержать инертные растворители, обычно используемые в уровне техники, такие как, например, вода или другие растворители, солюбилизирующие средства и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этиловый эфир угольной кислоты, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, диметилформамид, масла (в частности, хлопковое, арахисовое, кукурузное, масло проростков, оливковое, касторовое и кунжутные масла), глицерин, тетрагидрофуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сложные эфиры жирной кислоты сорбита и их смеси.

Помимо инертных растворителей композиции для перорального приема могут также включать адьюванты, такие как увлажняющие вещества, эмульгирующие и суспендирующие агенты, подсластители, ароматизаторы и отдушки.

Суспензии, в дополнение к активным соединениям, могут содержать суспендирующие агенты, как, например, этоксилированные изостеариловые спирты, сорбит полиэтиленоксид и сложные эфиры сорбита, микрокристаллическую целлюлозу, метагидроксид алюминия, бентонит, агар-агар, трагакант и их смеси.

Композиции для ректального или влагалищного использования предпочтительно представляют собой свечи, которые могут быть получены смешиванием соединений настоящего изобретения с подходящими нераздражающими инертными наполнителями или носителями, такими как масло какао, полиэтиленгликоль или воск, свечи, которые тверды при комнатной температуре, но разжижаются при температуре тела и поэтому плавятся в прямой кишке или влагалище и высвобождают активное соединение.

Формы дозировки для местного применения соединений настоящего изобретения включают порошки, пластыри, спреи, мази и летучие препараты. Активное соединение смешано при стерильных условиях с фармацевтически приемлемым носителем и любыми необходимыми консервирующими средствами, буферами или газом-вытеснителем, которые требуются.

Количество применяемого соединения предпочтительно лечит и уменьшает или облегчает заболевание. Терапевтически эффективное количество может быть без труда определено лечащим врачом при помощи обычных методик и наблюдением результатов, полученных при аналогичных обстоятельствах. В определении терапевтически эффективного количества должно быть учтено множество факторов, включая, но не ограничивая, вид животного, его размер, возраст и общее состояние здоровья, специфичные сопутствующие заболевания, серьезность заболевания, реакция пациента на лечение, особенности применяемого соединения, способ введения, биодоступность применяемой формы, выбранный режим дозирования, использование других лекарств и других значимых обстоятельств.

Предпочтительная дозировка находится в диапазоне от приблизительно 0.01 до 300 мг на килограмм веса тела в сутки. Более предпочтительная дозировка находится в диапазоне от 0.1 до 100 мг на килограмм веса тела в сутки, более предпочтительно от 0.2 до 80 мг на килограмм веса тела в сутки, еще более предпочтительно от 0.2 до 50 мг на килограмм веса тела в сутки. Подходящая доза может применяться в виде многократных субдоз в сутки. Средства различных воплощений изобретения могут быть получены с использованием проведения реакций и схем синтеза, как описано далее, с использованием доступных способов и исходных материалов, которые общедоступны. Получение конкретных соединений различных воплощений изобретения описано подробно в следующих примерах, но квалифицированный специалист понимает, что описанные химические реакции могут быть без особого труда адаптированы для того, чтобы получить множество других средств различных воплощений изобретения. Например, синтез неиллюстрированных соединений может быть успешно выполнен модификациями, очевидными для квалифицированных в уровне техники специалистов, например соответствующей защитной интерферирующей группой, заменой на другие подходящие реактивы, известные в технике, или используя обычные модификации условий реакции. Список подходящих защитных групп в органическом синтезе может быть найден в T.W. Greene s Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Edition, John Wiley & Sons, 1991. Альтернативно, другие реакции, раскрытые здесь или известные из уровня техники, признаны как применимые для того, чтобы получать другие соединения различных воплощений изобретения.

Реактивы, используемые для синтеза соединений, могут быть получены или препарированы согласно методикам, известным в уровне техники.

Общая схема синтеза

Широкий диапазон трехзамещенных пуринов может быть получен последовательной трехшаговой процедурой, начинающейся с 2,6-дихлорпурин, который коммерчески доступен из многих источников или может быть получен из пурина непосредственно с использованием, например, фосфорилхлорида. Общая репрезентативная процедура показана на схеме 1.

Как показано, начальная реакция 2,6-дихлорпурина или его 8 производных с галоидалкилом приводит к алкилированию преимущественно в 9 положениях (TeTpahedron Letters 1995, 36, 11, 1945). Типичная процедура использует алкил бромид в присутствии подходящего основания, такого как карбонат калия. Альтернативно, спирт может реагировать с 2,6-дихлорпурин в присутствии фосфина и активирующего агента, такого как диэтилазодикарбоксилат, для достижения аналогичного алкилирования. N-арилирование может также быть выполнено в 9 положении дихлорпурина. Катализируемые медью связывания этого типа были описаны Gundersen et al. в TeTpahedron Letters 2003, 44, 3359-3362. Последующее катализируемое палладием связывание 2 с подходящей арилбороновой кислотой или эфиром приводит к промежуточному соединению 3 (Collect. Czech. Chem. Commun. 2002, 67, 325). Добавление морфолина может тогда быть выполнено при повышенной температуре, в подходящем растворителе, таком как DMA, DMF или THF, для получения желательного трехзамещенного пурина. В случаях когда добавляется замещенная группа морфолина, реакция может быть облегчена при помощи микроволновой радиации. Заместитель R¹ может быть различен также при использовании 8-замещенного дихлорпурина в качестве исходного материала (Схема 1) или может быть введен позже в синтетической последовательности (Схема 2). Например, реакция может быть проведена в 8 положении после завершения последовательности реакции, проиллюстрированной в схеме 1 выше. Например, 8 положение соединения 4 может быть бромировано для того, чтобы получить соединение 5. Бромид затем может быть вытеснен, например, металлорганическим агентом, таким как органоцинк для того, чтобы установить R¹, как в 6.

ПРИМЕРЫ

В примерах, описанных ниже, если иначе не указано, все температуры в последующем описании приводятся в градусах Цельсия и все части и проценты обозначены по весу, если не обозначено иначе.

Различные исходные материалы и другие реактивы были куплены у коммерческих поставщиков, таких как Aldrich Chemical Company или Lancaster Synthesis Ltd., и использовались без дополнительной очистки, если не обозначено иначе. Тетрагидрофуран (THF) и N,N-диметилформамид (DMF) был куплен у Aldrich в баллонах SureSeal и использовался, как был получен. Все растворители были очищены с использованием стандартных способов, известных из уровня техники, если не обозначено иначе.

Реакции, изложенные далее, были выполнены при положительном давлении азота, аргона или в сушильной трубе, при температуре окружающей среды (если иначе не заявлено), в безводных растворителях, и реакционные колбы были оснащены резиновыми перегородками для введения субстратов и реактивов через шприц. Стеклянная посуда была высушена в печи и/или высокой температурой. Аналитическая тонкослойная хроматография была выполнена на поддержанном стеклом силикагеле 60 F 254 в плашках (Е Merck (0,25 мм)) и элюировалась с соответствующими отношениями растворителя (об./об.). Реакции были проанализированы TLC (тонкослойная хроматография) и завершались при определенном расходе исходного материала.

Плашки TLC визуализировались ультрафиолетовым поглощением или спреем р-анисальдегид реактива или фосфорномолибденовым кислотным реактивом (Aldrich Chemical, 20 мас.% в этиловом спирте), который был активизирован высокой температурой или окрашиванием в иодовой камере. Реакции обычно проводились дублированием объема реакции с растворителем реакции или экстракционным растворителем и последующим отмыванием обозначенными водными растворами, используя 25% по объему экстракционного объема (если не обозначено иначе). Готовые растворы были высушены безводным сульфатом натрия до фильтрации, и испарение растворителей производилось при пониженном давлении в роторном испарителе и обозначено как растворители, удаленные в вакууме.

Флеш хроматография на колонке [Still и др., J. Org. Chem., 43, 2923 (1978)] проводилась с использованием Е Merck-градуированного силикагеля для флеш хроматографии (47-61 мм) и соотношением силикагель : исследуемый материал приблизительно от 20:1 до 50:1, если иначе не указано. Гидрогенолиз проводился при указанном выше давлении или при окружающем давлении.

¹Н спектры NMR были зарегистрированы на приборе Bruker, функционирующем при 400 МГц, и ¹³C-NMR спектры были зарегистрированы при 100 МГц. Спектры NMR были получены как растворы CDCl₃ (указаны в миллионных долях - мд.), используя хлороформ в качестве исходного эталона (7,27 мд. и 77,00 мд.), или CD₃OD (3,4, 4,8 мд. и 49,3 мд.), или внутренний тетраметилсилановый стандарт (0,00 мд.), когда было необходимо. Другие растворители NMR использовались по мере необходимости. Когда говорится о пиковых разнообразиях, используются следующие сокращения: с=синглет, d=дуплет, t=триплет, м=мультиплет, br=расширенный, dd=дуплет дуплетов, dt=дуплет триплетов. Константы связывания, когда необходимо, указывают в герцах. Масс-спектры были получены с использованием LC/MS, или в ESI, или в APCI. Все точки плавления приводятся без коррекции. Все конечные продукты имели больше чем 90%-ную чистоту (HPLC при длинах волн 220 нм и 254 нм).

Следующие примеры предназначены для того, чтобы проиллюстрировать раскрытые воплощения и не должны быть рассмотрены как ограничивающие воплощения изобретения. Дополнительные соединения, кроме описанных ниже, могут быть получены с использованием нижеописанных схем реакций или их соответствующих изменений или модификаций.

Схема 3 изображает три вариации на трехшаговой процедуре, в которых различные условия используются на первом шаге для введения различных заместителей в 9 положении пуринового основания. В принципе, однако, квалифицированный специалист мог изменить общую схему реакции, показанную на схеме 1, где азотный осадок в 9 положении пурина может реагировать с остатком, содержащим подходящую отсоединяемую группу (такую, как галоидное соединение) в реакции, в которой азот вытесняет отсоединяемую группу для того, чтобы сформировать соединение, в котором азот в 9 положении затем функционализируется с этим остатком. Подходящие отсоединяемые группы для использования в реакциях этого типа, которые могут быть вытеснены азотом в таких реакциях, известны из уровня техники и вообще, синтез функциональных групп, содержащих отсоединяемые группы этого типа для использования в данных типах реакций, также известен квалифицированному в уровне техники специалисту.

Как показано на Схеме 3, три самых простых пути получения соединений настоящего изобретения включают реакцию дихлорпурина с любым арилалкилгалоидным соединением (таким, как бензилгалогенид) или гетероарилалкилгалоидным соединением для того, чтобы поместить арил или гетероарил замещенную метиловую группу в 9 положение, со спиртом (для того, чтобы поместить двузамещенную метиловую группу в 9 положение) или арил или гетероарилбороновой кислотой (для того, чтобы поместить непосредственно арил или гетероарил группу).

Пример 1 (Соединение 1)

Синтез 2,6-Дихлоро-9-(2,6-дифторо-бензил)-9-пурина

К перемешиваемому раствору 2,6-дихлорпурина (5,3 мМ) в безводном диметилсульфоксиде на 10 мл при комнатной температуре был добавлен безводный карбонат калия (6,34 мМ) и 2,6-дифторобензилбромид (6,34 мМ). Реагирующая смесь выдерживалась при этой температуре в течение 20 часов. Реакция контролировалась посредством использования TLC или LC/MS. Реагирующая смесь была влита в химический стакан, содержащий ледяную воду. Водный слой был подкислен до рН, равного 5-6. В результате экстракции водного слоя, с использованием 3×75 мл этилацетата, получали сырьевой продукт. Сырьевой продукт затем был очищен на колонке силикагеля (10-70% этилацетат в петролейном эфире, ступенчатый градиент) для получения желаемого соединения с выходом 61%.

Синтез 5-[2-хлоро-(2,6-дифторо-бензил)-9Н-пурин-6-ил]-пиримидин-2-иламина

Раствор 2,6-дихлоро-9-(2,6-дифторо-бензил)-9-пурина (1,59 мМ), 5-(4,4,5,5-этреметил-[1,3,2] диоксаборолан-2-иламина (1,59 мМ) и 1,1 -бис (дифенилфосфино) хлорид ферроцена паладия (II), комплексированного с дихлорметаном (0,15 мМ), был смешан со свободным от перекиси диоксаном (40 мл) и к нему добавили 2М водный раствор углекислого натрия (6,4 мМ). Реакционная смесь была дегазирована и очищена азотом. Полученная реакционная смесь затем перемешивалась на масляной бане при температуре 65°C в течение 3 часов. Реакция наблюдалась с помощью LC/MS до исчезновения исходного пурина.

Реакционная смесь была охлаждена до комнатной температуры и растворители были удалены при пониженном давлении. Осадок был растворен в этилацетате и воде. Органическая фаза была отделена, и водный слой был экстрагирован 3×100 мл этилацетата. Комбинированные слои этилацетата были отмыты один раз концентрированным раствором хлористого натрия (25 мл). Органические вещества были осушены сульфатом натрия и растворители были удалены под вакуумом для того, чтобы получить в результате 5-[2-хлоро-(2,6-дифторо-бензил)-9Н-пурин-6-ил]-пиримидин-2-иламин с 60%-ным выходом.

Синтез 5-[2-хлоро-(2,6-дифторо-бензил)-2-морфолин-4-ил-9Н-пурин-6-ил]-пиримидин-2-иламина

К раствору 5-[2-хлоро-(2,6-дифторо-бензил)-9Н-пурин-6-ил]-пиримидин-2-иламина (1.12 мМ) в диметилацетамиде (18 мл) был добавлен морфолин (3,5 мМ). Реакционная смесь была нагрета на масляной бане при температуре 94°C в течение 12 часов. Реакция контролировалась до отсутствия 5-[2-хлоро-(2,6-дифторо-бензил)-9Н-пурин-6-ил]-пиримидин-2-иламина с помощью LC-MS. Сырьевой материал был непосредственно загружен в препаративную колонку HPLC и очищен хроматографией для получения вышеуказанного в названии соединения с выходом 70%. ¹ H NMR, DMSO: 9,48 (s, 2H); 8,29 (s, 1H); 7,45 (m, 2H); 7,31 (s, 2H); 7,14 (t, 1H); 5,42 (s, 2H); 3,75 (m, 4H); 3,67 (m, 4H), m/z: 425,27 [MH]⁺.

Пример 2 (Соединение 2)

Синтез 9-сек-бутил-2,6-дихлоро-9Н-пурина

К 2,6-дихлорпурину (5,3 мМ), 2-бутанолу (9,01 мМ), трифенилфосфину (7,95 мМ) в 40 мл безводного тетрагидрофурана был добавлен по каплям диизопропилазидодикарбоксилат (7,95 мМ) при комнатной температуре в течение 30 минут. Реагирующая смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение 24 часов. Реакция контролировалась TLC или LC/MS. Реагирующая смесь была влита в химический стакан, содержащий ледяную воду. Экстракция водного слоя, с использованием 3×100 мл этилацетата, давала в результате сырой продукт. Сырой продукт был очищен на колонке силикагеля (10-80% этилацетат в петролейном эфире, градиентная элюция) для получения в результате желательного соединения с выходом 50%.

Синтез 5-(9-сек-бутил-2-хлоро-9H-пурин-6-ил)-пиримидин-2-иламина

Раствор 9-сек-бутил-2,6-дихлоро-9Н-пурина (1,59 мМ), 5-(4,4,5,5-этреметил-[1,3,2] диоксаборолан-2-иламина (1,59 мМ) и 1,1 -бис (дифенилфосфино) хлорид ферроцена паладия (II), комплексированного с дихлорметаном (0,15 мМ), был смешан со свободным от перекиси диоксаном (40 мл) и к нему добавили 2М водный раствор углекислого натрия (6,4 мМ). Реакционная смесь была дегазирована и очищена азотом. Полученная реакционная смесь затем перемешивалась на масляной бане при температуре 65°C в течение 3 часов. Реакция наблюдалась с помощью LC/MS до исчезновения исходного пурина.

Реакционная смесь была охлаждена до комнатной температуры и растворители удалены при пониженном давлении. Осадок был растворен в этилацетате и воде. Органическая фаза была отделена, и водный слой далее извлечен 3×100 мл этилацетата. Органические вещества были высушены сульфатом натрия и растворители удалены под вакуумом для получения 5-(9-сек-бутил-2-хлоро-9H-пурин-6-ил)-пиримидин-2-иламина с 60% выходом.

Синтез 5-(9-сек-бутил-2-морфолин-4-ил-9h-пурин-6-ил)-пиримидин-2-иламина

К раствору 5-(9-сек-бутил-2-хлоро-9Н-пурин-6-ил)-пиримидин-2-иламина (1,12 мМ) в диметилацетамиде (18 мл) был добавлен морфолин (3,5 мМ). Реакционная смесь была нагрета на масляной бане при температуре 94°C в течение 12 часов. Реакция контролировалась до отсутствия 5-(9-сек-бутил-2-хлоро-9Н-пурин-6-ил)-пиримидин-2-иламина с помощью LC-MS. Сырьевой материал был непосредственно загружен в препаративную колонку HPLC и очищен хроматографией, чтобы получить соединение, указанное в названии, с выходом 70%. ¹H NMR, DMSO-d6: 9,52 (s, 2H); 8,27 (s, 1H); 7,28 (s, 2H); 4,5 (m, 2H); 3,8 (m, 4H); 3,70 (m, 4H); 2,0 (m, 1H); 1,9 (m, 1H); 1,6 (d, 3H); 0,79 (t, 3H), m/z: 355,45 [МН]⁺.

Пример 3 (Соединение 27)

Синтез 2,6-Дихлоро-9-m-толил-9Н-пурина

2,6-дихлорпурин (1,3 мМ), m-Толил бороновая кислота (4,0 мМ), безводная уксуснокислая медь (1,32 мМ), 4А молекулярные сита (1g) [1,10] - Фенантролин (2,64 мМ) в 25 мл безводного дихлорметана перемешивались при комнатной температуре в круглодонной колбе. Реагирующая смесь была перемешана при комнатной температуре и контролировалась TLC, LC/MS. Реакция была завершена через 24 часа. Молекулярные сита и неорганический материал были удалены фильтрацией через слой целита. Слой был полностью промыт метанолом. Комбинированные органические вещества были очищены флеш хроматографией для получения твердого желательного соединения с выходом 50%. m/z: 279,02 [MH]+.

Синтез 5-(2-хлоро-9-m-толил-9H-пурин-6-ил)-пиримидин-2-ил-амина

2,6-Дихлоро-9-m-толил-9Н-пурин (0,182 мМ), 5-(4,4,5,5-этреметил-[1,3,2] диоксаборолан-2-иламин (0,182 мМ) и 1,1 -бис (дифенилфосфино) хлорид ферроцена палладия (II), комплексированного с дихлорметаном (0,018 мМ), были растворены в смеси свободного от перекиси диоксана (40 мл) и затем добавили 2М водный раствор углекислого натрия (0,730 мМ). Реакционная смесь была дегазирована и очищена азотом. Это реакционная смесь затем перемешивалась на масляной бане при температуре 40°C в течение 2 часов. Реакция контролировалась LC/MS до исчезновения стартового пурина.

Реагирующая смесь была охлаждена до комнатной температуры и растворители удалены при пониженном давлении. Осадок был растворен в этилацетате и воде. Органическая фаза была отделена, и водный слой далее извлечен 3×100 мл этилацетата. Органические вещества были высушены сульфатом натрия и растворители удалены под вакуумом для получения 5-(2-хлоро-9-m-толил-9Н-пурин-6-ил)-пиримидин-2-ил-амина. Этот сырьевой материал брался непосредственно на следующий этап реакции без дальнейшей очистки.

Синтез 5-(2-морфолин-4-ил-9-m-толил-9Н-пурин-6-ил)-пиримидин-2-ил-амина

К раствору 5-(2-хлоро-9-m-толил-9Н-пурин-6-ил)-пиримидин-2-ил-амина (0,182 мМ) в диметилацетамиде (4 мл) был добавлен морфолин (0,4 мМ). Реакционная смесь была нагрета на масляной бане при температуре 94°C в течение 12 часов. Реакция контролировалась до отсутствия 5-(2-хлоро-9-m-толил-9Н-пурин-6-ил)-пиримидин-2-ил-амина с помощью LC/MS. Сырьевой материал был непосредственно загружен в препаративную колонку HPLC и очищен хроматографией для получения соединения, указанного в названии, m/z: 389,2 [МН]⁺.

Пример 4 (Соединение 33)

Синтез {3-[6-(2-амино-пиримидин-5-ил)-2-морфолин-4-ил-пурин-9-ил]-пирролидин-1-ил}-(5-метил-тиофен-2-ил)-метанона

{3-[6-(2-амино-пиримидин-5-ил)-2-морфолин-4-ил-пурин-9-ил]-пирролидин-1-ил}-(5-метил-тиофен-2-ил)-метанон был получен из соответствующего Boc защищенного соединения (3-[6-(2-амино-пиримидин-5-ил)-2-морфолин-4-ил-пурин-9-ил]-пирролидин-1-карбоксил сложный эфир трет-бутила) с использованием стандартного протокола депротекции. Это промежуточное соединение было в свою очередь подготовлено с использованием той же самой трехшаговой процедуры, используемой в синтезе 5-(9-сек-бутил-2-морфолин-4-ил-9Н-пурин-6-ил)-пиримидин-2-иламина (соединение 2), начинающейся с коммерчески доступного Boc защищенного трет бутилового эфира аминоэтил-3-гидрокси-пирролидин-1-карбоксиловой кислоты.

К раствору 5-(2-морфолин-4-ил-9-пирролидин-3-ил-9Н-пурин-6-ил)-пиримидин-2-иламина (37 мг, 0,08 мМ) в DMF была добавлена 5-метил-тиофен-2-карбоксильная кислота (15 мг, 0,104 мМ, 1,3 экв.), EDC (20 мг, 0,104 мМ, 1,3 экв.), HOBt (14 мг, 0,104 мМ, 1,3 экв.) и диизопропилэтиламин (32 мкл, 0,184 мМ, 2,3 экв.). Смесь перемешивалась при 50°C в течение 16 часов Затем был добавлен NaHCO₃ и смесь была дважды экстрагирована этилацетатом. Комбинированные органические слои были далее отмыты насыщенным солевым раствором прежде, чем высушены Na₂SO₄. Сырой продукт был очищен хроматографией для того, чтобы получить соединение, указанное в названии, как твердый желтый (14,4 мг).

¹H NMR, CDCl₃: 9,74 (2Н, s), 7,80 (1H, s), 7,39 (3H, s), 6,77 (1H, d, J=3,3), 5,19-5,13 (1H, m), 4,33 (1H, b s), 4,24-4,19 (1H, m), 4,09-4,04 (1H, m), 4,00 (1H, b s), 3,87-3,79 (8H, m), 2,61-2,56 (2H, m), 2,52 (3H, s), m/z: 492 [MH]⁺ .

Пример 5 (Соединение 40)

Синтез 5-(8-бромо-9-сек-бутил-2-морфолин-4-ил-9Н-пурин-6-ил)-пиримидин-2-иламина

К раствору 5-(9-сек-бутил-2-морфолин-4-ил-9Н-пурин-6-ил)-пиримидин-2-иламина, (200 мг, 0,57 мМ) в 15 мл хлороформа медленно добавлялся NBS (120 мг, 0,68 мМ) при температуре 5°C. Реакция проводилась в течение 2 часов при указанной температуре. После окончания реакции продукт 5-(8-бромо-9-сек-бутил-2-морфолин-4-ил-9Н-пурин-6-ил)-пиримидин-2-иламина был очищен на флеш колонке (система растворителя: 50%-ный этилацетат в гексане) для получения желаемого соединения с выходом 49% (120 мг).

Синтез 5-(9-сек-бутил-8-метил-2-морфолин-4-ил-9Н-пурин-6-ил)-пиримидин-2-иламина

К раствору 5-(8-бромо-9-сек-бутил-2-морфолин-4-ил-9Н-пурин-6-ил)-пиримидин-2-иламина (20 мг, 0,046 мМ), Pd(dppf)Cl₂, (3 мг, 8% мМ) в 3 мл безводного диоксана медленно добавлялся диметилцинк (230 мкл, 1,0 М в растворе гептана). Смесь была нагрета до приблизительно 65°С в герметичном сосуде. МеОН был добавлен по каплям, и растворители были удалены в вакууме. Этилацетат был добавлен к осадку, и получающийся раствор был отмыт 1М HCl, водой, насыщенным раствором хлорида натрия и затем высушен Na₂SO ₄. Растворитель был удален, и сырая смесь была подвергнута флеш хроматографии для получения 5-(9-сек-бутил-8-метил-2-морфолин-4-ил-9Н-пурин-6-ил)-пиримидин-2-иламина 8 мг с выходом 47%. ¹H NMR, MeOD: 9,45 (s, 2H); 4,55 (m, 1H); 3,87 (m, 4H); 3,80 (s, 4H); 2,69 (s, 3H); 2,43 (m, 1H); 2,02 (m, 1H); 1,71 (d, 3H); 0,86 (t, 3H). m/z: 369,22 [МН] ⁺.

Соединения, представленные в Таблице 1, синтезировались после реакций, описанных выше, или их вариаций, обычно вариацией используемых исходных материалов.

Таблица 1
Синтезированные соединения
№ соединения	Структура	Данные ЯМР 1Н	MS (M+1)
1		(DMSO-d6) 9,48 (s, 2H); 8,29 (s, 1H); 7,45 (m, 2H); 7,31 (s, 2H); 7,14 (t, 1Н); 5,42 (s, 2H); 3,75 (m, 4H); 3,67 (m, 4H)	425,27
2		(DMSO-d6) 9,52 (s, 2H); 8,27 (s, 1Н); 7,28 (s, 2H); 4,5 (m, 2H); 3,8 (m, 4H); 3,70 (m, 4H); 2,0 (m, 1Н); 1,9 (m, 1Н); 1,6 (d, 3H); 0,79 (t, 3H)	355,45
3		(DMSO-d6) 9,52 (s, 2H); 8,27 (s, 1Н); 7,28 (s, 2H); 4,01 (m, 2H); 3,8 (m, 4H); 3,70 (m, 4H), 1,3 (m, 1Н); 0,54 (m, 2H); 0,52 (m, 2H)	353,40
4		(CDCl3) 10,0 (s, 2H); 9,4 (s, 1Н); 7,9 (s, 1Н); 7,45-7,35 (m, 5H); 5,4 (s, 2H); 3,9 (m, 4H); 3,8 (m, 4H)	374,32

№ соединения	Структура	Данные ЯМР 1Н	MS (M+1)
5		(DMSO-d6) 9,54 (s, 2H); 8,27 (s, 1Н); 7,28 (s, 2H); 4,6 (m, 2H); 3,8 (m, 4H); 3,70 (m, 4H); 3,65 (m, 2H); 1,55 (d, 3H); 0,9 (s, 9H)	413,41
6		(DMSO-d6) 9,97 (s, 2H); 9,34 (s, 1Н); 8,50 (s, 1Н); 4,5 (m, 1Н); 3,9 (m, 4H); 3,8 (m, 4H); 2,0 (m, 1Н); 1,9 (m, 1Н); 1,6 (d, 3H); 0,79 (t, 3H)	340,50
7		(MeOD) 9,28 (s, 2H), 8,08 (s, 1Н), 5,03 (m, 1Н), 4,34 (m, 4H), 3,85 (m, 4H), 2,30 (m, 2H), 2,03 (m, 4H), 1,85 (m, 2H)	367
8		(DMSO-d6) 8,74 (s, 1Н); 8,4 (s, 1Н); 7,6 (bs, 2H); 4,5 (m, 1Н); 4,0 (s, 3H); 3,8 (m, 4H); 3,7 (m, 4H); 2,0 (m, 1Н); 1,9 (m, 1Н); 1,6 (d, 3H); 0,79 (t, 3H)	385,46

№ соединения	Структура	Данные ЯМР 1Н	MS (M+1)
9		(DMSO-d6) 9,54 (s, 2H); 8,45 (s, 1Н); 7,42-7,22 (m, 5H); 5,8 (m, 1Н); 3,8 (m, 4H); 3,7 (m, 4H); 2,0 (d, 3H)	403,39
10		(DMSO-d6) 9,53 (s, 2H); 8,35 (s, 1Н); 7,28 (s, 2H); 3,86 (m, 1Н); 3,78 (m, 4H); 3,72 (m, 4H); 1,62 (d, 3H); 1,5 (m, 1Н); 0,7 (m, 1Н); 0,5 (m, 2H); 0,4 (m, 1Н)	367,46
11		(DMSO-d6) 8,73 (s, 1Н); 8,5 (s, 1Н); 7,28 (s, 2H); 4,0 (s, 3H); 3,86 (m, 1Н); 3,78 (m, 4H); 3,72 (m, 4H); 1,62 (d, 3H); 1,5 (m, 1Н); 0,7 (m, 1Н); 0,5 (m, 2H); 0,4 (m, 1Н)	397,41
12		(DMSO-d6) 9,53 (s, 2H), 8,26 (s, 1Н), 4,81 (m, 1Н), 3,84 (m, 4H), 3,71 (m, 4H), 3,62 (m, 2H), 3,23 (s, 3H), 1,50 (d, 3H)	371

№ соединения	Структура	Данные ЯМР 1Н	MS (M+1)
13		(DMSO-d6) 8,72 (s, 1Н); 8,34 (s, 1Н); 7,66 (bs, 2H); 4,8 (m, 1Н); 4,0 (s, 3H); 3,9 (m, 1Н); 3,8-3,7 (m, 8H); 3,6 (m, 1Н); 3,3 (s, 3H); 1,5 (d, 3H)	401,41
14		(CDCl3) 9,16 (s, 1Н); 7,84 (s, 1Н); 4,6 (m, 1Н); 3,86 (m, 8H); 2,88 (s, 3H); 2,0 (m, 2H); 1,65 (d, 3H); 0,94 (t, 3H)	369,31
15		(CDCl3) 9,16 (s, 1Н); 7,84 (s, 1Н); 3,86 (m, 8H); 2,88 (s, 3H); 1,65 (d, 3H); 1,4 (m, 2H); 0,81 (m, 1Н); 0,6 (m, 1Н); 0,46 (m, 2H)	381,29
16		(CDCl3) 9,13 (s, 1Н); 7,99 (s, 1Н); 7,6 (bs, 2H); 4,75 (m, 1Н); 3,9 (m, 1Н); 3,8-3,7 (m, 8H); 3,6 (m, 1Н); 3,4 (s, 3H); 2,8 (s, 3H); 1,6 (d, 3H)	385,3
17		(CDCl3) 9,16 (s, 1Н); 7,84 (s, 1Н); 7,4 (m, 5H); 5,9 (m, 1Н); 3,86 (m, 8H); 2,88 (s, 3H); 2,0 (d, 3H)	417,31

№ соединения	Структура	Данные ЯМР 1Н	MS (M+1)
18		(DMSO-d6) 9,52 (s, 2H); 8,2 (s, 1Н); 7,3 (s, 2H); 5,2 (m, 1Н); 4,2 (m, 1Н); 4,1 (m, 2H); 3,9 (m, 1Н); 3,8 (m, 4H); 3,7 (m, 4H); 2,4 (m, 2H)	369,24
19		(MeOD) 9,68 (s, 2H), 8,27 (s, 1Н), 4,65 (m, 1Н), 4,28 (m, 2H), 3,91 (m, 4H), 3,80 (m, 4H), 3,01 (m, 2H), 2,23 (m, 2H), 2,10 (m, 2H), 1,51 (s, 9H)	482
20		(CDCl3) 10,4 (bs, 1Н); 9,9 (s, 1Н); 9,6 (s, 1Н); 7,9 (s, 1Н); 4,6 (m, 1Н); 3,9 (m, 4H); 3,8 (m, 4H); 3,3 (d, 3H); 2,0 (m, 2H); 1,6 (d, 3H); 1,0 (t, 3H)	369,30
21		(MeOD) 9,46 (s, 2H), 8,07 (s, 1Н), 4,74 (m, 2H), 4,01 (m, 1Н), 3,77 (m, 4H), 3,68 (m, 4H), 2,75 (m, 1Н), 2,34 (m, 2H), 2,10 (m, 5H), 1,57 (m, 2H), 0,91 (m, 3H)	452

№ соединения	Структура	Данные ЯМР 1Н	MS (M+1)
22		(DMSO-d6) 9,53 (s, 2H); 8,3 (s, 1Н); 7,33 (bs, 2H); 4,31 (m, 1Н); 3,77 (m, 4H); 3,72 (m, 4H); 2,4 (m, 1Н); 1,5 (d, 3H); 1,0 (m, 3H); 0,7 (m, 3H)	369,28
23		(DMSO-d6) 9,56 (s, 2H); 8,35 (s, 1Н); 7,40 (bs, 2H); 5,81 (t, 1Н); 3,9 (m, 4H); 3,8 (m, 4H); 2,4 (m, 2H); 0,9 (t, 3H)	366,18
24		(DMSO-d6) 9,54 (s, 2H); 8,28 (s, 1Н); 7,37 (bs, 2H); 4,3 (m, 1Н); 3,8 (m, 4H); 3,7 (m, 4H); 2,0 (m, 4H); 0,7 (t, 6H)	369,21
25		(DMSO-d6) 9,52 (s, 2H); 8,27 (s, 1Н); 7,28 (s, 2H); 4,5 (m, 2H); 3,8 (m, 4H); 3,70 (m, 4H); 2,0 (m, 1Н); 1,9 (m, 1Н); 1,6 (d, 3H); 0,79 (t, 3H)	355,45

№ соединения	Структура	Данные ЯМР 1Н	MS (M+1)
26		(DMSO-d6) 9,52 (s, 2H); 8,27 (s, 1Н); 7,28 (s, 2H); 4,5 (m, 2H); 3,8 (m, 4H); 3,70 (m, 4H); 2,0 (m, 1Н); 1,9 (m, 1Н); 1,6 (d, 3H); 0,79 (t, 3H)	355,45
27		(DMSO-d6) 9,56 (s, 2H); 8,64 (s, 1Н); 7,73 (m, 2H); 7,50 (t, 1Н); 7,36 (s, 2H); 7,28 (m, 1H); 3,78 (m, 4H); 3,73 (m, 4H); 2,38 (s, 3H)	389,14
28		(DMSO-d6) 9,46 (2H, s); 8,25 (1H, s); 7,35 (2H, br s); 5,21-5,14 (1Н, m); 3,73-3,60 (10H, m); 3,58-3,50 (1Н, m); 3,39-3,30 (1Н, m); 2,46 (2H, перекрывающийся)	368,17
29		(DMSO-d6) 9,54 (s, 2H); 8,18 (s, 1H); 3,66 (s, 2H); 3,78 (m, 4H); 3,73 (m, 4H)	369,15

№ соединения	Структура	Данные ЯМР 1Н	MS (M+1)
30		(DMSO-d6) 9,54 (s, 2H); 8,32 (s, 1H); 7,34 (bs, 2H); 7,16 (m, 4H); 4,82 (m, 1H); 3,78 (m, 4H); 3,43 (m, 4H); 3,21-3,0 (m, 6H)	429,19
31		(DMSO-d6) 9,52 (s, 2H); 8,21 (s, 1H); 7,33 (bs, 2H); 7,24 (m, 4H); 5,35 (m, 1H); 3,78 (m, 4H); 3,63 (m, 4H); 3,58-3,40 (m, 4H)	415,15
32		Нет данных	472,18
33		(CDCl3) 9,74 (2H, s); 7,80 (1H, s); 7,39 (3Н, s); 6,77 (1Н, d); 5,19-5,13 (1Н, m); 4,33 (1Н, b s); 4,24-4,19 (1Н, m); 4,09-4,04 (1Н, m); 4,00 (1Н, b s); 3,87-3,79 (8H, m); 2,61-2,56 (2H, m); 2,52 (3Н, s)	492,19

№ соединения	Структура	Данные ЯМР 1Н	MS (M+1)
34		(DMSO-d6): 12,83 (1Н, bs, D2O заменяемый протон); 9,51 (2H, s); 8,15 (1H, s); 7,25 (2H, s, D2O заменяемый протон); 3,73-3,74 (4Н, d); 3,69-3,70 (4Н, d)	299,00
35		(DMSO-d6): 9,51 (2H, s); 8,27-8,25 (1Н, d); 7,25 (2H, s, D2 O заменяемый протон); 4,72-4,70 (1Н, d); 4,51-4,46 (1Н, m); 4,37-4,35 (1Н, d); 3,96-3,95 (1Н, d), 3,77-3,74 (1Н, d); 3,65-3,63 (1Н, d); 3,51-3,48 (1Н, t); 3,23-3,19 (1Н, m); 2,05-1,85 (2H, m); 1,54-1,52 (3H, q); 1,22-1,20 (3Н, q); 0,78-0,74 (3H, q)	369,10
36		(DMSO-d6) 9,53 (2H, s); 8,35 (1H, s); 7,37 (2H, b s); 4,37-4,31 (1Н, m); 3,77 (4Н, m); 3,72 (4Н, m); 2,31-2,21 (2H, m); 1,99-1,91 (1Н, m); 1,78-1,65 (4Н, m); 1,57-1,52 (2H, m); 1,07 (3H, d, J=7,1)	295,21

№ соединения	Структура	Данные ЯМР 1Н	MS (M+1)
37		Смесь диастереомеров (2:1): (DMSO-d6): 9,50 (2H, s), 9,50 (2H, s); 8,26 (1Н, s), 8,28 (1Н, s); 7,26 (2H, s), 7,26 (2H, s); 4,95-4,92 (1Н, m), 4,83-4,80 (1Н, m); 3,77 (4H, s), 3,77 (4H, s); 3,71-3,69 (4H, t), 3,71-3,69 (4H, t); 2,40-2,35 (1Н, m), 2,40-2,35 (1Н, m); 2,30-2,13 (2H, m), 2,30-2,13 (2H, m); 2,08-2,02 (3H, m), 1,89-1,88 (1Н, m), 1,77-1,70 (2H, m); 1,55-1,53 (1Н, m), 1,32-1,21 (1Н, m); 1,10-1,08 (3H, d), 1,04-1,02 (3H, d)	381,20
38		(DMSO-d6) 9,53 (s, 2H); 8,55 (s, 1H); 8,20 (s, 2H); 7,90 (d, 2H); 7,56 (t, 2H); 7,40 (t, 1H); 3,77 (m, 4H); 3,70 (m, 4H)	375,15
39		(DMSO-d6) 9,52 (s, 2H); 8,20 (s, 1Н); 7,29 (s, 2H); 5,18 (m, 1Н); 4,16 (m, 1Н); 3,96 (m, 2H); 3,86 (m, 1Н); 3,79 (m, 4H); 3,68 (m, 4H); 2,43 (m, 2H)	369,10

№ соединения	Структура	Данные ЯМР 1Н	MS (M+1)
40		(MeOD) 9,45 (s, 2H), 4,55 (m, 1Н), 3,87 (m, 4H), 3,80 (m, 4H), 2,69 (s, 3H), 2,43 (m, 1Н), 2,02 (m, 1Н), 1,71 (d, 3H), 0,86 (t, 3H)	369,22
41		(MeOD) 9,44 (s, 2H), 4,64 (m, 1Н), 3,77 (m, 4H), 3,69 (m, 4H), 2,89 (m, 2H), 1,61 (d, 6H), 1,21 (t, 3H)	369,21
42		(MeOD) 9,58 (s, 2H), 4,64 (m, 1Н), 3,87 (m, 4H), 3,80 (m, 4H), 2,46 (m, 1Н), 2,00 (m, 1Н), 1,71 (d, 3H), 0,82 (t, 3H)	434

БИОЛОГИЧЕСКОЕ ТЕСТИРОВАНИЕ

Анализ mTOR

Процессированная mTOR киназа и гистидин-меченный 4еВР1 были получены самостоятельно, [ ³³P] - АТФ была куплена у Amersham (GE Healthcare). Все реагенты, если иначе не указано, были куплены у Sigma-Aldrich.

Анализы фосфорилирования были первоначально выполнены в заключительном объеме 20 мкл в 384-ячеечной полипропиленовой плашке (Greiner). Соединения обычно тестировались в диапазоне от 100 мкМ до 0,006 мкМ, в 8 шаговом разбавлении, в повторе. 10 мкл/ячейка 2Х раствора ферментного субстрата (1,5 мкг/мл mTOR, 40 мкг/мл 4еВР1 в 1Х аналитическом буфере: 10 мМ Hepes pH 7,5, 50 Мм NaCl и 10 Мм MnCl₂) были сначала добавлены к плашке с образцами, содержащей 1 мкл/ячейка исследуемого соединения в чистом диметилсульфоксиде. Реакция была инициирована добавлением 10 мкл/ячейка 20 мкМ раствора АТФ (конечная концентрация в анализе составляла 10 мкМ АТФ и 0,4 мкКюри/ячейка (в системе СИ - 14,8 кБк/ячейка) [ ³³P] - АТФ). После инкубации в течение 1 часа при комнатной температуре реакция была завершена 40 мкл/ячейка 20 мМ ЭДТА/1 мМ АТФ раствора.

50 мкл/ячейка остановленной реакционной смеси были затем помещены на 384-ячеистую фильтровальную пластину MultiScreenHTS-PH (Millipore), с предварительно добавленными 50 мкл/ячейка 1%-ной фосфорной кислоты. Пластина была промыта 4 раза 120 мкл/ячейка 0,5% фосфорной кислоты через вакуумную фильтрацию. В конце было добавлено 10 мкл/ячейка Optiphase SuperMix смеси жидкой сцинтилляции (Perkin Elmer). После минимум 1 часа инкубации подсчет был выполнен на Wallac MicroBeta TriLux сцинтилляционном счетчике, с использованием способа рассчитывающего совпадения с коррекцией кроссвязи. IC₅₀ определен как концентрация соединения, требуемая для 50%-ного ингибирования активности фермента киназы. Данные IC₅₀ показаны в Таблице 2 ниже.

Анализ PI3K киназы

Рекомбинантная PI3K р110 /р85 была получена самостоятельно. Фосфатидилинозитол (Ptdins), фосфатидилсерин (PtdSer) и все другие неспецифичные вещества и реагенты были куплены у Sigma-Aldrich. [ ³³Р] АТФ и Optiphase сцинтиллянт были куплены у Perkin Elmer.

Исследования были выполнены в конечном объеме анализа 25 мкл в 384-ячеистых плашках Maxisorp (Nunc). Соединения были протестированы при 8 концентрациях в 3-кратном серийном разведении, обычно начинающемся с 10 мкМ. Плашки Maxisorp были покрыты 20 мкл/ячейка 1:1 смесью Ptdins и PtdSer [0,1 мг/мл, каждый из которых был растворен в смеси хлороформ:этанол (3:7), и оставлены на ночь в вытяжном шкафу при комнатной температуре, чтобы высохнуть.

Ферментативная реакция была создана раскапыванием 5 мкл/ячейка соединения (в 2,5% DMSO), 10 мкл/ячейка фермента (0,5 мкг/мл р110 + 1 мкг/мл р85) и 10 мкл/ячейка 5 мкМ АТФ с 5 мкКюри/мл (в системе СИ - 175 кБк/ячейка) [ ³³P] АТФ в аналитическом буфере (конечные концентрации: 0,2 мкг/мл р110 , 2 мкМ АТФ, 0,05 мкКюри/ячейка (в системе СИ - 1,75 кБк/ячейка) [ ³³P]АТФ в 1Х аналитическом буфере: 100-мМ Трис-HCl c pH 7,0, 200-мМ NaCl, 8-мМ MgCl₂). Реакция была проведена в течение 1 часа при комнатной температуре и остановлена 30 мкл/ячейка 50-мМ раствора ЭДТА. Затем плашка была дважды отмыта TBS, высушена и был добавлен 30 мкл/ячейка сцинтиллянт прежде, чем она была считана в MicroBeta Trilux. IC₅₀ определен как концентрация соединения, требуемая для 50%-ного ингибирования активности фермента киназы. Данные IC₅₀ показаны в Таблице 2 ниже.

Таблица 2
IC50 данные активности ингибирования киназ mTOR и PI3K in vitro
Номер соедине- ния	IC50 (mTOR)*	IC50 (PI3K )*	Номер соединения	IC50 (mTOR)*	IC50 (PI3K )*
1	++	+++	22	+++	+++
2	+++	+++	23	+++	+++
3	+++	+++	24	+++	+++
4	+	+++	25	+++	+++
5	++	+++	26	+++	+++
6	++	+++	27	+++	+++
7	+++	+++	28	++	нд
8	+++	+++	29	+++	+++
9	++	+++	30	+++	+++
10	+++	+++	31	+++	+++
11	++	+++	32	+++	+++
12	+++	+++	33	+++	+++
13	++	+++	34	++	+++
14	+	+++	35	+++	+++
15	+	+++	36	+++	+++
16	+	+++	37	+++	+++
17	+	+++	38	+++	+++
18	+++	+++
19	+++	+++
20	+++	+++
21	+++	+++
* +++ < 1 мкМ
++ 1 мкМ - 5 мкМ
+ > 5 мкМ
нд нет данных

Клеточно-пролиферативный анализ

Биологическая эффективность соединений изобретения продемонстрирована следующим анализом. Линии раковых клеток человека РС3 и DU145 (линии раковых клеток простаты человека) были получены из АТСС. Они культивировались в среде согласно инструкциям работы АТСС. Клетки РС3 и DU145 были помещены в концентрации 1000 клеток на ячейку в 96-ячеистых плашках соответственно. Плашки культивировались при 37°С, 5%-ном СО₂ в течение 24 часов. Клетки были обработаны соединениями по изобретению в различных концентрациях в течение 96 часов. Затем пролиферация клеток определена количественно, с использованием Celltiter 96 Aqueous One Solution Cell Proliferation Assay от Promega (Madison Wisconsin). Кривые дозозависимости были построены для определения значения IC₅₀ для указанных соединений, используя XL-выравнивание (ID Business Solution, Emeryville, CA). IC₅₀ определен как концентрация соединения, требуемая для 50%-ного ингибирования пролиферации клетки. Соединения настоящего изобретения замедляли пролиферацию клеток, как показано в Таблице 3 ниже. Данные показали, что соединения настоящего изобретения являются активными в отношении ингибирования роста опухолевых клеток. Данные IC₅₀ приведены в Таблице 3 ниже.

Таблица 3
IC50 данные клеточно-пролиферативного анализа
Соединение №	РС3	DU145
2	+++	NT
3	NT	++
10	+++	NT
18	+++	NT
19	+++	NT
21	+++	NT
22	+++	NT
23	+++	NT
25	+++	NT
26	+++	NT
29	+++	NT
35	+++	NT
37	+++	NT
42	+++	NT
NT = не тестировалось
IC50<1 мкМ +++
1 мкМ<IC50<5 мкМ ++
IC50>5 мкМ +

In vivo антинеопластический (противоопухолевый) эффект

Эффективность соединений настоящего изобретения может быть определена с использованием in vivo исследований на моделях ксенотрансплантатов животных. Модель ксенотрансплантата животных - одна из обычно используемых in vivo моделей рака.

В этих исследованиях в голых бестимусных мышей женского пола 12-14-недельного возраста можно имплантировать подкожно подвздошно 5×10⁶ клеток РС-3 линии раковых клеток простаты человека в 50%-ном Matrigеl (BD Biosciences). Когда опухоль достигнет размера 100 мм³, ксенотрансплантированные голые мыши распределяются попарно в различные группы лечения. Выбранные ингибиторы киназ растворяются в адекватных носителях и вводятся в ксенотрансплантированных голых мышей интраперитонеально или перорально ежедневно в течение 28 дней. Объем дозирования составляет 0,01 мл/г веса тела. Объем опухоли рассчитывается дважды в неделю после инъекции, используя формулу: Объем (мм³)=(w²×l)/2, где w = ширина и l = длина в мм опухоли MV4-11. Соединения настоящего изобретения, которые были проверены, показывают значительное сокращение объема опухоли по сравнению с контрольными группами, которые обрабатывались только носителями. Результаты таким образом покажут, что соединения настоящего изобретения эффективны в лечении пролиферативных заболеваний, таких как рак.

Подробности определенных воплощений, описанных в этом изобретении, не должны быть рассмотрены как ограничения. Различные эквиваленты и модификации могут быть выполнены, не отступая от духа и охвата настоящего изобретения, и подразумевается, что такие эквивалентные воплощения - часть настоящего изобретения.