способ модулирования биологических функций, ассоциированных с процессом старения пожилого или старого животного-компаньона.

Формула изобретения

1. Способ модулирования биологических функций, ассоциированных с процессом старения пожилого или старого животного-компаньона, выбранного из собаки мелкой/средней породы, собаки крупной породы и кошки, включающий кормление животного-компаньона эффективным количеством композиции, содержащей питательные вещества, по существу в соответствии с одной из следующих композиций, в которой композиция А предназначена для собак мелкой/средней породы, композиция В - для собак крупной породы и композиция С - для кошек, в расчете на массу сухого вещества:

Питательный компонент	А	В	С
Неочищенные белки, %	20,1	19,3	35,7
Жиры, %	16,5	16,9	22,5
Кальций, %	0,7	0,7	0,9
Фосфор, %	0,6	0,7	0,8
ЕРА, %	0,3	0,3	0,2
DHA, %	0,2	0,2	0,3
Линолевая кислота, %	4	4	5,1
Общие N-3 жирные кислоты, %	1,3	2,2	1,1
Общие N-6 жирные кислоты, %	4	4	5,1
Таурин, м.д.	1400	1525	2100
Карнитин, м.д.	314	337	367
Метионин, %	1	1,2	1,3
Цистин, %	0,3	0,2	0,5
Марганец, м.д.	87	100	104
Витамин Е, МЕ/кг	1492	1525	1292
Витамин С, м.д.	127	261	141
Липоевая кислота, м.д.	101	135

2. Способ по п.1, где биологические функции, ассоциированные с процессом старения, включают воспаление, репарацию ДНК или выживание клеток, метаболизм жиров или холестерина, синтез белка, рост клеток и гибель клеток.

3. Способ по п.1, где композиция дополнительно содержит, по меньшей мере, приблизительно 1000 м.д. холина.

4. Способ по п.1, где композиция, которой кормят животное, представляет собой угощение для животного или игрушку для животного.

5. Способ по п.1, где композиция, которой кормят животное, представляет собой пищевую добавку.

6. Способ по п.1, включающий кормление животного композицией в количестве, эффективном для модулирования биологических функций, ассоциированных с процессом старения, где о модулировании биологических функций, ассоциированных с процессом старения, свидетельствует улучшение в одном или нескольких биологических каскадах, выбранных из свертывания крови и активации и агрегации тромбоцитов, целостности костей и мышц, воспалительных ответов, деградации хрящей и болевого ответа, каскадов повреждения и репарации ДНК, нервной функции, синтеза и деградации гликогена, гликолиза, глюконеогенеза, каскада пентозофосфатов, процесса старения и переноса электронов.

7. Способ по п.1, где способ включает кормление животного композицией в количестве, эффективном для модулирования биологических функций, ассоциированных с процессом старения, где о модулировании биологических функций, ассоциированных с процессом старения, свидетельствует благоприятное изменение экспрессии одного или нескольких генов, которые кодируют белки, ассоциированные или связанные с биологическими каскадами, выбранными из свертывания крови и активации и агрегации тромбоцитов, целостности костей и мышц, воспалительных ответов, деградации хрящей и болевого ответа, каскадов повреждения и репарации ДНК, нервной функции, синтеза и деградации гликогена, гликолиза, глюконеогенеза, каскада пентозофосфатов, процесса старения и переноса электронов.

8. Способ по п.1, дополнительно включающий измерение повышения качества жизни указанного животного, включающее количественное определение уровней одного или нескольких генов, выбранных из генов, описанных в таблицах 5-14, у указанного животного до и после кормления указанной композицией, и сравнение указанных уровней у животного, где повышение качества жизни указанного животного отражается благоприятным изменением уровней экспрессии генов у указанного животного.

9. Способ по п.1, где о повышении качества жизни животного свидетельствует благоприятное изменение экспрессии одного или нескольких генов старения, которые кодируют белки, ассоциированные или связанные с биологическими каскадами, выбранными из воспаления, репарации ДНК, выживания клеток, метаболизма жиров и холестерина, синтеза белков, роста клеток и гибели клеток.

10. Способ по п.9, где изменение экспрессии происходит в одном или нескольких генах, приведенных в таблицах 15-20, и где изменение экспрессии происходит в направлении уровня экспрессии у здорового взрослого животного-компаньона по сравнению с уровнем экспрессии у гериатрического животного.

Описание изобретения к патенту

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится, главным образом, к способам модулирования биологических функций, ассоциированных с процессом старения животного, и, в частности, к применению пищевых композиций, содержащих омега-3 полиненасыщенные жирные кислоты, для модулирования биологических функций, ассоциированных с процессом старения пожилого животного или старого животного.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОМУ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Для животных-компаньонов, таких как собаки и кошки, часто требуются различные режимы, зависящие от их периода жизни (возраста), размера, композиции тела и породы. Потребности в питательных веществах, как для собак, так и для кошек, можно разделить на три различные стадии жизни, исходя из возраста: растущие собаки (или кошки), взрослые собаки (или кошки) и пожилые собаки (или кошки). Последнюю категорию пожилых собак (или кошек) можно далее разделить на две стадии, которые включают пожилых (или зрелого возраста) и старых (или гериатрических). Кроме того, собак подразделяют на различные категории: собаки обычных пород и собаки крупных пород.

Незаменимые жирные кислоты, состоящие из омега-3 и омега-6 полиненасыщенных жирных кислот, являются важными питательными веществами для здоровья животного. Однако эти питательные вещества либо не могут продуцироваться у животных, либо не могут продуцироваться в достаточных количествах для обеспечения полезных эффектов, и, таким образом, животное должно употреблять их с рационом. См., например, Hornstra, G., et al., "Essential fatty acids in pregnancy and early human development", Eur. J. Obs. & Gyn. and Reprod. Biology, 61:57-62 (1995). Ранее утверждали, что докозагексаеновая кислота ("DHA"), омега-3-полиненасыщенная жирная кислота, является эффективной в отношении способности к обучению в лабиринте и функций головного мозга у стареющих мышей. См., Lim, S.-Y., "Intakes of dietary docosahexaenoic acid ethyl ester and egg phosphatidylcholine improve maze-learning ability in young and old mice", J. Nutr., 130:1629-1632 (2000).

Rogers описывает теорию потенциального применения антиоксидантов для замедления нарушения когнитивной функции, в частности, у пожилых. См. Rogers, P., "A healthy body, a healthy mind: long-term impact of diet on mood and cognitive function", Proceedings of the Nutrition Society, 60:135-143 (2001).

Несмотря на исследования и разработки, связанные с улучшением когнитивных способностей, продолжает существовать потребность в способах улучшения качества жизни пожилых животных, определяемого, например, по более высокой активности, повышенной жизнеспособности, защите хрящей, поддержанию мышечной массы, повышенной перевариваемости и улучшенному качеству кожи и шерсти у пожилых и старых животных.

Как описано выше, для достижения этого результата можно вводить пищевую композицию для старых животных, описанную в настоящем документе. Кроме того, авторы настоящего изобретения описывают в настоящем документе их неожиданное открытие, что улучшенное качество жизни пожилых и старых животных, обеспечиваемое введением пищевой композиции для домашних животных, описанной в настоящем документе, отражается на геномном уровне. Конкретно, как подробно описано в разделе "Примеры" ниже, данные генных чипов указывают на то, что экспрессия генов, которые кодируют белки, ассоциированные с несколькими биологическими каскадами, такими как свертывание крови и активация и агрегация тромбоцитов, целостность костей и мышц, воспалительные ответы, деградация хряща и болевой ответ, каскады повреждения и репарации ДНК, нервная функция, синтез и деградация гликогена, гликолиз, глюконеогенез и каскад пентозофосфатов, процесс старения и перенос электронов, модифицируются, т.е., как правило, большинство из них благоприятным образом изменяются путем введения животному пищевых композиций для старых домашних животных, описанных в настоящем документе.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Изобретение относится к способам улучшения или повышения качества жизни пожилых и старых животных путем кормления животного композицией, содержащей, по меньшей мере, приблизительно 9% по массе белков, по меньшей мере, приблизительно 5% по массе жиров и, по меньшей мере, приблизительно 0,05% по массе, по меньшей мере, одной омега-3 полиненасыщенной жирной кислоты.

В одном варианте осуществления изобретение относится к композициям, эффективным для улучшения качества жизни животного, где об улучшенном качестве жизни свидетельствует улучшение одной или нескольких характеристик, выбранных из активности, жизнеспособности, защиты хрящей, поддержания мышечной массы, усваиваемости и качества кожи и шерсти.

В другом варианте осуществления изобретение относится к композициям, содержащим, по меньшей мере, одну омега-3 полиненасыщенную жирную кислоту, выбранную из докозагексаеновой кислоты ("DHA") и эйкозапентаеновой кислоты ("EPA"). В дополнительном варианте осуществления способ включает кормление животного композицией, дополнительно содержащей, по меньшей мере, один антиоксидант и, по меньшей мере, одно питательное вещество, выбранное из холина, марганца, метионина, цистеина, L-карнитина, лизина и их смесей.

В одном варианте осуществления изобретение относится к композициям, эффективным для улучшения или повышения качества жизни животного, где об улучшенном качестве жизни свидетельствует улучшение в одном или нескольких биологических каскадах, выбранных из свертывания крови и активации и агрегации тромбоцитов, целостности костей и мышц, воспалительных ответов, деградации хрящей и болевого ответа, каскадов повреждения и репарации ДНК, нервной функции, синтеза и деградации гликогена, гликолиза, глюконеогенеза, каскада пентозофосфатов, процесса старения и переноса электронов.

В другом варианте осуществления изобретение относится к композициям, эффективным для улучшения качества жизни животного, где об улучшенном качестве жизни животного свидетельствует благоприятное изменение экспрессии одного или нескольких генов, которые кодируют белки, ассоциированные или связанные с биологическими каскадами, выбранными из свертывания крови и активации и агрегации тромбоцитов, целостности костей и мышц, воспалительных ответов, деградации хрящей и болевого ответа, каскадов повреждения и репарации ДНК, нервной функции, синтеза и деградации гликогена, гликолиза, глюконеогенеза, каскада пентозофосфатов, процесса старения и переноса электронов.

В другом варианте осуществления изобретение относится к способам лечения животного, страдающего нарушением или заболеванием, ассоциированным или связанным с биологическим каскадом, выбранным из свертывания крови и активации и агрегации тромбоцитов, целостности костей и мышц, воспалительных ответов, деградации хрящей и болевого ответа, каскадов повреждения и репарации ДНК, нервной функции, синтеза и деградации гликогена, гликолиза, глюконеогенеза, каскада пентозофосфатов, процесса старения и переноса электронов, включающим введение указанному животному эффективного количества композиции по настоящему изобретению. В одном варианте осуществления композиция включает, по меньшей мере, приблизительно 9% по массе белков, по меньшей мере, приблизительно 5% по массе жиров и, по меньшей мере, приблизительно 0,05% по массе, по меньшей мере, одной омега-3 полиненасыщенной жирной кислоты. В следующем варианте осуществления указанная композиция содержит, по меньшей мере, одну омега-3 полиненасыщенную жирную кислоту, выбранную из докозагексаеновой кислоты ("DHA") и эйкозапентаеновой кислоты ("EPA"). В дополнительном варианте осуществления композиция дополнительно содержит, по меньшей мере, один антиоксидант и, по меньшей мере, одно питательное вещество, выбранное из холина, марганца, метионина, цистеина, L-карнитина, лизина и их смесей. В дополнительных вариантах осуществления композиция может содержать компоненты, описанные в таблице 1 или таблице 1A.

В другом варианте осуществления изобретение относится к способам определения или характеризации повышения качества жизни животного, в частности пожилого или старого животного, которого кормили композицией, описанной в настоящем документе, путем количественного определения уровней генной экспрессии одного или нескольких генов, выбранных из генов, описанных в таблицах 5-14, у указанного животного до и после кормления композицией, описанной в настоящем документе, и сравнения указанных уровней у животного, где на повышение качества жизни указанного животного указывает благоприятное изменение уровней экспрессии генов у указанного животного.

Другой вариант осуществления относится к способам изменения экспрессии, по меньшей мере, одного пептида у млекопитающего, причем способ включает введение млекопитающему композиции, содержащей, по меньшей мере, приблизительно 9% по массе белков; по меньшей мере, приблизительно 5% по массе жиров; и, по меньшей мере, приблизительно 0,05% по массе, по меньшей мере, одной омега-3 полиненасыщенной жирной кислоты, где, по меньшей мере, один пептид выбран из группы, состоящей из X, Y и Z. В отношении различных вариантов осуществления, представленных в настоящем документе, в настоящем документе предусматривается, что пожилое или старое животное может представлять собой пожилую или старую собаку крупной породы, собаку обычной породы, собаку мелкой породы или кошку.

В другом варианте осуществления изобретение относится к способам скрининга одного или нескольких тестируемых соединений в отношении их способности изменять экспрессию, по меньшей мере, одного представляющего интерес гена у млекопитающего, причем способ включает введение контрольной композиции контрольной группе млекопитающих и определение уровней экспрессии, по меньшей мере, одного представляющего интерес гена, введение одной или нескольких тестируемых композиций экспериментальной группе млекопитающих и определение уровней экспрессии, по меньшей мере, одного представляющего интерес гена, где тестируемая композиция содержит, по меньшей мере, приблизительно 9% по массе белков; по меньшей мере, приблизительно 5% по массе жиров; и, по меньшей мере, приблизительно 0,05% по массе, по меньшей мере, одной омега-3 полиненасыщенной жирной кислоты, и определение отличий в уровнях экспрессии, по меньшей мере, одного представляющего интерес гена между контрольной и экспериментальной группой млекопитающих после введения каждой группе соответствующих композиций, где отличие в уровнях экспрессии, по меньшей мере, одного представляющего интерес гена указывает на то, что тестируемая композиция способна изменять экспрессию, по меньшей мере, одного представляющего интерес гена.

Другой вариант осуществления относится к способам скрининга одного или нескольких тестируемых соединений в отношении их способности изменять экспрессию, по меньшей мере, одного представляющего интерес гена у млекопитающего, причем способ включает введение контрольной композиции контрольной группе млекопитающих и определение уровней экспрессии, по меньшей мере, одного представляющего интерес гена, где контрольная композиция содержит, по меньшей мере, приблизительно 9% по массе белков; по меньшей мере, приблизительно 5% по массе жиров; и, по меньшей мере, приблизительно 0,05% по массе, по меньшей мере, одной омега-3 полиненасыщенной жирной кислоты, введение одной или нескольких тестируемых композиций экспериментальной группе млекопитающих и определение уровней экспрессии, по меньшей мере, одного представляющего интерес гена и определение отличий в уровнях экспрессии, по меньшей мере, одного представляющего интерес гена между контрольной и экспериментальной группой млекопитающих после введения каждой группе их соответствующих композиций, где отличие в уровнях экспрессии, по меньшей мере, одного представляющего интерес гена указывает на то, что тестируемая композиция способна изменять экспрессию, по меньшей мере, одного представляющего интерес гена.

Другие и дополнительные задачи, признаки и преимущества настоящего изобретения будут очевидны специалистам в данной области.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Определения

Предусматривается, что изобретение, описанное в настоящем документе, не ограничивается конкретными описанными способами, протоколами и реагентами, поскольку они могут варьировать. Также следует понимать, что терминология, используемая в настоящем документе, предназначена только для описания конкретных вариантов осуществления и не предназначена для ограничения объема настоящего изобретения никоим образом.

Если не определено иначе, все технические и научные термины, используемые в настоящем документе, имеют те же значения, как обычно понимает специалист в области, к которой относится это изобретение. Хотя при осуществлении на практике или тестировании настоящего изобретения можно использовать любые способы и материалы, сходные или эквивалентные способам и материалам, описанным в настоящем документе, в настоящем документе описаны преимущественные способы, устройства и материалы. Все публикации, упомянутые в настоящем документе, включены в настоящий документ в качестве ссылок для описания или раскрытия материалов и способов, описанных в публикации, которые можно использовать применительно к изобретению.

При применении на практике настоящего изобретения можно использовать множество общепринятых способов молекулярной биологии. Эти способы хорошо известны и объяснены, например, в F.M. Ausubel, Ed. Current Protocols in Molecular Biology, Volumes I, II и III, (Wiley, New York), 1997; J. Sambrook, E.F. Fritsch, T. Maniatis, Eds., Molecular Cloning: A Laboratory Manual (Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor. New York, 1989).

Как используют в настоящем документе и в прилагаемой формуле изобретения, форма единственного включает форму множественного числа, если контекст явно не указывает на иное.

Термины "пожилой" или "зрелый взрослый" относятся к стадии жизни животного. Для мелких или обычных пород собак возраст "пожилого" периода жизни составляет от приблизительно 7 до приблизительно 10 лет. Для кошек возраст "пожилого" периода жизни составляет от приблизительно 7 до приблизительно 12 лет. Для крупных пород собак возраст старше 5 лет соответствует "старому" возрасту, как описано ниже.

Термины "старый" или "гериатрический" относится к конкретному периоду жизни животного. Для мелких или обычных пород собак возраст старого периода жизни составляет более 10 лет. Для крупных пород собак возраст старого периода жизни составляет любой возраст старше 5 лет. Для кошек старый период представляет собой любой возраст более 12 лет.

Термин "крупная порода" собак означает собак, которые обычно весят приблизительно 55 фунтов (25 кг) или более во взрослом состоянии.

Термин "обычная порода" означает собак, которые в норме весят менее чем приблизительно 55 фунтов (25 кг) во взрослом состоянии.

Термин "мелкая порода" собак означает, что они весят менее чем приблизительно 20 фунтов (9 кг) во взрослом состоянии.

Термин "пищевая композиция для старого домашнего животного" относится к любой и всем пищевым композициям для домашних животных, описанным в настоящем документе.

Термин "углевод", как используют в настоящем документе, включает полисахариды (например, крахмалы и декстрины) и сахара (например, сахарозу, лактозу, мальтозу, глюкозу и фруктозу), которые при гидролизе метаболизируются для выработки энергии. Примеры углеводов, пригодных для включения в композиции, описанные в настоящем документе, включают, но не ограничиваются ими, кукурузу, сорго обыкновенное, пшеницу, ячмень и рис.

Термин "антиоксидант" означает вещество, которое способно реагировать со свободными радикалами и нейтрализовать их. Иллюстративные примеры таких веществ включают бета-каротин, селен, кофермент Q10 (убиквинон), лютеин, токотриенолы, изофлавоны сои, S-аденозилметионин, глутатион, таурин, N-ацетилцистеин, витамин E, витамин C, липоевую кислоту и L-карнитин. Примеры пищевых продуктов, содержащих пригодные уровни одного или нескольких антиоксидантов, включают, но не ограничиваются ими, гинкго билоба, зеленый чай, брокколи, цитрусовую пульпу, виноградные выжимки, выжимки томата, морковь, шпинат и широкое множество типов фруктовой и овощной пищи. Специалисту в данной области понятно, что, хотя единицы антиоксидантов могут быть представлены в настоящем документе в качестве "м.д.", также соответствующие количества антиоксидантов могут быть представлены в качестве "МЕ/кг", когда это целесообразно и традиционно для данного антиоксиданта, например витамина E.

Термины "благоприятное изменение" экспрессии гена или экспрессию гена можно "благоприятно изменять" и сходные термины относятся к модификации экспрессии гена (например, повышению или снижению уровней мРНК), так что уровни белков или пептидных цепей, кодируемые этими генами, могут быть соответствующим образом модифицированы, так что ассоциированный с ними биологический каскад может с большей вероятностью функционировать нормально, как у здорового животного, и иметь меньшую тенденцию к тому, чтобы отражать патологические изменения в каскаде, которые, например, могут быть типичными для старого или гериатрического животного. Как правило, благоприятные изменения экспрессии генов относятся к улучшенному здоровью и/или сниженной склонности к заболеваниям у животного. Как используют в настоящем документе, измерение отличий в "экспрессии генов" и сходные термины относятся, например, к характеризации того, повышается или снижается экспрессия гена у животного по сравнению с контрольным уровнем. Уровни экспрессии генов можно оценивать путем определения уровней мРНК соответствующего гена, или их можно устанавливать путем определения уровней белка или пептидной цепи. Для ясности определения "экспрессия генов" или "уровни экспрессии генов", как используют в настоящем документе, включают, но не ограничиваются ими, определение либо соответствующих уровней РНК, или уровней пептида/белка, или обоих из них. Изобретение не ограничивается конкретным способом определения уровней белка или пептида или РНК, все из которых хорошо известны в данной области. Более того, экспрессию генов и уровни экспрессии генов можно оценивать в любой клетке или ткани, которая является пригодной для экспрессии представляющего интерес гена. В одном варианте осуществления экспрессию гена оценивают в клетках крови. В более конкретном варианте осуществления клетки крови представляют собой лимфоциты. В еще более конкретном варианте осуществления клетки представляют собой T-лимфоциты. Другие типы клеток включают, но не ограничиваются ими, мышечные клетки, нервные клетки, глиальные клетки, эндотелиальные клетки, клетки кожи, клетки печени, клетки почки, клетки кости, другие типы клеток крови, такие как, но не ограничиваясь ими, макрофаги. Клетки могут представлять собой первичные клетки, т.е. взятые непосредственно от животного, такие как клетки, выделенные из недавно взятой крови. Также клетки могут быть не первичными, т.е. они могут представлять собой установившуюся клеточную линию путем пассирования или даже иммортализованную клеточную линию, так что способы определения уровней экспрессии генов можно выполнять на установившихся клеточных линиях, например клетках CHO, перед введением композиции животному.

Как используют в настоящем документе, "ген" представляет собой молекулу ДНК, по меньшей мере, часть которой транскрибируется в молекулу РНК. Молекула ДНК может включать нетранскрибируемые области и/или нетранслируемые области, такие как, но не ограничиваясь ими, интроны, промоторы, энхансерные области, 5'-нетранслируемые области, или может не включать их.

Способы включают гены, приведенные в настоящем документе, а также гомологи. Таким образом, способы по настоящему изобретению не ограничиваются генами, для которых в настоящем документе описаны регистрационные номера баз данных, и включают их гомологи. Как используют в настоящем документе, гомолог гена, приведенного в настоящем документе, означает ген, кодирующая или некодирующая последовательность которого может несколько отличаться от эталонной последовательности, но также кодирует тот же или "эквивалентный" белок или пептид в другом организме. Например, способы по настоящему изобретению относятся к экспрессии фосфолипазы A2, по меньшей мере, у собаки. Гомолог гена фосфолипазы A2 собак включает, но не ограничивается ими, ген фосфолипазы A2 кошек, ген фосфолипазы A2 крупного рогатого скота, ген фосфолипазы A2 свиней, ген фосфолипазы A2 лошадей и ген фосфолипазы A2 приматов. Гомологи также включают варианты кодирующих или некодирующих последовательностей, которые определяют небольшие изменения между видами. Например, настоящее изобретение относится к гену фосфолипазы A2 человека, и ее гомолог включает, но не ограничивается ими, ген фосфолипазы A2 мартышки или шимпанзе.

Как используют в настоящем документе, "улучшение" или "повышение" качества жизни животного относится к улучшению или повышению одной или нескольких характеристик, выбранных из активности, жизнеспособности, защиты хрящей, поддержания мышечной массы, усваиваемости и качества кожи и шерсти. Кроме того, также предусматриваются улучшение/повышение свертывания крови и активации и агрегации тромбоцитов, целостности костей и мышц, воспалительных ответов, деградации хрящей и болевого ответа, каскадов повреждения и репарации ДНК, нервной функции, синтеза и деградации гликогена, гликолиза, глюконеогенеза, каскада пентозофосфатов, процесса старения и переноса электронов.

"Улучшение" или "повышение" характеристики или биологического каскада относится к модификации указанной характеристики или биологического каскада таким образом, чтобы существовала тенденция к тому, чтобы характеристика или каскад выглядели и/или функционировали нормально и чтобы уменьшалась тенденция к тому, чтобы отражать патологические изменения характеристики или каскада, которые, например, могут быть типичными для старого животного.

Как используют в настоящем документе, способы "лечения" животного, страдающего заболеванием или нарушением, также включают способы предотвращения и/или смягчения заболевания или нарушения.

Как используют в настоящем документе, "гены, ассоциированные с процессом старения", или "гены старения", или сходные термины относятся к генам, которые могут быть вовлечены в процесс старения у животного. Эти гены могут включать, например, гены, которые кодируют белки, которые участвуют в ряде биологических функций, таких как воспаление, репарация ДНК или выживание клеток, метаболизм жиров или холестерина, синтез белка, иммунная регуляция, рост клеток и гибель клеток.

Аналогично, "процесс старения", как используют этот термин в настоящем документе, относится к процессу старения у животного, и он может включать изменение биологических функций, например, таких как воспаление, репарация ДНК или выживание клеток, метаболизм жиров или холестерина, синтез белка, иммунная регуляция, рост клеток и гибель клеток.

Как используют в настоящем документе, выражение "моделирование биологических функций, ассоциированное с процессом старения", относится к активации или подавлению генов, которые могут быть вовлечены в процесс старения животного. Эти гены могут включать, например, гены, которые кодируют белки, которые участвуют в ряде биологических функций, таких как воспаление, репарация ДНК или выживание клеток, метаболизм жиров или холестерина, синтез белка, иммунная регуляция, рост клеток и гибель клеток.

Изобретение

Настоящее изобретение относится к композициям и способам улучшения или повышения качества жизни пожилого и старого животного. Способы включают кормление животного композицией, содержащей, по меньшей мере, приблизительно 9% по массе белков, по меньшей мере, приблизительно 5% по массе жиров и, по меньшей мере, приблизительно 0,05% по массе омега-3 полиненасыщенной жирной кислоты. Способы пригодны для усиления активности, повышения жизнеспособности, защиты хрящей, поддержания мышечной массы, усиления усваиваемости и улучшения качества кожи и шерсти у пожилого или старого животного. Также способы пригодны для усиления одного или нескольких биологических каскадов у животного, выбранных из каскада свертывания крови и агрегации тромбоцитов, целостности костей и мышц, воспалительных ответов, деградации хрящей и болевого ответа, каскадов повреждения и репарации ДНК, нервной функции, синтеза и деградации гликогена, гликолиза, глюконеогенеза, каскада пентозофосфатов, процесса старения и переноса электронов, такие улучшения также отражаются общими благоприятными изменениями на геномном уровне. Также в настоящем документе предусматриваются способы лечения животных, страдающих нарушениями или заболеваниями, ассоциированными или связанными с этими биологическими каскадами, включающие введение композиций по настоящему изобретению.

Без связи с теорией, преимущества изобретения могут представлять собой результат физиологических эффектов добавления омега-3 полиненасыщенных жирных кислот в рацион пожилого или старого животного. Аналогично, антиоксиданты, холин и другие питательные вещества могут играть роль в повышении качества жизни пожилого или старого животного.

Хотя способы по настоящему изобретению могут повышать качество жизни животного путем улучшения всех из указанных выше характеристик или усиления всех из описанных биологических каскадов, не обязательно демонстрировать существенные улучшения каждой из характеристик или каскадов для достижения "улучшенного качества жизни", как определено в настоящем документе.

Когда композиции вводят пожилому или старому животному, животное испытывает повышение качества жизни, например, оно проявляет или испытывает одно или несколько из усиления активности, повышения жизнеспособности, защиты хрящей, поддержания мышечной массы, усиления усваиваемости и улучшения качества кожи и шерсти у пожилого или старого животного, а также улучшения например, в каскаде свертываемости крови и агрегации тромбоцитов, целостности костей и мышц, воспалительных ответов, деградации хрящей и болевого ответа, каскадов повреждения и репарации ДНК, нервной функции, синтеза и деградации гликогена, гликолиза, глюконеогенеза, каскада пентозофосфатов, процесса старения и переноса электронов, на что указывают общие благоприятные изменения на геномном уровне. Способы определения этих показателей качества жизни известны специалистам в данной области. Например, активность можно определять различными способами, включая анализ маркеров метаболизма и антиоксидантных маркеров, а также путем клинических исследований с контролирующими вопросами владельцам участвующих в исследовании животных. Потенциальные маркеры метаболизма могут включать грелин, GLP-1, гормон щитовидной железы и/или гормон роста. Потенциальные маркеры антиоксидантного статуса могут включать витамин E, ORAC, глутатионпероксидазу, алканы и/или индикаторы повреждения клеток в сыворотке. Кроме того, жизнеспособность можно определять различными способами, включающими анализ маркеров метаболизма и антиоксидантных маркеров, а также путем клинических исследований с контролирующими вопросами владельцам участвующих в исследовании животных. Аналогично защиту хряща можно измерять различными способами, включающими анализ биомаркеров артрита. Потенциальные биомаркеры артрита могут включать синтез коллагена типа II, матриксную металлопротеиназу, остеокальцин, активность щелочной фосфатазы, COMP и фрагменты поврежденного хряща. Поддержание мышечной массы можно измерять различными способами, включающими анализ состава тела и усваиваемости, можно измерять различными способами, включая клинические исследования с контролирующими вопросами владельцам участвующих в исследовании животных и кормление животного для определения процента усвоенных пищевых добавок. Качество кожи и шерсти можно определять различными способами, включая клинические исследования с контролирующими вопросами владельцам участвующих в исследовании животных. Кроме того, как рассмотрено выше, улучшение качества жизни также отражается на геномном уровне, о чем свидетельствуют данные генных чипов, которые указывают на благоприятные изменения экспрессии генов, ассоциированных с различными важными биологическими каскадами, включающими каскад свертывания крови и агрегации тромбоцитов, целостности костей и мышц, воспалительных ответов, деградации хрящей и болевого ответа, каскадов повреждения и репарации ДНК, нервной функции, синтеза и деградации гликогена, гликолиза, глюконеогенеза, каскада пентозофосфатов, процесса старения и переноса электронов. Типы этих генов представлены в разделе "Примеры" ниже.

Способы по изобретению пригодны для улучшения качества жизни людей и животных, в том числе приматов (например, мартышек, шимпанзе и т.д.), животных-компаньонов (например, собак, кошек, лошадей и т.д.), сельскохозяйственных животных (например, коз, овец, свиней, крупного рогатого скота и т.д.), лабораторных животных (например, мышей, крыс и т.д.), птиц (например, домашних птиц, таких как канарейки, попугаи и т.д., и коммерческих птиц, таких как куры, утки, индюки и т.д.), грызунов (например, хомяков, морских свинок, песчанок, кроликов, ежей, хорьков, шиншилл и т.д.) и диких, экзотических животных и животных зоопарков (например, волков, медведей, оленей и т.д.). В различных вариантах осуществления животное представляет собой кошку, собаку или лошадь.

Композиции по настоящему изобретению предназначены для усиления усваиваемости и улучшения разжевываемости. Корма для собак и кошек, как правило, изготавливают, исходя из их периода жизни (возраста), размера, состава тела и породы. Таким образом, некоторые варианты осуществления настоящего изобретения включают композиции, которые изготавливают так, чтобы они были направлены на конкретные пищевые отличия между собаками обычных или мелких пород, собаками крупных пород и кошек.

Изобретение относится к способам применения множества композиций, содержащих, по меньшей мере, одну омега-3 полиненасыщенную жирную кислоту. Композиции включают продукты питания, добавки, угощения и игрушки (как правило, разжевываемые и годные к употреблению игрушки). Способы также обеспечивают композиции указанным животным на период времени, который является достаточно длительным для достижения улучшенного качества жизни. В одном варианте осуществления способ обеспечивает животное композицией в течение, по меньшей мере, тридцати суток.

Композиции для применения в способах по настоящему изобретению, как правило, имеют содержание омега-3 полиненасыщенной жирной кислоты, по меньшей мере, приблизительно 0,02% (или от приблизительно 0,05% до приблизительно 10%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 6%) по массе в расчете на массу сухого вещества. В некоторых вариантах осуществления омега-3 полиненасыщенная жирная кислота представляет собой DHA. В других вариантах осуществления омега-3 полиненасыщенная жирная кислота представляет собой EPA. В других вариантах осуществления омега-3 полиненасыщенная жирная кислота содержит смесь DHA и EPA.

В некоторых вариантах осуществления композиция, содержащая омега-3 полиненасыщенную жирную кислоту, представляет собой корм. Хотя предусматриваются как жидкие, так и твердые корма, твердые корма, как правило, являются предпочтительными. Корма включают как сухие корма, так и содержащие жидкость корма. Некоторые из компонентов корма, не являющихся полиненасыщенной жирной кислотой, и полезные соотношения включают корма и соотношения, приведенные в таблице 1.

Таблица 1
Компонент	Доля в композиции (% от сухой массы композиции или части на миллион)
Белки	от приблизительно 9% до приблизительно 55%, или от приблизительно 18% до приблизительно 30%, или от приблизительно 33% до приблизительно 55%, или от приблизительно 18% до приблизительно 20%, или от приблизительно 33% до приблизительно 36%.
Жиры	от приблизительно 7% до приблизительно 35%, или от приблизительно 18% до приблизительно 35%, или от приблизительно 7% до приблизительно 24%, или от приблизительно 14% до приблизительно 24%, или от приблизительно 14% до приблизительно 16%, или от приблизительно 18% до приблизительно 24%.
Антиоксиданты	от приблизительно 0 м.д. до приблизительно 7500 м.д., или от приблизительно 0,05 м.д. до приблизительно 3600 м.д., или от приблизительно 250 до приблизительно 3600, или от приблизительно 250 м.д. до приблизительно 1650 м.д., или от приблизительно 5 м.д. до приблизительно 225 м.д., или от приблизительно 0,05 м.д. до приблизительно 2,4 м.д.

В одном варианте осуществления способы по этому изобретению включают кормление старого животного композицией в количестве, эффективном для повышения качества жизни животного. Такие композиции, главным образом, содержат

(a) 0,02% (или от приблизительно 0,05% до приблизительно 10%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 6%), по меньшей мере, одной омега-3 полиненасыщенной жирной кислоты, и

(b) по меньшей мере, одно из следующих:

(i) от приблизительно 10% до приблизительно 55% (или от приблизительно 18% до приблизительно 30%, или от приблизительно 33% до приблизительно 55%, или от приблизительно 18% до приблизительно 20%, или от приблизительно 33% до приблизительно 36%) белков,

(ii) от приблизительно 7% до приблизительно 35% (или от приблизительно 18% до приблизительно 35%, или от приблизительно 7% до приблизительно 24%, или от приблизительно 14% до приблизительно 24%, или от приблизительно 14% до приблизительно 16%, или от приблизительно 18% до приблизительно 24%) жиров, и

(iii) по меньшей мере, приблизительно 0,05 (или от приблизительно 0,05 м.д. или МЕ/кг до приблизительно 7500 м.д., или МЕ/кг или от приблизительно 250 м.д., или МЕ/кг до приблизительно 3600 м.д. или МЕ/кг, или от приблизительно 250 м.д. или МЕ/кг до приблизительно 1650 м.д. или МЕ/кг, или от приблизительно 5 м.д. или МЕ/кг до приблизительно 225 м.д. или МЕ/кг, или от приблизительно 0,05 м.д. или МЕ/кг до приблизительно 2,4 м.д. или МЕ/кг) антиоксидантов.

В другом варианте осуществления способы по этому изобретению включают кормление старой собаки обычной или мелкой породы композицией в количестве, эффективном для повышения качества жизни собаки. Как правило, композиция содержит

(a) по меньшей мере, одно из следующих:

(i) по меньшей мере, приблизительно 0,02% (или от приблизительно 0,02% до приблизительно 0,3%, или от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,3%, или от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,2%) DHA, и

(ii) по меньшей мере, приблизительно 0,1% (или от приблизительно 0,1% до приблизительно 0,5%, или от приблизительно 0,2% до приблизительно 0,5%, или от приблизительно 0,2% до приблизительно 0,3%) EPA,

(b) по меньшей мере, приблизительно 9% (или от приблизительно 9% до приблизительно 30%, или от приблизительно 18% до приблизительно 30%, или от приблизительно 18% до приблизительно 20%) белков,

(c) по меньшей мере, приблизительно 7% (или от приблизительно 7% до приблизительно 24%, или от приблизительно 14% до приблизительно 24%, или от приблизительно 14% до приблизительно 16%) жиров, и

(d) по меньшей мере, одно из следующих:

(i) по меньшей мере, приблизительно 250 МЕ/кг (или от приблизительно 250 МЕ/кг до приблизительно 1500 МЕ/кг, или от приблизительно 500 МЕ/кг до приблизительно 1500 МЕ/кг, или от приблизительно 500 МЕ/кг до приблизительно 1000 МЕ/кг) витамина E,

(iv) по меньшей мере, приблизительно 50 м.д. (или от приблизительно 50 м.д. до приблизительно 500 м.д., или от приблизительно 100 м.д. до приблизительно 500 м.д., или от приблизительно 100 м.д. до приблизительно 301 м.д.) витамина C,

(v) по меньшей мере, приблизительно 600 м.д. (или от приблизительно 600 м.д. до приблизительно 2400 м.д., или от приблизительно 1260 м.д. до приблизительно 2400 м.д., или от приблизительно 1260 м.д. до приблизительно 1545 м.д.) таурина,

(vi) по меньшей мере, приблизительно 50 м.д. (или от приблизительно 50 м.д. до приблизительно 200 м.д., или от приблизительно 100 до приблизительно 160, или от приблизительно 100 до приблизительно 155) липоевой кислоты, и

(vii) по меньшей мере, приблизительно 50 м.д. (или от приблизительно 50 м.д. до приблизительно 500 м.д., или от приблизительно 200 м.д. до приблизительно 500 м.д., или от приблизительно 200 м.д. до приблизительно 350 м.д.) карнитина.

В другом варианте осуществления способы по этому изобретению включают кормление старой собаки крупной породы композицией в количестве, эффективном для повышения качества жизни собаки. Как правило, композиции содержат

(a) по меньшей мере, одно из следующих:

(i) по меньшей мере, приблизительно 0,02% (или от приблизительно 0,02% до приблизительно 0,3%, или от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,3%, или от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,2%) DHA, и

(ii) по меньшей мере, приблизительно 0,1% (или от приблизительно 0,1% до приблизительно 0,5%, или от приблизительно 0,2% до приблизительно 0,5%, или от приблизительно 0,2% до приблизительно 0,3%) EPA,

(b) по меньшей мере, приблизительно 9% (или от приблизительно 9% до приблизительно 30%, или от приблизительно 18% до приблизительно 30%, или от приблизительно 18% до приблизительно 20%) белков,

(c) по меньшей мере, приблизительно 7% (или от приблизительно 7% до приблизительно 24%, или от приблизительно 14% до приблизительно 24%, или от приблизительно 14% до приблизительно 16%) жиров, и

(d) по меньшей мере, одно из следующих:

(i) по меньшей мере, приблизительно 250 МЕ/кг (или от приблизительно 250 МЕ/кг до приблизительно 1500 МЕ/кг, или от приблизительно 500 МЕ/кг до приблизительно 1500 МЕ/кг, или от приблизительно 500 МЕ/кг до приблизительно 1000 МЕ/кг) витамина E,

(viii) по меньшей мере, приблизительно 50 м.д. (или от приблизительно 50 м.д. до приблизительно 500 м.д., или от приблизительно 100 м.д. до приблизительно 500 м.д., или от приблизительно 100 м.д. до приблизительно 301 м.д.) витамина C,

(ix) по меньшей мере, приблизительно 600 м.д. (или от приблизительно 600 м.д. до приблизительно 2400 м.д., или от приблизительно 1260 м.д. до приблизительно 2400 м.д., или от приблизительно 1260 м.д. до приблизительно 1575 м.д.) таурина, и

(x) по меньшей мере, приблизительно 50 м.д. (или от приблизительно 50 м.д. до приблизительно 200 м.д., или от приблизительно 100 до приблизительно 160, или от приблизительно 100 до приблизительно 155) липоевой кислоты, и

(xi) по меньшей мере, приблизительно 50 м.д. (или от приблизительно 50 м.д. до приблизительно 500 м.д., или от приблизительно 200 м.д. до приблизительно 500 м.д., или от приблизительно 200 м.д. до приблизительно 350 м.д.) карнитина.

В другом варианте осуществления способы по этому изобретению включают кормление старой кошки композицией в количестве, эффективном для повышения качества жизни кошки. Композиции, главным образом, содержат

(a) по меньшей мере, одно из следующих:

(i) по меньшей мере, приблизительно 0,05% (или от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,30%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 0,30%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 0,2%) DHA, и

(ii) по меньшей мере, приблизительно 0,1% (или от приблизительно 0,1% до приблизительно 0,5%, или от приблизительно 0,2% до приблизительно 0,5%, или от приблизительно 0,2% до приблизительно 0,3%) EPA,

(b) по меньшей мере, приблизительно 15% (или от приблизительно 15% до приблизительно 55%, или от приблизительно 30% до приблизительно 55%, или от приблизительно 33% до приблизительно 36%) белков,

(c) по меньшей мере, приблизительно 9% (или от приблизительно 9% до приблизительно 35%, или от приблизительно 18% до приблизительно 35%, или от приблизительно 18% до приблизительно 24%) жиров, и

(d) по меньшей мере, одно из следующих:

(i) по меньшей мере, приблизительно 250 МЕ/кг (или от приблизительно 250 МЕ/кг до приблизительно 1500 МЕ/кг, или от приблизительно 500 МЕ/кг до приблизительно 1500 МЕ/кг, или от приблизительно 500 МЕ/кг до приблизительно 1100 МЕ/кг) витамина E,

(xii) по меньшей мере, приблизительно 50 м.д. (или от приблизительно 50 м.д. до приблизительно 300 м.д., или от приблизительно 100 м.д. до приблизительно 300 м.д., или от приблизительно 100 м.д. до приблизительно 200 м.д.) витамина C,

(xiii) по меньшей мере, приблизительно 1100 м.д. (или от приблизительно 1100 м.д. до приблизительно 3500 м.д., или от приблизительно 2300 м.д. до приблизительно 3500 м.д., или от приблизительно 2300 м.д. до приблизительно 2350 м.д.) таурина, и

(xiv) по меньшей мере, приблизительно 200 м.д. (или от приблизительно 200 до приблизительно 750 м.д., или от приблизительно 400 м.д. до приблизительно 750 м.д., или от приблизительно 400 до приблизительно 525 м.д.) карнитина, и

(xv) по меньшей мере, приблизительно 0,05% (или от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,6%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 0,6%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 0,4%) цистина.

В другом варианте осуществления способы по этому изобретению включают кормление старого животного композицией в количестве, эффективном для повышения активности и жизнеспособности животного. Композиция, главным образом, содержит

(a) 0,02% (или от приблизительно 0,05% до приблизительно 10%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 6%) по меньшей мере, одной омега-3 полиненасыщенной жирной кислоты, и

(b) по меньшей мере, одно из следующих:

(xvi) от приблизительно 10% до приблизительно 55% (или от приблизительно 18% до приблизительно 30%, или от приблизительно 33% до приблизительно 55%, или от приблизительно 18% до приблизительно 20%, или от приблизительно 33% до приблизительно 36%) белков,

(xvii) от приблизительно 7% до приблизительно 35% (или от приблизительно 18% до приблизительно 35%, или от приблизительно 7% до приблизительно 24%, или от приблизительно 14% до приблизительно 24%, или от приблизительно 14% до приблизительно 16%, или от приблизительно 18% до приблизительно 24%) жиров,

(xviii) по меньшей мере, приблизительно 0,05 (или от приблизительно 0,05 м.д. до приблизительно 7500 м.д., или от приблизительно 250 до приблизительно 3600, или от приблизительно 250 м.д. до приблизительно 1650 м.д., или от приблизительно 5 м.д. до приблизительно 225 м.д., или от приблизительно 0,05 м.д. до приблизительно 2,4 м.д.) антиоксидантов, и

(xix) по меньшей мере, приблизительно 1000 м.д. (или от приблизительно 1000 м.д. до приблизительно 5000 м.д., от приблизительно 3300 м.д. до приблизительно 5000 м.д., или от приблизительно 2000 м.д. до приблизительно 3000 м.д., или от приблизительно 3000 м.д. до приблизительно 4000 м.д.) холина.

В другом варианте осуществления способы по этому изобретению включают кормление старой собаки обычной или мелкой породы композицией в количестве, эффективном для повышения активности и жизнеспособности собаки. Композиция, главным образом содержит

(a) по меньшей мере, одно из следующих:

(i) по меньшей мере, приблизительно 0,02% (или от приблизительно 0,02% до приблизительно 0,3%, или от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,3%, или от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,2%) DHA, и

(ii) по меньшей мере, приблизительно 0,1% (или от приблизительно 0,1% до приблизительно 0,5%, или от приблизительно 0,2% до приблизительно 0,5%, или от приблизительно 0,2% до приблизительно 0,3%) EPA,

(b) по меньшей мере, приблизительно 9% (или от приблизительно 9% до приблизительно 30%, или от приблизительно 18% до приблизительно 30%, или от приблизительно 18% до приблизительно 20%) белков,

(c) по меньшей мере, приблизительно 7% (или от приблизительно 7% до приблизительно 24%, или от приблизительно 14% до приблизительно 24%, или от приблизительно 14% до приблизительно 16%) жиров,

(d) по меньшей мере, одно из следующих:

(i) по меньшей мере, приблизительно 250 МЕ/кг (или от приблизительно 250 МЕ/кг до приблизительно 1500 МЕ/кг, или от приблизительно 500 МЕ/кг до приблизительно 1500 МЕ/кг, или от приблизительно 500 МЕ/кг до приблизительно 1000 МЕ/кг) витамина E,

(xx) по меньшей мере, приблизительно 50 м.д. (или от приблизительно 50 м.д. до приблизительно 500 м.д., или от приблизительно 100 м.д. до приблизительно 500 м.д., или от приблизительно 100 м.д. до приблизительно 301 м.д.) витамина C,

(xxi) по меньшей мере, приблизительно 600 м.д. (или от приблизительно 600 м.д. до приблизительно 2400 м.д., или от приблизительно 1260 м.д. до приблизительно 2400 м.д., или от приблизительно 1260 м.д. до приблизительно 1545 м.д.) таурина, и

(xxii) по меньшей мере, приблизительно 50 м.д. (или от приблизительно 50 м.д. до приблизительно 200 м.д., или от приблизительно 100 до приблизительно 160, или от приблизительно 100 до приблизительно 155) липоевой кислоты, и

(xxiii) по меньшей мере, приблизительно 50 м.д. (или от приблизительно 50 м.д. до приблизительно 500 м.д., или от приблизительно 200 м.д. до приблизительно 500 м.д., или от приблизительно 200 м.д. до приблизительно 350 м.д.) карнитина,

(e) по меньшей мере, приблизительно 1000 м.д. (или от приблизительно 1000 м.д. до приблизительно 3200 м.д., или от приблизительно 2000 м.д. до приблизительно 3200 м.д., или от приблизительно 2000 м.д. до приблизительно 2500 м.д.) холина,

(f) по меньшей мере, приблизительно 50 м.д. (или от приблизительно 50 м.д. до приблизительно 150 м.д., или от приблизительно 100 м.д. до приблизительно 150 м.д., или от приблизительно 100 м.д. до приблизительно 110 м.д.) марганца, и

(g) по меньшей мере, приблизительно 0,4% (или от приблизительно 0,4% до приблизительно 2%, или от приблизительно 0,9% до приблизительно 2%, или от приблизительно 0,9% до приблизительно 1,2%) лизина, и

(h) по меньшей мере, от приблизительно 0,4% до приблизительно 1,5% метионина.

В другом варианте осуществления способы по этому изобретению включают кормление старой собаки крупной породы композицией в количестве, эффективном для повышения активности и жизнеспособности собаки. Композиция, главным образом, содержит

(a) по меньшей мере, одно из следующих:

(i) по меньшей мере, приблизительно 0,02% (или от приблизительно 0,02% до приблизительно 0,3%, или от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,3%, или от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,2%) DHA, и

(ii) по меньшей мере, приблизительно 0,1% (или от приблизительно 0,1% до приблизительно 0,5%, или от приблизительно 0,2% до приблизительно 0,5%, или от приблизительно 0,2% до приблизительно 0,3%) EPA,

(b) по меньшей мере, приблизительно 9% (или от приблизительно 9% до приблизительно 30%, или от приблизительно 18% до приблизительно 30%, или от приблизительно 18% до приблизительно 20%) белков,

(c) по меньшей мере, приблизительно 7% (или от приблизительно 7% до приблизительно 24%, или от приблизительно 14% до приблизительно 24%, или от приблизительно 14% до приблизительно 16%) жиров,

(d) по меньшей мере, одно из следующих:

(i) по меньшей мере, приблизительно 250 МЕ/кг (или от приблизительно 250 МЕ/кг до приблизительно 1500 МЕ/кг, или от приблизительно 500 МЕ/кг до приблизительно 1500 МЕ/кг, или от приблизительно 500 МЕ/кг до приблизительно 1000 МЕ/кг) витамина E,

(xxiv) по меньшей мере, приблизительно 50 м.д. (или от приблизительно 50 м.д. до приблизительно 500 м.д., или от приблизительно 100 м.д. до приблизительно 500 м.д., или от приблизительно 100 м.д. до приблизительно 301 м.д.) витамина C,

(xxv) по меньшей мере, приблизительно 600 м.д. (или от приблизительно 600 м.д. до приблизительно 2400 м.д., или от приблизительно 1260 м.д. до приблизительно 2400 м.д., или от приблизительно 1260 м.д. до приблизительно 1575 м.д.) таурина, и

(xxvi) по меньшей мере, приблизительно 50 м.д. (или от приблизительно 50 м.д. до приблизительно 200 м.д., или от приблизительно 100 до приблизительно 160, или от приблизительно 100 до приблизительно 155) липоевой кислоты, и

(xxvii) по меньшей мере, приблизительно 50 м.д. (или от приблизительно 50 м.д. до приблизительно 500 м.д., или от приблизительно 200 м.д. до приблизительно 500 м.д., или от приблизительно 200 м.д. до приблизительно 350 м.д.) карнитина,

(e) по меньшей мере, приблизительно 1000 м.д. (или от приблизительно 1000 м.д. до приблизительно 3200 м.д., или от приблизительно 2000 м.д. до приблизительно 3200 м.д., или от приблизительно 2000 м.д. до приблизительно 2500 м.д.) холина,

(f) по меньшей мере, приблизительно 50 м.д. (или от приблизительно 50 м.д. до приблизительно 150 м.д., или от приблизительно 100 м.д. до приблизительно 150 м.д., или от приблизительно 100 м.д. до приблизительно 110 м.д.) марганца, и

(g) по меньшей мере, приблизительно 0,4% (или от приблизительно 0,4% до приблизительно 2%, или от приблизительно 0,9% до приблизительно 2%, или от приблизительно 0,9% до приблизительно 1,2%) лизина, и

(h) по меньшей мере, от приблизительно 0,4% до приблизительно 1,5% метионина.

В другом варианте осуществления способы по этому изобретению включают кормление старой кошки композицией в количестве, эффективном для повышения активности и жизнеспособности кошки. Композиция, главным образом, содержит

(a) по меньшей мере, одно из следующих:

(i) по меньшей мере, приблизительно 0,05% (или от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,30%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 0,30%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 0,2%) DHA, и

(ii) по меньшей мере, приблизительно 0,1% (или от приблизительно 0,1% до приблизительно 0,5%, или от приблизительно 0,2% до приблизительно 0,5%, или от приблизительно 0,2% до приблизительно 0,3%) EPA,

(b) по меньшей мере, приблизительно 15% (или от приблизительно 15% до приблизительно 55%, или от приблизительно 30% до приблизительно 55%, или от приблизительно 33% до приблизительно 36%) белков,

(c) по меньшей мере, приблизительно 9% (или от приблизительно 9% до приблизительно 35%, или от приблизительно 18% до приблизительно 35%, или от приблизительно 18% до приблизительно 24%) жиров,

(d) по меньшей мере, одно из следующих:

(i) по меньшей мере, приблизительно 250 МЕ/кг (или от приблизительно 250 МЕ/кг до приблизительно 1500 МЕ/кг, или от приблизительно 500 МЕ/кг до приблизительно 1500 МЕ/кг, или от приблизительно 500 МЕ/кг до приблизительно 1100 МЕ/кг) витамина E,

(xxviii) по меньшей мере, приблизительно 50 м.д. (или от приблизительно 50 м.д. до приблизительно 300 м.д., или от приблизительно 100 м.д. до приблизительно 300 м.д., или от приблизительно 100 м.д. до приблизительно 200 м.д.) витамина C,

(xxix) по меньшей мере, приблизительно 1100 м.д. (или от приблизительно 1100 м.д. до приблизительно 3500 м.д., или от приблизительно 2300 м.д. до приблизительно 3500 м.д., или от приблизительно 2300 м.д. до приблизительно 2350 м.д.) таурина, и

(xxx) по меньшей мере, приблизительно 200 м.д. (или от приблизительно 200 до приблизительно 750 м.д., или от приблизительно 400 м.д. до приблизительно 750 м.д., или от приблизительно 400 до приблизительно 525 м.д.) карнитина, и

(xxxi) по меньшей мере, приблизительно 0,05% (или от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,6%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 0,6%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 0,4%) цистина,

(e) по меньшей мере, приблизительно 1600 м.д. (или от приблизительно 1600 м.д. до приблизительно 5000 м.д., или от приблизительно 3300 м.д. до приблизительно 5000 м.д., или от приблизительно 3300 м.д. до приблизительно 3400 м.д.) холина,

(f) по меньшей мере, приблизительно 50 м.д. (или от приблизительно 50 м.д. до приблизительно 150 м.д., или от приблизительно 100 м.д. до приблизительно 150 м.д., или от приблизительно 100 м.д. до приблизительно 110 м.д.) марганца, и

(g) по меньшей мере, приблизительно 0,7% (или от приблизительно 0,7% до приблизительно 3%, или от приблизительно 1,4% до приблизительно 3%, или от приблизительно 1,4% до приблизительно 1,7%) лизина, и

(h) по меньшей мере, от приблизительно 0,4% до приблизительно 1,5% метионина.

В другом варианте осуществления это изобретение относится к способу повышения качества жизни пожилой или старой собаки мелкой или обычной породы. Способ включает кормление собаки композицией, содержащей

от приблизительно 60% до приблизительно 70% по массе углеводов;

от приблизительно 15% до приблизительно 25% по массе белков, выбранных из животных белков и растительных белков;

от приблизительно 5% до приблизительно 7% по массе жиров, выбранных из животных жиров и растительных жиров;

от приблизительно 2,5% до приблизительно 4% по массе, по меньшей мере, одной омега-3 полиненасыщенной жирной кислоты;

от приблизительно 1% до приблизительно 4% по массе волокон;

от приблизительно 1% до приблизительно 2% по массе минералов и

от приблизительно 0,5 до приблизительно 1,5% по массе витаминов.

В другом варианте осуществления это изобретение относится к способу повышения качества жизни пожилой или старой собаки крупной породы. Способ включает кормление собаки композицией, содержащей

от приблизительно 60% до приблизительно 70% по массе углеводов;

от приблизительно 15% до приблизительно 25% по массе белков, выбранных из животных белков и растительных белков;

от приблизительно 5% до 10% по массе жиров, выбранных из животных жиров и растительных жиров;

от приблизительно 3% до приблизительно 5% по массе, по меньшей мере, одной омега-3 полиненасыщенной жирной кислоты;

от приблизительно 1% до приблизительно 4% по массе волокон;

от приблизительно 0,5% до приблизительно 1% по массе минералов; и

от приблизительно 0,75 до приблизительно 1,25% по массе витаминов.

В другом варианте осуществления это изобретение относится к способу повышения качества жизни пожилой или старой кошки. Способ включает кормление кошки композицией, содержащей

от приблизительно 30% до приблизительно 35% по массе углеводов;

от приблизительно 35% до приблизительно 50% по массе белков, выбранных из животных белков и растительных белков;

от приблизительно 12% до приблизительно 15% по массе жиров, выбранных из животных жиров и растительных жиров;

от приблизительно 1% до приблизительно 2% по массе, по меньшей мере, одной омега-3 полиненасыщенной жирной кислоты;

от приблизительно 1% до приблизительно 5% по массе волокон;

от приблизительно 1% до приблизительно 2% по массе минералов; и

от приблизительно 1% до приблизительно 2% по массе витаминов.

В следующем варианте осуществления это изобретение относится к способу повышения качества жизни пожилого или старого животного, включающему кормление животного (например, собаки мелкой, обычной или крупной породы или кошки, в зависимости от обстоятельств) композицией, содержащей компоненты, указанные в таблице 1A ниже:

Таблица 1A
Химический состав кормов для старых животных
Питательный компонент	Собака мелкой/обычной породы	Собака крупной породы	Кошка
Неочищенные белки, %	20,1	19,34	35,73
Жиры, %	16,45	16,92	22,47
Кальций, %	0,71	0,73	0,94
Фосфор, %	0,61	0,68	0,77
EPA, %	0,32	0,32	0,23
DHA, %	0,22	0,22	0,32
Линолевая кислота, %	3,96	4,04	5,05
Общие N-3 жирные кислоты, %	1,3	2,24	1,14
Общие N-6 жирные кислоты, %	3,96	3,99	5,09
Таурин, м.д.	1400	15,25	2100
Карнитин, м.д.	314	337	367
Метионин, %	1	1,19	1,32
Цистин, %	0,25	0,24	0,47
Марганец, м.д.	87	100	104
Витамин E, МЕ/кг	1492	1525	1292
Витамин С, м.д.	127	261	141
Липоевая кислота, м.д.*	101	135
*Содержание липоевой кислоты основано на включенных в состав, а не проанализированных значениях.

Композиции для применения в способах по этому изобретению, кроме того, содержат, по меньшей мере, одно питательное вещество, выбранное из марганца, метионина, цистеина, смесей метионина и цистеина, L-карнитина, лизина и аргинина. Конкретные преимущественные количества для каждого компонента в композиции зависят от множества факторов, включающих, например, вид животного, употребляющего композицию; конкретные компоненты, включенные в композицию; возраст, массу, общее состояние здоровья, пол и рацион животного; интенсивность потребления животным и т.п. Таким образом, количества компонентов могут широко варьировать и даже могут отклоняться от соотношений, приведенных в настоящем документе.

Омега-3 жирные кислоты можно получать из множества источников. Одним из подходящих источников является рыбий жир, например, из менхадена, макрели, сельди, анчоуса и лосося. DHA и EPA являются типичными жирными кислотами, присутствующими в таких рыбьих жирах, и вместе часто составляют существенную часть масла, например, от приблизительно 25% до приблизительно 38% масла.

Когда композиция представляет собой корм для животных, витамины и минералы предпочтительно включают в количествах, требуемых для того, чтобы избежать дефицита и сохранить здоровье. Эти количества являются общедоступными в данной области. Например National Research Council (NRC) предоставляет рекомендованные количества таких ингредиентов для сельскохозяйственных животных. См., например, Nutrient Requirements of Swine (10th Rev. Ed., Nat'l Academy Press, Wash. D.C., 197298), Nutrient Requirements of Poultry (9th Rev. Ed., Nat'l Academy Press, Wash. D.C., 1994), Nutrient Requirements of Horses (Fifth Rev. Ed., Nat'l Academy Press, Wash. D.C., 1989), Nutrient Requirements of Dogs and Cats (Nat'l Academy Press, Wash. D.C., 2006). American Feed Control Officials (AAFCO), например, предоставляет рекомендованные количества таких ингредиентов для собак и кошек. См. American Feed Control Officials, Inc., Official publication, p. 126-140 (2003). Примеры витаминов, полезных в качестве пищевых добавок, включают витамин A, B1, B2, B6, B12, C, D, E, K, H (биотин), K, фолиевую кислоту, инозитол, ниацин и пантотеновую кислоту. Примеры минералов и микроэлементов, пригодных в качестве пищевых добавок, включают кальций, фосфор, натрий, калий, магний, медь, цинк, хлорид и соли железа.

Способы по настоящему изобретению включают композиции, которые, кроме того, могут содержать другие добавки, известные в данной области. Предпочтительно такие добавки присутствуют в количествах, которые не препятствуют цели и эффекту, обеспечиваемым изобретением. Примеры добавок включают, например, вещества со стабилизирующим эффектом, технологические добавки, вещества, которые усиливают вкусовые качества, красители и вещества, которые обеспечивает питательную пользу.

Стабилизирующие вещества включают, например, вещества, которые имеют тенденцию к повышению срока годности композиции. Потенциально пригодные примеры таких веществ включают, например, консерванты, антиоксиданты, синергические средства и средства, усиливающие экскрецию, газы для упаковывания, стабилизаторы, эмульгаторы, загустители, гелеобразующие средства и увлажнители. Примеры эмульгаторов и/или загустителей включают, например, желатин, простые эфиры целлюлозы, крахмал, сложные эфиры крахмала, простые эфиры крахмала и модифицированные крахмалы.

Добавки для окрашивания, средства, обеспечивающие вкусовые качества ("усилители вкуса"), и питательные средства включают, например, красители (например, оксид железа, такой как красная, желтая или коричневая формы); хлорид натрия, цитрат калия, хлорид калия и другие пищевые соли; витамины; минералы и вкусовые добавки. Такие добавки известны в данной области. См., например, патент США № 3202514. Также см., патент США № 4997671. Вкусовые добавки включают, например, вкусовые добавки молочных продуктов (например, молока или сыра), вкусовые добавки мяса (например, бекона, печени, говядины, птицы или рыбы), терпентин, пинакол и различные вкусовые добавки, указываемые в данной области под номером FEMA (Flavor Extract Manufacturers Association). Вкусовые добавки помогают обеспечить дополнительные вкусовые качества и известны в данной области. См., например, патент США № 4997672. Также см. патент США № 5004624. Также см. патент США № 5114704. Также см. патент США № 5532010. Также см. патент США № 6379727. Концентрация таких добавок в композиции, как правило, может составлять вплоть до приблизительно 5% по массе. В некоторых вариантах осуществления концентрация таких добавок (в частности, когда такие добавки, главным образом, представляют собой средства, обеспечивающие баланс питательных веществ, такие как витамины и минералы) составляет от приблизительно 0% до приблизительно 2,0% по массе. В некоторых вариантах осуществления концентрация таких добавок (снова, в частности, где такие добавки, главным образом, представляют собой средства, обеспечивающие баланс питательных веществ) составляет от приблизительно 0% до приблизительно 1,0% по массе.

Добавки включают, например, корм, используемый с другим кормом для улучшения баланса питательных веществ или эффективности в целом. Добавки включают композиции, которые скармливают без разбавления в качестве добавки к другим кормам и которые позволяют свободный выбор других частей рациона животного, доступных по отдельности или которые разбавляют и смешивают с обычным кормом для животного для получения полноценного корма. Обсуждение AAFCO, например, касающееся добавок, представлено в American Feed Control Officials, Inc. Official Publication, p. 220 (2003). Добавки могут быть в различных формах, включая, например, порошки, жидкости, сиропы, пилюли, инкапсулированные композиции и т.д.

Угощения включают, например, композиции, которые дают животному для привлечения животного к еде не во время приема пищи. Угощения для собак включают, например, кости для собак. Угощение может быть питательным, когда в его составе содержится одна или несколько пищевых добавок, и оно, например, может иметь состав, как описано выше для корма. Непитательные угощения охватывают любые другие угощения, которые являются нетоксичными.

Игрушки включают, например, разжевываемые игрушки. Игрушки для собак включают, например, искусственные кости. В настоящее время на рынке имеется широкое множество пригодных игрушек. См., например, патент США № 5339771 (и ссылки, описанные в патенте США № 5339771). Также см., например, патент США № 5419283 (и ссылки, описанные в патенте США № 5419283). Изобретение относится как к частично пригодным к употреблению игрушкам (например, игрушкам, содержащим пластмассовые компоненты), так и к полностью пригодным к употреблению игрушкам (например, сыромятная кожа и различные искусственные кости). Кроме того, должно быть понятно, что это изобретение относится к игрушкам для применения как у человека, так и не у человека, в частности для применения у животных-компаньонов, сельскохозяйственных животных и животных зоопарков, и, в частности, для применения у собак, кошек или птиц.

"Корм" представляет собой полноценный с точки зрения питательных веществ рацион для предполагаемого животного-реципиента (например, домашней кошки или домашней собаки). "Полноценный с точки зрения питательных веществ рацион" представляет собой рацион, который включает достаточное количество пищевых добавок для поддержания нормального здоровья здорового животного, находящегося на этом рационе. В способах по этому изобретению используются композиции, которые не предполагают ограничения каким-либо конкретным списком белковых или жировых ингредиентов или формы продукта. Композиции можно изготавливать, например, в сухой, консервированной, жидкостной форме или в форме с промежуточным обезвоживанием с использованием общепринятых способов приготовления кормов для животных. В некоторых вариантах осуществления влагосодержание составляет от приблизительно 10% до приблизительно 90% от общей массы композиции. В других вариантах осуществления влагосодержание составляет от приблизительно 65% до приблизительно 75% от общей массы композиции.

При приготовлении композиции для применения в способах по настоящему изобретению любой ингредиент (например, рыбий жир), как правило, можно включать в композицию, например, в ходе обработки состава, например, в процессе и/или после примешивания других компонентов композиции. Добавление этих компонентов в композицию можно проводить традиционными способами. В одном варианте осуществления измельченные белковые ткани животных и птиц смешивают с другими ингредиентами, включающими рыбий жир, зерна злаковых, другие ингредиенты, обеспечивающие баланс питательных веществ, добавки специального назначения (например, смеси витаминов и минералов, неорганические соли, целлюлозная и свекловичная пульпа, наполнители и т.д.); а также добавляют воду в количестве, достаточном для переработки. Эти ингредиенты предпочтительно смешивают в емкости, пригодной для нагревания в процессе перемешивания компонентов. Нагревание смеси можно осуществлять с использованием любого пригодного способа, например, такого как прямая инжекция пара, или с использованием емкости, оборудованной теплообменником. После добавления последнего ингредиента смесь нагревают до диапазона температур от приблизительно 50°F (10°С) до приблизительно 212°F (100°С). В некоторых вариантах осуществления смесь нагревают до диапазона температур от приблизительно 70°F (21°С) до приблизительно 140°F (60°С).

Обычно являются приемлемыми температуры за пределами этих диапазонов, однако они могут быть коммерчески нецелесообразными без применения других технологических добавок. Нагретый до подходящей температуры материал, как правило, имеет форму густой жидкости. Густой жидкостью заполняют консервные банки. Накладывают крышку и контейнер герметично закрывают. Закрытую консервную банку затем помещают в общепринятое оборудование, предназначенное для стерилизации содержимого. Ее обычно проводят путем нагревания до температур более чем приблизительно 230°F (110°С) в течение подходящего периода времени, который зависит, например, от используемой температуры и композиции.

Способы по настоящему изобретению включают применение композиций, которые можно приготавливать в сухой форме с использованием общепринятых способов. В одном варианте осуществления сухие ингредиенты, включающие, например, источники животного белка, источники растительного белка, зерна и т.д., растирают и смешивают. Затем добавляют сырые или жидкие ингредиенты, включающие жиры, масла, источники животного белка, воду и т.д., и перемешивают с сухой смесью. Затем смесь перерабатывают в гранулы или сходные сухие куски. Гранулы часто формируют с использованием способа экструзии, в котором смесь сухих и влажных ингредиентов подвергают механической обработке при высоком давлении и температуре, и пропускают через небольшие отверстия и нарезают на гранулы вращающимся ножом. Затем влажные гранулы сушат и необязательно покрывают одним или несколькими поверхностными покрытиями, которые могут включать, например, вкусовые добавки, жиры, масла, порошки и т.п. Гранулы также можно изготавливать из теста с использованием процесса выпекания, а не экструзии, где тесто помещают в форму перед сухожаровой обработкой.

Композиции также предназначены для того, чтобы их было легче жевать. Корма для собак и кошек, как правило, изготавливают, исходя из периода жизни (возраста), размера, состава тела и породы. В способах по этому изобретению некоторые варианты осуществления композиций направлены на конкретные пищевые отличия между старыми собаками обычных или мелких пород, собаками крупных пород и кошками.

Все проценты, представленные в настоящем документе, указаны в расчете на массу сухого вещества, если конкретно не указано иное.

Как отмечалось ранее, это изобретение относится частично к способу улучшения качества жизни животного. Способ включает кормление пожилого или старого животного композицией в количестве, эффективном для повышения активности, усиления активности, повышения жизнеспособности, защиты хрящей, поддержания мышечной массы, усиления усваиваемости и улучшения качества кожи и шерсти. Кроме того, авторы настоящего изобретения описывают в настоящем документе их неожиданное открытие, что улучшенное качество жизни животного, достигаемое введением композиций по настоящему изобретению, отражается на геномном уровне. Хотя возможно, что изменение экспрессии какого-либо одного гена, описанного в таблицах, представленных ниже, может приводить к благоприятным или вредоносным биологическим эффектам, данные, представленные в настоящем документе, указывают на то, что, в целом, наблюдаемые профили экспрессии согласуются с благоприятными биологическими эффектами, наблюдаемыми после применения рационов, описанных в настоящем документе. В частности, данные генных чипов указывают на то, что экспрессия генов, которые кодируют белки, ассоциированные или связанные с несколькими биологическими каскадами, такими как свертывание крови и агрегация тромбоцитов, целостность костей и мышц, воспалительные ответы, деградация хряща и болевой ответ, каскады повреждения и репарации ДНК, нервная функция, синтез и деградация гликогена, гликолиз, глюконеогенез, каскад пентозофосфатов, процесс старения и перенос электронов, по большей части, благоприятным образом изменяется путем введения животному композиций, описанных в настоящем документе. Таким образом, изобретение также относится к способам измерения или охарактеризации повышения качества жизни животного, в частности пожилого или старого животного, которого кормили композицией, описанной в настоящем документе, путем количественного определения уровней экспрессии одного или нескольких генов, выбранных из генов, описанных в таблицах 5-14 у указанного животного до или после кормления композицией, описанной в настоящем документе, и сравнения указанных уровней у животного, где повышение качества жизни указанного животного отражается благоприятным изменением уровней экспрессии генов у указанного животного.

Количественное определение экспрессии генов можно проводить множеством способов, известных специалисту в данной области, и оно включает такие способы, как RT-PCR, а также анализы генных чипов и нозерн-блоттинг. Таким образом, в настоящем документе предусматривается, что уровни экспрессии можно использовать, например, в способах определения качества жизни животного, как описано в настоящем документе.

Существуют некоторые индуцируемые старением изменения паттернов экспрессии генов (см., например, P. Tollet-Egnell et al., Molecular Endocrinology, 15(2):308-318(2001)). Без связи с теорией, такие изменения паттернов экспрессии генов могут быть связаны с физиологическим старением, механизмом старения. C-K Lee et al., Science, 285:1390-1393(1999) описали, что изменение профиля экспрессии генов в процессе старения у мышей можно полностью или частично предотвращать путем ограничения калорий. Авторы настоящего изобретения открыли, что неожиданно изменения экспрессии определенных генов по мере старения животного, такого как собака, от здорового взрослого животного до гериатрического животного, можно обращать с помощью рациона на корме для старых собак в соответствии с настоящим изобретением. Таким образом, при сравнении паттерна экспрессии генов у здоровой взрослой собаки с паттерном экспрессии генов у гериатрической собаки выявляются определенные гены, экспрессия которых повышается ("растет") у гериатрической собаки, в то время как экспрессия других генов снижается ("падает"). Неожиданно авторы настоящего изобретения выявили, что путем кормления гериатрической собаки рационом на корме для старых собак в соответствии с настоящим изобретением паттерн экспрессии генов можно обращать. Следовательно, путем сравнения паттерна экспрессии генов у гериатрической собаки, которую кормили контрольным рационом, с паттерном экспрессии генов у гериатрической собаки, которую кормили рационом на корме для старых собак по настоящему изобретению, можно обнаружить, что экспрессия определенных генов повышается ("растет") под контролем режима на корме для собак, в то время как экспрессия других генов снижается ("падает") под контролем режима на корме для собак. Результатом является то, что гериатрические собаки с рационом на корме для старых собак по настоящему изобретению имели профили экспрессии генов, измененные в сторону профилей экспрессии генов здоровых взрослых собак. Сравнивая перечень генов, которые коррелируют противоположным образом между паттернами экспрессии здоровой взрослой собаки/гериатрической собаки, авторы настоящего изобретения выявили гены, представленные в таблицах 15-20, ниже, которые неожиданно демонстрируют, что корм для старых собак по настоящему изобретению может обращать изменение экспрессии, которое претерпевают некоторые гены в качестве части процесса старения. Таким образом, качество жизни гериатрических животных может улучшаться путем модификации процесса старения тем, что паттерн экспрессии определенных генов изменяется в направлении паттерна экспрессии здоровой взрослой собаки от паттерна гериатрической собаки.

Таким образом, это изобретение относится частично к способу улучшения качества жизни животного, включающему кормление пожилого или старого животного композицией в количестве, эффективном для изменения паттерна экспрессии определенных генов (представленных в таблицах 15-20, где направление взрослые против гериатрических является таким же, как и направление старые против контрольных) в направлении паттерна здоровой взрослой собаки от паттерна гериатрической собаки. Способ улучшает качество жизни животного путем модификации экспрессии генов, ассоциированных с процессом старения, так что паттерн экспрессии генов изменяется от паттерна гериатрического животного в направлении здорового взрослого животного.

В одном аспекте это изобретение относится к способу повышения качества жизни пожилого или старого животного, включающему кормление животного композицией, содержащей, по меньшей мере, приблизительно 9% по массе белков; по меньшей мере, приблизительно 5% по массе жиров; и, по меньшей мере, приблизительно 0,05% по массе, по меньшей мере, одной омега-3 полиненасыщенной жирной кислоты, где способ включает кормление животного композицией в количестве, эффективном для повышения качества жизни животного, где о повышении качества жизни свидетельствует изменение экспрессии одного или нескольких генов, которые кодируют белки, ассоциированные с процессом старения. Как описано в настоящем документе, эти гены, как правило, называют генами, ассоциированными с процессом старения, однако следует отметить, что эти гены могут быть, в частности, связаны с биологическими каскадами, выбранными, например, из воспаления, репарации ДНК, выживания клеток, метаболизма жиров или холестерина, иммунной регуляции, синтеза белка, роста клеток и гибели клеток.

В одном варианте осуществления этого аспекта изменение экспрессии происходит в одном или нескольких генах, приведенных в таблицах 15-19, и где изменение экспрессии происходит в сторону уровня экспрессии у здорового взрослого животного по сравнению с уровнем экспрессии у гериатрического животного.

В другом варианте осуществления этого аспекта животное представляет собой собаку.

В другом аспекте это изобретение относится к способу повышения качества жизни пожилого или старого животного, включающему кормление животного композицией, содержащей, по меньшей мере, приблизительно 9% по массе белков; по меньшей мере, приблизительно 5% по массе жиров; и, по меньшей мере, приблизительно 0,05% по массе, по меньшей мере, одной омега-3 полиненасыщенной жирной кислоты, где способ включает кормление животного композицией в количестве, эффективном для повышения качества жизни животного, где о повышенном качестве жизни свидетельствует изменение экспрессии одного или нескольких генов, приведенных в таблице 20, и где изменение экспрессии происходит в направлении уровня экспрессии у здорового взрослого животного по сравнению с уровнем экспрессии у гериатрического животного.

В одном варианте осуществления этого аспекта животным является собака.

Также в настоящем документе предусматривается, что изобретение относится к способам лечения животного, страдающего нарушением или заболеванием, ассоциированным или связанным с одним или несколькими из следующих биологических каскадов: свертывание крови и активация и агрегация тромбоцитов, целостность костей и мышц, воспалительные ответы, деградация хряща и болевой ответ, каскады повреждения и репарации ДНК, нервная функция, синтез и деградация гликогена, гликолиз, глюконеогенез и каскад пентозофосфатов, процесс старения и перенос электронов, включающим введение животному эффективного количества композиции корма по настоящему изобретению.

Это изобретение не ограничивается конкретными способами, протоколами и реагентами, описанными в настоящем документе, поскольку они могут варьировать. Кроме того, терминология, используемая в настоящем документе, предназначена только для описания конкретных вариантов осуществления и не предназначена для ограничения объема настоящего изобретения. Термины "содержат", "содержит" и "содержащий" следует интерпретировать включительно, а не исключительно.

Если не определено иначе, все технические и научные термины и любые акронимы, используемые в настоящем документе, имеют те же значения, которые обычно понимают специалисты в области изобретения. Ввиду указанных выше идей возможно множество модификаций и вариантов настоящего изобретения. Таким образом, следует понимать, что в пределах объема прилагаемой формулы изобретения изобретение можно осуществлять на практике иначе, чем конкретно описано.

Все патенты, патентные заявки и публикации, упомянутые в настоящем документе, включены в настоящий документ в качестве ссылок в полном объеме. Однако в случае противоречия между определением в настоящем описании и определением в цитированной ссылке, следует руководствоваться настоящим описанием.

ПРИМЕРЫ

Это изобретение может быть далее проиллюстрировано следующими примерами, хотя будет понятно, что эти примеры включены только для иллюстрации и не предназначены для ограничения объема изобретения, если конкретно не указано иное. Количественный состав ингредиентов композиции представлен в Таблице ниже.

Пример 1

Измельченные белковые ткани животных тщательно смешивают с рыбьим жиром и другими ингредиентами, такими как Кальций, Фосфор, ЕРА, DHA, Линолевая кислота, общие N-3 жирные кислоты, общие N-6 жирные кислоты, Таурин, Карнитин, Метионин, Цистин, Марганец, Витамин Е, Витамин С, Липоевая кислота. Указанные ингредиенты смешивают в емкости с нагреванием в процессе перемешивания компонентов. Полученную смесь нагревают в интервале температур от приблизительно 10°C до приблизительно 100°C. Нагретый до подходящей температуры материал имеет форму густой жидкости. Густой жидкостью заполняют консервные банки. Накладывают крышку и контейнер герметично закрывают. Закрытую консервную банку затем помещают в общепринятое оборудование, предназначенное для стерилизации содержимого. Ее обычно проводят путем нагревания до температур более чем приблизительно 110°C.

При составлении композиции используют указанные ингредиенты в следующих количествах.

Питательный компонент	Композиция для собак мелкой/средней породы
Неочищенные белки, %	20,1
Жиры, %	16,5
Кальций, %	0,7
Фосфор, %	0,6
ЕРА, %	0,3
DHA, %	0,2
Линолевая кислота, %	4
Общие N-3 жирные кислоты, %	1,3
Общие N-6 жирные кислоты, %	4
Таурин, м.д.	1400
Карнитин, м.д.	314
Метионин, %	1
Цистин, %	0,3
Марганец, м.д.	87
Витамин Е, МЕ/кг	1492
Витамин С, м.д.	127
Липоевая кислота, м.д.	101

Пример 2

Аналогично готовят композицию, предназначенную для корма собак крупной породы, но в форме гранул или кусков. Для этого полученную смесь перерабатывают в гранулы или сходные сухие куски. Гранулы формируют с использованием способа экструзии, в котором смесь сухих и влажных ингредиентов подвергают механической обработке при высоком давлении и температуре и пропускают через небольшие отверстия и нарезают на гранулы вращающимся ножом. Затем влажные гранулы сушат

Количественный состав ингредиентов композиции представлен в Таблице ниже.

Питательный компонент	Композиция для собак крупной породы
Неочищенные белки, %	19,3
Жиры, %	16,9
Кальций, %	0,7
Фосфор, %	0,7
ЕРА, %	0,3
DHA, %	0,2
Линолевая кислота, %	4
Общие N-3 жирные кислоты, %	2,2
Общие N-6 жирные кислоты, %	4
Таурин, м.д.	1525
Карнитин, м.д.	337
Метионин, %	1,2
Цистин, %	0,2
Марганец, м.д.	100
Витамин Е, МЕ/кг	1525
Витамин С, м.д.	261
Липоевая кислота, м.д.	135

Пример 3

Композицию для кормления кошек готовят аналогично способу примера 1. Количественный состав ингредиентов композиции представлен в Таблице ниже.

Питательный компонент	Композиция для кошек
Неочищенные белки, %	35,7
Жиры, %	22,5
Кальций, %	0,9
Фосфор, %	0,8
ЕРА, %	0,2
DHA, %	0,3
Линолевая кислота, %	5,1
Общие N-3 жирные кислоты, %	1,1
Общие N-6 жирные кислоты, %	5,1
Таурин, м.д.	2100
Карнитин, м.д.	367
Метионин, %	1,3
Цистин, %	0,5
Марганец, м.д.	104
Витамин Е, МЕ/кг	1292
Витамин С, м.д.	141

Все проценты указаны в расчете на массу сухого вещества, если конкретно не указано иное.

Пример 4

Геномный анализ контрольного корма против корма для старых домашних животных

Для дальнейшей охарактеризации пищевых преимуществ композиций кормов для старых животных по настоящему изобретению анализируют профили экспрессии генов животных, которых кормили композициями, по сравнению с контрольными животными, и результаты подробно описаны ниже.

Материалы и способы

Схема исследования

Образцы крови отбирают у 9 биглей общепринятыми способами до и после кормления в течение 14 суток рационом для старых собак K9 (всего 18 образцов). Каждый образец, взятый после испытания в течение 14 суток, сравнивают с его собственным контролем.

Выделение лимфоцитов из крови собак

Реагенты

4 мл крови собаки, пробирки с гепарином или ЭДТА, сбалансированный солевой раствор Хэнкса (Gibco 14175-095), буфер HEPES (Gibco 15630-080), Accu-Paque (Accurate Chemical & Scientific Corp AN3100).

Материалы/Оборудование

Пипетки для переноса (VWR 14670-147), 14-мл центрифужные пробирки с крышками, 9" пастеровские пипетки, 1,5-мл микроцентрифужные пробирки (VWR 20170-038), штативы для центрифужных пробирок, пакеты микроцентрифужных пробирок, контейнер для отходов, центрифуга Beckman Coulter Allegra 25R Centrifuge, центрифуга SN AJC01J015 Eppendorf Centrifuge, 5417C.

Растворы

Сбалансированный солевой раствор Хэнкса (HBSS) с 25 мМ буферным раствором HEPES приготавливают добавлением 12,8 мл буферного раствора HEPES в 500-мл бутыль с HBSS. Сбалансированный солевой раствор Хэнкса и Accu-Paque необходимо извлечь из холодильника и поместить при комнатной температуре, по меньшей мере, за 30 минут до начала выделения лимфоцитов. Оба раствора следует поместить обратно в холодильник (4°С) сразу после их применения.

Способ

1. Отмерить 4 мл HBSS с HEPES в соответствующее количество 14-мл центрифужных пробирок (одна пробирка для каждого взятия крови по 4 мл)

2. С использованием пипетки для переноса перенести 4 мл крови из пробирок Vacutainer® в 14-мл центрифужную пробирку, содержащую HBSS с HEPES.

3. Хорошо перемешать образец с использованием пипетки для переноса, пипетируя вверх и вниз в течение 30 секунд.

4. Поместить 9" пастеровскую пипетку в каждую из 14-мл центрифужных пробирок. Убедиться, что нижний конец пастеровской пипетки касается дна пробирки.

5. С использованием пипетки для переноса медленно добавить 4 мл Accu-Paque, пуская жидкость вниз внутри пастеровской пипетки, позволяя силе тяжести образовать слой Accu-Paque под разбавленным образцом крови.

6. Зажать верх пастеровской пипетки с использованием пальца и осторожно удалить пипетку.

7. Центрифугировать пробирки при 800×g в течение 20 минут при комнатной температуре. Для крови щенков требуется более длительное центрифугирование в течение 45 минут для обеспечения отделения RBC от WBC.

8. С использованием пипетки для переноса осторожно удалить верхний слой до 0,5 см от среднего мутного слоя и выбросить.

9. С использованием новой пипетки для переноса осторожно удалить средний мутный слой и перенести в 1,5-мл микроцентрифужную пробирку. Следить за тем, чтобы не перенести какой-либо из нижних слоев.

10. Центрифугировать микроцентрифужные пробирки при 13200 об/мин в течение 3,5 минут при комнатной температуре.

11. Осторожно удалить супернатант и быстро заморозить оставшийся осадок (лимфоциты) в жидком азоте. Хранить конечные образцы при -80°С.

Выделение РНК

Реагенты

Деионизированная H₂O, абсолютный этанол (Sigma E7023), раствор для хранения РНК (Ambion 7000), РНКаза Zap® (Ambion 9780), буфер RLT, буфер RW1 и буфер RPE (предоставленные в наборе RNeasy Mini Kit).

Оборудование/материалы

Набор RNeasy Mini Kit (Qiagen 74104), спин-колонки QIAshredder (Qiagen 79656), пипетка P1000 Pipetman (Rainin), пипетка P200 Pipetman (Rainin), 100-100-мкл фильтрующие наконечники для пипетки (USA Scientific 1126-7810), 1-200-мкл фильтрующие наконечники для пипетки (USA Scientific 1120-8810), стерильные пипетки для переноса (VWR 14670-147), 55-мл чашка со стерильным раствором (VWR 21007-974), 2 контейнера для отходов (один для жидких, один для наконечников/пипеток), 1,5-мл стерильные микроцентрифужные пробирки (VWR 20170-038), штатив для микроцентрифужных пробирок, устойчивый маркер, микроцентрифуга Eppendorf, модель #5417C.

Способ

1. Освободить осадок в микроцентрифужных пробирках путем слабого размораживания, а затем слегка ударить пробирку для отделения осадка.

2. Добавить соответствующий объем буфера RLT (в этом случае использовать 600 мкл). Встряхивать или пипетировать для перемешивания.

3. Перенести образец в пробирку QIAshredder для гомогенизации образца. Центрифугировать в течение 2 минут при 14000 об/мин. Выбросить спин-колонку, но сохранить пробирку для сбора и ее содержимое.

4. Добавить к гомогенизированному лизату один объем (600 мкл) 70% этанола и перемешивать пипетированием.

5. Нанести 600-мкл аликвоту образца в миниколонку RNeasy, помещенную в 2-мл пробирку для сбора. Закрыть осторожно и центрифугировать в течение 15 с при 14000 об/мин. Удалить супернатант. Добавить вторую 600-мкл аликвоту клеточного лизата в ту же спин-колонку и повторить это действие. Удалить супернатант.

6. Использовать повторно пробирку для сбора стадии 5. Добавить в колонку 700 мкл буфера RW1. Центрифугировать в течение 15 с при 14000 об/мин. Выбросить супернатант и пробирку для сбора.

7. Перенести колонку в новую 2-мл пробирку для сбора и добавить пипеткой в колонку 500 мкл буфера RPE. Центрифугировать в течение 15 с при 14000 об/мин для промывания колонки. Удалить супернатант, но сохранить пробирку для сбора для стадии 8.

8. Добавить в колонку другие 500 мл буфера RPE. Центрифугировать в течение 2 мин при 14000 об/мин для высушивания мембраны.

9. Перенести колонку в новую 1,5-мл пробирку для сбора. Перенести пипеткой 10 мкл раствора для хранения РНК непосредственно на мембрану. Центрифугировать в течение 1 мин при 14000 об/мин для элюирования РНК. Добавить второй 5-мкл объем раствора для хранения РНК непосредственно на мембрану и центрифугировать в течение дополнительной минуты. Хранить конечный элюат РНК при -80°С.

Получение РНК-зонда и гибридизация

Реагенты

Ovation TM Biotin System v1.0 для получения зондов.

Протокол

Руководство пользователя ( № по каталогу D01002, версия 10/27/04, NuGEN Technologies, Inc). Экспериментальный протокол проводили, как описано в руководстве пользователя. Все получения зондов начинают с 50 нг тотальной РНК.

Способы генных чипов

Генные чипы, использованные для тестирования, представляют собой Canine Genome 2.0 Array (Affymetrix). Этот генный чип содержит наборы из 44000 зондов. Детальная информация о последовательности для каждого уникального идентификационного номера зонда доступна от изготовителя.

Анализ экспрессии генов

Нормализацию проводят с использованием MAS 5, предоставляемого в программном обеспечении GCOS Affymetrix (версии 1.2). Уровни экспрессии для анализированных генов указаны в таблицах, включенных в примеры ниже, где направленная вверх стрелка относится к "активации" или повышению, а направленная вниз стрелка указывает на "подавление" экспрессии генов. Аналогично, в некоторых таблицах направленные вверх или вниз стрелки также указывают на повышение или снижение активности определенных белков, вовлеченных в конкретный каскад, а в ином случае они не требуют пояснений.

Выбор перечня генов

15411 генов выбирают для дальнейшего анализа, исходя их сигналов "присутствия", по меньшей мере, в 9 из 18 образцов.

Результаты анализа генного чипа указывают на то, что 1088 генов дифференциально экспрессируются в группах контрольного рациона и в группах рациона для старых собак. Уровни экспрессии этих 1088 генов являются статистически значимыми, когда их группируют по "рациону"; с использованием параметрического критерия, где не предполагается, что дисперсии являются равными (t-критерий Велша). Предел значения p составляет 0,01 без коррекции по множественным тестированиям. При этих критериях отбора можно было ожидать, что только приблизительно 154 гена преодолеют ограничение по вероятности. Геномные данные подробно рассмотрены ниже.

Результаты

Эффект питания на гены, ассоциированные с болью и воспалением

Исходя из анализа данных генного чипа на уровне P<0,01, уровни экспрессии 1088 генов менялись по сравнению с контрольными уровнями экспрессии (10 активировались, а остальные подавлялись). При уровне P<0,001 данные указывают на то, что экспрессия 35 генов подавляется у биглей, которых кормили кормом для старых животных. Девять из этих подавляемых генов идентифицировано в качестве связанных с воспалительным и болевым ответом. Как можно предсказать, подавление этих генов приведет к смягчению боли, защите хрящей (меньшему повреждению) и уменьшению воспалительных ответов. Композиции, описанные в настоящем документе, могут быть частью терапевтического режима для лечения животных, страдающих от боли и/или воспалительных заболеваний. Эти гены и их предполагаемая роль в воспалении и болевом ответе представлены ниже в таблицах 5-6.

Таблица 5
Гены, вовлеченные в воспаление и болевой ответ (P<0,001)

Таблица 6
Обобщение роли отрицательно регулируемых ферментов, вовлеченных в каскад эйкозаноидов (воспалительный ответ)
Ген	Экспрессия гена по сравнению с контролем	Приводит к	Роль
Фосфолипаза A2		высвобождения арахидоновой кислоты из фосфолипидов	2-серийного воспалительного ответа
Тромбоксан-синтаза		Тромбоксана A2	агрегации тромбоцитов, сужения сосудов, пролиферации лимфоцитов и сужения бронхов
Дипептидаза 2		Тромбоксана B2	сужения сосудов
		Лейкотриена E4	компонента медленно реагирующего вещества анафилаксии, сужения микрососудов и сужения бронхов
Убиквитин-конъюгирующий фермент E2D 3 (и конечный регулятор-1 NEDD8)		убиквитинилирования или активации TAK1, IRAK и TRAF	продукции MMP
Митоген-активируемая протеинкиназа 14 (p38)		промотора с-Jun	продукции MMP
MMP-19		MMP-19	происходящей из T-клеток MMP-19, которая вовлечена в ревматоидный артрит
TIMP-1		TIMP-1	Инактивирует MMP, его концентрация прямо связана с концентрацией MMP
Гидролаза амидов жирных кислот		анандамида	болевого ответа

Эффект питания на гены, вовлеченные в здоровье сердца и свертывание крови

При уровне P<0,001 и P<0,01 идентифицировано 12 генов, связанных со здоровьем сердца, путем регуляции каскада эйкозаноидов и каскада свертывания крови. Гены ответственны за свертывание крови через активацию и агрегацию тромбоцитов. Отрицательная регуляция этих генов путем питания может предотвратить ненадлежащее свертывание крови, которое может привести к нарушениям, связанным с сердцем или головным мозгом. Композиции по настоящему изобретению могут быть частью терапевтического режима для лечения животных, страдающих нарушениями или заболеваниями крови, сердца или головного мозга. Эти гены и их предполагаемая роль in vivo описаны в таблицах 7 и 8 ниже.

Таблица 7
Гены, вовлеченные в здоровье сердца и свертывание крови

Таблица 8
Обобщение ролей подавляемых ферментов, вовлеченных в здоровье сердца и свертывание крови
Ген	Экспрессия гена по сравнению с контролем	Роль
Гликопротеин Ib		GP-Ib, белок поверхности мембраны тромбоцитов, участвует в образовании тромбоцитарных пробок путем связывания с A1-доменом фактора фон Виллебранда, который уже связан с субэндотелием
Тромбоцитарный гликопротеин VI		Рецептор коллагена, принадлежащий к семейству иммуноглобулинподобных белков, который необходим для взаимодействий тромбоцитов с коллагеном
Предшественник тромбоцитарного гликопротеина IX		Комплекс GPIb-V-IX выполняет функцию рецептора фактора фон Виллебранда и опосредует зависимую от фактора фон Виллебранда адгезию тромбоцитов к кровеносным сосудам. Адгезия тромбоцитов к поврежденным поверхностям сосудов в артериальной системе является важным инициирующим событием при гемостазе
Предшественник A-цепи фактора свертывания XIII		Фактор XIII активируется тромбином и ионами кальция с образованием трансглутаминазы, которая катализирует образование гамма-глутамил-эпсилон-лизиновых поперечных сшивок между цепями фибрина, стабилизируя, таким образом, фибриновый сгусток
Тромбоксинсинтаза		агрегации тромбоцитов, сужения сосудов, пролиферации лимфоцитов и сужения бронхов
Ангио-ассоциированный белок мигрирующих клеток (AAMP)		содержит гепарин-связыващий домен (константа диссоциации, 14 пмоль) и опосредует гепарин-чувствительную адгезию клеток
Изоформа a связывающего дистробревин белка 1		Участвует в биогенезе родственных лизосомам органелл, таких как плотные гранулы тромбоцитов и меланосомы
Тромбоспондин 1		Адгезивный гликопротеин, который опосредует взаимодействия клетка-клетка и клетка-матрикс. Может связываться с фибриногеном, фибронектином, ламинином, коллагеном типа V и интегринами альфа-V/бета-1, альфа-V/бета-3 и альфа-IIb/бета-3
Мотив 17 тромбоспондина 1 типа		Активность металлопротеиназы
Тромбоспондин 1, содержащий повторы
Предшественник интегрина-бета 7		Предполагается, что интегрин альфа-4/бета-7 (специфичный к пейеровым бляшкам хоминг-рецептор LPAM-1) участвует в адгезивных взаимодействиях с лейкоцитами. Он представляет собой рецептор фибронектина и распознает один или несколько доменов в альтернативно сплайсированной области CS-1 фибронектина. Интегрин альфа-4/бета-7 также представляет собой рецептор для MADCAM1 и VCAM1. Он распознает последовательность L-D-T в MADCAM1. Интегрин альфа-E/бета-7 (HML-1) является рецептором для E-кадгерина
Интегрин-связанная киназа		Ближайшая к рецептору протеинкиназа, регулирующая опосредуемую интегринами передачу сигнала. Может действовать в качестве медиатора передачи сигнала интегрина изнутри наружу. Часть комплекса ILK-PINCH, представляющая собой белок фокальной адгезии. Этот комплекс считается одной их точек конвергенции каскада передачи сигнала интегринов и факторов роста. Может быть вовлечен в обеспечение клеточной архитектуры, адгезию к субстратам интегринов и зависимый от заякоривания рост в эпителиальных клетках. Фосфорилирует бета-1 и бета-3 субъединицы интегринов на остатках серина и треонина, а также AKT1 и GSK3B

Эффект питания на гены, вовлеченные в регуляцию мышц и костей

Десять подавляемых генов идентифицированы в качестве связанных с составом тела через регуляцию костей и мышц. Эти гены уменьшают повреждение мышц и костей путем снижения продукции оксида азота и деградации глюкокортикоидов в мышце. Подавление этих генов приводит к снижению образования оксида азота и ответа глюкокортикоидов. Композиции, описанные в настоящем документе, могут быть частью терапевтического режима для лечения животных, страдающих заболеваниями или нарушениями, ассоциированными или связанными с мышцами или костями. Эти гены и их предполагаемая роль в регуляции мышц и костей подробно описаны в таблицах 9 и 10 ниже.

Таблица 9
Гены, вовлеченные в регуляцию мышц и костей

Таблица 10
Обобщение генов, влияющих на рецепторы глюкокортикоидов и продукцию оксида азота
Ген	Экспрессия гена по сравнению с контролем	Роль
Кинезин		Транспорт органелл от (-) концов к (+) концам. Связывает микротрубочки. Активность ATP-азы.
Кэппирующий белок		Часть гетерокомплекса динактин-динеин
Кальмодулин		Прямо влияет на кальций-зависимую активность динеина. Связывается с синтазой оксида азота и повышает продукцию оксида азота.
Динеин		Транспорт органелл от (-) концов к (+) концам. Связывает микротрубочки. Активность ATP-азы и продуцирование движущей силы
Динактин		Цитоплазматический активатор динеина. Связывает микротрубочки и среднюю длину движений динеина.
Белок теплового шока 1 бета (HSP90)		Необходим для связывания рецептора глюкокортикоидов и быстрого транспорта комплекса динеина в ядро. Активность кальциневрина. Усиливает продукцию оксида азота путем связывания с синтазой оксида азота.
PPI-аза		Необходима для взаимодействия динеин/глюкокортикоид и движения
Кальциневрин		Часть гетерокомплекса динактин-динеин. Катализирует превращение аргинина в цитруллин и оксид азота.
Протеинкиназа С		Активируемый кальцием зависимый от фосфолипидов серин- и треонинспецифический фермент
Связывающий протеинкиназу C белок		Ассоциирован с протеинкиназой С

Эффект питания на гены, вовлеченные в повреждение/защиту ДНК и нервную функцию

Идентифицировано одиннадцать генов, которые связаны с повреждением/защитой ДНК и нервной функцией. Что касается последней, идентифицированные гены важны для потенциации обратного действия; полагают, что они обладают потенциальной ролью в двигательном обучении. Интересно, что все из этих генов подавлялись, за исключением рецептора гамма-аминомасляной кислоты (GABA) A, гамма-2, который активировался. Композиции, описанные в настоящем документе, могут быть частью терапевтического режима для лечения животных, страдающих заболеваниями или нарушениями, ассоциированными или связанными с повреждением/защитой ДНК и нервной функцией. Названия этих генов и их предполагаемая роль в повреждении/защите ДНК и нервной функции описаны в таблицах 11 и 12 ниже.

Таблица 11
Гены, вовлеченные в повреждение/защиту ДНК и нервную функцию

Таблица 12
Обобщение генов, важных для потенциации обратного действия и целостности ДНК
Ген	Экспрессия гена по сравнению с контролем	Роль
Рецептор гамма-аминомасляной кислоты (GABA) A, гамма 2		Вовлечен в одноканальную проводимость (C1-канал)
Кальмодулин		Входящий поток кальция приводит к комплексу кальций/кальмодулин, который активирует CaMKII и кальциневрин
Кальциневрин		Вовлечен в каскад подавления RP
Кальций/кальмодулин-зависимая протеинкиназа II		Вовлечен в индукцию и подавление RP
Ассоциированный с аденилатциклазой белок I		Аденилилциклаза вовлечена в подавление RP
Протеинфосфатаза I		Дефосфорилирует компоненты стресс-активируемых каскадов. Активный PP-1 приводит к ингибированию CaMKII и к подавлению RP
Диазепам-связывающий ингибитор		Вытесняет бензодиазепин. Подавляет эффекты GABA
Белок, связывающий опухолевый белок p53		Удерживает клетки от прохождения клеточного цикла, если присутствует повреждение ДНК
Убиквитин-конъюгирующий фермент E2D 3 (и конечный регулятор-1 NEDD8)		Регулируемый протеолиз белков протеасомами удаляет денатурированные, поврежденные или ненадлежащим образом транслированные белки из клеток и регулирует уровень белков, таких как циклины или некоторые факторы транскрипции
Ассоциированный с BCL2 белок X		Ускоряет запрограммированную гибель клеток путем связывания и антагонизма репрессору апоптоза BCL2

Эффект питания на гены, вовлеченные в метаболизм глюкозы

Двадцать четыре гена, ассоциированных с метаболизмом глюкозы, подавлялись у животных, которых кормили рационом для старых собак, что может указывать на то, что эти животные утилизируют жиры (окисление жиров) вместо глюкозы в качестве источника энергии. Композиции, описанные в настоящем документе, могут быть частью терапевтической схемы у животных с диабетом и/или для предотвращения или лечения у животного ожирения. Эти подавляемые гены идентифицированы, и их предполагаемая роль в метаболизме глюкозы подробно описана ниже в таблицах 13 и 14.

Таблица 13
Гены, вовлеченные в метаболизм глюкозы

Таблица 14
Обобщение генов, вовлеченных в метаболизм глюкозы
Ген	Экспрессия гена по сравнению с контролем	Роль
Киназа фосфорилазы		Необходима для активации гликогенсинтазы, которая запасает глюкозу в качестве гликогена
Фосфорилаза		Необходима для превращения гликогена в глюкоза-1-фосфат, который поступает в гликолиз
Киназа 3 гликогенсинтазы		Необходима для активации гликогенсинтазы, которая запасает глюкозу в качестве гликогена
Кальмодулин		Необходим для активации гликогенсинтазы, которая запасает глюкозу в качестве гликогена
Протеинкиназа С		Необходима для активации гликогенсинтазы, которая запасает глюкозу в качестве гликогена
Связывающий протеинкиназу С белок		Необходим для активации гликогенсинтазы, которая запасает глюкозу в качестве гликогена
Гексокиназа 3		Необходима для превращения глюкозы в пируват для вхождения в цикл TCA
Фруктоза-1,6-бисфосфатаза		Необходима для превращения глюкозы в пируват для вхождения в цикл TCA
Глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа		Необходим для превращения глюкозы в пируват для вхождения в цикл ТСА
Дегидрогеназа глюкоза-6-фосфат		Вовлечена в пентозофосфатный путь
Енолаза		Необходима для превращения глюкозы в пируват для вхождения в цикл TCA
Лактатдегидрогеназа		Вовлечена в превращения пирувата в лактат
Цитратлиаза		Необходима для превращения цитрата в оксалоацетат, который поставляет ацетил-CoA в каскад синтеза жирных кислот
Глицеринкиназа		Необходима для изменения глицерина в DHAP, который поступает в гликолиз
Транскетолаза		Вовлечена в пентозофосфатный путь
Рибулозафосфат-3-эпимераза		Вовлечена в пентозофосфатный путь
Рибоза-5-фосфат-изомераза		Вовлечена в пентозофосфатный путь
Полипептид VIIa оксидазы цитохрома с - печень/сердце, митохондриальный предшественник		Ассоциирован с продукцией ATP (источник энергии) в цепи переноса электронов, которая ассоциирована с циклом TCA
Субъединица VIII оксидазы цитохрома с, печеночная форма		Ассоциирована с продукцией ATP (источник энергии) в цепи переноса электронов, которая ассоциирована с циклом TCA
Убиквинол-цитохром с редуктаза		Ассоциирована с продукцией ATP (источник энергии) в цепи переноса электронов, которая ассоциирована с циклом TCA
ATP-синтаза		Ассоциирована с продукцией ATP (источник энергии) в цепи переноса электронов, которая ассоциирована с циклом TCA
NADH-убиквинон оксидоредуктаза		Ассоциирована с продукцией ATP (источник энергии) в цепи переноса электронов, которая ассоциирована с циклом TCA
Облегченный переносчик глюкозы/Подобный переносчику глюкозы белок III (GLUT3)		Вовлечен захват глюкозы

Пример 5

Сравнение профилей экспрессии генов, ассоциированных с процессом старения: Здоровые взрослые собаки против старых собак по сравнению с контрольным рационом против рациона для старых собак

Профиль экспрессии генов у собак меняется по мере старения собаки от взрослой собаки до гериатрической (пожилой) собаки. Это справедливо для генов, ассоциированных с множеством биологических каскадов, например, таких как метаболизм глюкозы, свертывание крови и целостность костей и мышц, а также для генов, которые ассоциированы с процессом старения или, как правило, физиологического старения. Что касается класса генов, ассоциированных со "старением", авторы настоящего изобретения открыли, что путем кормления пожилых собак рационом для старых собак в соответствии с настоящим изобретением профиль экспрессии некоторых из этих генов в лимфоцитах имеет тенденцию к смещению от профиля гериатрической собаки в направлении профиля взрослой собаки. Таким образом, у гериатрических собак, которых кормили рационом для старых собак в соответствии с настоящим изобретением, генетический профиль может быть изменен в сторону большего сходства с генетическим профилем здоровой взрослой собаки.

Результаты, представленные ниже в таблицах 15-20, демонстрируют, что гены, обычно изменяемые в процессе старения, можно регулировать путем диетологических стратегий, направленных на общие изменения при старении. В частности, результаты демонстрируют, что при кормлении рационом для старых собак, как правило, уровни экспрессии генов в лимфоцитах смещаются в противоположном направлении относительно направления от уровней экспрессии у здорового взрослого животного к уровням экспрессии у гериатрического животного. Следовательно, когда уровень экспрессии у здорового взрослого животного является высоким по сравнению с гериатрическим животным (т.е. "снижен" у гериатрического животного), гериатрические животные, которых кормили кормом для старых животных, также обладают более высоким уровнем экспрессии (измененным на "повышенный") по сравнению с гериатрическими животными, которых кормили контрольным рационом. Аналогично, когда уровень экспрессии у здорового взрослого животного является низким по сравнению с гериатрическим животным ("повышен" у гериатрического животного), гериатрические животные, которых кормили кормом для старых животных, как правило, также обладают более низким уровнем экспрессии (измененным на "сниженный") по сравнению с гериатрическим животным, которого кормили контрольным рационом. Таким образом, уровни экспрессии связанных со старением генов у гериатрических собак могут благоприятным образом изменяться, когда гериатрических собак кормят рационом для старых собак по настоящему изобретению, и, таким образом, собаки могут вести жизнь улучшенного качества.

Таблица 15
Гены старения, ассоциированные с воспалением
Аннотация	ID зонда	Направление экспрессии
		Взрослое против гериатрического	Рацион для старых животных против контрольного рациона
Белок 2, родственный Clq и фактору некроза опухоли	CfaAffx.26423.1.Sl_at	повышение	снижение
Изоформа 1, ассоциированная с доменом смерти TNFRSF1A	CfaAffx.31209.1.Sl_s_at	снижение	снижение
Предшественник антигена CD2 T-клеточной поверхности	CfaAffx.l5424.1.Sl_at	снижение	снижение
Дегидратаза дельта-аминолевулиновой кислоты	Cfa.17192.1.Sl_s_at	снижение	снижение
Предшественник аттрактина	CfaAffx.l0508.1.Sl_at	повышение	повышение
Субъединица III оксидазы цитохрома С	Cfa.16058.l.Al_x_at	повышение	повышение
NEDD4-подобная убиквитин-протеин лигаза 1	Cfa.8453.1.Al_at	повышение	повышение
Убиквитин-специфичная пептидаза 11	CfaAffx.23104.1.Sl_at	снижение	снижение
Белок промежуточного слоя хряща	Cfa/15775.1.Al_at	повышение	повышение

Таблица 16
Гены, ассоциированные с репарацией ДНК/выживанием клеток
Аннотация	Зонд	Направление экспрессии
		Взрослое против гериатрического	Рацион для старых животных против контрольного рациона
Гемин 7	CfaAffx.7805.1.Sl_s_at	снижение	снижение
Гомеодоменный белок IRX-4 класса Iroquis	CfaAffx.16317.1.Sl_at	повышение	снижение
Гомолог хромобокса 4	CfaAffx.9308.1.Sl_at	снижение	снижение
Убиквитин-специфичная пептидаза 11	CfaAffx.23104,1,Sl_at	снижение	снижение
ADP 10B, подобный фактору рибозилирования	Cfa.l3803.1.Sl_s_at	снижение	снижение
Фактор инициации трансляции эукариот 5B	CfaAffx.4294.1.Sl_at	повышение	повышение
Полипептид 4 общего фактора транскрипции 11 H	CfaAffx.l649.1.Sl_s_at	снижение	снижение
NEDD4-подобная убиквитин-протеинлигаза 1	Cfa,8453.1.Al_at	повышение	повышение
Представитель 8 семейства поли(ADP-рибоза)полимеразы	Cfa.5341.1.Al_at	повышение	снижение

Таблица 17
Гены старения, ассоциированные с метаболизмом жиров/холестерина
Аннотация	Зонд	Направление экспрессии
		Взрослое против гериатрического	Рацион для старых животных против контрольного рациона
Фосфомеванонаткиназа	Cfa.l406.1.Sl_s_at	снижение	снижение
5-AMP-активируемая протеинкиназа, субъединица гамма-1	CfaAffx.13848.1.Sl_at	снижение	снижение
Предшественник аполипопротеина A-II	Cfa.8770.1.Sl_at	снижение	снижение
Белок 2, родственный Clq и фактору некроза опухоли	CfaAffx.26423.1.Sl_at	повышение	снижение
Предшественник аттрактина	CfaAffx.10508.1.Sl_at	повышение	повышение

Таблица 18
Гены старения, ассоциированные с синтезом белков
Аннотация	Зонд	Направление экспрессии
		Взрослое против гериатрического	Рацион для старых животных против контрольного рациона
Дегидрогеназа E1 разветвленных кетокислот, альфа-полипептид	Cfa.l7186.1_s_at	снижение	снижение
Серил-тРНК-синтаза	CfaAffx.9380.1.Sl_s_at	снижение	снижение
Митохондриальный 28S рибосомальный белок S33	CfaAffx.200.1.Sl_at	снижение	снижение
Рибосомальный белок S3a	CfaAffx.416.1.Sl_x_at	снижение	повышение
60S рибосомальный белок L21	CfaAffx.802.1.Sl_at	снижение	повышение

Таблица 19
Гены старения, ассоциированные с ростом/гибелью клеток
Аннотация	Зонд	Направление экспрессии
		Взрослое против гериатрического	Рацион для старых животных против контрольного рациона
Сортирующий нексин-9	Cfa.l874.1.Sl_at	повышение	повышение
Регулятор роста клеток с RING-пальцевым доменом 1	Cfa.3200.1.Sl_s_at	снижение	снижение
Семейство 39 переносчиков растворенных веществ (цинковый переносчик)	CfaAffx.14864. l.Sl_at	повышение	повышение
Изоформа a холинкиназы альфа	Cfa.8353.1.Al_at	снижение	снижение
Белок 2, взаимодействующий с Kv-каналом	Cfa.3460.1.Sl_at	повышение	снижение
Рибосомальный белок S3a	CfaAffx.416.1.Sl_x_at	снижение	повышение
Убиквитин-специфичная пептидаза 11	CfaAffx.23104.1.Sl_at	снижение	снижение

Таблица 20
Гены, изменяемые при старении и рационе для старых животных с неизвестными функциями
Аннотация	Зонд	Направление экспрессии
		Взрослое против гериатрического	Рацион для старых животных против контрольного рациона
Белок KIAA0406	Cfa.13958.1.Al_at	повышение	повышение
Гипотетический LOC477905	CfaAffx.12332.1.Sl_at	повышение	повышение
Нитилаза 1	CfaAffx.l9716.1.Sl_s_at	снижение	снижение
CG5645-PA	CfaAffx.27184.1.Sl_at	снижение	снижение
Транскрибируемый локус	Cfa.12738.1.Al_at	повышение	повышение
Транскрибируемый локус	Cfa.18839.1.Sl_at	повышение	снижение