способ выявления внутрибольничных штаммов микроорганизмов

Классы МПК:C12Q1/04 установление присутствия и(или) вида микроорганизма; использование селективных сред для испытания антибиотиков или бактерицидов; составы, содержащие химический индикатор для этих целей
C12N1/20 бактерии; питательные среды для них
Автор(ы):, , , ,
Патентообладатель(и):Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пермская государственная медицинская академия имени академика Е.А. Вагнера" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)
Приоритеты:
подача заявки:
2012-12-18
публикация патента:

Изобретение относится к биотехнологии. Способ предназначен для выявления внутрибольничных штаммов микроорганизмов при проведении эпидемиологического мониторинга. Готовят водно-спиртовые растворы 3-4 анилиновых красителей. Добавляют стандартизированную взвесь исследуемой микробной культуры. Инкубируют, оценивают полученные результаты и определяют тождественность штаммов. Причем при тождественности показателей чувствительности выделенных и изученных микробных культур к каждому соответствующему анилиновому красителю устанавливают выявление внутрибольничного штамма. Изобретение позволяет повысить точность способа. 4 табл., 3 пр.

Формула изобретения

Способ выявления внутрибольничных штаммов микроорганизмов путем определения уровней чувствительности микробных культур в клинических и санитарных пробах к 3-4 анилиновым красителям, причем при тождественности показателей чувствительности микробных культур к каждому соответствующему анилиновому красителю устанавливают выявление внутрибольничного штамма.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано для выявления внутрибольничных штаммов и слежения за их циркуляцией в лечебно-профилактических учреждениях, в частности при проведении эпидемиологического мониторинга.

Известен способ выявления внутрибольничных штаммов и слежения за ними, основанный на определении профиля антибиотикочувствительности как внутривидового маркера штаммов для идентификации однородных возбудителей и выявления закономерностей их циркуляции в госпитальных условиях (Л.П.Зуева, М.С.Поляк, Е.Н.Колосовская и др. Микробиологический мониторинг и эпидемиологический анализ антибиотикорезистентности микроорганизмов с использованием компьютерной программы WHONET. Методические рекомендации. СПб., 2005. - 72 с.).

Недостатки: невысокая точность из-за изменения уровня антибиотикочувствительности культур в процессе лечения, низкая производительность из-за необходимости определения чувствительности к большому количеству антибиотиков (не менее 6-8).

Технический результат: повышение точности способа за счет изучения более стабильной характеристики, а именно чувствительности к анилиновым красителям, повышение производительности благодаря исследованию чувствительности к меньшему количеству препаратов (3 и более). Указанный результат достигается путем определения уровня чувствительности микробных культур к 3 и более анилиновым красителям. Изучение чувствительности к анилиновым красителям для определения видовой принадлежности микробных культур описано в книге: Руководство по медицинской микробиологии. Частная медицинская микробиология и этиологическая диагностика инфекций. Книга II. / Под ред. А.С.Лабинской, Н.Н.Костюковой, С.М.Ивановой. - М.: БИНОМ, 2010. В качестве эпидемиологического маркера этот показатель используется в настоящее время впервые.

Способ осуществляют следующим образом.

В лунки стерильного 96-луночного планшета вносят по 5 мкл 0,1%-ных водно-спиртовых растворов анилиновых красителей (генциан фиолетовый, метиловый красный, бромфеноловый синий и бромкрезоловый пурпурный). С помощью многоканального дозатора готовят серийные двукратные разведения красителей в жидкой питательной среде, после чего в лунки добавляют стандартизованную взвесь исследуемой микробной культуры в физиологическом растворе плотностью 106 клеток/мл. Микробные культуры могут быть взяты из клинических (пациенты с гнойно-воспалительными заболеваниями) и санитарных (смывы с объектов) проб. При определении тождества культур выявляют внутрибольничные штаммы, а при отсутствии тождества культур - внебольничные.

Примеры использования предлагаемой методики.

Пример № 1. Изучена чувствительность к анилиновым красителям 3 культур энтерококка (Enterococcus faecalis), выделенных от разных пациентов отделения реанимации хирургического стационара. Результаты (см. табл.1) свидетельствуют об отсутствии подобия в показателях чувствительности к анилиновым красителям у изученных культур и, следовательно, об отсутствии эпидемических связей между данными клиническими случаями, то есть выявлены внебольничные штаммы.

Таблица 1
№ № культургенцианвиолет бромкрезоловый пурпурныйбромфеноловый синийметиловый красный
510,635 2,580
1380,1640 1010
1395 52040

Пример № 2. Изучена чувствительность к 4 анилиновым красителям 2 культур клебсиеллы (Klebsiella pneumoniae), выделенных с объектов внутрибольничной среды хирургического стационара. Результаты (см. табл.2) свидетельствуют о тождественности показателей чувствительности к анилиновым красителям у изученных культур и, следовательно, о наличии эпидемических связей между данными культурами, то есть о наличии внутрибольничного штамма.

Таблица 2
№ № культургенцианвиолет бромкрезоловый пурпурныйбромфеноловый синий
77 с 0,31160160
79 с0,31 160160

Пример № 3. Изучена чувствительность к анилиновым красителям 2 культур золотистого стафилококка (Staphylococcus aureus), одна из которых выделена от пациента отделения реанимации хирургического стационара, а другая - с объекта внешней среды (ручка тумбочки) в данном отделении. Результаты (см. табл.3) свидетельствуют о подобии показателей чувствительности к анилиновым красителям у изученных культур и, следовательно, отражают процесс распространения микроорганизма в больничной среде, то есть выявлен внутрибольничный штамм.

Таблица 3
№ № культургенцианвиолет бромкрезоловый пурпурныйбромфеноловый синийметиловый красный фуксин кислый
56 401040 1605
257 с4010 40160 5

Класс C12Q1/04 установление присутствия и(или) вида микроорганизма; использование селективных сред для испытания антибиотиков или бактерицидов; составы, содержащие химический индикатор для этих целей

способ определения чувствительности патогенных бактерий к комплексным антибактериальным препаратам -  патент 2529711 (27.09.2014)
бифазная транспортная питательная среда для выделения и выращивания бруцеллезного микроба -  патент 2529364 (27.09.2014)
способ оценки выживаемости бифидо- и лактобактерий в желудочно-кишечном тракте экспериментальных животных -  патент 2528867 (20.09.2014)
способ и набор для детекции микроорганизмов -  патент 2527897 (10.09.2014)
способ видовой и штаммовой идентификации бифидобактерий филотипа bifidobacterium longum -  патент 2527069 (27.08.2014)
способ идентификации лактобацилл -  патент 2526576 (27.08.2014)
способ видовой дифференциации жизнеспособных родококков, иммобилизованных в гелевом носителе -  патент 2525934 (20.08.2014)
питательная среда плотная для культивирования возбудителя листериоза -  патент 2525637 (20.08.2014)
способы разделения, характеристики и(или) идентификации микроорганизмов с помощью масс-спектрометрии -  патент 2519650 (20.06.2014)
оптический индикатор для обнаружения бактериальных патогенов -  патент 2519339 (10.06.2014)

Класс C12N1/20 бактерии; питательные среды для них

способ определения чувствительности патогенных бактерий к комплексным антибактериальным препаратам -  патент 2529711 (27.09.2014)
бифазная транспортная питательная среда для выделения и выращивания бруцеллезного микроба -  патент 2529364 (27.09.2014)
питательная среда для выращивания консорциума азотфиксирующих и фосфатмобилизующих микроорганизмов -  патент 2528874 (20.09.2014)
питательная среда для выращивания консорциума азотфиксирующих и фосфатмобилизующих микроорганизмов -  патент 2528873 (20.09.2014)
штамм lactobacillus fermentum, обладающий широким спектром антагонистической активности и пробиотический консорциум лактобактерий для изготовления бактериальных препаратов -  патент 2528862 (20.09.2014)
изолированный штамм (варианты), обеспечивающий улучшение состояния здоровья жвачных животных, способ его получения, и способ его введения жвачным животным -  патент 2528859 (20.09.2014)
способ получения миллерита с использованием сульфатредуцирующих бактерий -  патент 2528777 (20.09.2014)
питательная среда для выращивания консорциума азотфиксирующих и фосфатмобилизующих микроорганизмов -  патент 2528744 (20.09.2014)
питательная среда для выращивания консорциума азотфиксирующих и фосфатмобилизующих микроорганизмов -  патент 2528740 (20.09.2014)
питательная среда для культивирования легионелл -  патент 2528101 (10.09.2014)
Наверх