способ получения алкилбензилдиметиламмонийфторидов, обладающих противовирусным и антибактериальным действием

Формула изобретения

Способ получения алкилбензилдиметиламмонийфторидов, обладающих противовирусным и антибактериальным действием, отличающийся тем, что с целью синтеза эффективного лекарственного средства с низкой токсичностью, путем взаимодействия смеси 1,5 М алкилиодида формулы RJ, где R-C₈H₁₇-C₁₈H₃₇ алкил, в абсолютном спирте с диметилбензиламином при кипении, с последующей последовательной отгонкой этанола в вакууме, растворением остатка в этилацетате, высушиванием в диэтиловом эфире, отделением осевшего в виде масла полученного промежуточного продукта с отгонкой оставшегося эфира, растворением промежуточного продукта в смеси этанол - вода в объемном соотношении 1:1, с последующим титрованием его 10% водным раствором AgF до исчезновения иодид - ионов из раствора, после чего раствор фильтруют, а фильтрат упаривают и кристаллизуют из смеси метанол - гексан.

Описание изобретения к патенту

Предлагаемое изобретение к медицине и может быть использовано для лечения вирусных и других инфекционных заболеваний, в том числе и туберкулёза.

Цель изобретения - синтез эффективного лекарственного средства с низкой токсичностью.

Известна композиция, созданная на основе бензальконийфторида, обладающая достаточно широким спектром действия и способная подавлять активность ретровирусов, особенно вируса простого герпеса и вируса LVA, ответственного за развитие СПИДа [1].

Предлагаемый способ отличается от способа получения указанной композиции тем, что при взаимодействии с алкилподидом в условиях, указанных в формуле изобретения, получают диметилбензиламмонийалкидиодит, из которого затем при титровании раствором AgF получают соответствующий диметилбензиламмонийалкидфторид.

Кроме того, недостатком композиции [1] является её сложный химический синтез и высокая токсичность, в том числе и гемолитическая, трудности в подборе индивидуальной дозы вводимого препарата.

Известен способ получения диметилбензиламмонийалкилиодита, в частности, диметилбензиламмонийнонилиодита путём взаимодействия бензилнониламина с MeJ [2]. Известны способы получения аммонийфторидов реакцией обмена в четвертичных аммонийных солях одного галоида на другой [3, 4, 5].

Так, при добавлении к лаурилбензилдиметиламмоний бромиду в водной среде AgF, с последующим отделением AgBr и конденсацией фильтрата в вакууме получают лаурилбензилдиметиламмонийфторид.

Известные способы получения алкилбензилдиметиламмонийфторидов [2] не обладает совокупностью отличительных признаков предлагаемого способа их получения - создания нового эффективного лекарственного средства с низкой токсичностью, обладающего противовирусным и антибактериальным действием.

Таким образом, предлагаемое техническое решение не следует из уровня современной техники и соответствует критериям «новизны» и «изобретательского уровня» изобретения.

Поставленная цель достигается путём синтеза соединений, исходными продуктами которого являются алкилиодид и диметилбензиламин смесь, 1,5 M алкилиодида и диметилбензиламина кипятят в абсолютном спирте (I). Затем отгоняют этанол в вакууме. Остаток растворяют в этилацетате и высушивают (II) диэтиловым эфиром. Осевшее масло отделяют, а остатки эфира отгоняют в вакууме. Далее точную навеску (II) растворяют в смеси (этанол-вода) в объёмном соотношении I : I и титруют 10 % водным раствором AgF до исчезновения иодид-ионов из раствора. Раствор фильтруют, а фильтрат упаривают и кристаллизуют из смеси метанол-гексан.

,

где R-CH₈H₁₇ -CH₁₈H_37.

Получены и испытаны соединения со всеми значениями алкила - от C₈H ₁₇ до C₁₈H₃₇.

Синтезированное соединение со значением алкила C₉H₁₉ имеет формулу:

, Mc 281,3-бензилдиметил-н-нониламмония фторид. Температура плавления - 119,5-121,5°C.

В воде хорошо растворим.

Элементарный анализ синтезированного соединения:

C - 76,81%; H - 11,45%; F - 6,73%; N - 5,01%.

Спектр ПМР, (б, ш, д): 3,01 C (6Н, N (CH₃)₂;

4,72^C (2Н, CH₂Ph), 6·99^T(1Н, Н_аром - 4);

7,21т(2H, Hаром - 3,5), 7,72д(2Н, Наром - 2,6);

3,37^д(2H,H-1), 0-87^д (3H,H-9), 1,25-1,39 м (12H,H-2/8).

ИК спектр снят на приборе ИКС-29 (в таблицах КВЧ)

3063^CM-1 (СНаром)

2920^CM-1 (CH₂)

2872^CM-1 (CH₃)

1678^CM-1 (^-C=C, аром).

Пример 1.

Противовирусная активность бензилдиметил-нониламмония фторида была испытана в отношении вируса простого герпеса на 30 беспородных белых крысах, массой 180-200 г, в возрасте 14-16 месяцев. Работа проводилась в Государственном учреждении «Самарская областная ветеринарная лаборатория».

Эксперименты проводились в соответствии с «Правилами использования экспериментальных животных» (Приказ Минвуза от 13.11.84 г. № 724). Животным внутрикожно вводился вирус герпеса (штамм ВПГ-1 Ту1ог-0,2^мл (10⁴ ТЦПД₅₀ ). Известно, что этот штамм вызывает герпетическую вирусемию.

Перед проведением эксперимента острую токсичность бензил-диметил-н-нониламмония фторида определяли при однократном введении мышам (n=15) и морским свинкам (n=15) по методу Behrers-Karbel. Введение раствора в концентрации 3 г/л в стерильном изотоническом растворе натрия хлорида осуществляли мышам внутривенно, внутриперитонеально. Морским свинкам - внутриперитонеально и внутриперикардиально.

Животных наблюдали в течение 14-ти суток. Ежедневно проводилось взвешивание и термометрия. Определялась ЛД₅₀ . Синтезированное соединение - малотоксично: ЛД₅₀ составляла для мышей от 54,7 до 56,9 мг/кг массы, для морских свинок - от 28,6 до 37,9 мг/кг массы.

В экспериментах на белых крысах (n=17), заражённых вирусом простого герпеса, использовалась концентрация раствора бензилдиметил-н-нониламмония фторида от 10 до 20 мг/кг.

Все животные экспериментальной группы, которым бензилдиметил-н-нониламмоний фторид вводился однократно на 7-е сутки после заражения, при наличии клинической симптоматики герпетической вирусемии остались живые. Их состояние быстро нормализовалось, и через 5-ть суток после инъекции они становились практически здоровыми: были активны, с удовольствием поедали корм.

Крысы контрольной группы (n=9), инфицированные вирусом простого герпеса, но не леченные бензилдиметил-н-нониламмоний фторидом погибли на 14, 21, 30, 32, 36 сутки.

Пример 2.

Синтезированное соединение использовано для лечения морских свинок, заражённых микобактериями туберкулёза человеческого типа, выделенными от больного туберкулёзом лёгких. Животным (n=25) мико-бактерии вводились внутрибрюшинно (0,001 мг в 1,0 мл физиологического раствора). Через 15-20 суток у всех инфицированных животных появились клинические признаки туберкулёзного процесса: вялость, потеря веса, частичное облысение. Животным трижды с интервалом 5-ть суток внутриплеврально вводился бензил-н-нониламмоний фторид в дозе 20 мг/кг массы тела в 5,0 мл изотонического раствора хлорида натрия. Все животные остались живы и наблюдались в течение года после клинического выздоровления. Животные контрольной группы (n=15), которым бензилдиметил-н-нониламмоний фторид не вводился, погибли на 38-е сутки (n=7), 45-е сутки (n=5) и на 48-е сутки (n=3) после инфицирования их микобактериями человеческого типа.

Таким образом, синтезировано эффективное средство с низкой токсичностью, обладающее противовирусным и антибактериальным действием.

Цитированные документы

1. Арофарм Лимитед, Пьер Бурбон, Пьер Лагни. Раствор для васкулярного введения, способ борьбы с вирусными и инфекционными заболеваниями, способ борьбы со СПИДом, способ борьбы с туберкулёзом // Патент РФ, № 2128507 от 24.01.94.

2. King Н. Antiplasmodial action and chemical constitution. V.Carbinolamines derived from 6-methooxyguinoline // J. Chemical soc. 1942, v.79, p.401-404.

3. Вейганд-Хильгемаг К. Методы эксперимента в органической химии / М. Химия, 1969, с.192-194.

4. Патент US 164744 A. 18.11.1965.

5. Патент BE 621086. 30.11.1962.