Недифференцированные клетки человека, животных или растений, например, клеточные линии, ткани, культивирование или сохранение их, питательные среды для них: ...клетки животных – C12N 5/16

Настоящее изобретение относится к иммунологии и биотехнологии. Предложены варианты нуклеиновых кислот, каждый из которых кодирует аминокислотную последовательность тяжелой цепи иммуноглобулина IgG1. Указанная цепь содержит на С-конце СН3-домена глицин-лизиновый дипептид, кодируемый кодоном ggaaaa, ggcaaa или gggaaa. Описаны: плазмида, кодирующая тяжелую цепь иммуноглобулина; клетки-варианты, обеспечивающие экспрессию иммуноглобулина IgG1; способ получения иммуноглобулина в клетках млекопитающего; способ улучшения экспрессии иммуноглобулина в клетках млекопитающего; - использующие варианты нуклеиновой кислоты. Использование изобретения обеспечивает предупреждение экспрессии побочного продукта массой 80 кДа, что может найти применение при производстве иммуноглобулинов. 7 н. и 11 з.п. ф-лы, 7 ил., 3 табл., 6 пр.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к полипептиду, несущему эпитоп BNP(1-32) человека, для получения лигандов, направленных против BNP(1-32) человека или proBNP(1-108) человека, где указанный полипептид имеет формулу . Раскрыто применение указанного полипептида для получения лигандов, направленных против BNP(1-32) человека или proBNP(1-108) человека и для получения гибридомы, которая секретирует моноклональное антитело, направленное против BNP(1-32) человека или proBNP(1-108) человека. Раскрыт способ получения гибридомы, которая секретирует моноклональное антитело, направленное против BNP(1-32) человека или proBNP(1-108) человека, а также полученная гибридома. Раскрыт лиганд, специфичный к эпитопу с последовательностью FGRKMDR, а также его применение для детектирования в биологическом образце BNP(1-32) человека или proBNP(1-108) человека. Раскрыт способы детектирования в биологическом образце BNP(1-32) человека или производного proBNP(1-108) человека, способ in vitro диагностики, прогноза, стратификации риска или последующего наблюдения отдаленных результатов сердечной и/или сосудистой патологии у индивидуума, а также способ in vitro диагностики инсульта у индивидуума с использованием указанного лиганда. Раскрыт мультиэпитопный калибратор, предназначенный для получения калибровочных кривых для анализов BNP(1-32), proBNP(1-108), а также набор для детектирования BNP(1-32) человека или proBNP(1-108) человека. Изобретение позволяет эффективно детектировать сердечные и/или сосудистые патологии у индивидуума. 12 н. и 3 з.п. ф-лы, 17 ил., 12 табл., 18 пр.

Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложено антитело к лимфотоксину-альфа (LT ), в том числе его химерные и гуманизированные варианты. Рассмотрены содержащие его композиции, его применение для получения лекарственного средства для лечения аутоиммунных нарушений, способ ингибирования активированной лимфотоксином-альфа клеточной пролиферации ex vivo с помощью антитела по изобретению, а также нуклеиновая кислота, экспрессирующий вектор, клетка-хозяин и основанный на их использовании способ продуцирования антитела. Настоящее изобретение может найти дальнейшее применение в терапии аутоиммунных заболеваний. 9 н. и 42 з.п. ф-лы, 27 ил., 7 табл., 21 пр.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения моноклональных антител (МКА) к V антигену Yersinia pestis. Штамм гибридных клеток животных Mus musculus 2B8 получают путем иммунизации мышей линии BALB/c. Мышей иммунизируют 4-кратным введением рекомбинантного V антигена в дозе 100 мкг/мышь. На третьи сутки после последней иммунизации проводят гибридизацию спленоцитов иммунных мышей (1×10⁸ клеток) с клетками мышиной миеломы РЗ-Х63 Ag/8-653 (1×10⁷ клеток). В качестве агента для слияния применяют полиэтиленгликоль (Sigma, США). После гибридизации проводят селекцию, скрининг, клонирование и криоконсервацию гибридомы. Штамм депонирован в государственной коллекции патогенных микроорганизмов и клеточных культур («ГКПМ-Оболенск») под номером Н-20. Штамм гибридных культивируемых клеток, продуцирующий моноклональные антитела, специфичные к V антигену Y.pestis, пригоден для конструирования на их основе тест-систем для выявления возбудителя чумы. 8 ил., 3 табл., 9 пр.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения моноклональных антител (МКА) к V антигену Yersinia pestis. Штамм гибридных клеток животных Mus musculus 5G6 получают путем иммунизации мышей линии BALB/c. Мышей иммунизируют 4-х кратным введением рекомбинантного V антигена в дозе 100 мкг/мышь. На третьи сутки после последней иммунизации проводят гибридизацию спленоцитов иммунных мышей (1×10⁸ клеток) с клетками мышиной миеломы Р3-Х63 Ag/8-653 (1×10⁷ клеток). В качестве агента для слияния применяют полиэтиленгликоль (Sigma, США). После гибридизации проводят селекцию, скрининг, клонирование и криоконсервацию гибридомы. Штамм депонирован в государственной коллекции патогенных микроорганизмов и клеточных культур («ГКПМ-Оболенск») под номером Н-19. Штамм гибридных культивируемых клеток, продуцирующий моноклональные антитела, специфичные к V антигену Y.pestis, пригоден для конструирования на их основе тест-систем для выявления возбудителя чумы. 8 ил., 3 табл., 7 пр.

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано при патоморфологической диагностике остеопороза по костным биоптатам. Сущность способа оценки участия остеоцитов в минерализации костного матрикса состоит в том, что в качестве участков для анализа оконтуривают и кадрируют остеоны и вставочные пластинки, в каждом из полученных изображений нумеруют лакуны остеоцитов, подсчитывают общее их число, а также количество лакун, содержащих минералы в аморфной фазе. Определяют процентное содержание последних как коэффициент участия остеоцитов в минерализации костного матрикса. Если минералы в аморфной фазе обнаруживаются менее чем в 30% лакун, минерализационную активность остеоцитов оценивают как низкую. При наличии аморфных минералов в 30-80% лакун - как среднюю, а если более 80% лакун содержат минералы в аморфной фазе - как высокую. 1 пр., 2 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен штамм гибридных клеток животных Mus musculus 10G4, депонированный в коллекции микроорганизмов ФГУН Государственного научного центра прикладной микробиологии и биотехнологии под номером Н-13. Данный штамм может быть использован для получения моноклональных антител (МКА) к капсульному F1 антигену Yersinia pestis и пригоден для конструирования на их основе тест-систем для выявления возбудителя чумы. 7 ил., 4 табл., 7 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и представляет собой выделенную нуклеиновую кислоту, включающую регуляторную последовательность РНК-полимеразы I собаки и содержащую (i) по меньшей мере 250, или по меньшей мере 350, или по меньшей мере 450 соприкасающихся нуклеотидов или всю нуклеотидную последовательность, представленную в виде последовательности SEQ ID NO:26, (ii) полинуклеотид, который по меньшей мере на 80% идентичен указанной выше нуклеотидной последовательности (i) или включает комплементарную или обратно комплементарную (i) или (ii) последовательность. Нуклеотидная последовательность (i) или (ii) функционально связана с кДНК, которая кодирует вРНК вируса гриппа и при интродуцировании в клетки MDCK способна направлять экспрессию указанной вРНК вируса гриппа. Настоящее изобретение также описывает векторы экспрессии и клетки, содержащие такие нуклеиновые кислоты, а также способы применения таких нуклеиновых кислот для получения вирусов гриппа, в том числе вирусов гриппа, вызывающих инфекцию. Система плазмидного спасения pol I собаки позволяет получить рекомбинантные вирусы гриппа в культуре клеток собаки с высоким титром. 9 н. и 16 з.п. ф-лы, 16 ил., 7 табл., 12 пр.

В изобретении описаны штаммы гибридных культивируемых клеток животных Mus musculus ВКПМ Н-117, ВКПМ Н-116, ВКПМ Н-115, ВКПМ Н-113 и ВКПМ Н-114 - продуценты моноклональных антител, обладающих различной специфичностью к рекомбинантному эритропоэтину (ЭПО) человека и позволяющих отличать гликозилированную форму ЭПО от сопутствующих гипо- и дегликозилированных примесей. Оценка продуктивности штаммов и специфичности продуцируемых антител проведена на основе иммуноферментного анализа с использованием нескольких маркеров специфичности: рекомбинантного белка ЭПО; гипогликозилированного ЭПО (о-ЭПО), полученного в результате периодатного окисления природного антигена; дегликозилированного ЭПО (de-ЭПО), полученного в результате ферментативной обработки рекомбинантного ЭПО (PNGasa). Продуцируемые гибридомами моноклональные с указанной специфичностью необходимы для выделения гликозилированной формы ЭПО, а также количественного и качественного анализа смесей ЭПО. 5 н.п. ф-лы, 2 табл., 5 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к рекомбинатной плазмидной ДНК рАР271 и линии клеток Mesocricetus auratus ВНК 21 k.13 (2H7). Конструируют рекомбинантную плазмидную ДНК рАР271, содержащую ген белка rhFVII, MAR-область прикрепления к ядерному матриксу гена лизоцима птиц, усилитель транскрипции вируса CMV, промоутер гена трансляционного фактора элонгации EF-1 человека, внутренний сайт инициации трансляции IRES вируса энцефаломиокардита, ген DHFR мыши, сигнал полиаденилирования вируса SV40, кассету, содержащую все необходимые элементы для экспрессии гена аминогликозид-3'-фосфотрансферазы (АРН), кассету для экспрессии в клетках бактерий гена -лактамазы, а также уникальные участки узнавания следующих эндонуклеаз рестрикции: AgeI (850 п.о.), BbvCI (1657 п.о.), BmgBI (4202 п.о.), BssHII (6672 п.о.), Eco47III (11269 п.о.), EcoRI (10929 п.о.), EcoRV (11863 п.о.), FseI (1455 п.о.), NotI (4812 п.о.), RsrII (6790 п.о.), SbfI (2330 п.о.), SfiI (6027 п.о.), Tth111I (6390 п.о.), XcmI (2404 п.о.). Предложенное изобретение позволяет получать рекомбинантный белок фактора VII свертываемости крови человека со стабильно высоким выходом. 2 н.п. ф-лы, 4 ил., 2 пр.

В изобретении описаны клетки-партнеры слияния, дающие возможность получения гетерогибридом из клеток биологических видов, отличающихся от мыши. Гетерогибридомы получают путем слияния миеломных клеток, полученных из животного первого биологического вида, с лейкозными клетками, полученными из животного второго биологического вида, которые имеют дополнительную S-фазу в клеточном цикле и обладают свойством диплоидизации. Клетка-партнер слияния SPYMEG депонирована под номером FERM ВР-10761 и может быть использована для получения гибридомы. Описана гибридома, продуцирующая антитела, полученная слиянием клетки-партнера слияния и третьей клетки с антителопродуцирующей способностью. В изобретении описаны способы получения клетки-партнера слияния, гибридомы и антителопродуцирующей клетки, а также способы получения антител. Использование изобретения обеспечивает стабильное и несложное продуцирование веществ с использованием гибридом в широком диапазоне видов животных. Полученные по изобретению гибридомы стабильно сохраняют фенотип в течение всего процесса клонирования. 8 н. и 12 з.п. ф-лы, 10 ил., 2 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Описан штамм гибридных культивируемых клеток животных Mus. Musculus RIM9 - продуцент моноклональных антител, специфичных к пептиду молока человека - лактаптину и его рекомбинантным аналогам, обладающим апоптотической активностью по отношению к раковым клеткам человека. Изобретение позволяет получать моноклональные антитела, распознающие общую линейную антигенную детерминанту рекомбинантного и природного лактаптина, что позволяет разрабатывать на их основе чувствительные и специфичные тест-системы для определения лактаптина, антител к нему и для выделения лактаптина из молока человека методом аффинной хроматографии. 2 табл.

Изобретение относится к анти-М-СSF-специфическим антителам, полученным на основе RX1 или происходящим от RX1, и которые более чем на 75% конкурируют с моноклональными антителами RX1, МС1 и/или МС3 за связывание с M-CSF (макрофагальному колониестимулирующему фактору). Не мышиное антитело является двухцепочечным, содержит определенную аминокислотную последовательность (приведенную в формуле изобретения и перечне последовательностей) и сохраняет высокую аффинность по отношению к M-CSF. Изобретение раскрывает выделенную нуклеиновую кислоту, кодирующую указанное антитело, вектор экспрессии, клетку-хозяина и способ получения анти-M-CSF-антитела с использованием клетки-хозяина или гибридомы, в частности гибридомы АТСС РТА-6263 или АТСС РТА-6264. Изобретение описывает фармацевтическую композицию, содержащую указанные антитела, наборы, содержащие фармацевтические композиции, и способы профилактики и лечения остеопороза у индивидуума, страдающего остеолитическим заболеванием. Полученные по изобретению антитела способны ингибировать дифференцировку остеокластов, что позволяет использовать их как высокоэффективные препараты для лечения остеолиза, рака с метастазами и остеопороза, ассоциированного с метастазами рака. 34 н. и 97 з.п. ф-лы, 30 ил., 12 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Штамм гибридомы получают путем иммунизации мышей линии BALB/c бычьим БТШ 70 в течение 78 суток. На третьи сутки проводят гибридизацию спленоцитов иммунных мышей (10 клеток) с клетками мышиной миеломы РЗ-Х63 Ag/8-653 (10 клеток). В качестве агента для слияния применяют полиэтиленгликоль с молекулярным весом 4000 (Merk, Германия). После гибридизации проводят селекцию, скрининг, клонирование и криоконсервацию гибридомы. Изобретение может быть использовано для получения моноклональных антител (МКА) к белку теплового шока 70 (БТШ 70). 4 ил., 1 табл.

Получен штамм 8С12 межвидовых гибридных клеток мыши Mus musculus и овцы Ovis aries - продуцент моноклональных антител овцы к гликопротеидному антигену вируса лейкоза крупного рогатого скота (КРС). Штамм депонирован в Специализированной Коллекции перевиваемых соматических клеточных культур сельскохозяйственных и промысловых животных под № 72. Штамм является постоянной гибридной линией клеток и обладает высоким уровнем продукции моноклональных антител овцы. Титры антител в нативной культуральной жидкости составляют 1:32-1:64 в иммуноферментном анализе (ИФА). Моноклональные антитела специфичны к общей антигенной детерминанте гликопротеидов вируса лейкоза КРС - наружного gp51 и трансмембранного gp30. При использовании в ИФА для выявления антител в сыворотке крови и молоке инфицированного вирусом лейкоза КРС моноклональные антитела обеспечивают прочное избирательное связывание с твердофазным носителем и оптимальную пространственную ориентацию гликопротеидного антигена. Штамм 8С12 может быть использован при изготовлении иммуноферментной тест-системы для диагностики лейкоза крупного рогатого скота, что позволит повысить эффективность оздоровительных мероприятий, уменьшить сроки оздоровления неблагополучных по лейкозу животноводческих хозяйств и, как следствие, снизить заболеваемость КРС лейкозом. 1 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению гибридом, и может быть использовано для получения штамма-продуцента моноклональных антител к антигену человека MUCI. С помощью гибридомной технологии получают штамм гибридных культивируемых клеток животных ВКПМ Н-105 - продуцент клинически значимых моноклональных антител крысы, обладающих индивидуальной специфичностью к гипогликозилированным и дегликозилированным изоформам опухоль-ассоциированного антигена человека MUCI. Изобретение позволяет распознавать клинически значимые изоформы антигена MUCI с помощью антител, продуцируемых полученным штаммом, которые также пригодны для определения концентрации MUCI в сыворотке крови человека при ранней диагностике опухолей. 1 ил.

Настоящее изобретение относится к модификации гликозилирования белков для получения полипептидов с улучшенными терапевтическими характеристиками, включая антитела с повышенной антителозависимой клеточной цитотоксичностью. Для получения указанных полипептидов используют клетку-хозяина, модифицированную нуклеиновой кислотой, кодирующей (1,4)-N-ацетилглюкозаминилтрансферазу III (GnTIII). Полученный полипептид представляет собой, в частности, IgG или его фрагмент. Изобретение раскрывает способ получения полипептида, а также антитела или его фрагмента и белка слияния, полученных указанным способом. Описан фармацевтический состав для увеличения Fc-опосредованной клеточной цитотоксичности, содержащий антитело и носитель, и его использование для лечения рака, а также способ лечения заболевания, связанного с увеличением количества или производства В-клеток с использованием указанного антитела, в частности, против CD20, и в предпочтительном варианте представляющее собой антитело IDEC-C2B8. Изобретение позволяет получать полипептид или антитело, обладающие увеличенной Fc-опосредованной клеточной цитотоксичностью, при использовании которого уменьшается содержание В-клеток в организме пациента. 10 н. и 28 з.п. ф-лы, 21 ил.

Изобретение относится к биотехнологии и иммунологии. Описано моноклональное анти-IFN антитело, которое связывается с подтипами IFN : IFN 1, IFN 2, IFN 4, IFN 5, IFN 8, IFN 10, IFN 21 и содержит три CDR участка тяжелой цепи. Аминокислотная последовательность в описании. Раскрыта тяжелая цепь анти-IFN антитела или ее фрагмент, которые также содержат указанные CDR участки. Описано анти-IFN антитело, которое содержит, по-меньшей мере, одну легкую цепь и одну тяжелую. Раскрыты варианты нуклеиновых кислот, кодирующих указанные антитела, и варианты векторов для экспрессии нуклеиновых кислот, а также варианты трансформированных клеток-хозяина. Среди векторов экспрессии описаны также векторы, депонированные под №2881 и под №2882, несущие соответственно тяжелую и легкую цепь антитела. Описан способ получения антитела из указанных клеток. Раскрыта гибридомная линия клеток мыши, депонированная в АТСС под номером №РТА-2917, и антитело, продуцируемое указанной линией. Описаны также варианты фармацевтической композиции на основе антитела и способ диагностики аутоиммунного заболевания. Раскрыто также применение антител для лечения заболевания или состояния, ассоциированного у пациента с повышенными уровнями IFN . Использование изобретения позволяет одновременно подавлять биологическую активность, по крайней мере, семи подтипов IFN человека, а именно IFN 1, IFN 2, IFN 4, IFN 5, IFN 8, IFN 10, IFN 21, что может найти применение в диагностике и терапии различных заболеваний человека, опосредуемых IFN , таких как инсулинозависимый сахарный диабет или системная красная волчанка. 24 н. и 29 з.п. ф-лы. 5 табл., 7 ил.

Изобретение относится к иммунобиотехнологии и касается антитела (Ат) со специфичностью к аномально процессированной форме белка тау человека, которая конформационно отлична от нормального тау и не связывается с нормальным белком тау, а также касается конформационно отличных белков тау («тауонов») и диагностических и терапевтических аспектов, имеющих отношение к болезни Альцгеймера и родственным таупатиям. Ат по изобретению продуцируются гибридомами DC-11 или DC-11/I, депонированными в ЕСАСС под номерами 00082215 и 00082216. Описаны укороченные формы белка тау человека, которые укорочены по N- и/или С-концу и включают аминокислотные остатки от аминокислотного остатка 300 до аминокислотного остатка 400 самой длинной изоформы белка тау человека (441 а.о.). Эти укороченные формы белка тау человека специфически распознаются Ат, описанным выше. В изобретении описан способ определения укороченных форм белка тау в биологическом материале пациента с использованием набора, включающего антитело по изобретению и подходящий контейнер. Использование изобретения обеспечивает подходящую мишень для лекарственных препаратов раннего терапевтического воздействия при болезни Альцгеймера и других таупатиях. 6 н. и 5 з.п. ф-лы, 13 ил.

(56) (продолжение):

CLASS="b560m"Charles L. Weaver et al. Conformational change as one of the earliest alterations of tau in Alzheimer's disease.

Изобретение относится к биотехнологии. Для трансформации используют 8-9-недельных самцов кроликов, которым в паренхиму семенника инъецируют векторную конструкцию pX-RSVhGH кодирующую гормон роста человека или pX-Ins, кодирующую инсулин человека. Эффективность трансформации генных конструкций определяют при помощи иммуногистохимического набора Novocastra (Sigma, США). Способ позволяет повысить эффективность генетической трансформации клеток семенников кроликов. 3 ил.

Изобретение относится к биотехнологии, конкретно к морфологическим исследованиям культивируемых клеток, и может быть использовано для стимуляции роста фибробластов в культуре. На первичную культуру фибробластов непрерывно в течение 5 минут воздействуют электромагнитным излучением с частотой импульсов 73±3,0 Гц и с амплитудой импульсов не менее 50 В. Изобретение позволяет повысить эффективность роста и увеличить плотность фибробластов в культуре. 1 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии и вирусологии. Предложен штамм гибридных культивируемых клеток Rattus norvegicus 122H9. Получен путем слияния клеток крысиной миеломы 210RC.Y3-Ag1.2.3. с клетками селезенки крысы LOU, иммунизированной очищенным вирусом эктромелии штамм К-1. Штамм является продуцентом перекрестно-реактивных нейтрализующих моноклональных антител против ортопоксвирусов, патогенных для человека. Изобретение может быть использовано в медицине и иммунологии для разработки и усовершенствования средств вакцинопрофилактики и терапии заболеваний, вызываемых патогенными для человека ортопоксвирусами. 1 нл., 2 табл.