Иммобилизованные ферменты или ферменты на носителях, иммобилизованные микробные клетки или микробные клетки на носителях, их получение: .ферменты или микробные клетки, иммобилизованные на или в органическом носителе – C12N 11/02

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен биосорбент для ликвидации нефти с поверхности водоемов. Биосорбент содержит (мас.%): глину - 70-80; отходы обогащения бурого угля - 19,5-28,5; штамм Pseudomonas fluorescens ВКГ RCAM00538 - 0,5-1,5. Изобретение направлено на эффективную очистку поверхности водоемов от нефти при сокращении времени и затрат с использованием биосорбента с высокой углеводородокисляющей активностью. 2 табл., 5 пр.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложен ферментный биокатализатор в виде наноразмерных частиц для детоксификации фосфорорганических соединений in vivo. Биокатализатор представляет собой нековалентные полиэлектролитные комплексы. Данные комплексы состоят из полигистидин-содержащего полипептида со свойствами органофосфатгидролазы и блок-сополимера полиэтиленгликоля и полиглутаминовой кислоты в зарядовом соотношении фермент:блок-сополимер в диапазоне от 2:1 до 1:5. Изобретение обеспечивает существенное упрощение технологии получения биокатализатора, увеличение его каталитической эффективности, снижение вводимой дозы, уменьшение иммунотоксичного эффекта, а также повышение активности в реакциях гидролиза пестицидов и отравляющих веществ. 3 з.п. ф-лы, 6 пр.

Изобретение относится к области биохимии. Используют липосомы в качестве матрицы для активированного фермента - пероксидазы хрена. К 5 мг окисленной перйодатным методом пероксидазы хрена добавляют 1 мл суспензии липосом в 0,01 М растворе карбонатно-бикарбонатного буфера при рН 9,5. Подвергают ультразвуковой обработке в течение 1 мин. Инкубируют 1 ч. Иммобилизуют с иммуноглобулинами в концентрации 5 мг в течение 2 ч при температуре 22±4°С. Стабилизируют 5 мг боргидрида натрия с последующей гель-хроматографической очисткой. Изобретение позволяет получить липосомально-иммунопероксидазный конъюгат для индикации возбудителей инфекционных заболеваний в иммуноферментном анализе и увеличить срок годности препарата до 6 лет. 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложена композиция для получения кремнийорганической золь-гель матрицы для иммобилизации микроорганизмов в биосенсорных анализаторах. Композиция состоит из 20% раствора полиэтиленгликоля в фосфатном буферном растворе, тетраэтоксисилана и 0,2 моль/дм³ раствора катализатора NaF, дополнительно введенной гидрофобной добавки - метилтриэтоксисилан. Компоненты взяты в объемном соотношении ПЭГ:ТЭС:МТЭС:NaF 4:(18-3,4):(2-16,6):1. Изобретение обеспечивает снижение токсичного действия матрицы на биоматериал и повышение ее механической прочности. 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине, конкретно к фармакологии и клеточным технологиям. Предложено применение иммобилизированной на низкомолекулярном водорастворимом носителе с помощью ионизирующего излучения гиалуронат-эндо- -N-ацетилгексозаминидазы в качестве средства, обладающего регенеративной активностью. Изобретение позволяет расширить показания к применению иммобилизированной с помощью ионизирующего излучения гиалуронат-эндо- -N-ацетилгексозаминидазы, которая обладает выраженной регенеративной активностью и терапевтическими свойствами при дегенеративных заболеваниях: сахарном диабете, циррозе печени, фиброзе легких и энцефалопатии. 9 табл., 7 пр.

Проводят термостатирование биокатализатора на основе иммобилизованных микробных клеток и неинокулированного носителя, входящего в состав биокатализатора, инфракрасное сканирование поверхности биокатализатора и носителя с помощью высокочувствительной инфракрасной камеры, и получение тепловых характеристик биокатализатора, таких как распределение температур на его поверхности и разница температур между поверхностью биокатализатора и неинокулированного носителя. Распределение температур позволяет контролировать однородность распределения активности на поверхности биокатализатора. Разницу температур используют для определения интенсивности адсорбции и метаболической активности закрепленных бактериальных клеток. Установка для определения эффективности адсорбционной иммобилизации микроорганизмов и мониторинга функционального состояния биокатализаторов включает инфракрасную камеру, закрепленную на штативе, и соединенную с компьютером, и термоизолирующий бокс с отверстием сверху, закрывающимся крышкой, что позволяет минимизировать колебания температуры окружающей среды до ±1°С/ч и снижает влияние инфракрасной камеры на результаты анализа. Изобретение обеспечивает сокращение времени проведения анализа, повышение эффективности и рентабельности биологических методов трансформации химических соединений и биологической утилизации опасных веществ. 3 н. и 3 з.п. ф-лы, 2 ил., 3 табл., 6 пр.

Способ иммобилизации бактериальных клеток предусматривает внесение бактериальных клеток Erwinia rhapontici B-9292 в концентрации 10% в раствор поли-N-винилпирролидона с молекулярной массой 500 кДа с концентрацией 1 мг/мл в ацетатном буфере рН 6,0. Полученную реакционную смесь выдерживают в течение 3 часов при температуре 22-25°С, а затем осуществляют центрифугирование иммобилизованных бактериальных клеток. Способ позволяет интенсифицировать процесс трансформации сахарозы и повысить выход изомальтулозы. Выход изомальтулозы составляет 92-95%. 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и экологии. Биосенсор содержит клетки фотоавтотрофных микроводорослей, флуоресцентные характеристики фотосинтетической системы которых изменяются при появлении в их окружении химических соединений с цитотоксичным действием: ионов тяжелых металлов и гербицидов. Клетки зеленых и диатомовых микроводорослей иммобилизуют в криогеле поливинилового спирта: наносят клеточную суспензию на поверхность, затем вводят клетки в макропоры полимерного носителя под действием центробежных сил (5000-14000 g) в течение 1-10 мин. Получают высокочувствительный и стабильный биосенсор на основе компонентов, взятых в следующем соотношении, мас.%: клетки микроводорослей 0,015-1,1; поливиниловый спирт 7-15; водная фаза - до 100. По изменению величины относительной переменной флуоресценции хлорофилла клеток, входящих в состав биосенсора, определяют низкие концентрации тяжелых металлов и гербицидов в водных системах при скоростях протока до 360 мл/ч. Максимальное время использования биосенсора составляет 60 суток. 2 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен способ получения гранул, содержащих иммобилизованные нефтеокисляющие микроорганизмы. Осуществляют иммобилизацию нефтеокисляющих микроорганизмов при температуре 15-30°С в гелеобразующей среде, образованной 3-5% раствором альгината натрия и 5% раствором сульфата кальция. Затем осуществляют одновременное гомогенизирование и гранулирование иммобилизованных микроорганизмов с гидрофобизированным порошком диоксида кремния при скорости вращения мешалки от 2000 до 3000 об/мин. Получают гранулы с гидрофобизированной поверхностью размером не более 0,5 мм. Полученные гранулы как композиция представляют собой легко сыпучий порошок с содержанием от 280 до 640 млн микроорганизмов/г. 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Описан способ получения гидрофобного или частично гидрофобного активного белка. Способ включает стадии взаимодействия активного водорастворимого белка с реагентом, способным преобразовать один или несколько гидрофильных аминокислотных остатков в гидрофобные остатки. Активный центр, ответственный за активность белка, защищают путем проведения реакции гидрофобизации в гомогенной смеси растворителей с различной полярностью. Представлен белок, полученный с помощью описанного способа. Представлен способ получения устройства, состоящего из мономолекулярного слоя ориентированного активного белка, иммобилизованного на твердой подложке, включающий стадию взаимодействия предложенного белка с гидрофобной твердой подложкой, причем указанное устройство пригодно для диагностических, генетических, иммунологических, медицинских, промышленных и исследовательских анализов, для механических манипуляций с белком или генетическим материалом или для получения микроматриц, а также устройства, полученные данным способом. Изобретение позволяет получать гидрофобизированные водорастворимые гидрофильные функциональные белки без изменения их природной функции, что дает возможность сканировать, получать изображения и манипулировать водорастворимыми белками. 12 н. и 16 з.п. ф-лы, 7 ил., 2 табл.

Изобретение относится к масложировой промышленности. Способ переэтерификации масла, содержащего одну или более из лимонной и/или фосфорной кислоты в качестве агентов, образующих хелаты с металлами, включающий стадии приведения масла в контакт с основанием и взаимодействия указанного масла с липазой. При этом ферментная композиция содержит липазу с внедренным основанием. Изобретение позволяет повысить производительность ферментной композиции и/или повысить средний выход продукта ферментной композиции за один проход в единицу времени. 3 н. и 19 з.п. ф-лы, 2 ил., 4 табл.

Изобретение относится к области обезвреживания реакционных масс, получаемых после химического уничтожения фосфорорганического вещества (ФОВ). Предложен способ биоразложения остаточных концентраций ФОВ и фосфорорганических соединений, являющихся продуктами его деструкции, в составе реакционных масс. Сначала проводится ферментативный гидролиз разбавленных водных растворов реакционных масс. В качестве фермента используется полигистидинсодержащий полипептид со свойствами органофосфатгидролазы, выделенный из штамма Escherichia coli ЦКМИБХ 29. Затем для биоразложения оставшихся в растворе фосфорганических компонентов применяются иммобилизованные клетки индивидуальных культур микроорганизмов-деструкторов С-Р-связи. Обработка 1 кг реакционных масс сопровождается накоплением до 2800 л водных стоков. Способ обеспечивает 100% разложение остаточных концентраций вещества типа Vx и 99% биоразложение всех фосфорорганических соединений в реакционных массах с разным химическим составом. При реализации способа возможно длительное функционирование клеток микроорганизмов (до 60 сут) и фермента (до 170 сут) в иммобилизованной форме. 4 з.п. ф-лы, 2 ил.

Изобретение относится к биотехнологии и предназначено для повышения эффективности биотехнологического получения этанола из целлюлозосодержащего сырья. Биокатализатор для получения этанола из пентоз представляет собой иммобилизованный мицелий микроскопического гриба, способного сбраживать пентозы в этиловый спирт, включенный в криогель на основе поливинилового спирта, при следующем соотношении исходных компонентов, мас.%: мицелий микроскопического гриба - 7,5-20,0, поливиниловый спирт - 2,5-5,0 и вода - до 100. Биокатализатор характеризуется периодом полуинактивации до 36 суток, обеспечивает скорость конверсии пентоз в этанол до 0,34 г/л/ч и выход целевого продукта до 50% от внесенного субстрата. Биокатализатор может быть многократно использован для получения этанола из пентоз в периодических условиях. 1 ил.

Изобретение относится к биотехнологии. Способ получения гетерогенного биокатализатора для ферментативного синтеза аминобета-лактамного антибиотика на основе внутриклеточной гидролазы эфиров альфа-аминокислот из бактерий рода Xanthomonas, включающий разрушение биомассы клеток Xanthomonas rubrilineans, экстракцию из нее фермента в водную фазу и последующую его иммобилизацию. Причем разрушение клеток осуществляют поэтапно, сначала нарушая их целостность криогенным воздействием, а затем обрабатывая водную суспензию размороженных клеток бутилацетатом. Экстракцию фермента в водную фазу проводят при нагревании обработанной клеточной суспензии сначала в условиях спонтанно устанавливающегося градиента рН, а затем при постоянном значении рН. Получаемый бесклеточный экстракт используют для процедуры иммобилизации фермента путем его осаждения полиэтиленгликолем в виде ферментных агрегатов и их последующей поперечной сшивки в присутствии глутарового альдегида. Полученный таким образом гетерогенный биокатализатор содержит до 0,95 г белка/г сухого биокатализатора и обладает синтетазной активностью до 2200 МЕ/г сухого биокатализатора. Изобретение позволяет повысить эффективность процедуры получения биокатализатора, повысить активность и стабильность получаемого биокатализатора. 3 н. и 3 з.п. ф-лы, 2 ил., 4 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для деструкции фосфорорганических соединений в проточных системах. Задачей предлагаемого изобретения является создание способа получения эффективного иммобилизованного биокатализатора для разложения ФОС в проточных системах и сам биокатализатор. На пористом носителе, представляющем собой криогель полимера, представляющего собой полиакриламид или его производные, поверхность которого модифицирована металл-хелатирующими лигандами и заряжена ионами двухвалентных металлов, иммобилизуют полипептид, содержащий полигистидиновую последовательность и проявляющий активность органофосфатгидролазы. Иммобилизацию пептида проводят пропуская его раствор через объем носителя. Способ экономически выгоден, биокатализатор может быть высушен, храниться в таком виде длительный период времени и регидратирован без существенных потерь активности, а также длительно использован в проточных системах. 2 н.п. ф-лы, 10 ил., 4 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к иммобилизованным биокатализаторам, с помощью которых осуществляют биологическую очистку жиросодержащих сточных вод предприятий пищевой промышленности. Иммобилизованный биокатализатор содержит биомассу микроорганизмов-продуцентов внеклеточных липаз, полимерный носитель на основе поливинилового спирта (ПВС) и водную фазу, причем в качестве биомассы иммобилизованный биокатализатор содержит клетки мицелиального гриба, а в качестве полимерного носителя - криогель ПВС. Получение самого иммобилизованного биокатализатора проводят смешиванием спор мицелиального гриба с раствором поливинилового спирта. Далее получают криогель ПВС с последующим формированием активного биокатализатора путем проращивания спор в массе полимерного носителя в питательной среде, содержащей индуктор(ы) биосинтеза секретируемых липаз в концентрации от 0,5 до 25 г/л. Изобретение позволяет получить эффективный биокатализатор для очистки жиросодержащих сточных вод, свести к минимуму вымывание клеток из носителя и загрязнение ими обрабатываемых сточных вод; кроме того, иммобилизованный биокатализатор обладает целевой функциональной активностью без введения каких-либо дополнительных минеральных подпиток. 2 н.п. ф-лы, 1 табл., 2 ил.

(56) (продолжение):

CLASS="b560m"с.83-87. МИРЗАЕВ Т.Ш. и др. Получение и применение иммобилизованных клеток гриба MUCOR MIEHEI, Химия природных соединений, 2000, №4, с.329, 330.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способам получения биокатализаторов на основе иммобилизованных ферментов, может быть использовано для удаления фосфорорганических соединений (ФОС) с различных поверхностей, в том числе кожных покровов, и последующей их детоксикации, а также для применения в качестве эффективных средств индивидуальной защиты. Для получения биокатализатора нерастворимый пористый материал вносят в раствор полимера, представляющего собой аминополисахарид, с одновременным внесением в тот же раствор белка и глутарового альдегида с последующим отжимом формирующейся ферментсодержащей композиции и ее последовательной обработкой растворами боргидрида натрия и антимикробных веществ. Изобретение позволяет получать в ходе непродолжительного процесса биокатализатор с концентрацией иммобилизованного белка до 25,0 мг/г биокатализатора и высокой каталитической активностью до 950 ед/г биокатализатора по отношению к ряду ФОС. 2 н.п. ф-лы, 9 ил., 1 табл.

(56) (продолжение):

CLASS="b560m"v.32, n.10, p.2254-2258. US 6642037, 04.11.2003. CALDWELL S.R., RAUSHEL P.M. Detoxification of organophosphate pesticides, using a naylon based Immobilized phosphotriesterase from Pseudomonas diminuta. Appl. Biochem. Biotechnol. 1991, v.37, p.59-72. ЕФРЕМЕНКО E.H., СЕРГЕЕВА B.C. Органофосфатгидролаза - фермент, катализирующий деградацию фосфорсодержащих отравляющих веществ и пестицидов. Известия АН. Сер. "Хим". 2001, с.1743-1749.

Изобретение относится к области биотехнологии. Микрочип представляет собой совокупность гелевых микроячеек на подложке из стекла, металла, полимера, керамики или композитного материала, внутри которых находятся иммобилизованные прокариотические или эукариотические клетки. Микроячейки с иммобилизованными клетками формируют с помощью гелеобразующего раствора, включающего глицерин. Клеточный микрочип используют для исследования живых клеток. Для этого клеточный микрочип инкубируют в присутствии маркера, регистрируют сигнал, например флуоресценцию клеток, и по сигналу оценивают жизнедеятельность клеток микрочипа. Использование микрочипа сохраняет жизнеспособность клеток, упрощает способ исследования живых клеток. 2 н. и 10 з.п. ф-лы, 5 ил.