Иммобилизованные ферменты или ферменты на носителях, иммобилизованные микробные клетки или микробные клетки на носителях, их получение: .ферменты или микробные клетки, иммобилизованные на или в неорганическом носителе – C12N 11/14

Группа изобретений относится к биотехнологии и пищевой промышленности. Предложен способ получения биокатализатора для переэтерификации жиров. Проводят аминирование гранулированного силикагеля или диоксида кремния дисперсностью 0,3-1,0 мм аминопропилтриэтоксисиланом. Затем полученный аминированный носитель обрабатывают водным раствором глутарового альдегида или глиоксаля концентрацией 2,0 мас.% или 5,0 мас.% в течение 2 ч. Иммобилизуют на обработанном носителе путем рециркуляции через него раствора термостабильной липазы бактерий Geobacillus lituanicus в фосфатном буфере при температуре 0ºC или 4ºC при pH 6,5 в течение 12 ч. Затем промывают полученный биокатализатор водным раствором трис(гидроксиметил)аминометана гидрохлорида. Также предложен биокатализатор для переэтерификации жиров, полученный указанным способом. Достигаемый технический результат заключается в упрощении технологии способа и в получении биокатализатора, обладающего высокой каталитической активностью и высокой механической прочностью. 2 н.п. ф-лы, 4 пр.

Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложен фотобиокатализатор, включающий гидрогеназу, иммобилизованную в количестве не менее 0,1 нмоль на 1 см² на наноструктурированной мезопористой пленке TiO₂. Мезопористая плёнка приготовлена из нанокристаллов TiO₂ размером от 15 до 25 нм с удельной поверхностью 50-100 м²/г. Совместно с ферментом гидрогеназой на пленке диоксида титана иммобилизован фотосенсибилизатор ФС 1 - пигмент-белковый комплекс фотосистемы 1 - в количестве 0,01-0,04 нмоль ФС 1 на 1 см². Полученная пленка TiO₂ имеет толщину 4-8 мкм, удельную поверхность 50-65 м² /г, поры со средним радиусом 11,5 нм и удельным объемом 0,50-0,65 см³/г. Также предложен фотокаталитический способ получения водорода в анаэробных условиях с использованием описанного фотобиокатализатора при освещении светом с =490-750 нм в присутствии органического донора электрона и переносчика электрона. Изобретения обеспечивают повышение устойчивости пигмент-белкового комплекса фотосистемы 1 и гидрогеназы, а также позволяют получать водород под действием видимого света с высокой скоростью. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 3 ил., 4 пр.

Изобретение относится к биохимии. Предложен способ иммобилизации L-фенилаланин-аммоний-лиазы на магнитных наночастицах оксидов металлов в присутствии конденсирующего агента 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида. Способ позволяет повысить удельную активность L-фенилаланин-аммоний-лиазы и сохранить от 64% до 75% ее активности. 6 табл., 3 пр.

Изобретение предназначено для использования в пищевой промышленности, а именно в технологии получения сиропов, содержащих глюкозу и фруктозу и используемых в кондитерской и хлебопекарной промышленности для производства кондитерских изделий, конфет. Заявлен биокатализатор для получения инвертного сиропа, способ его приготовления и способ получения инвертного сиропа - инверсия сахарозы с участием приготовленных биокатализаторов. Биокатализатор для получения инвертного сиропа содержит в мас.% по сухим веществам: в качестве ферментативно-активной биомассы автолизаты дрожжей 30-50, наноуглеродный компонент 5-15 и носитель, состоящий из диоксида кремния, до 100. Используют наноуглеродный компонент со структурой нановолокна или со структурой углеродных нанотрубок, или со структурой наноалмазов, или со структурой луковичного наноуглерода. Способ получения инверного сиропа осуществляют в проточном реакторе с неподвижным слоем описанного выше биокатализатора при температуре не выше 50°C. Технический результат - высокая ферментативная активность биокатализаторов для биоконверсии субстрата (сахарозы) в инвертный сироп. 3 н. и 3 з.п. ф-лы, 14 пр., 1 табл.

Изобретение относится к области биохимии. Предложен стабилизатор ферментативной активности пероксидазы. Стабилизатор представляет собой наноразмерные частицы кобальтовой феррошпинели, компоненты которой изменяются в интервале Co_0,7±0,05 Fe_2,3±0,05O₄÷Co_1±0,05 Fe_2±0,05O₄, суспендированные в натрий-фосфатном буферном растворе в концентрации 0.01-10 мг/мл. Изобретение способствует сохранению 40-42% ферментативной активности пероксидазы в течение 105-255 суток при заданной намагниченности частиц кобальтовой феррошпинели. 2 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен способ получения поверхностно-модифицированных наночастиц для иммобилизации биологических веществ. Способ заключается в модификации содержащих сложноэфирные группы наночастиц Fе₃О ₄. Затем полученные частицы обрабатывают аминопропилтриэтоксисиланом. Далее суспензию наночастиц инкубируют с конденсирующим агентом и осуществляют иммобилизацию фермента. Способ позволяет получать иммобилизованные препараты с удельной активностью фермента более 70%. 3 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложен фотобиокатализатор для получения восстановленных форм никотинамидных коферментов NADH или NADPH. Фотобиокатализатор представляет собой ферредоксин-NADP-редуктазу, иммобилизованную на поверхности наноструктурированной мезопористой пленки диоксида титана TiO₂ в количестве 0,8-1,24 нмоль на 1 см² поверхности пленки. Пленка приготовлена из нанокристаллов диоксида титана размером 15-25 нм с удельной поверхностью 50-100 м²/г на стеклянной подложке или на стеклянной подложке с токопроводящим покрытием. Предложен также фотокаталитический способ получения восстановленных форм никотинамидных коферментов NADH или NADPH с использованием фотобиокатализатора на основе ферредоксин-NADP-редуктазы, иммобилизованной на поверхности пленки диоксида титана TiO₂. Фотобиокатализатор позволяет с высокой скоростью и специфично получать NADH или NADPH из NAD⁺ или NADP⁺ под действием света. Способ получения восстановленных форм никотинамидных коферментов NADH или NADPH с использованием полученного фотобиокатализатора обеспечивает легкое отделение продуктов реакции от фермента и полупроводника и многократное использование фотобиокатализатора. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 5 ил.

Биокатализатор для получения инвертного сиропа содержит в качестве носителя диоксид кремния и дрожжевую биомассу в качестве источника инвертазы из дрожжей и имеет следующий состав, в мас.% по сухим веществам: дрожжевая биомасса - 40-80, диоксид кремния - 60-20. Способ его приготовления предусматривает смешивание дрожжевой биомассы с носителем - гидрогелем диоксида кремния, с последующим высушиванием при температуре не выше 50°С, прессованием и фракционированием. Способ получения инвертного сиропа осуществляют в проточном реакторе со слоем биокатализатора состава, в мас.% по сухим веществам: дрожжевая биомасса - 40-80, диоксид кремния - 60-20, при температуре не выше 50°С. Это обеспечивает высокую инвертазную активность и стабильность биокатализаторов. 3 н. и 2 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к биотехнологии. Способ получения композиции, содержащей высушенные бактерии, предусматривает культивирование одного или нескольких видов живых бактерий; смешивание культивируемой бактерии с одним или несколькими носителями; обработку бактерии импульсными электромагнитными полями 2 мВ/см при 50 Гц и 55 В; инкубирование смеси культура:носитель в течение по крайней мере приблизительно 6 часов; и сушку бактерии таким образом, чтобы снизить уровень влажности до величины приблизительно от 1% мас. до приблизительно 6% мас. Полученная композиция может быть использована для нанесения на семена или другой репродуктивный материал растения, для введения в среду для роста растений, для очистки сточных вод и/или очистки химических/биологических отходов, для очистки загрязненных почв, для введения приемлемого микроорганизма в пищевые продукты и/или корма для животных, для обеспечения молочнокислыми бактериями в медицинских целях. Сочетание смешивания культивируемой бактерии с одним или несколькими носителями и обработки микроорганизмов в композиции значительно повышает исходную выживаемость и срок хранения композиции. 6 н. и 16 з.п. ф-лы, 3 ил., 11 табл.

Настоящее изобретение относится к способу произвольной перегруппировки (рандомизации) жирнокислотных остатков части глицеридов по концевым и средним положениям, к пищевому триглицеридному жиру, полученному данным способом, к маргарину на его основе и к применению катализатора Lipozyme® TL IM, представляющего собой комбинацию липазы, продуцируемой Thermomyces lanuginosa, и диоксида кремния, в предлагаемом способе. Способ рандомизации продолжается до степени конверсии по концевым положениям (Re), составляющей от 0,3 до 0,95, степени конверсии по среднему положению (Ra) от 0,06 до 0,75, при этом Ra больше чем (0,32Re - 0,08), и включает обработку жира с высоким содержанием триглицеридов катализатором, содержащим липазу, продуцируемую Thermomyces lanuginosa, в виде комбинации с диоксидом кремния. При этом комбинация липаза/диоксид кремния имеет активность, по меньшей мере, 250 IUN в начале способа. Предлагаемый способ позволяет достигнуть значительной степени перегруппировки жирнокислотных остатков по среднему положению и сократить время реакции. 4 н. и 12 з.п. ф-лы, 8 табл., 3 ил.

Изобретение относится к биотехнологии. Способ предусматривает ковалентное связывание лиганда белковой природы с модифицированным носителем. В качестве носителя используют алюмосиликат, содержащий магнетит. Носитель модифицируют 1-1,5% раствором карбоксиметилированного лигнина. Последующее активирование сорбента осуществляют карбодиимидом (N-циклогексил-N¹-(2-морфолиноэтил)-карбодиимид-метил-n-толуолсульфонатом). Способ позволяет получить магноиммуносорбенты с повышенной специфической емкостью. Чувствительность метода ИФА с использованием магноиммуносорбента составляет по корпускулярному антигену 10¹ м.т./мл, по водорастворимому антигену 25-50 нг/мл. 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Способ получения иммобилизованного биокатализатора включает иммобилизацию клеток микроорганизмов рода Rhodococcus, обладающих нитрилгидратазной активностью на углеродных носителях путем пропускания клеточной суспензии через колонку, заполненную носителем, либо путем совместного центрифугирования клеток и носителей. При этом в качестве углеродных носителей используют активные угли из растительного и полимерного сырья с параметрами пористой структуры - суммарным объемом пор 0,4-1,8 см³/г и объемной долей макропор 45-92%. Полученный биокатализатор используют в способе получения водных растворов амидов путем гидратации нитрилов карбоновых кислот. Изобретения позволяют повысить выход амида и увеличение времени использования биокатализатора синтеза амидов. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 3 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Капсулы с жидким ядром получают путем внесения по каплям раствора альгината натрия концентрацией 1,0÷1,5% с клетками микроорганизма в раствор хлорида кальция концентрации 2,0÷2,5%. Время выдержки образовавшихся капсул в растворе хлорида кальция устанавливают равным 4-5 мин. Изобретение позволяет получить капсулы с жидким ядром, характеризующиеся малым внутридиффузионным сопротивлением, что обеспечивает ускорение обменных процессов между иммобилизованной клеткой и внешней средой при жидкофазном культивировании. 1 з.п. ф-лы, 3 ил.

(56) (продолжение):

CLASS="b560m"lactic acid fermentation. Biotechnol. Prog., 1995, no 11, p.558-564. SCANNELL A.G.M., HILL C., ROSS R.P. ET AL. Continuous production of lacticin 3147 and nisin using cells immobilized in calcium alginate. Journal of Applied Microbiology, 2000, no. 89, p.573-579. Иммобилизованные клетки и ферменты. Методы. /Под ред. ДЖ. ВУДВОРДА. - M.: Мир, 1988, с.58-59.

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММОБИЛИЗОВАННОЙ -ФРУКТОФУРАНОЗИДАЗЫ

Способ включает оживление чистой культуры Klyuveromyces marxianus Y-303 по методу Коха, засев ее в чашки Петри с 2%-ным сусло-агаром при температуре 48-50°С. Чашки переворачивают вверх дном и выдерживают в течение 2-3 суток в термостате при температуре 28-30°С. Выросшие колонии переносят в чашку Петри с сусло-агаром для наращивания биомассы, затем на скосы с сусло-агаром. Проводят глубинное культивирование дрожжей в колбах емкостью 500 см ³, содержащих по 50 см³ пивного сусла в течение 47,5-48,5 ч при температуре 30°С. Выращенную биомассу смешивают с дистиллированной водой в соотношении 1:5, проводят автолиз при температуре 38-42°С в течение 59,5-60,5ч. Полученную ферментсодержащую смесь осаждают этиловым спиртом при рН 5,0 или ацетоном при рН 5,5. Проводят очистку -фруктофуранозидазы в 3 стадии: удаляют низкомолекулярные примеси гель-фильтрацией на колонке с сефадексом G-25, повышают чистоту ферментного препарата ионообменной хроматографией на колонке с ДЭАЭ-целлюлозой, фракционируют на колонке с сефадексом G-150. Осуществляют концентрирование на мембране Amicon РМ-30 до 5 см³, направляют на лиофильную сушку при t=-30°C. Осуществляют иммобилизацию -фруктофуранозидазы на полимерном волокнистом сорбенте (анионите). Перед иммобилизацией сорбент обрабатывают 5%-ной соляной кислотой, дистиллированной водой, 5%-ным раствором едкого натра и снова водой. Каждая обработка длится 12 ч. Промытый сорбент дополнительно обрабатывают 95%-ным этиловым спиртом и снова водой. Готовят водный раствор -фруктофуранозидазы с содержанием 0,018-0,098 моль/дм ³ и инкубируют подготовленный сорбент. Способ позволяет получить иммобилизованный фермент в количестве 0,005-0,025 мг/г, обеспечить чистоту целевого продукта. 2 табл.

Изобретение может быть использовано в биотехнологии при иммобилизации ферментов на мезопористых наноструктурированных пленках диоксида титана с целью получения фотобиокатализаторов. Способ получения мезопористых наноструктурированных пленок диоксида титана включает нанесение на твердую подложку водосодержащей композиции на основе диоксида титана, содержащей стабилизатор и порообразующий полимер, последующую сушку и кальцинирование. Для приготовления водосодержащей композиции используют порошок нанокристаллов диоксида титана со средним размером частиц от 6 до 25 нм и с удельной поверхностью 50-300 м²/г, который смешивают со стабилизатором и подвергают ультразвуковому дезагрегированию. Затем добавляют порообразующий полимер в количестве 10-30% от массы диоксида титана и водный раствор ПАВ до массового соотношения TiO ₂:Н₂О=1:1-10. Полученную пасту гомогенизируют ультразвуком, наносят на подложку, сушат при комнатной температуре и кальцинируют в присутствии воздуха или кислорода при температуре 400-600°С. В способе иммобилизации фермента адсорбируют фермент на поверхности полученной наноструктурированной мезопористой пленки диоксида титана в среде буферного раствора при рН меньше 8. Изобретение позволяет обеспечить толщину получаемых пленок не менее 2 мкм для иммобилизации на них достаточного количества фермента для эффективного протекания фотобиокаталитических процессов. 6 з.п. ф-лы, 6 табл, 4 ил.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в качестве носителя иммобилизованных клеток и ферментов. Изобретение позволяет упростить процесс получения носителя иммобилизованных клеток и ферментов. Повысить абсорбционную поверхность носителя, удешевить процесс получения носителя. 1 табл.

(56) (продолжение):

CLASS="b560m"состояние и перспективы, Из-во Московского университета, М., 1976, с.107. Грачева И.М., Кривова А.Ю., Технология ферментных препаратов, М., Элевар, 2000, с.155-156. в Интернете geo.lseptember.ru/article.php?ID=20000091. в Интернете http://www.erudition.ru. RU 2058937 C1, 27.04.1996. RU 2094459 C1, 27.10.1997. Петров В.П. Важнейшие неметаллические полезные ископаемые., М., Наука, 1992, с.322-333, с.361. Мухленов И.П., Добкина Е.И., и др., Под ред. Мухленова И.П., Технология катализаторов, Л., Химия, 1979, с.163, с.328. Некрасов Б.В., Основы общей химии, T.1, изд. 3-е, М., Химия, 1974, с.618, с.688, с.270. Политехнический словарь под ред. Ишлинского А.Ю., 3-е изд., М., Большая Российская Энциклопедия, 1998, с.656.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для создания ферментных электродов при очистке сточных вод от мочевины. Способ предусматривает иммобилизацию фермента на неорганическом носителе - аэросиле, поверхность которого модифицирована казеином. Изобретение позволяет повысить удельную активность фермента, повысить диапазон термостабильности иммобилизованной уреазы, повысить процент связывания фермента с носителем, упростить процесс иммобилизации фермента. 1 з.п. ф-лы, 1 табл.

Изобретение относится к биокатализаторам для осахаривания декстрина и может быть использовано в пищевой промышленности. Биокатализатор для осахаривания декстрина содержит фермент глюкоамилазу и твердый носитель, носителем является твердый гранулированный углеродный носитель, приготовленный на основе технического углерода - сажи - и имеющий мезопористую структуру со средним диаметром пор 300-400 Å и объемом пор 0,7-0,9 см³/г. Биокатализатор готовят путем иммобилизации глюкоамилазы на поверхности описанного выше носителя. Способ осахаривания декстрина осуществляют в биореакторе с неподвижным слоем заявляемого биокатализатора при температуре не выше 55°С. Изобретение позволяет получить высокоактивный и стабильный биокатализатор для процесса осахаривания декстрина. 3 н.п. ф-лы, 1 табл.

(56) (продолжение):

CLASS="b560m"адсорбционной иммобилизации ферментов и микроорганизмов. Биокаталитические свойства адсоробированной глюкоамилазы. Биотехнология. 2002, №5, с.81-93. КОВАЛЕНКО Г.А. и др. Углеродные материалы как адсорбенты для биологически активных веществ и бактериальных клеток. Коллоидный журнал, 1999, том 61, №6, с.787-795.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к биокатализаторам и способам приготовления биокатализаторов для инверсии сахарозы с целью получения сахаристых веществ. Биокатализатор для инверсии сахарозы включает твердый углеродсодержащий носитель, на поверхности которого иммобилизованы дрожжевые мембраны, твердым носителем является гранулированный углеродсодержащий носитель, приготовленный на основе природных илистых отложений - сапропелей и имеющий макропористую структуру. Иммобилизацию проводят путем длительной адсорбции на поверхности данного твердого углеродного носителя. Процесс ферментативной инверсии сахарозы проводят в непрерывном режиме в реакторе с неподвижным слоем биокатализатора. Изобретение позволяет получить высокоактивные и стабильные биокатализаторы. 4 н.п. ф-лы.