Получение мутаций или генная инженерия, ДНК или РНК, связанные с генной инженерией, векторы, например плазмиды или их выделение, получение или очистка, использование их хозяев: ..клетки животных – C12N 15/06

Цель изобретения - разработка эффективного способа генотипирования крупного рогатого скота по DGAT1-гену на основе ПЦР-ПДРФ-анализа. Разработанный способ проведения ПЦР-ПДРФ для генотипирования крупного рогатого скота по аллелям А и К гена DGAT1, отличающийся от ближайшего прототипа [1] тем, что на этапе ПЦР используются другие последовательности олигонуклеотидных праймеров:

DGAT1-1: 5'-CCGCTTGCTCGTAGCTTTCGAAGGTAACGC-3' (SEQ ID NO:1)

DGAT1-2: 5'-CCGCTTGCTCGTAGCTTTGGCAGGTAACAA-3' (SEQ ID NO:2)

DGAT1-3: 5'-AGGATCCTCACCGCGGTAGGTCAGG-3' (SEQ ID NO:3),

а на этапе ПДРФ применяется другая эндонуклеаза рестрикции - TaqI, с генерацией генотип-специфичных фрагментов: генотип АА=82/18 bp, генотип КК=100 bp и генотип АК=100/82/18 bp (фиг.1 и 2). 2 ил., 2 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению рекомбинантного фактора свертываемости крови VIII, и может быть использовано в медицине. Конструируют экспрессионную плазмидную ДНК pOptivec/F8BDD, кодирующую рекомбинантный фактор свертываемости крови VIII с делецией В-домена, которой трансформируют клетки линии DG-OV-F8BDD-18 для продуцирования. Изобретение обеспечивает высокий уровень секреции рекомбинантного фактора свертываемости крови VIII с делецией В-домена в бессывороточную культуральную среду. 2 н.п. ф-лы, 1 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии. Клетки млекопитающего трансформируют экспрессирующим вектором, содержащим репортерный ген, цитомегаловирусный промотор и терминатор транскрипции, встраиваемый выше последовательности цитомегаловирусного промотора. Способ может быть использован для получения культур клеток млекопитающих с высоким и стабильным уровнем наработки целевого белка для крупномасштабного получения рекомбинантных белков, которые могут быть использованы в медицинских и исследовательских целях. 1 ил., 2 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к клеточным технологиям, и может быть использовано для селекции генетически модифицированных клеток. В клетки вводят одну или несколько генетических конструкций, в составе которых находится ген мутантной формы фермента MGMT (О6-метилгуанин ДНК-метилтрансфераза), устойчивой к действию ингибитора О6-бензилгуанина, подавляющего действие природной формы MGMT, а также нуклеотидная последовательность, обладающая терапевтическим действием. Модифицированные таким образом клетки трансплантируют в организм, после чего в организм вводят указанный ингибитор, а затем изомер 2 лизомустина или смесь изомеров 1 и 2 лизомустина, которые подавляют размножение собственных клеток организма, в результате чего происходит селекция модифицированных клеток. Изобретение обеспечивает более избирательную селекцию модифицированных клеток и позволяет повысить безопасность и эффективность способа селекции клеток из-за использования лизомустина, характеризующегося пониженной токсичностью. 3 з.п. ф-лы, 9 ил.

Изобретение относится к клеточной инженерии, медицине, в частности к способам преодоления барьера гистонесовместимости при клеточной терапии. Способ снятия барьера гистонесовместимости при ксеногенной клеточной терапии включает получение клеток, свободных от антигенов гистосовместимости, путем гибридизации соматических клеток разных видов животных, культивирования их на среде определенного состава, затем клетки рассевают с коэффициентом рассева 1:3, получают монослой, выдерживают при 37°С, снимают клетки с субстрата с помощью раствора Версена и 0,25% раствора трипсина в соотношении 9:1, полученные клетки вводят реципиенту. Способ позволяет снизить барьер гистонесовместимости без использования иммунодепрессантов и иных дополнительных компонентов, что является практически значимым при клеточной терапии. 4 ил.