Получение мутаций или генная инженерия, ДНК или РНК, связанные с генной инженерией, векторы, например плазмиды или их выделение, получение или очистка, использование их хозяев: .....интерлейкины – C12N 15/24

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии и иммунологии. Предложены: выделенный тимусный стромальный лимфопоэтический белок (ТСЛБ) или его антигенный фрагмент для индукции иммунного ответа, а также кодирующая его молекула нуклеиновой кислоты. Использование изобретения может найти дальнейшее применение в терапии атопических заболеваний. 3 н. и 4 з.п. ф-лы, 8 ил., 2 табл., 7 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к модификациям молекулы IL-7, и может быть использовано в медицине. Рекомбинантным путем получают слитый полипептид с активностью интерлейкина-7, содержащий модифицированную молекулу человеческого IL-7, в которой Т-клеточный эпитоп модифицирован для снижения Т-клеточного ответа против IL-7, и участок Fc молекулы иммуноглобулина, слитый через свой С-конец с N-концом указанной модифицированной молекулы IL-7. Полученный полипептид используют в составе фармацевтической композиции для стимуляции иммунного ответа у пациента. Изобретение позволяет получить полипептид с активностью интерлейкина-7, обладающий сниженной иммуногенностью. 6 н. и 2 з.п. ф-лы, 43 ил., 14 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения рекомбинантного интерлейкина-11 (рИЛ-11) человека. Рекомбинантную плазмидную ДНК pET32M/mTrx-rhIL-11 получают способом, который включает синтез четырех фрагментов гена рекомбинантного интерлейкина-11 человека из олигонуклеотидных праймеров, клонирование каждого фрагмента в рестрицированный эндонуклеазой EcoRV плазмидный вектор pGEM5z, трансформацию каждой из 4-х плазмид клеток E.coli штамма DH5a, отбор кодирующих соответствующие фрагменты гена интерлейкина-11 человека клонов, отбор плазмид с фрагментами гена интерлейкина-11 человека без мутаций, объединение всех фрагментов гена рекомбинантного интерлейкина-11 человека в плазмидном векторе pUC19, конструирование вектора рЕТ32М на основе плазмиды pET32b, переклонирование гена рекомбинантного интерлейкина-11 человека в экспрессионный вектор рЕТ32М, кодирующий тиоредоксин 1 E.coli с заменой Asn84/Gln. Полученной ДНК трансформируют клетки штамма E.coli BL21(DE3) с получением штамма E.coli BL21(DE3)/pET32M/mTrx-rhIL-11 - продуцента рекомбинантного интерлейкина-11 человека в составе растворимого слитного белка mTrx-rhIL-11. Изобретение обеспечивает эффективную продукцию рИЛ-11 в клетках E.coli. 3 н.п. ф-лы, 5 ил., 1 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению модифицированного антагониста рецептора мутеина IL-4 (IL-4RA), и может быть использовано для лечения заболеваний дыхательных путей, таких как астма, эмфизема или хронический бронхит. В модифицированной молекуле IL-4RA, которая ингибирует опосредованную IL-4 и IL-13 активность, аминокислотные остатки 37, 38 или 104 представляют собой цистеин. Полинуклеотидом, кодирующим указанный антагонист, в составе вектора экспрессии трансформируют клетку-хозяина и получают IL-4RA. Полученную молекулу IL-4RA ПЭГилируют и используют для устранения нарушений, связанных с повышенной активностью IL-4 и IL-13. Изобретение позволяет получить антагонист с более длительным периодом полураспада по сравнению с немодифицированным IL-4RA. 8 н. и 9 з.п. ф-лы, 1 ил., 7 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии и представляет собой способ получения трансгенных растений моркови, продуцирующих интерлейкин-10 человека. Конструируют рекомбинантную плазмидную ДНК pBi101-IL10, кодирующую синтез интерлейкина-10 человека, и переносят ее в штамм Agrobacterium. Получают каллус, индуцированный из зрелых зародышей семян моркови с использованием агаризованной питательной среды MS, содержащей 0,2 мг/л 2,4-Д и 0,2 мг/л кинетика. Проводят агробактериальную трансформацию каллуса конструкцией pBi101-IL10 с получением трансгенных эксплантов. Культивируют полученные экспланты для индукции канамицинустойчивого каллуса с использованием среды MS, содержащей 0,2 мг/л 2,4-Д, 0,2 мг/л кинетина, 100 мг/л канамицина и 500 мг/л цефотаксима. Сформировавшиеся эмбриоиды переносят для регенерации растений на бумажные мостики в пробирки с использованием жидкой среды MS, содержащей 100 мг/л канамицина, 500 мг/л цефотаксима с последующим выращиванием растений-регенерантов в условиях закрытого грунта. Способ позволяет проще и дешевле получать трансгенные растения моркови, продуцирующие интерлейкин-10 человека. 4 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к генной инженерии, и может быть использовано в медикобиологической промышленности для получения активных препаратов интерлейкина-29 (IL-29). Предложены мутантные формы IL-29 (SEQ ID NO: 27, 29, 40, 41, 149 и 159) с заменой цистеинового остатка в положении, соответствующем положению 171 аминокислотной последовательности зрелого белка дикого типа, которые характеризуются корректным образованием внутримолекулярных дисульфидных связей и, соответственно, обеспечивают при экспрессии в гетерологичной системе получение полипептидов с антивирусной активностью в виде гомогенных препаратов. Описаны векторные конструкции и трансформированные этими конструкциями клетки-хозяева для экспрессии новых вариантов IL-29. 7 с. и 8 з.п. ф-лы, 37 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано в биомедицинской промышленности. Предложены экспрессионные векторы для получения IL-21 в клетках Е.coli. Кодирующая IL-21 нуклеотидная последовательность, включенная в состав новых векторов, содержит модификации, которые направлены на оптимизацию кодонов и вторичной структуры мРНК для трансляции в Е.coli. В результате трансформации предложенными векторными конструкциями получены штаммы Е.coli, пригодные для применения в промышленном масштабе. Разработаны способы крупномасштабного производства IL-21, использующие названные штаммы, которые позволяют получать более 1 г/л рекомбинантного цитокина. 8 н. и 6 з.п. ф-лы, 1 ил., 12 табл.

Изобретение относится к области генетической инженерии и может быть использовано для получения интерлейкина-13 (ИЛ-13) человека. На основании плазмиды pTrcTEGF и оптимизированной для бактериальной экспрессии кДНК, кодирующей зрелую форму интерлейкина-13 человека, сконструирована рекомбинантная плазмидная ДНК pTrcTREN-IL13. Эта плазмидная ДНК обеспечивает биосинтез полипептида со свойствами интерлейкина-13 человека в клетках Е. coli. В результате трансформации штамма бактерий Escherichia coli BL21(DE3) данной плазмидой получен штамм E. coli BL21(DE3)/pTrcTREN-IL13/pTrcTREN-IL13, продуцирующий полипептид со свойствами интерлейкина-13 человека. Применение изобретения обеспечивает увеличение уровня гетерологичной экспрессии полипептида со свойствами интерлейкина-13 человека при пониженном количестве индуктора. 2 н.п. ф-лы, 4 ил., 1 табл.

Изобретение относится к области молекулярной биологии и медицинской генетики и может быть использовано в клинической практике при прогнозировании течения хронического гепатита С (ХГС). Предложена предсказательная модель, позволяющая оценить вероятность прогрессирования фиброза печени (развития цирроза) при ХГС. В основу данной модели положено суммирование результатов анализа ДНК пациентов на наличие полиморфизмов генов цитокинов: (-511) С/Т гена IL-1b, (-174) G/C гена IL-6 и (+915) G/C гена TGF-b1. При этом установлено, что генотипы (-511) ТТ гена IL-1b, (-174) СС гена IL-6 и (+915) GC гена TGF-b1 характеризуются выраженным «профибротическим» действием; генотипы (-511) СТ гена IL-1b и (-174) GC гена IL-6 - умеренным «профибротическим» действием; генотипы (-511) СС гена IL-1b, (-174) GG гена IL-6 - протективным действием в отношении развития цирроза печени, а генотип (+915) GC гена TGF-b1 является нейтральным. Применение изобретения позволяет выделить среди больных ХГС группу высокого риска развития цирроза печени, нуждающихся в интенсивной противовирусной, а в перспективе - и в антифибротической терапии. 5 ил., 11 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генетической инженерии высших растений. Конструируют рекомбинантную плазмидную ДНК pBi101-IL18, размером 15 т.п.н., содержащую фрагмент ДНК векторной плазмиды pBi101, размером 13,9 т.п.н; - NdeI-BamHI/BglII фрагмента ДНК, являющегося участком кДНК гена ИЛ-18 человека; - NcoI-NdeI фрагмента плазмиды рЕТ15b; кодирующий N-концевой полипептид из шести аминокислот гистидина и сайт гидролиза ферментом тромбином, - 5'UTR области из генома вируса гравировки табака; - двойной 35S CaMV промотора из генома вируса мозаики цветной капусты; - 3'UTR область из генома вируса мозаики цветной капусты. Изобретение обеспечивает перенос нуклеотидной последовательности ИЛ-18 человека в геномную ДНК растений и продукцию зрелой формы интерлейкина 18 человека, обладающей биологической активностью. 2 ил., 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения мутеинов человеческого IL-4, обладающих активирующей Т-клетки активностью и пониженной активирующей эндотелиальные клетки активностью. Мутеин IL-4 человека, вызывающий пролиферацию Т-клеток и пониженную секрецию IL-6 ЭКПВЧ по сравнению с IL-4 дикого типа, получают путем мутации поверхностных остатков D-спирали IL-4 человека, пронумерованного в соответствии с IL-4 дикого типа. Мутеины IL-4 содержат одиночные, двойные и тройные мутации, представленные обозначениями R121A, R121D, R121E, R121F, R121H, R121I, R121K, R121N, R121P, R121T, R121W; Y124А, Y124Q, Y124S, Y124Т; Y124A/S125A, T13D/R121E и R121Т/Е122F/Y124Q, при нумерации в соответствии с IL-4 дикого типа (His=1). Полинуклеотиды, кодирующие мутеины по изобретению, клонируют в вектор, и трансформируют им клетки-хозяева с последующим культивированием. Фармацевтические композиции, содержащие мутеины, используют для лечения пациентов, страдающих состоянием, поддающимся лечению IL-4. Изобретение позволяет получать менее токсичный мутеин IL-4, который делает возможным более широкое терапевтическое применение интерлейкина. 7 н. и 36 з.п.ф-лы, 23 ил., 1 табл.