Получение мутаций или генная инженерия, ДНК или РНК, связанные с генной инженерией, векторы, например плазмиды или их выделение, получение или очистка, использование их хозяев: ...гены, кодирующие ферменты или проферменты – C12N 15/52

ТЕСТ-СИСТЕМА ДЛЯ СКРИНИНГА ИНГИБИТОРОВ ПРОТЕИНКИНАЗЫ GSK3 ; ЧЕЛОВЕКА

Изобретение относится к области молекулярной биологии и касается тест-системы для скрининга ингибиторов протеинкиназы GSK3 . Охарактеризованное изобретение представляет собой генетическую конструкцию, представленную на рис.2, полученную на основе экспрессионного вектора pET32a, и включающую ген каталитического домена протеинкиназы GSK3 , клонированного по сайтам эндонуклеаз рестрикции EcoRI и HindIII, и ген субстрата - аминогликозидфосфотрансферазы aphVIII из Streptomyces rimosus, клонированный по сайту эндонуклеазы рестрикции XbaI, в котором модифицирован сайт фосфорилирования AphVIII Ser-146 (AVAEGS₁₄₆VDLED ASAEGS₁₄₆VDLSD). Тест-система позволяет проводить прескрининг in situ ингибиторов GSK3 - низкомолекулярных соединений различных химических классов, способных проникать в клетки E.coli и грамположительных бактерий и может быть использовано в фармацевтике и медицинской химии, в частности в разработке, создании и валидации новых биомишеней и тест-систем с целью поиска химических соединений-лидеров, которые могут являться потенциальными кандидатами в лекарства для лечения заболеваний человека. 5 ил., 3 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области генной и белковой инженерии и представляет собой три новые мутантные формы растительной формиатдегидрогеназы, обладающие улучшенными свойствами по сравнению с белком дикого типа. В первом из предложенных мутантных белков природный остаток фенилаланина в положении, соответствующем положению 290 в последовательности формиатдегидрогеназы из сои Glycine max, заменен на остаток аспарагина. Во второй мутантной форме фермента этот же природный остаток фенилаланина 290 заменен на остаток аспарагиновой кислоты, а в третьей - на остаток серина. Изобретение позволяет получить улучшенные варианты формиатдегидрогеназы с повышенной термостабильностью. 3 н.п. ф-лы, 3 табл., 5 пр.

Группа изобретений относится к биотехнологии. Сконструированы рекомбинантные штаммы Rhodococcus erythropolis 37 p16-Ami ВКПМ Ac-1937 и Rhodococcus erythropolis HX7 p16-Ami ВКПМ Ac-1938, конститутивно продуцирующие фермент ациламидазу с ацилирующей активностью. Также разработан способ синтеза N-замещенных акриламидов, в частности N-изопропилакриламида и N-диметиламинопропилакриламида, с использованием этих штаммов в качестве биокатализатора. Заявленные изобретения позволяют повысить эффективность получения N-замещенных акриламидов. 3 н.п. ф-лы, 1 табл., 1 ил., 9 пр.

Изобретение относится к способу идентификации улучшенных вариантов белка. Способ включает тестирование множества вариантов белка с единичными заменами в первом тесте первого свойства и во втором тесте второго свойства. Свойству родительского белка присваивается значение 1,0 в каждом тесте. Благоприятное первое или второе свойство обладает значением, превышающим 1,0, и чрезмерно неблагоприятное первое или второе свойство обладает значением менее чем приблизительно 0,80. Указанный родительский белок представляет собой протеазу. Первым свойством является стабильность, вторым свойством является эффективность стирки. Осуществляют идентификацию замены, введение замены в белок для получения варианта белка с множественными заменами. При этом замена не взаимодействует в трехмерной структуре указанного родительского белка, и одна из замен содержит изменение суммарного заряда, равное 0, -1 или -2 по отношению к родительскому ферменту, и, по меньшей мере, одна из замен содержит изменение суммарного заряда, равное +1 или +2 по отношению к родительскому ферменту. Тестируют вариант белка с множественными заменами в первом и втором тесте и идентифицируют указанный вариант белка. Изобретение позволяет получить вариант белка с улучшенной стабильностью и эффективностью стирки. 13 з.п. ф-лы, 6 ил., 6 табл., 7 пр.

Изобретение относится к биотехнологии. Представлены ферменты: гидрогеназа и дегидрогеназа, выделенные из Thermococcus onnurineus NA1 и имеющие последовательности, приведенные в описании, а также кодирующие их гены. Описан вектор, содержащий указанные гены, объединенные в кластер FDH2-MFH2-MNH2. Описана клетка-хозяин, содержащая указанный вектор. Предложены способы получения водорода, включающие следующие стадии: приготовления среды в сосуде для культивирования; подачи формиата в газовую фазу, присутствующую в сосуде для культивирования; культивирования рекомбинантной клетки-хозяина или штамма T. onnurineus в сосуде для культивирования; извлечения водорода из сосуда для культивирования. Изобретение позволяет наиболее эффективно получать водород микробиологическим способом в среде, содержащей формиат в газовой фазе. 8 н. и 5 з.п. ф-лы, 14 ил., 7 табл., 4 пр.

Изобретение относится к области биохимии и биотехнологии. Представлена протеаза, обладающая усовершенствованной молокосвертывающей активностью, содержащая аминокислотную последовательность, по меньшей мере, на 80% идентичую SEQ ID NO: 3, где указанная протеаза имеет, по меньшей мере, одну мутацию, выбранную из группы, состоящей из: (а) замены глутамина, соответствующего глутамину в положении 265 в SEQ ID NO:3, на кислую аминокислоту; и (b) замены глутамина, соответствующего глутамину в положении 266 в SEQ ID NO:3, на кислую аминокислоту. Описаны ДНК, кодирующая указанную протеазу; экспрессионный вектор, содержащий указанную ДНК; и клетка, трансформированная указанным вектором, предназначенная для экспрессии указанной протеазы. Предложен способ получения протеазы, обладающей усовершенствованной молокосвертывающей активностью, включающий культивирование указанной трансформированной клетки в культуральной среде и выделение протеазы из культуральной среды. Изобретение позволяет получить протеазу с улучшенной молокосвертывающей активностью. 5 н. и 11 з.п. ф-лы, 2 ил., 4 табл.

Изобретение относится к области генной инженерии и может быть использовано в биотехнологии для получения представляющих практический интерес белков, являющихся продуктами молчащих генов или генов с низким уровнем экспрессии. Предложен способ продуцирования рекомбинантного белка реналазы 2 человека, предусматривающий а) получение полной последовательности кДНК и б) экспрессию полученной последовательности в E.coli, где стадию (а) осуществляют путем ПЦР-амплификации каждого из экзонов с использованием специфических пар праймеров и геномной ДНК в качестве матрицы, и последующего, не предполагающего предварительной очистки, попарного объединения тем же методом сначала соседних экзонов, а затем являющихся продуктами их объединения ампликонов. При этом подбор праймеров, число которых равно удвоенному количеству экзонов, проводят так, чтобы прямые праймеры содержали концевую последовательность предыдущего экзона и начальную последовательность копируемого экзона; обратные праймеры включали только последовательность, комплементарную концу амплифицируемого экзона, а фланкирующие полную кодирующую последовательность прямой и обратный праймеры содержали сайты рестрикции, необходимые для встраивания в плазмидный вектор. 2 табл., 6 ил., 1 пр.

Изобретение относится к биотехнологии. Представлены ферменты: гидрогеназа и дегидрогеназа, выделенные из Thermococcus onnurineus NA1 и имеющие последовательности, приведенные в описании, а также кодирующие их гены. Описан вектор, содержащий указанные гены, объединенные в кластер CODH-MCH-MNH3. Создана клетка-хозяин, содержащая указанный вектор. Предложены способы получения водорода, включающие следующие стадии: приготовления среды в сосуде для культивирования, культивирования рекомбинантной клетки-хозяина или штамма Thermococcus onnurineus NA1 в присутствии монооксида углерода, извлечения водорода из сосуда для культивирования. Изобретение позволяет наиболее эффективно получать водород микробиологическим способом. 8 н. и 4 з.п. ф-лы, 10 ил., 5 табл., 4 пр.

Изобретение относится к биотехнологии и касается промотора для тканеспецифической экспрессии генов в герминальных тканях млекопитающих. Представленный промотор состоит из последовательности длиной 3574 пары нуклеотидов, расположенной выше точки начала транскрипции гена человека NDUFV1, с удаленной последовательностью протяженностью 91 п.о., расположенной непосредственно выше точки начала транскрипции этого гена. Представленное изобретение позволяет создать искусственный сильный промотор, который может быть использован для терапии герминальных тканей, создания трансгенных животных или модифицированных клеточных линий с заданными функциями. 5 ил., 1 табл., 4 пр.

Изобретение относится к области биохимии. Представлена плазмида, определяющая синтез щелочной фосфатазы СmАР, включающая NcoI/SacI-фрагмент плазмиды pET-40b(+) (Novagen) и фрагмент ДНК, размером 1530 пар оснований, содержащий химерный ген, состоящий из структурной части гена СmАР, адаптированной по N-концу для экспрессии в клетках E.coli, и нуклеотид, кодирующий специфическую последовательность для протеазы TEV. Описан штамм E.coli Rosetta(DE3), трансформированный указанной плазмидой, - продуцент химерного белка, включающего аминокислотную последовательность рекомбинантной щелочной фосфатазы СmАР. Предложен способ получения рекомбинантной щелочной фосфатазы СmАР, включающий стадии: инкубирования указанного штамма-продуцента в жидкой питательной среде LB в течение 12 ч при 20°С, осаждения бактериальных клеток центрифугированием, дезинтеграции суспензии клеток в буфере, центрифугирования экстракта, хроматографии надосадочной жидкости на колонке с металлоафинной смолой, элюции белка, концентрирования активных фракций ультрафильтрацией, инкубирования с протеазой TEV, концентрирования раствора белка и выделения целевого продукта гель-фильтрацией. 3 н.п. ф-лы, 1 ил., 3 пр.

Изобретение относится к выделению молекул нуклеиновых кислот, которые кодируют ферменты, необходимые для пути биосинтеза лантибиотика 107891 и его гомологов. НК содержит нуклеотидную последовательность (НП), выбранную из а) генного кластера mlb с определенной последовательностью или б) последовательности, соответствующей последовательности а) в силу вырожденности генетического кода и кодирующей те же полипептиды, или в) любой из НП ORF, кодирующих полипептиды с установленной аминокислотной последовательностью или их комбинации. В изобретении раскрыты рекомбинантный вектор для трансформации клетки-хозяина, способной продуцировать лантибиотик 107891, его гомологи и предшественники. Лантибиотик 107891 или его производные получают культивированием трансформированной вектором клетки-хозяина в условиях, подходящих для роста клеток, экспрессии гена и продукции лантибиотика или его производного. Описан выделенный полипептид, вовлеченный в биосинтез лантибиотика 107891 и его гомологов. Лантибиотик 107891 обладает антимикробной эффективностью, в частности, против грамположительных бактерий, включая метициллин- и ванкомицинустойчивые штаммы. Лантибиотик 107891 также полезен в качестве пищевых добавок и для приготовления антибактериальных агентов. 12 н. и 22 з.п. ф-лы, 4 ил.

Настоящее изобретение относится к мутантным микроорганизмам, обладающим способностью к повышенной продукции путресцина. Данные микроорганизмы были получены путем разрушения гена SpeE, и, по крайней мере, одного гена, выбранного из SpeG, ArgI или PuuP в микроорганизме, имеющем метаболический путь синтеза путресцина. Кроме того, предлагается способ получения этих микроорганизмов и способ продуцирования путресцина путем их культивирования. Предложенные мутантные микроорганизмы могут использоваться для крупномасштабной продукции путресцина для промышленного применения. 6 н. и 24 з.п. ф-лы, 5 ил., 2 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению аналогов плазминогена человека, и может быть использовано в медицине. Генно-инженерным путем получают в клетках Escherichia coli рекомбинантные полипептиды со свойствами плазминогена человека, содержащие каталитический домен плазминогена, 5-ый крингл-домен плазминогена и видоизмененный фрагмент аминокислотной последовательности, предшествующий 5-му крингл-домену плазминогена. Изобретение позволяет получить полипептиды с высокой фибринолитической активностью плазминогена человека и выходом 50-80% при экспрессии в клетках Escherichia coli. 4 н. и 3 з.п. ф-лы, 1 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению аналогов плазминогена человека, и может быть использовано в медицине. Генно-инженерным путем получают в клетках Escherichia coli рекомбинантные полипептиды со свойствами плазминогена человека, содержащие каталитический домен плазминогена, 5-й и 4-й крингл-домены плазминогена и видоизмененный фрагмент аминокислотной последовательности, предшествующий 4-му крингл-домену плазминогена. Изобретение позволяет получить полипептиды с высокой фибринолитической активностью плазминогена человека и выходом 40-60 мг в пересчете на 1 л культуры при экспрессии в клетках Escherichia coli. 4 н. и 3 з.п. ф-лы, 1 ил.

Настоящее изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности, к способу получения 1-бутанола с помощью бактерий. Предложена клетка бактерий, в которой повышена активность ферментов -окисления жирных кислот по сравнению с немодифицированным организмом. В частности, в ней повышена активность: ацил-СоА-дегидрогеназы, еноил-СоА-гидратазы, 3-гидроксиацил-СоА дегидрогеназы и 3-кетоацил-СоА-тиолазы. Бутанол получают посредством культивирования этой клетки в питательной среде и выделения произведенного и накопленного 1-бутанола из культуральной жидкости. Предложенные бактерии могут использоваться для крупномасштабной продукции 1-бутанола для промышленного применения. 2 н. и 21 з.п.ф-лы, 4 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и генной инженерии и касается ферментативного способа получения 1-бутанола с использованием бактериальной клетки. Данная клетка содержит гетерологичные молекулы ДНК, кодирующие ферменты пути биосинтеза 1-бутанола: ацетил-СоА-ацетилтрансферазу, 3-гидроксибутирил-СоА-дегидрогеназу, кротоназу, бутирил-СоА-дегидрогеназу, бутиральдегиддегидрогеназу и, необязательно, бутанолдегидрогеназу. Бутанол получают посредством ферментативного выращивания рекомбинантной бактериальной клетки в среде с глюкозой или сахарозой. Изобретение позволяет получать 1-бутанол в виде единственного продукта безопасным для окружающей среды и экономичным способом. 2 н. и 16 з.п. ф-лы, 1 ил., 15 табл.

Изобретение относится к области молекулярной биологии и биотехнологии и может быть использовано в медико-биологической промышленности при производстве антимикробных и противоопухолевых препаратов. Выделен фрагмент геномной ДНК Pseudomonas fluorescens А2-2, включающий полноразмерный генный кластер биосинтеза сафрацина (А и В), при исследовании которого установлено наличие нескольких ОРС, организованных в два оперона: sacABCDEFGH и sacIJ. Путем экспрессии нуклеиновой кислоты, включающей полный генный кластер сафрацина, в гетерологичной системе получены рекомбинантные формы природных сафрацинов А и В. В результате удаления или нарушения функционирования отдельных генов, входящих в состав оперонов, и применения полученных модифицированных форм нуклеиновой кислоты в технологии рекомбинантных ДНК синтезированы аналоги сафрацина, которые могут быть использованы в качестве антимикробных или противоопухолевых средств, а также в синтезе эктеинасцидиновых соединений. 13 н. и 7 з.п. ф-лы, 9 ил.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой выделенную нуклеиновую кислоту, имеющую нуклеотидную последовательность, кодирующую лизосомальный глюкоцереброзидазный белок человека, непрерывно связанный с С-концевым вакуолярным нацеливающим сигналом и N-концевым сигнальным пептидом эндоплазматического ретикулума. Изобретение относится к клеткам-хозяевам, векторам и способам экспрессии и продуцированию с высокими выходами биологически активной глюкоцереброзидазы (GCD) с высоким содержанием маннозы. Изобретение также относится к фармацевтическим композициям и способам лечения болезни Гоше. Изобретение позволяет проводить лечение болезни Гоше с высокой степенью эффективности. 16 н. и 38 з.п. ф-лы, 22 ил., 3 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к выделению и идентификации новых генов пути биосинтеза спирамицинов и к новым полипептидам, участвующим в этом биосинтезе, и может быть использовано для получения ацилтрансферазы, отвечающей за модификацию платенолида в положении 3. Полинуклеотидом, кодирующим ацилтрансферазу, которая отвечает за модификацию платенолида в положении 3, трансформируют клетки бактерии рода Streptomyces и получают штамм-продуцент целевого полипептида. Изобретение позволяет повысить степень продуцирования и чистоту продуцируемого спирамицина. 18 н. и 8 з.п. ф-лы, 41 ил., 44 табл.

Генетическая модификация пшеницы в форме мутации в гене SBEIIa с понижением уровня его активности позволяет получать зерно с повышенным содержанием амилозы в его крахмале. Кроме того, эта пшеница может иметь пониженные уровни SBEIIb-активности. Зерно такой пшеницы может иметь неморщинистый фенотип, несмотря на нарушение пути синтеза амилопектина, и также может иметь относительно высокое содержание амилозы. 18 н. и 44 з.п. ф-лы, 21 ил., 12 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Описан выделенный и очищенный новый белок, названный афлатоксин-детоксифизим (ADTZ), который обладает активностью преобразования афлатоксина в нетоксичный. Раскрыт ген, кодирующий ADTZ, а также рекомбинантный экспрессионный вектор. Описан трансформант, полученный трансформацией клетки-хозяина с использованием приведенного рекомбинантного экспрессионного вектора. Раскрыт способ получения детоксифизима, предусматривающий: культивирование описанного трансформанта, выделение, очистку и восстановление экспрессированного детоксифизима с активностью преобразования афлатоксина в нетоксичный. Настоящее изобретение позволяет получать новый белок и может быть использовано для производства кормов и пищевых продуктов. 7 н. и 1 з.п. ф-лы, 14 ил., 9 табл.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано в биомедицинской промышленности для получения гиалуроновой кислоты. Предложен способ получения гиалуронана, предусматривающий культивирование клетки-хозяина Bacillus в условиях, подходящих для получения гиалуроновой кислоты, и извлечение целевого продукта из культуральной среды. При этом клетка-хозяин Bacillus содержит генетическую конструкцию, включающую промотор, функционально активный в указанной клетке, и кодирующую область, состоящую из нуклеотидной последовательности, кодирующей стрептококковую гиалуронансинтазу (hasA); последовательности, кодирующей UDP-глюкозо-6-дегидрогеназу Bacillus (tuaD) или аналогичный фермент стрептококкового происхождения (hasB), и последовательность, кодирующую бактериальную или стрептококковую UDP-глюкозопирофосфорилазу (соответственно gtaB и hasC). Применение способа по изобретению обеспечивает возможность получения значительных количеств гиалуронана в хорошо исследованной, непатогенной клеточной системе. 3 и 12 з.п., 45 ил., 2 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ оценки количества гомоцистеина и/или цистатионина в растворе ферментативным циклическим преобразованием. Анализ включает стадии контактирования содержащего гомоцистеин и/или цистатионин раствора с CBS, L-серином и CBL и восстановительным средством в период времени, достаточный для катализа циклического преобразования формы гомоцистеина в цистатионина и обратного преобразования цистатионина в гомоцистеин с образованием пирувата и аммиака; определения количества присутствующих в реакционной смеси пирувата и/или аммиака и определения количества присутствующего в растворе гомоцистеина и/или цистатионина, основываясь на количестве образующегося пирувата и/или аммиака. При этом первая стадия контактирования длится менее 15 минут. Изобретение охватывает также и набор для проведения такого анализа. Изобретение позволяет сократить срок проведения анализа и, следовательно, повысить пропускную способность для образцов. 9 н. и 14 з.п. ф-лы, 16 ил., 34 табл.

Изобретение относится к области генной инженерии и биотехнологии и может быть использовано в пищевой промышленности. В молочнокислой бактерии обеспечивают сверхэкспрессию фермента, выбранного из гамма-глутамилгидролазы, GTP циклогидролазы, дигидронеоптеринальдолазы и 2-амино-4-гидрокси-6-гидроксиметилдигидроптеридинпирофосфокиназы. Данную бактерию используют в ферментативном способе получения моноглутамилфолата и в составе пищевого продукта, в том числе, молочного. Применение изобретения позволяет получить повышенное количество фолата в биодоступной форме. 3 н. и 6 з.п. ф-лы, 5 ил.

Настоящее изобретение относится к модификации гликозилирования белков для получения полипептидов с улучшенными терапевтическими характеристиками, включая антитела с повышенной антителозависимой клеточной цитотоксичностью. Для получения указанных полипептидов используют клетку-хозяина, модифицированную нуклеиновой кислотой, кодирующей (1,4)-N-ацетилглюкозаминилтрансферазу III (GnTIII). Полученный полипептид представляет собой, в частности, IgG или его фрагмент. Изобретение раскрывает способ получения полипептида, а также антитела или его фрагмента и белка слияния, полученных указанным способом. Описан фармацевтический состав для увеличения Fc-опосредованной клеточной цитотоксичности, содержащий антитело и носитель, и его использование для лечения рака, а также способ лечения заболевания, связанного с увеличением количества или производства В-клеток с использованием указанного антитела, в частности, против CD20, и в предпочтительном варианте представляющее собой антитело IDEC-C2B8. Изобретение позволяет получать полипептид или антитело, обладающие увеличенной Fc-опосредованной клеточной цитотоксичностью, при использовании которого уменьшается содержание В-клеток в организме пациента. 10 н. и 28 з.п. ф-лы, 21 ил.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложены: способ амплификации ДНК, способ клонирования второй кДНК и обратной транскрипции ДНК. Каждый из способов отличается тем, что используют термостабильную ДНК-полимеразу, которая кодируется SEQ ID NO:7, происходит из Anaerocellum thermophilum или рекомбинантного штамма E.coli, трансформированного вектором, содержащим SEQ ID NO:7, ДНК-полимераза катализирует матрично-направленную полимеризацию ДНК, обладает 5'-3'-полимеразной активностью и обратно-транскриптазной активностью и не обладает 3'-5'-экзонуклеазной активностью в присутствии ионов магния и отсутствия ионов марганца. ДНК-полимераза сохраняет, по крайней мере, 90% своей активности после инкубации в течение 30 минут при 80°С в отсутствие стабилизирующих детергентов и обладает кажущейся молекулярной массой между приблизительно 96 кДа и приблизительно 100 кДа. Магний-зависимая обратно-транскриптазная активность ДНК-полимеразы составляет более чем 30% от ДНК-полимеразной активности, тогда как марганец - зависимая обратно-транскриптазная активность указанного полипептида составляет более чем 60% от ДНК-полимеразной активности. Использование ДНК-полимеразы обеспечивает увеличение точности транскрибирования матричной РНК при высоких температурах. 3 н. и 4 з.п. ф-лы, 5 ил.

Изобретение относится к биотехнологии и генной инженерии и может быть использовано при оценке степени загрязнения окружающей среды гептилом. Методом рекомбинантных ДНК получены клетки Escherichia coli, содержащие плазмиды с бактериальными luxCDABE-генами под контролем индуцибельных стрессовых промоторов PkatG, PsoxS, PrecA, PgrpE. На их основе разработан набор проб бактериальных клеток Escherichia coli для определения гептила в окружающей среде. Применение изобретения позволяет быстро в стационарных или полевых условиях определять содержание гептила в окружающей среде. 4 ил., 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Кормовой комплексный ферментный препарат с эндо-1,4- -глюканазной, -глюканазной, эндо-1,4- -ксиланазной, фитазной, пектин-лиазной и -галактозидазной активностью получают при совместном культивировании мультикопийных штаммов гриба Penicillium canescens BKM F-3868 D и ВКМ F-3869 D. Ферментный препарат с эндо-1,4- -глюканазной, -глюканазной, эндо-1,4- -ксиланазной, фитазной, пектин-лиазной активностью получают при совместном культивировании мультикопийных штаммов гриба Penicillium canescens BKM F-3868 D и ВКМ F-3870 D. Для получения ферментного препарата с эндо-1,4- -глюканазной, -глюканазной, эндо-1,4- -ксиланазной активностями культивируют штамм Penicillium canescens BKM F-3868 D, а для получения ферментного препарата с фитазной, пектин-лиазной и -галактозидазной активностями культивируют штамм Penicillium canescens ВКМ F-3869 D. Ферментный препарат с фитазной и пектин-лиазной активностями получают культивированием штамма Penicillium canescens BKM F-3870 D. Заявленное изобретение позволяет расширить ассортимент ферментных препаратов. 11 н.п. ф-лы, 3 ил.

Изобретение относится к области иммунологии, а именно к способу презентации вирусных антигенов иммунной системе хозяина, основанный на протеасомоопосредованной технологии, предназначенному для разработки методов биологической защиты. Сущность изобретения состоит в том, что впервые в Российской Федерации в результате молекулярно-биологических и иммунологических исследований разработан способ ДНК-вакцинации, основанный на протеасомоопосредованной технологии, с использованием рекомбинантных плазмид pCI-neo-ODC-nsP1, pCI-neo-ODC-E2-L, pCI-neo-ODC-E2-M. Рекомбинантные плазмиды pCI-neo-ODC-nsP1, pCI-neo-ODC-E2-L, pCI-neo-ODC-E2-M получены в результате последовательного клонирования ген-эквивалентов неструктурного белка nsP1, фрагментов L, М структурного белка Е2 вируса ВЭЛ соответственно в составе гена орнитиндекарбоксилазы сначала в прокариотический плазмидный вектор рЕТ-23b, а затем в эукариотический плазмидный вектор pCI-neo. Преимущество изобретения заключается в разработке полинуклеотидных вакцин, индуцирующих клеточноопосредованный иммунный ответ. 4 табл., 2 ил.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложена мутантная карбамоилфосфатсинтетаза из Escherichia coli, в которой последовательность аминокислот, соответствующая положениям 947-951 в природной карбамоилфосфатсинтетазе, заменена любой из последовательностей аминокислот SEQ ID NO:1 - SEQ ID NO:9. Описана также аналогичная мутантная карбамоилфосфатсинтетаза из Escherichia coli, содержащая любые делеции, замены, вставки или добавления одной или нескольких аминокислот в одном или множестве положений, кроме 947-951. Предложен фрагмент ДНК, кодирующий указанные мутантные карбамоилфосфатсинтетазы, а также способ продукции производного карбамоилфосфата с использованием штамма Escherichia coli, трансформированного указанным фрагментом ДНК. В изобретении описываются также различные штаммы Escherichia coli, каждый из которых трансформирован предложенным фрагментом ДНК: штамм Escherichia coli 311 (ВКПМ В-8085)-продуцент оротовой кислоты, штамм Escherichia coli 333 (ВКПМ В-8084) - продуцент L-аргинина и цитруллина, штамм Escherichia coli 374 (ВКПМ В-8086) - продуцент цитруллина. Использование изобретения позволяет получать повышенные количества производных карбамоилфосфата, таких как L-аргинин, цитруллин, производных пиримидина, по сравнению с природными штаммами Escherichia coli. 7 н. и 3 з.п. ф-лы, 2 ил., 5 табл.