Получение мутаций или генная инженерия, ДНК или РНК, связанные с генной инженерией, векторы, например плазмиды или их выделение, получение или очистка, использование их хозяев: ....трансферазы (2) – C12N 15/54

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой новую диацилглицерол-ацилтрансферазу. Изобретение относится также к полинуклеотиду, кодирующему диацилглицерол-ацилтрансферазу, вектору экспрессии и трансформанту, такому как дрожжи или грибок, а также к способу получения композиции липидов или жирных кислот с использованием трансформанта. Изобретение позволяет получить новый фермент, пригодный для эффективной продукции липидов и жирных кислот. 6 н. и 7 з.п. ф-лы, 5 ил., 2 табл., 1 пр.

Настоящее изобретение относится к области молекулярной биологии и генетической инженерии и может быть использовано в пищевой промышленности. Из нитчатого гриба Mortierella alpina получены новые гены ацилтрансферазы лизофосфатидной кислоты (АТЛК). Определена кодирующая фермент нуклеотидная последовательность, описано конструирование содержащих ее экспрессионных векторов и включающих векторные конструкции по изобретению клеток-хозяев, а также получение рекомбинантных форм АТЛК, кодируемых новыми генами. 4 н.п. ф-лы, 14 табл., 6 ил., 9 пр.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу синтеза целевого белка с пониженным ксилозилированием, пониженным фукозилированием или их комбинацией. Способ включает в себя введение в растение, часть растения или растительную клетку нуклеотидной последовательности на 80-100 % идентичной нуклеотидной последовательности, определенной в SEQ ID NO: 17, и кодирующей составной белок, содержащий цитоплазматический концевой сегмент, трансмембранный домен, стволовую область (CTS домен) N-ацетилглюкозаминилтрансферазы (GNT1), слитую с каталитическим доменом бета-1,4-галактозилтрансферазы (GalT), причем указанная первая нуклеотидная последовательность функционально связана с первой регуляторной областью, являющейся активной в растении; и второй нуклеотидной последовательностью для кодирования целевого белка, причем указанная вторая нуклеотидная последовательность функционально связана со второй регуляторной областью, являющейся активной в растении, а также транзиентную коэкспрессию первой и второй нуклеотидных последовательностей с синтезом целевого белка, содержащего гликаны, с пониженным ксилозилированием, пониженным фукозилированием или их комбинацией при сравнении с таким же целевым белком, полученным из дикого растения. Раскрыты нуклеиновая кислота, кодирующая белок, модифицирующий гликозилирование целевого белка, составной белок для модификации гликозилирования целевого белка, нуклеиновая кислота, его кодирующая, а также растение, растительная клетка и семя, содержащие указанную нуклеиновую кислоту или указанный составной белок. Изобретение позволяет эффективно получать целевой белок с пониженным ксилозилированием, пониженным фукозилированием или их комбинацией. 7 н. и 13 з.п. ф-лы, 7 ил., 9 пр.

Настоящее изобретение относится к области молекулярной биологии и генной инженерии и может быть использовано в процессе синтеза жирных кислот. Из штамма липидпродуцирующего грибка Mortierella alpina получен новый ген, кодирующий фермент глицерин-3-фосфатацилтрансферазы; определена его полная нуклеотидная последовательность, а также ее часть, кодирующая зрелый белок; выведена аминокислотная последовательность нового фермента. Путем трансформации штаммов Mortierella и дрожжевых штаммов кодирующей фермент нуклеотидной последовательностью получены трансформанты с измененным в сравнении с организмом-хозяином долевым соотношением жирных кислот. 4 н.п. ф-лы, 6 табл., 1 ил., 8 пр.

Настоящее изобретение относится к области биохимии, в частности к способам трансляции белка, и может быть использовано в различных тест-системах, предназначенных для детектирования соединений полипептидной природы. Предложена ортогональная пара, включающая тРНК (О-тРНК) и аминоацил-тРНК синтетазу (О-РС), в которой О-тРНК является супрессорной тРНК, распознающей амбер-кодон, а О-РС представляет собой мутантную форму тирозил-тРНК синтетазы Methanococcus janaschii, предпочтительно аминоацилирующую указанную тРНК неприродной аминокислотой L-(7-гидроксикумарин-4-ил)-этилглицином. Описана система трансляции, обеспечивающая введение в любое выбранное положение интересующего белка, синтезируемого в этой системе, неприродной аминокислоты L-(7-гидроксикумарин-4-ил)-этилглицина, которая включает ортогональную пару по изобретению, названную неприродную аминокислоту и нуклеиновую кислоту, которая кодирует представляющий интерес белок и содержит в выбранном положении селекторный кодон, распознаваемый О-тРНК. 6 н. и 14 з.п. ф-лы, 9 ил., 5 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и молекулярной генетики. Выделенный полипептидный комплекс участвует в эпигенетическом контроле экспрессии генов у млекопитающего. При этом комплекс содержит белок Blimp 1 или его гомолог PRD1, имеющий сайт-специфическую ДНК-связывающую активность, и белок PRMT5. Комплекс может регулировать экспрессию генов в клетках, в частности в стволовых клетках млекопитающих, за счет контроля метилирования R3 в С-концевых областях гистонов Н2А и Н4. 3 н. и 8 з.п. ф-лы, 8 ил., 1 табл., 5 пр.

Изобретение относится к биотехнологии, к способу получения полиненасыщенных жирных кислот в семени трансгенного растения. Способ включает введение в растительный организм нуклеиновых кислот, последовательности которых кодируют ферменты с активностью -6-дезатуразы, -6-элонгазы, -5-дезатуразы, -5-элонгазы, -4-дезатуразы и -12-дезатуразы. Способ позволяет увеличить содержание жирных полиненасыщенных кислот в семени трансгенного растения. 18 з.п. ф-лы, 33 ил., 24 табл., 61 пр.

Изобретение относится к биотехнологии. Описаны способы получения симвастатина. В одном варианте способ осуществляют путем взаимодействия монаколина J и ацилтиоэфира, который отдает ацильную группу С8-гидроксильной группе монаколина J в присутствии ацилтрансферазы LovD; и ацилтрансферазы LovD и региоселективного ацилирования С8-гидроксильной группы монаколина J ацилтрансферазой LovD, использующей ацильную группу ацилтиоэфира. Во втором варианте - путем взаимодействия ловастатина и ацилтиоэфира, который отдает ацильную группу С8-гидроксильной группе монаколина J в присутствии ацилтрансферазы LovD и ацилтрансферазы LovD и воздействия ацилтрансферазы LovD, приводящего к гидролизу ловастатина до монаколина J и использованию ацильной группы ацилтиоэфира для региоселективного ацилирования С8-гидроксильной группе монаколина J. Изобретение расширяет арсенал средств получения симвастатина. 2 н. и 10 з.п. ф-лы, 24 ил., 5 табл., 4 пр.

Изобретение относится к области биохимии. Описана синтетаза жирных кислот с последовательностью, приведенной в описании. Определена последовательность полинуклеотида, кодирующая указанную синтетазу. Представлен вектор, содержащий указанный полинуклеотид. Кроме того, описан трансформированный микробный организм, содержащий указанный вектор или полинуклеотид. Трансформированный микробный организм используется для продуцирования жирных кислот. Предложен способ получения липида или жирной кислоты, включающий культивирование клеток трансформанта с последующим выделением липида или жирной кислоты из указанных клеток. Описан способ оценки способности образования жирных кислот, основанный на измерении уровня экспрессии гена синтетазы жирных кислот, имеющего нуклеотидную последовательность указанного полинуклеотида. Также представлен способ селекции микробных липидпродуцирующих организмов, в основе которого лежит сравнение уровней экспрессии указанного гена в контрольном и тестируемом микробном организме. Изобретение позволяет получить жирные кислоты с высоким выходом продукта. 9 н. и 8 з.п. ф-лы, 5 ил., 2 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии. Представлен вариант нейтральной металлопротеиназы дикого типа Bacillus, обладающий, по меньшей мере, 80% идентичностью с последовательностью, представленной в описании, и имеющий мутации в аминокислотной последовательности в положениях, также раскрытых в описании. Раскрыт способ получения фермента, включающий трансформирование клетки-хозяина вектором, содержащим полинуклеотид, кодирующий один из вариантов металлопротеиназы, и культивирование трансформированной клетки в подходящих условиях. Описаны очищающая композиция, содержащая указанный фермент, и способ очистки ткани и текстиля, включающий стадию приведения поверхности и/или изделия из ткани или текстиля в контакт с очищающей композицией. Представленное изобретение позволяет расширить спектр средств, используемых для очистки поверхностей, изделий из тканей или текстиля. 8 н. и 20 з.п. ф-лы, 21 табл., 35 ил.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии. Предлагается генетически модифицированный микроорганизм, способный продуцировать макролидное соединение, гидроксилированное в 16-положении. Описан способ получения макролидного соединения, гидроксилированного в 16-положении. В частности, предложены генетически модифицированные микроорганизмы, имеющие ДНК, кодирующую полипептид, участвующий в биосинтезе макролидного соединения пладиенолида, и ДНК, кодирующую полипептид, обладающий гидроксилазной активностью, направленной на гидроксилирование пладиенолидов в 16-положении. Изобретение позволяет эффективно продуцировать макролидное соединение, гидроксилированное в 16-положении, непосредственно в одном микроорганизме. Полученное соединение обладает высокой противоопухолевой активностью и может быть использовано для создания противоопухолевых препаратов. 2 н. и 15 з.п. ф-лы, 4 ил., 7 табл.

Нуклеотидные последовательности, кодирующие полипептиды устойчивости к глифосату, используют в конструкциях ДНК или экспрессионных кассетах для трансформации или экспрессии в организмах, включая микроорганизмы и растения. Трансформированные организмы приобретают устойчивость к гербициду. 9 н. и 8 з.п. ф-лы, 5 ил., 11 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и касается фермента транс-сиалидазы. Этот фермент был выделен из одноклеточного организма Trypanosoma congolense. Транс-сиалидаза характеризуется одной из следующих аминокислотных последовательностей: SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:4 или последовательностью, обладающей по меньшей мере 75% идентичностью с одной из вышеуказанных последовательностей. Изобретение позволяет расширить арсенал ферментов с транс-сиалидазной активностью. 5 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ продукции стафилокиназы с использованием кассеты OXY-1 с последовательностью SEQ ID No. 1. Кассета входит в состав двух плазмид с международными инвентарными номерами BPL-0020 и BPL-0021, которыми трансформированы штаммы бактерии Е. coli для продукции стафилокиназы. Изобретение позволяет получать стафилокиназу с высокой степенью эффективности. 6 н. и 10 з.п. ф-лы, 11 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к генной инженерии, и может быть использовано в фармакологии. Предложен способ идентификации и/или проверки ингибиторов рецепторных тирозинкиназ, основанный на использовании новой тест-системы, которая представляет собой дрожжевую клетку-хозяина, содержащую экспрессионный вектор, включающий последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую слитый белок, по существу состоящий из полной цитоплазматической части исследуемой рецепторной тирозинкиназы и домена димеризации и, при необходимости, дополнительно включающий последовательность для «заякоривания» слитого белка в мембране, где экспрессия слитого белка приводит к прекращению пролиферации клеток. Способ предусматривает получение указанных клеток-хозяев, контактирование этих клеток с соединением-кандидатом и идентификацию ингибиторов активности тестируемой тирозинкиназы по результатам их культивирования, исходя из того, что ингибирование активности тирозинкиназы соединением-кандидатом ведет к восстановлению процесса пролиферации. Перспективы применения изобретения связаны с разработкой селективных лекарственных, в том числе противораковых, препаратов. 3 н. и 10 з.п. ф-лы, 3 ил.

Изобретение относится к биотехнологии и касается варианта сфингозинкиназы, обладающего сниженной способностью к фосфорилированию сфингозина до сфингозин-1-фосфата. Такой вариант содержит одну или несколько модификаций в области, ограниченной аминокислотами 16-153 сфингозинкиназы дикого типа. Изобретение также предусматривает молекулу нуклеиновой кислоты, содержащую последовательность, кодирующую эту сфингозинкиназу. Сфингозинкиназа согласно настоящему изобретению может быть использована для лечения или профилактики заболеваний у млекопитающих, которые характеризуются ненормальной, нежелательной или иной ненадлежащей активностью клеток. Изобретение позволяет получить новую сфингозинкиназу со сниженной каталитической активностью, пригодную для лечебного или профилактического применения. 7 н. и 17 з.п. ф-лы, 15 ил., 4 табл.

Изобретение относится к области медицины и касается способа модулирования роста клеток и, более точно, способа подавления роста неопластических клеток. Сущность изобретения включает способ понижающей регуляции (подавления) пролиферации неопластических клеток, которые были трансформированы в результате активации онкогена, эффективным количеством средства для подавления функциональной активности сфингозинкиназы и повышающей регуляции (активации) пролиферации этих клеток обработкой их средством для повышающей активации онкогенной активности сфингозинкиназы. Изобретение также касается способа диагностики неоплазии. Преимущество изобретения заключается в обнаружении нового маркера онкогенности, а именно факта онкогенной активности сфингозинкиназы. 6 н. и 33 з.п. ф-лы, 3 табл., 4 ил.

Изобретение относится к биотехнологии. Описаны выделенные молекулы нуклеиновых кислот Corynebacterium glutamicum, которые кодируют полипептиды, обладающие активностью сахароза-специфического компонента II ABC. Изобретение относится также к рекомбинантным экспрессирующим векторам, содержащим описанные молекулы нуклеиновых кислот. Раскрыт способ получения клетки-хозяина, содержащей описанные экспрессирующие векторы. Данное изобретение касается также способа получения описанного полипептида при помощи культивирования указанной клетки-хозяина. Раскрыт способ диагностики Corynebacterium glutamicum у пациента, включающий обнаружение описанных молекул нуклеиновых кислот. Изобретение позволяет расширить ассортимент молекул нуклеиновых кислот, кодирующих белки системы фосфоенолпируват-сахар-фосфотрансферазы. 23 н. и 4 з.п. ф-лы, 4 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Культивируют коринеформную бактерию, в которую введен ген, кодирующий нейтральную металлопротеазу из Streptoverticillium. Отщепляют проструктурную часть протрансглутаминазы нейтральной металлопротеазой, которую продуцирует данная бактерия. Характеристики нейтральной металлопротеазы приведены в тексте. Изобретение также относится к молекуле нуклеиновой килоты, кодирующей нейтральную металлопротеазу. Настоящее изобретение позволяет получать протеазу, которую можно использовать для продуцирования трансглутаминазы и которая избирательно отщепляет проструктурную часть протрансглутаминазы. 5 н. и 3 з.п. ф-лы, 8 ил.

Изобретение относится к биотехнологии и касается варианта белка субтилизина Bacillus amyloliguefaciens с заменой Y217L, содержащий Т-клеточный эпитоп, при этом указанный Т-клеточный эпитоп указанного варианта включает одну или несколько аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из остатков, соответствующих положениям 76, 79 и 122, где указанный вариант субтилизина необязательно имеет замену в одном или нескольких из положений 3, 31, 40, 41, 46, 47, 48, 50, 76, 101, 104, 107, 111, 128, 147, 154, 181, 182, 183, 185, 206, 215, 216, 218, 238, 247, 248, 250, 254, 258, 262. Изобретение относится также к молекулам ДНК, которые кодируют варианты субтилизина, клеткам-хозяевам, содержащим данную ДНК, а также к композициям для ухода за кожей, содержащим указанный вариант субтилизина. Изобретение позволяет получить варианты субтилизина, которые проявляют уменьшенную иммуногенную реакцию у человека по сравнению с исходным субтилизином. 8 н. и 23 з.п. ф-лы, 16 ил., 3 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения композиции масел и/или кислот жирного ряда с высоким содержанием полиненасыщенных кислот. В микроорганизм, животное или растение вводят ген элонгазы или его гомолога, производного или аналога, либо конструкт, содержащий такой ген. Экспрессия данного гена приводит к активации биосинтеза жирных кислот в организме, а именно обеспечивает удлинение молекулы жирной кислоты с 16, 18, 20 или 22 атомами углерода с, по меньшей мере, двумя двойными связями на, по меньшей мере, два атома углерода. 4 н. и 10 з.п. ф-лы, 16 ил., 7 табл.

Изобретение относится к генной инженерии. Введение в растение полинуклеотидов, кодирующих мутантные полипептиды АДФ-глюкозопирофосфорилазы эндоспермы кукурузы и растворимой синтазы крахмала обеспечивает высокую урожайность за счет их повышенной термостабильности в условиях теплового стресса. 8 н. и 78 з.п. ф-лы, 3 ил., 4 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано в медицине. Предложены новые мутантные формы мультисубстратной дезоксирибонуклеозидкиназы Drosophila melanogaster (Dm-dNK) с измененными по сравнению с ферментом дикого типа кинетическими свойствами, экспрессия которых в клетке обеспечивает возможность снижения летальной для клетки дозы (LD₁₀₀ ) по меньшей мере одного используемого в качестве пролекарства нуклеозидного аналога, выбранного из группы: AZT, ara-A, ara-C, ddC, ddA и 2 CdA. Описаны кодирующие варианты Dm-dNK нуклеотидные последовательности; раскрыты включающие их векторные конструкции, способ получения мутантных форм фермента и применение новых белков и полинуклеотидов в составе фармкомпозиций. Использование настоящего изобретения позволяет повысить эффективность и избирательность действия целого ряда известных цитотоксических и противовирусных препаратов. 6 с. и 1 з.п.ф-лы, 2 ил., 2 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ получения L-гистидина, который включает выращивание бактерии рода Escherichia, содержащей фрагмент ДНК, который кодирует мутантную бактериальную фосфорибозилпирофосфатсинтетазу (ФРПФ-синтетазу), и сбор из культуральной жидкости полученного и накопленного L-гистидина. При этом в мутантной ФРПФ-синтетазе L-аминокислотный остаток, соответствующий позиции 115 аминокислотной последовательности в природной ФРПФ-синтетазе из Escherichia coli, заменен на остаток серина. Изобретение позволяет получать L-гистидин с высокой степенью эффективности. 4 н. и 7 з.п. ф-лы, 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. L-цистеин получают культивированием бактерии рода Escherichia, которая трансформирована ДНК, кодирующим мутантную серинацетилтрансферазу. Причем указанная мутантная серинацетилтрансфераза имеет одну или несколько мутаций в природной последовательности серинацетилтрансферазы из Е.coli, в положениях с 89 по 96 и ингибирование L-цистеином по принципу обратной связи в которой ослаблено. Заявленное изобретение позволяет получить L-цистеин с высокой степенью эффективности. 4 н. и 2 з.п. ф-лы, 5 ил., 3 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложено использование фермента фосфолипид: диацилглицерин ацилтрансферазы в качестве катализатора в ацил-СоА-независимой реакции переноса жирных кислот из фосфолипидов в диацилглицерин в процессе биосинтетического получения триацилглицерина. Заявленное изобретение позволяет получать триацилглицерин с высокой степенью эффективности. 8 ил., 2 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в пищевой промышленности. Конструируют молекулу нуклеиновой кислоты, включающую функциональный в крахмалсодержащих тканях растения промотор, фрагмент, кодирующий транзитный пептид для транслокации полезного пептида в амилопласт, фрагмент, кодирующий полезный пептид, область, инкапсулирующуюся в крахмал и терминатор. При встраивании в геном растения молекула ДНК экспрессирует гибридный полипептид, включающий инкапсулированный в матрицу крахмала желаемый белок. Полученный растительный материал может быть использован, например, для производства кормов для млекопитающих, рыб и птиц. 5 н. и 10 з.п. ф-лы, 19 ил., 9 табл.

Изобретение относится к генной инженерии, конкретно, к генам точки контроля клеточного цикла и может быть использовано in vitro или in vivo в системах клеточной культуры для изучения роли ATR в качестве гена точки контроля. Полинуклеотид, кодирующий гомолог ATR полипептида rad3, клонируют в экспрессирующий вектор, функциональный в эукариотических клетках. Полипептид гомолога ATR полипептида rad3 получают путем культивирования эукариотической клеточной культуры, трансформированной вектором. Моноклональное антитело к гомологу ATR полипептида rad3 получают с помощью гибридомных технологий. Путем инокуляции полипептида гомолога ATR полипептида rad3 животному-хозяину получают поликлональные антитела. Присутствие полинуклеотида в образце животной ткани обнаруживают путем контактирования данного образца, содержащего ДНК или РНК, с полинуклеотидом, кодирующим гомолог ATR полипептида rad3, в условиях гибридизации. Полипептид в биологическом образце обнаруживают путем контактирования образца с моноклональными или поликлональными антителами. Проводят отбор веществ - кандидатов как антираковых агентов, судя по уменьшению активности полипептида ATR на субстрате или уменьшению комплексообразования гомолога ATR в присутствии веществ-кандидатов. Изобретение позволяет получить гомологи ATR полипептида rad3 человека или S.pombe. 22 н. и 2 з.п. ф-лы, 1 ил.

Изобретение относится к биотехнологии. Раффинозосинтазу получают культивированием клетки-хозяина, трансформированной вектором, содержащим ген раффинозосинтазы. Полученную раффинозосинтазу выделяют из культуральной жидкости. Частичную последовательность гена раффинозосинтазы используют в качестве зонда или затравки. Данное изобретение позволяет варьировать уровень экспрессии и активности у растений. 9 н. и 15 з.п. ф-лы, 1 табл.

Изобретение относится к области генной инженерии и молекулярной биологии и может быть использовано при разработке и осуществлении многих методов анализа ДНК. Предложены модифицированные формы термостабильных ДНК-полимераз, получаемые путем замены остатка глутамата в 4-м положении 11-членного критического мотива, принадлежащего нативной форме фермента бактерий р. Thermus, другим аминокислотным остатком, введение которого имеет результатом понижение уровня дискриминирующей способности фермента по отношению к нуклеотидам, меченным красителем из класса флуоресцеина. Предпочтительной является замена глутамата в указанном положении лизином. Описаны ДНК-последовательности, кодирующие предлагаемые варианты термостабильной ДНК-полимеразы, векторы для экспрессии этих последовательностей в различных типах хозяйских клеток, способ получения рекомбинантных форм модифицированных ДНК-полимераз по изобретению и наборы для осуществления анализов с их использованием, которое существенно упрощает экспериментальную процедуру. 5 с. и 6 з.п. ф-лы, 1 ил., 3 табл.