Получение мутаций или генная инженерия, ДНК или РНК, связанные с генной инженерией, векторы, например плазмиды или их выделение, получение или очистка, использование их хозяев: ...общие способы получения вектора для введения в клетку или для отбора векторсодержащего хозяина – C12N 15/64

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к лейколектинам, и может быть использовано в медицине. Получен полипептид лейколектин, характеризующийся SEQ ID NO:1-8. Для рекомбинантного получения лейколектина используют кодирующую его нуклеиновую кислоту, встроенную в вектор экспрессии, которым трансформируют клетку-хозяина. Для определения присутствия или определения количества полипептида лейколектина в образце используют антитело или антиген-связывающий фрагмент вариабельной области указанного антитела, которое специфически связывается с полипептидом лейколектином. Полипептид лейколектин или кодирующую его нуклеиновую кислоту используют в составе фармацевтической композиции в терапии патологических нарушений кожи и слизистых. Изобретение позволяет эффективно лечить или проводить профилактику аутоиммунных нарушений кожи, воспалительных заболеваний кожи или слизистой оболочки, или поврежденной кожи у животного. 11 н. и 5 з.п. ф-лы, 19 ил., 3 табл., 12 пр.

Представленная группа изобретений относится к области биотехнологии и касается новых нуклеотидных последовательностей вируса Torque teno (TTV) и векторов, содержащих такие последовательности. Выделенная полинуклеотидная молекула, содержит полинуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из: SEQ ID NO:4, последовательности, комплементарной SEQ ID NO:4 и полинуклеотида, который является, по меньшей мере, на 95% идентичным SEQ ID NO:4.

Представленные изобретения могут быть использованы при получении вакцин для предупреждения заболеваний свиней и других животных, вызванных вирусом Torque teno. 3 н. и 1 з.п. ф-лы, 7 ил., 3 табл., 10 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к рекомбинантной нуклеиновой кислоте, экспрессирующей один или несколько представляющих интерес полипептидов, вектору экспрессии и бактерии, которые содержат данную рекомбинантную нуклеиновую кислоту, и их применению, а также к фармацевтической композиции для доставки одного или нескольких представляющих интерес полипептидов человеку или животному. Рекомбинантная нуклеиновая кислота содержит природный промотор гена HU-подобного ДНК-связывающего белка (PhIIA) вида Lactococcus с последовательностью SEQ ID NO:28, или его гомологичный или функциональный вариант, который по меньшей мере на 95% идентичен промотору с последовательностью SEQ ID NO:28, функционально связанный с одной или несколькими открытыми рамками считывания, гетерологичными для промотора PhIIA, где промотор PhIIA расположен выше одной или нескольких открытых рамок считывания. Вектор экспрессии содержит вышеуказанную рекомбинантную нуклеиновую кислоту, предпочтительно, указанный вектор получают из pT1NX. Бактерия содержит вышеуказанную рекомбинантную нуклеиновую кислоту или вышеуказанный вектор. Предложенное изобретение позволяет повысить уровень экспрессии представляющих интерес генов полипептидов и таким образом получить достаточное количество экспрессированных белков. 11 н. и 8 з.п.ф-лы, 26 ил., 12 табл., 9 пр.

Изобретение относится к области молекулярной генетики и клеточной биологии и касается вектора экспрессии для трансгенного введения в клетки и ткани млекопитающих. Представленный вектор сконструирован на основе векторной плазмиды pEGFP-N1, содержащий фрагмент ДНК, кодирующий промотор гена белка теплового шока hsp70 Drosophila melanogaster и регуляторную последовательность перед ним, содержащую элементы теплового шока (HSE) в различном количестве, зону полилинкера, ген зеленого флуоресцентного белка (GFP) и ген устойчивости к неомицину, при этом промотор способен активироваться под действием температуры теплового шока млекопитающих или при токсическом воздействии. Такой вектор активируется при повышении температуры до 38°С или токсическом воздействии на трансгенные клетки или ткань млекопитающих. Активность входящего в состав вектора промотора можно регулировать, то есть можно вызвать или его гиперактивность, или его слабое «подтекание» или блокировать активность данного промотора путем насыщения регуляторной области элементами HSE. Изобретение может быть использовано для получения трансгенных препаратов, где исследуемый или используемый ген будет находиться под контролем регулируемого невирусного промотора. 2 з.п. ф-лы, 20 ил., 2 пр.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к молекуле нуклеиновой кислоты, которая является циклическим или линейным вектором, пригодным для экспрессии, по меньшей мере, одного целевого полипептида в клетках млекопитающих, включающая (а) по меньшей мере, одну экспрессирующую кассету (POI) для экспрессии целевого полипептида; (б) экспрессирующую кассету (MSM), включающую ген селективного маркера млекопитающих; (в) экспрессирующую кассету (MASM), включающую амплифицированный ген селективного маркера млекопитающих; причем экспрессирующая кассета (POI) фланкирована в направлении 5 кассетой экспрессии (MASM), кассета экспрессии (MSM) локализована в направлении 3 от кассеты экспрессии (POI) и в которой кассеты экспрессии (MASM), (POI) и (MSM) расположены в той же ориентации от 5 к 3 . Также раскрыты способ получения указанной молекулы нуклеиновой кислоты вектора, клетка млекопитающего-хозяина, включающая указанную молекулу нуклеиновой кислоты вектора, способ получения клетки-хозяина, содержащей указанную молекулу нуклеиновой кислоты вектора, а также способ получения целевого полипептида, используя указанную клетку-хозяина. Изобретение позволяет эффективно получать целевой полипептид в клетках млекопитающего. 5 н. и 19 з.п. ф-лы, 2 ил., 4 табл., 13 пр.

Группа изобретений относится к области медицины, в частности токсикологии и радиологии, к лекарственным средствам на основе антиоксидантных белков и способам их применения. Фармацевтическая композиция для лечения токсических состояний, в которой лечебный эффект получают в результате воздействия антиоксидантного, антимикробного, антитоксического белка лактоферрина человека на организм человека, содержит нереплицирующиеся наночастицы на основе генома аденовируса человека 5-го серотипа со вставкой гена лактоферрина человека, экспрессирующие лактоферрин человека в терапевтически эффективном количестве в организме и формулирующий буфер, при содержании частиц не менее 2,33×10¹¹ физических частиц на мл формулирующего буфера. Способ терапии включает введение композиции в терапевтически эффективной дозе от 7×10¹¹ физических частиц до 7×10¹³ физических частиц на мл формулирующего буфера на человека, вводится внутривенно. Изобретение обеспечивает стойкий терапевтический эффект при однократном введении композиции. 2 н. и 15 з.п. ф-лы, 14 пр., 4 ил., 9 табл.

Настоящее изобретение относится к области микробиологии и касается слитого белка, способного индуцировать защитный иммунитет против стрептококка группы В, а также вакцины, содержащей такой белок. Описанный слитый белок содержит по меньшей мере две аминокислотные последовательности. Первая аминокислотная последовательность, имеющая 90%-ную идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 2, слита со второй аминокислотной последовательностью, имеющей по меньшей мере 90%-ную идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью, представленной в SEQ ID NO: 4. Представленное изобретение позволяет обеспечить иммунитет против различных клинически важных штаммов стрептококков группы В (Streptococcus agalactiae). 2 н. и 7 з.п. ф-лы, 5 ил., 8 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии. Описана плазмида, кодирующая эстеразу Psychrobacter cryohalolentis K5 ^T и содержащая NdeI/XhoI - фрагмент ДНК плазмиды рЕТ32а длиной 5,366 т.п.о., включающий промотор бактериофага Т7, усилитель трансляции гена 10 бактериофага Т7, терминатор транскрипции бактериофага Т7, ген bla -лактамазы, определяющий устойчивость трансформированных плазмидой рРС023 клеток к ампициллину, участок ori инициации репликации; и Ndel/Sall - фрагмента ДНК размером 0,869 т.п.о., содержащего ген, кодирующий зрелую форму эстеразы Psychrobacter cryohalolentis K5^T с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:2, представленной в описании, с С-концевым гексагистидиновым линкером. Представлен штамм бактерий Escherichia coli, модифицированный указанной плазмидой, - продуцент полипептида с активностью эстеразы Psychrobacter cryohalolentis K5^T. Изобретение позволяет увеличить уровень биосинтеза эстеразы до 20% от суммарного клеточного белка. 2 н.п. ф-лы, 2 ил., 5 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу замены последовательности ДНК-мишени посредством гомологичной рекомбинации в Clostridium acetobutylicum, способу замены двух или более генов-мишеней посредством гомологичной рекомбинации в одной и той же клетке С.acetobutylicum, трансформированной клетке Clostridium acetobutylicum, трансформирующему вектору. Способ включает трансформацию клетки Clostridium acetobutylicum вектором, содержащим: ориджин репликации, позволяющий осуществлять его репликацию в С.acetobutylicum; замещающую кассету, содержащую первый маркерный ген, окруженный двумя последовательностями, гомологичными выбранным участкам около последовательности ДНК-мишени, позволяющими осуществлять рекомбинацию данной кассеты; второй маркерный ген, представляющий собой upp встречно-селектируемый маркер. Осуществляют селекцию клеток с интегрированной в их геном указанной кассетой, которые экспрессируют первый маркерный ген. Проводят селекцию клеток с элиминированным указанным вектором, которые не экспрессируют второй маркерный ген. Предложенное изобретение позволяет получать трансформированную клетку Clostridium acetobutylicum, которая является генетически стабильной и безмаркерной. 4 н. и 27 з.п. ф-лы, 6 ил., 4 табл., 4 пр.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой антитела к эфрину В2. Предложены полинуклеотид, кодирующий антитело, вектор экспрессии, клетка-хозяин, композиции, содержащие антитело, а также способ получения антитела и способы применения антитела. Изобретение может использоваться для получения терапевтических и диагностических средств для применения и выявления патологических состояний, связанных с экспрессией и/или активностью проводящих путей лиганда эфрина В2. 11 н. и 16 з.п. ф-лы, 10 ил., 3 табл., 6 пр.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложен полипептид, обладающий фитазной активностью. Последовательности приведены в описании. Описан полинуклеотид, кодирующий представленный полипептид. Раскрыто применение указанного полипептида для использования в кормовой композиции или кормовой добавке. Данное изобретение позволяет увеличить устойчивость модифицированной фитазы к температуре и влажности. 3 н. и 3 з.п. ф-лы, 12 табл., 10 ил.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой прокариотическую рекомбинантную клетку хозяина, содержащую гетерологичный белок инициации репликации, который активирует зависимую от условий точку начала репликации, и внехромосомную молекулу ДНК, содержащую гетерологичный терапевтический ген и зависимую от условий точку начала репликации. Также изобретение относится к способу продуцирования плазмиды, содержащей гетерологичный терапевтический ген и зависимую от условий точку начала репликации. А также к самой плазмиде, представляющей собой суицидный вектор для переноса генов, содержащей гетерологичный терапевтический ген и зависимую от условий точку начала репликации. Данное изобретение позволяет избежать неконтролируемой гиперэкспрессии терапевтического гена и генов устойчивости. 3 н. и 41 з.п. ф-лы, 33 ил., 10 табл.

РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pET23-a(+)PrxVIhum178, КОДИРУЮЩАЯ N-КОНЦЕВОЙ ФРАГМЕНТ ПЕРОКСИРЕДОКСИНА VI ЧЕЛОВЕКА, И ШТАММ E.coli BL21/DE3/pET23-a(+)/PrxVIhum178 - ПРОДУЦЕНТ N-КОНЦЕВОГО ФРАГМЕНТА ПЕРОКСИРЕДОКСИНА VI ЧЕЛОВЕКА

Изобретение относится к области биотехнологии и генной инженерии и может быть использовано в фармацевтической промышленности. Сконструирована плазмидная ДНК pET23-a(+)/PrxVIhum178 с молекулярной массой 19691, 61 Da, которая содержит промотор РНК-полимеразы Т7, участок инициации репликации, генетический маркер, детерминирующий устойчивость трансформированных данной плазмидой клеток и ампициллину, и последовательность нуклеотидов, кодирующих N-концевой фрагмент пероксиредоксина VI человека размером 177 аминокислотных остатков. Путем трансформации клеток E.coli плазмидной ДНК pET23-a(+)/PrxVIhum178 получен штамм E.coli BL21/DE3/PeT23-a (+)/PrxVIhum178 - продуцент N-концевого фрагмента пероксиредоксина VI человека. Использование предложенного изобретения позволяет получить фрагмент пероксиредоксина VI человека, обладающий антиоксидантной активностью полноразмерного пероксиредоксина при пониженной молекулярной массе, что обеспечивает лучшую проницаемость в ткани. 2 н.п. ф-лы, 3 ил.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генетической инженерии. Способ конструирования рекомбинантных штаммов микроорганизмов обеспечивает экспрессию целевого прокариотического или эукариотического гена в любом штамме микроорганизма, поддерживающем репликацию векторной ДНК. На основе мультикопийной плазмиды pLF1311 сконструирован вектор, позволяющий легко отбирать клонированные последовательности по фенотипическому признаку несущих его бактерий и экспрессировать их. С его помощью сконструирован пробиотический штамм Lactobacillus sp. ВРАЗ (pLF-SL2), который экспрессирует эукариотический ген соматолиберина. Данное изобретение используется для создания пробиотиков и заквасок - препаратов на основе живых культур микроорганизмов. 1 ил.