Получение мутаций или генная инженерия, ДНК или РНК, связанные с генной инженерией, векторы, например плазмиды или их выделение, получение или очистка, использование их хозяев: ....увеличение числа копий вектора – C12N 15/69

Изобретение относится к области биотехнологии и генной инженерии. Получен новый интегративный вектор Random-URA3-RPT для последовательного повышения копий в штаммах дрожжей Yarrowia lipolytica. Вектор может быть использован для оптимизации продукции различных ферментов и карбоновых кислот путем повышения количества копий в геноме любых необходимых генетических элементов, влияющих на их биосинтез. 4 ил., 1 табл.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии и решает задачу создания системы экспрессии целевых белков в клетках Escherichia coli, сочетающей высокий уровень биосинтеза продукта с большим диапазоном его регуляции. Сконструированы экспрессионные системы, представляющие собой штамм Е. coli с интегрированным в хромосому клеток геном антирепрессора фага N15, который находится под контролем функционально активного в Е. coli индуцируемого промотора, и sop-опероном фага N15, трансформированный рекомбинантным вектором, основанным на репликоне фага N15 и содержащим фрагмент ДНК, кодирующий целевой белок, под контролем того же, что и в составе хромосомы, или иного индуцируемого промотора. Предложенные векторы стабильно наследуются при выращивании бактерий в среде без антибиотика за счет механизма правильного распределения реплицированных плазмидных копий между дочерними клетками. Применение изобретения обеспечивает широкий диапазон регулирования выхода целевого продукта и соответственно возможность использования одной и той же системы экспрессии для получения широкого круга белковых продуктов вне зависимости от их функциональной активности. 3 н. и 9 з.п. ф-лы, 7 ил., 2 табл.