Получение мутаций или генная инженерия, ДНК или РНК, связанные с генной инженерией, векторы, например плазмиды или их выделение, получение или очистка, использование их хозяев: ....для Bacillus – C12N 15/75

МПКРаздел CC12C12NC12N 15/00C12N 15/75
Раздел C ХИМИЯ; МЕТАЛЛУРГИЯ
C12 Биохимия; пиво; алкогольные напитки; вино; уксус; микробиология; энзимология; получение мутаций; генная инженерия
C12N Микроорганизмы или ферменты; их композиции; размножение, консервирование или сохранение микроорганизмов; мутации или генная инженерия; питательные среды
C12N 15/00 Получение мутаций или генная инженерия; ДНК или РНК, связанные с генной инженерией, векторы, например плазмиды или их выделение, получение или очистка; использование их хозяев
C12N 15/75 ....для Bacillus

Патенты в данной категории

УЛУЧШЕННАЯ ПРОДУКЦИЯ БЕЛКА В BACILLUS

Изобретение относится к области биотехнологии. Представлен выделенный химерный полинуклеотид для усиления продуцирования представляющего интерес гетерологичного белка, содержащий полинуклеотидную последовательность промотора SigA или SigH, функционально связанную с полинуклеотидом, кодирующим белок YmaH, причем химерный полинуклеотид содержит последовательность, которая по меньшей мере на 90% идентична SEQ ID NO: 1, 2, 3 или 13. Также описаны вектор экспрессии, содержащий указанную нуклеотидную конструкцию, и клетка-хозяин Bacillus для продукции представляющего интерес гетерологичного белка, содержащая указанный вектор. Предложен способ получения модифицированной клетки Bacillus, включающий трансформацию клетки-хозяина Bacillus-продуцента представляющего интерес гетерологичного белка указанным вектором; и выращивание указанной модифицированной клетки в оптимальных условиях. Описан способ получения представляющего интерес белка в модифицированной клетке Bacillus, где способ включает культивирование указанной клетки-хозяина; и выращивание указанной модифицированной клетки Bacillus в оптимальных условиях. Кроме того, раскрыт способ усиления экспрессии представляющего интерес гетерологичного белка из Bacillus, включающий получение указанной модифицированной клетки Bacillus; выращивание модифицированной клетки Bacillus воптимальных условиях; и экспрессию указанного представляющего интерес белка в модифицированной клетке Bacillus, где экспрессия указанного представляющего интерес гетерологичного белка в модифицированной клетке Bacillus усиливается по сравнению с экспрессией указанного представляющего интерес белка в указанной родительской клетке-хозяине Bacillus. Изобретение позволяет повысить выход целевого белка за счет сверхэкспрессии белка YmaH. 7 н. и 23 з.п. ф-лы, 4 ил., 3 пр.

2515112
патент выдан:
опубликован: 10.05.2014
ВАРИАНТЫ АЛЬФА-АМИЛАЗЫ С ИЗМЕНЕННЫМИ СВОЙСТВАМИ

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано в производстве композиций, предназначенных для удаления крахмалсодержащих загрязнений. Предложены композиции, содержащие активные варианты альфа-амилазы, которые проявляют повышенную термостабильность относительно родительской формы AmyS-подобной альфа-амилазы, из которой они получены путем замены S/Q в положении, соответствующем положению 242 альфа-амилазы с SEQ ID NO: 1. Помимо нового варианта альфа-амилазы композиции по изобретению обычно содержат, по меньшей мере, один дополнительный фермент, детергент, одно поверхностно-активное вещество, один комплексообразователь, окислитель, подкислитель, подщелачивающий агент, источник пероксида, источник жесткости, соль, детергентный комплексообразующий агент, полимер, стабилизирующий агент или кондиционер. Описаны также способы применения этих композиций для расшлихтовки тканого материала, для мойки или очистки изделий, таких как посуда или белье, загрязненных крахмалсодержащими веществами. 5 н. и 5 з.п. ф-лы, 13 табл., 24 ил., 14 пр.

2499044
патент выдан:
опубликован: 20.11.2013
ВАРИАНТЫ АЛЬФА-АМИЛАЗЫ BACILLUS LICHENIFORMIS С ПОВЫШЕННОЙ ТЕРМОСТАБИЛЬНОСТЬЮ И/ИЛИ СНИЖЕННОЙ КАЛЬЦИЕВОЙ ЗАВИСИМОСТЬЮ

Изобретение относится к области биотехнологии. Описан вариант альфа-амилазы Bacillus licheniformis, имеющий аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 90% идентична последовательности SEQ ID NO: 4 и включает замену S239Q, соответствующую SEQ ID NO:4, содержащейся в описании. Представлены: нуклеиновая кислота, кодирующая указанный вариант; экспрессионный вектор, содержащий указанную нуклеиновую кислоту; и клетка-хозяин, содержащая указанные вектор или нуклеиновую кислоту. Описаны композиции, содержащие альфа-амилазу по настоящему изобретению и применяющиеся для разжижения крахмала, осахаривания крахмала, переработки крахмала, расшлихтовки текстильного изделия, выпекания, а также детергентные моющие композиция и добавка. Предложен способ получения этанола, включающий стадии: а) применение композиции для разжижения крахмала по отношению к молотой кукурузе или крахмальной суспензии; b) осахаривание крахмала; с) брожение осахаренного крахмала; d) получение этанола. Изобретение позволяет получить композиции, содержащие альфа-амилазу, имеющую повышенную термостабильность и температуру плавления. 20 н. и 23 з.п. ф-лы, 3 табл., 9 ил., 6 пр.

2469087
патент выдан:
опубликован: 10.12.2012
РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНК, КОДИРУЮЩАЯ СИНТЕЗ ДЕЛЬТА-ЭНДОТОКСИНА Cry IIIA, И ШТАММ BACILLUS THURINGIENSIS SSP. KURSTAKI, ПОЛУЧЕННЫЙ НА ОСНОВЕ РЕКОМБИНАНТНОЙ ПЛАЗМИДНОЙ ДНК

Изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности к производству бактериальных биопрепаратов. Конструируют рекомбинантную плазмидную ДНК, содержащую ген устойчивости к эритромицину (ErmC), последовательность фрагмента ДНК В. thuringiensis subsp. tenebrionis, кодирующую синтез -эндотоксина cryIIIA, последовательность фрагмента ДНК хромосомы В. thuringiensis subsp. kurstaki размером 448 п.н., последовательность фрагмента ДНК хромосомы В. thuringiensis subsp. kurstaki размером 501 п.н., сайты расщепления эндонуклеазой EcoRI, PstI, Barn HI, HmdIII, KpnI. Получают штамм В. thuringiensis subsp. kurstaki, содержащий указанную рекомбинантную плазмидную ДНК. Изобретение позволяет получить штамм В. thuringiensis, обладающий повышенной инсектицидной активностью в отношении представителей отряда Lepidoptera, Coleoptera, Homoptera, приносящих вред сельскохозяйственным культурам. 2 н.п. ф-лы, 5 ил., 6 табл.

2278161
патент выдан:
опубликован: 20.06.2006
РЕКОМБИНАНТНАЯ ПЛАЗМИДНАЯ ДНКРTV241, СПОСОБ КОНСТРУИРОВАНИЯ РЕКОМБИНАНТНОЙ ПЛАЗМИДНОЙ ДНКРTV241, СПОСОБ КОНСТРУИРОВАНИЯ ПЛАЗМИДЫ, СОДЕРЖАЩЕЙ ГЕН CRY III A В СОСТАВЕ ТРАНСПОЗОНА TN917CAT, ШТАММ БАКТЕРИЙ BACILLUS THURINGIENSIS SUBSP. THURINGIENSIS, АКТИВНЫЙ ПРОТИВ КОЛОРАДСКОГО ЖУКА

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генетической инженерии. Рекомбинантная плазмидная ДНК рТV/241, обеспечивающая экспрессию гена дельта-эндотоксина cryIII A Bacillus thuringiensis subsp. tenebrionis, содержит полную последовательность векторной плазмиды рТV24, полную последовательность Bam HI-Bgl II - фрагментa ДНК Bacillus thuringiensis subsp. tenebrionis размером 2,9 т.п.н., интактный ген дельта-эндотоксина Bacillus thuringiensis subsp. tenebrionis cry IIIA, встроенный в последовательность транспозона Тп917 cat. Способ конструирования рекомбинантной плазмидной ДНК pTV241 заключается в том, что смесь ДНК плазмиды pUC19 и Bacillus thuringiensis subsp. tenebrionis расщеляют эндонуклеазой HindIII. Обрабатывают смесью клетки Escherichia coli JM103, отбирают бесцветные колонии на среде Мак-Конки с ампициллином. Отобранные колонии проверяют на наличие последовательностей ДНК, гомологичных соответствующим последовательностям cryIIIА гена. Из клеток одной из колоний, содержащих указанные последовательности, выделяют ДНК-плазмиду с геном cryIIIA, обозначенную рВТТ51. Плазмиду рВТТ51 расщепляют эндонуклеазами Bam HI и Bgl II. Полученные фрагменты смешивают с фрагментами ДНК плазмиды pTV24 и соединяют. Трансформируют фрагменты посредством электропорации клеток Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki. Трансформанты высевают на агаризованную среду, содержащую хлорамфеникол (Cm). Выделяют из Cm - устойчивых клеток плазмидные ДНК. Отбирают целевую рекомбинантную плазмидную ДНК pTV241. Способ конструирования плазмиды, содержащей ген cryIIIA в составе транспозона Tn917 cat, размером около 50 т.п.н., заключается в том, что рекомбинантную плазмидную ДНК pTV241 передают в клетки штамма Bacillus thuringiensis subsp. morrisoni ДС. Отбирают трансформированные клоны, устойчивые к Cm. Затем их скрещивают со штаммом Bacillus cereus, устойчивым к рифампицину (Rf). Из клеточных клонов, устойчивых к Cm и Rf, выделяют целевую конъюгативную плазмиду. На основе данной плазмиды получают штамм Bacillus thuringiensis subsp. thuringiensis IPM-37, активный против колорадского жука. Предлагаемoе изобретение позволяет получить более эффективный штамм, не только активный против колорадского жука, но и против других жесткокрылых вредных насекомых. 4 c.п. ф-лы, 1 ил.
2125091
патент выдан:
опубликован: 20.01.1999
ФРАГМЕНТ ДНК, СООТВЕТСТВУЮЩИЙ ОБЛАСТИ НАЧАЛА РЕПЛИКАЦИИ, ВЫДЕЛЕННЫЙ ИЗ ПЛАЗМИДЫ МИКРООРГАНИЗМА BACILLUS THURINQIENSIS HD73, ВЕКТОР ЭКСПРЕССИИ КРИСТАЛЛИЧЕСКОГО БЕЛКОВОГО ТОКСИНА B. THURINQIENSIS, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭКЗОГЕННОГО КРИСТАЛЛИЧЕСКОГО БЕЛКОВОГО ТОКСИНА B. THURINQIENSIS В КЛЕТКАХ B. THURINQIENSIS И ИНСЕКТИЦИДНОЕ СРЕДСТВО, СОДЕРЖАЩЕЕ БАКТЕРИИ B. THURINQIENSIS

Изобретение относится к биотехнологическим методам получения инсектицидных средств. Предложенный вектор экспрессии кристаллического белкового токсина Bacillus thurinqiensis стабилен в хозяйских клетках B.t. и содержит главным образом ДНК B.t. В состав вектора входит область начала репликации, выделенная из плазмиды B.t. HD 73, селективный маркер, сайт клонирования, фрагмент ДНК, обеспечивающий экспрессию гена в выбранном хозяине, и фрагмент ДНК, кодирующий кристаллический белковый токсин B. t. Данный вектор при введении в штаммы B.t, содержащие резидентные плазмиды, не приводит к вытеснению этих плазмид из трансформированного штамма. В трансформированных штаммах экспрессируется экзогенный кристаллический белковый токсин B.t. В качестве эффективного инсектицидного средства используют бактерии B.t., трансформированные заявленным вектором. 4 с.п. ф-лы, 11 ил. 2 табл.
2114909
патент выдан:
опубликован: 10.07.1998
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СЕРИНОВОЙ ПРОТЕАЗЫ, ШТАММ ЩЕЛОЧЕФИЛЬНЫХ BACILLUS-ПРОДУЦЕНТ СЕРИНОВОЙ ПРОТЕАЗЫ

Использование: микробиологический способ получения фермента, а именно получение сериновой протеазы рекомбинантной технологией. Сущность изобретения: способ получения сериновой протеазы предполагает культивирование штамма щелочефильных Bacillus РВ 92, трансформированных рекомбинантной плазмидой ДНК pMAX 4, выделение и очистку целевого продукта. Трансформацию штамма осуществляют путем обработки штамма лизоцимом в щелочной среде при 20 - 37°С, отделения образовавшихся протопластов от лизоцима, объединения протопластов с рекомбинантной плазмидной ДНК при той же температуре в присутствии реагента для смещения, регенерации клеток штаммов и выращивания регенерированных клеток в селективных условиях. 1 табл., 2 ил.
2023723
патент выдан:
опубликован: 30.11.1994
Наверх